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CARTILLA DE REFERENCIA
GICUV | BIOSEGURIDAD
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TABLA DE CONTENIDO
INTRODUCCIN ................................................................................................................................... 5
PRINCIPIOS DE LAS BUENAS PRCTICAS DE LABORATORIO ............................................................... 6
Organizacin y personal de la instalacin de pruebas .................................................................... 6
Evaluacin del riesgo biolgico ....................................................................................................... 8
Muestras para las que se dispone de informacin limitada. ........................................................ 10
LABORATORIOS BSICOS NIVELES DE BIOSEGURIDAD 1 Y 2 ....................................................... 11
Acceso ........................................................................................................................................... 11
Proteccin personal ...................................................................................................................... 12
Procedimientos ............................................................................................................................. 13
Zonas de trabajo del laboratorio ................................................................................................... 14
Gestin de la bioseguridad............................................................................................................ 14
Material de laboratorio ............................................................................................................... 15
Material de bioseguridad indispensable ....................................................................................... 15
EQUIPO DE SEGURIDAD Y TCNICAS DE LABORATORIO ................................................................... 17
Cmaras aislantes de material flexible y presin negativa ........................................................... 17
Dispositivos de pipeteo ................................................................................................................. 19
Homogeneizadores, agitadores, mezcladores y desintegradores ultrasnicos. ........................... 20
Asas desechables........................................................................................................................... 21
Microincineradores ....................................................................................................................... 21
Ropas y equipo de proteccin personal ........................................................................................ 22
Batas, trajes y delantales de laboratorio ...................................................................................... 22
Gafas de seguridad y viseras ......................................................................................................... 22
Mascarillas respiratorias ............................................................................................................... 23
Guantes ......................................................................................................................................... 23
DESINFECCIN Y ESTERILIZACIN ..................................................................................................... 25
Limpieza del material de laboratorio ............................................................................................ 25
Germicidas qumicos ..................................................................................................................... 26
Descontaminacin de espacios y superficies ................................................................................ 29
Descontaminacin de cmaras de seguridad biolgica ................................................................ 29
Lavado y descontaminacin de manos ......................................................................................... 30
Desinfeccin y esterilizacin por calor .......................................................................................... 31
Incineracin ................................................................................................................................... 31
Eliminacin de desechos ............................................................................................................... 32
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CAPACITACIONES .............................................................................................................................. 33
Capacitacin en seguridad en el laboratorio ................................................................................ 33
Capacitacin en el manejo de extinguidores ................................................................................ 33
Capacitacin en el manejo de desechos ....................................................................................... 33
PGINAS Y DOCUMENTOS DE INTERS............................................................................................. 34
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INTRODUCCIN
Las Buena Prcticas de Laboratorio (BPL) fueron adoptadas por la Organizacin para la
Cooperacin y el Desarrollo Econmicos en 1981. Las BPL son un conjunto de requerimientos,
procedimientos operacionales y prcticas establecidas, para asegurar la calidad e integridad de los
datos producidos en determinados tipos de investigaciones y estudios.
Las BPL proporcionan pautas recomendadas para la gestin de los ensayos que se llevan a cabo en
el laboratorio y representan un sistema de calidad relacionado con los procesos organizativos y las
condiciones bajo las cuales se realizan los ensayos, incluyendo planificacin, realizacin, control,
registros, archivos y resultados.
Las BPL se rigen por diez principios que tienen como objetivo obtener datos de pruebas de calidad
estos principios son:
1. Organizacin y personal de la instalacin de pruebas.
2. Programa de aseguramiento de calidad.
3. Instalaciones.
4. Aparatos, materiales y reactivos.
5. Sistemas de pruebas.
6. Elementos de pruebas y de referencia
7. Procedimientos normalizados de operacin.
8. Ejecucin del estudio.
9. Establecimiento del informe relativo a los resultados del estudio.
10. Almacenamiento y conservacin de los archivos y de materiales.
Debido al contenido y los requerimientos de las BPL se encuentra una estrecha relacin con la
implementacin de Sistemas de Gestin de la Calidad, esto favorece a los laboratorios que tienen
SGC implementados ya que as garantizan el cumplimiento de los requisitos exigidos en las BPL.
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que
pueda
precintarse
para
Nivel de Bioseguridad
2
3
No
No
ser No
No
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descontaminada
Ventilacin:
Requerimiento
Nivel de Bioseguridad
2
3
No
Conveniente
No
Conveniente
No
No
S/Nob
No
No
No
No
No
No
No
No
Antesala
No
No
No
No
S/Noc
No
Tratamiento de efluentes
No
No
S/Noc
No
Autoclave:
-
En el local
No
Conveniente
En la sala de trabajo
No
No
Conveniente
De doble puerta
No
No
Conveniente
No
Convenite
No
Conveniente
CSB
Es importante tener en cuenta el juicio del profesional quien ayudara a definir el nivel del riesgo
basndose en la evaluacin del riesgo, ya que la asignacin automtica puede dar una calificacin
subestimada. Por tanto la asignacin de un nivel de bioseguridad tiene en consideracin el
microorganismo (agente patgeno) utilizado, las instalaciones disponibles y el equipo, las prcticas
y los procedimientos necesarios para trabajar con seguridad en el laboratorio.
Es responsabilidad del encargado del laboratorio revisar la evaluacin de los riesgos y mantenerlos
actualizados, teniendo en cuenta el cambio de metodologas, organismos, avances cientficos, etc.
Cada uno de los usuarios debe conocer los riesgos, las evaluaciones y asumir las acciones que se
contemplen para mitigar el riesgo biolgico.
Una de las herramientas ms tiles de que se dispone para llevar a cabo una evaluacin del riesgo
microbiolgico es la asignacin de los agentes microbiolgicos a uno de los grupos de riesgo. Sin
embargo, la mera consulta del grupo de riesgo a que pertenece cierto agente no basta para
realizar una evaluacin del riesgo. Otros factores que hay que tener en cuenta, segn proceda, son
los siguientes:
1. La patogenicidad del agente y la dosis infectiva.
2. El resultado potencial de la exposicin.
3. La va natural de infeccin.
4. Otras vas de infeccin, derivadas de manipulaciones en el laboratorio (parenteral, area, por
ingestin).
5. La estabilidad del agente en el ambiente.
6. La concentracin del agente y el volumen del material concentrado que va a manipularse.
7. La presencia de un husped apropiado (personas o animales).
8. La informacin disponible procedente de estudios en animales y de notificaciones de
infecciones adquiridas en el laboratorio o de informes clnicos.
9. La actividad prevista en el laboratorio (tratamiento con ultrasonidos, produccin de aerosoles,
centrifugacin, entre otras).
10. Toda manipulacin gentica del microorganismo que pueda ampliar su gama de huspedes o
su sensibilidad a los regmenes teraputicos eficaces conocidos.
11. Disponibilidad local de intervenciones profilcticas o teraputicas eficaces.
Con la informacin compilada en la evaluacin del riesgo se deber:
Elaborar procedimientos de trabajo o ajustar los existentes con las normas de seguridad.
Nota: para enfermedades etiolgicas desconocidas, las autoridades nacionales o la OMS pueden
elaborar directrices particulares donde se indica cmo deben prepararse las muestras para el
transporte y en qu nivel de bioseguridad deben analizarse.
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Acceso
1. El smbolo y signo internacional de peligro biolgico (figura 1) deber colocarse en las puertas
de los locales donde se manipulen microorganismos del grupo de riesgo 2 o superior.
2. Slo podr entrar en las zonas de trabajo del laboratorio el personal autorizado.
3. Las puertas del laboratorio se mantendrn cerradas.
4. No se autorizar ni permitir la entrada de nios en las zonas de trabajo del laboratorio.
5. El acceso a los locales que alberguen animales habr de autorizarse especialmente.
6. No se permitir el acceso al laboratorio de animales que no sean objeto del trabajo del
laboratorio.
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Proteccin personal
El personal y los usuarios de los laboratorios deben procurar en el laboratorio.
1. Usar en todo momento trajes, batas o
uniformes especiales para el trabajo en el
laboratorio.
2. Se usarn guantes protectores apropiados
para todos los procedimientos que puedan
causar contacto directo o accidental con
sangre, lquidos corporales y otros materiales
potencialmente
infecciosos
animales
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Material de laboratorio
Contar con material seguro en el laboratorio favorece la reduccin de los riesgo cuando se trabaje
con agentes biolgicos que entraen peligro. Para elegir el material de laboratorio habr que
cerciorarse de que responda a los siguientes principios generales:
1. Que su diseo permita limitar o evitar los contactos entre el trabajador y el material
infeccioso.
2. Que est construido con materiales impermeables a los lquidos, resistentes a la corrosin
y acordes con las normas de resistencia estructural.
3. Que carezca de rebabas, bordes cortantes y partes mviles sin proteger.
4. Que est diseado, construido e instalado con miras a simplificar su manejo y
conservacin, as como a facilitar la limpieza, la descontaminacin y las pruebas de
certificacin; siempre que se pueda, se evitar el material de vidrio y otro material
rompible.
Material de bioseguridad indispensable
Algunos equipos o materiales son indispensables para el manejo de microorganismo, dentro de
estos materiales estn:
1. Dispositivos de pipeteo para evitar que se pipetee con la boca.
2. Cmara de Seguridad Biolgica CSB se utilizarn en los siguientes casos:
Siempre que se manipule material infeccioso; ese material puede ser centrifugado en
el laboratorio ordinario si se utilizan vasos de centrifugadora con tapas hermticas de
seguridad y si stos se cargan y descargan en una CSB.
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Debe explicarse a todos los posibles usuarios el modo de empleo y las limitaciones de la
cmara.
Evite ubicar gran cantidad de elementos o materiales dentro de la cmara, los cuales
pueden afectar el flujo correcto de aire.
Las rejillas de aire no deben estar bloqueadas con papeles, pipetas u otros materiales,
pues con ello se perturba el flujo de aire y puede provocarse la contaminacin del material
y la exposicin del trabajador.
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Dispositivos de pipeteo
Siempre que se requiere un procedimiento de pipeteo se debe utilizar un dispositivo especial, NO
realizar pipeteo con la boca, ya que esta mala prctica de laboratorio puede ocasionar:
Los tapones de algodn no son un filtro eficiente, pues permite el paso de las partculas
durante la succin.
El uso correcto de los dispositivos de pipeteo evita la ingestin de patgenos, la inhalacin de los
aerosoles producidos durante el uso de pipetas, mezcla de cultivos por succin y soplado, goteo
sobre una superficie, pueden evitarse trabajando en una cmara de seguridad biolgica.
microorganismos
cultivos
celulares.
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Todas las pipetas tendrn tapones de algodn para reducir la contaminacin de los
dispositivos de pipeteo.
Son preferibles las pipetas aforadas con una muesca superior y otra inferior, ya que no
exigen la expulsin de la ltima gota.
Las
pipetas
sumergirse
contaminadas
completamente
deben
en
un
No
deben
jeringuillas
utilizarse
provistas
para
pipetear
de
aguja
hipodrmica.
Para evitar la dispersin del material infeccioso que caiga accidentalmente de una pipeta,
se recubrir la superficie de trabajo con material absorbente, que se desechar como
residuo infeccioso una vez utilizado.
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Los dispositivos de proteccin y partes externas de los equipos que deben descontaminarse
despus de su uso.
Los tapones y los recipientes o frascos deben estar en buenas condiciones, sin deformaciones
ni fisuras. Los tapones deben ajustar bien y las juntas deben estar en buen estado.
Durante su utilizacin, hay que recubrir los aparatos con una funda fuerte de plstico
transparente, que se desinfectar una vez usada. Siempre que sea posible, estos aparatos,
con su funda de plstico, se utilizarn dentro de una CSB.
Una vez terminada la operacin, el recipiente se abrir en una cmara de seguridad biolgica.
Las personas que utilicen desintegradores ultrasnicos deben llevar proteccin auditiva.
Asas desechables
Las asas desechables ofrecen la ventaja de que no necesitan ser esterilizadas, por lo que pueden
utilizarse en cmara de seguridad biolgica, en las que los mecheros de Bunsen y los
microincineradores perturbaran la corriente de aire. Estas asas deben colocarse en un
desinfectante despus del uso y desecharse como material contaminado.
Microincineradores
Los microincineradores calentados con gas o electricidad llevan protecciones de cristal de
borosilicato o de cermica que reducen al mnimo las salpicaduras y la dispersin de material
infectado cuando se esterilizan las asas. Sin embargo, pueden perturbar la corriente de aire y por
consiguiente deben colocarse hacia la parte trasera de la superficie de trabajo de las cmaras de
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seguridad biolgica.
Ropas y equipo de proteccin personal
El uso de elementos de proteccin y de vestimenta apropiada en el laboratorio son necesarios
para generar una barrera que disminuya la exposicin a aerosoles, salpicaduras, inoculacin
accidental. Es importante tener en cuenta que el tipo de proteccin y vestimenta depende de la
naturaleza del trabajo que se realice.
Se debe tener en cuenta:
Antes de abandonar el laboratorio, tendrn que quitarse las prendas protectoras y lavarse
las manos.
Usar los delantales por encima de las batas cuando se requiera mayo proteccin contra el
derrame de sustancias qumicas o material biolgico como sangre o lquidos de cultivo.
Las batas, trajes y delantales de laboratorio NO deben utilizarse fuera del rea del
laboratorio.
Estos elementos de proteccin deben guardarse de forma separada a las prendas de uso
personal.
Los cristales deben ser de material irrompible y pueden ser curvos o tener proteccin
lateral.
Las gafas de mscara para proteger contra salpicaduras e impactos deben llevarse sobre
las gafas graduadas normales y las lentes de contacto (que no protegen contra los riesgos
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biolgicos o qumicos).
Las viseras estn hechas de plstico irrompible, se ajustan al rostro y se sujetan a la cabeza
mediante cintas o una capucha.
El tipo de mascarilla depende del tipo de peligro de la actividad que se est desarrollando. Se
encuentra
respiradores
con
filtros
cambiables
contra
gases,
vapores,
partculas
Para que la proteccin sea mxima, las mascarillas respiratorias deben ajustarse al rostro de cada
trabajador y probarse previamente. Los respiradores autnomos con suministro de aire integrado
proporcionan proteccin completa. Para seleccionar el respirador correcto habr que solicitar el
consejo de una persona debidamente cualificada, como un especialista en higiene laboral. Las
mascarillas de tipo quirrgico estn diseadas exclusivamente para proteger a los pacientes y no
ofrecen proteccin respiratoria a los trabajadores. Algunas mascarillas respiratorias desechables
de un solo uso estn diseadas para proteger de las exposiciones a agentes biolgicos.
Las mascarillas respiratorias no deben usarse fuera del laboratorio.
Guantes
Los guantes protegen las manos de contaminacin y heridas con objetos cortos punzantes. Los
guantes desechables de ltex, vinilo o nitrilo de tipo quirrgico aprobados para uso microbiolgico
son los ms extendidos para el trabajo general de laboratorio y para manipular agentes
infecciosos, as como sangre y otros lquidos corporales. Tambin pueden usarse guantes
reutilizables, pero hay que lavarlos, retirarlos, limpiarlos y desinfectarlos correctamente.
Despus de manipular material infeccioso o trabajar en una cmara de seguridad biolgica y antes
de abandonar el laboratorio es preciso retirar los guantes y lavarse las manos minuciosamente.
Los guantes desechables usados deben eliminarse junto con los residuos de laboratorio
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infectados.
Los guantes de malla de acero inoxidable se llevarn cuando haya posibilidad de exposicin a
instrumentos cortantes o punzantes (por ejemplo, durante una autopsia). No obstante, esos
guantes protegen contra los cortes pero no contra las punciones.
Peligro Evitado
Contaminacin de la ropa
Contaminacin de la ropa
Impactos y salpicaduras
Impactos y salpicaduras
Gafas de mscara
Impactos y salpicaduras
Viseras
Inhalacin de aerosoles
Mascarillas respiratorias
Punciones o cortes
Caractersticas de seguridad
Abertura trasera
Cubren la ropa de calle
Impermeables
Puntera cerrada
Lentes resistentes a los
impactos (con correccin
ptica)
Proteccin lateral
Protegen todo el rostro
Se retiran fcilmente en
caso de accidente
Varios diseos disponibles:
desechables de un solo
uso; purificadores de aire,
de cara entera o de media
cara; purificadores de aire
elctricas, de cara o con
capucha; con el suministro
de aire.
De ltex, vinilo o nitrilo,
aprobados
para
uso
microbiolgico,
desechables
Proteccin de las manos
De malla
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DESINFECCIN Y ESTERILIZACIN
Se reconoce que la limpieza es un factor que influye sobre la bioseguridad en un laboratorio, es
necesario tener claro que existen diferentes tcnicas de desinfeccin y esterilizacin, las cuales
varan dependiendo del tipo de material o el fabricante.
Dentro del tema de desinfeccin y esterilizacin se manejan diferentes trminos, entre los cuales
estn:
Antimicrobiano: Agente que mata los microorganismos o suprime su crecimiento y proliferacin.
Antisptico: Sustancia que inhibe el crecimiento y el desarrollo de microorganismos pero no
necesariamente los mata. Los antispticos suelen aplicarse a las superficies corporales.
Biocida: Trmino general para cualquier agente que mate organismos.
Descontaminacin: Cualquier proceso utilizado para eliminar o matar microorganismos. Tambin
se utiliza para referirse a la eliminacin o neutralizacin de sustancias qumicas peligrosas y
materiales radioactivos.
Desinfeccin: Medio fsico o qumico de matar microorganismos, pero no necesariamente
esporas.
Desinfectante: Sustancia o mezcla de sustancias qumicas utilizada para matar microorganismos,
pero no necesariamente esporas. Los desinfectantes suelen aplicarse a superficies u objetos
inanimados.
Esporicida: Sustancia o mezcla de sustancias qumicas utilizadas para matar microorganismos y
esporas.
Esterilizacin: Proceso que mata o elimina todas las clases de microorganismos y esporas.
Germicida qumico: Sustancia o mezcla de sustancias qumicas utilizada para matar
microorganismos.
Microbicida: Sustancia o mezcla de sustancias qumicas que mata microorganismos. Este trmino
se utiliza a menudo en lugar de biocida, germicida qumico o antimicrobiano.
Limpieza del material de laboratorio
Esta actividad consiste en la eliminacin de suciedad, material orgnico, manchas y dems
residuos mediante cepillado, lavado, desempolvar, etc. Es necesario realizar una limpieza previa
del material de laboratorio para disminuir la contaminacin y evitar las interferencias que pueden
generar el material orgnico en la accin de los descontaminantes.
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Germicidas qumicos
Pueden utilizarse como desinfectantes o antispticos muchos tipos de sustancias qumicas. Dado
que el nmero y la variedad de productos comerciales es cada vez mayor, deben elegirse
cuidadosamente las formulaciones que sean ms indicadas para las necesidades concretas.
Muchos germicidas pueden ser perjudiciales para el ser humano o el medio ambiente. Se deben
seleccionar, almacenar, manipular, utilizar y eliminar con precaucin, siguiendo las instrucciones
del fabricante. En relacin con la seguridad personal, se recomienda utilizar guantes, delantales y
proteccin ocular cuando se preparen diluciones de germicidas qumicos.
En la medida de lo posible, el nmero de sustancias qumicas germicidas que se utilicen deber ser
limitado por razones econmicas y de control del inventario, as como para reducir la
contaminacin ambiental.
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Caractersticas
Hipoclorito sdico
(Cloro)
Dicloroisocianurato
sdico NaDCC
Cloraminas
Dixido de cloro
Formaldehdo
Glutaraldehdo
Precauciones*
Tiene
actividad
contra
formas
vegetativas de bacterias, esporas,
hongos y virus con y sin envoltura
lipdica.
No es corrosivo y su accin es ms
rpida que la del formaldehdo.
Tarda varias horas en matar las esporas
El cloro gaseoso es
sumamente txico
No debe mezclarse con
cido
para
evitar
liberacin de cloro
gaseoso
Liberacin de cloro
gaseoso
La forma gaseosa es
inestable
y
se
descompone en cloro
gaseoso (Cl2) y oxgeno
gaseoso
(O2),
produciendo calor.
El formaldehdo es un
agente presuntamente
cancergeno.
Se trata de un gas
peligroso de olor acre
(spero y picante) que
puede irritar los ojos y
las mucosas.
El glutaraldehdo es
txico e irritante para la
piel y las mucosas.
Debe utilizarse con una
campana extractora de
vapores o en locales
bien ventilados.
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Sustancia
Caractersticas
Compuestos de
amonaco
cuaternario
Alcoholes
Yodo y yodforos
Precauciones*
bacterianas.
No se recomienda en
forma de pulverizacin
ni de solucin para
descontaminar
superficies.
En las soluciones de
estos
compuestos
pueden
proliferar
bacterias
potencialmente
nocivas.
Debido a su baja
biodegradabilidad,
estos
compuestos
tambin
pueden
acumularse en el medio
ambiente.
Los
alcoholes
son
voltiles e inflamables y
no deben utilizarse en
las proximidades de
llamas desnudas.
Las
soluciones
de
trabajo
deben
almacenarse
en
recipientes apropiados
para
evitar
la
evaporacin.
Los alcoholes pueden
endurecer el caucho y
disolver ciertos tipos de
cola.
El yodo
txico.
puede
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ser
Sustancia
Caractersticas
Perxido de
hidrgeno y
perocidos
Precauciones*
El
perxido
de
hidrgeno
y
los
perocidos pueden ser
corrosivos para metales
como el aluminio, el
cobre, el latn y el zinc,
y tambin pueden
descolorar
tejidos,
cabellos,
piel
y
mucosas.
Almacenar alejados del
calor y protegidos de la
luz.
*Consulte los riesgos en las fichas de seguridad de los reactivos y las normas nacionales e internacionales de seguridad
de las sustancias qumicas.
Las sala y equipos se pueden descontaminar por fumigacin con formaldehdo, este
proceso sumamente peligroso, por lo que debe realizarse por personalmente
especialmente entrenado siguiendo los requerimientos de temperatura, humedad y
aislamiento necesarias.
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Para la
Incineracin
La incineracin es un mtodo til para eliminar del laboratorio los cadveres de animales y los
desechos anatmicos y de otro tipo, con o sin descontaminacin previa. La incineracin de
material infeccioso slo sustituye al tratamiento en autoclave si el incinerador est sometido a
control del laboratorio.
Para el proceso de incineracin debe tener en cuenta:
Los encargados del incinerador deben recibir instrucciones apropiadas acerca de la carga y
el control de la temperatura.
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Eliminacin de desechos
La eliminacin de los desechos mdicos y de laboratorio est sometida a varias reglamentaciones
regionales, nacionales e internacionales. Deben consultarse las ltimas versiones de los
documentos pertinentes con el objetivo de realizar un manejo adecuado de los desechos
generados en el laboratorio. Para mayor informacin consulte la cartilla recepcin, distribucin y
almacenamiento de sustancias qumicas disponible en la pgina de laboratorios del GICUV.
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CAPACITACIONES
Capacitacin en seguridad en el laboratorio
Esta capacitacin es obligatoria para todos los empleados de la Universidad, incluyendo los
estudiantes, que pueden llegar a trabajar en el laboratorio con reactivos qumicos o materiales
biolgicos peligrosos. Se debe recibir esta capacitacin antes, o dentro de 30 das, de iniciar un
trabajo en el laboratorio. La Seccin de Salud Ocupacional de la Vicerrectora de Bienestar
Universitario ofrece esta capacitacin con regularidad. La capacitacin incluye lo siguiente:
Procedimientos de emergencia.
Equipos de emergencia.
Evacuacin de desechos.
Manejo de extinguidores
Aseguradora de Riesgos Profesionales (ARP) ofrecen esta capacitacin con regularidad y pueden
organizar sesiones especiales a peticin. La capacitacin incluye lo siguiente:
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