Informe de Laboratorio 2

Anlisis de residuos de antibiticos,

micotoxinas e histaminas
Higiene y control de alimentos

Integrantes:
Ariana Cabrera
Aldo Cedrn
Natalia Hernndez
Daniel Pari
Jaime Marn

Seccin 2
Grupo 2

INTRODUCCIN:
Para garantizar la inocuidad de los alimentos, es muy importante realizarle anlisis y
pruebas, las cuales nos confirmen que son aptos para el consumo humano y animal. Las
diferentes pruebas existentes son de vital importancia y juegan un rol muy importante en lo
que se refiere a salud pblica, ya que, a travs de estas descartamos o confirmamos
presencia de patgenos y sus toxinas, las cuales pueden ser ingeridas en los alimentos y
causar enfermedades.
Se evalu leche ya que este producto de origen animal es consumido a nivel mundial, en su
presentacin lquida como tambin sus derivados, as, de esta manera en esta prctica
realizamos la deteccin de antibiticos y aflatoxina con la prueba IDEXX SNAP duo
Beta-Tetra ST y Veratox Aflatoxina, respectivamente. En primer lugar analizamos leche
evaporada comercial en busca de residuos de antibiticos. La razn por la que se hacen esta
prueba en la leche es para ver si hubo un retiro adecuado del tratamiento antibitico antes
de volver a incluir la leche de esa vaca para la venta. Es importante que esto se evale ya
que estos residuos de antibiticos son ingeridos por el hombre y puede crear resistencia.
Luego se realiz la prueba de aflatoxinas en una muestra de man entero adquirido de un
supermercado conocido. La importancia de esta prueba radica en que la aflatoxina es la
micotoxina de mayor importancia cuando nos referimos a granos, adems de que es la ms
txica de todas, debido a que se ha probado el efecto carcinognico que posee una de sus
cepas, adems de causar hepatotoxicidad cuando es ingerida en grandes proporciones. En la
produccin ganadera esta prueba es importante ya que es muy comn encontrar
micotoxinas en el alimento, sin embargo cuando los niveles sobrepasan lo aceptable
evidencia un mal almacenamiento, manejo o procedencia, y va a afectar directamente en la
salud y performance productivo y reproductivo de los animales, reflejados en prdidas para
la empresa.

OBJETIVO GENERAL
Establecimos que el objetivo general de esta prctica fue aprender a utilizar el Test IDEXX
SNAP y ver sus distintas aplicaciones en la inocuidad alimentaria, usando como ejemplo la
deteccin de residuos antibiticos en la leche y la presencia de aflatoxinas en el man.
MATERIALES Y MTODOS
Evaluacin de leche
Para realizar la prueba se utiliz leche entera de marca LAIVE en su presentacin en bolsa.
Como mencionamos, se utiliz la prueba IDEXX SNAPduo Beta-Tetra ST. Se usaron dos de
estas, una vencida y una vigente, para comparar resultados y si se vean afectados por el
estado del test.

Como vemos la prueba es un kit que contiene el aparato SNAP, un gotero y un tubo que
contiene una pastilla azul. Con el gotero se toma la muestra de leche y se coloca lentamente
y directamente sobre la pastilla dentro del tubo, sin chocar las paredes. Se agita el tubo
hasta disolver la pastilla y homogeneizar. Luego se procede a colocar la muestra en el SNAP.

Se espera hasta que el lquido moje la mitad del crculo de activacin y se presiona el
dispositivo. Una vez hecho esto se esperan 6 minutos para leer el resultado.

Vencido

Nuevo

Se procede a leer la muestra segn el adjunto del fabricante.

Tambin realizamos una prueba de aflatoxinas en la leche con el IDEXX SNAP AFM1
Test, para el cual se sigui un procedimiento parecido al realizado anteriormente. Las
excepciones en este caso fue que se llev el tubo ya homogeneizado y el dispositivo
SNAP a una estufa a 45C durante 2 minutos. Luego se sacan ambos y se procede a
verter la leche en el dispositivo y esperar hasta que llegue al crculo de activacin para
activar el dispositivo.

Se regres el dispositivo a la estufa una vez activado y se dej por 7 minutos. Luego se
procedi a leer los resultados segn el adjunto del fabricante.

Determinacin de aflatoxinas en man

Se utiliz una muestra de man comercial proveniente de supermercados Metro. Para
empezar, se pes 10 gramos en la balanza electrnica y luego se moli de forma
uniforme en un mortero.

Una vez que tuvimos la muestra molida, se coloc en un frasco y se agregaron 50 ml de

metanol. Se agit la muestra por 3 minutos aproximadamente hasta tener una mezcla
homognea. Luego esperamos a que la solucin se precipite. Se utiliz otro frasco para
obtener solo el contenido lquido del frasco que contena la muestra, nos ayudamos de
un filtro para evitar que el contenido slido pase al segundo frasco.

Utilizamos la prueba Veratox Aflatoxina B1 (Neogen; Multivet), siendo el primer paso

verter el suficiente contenido de solucin conjugada de aflatoxina HRP, el cual fue
obtenido con la ayuda de una multipipeta y colocado en 10 pozos de mezcla rojos. En
estos pozos se puso en control 0ppm y 5ppm independientemente. luego se adiciona
100 microlitros del extracto de la muestra filtrada a su correspondiente pozo. Despus,
a los pozos de mezcla recubiertos con los anticuerpos fueron lavados con agua
destilada. luego vertemos el contenido de la solucin K y colocada en los pozos de
mezcla recubiertos de anticuerpos al que despus le pusimos la solucin STOP. El
contenido final de cada pozo fue depositado en los pocillos de ELISA asignados y se les

realiz la lectura de densidades pticas en un espectrofotmetro lector de ELISA en el

laboratorio.

RESULTADOS
Presencia de residuos de Betalactmicos y Tetraciclinas
BETALACTMICOS: positivo
TETRACICLINAS: positivo
Presencia de residuos de Aflatoxinas M1
Aflatoxina M1: Negativo
Presencia de residuos de Aflatoxinas totales
Elisa: 0-5 ppb

DISCUSIN
-

Los resultados positivos obtenidos en la prueba de leche SNAPduo Beta-Tetra ST

nos hacen sospechar de un mal procesamiento de la muestra, pues presionar el
SNAP antes o despus de lo indicado en el inserto genera falsos positivos.

La diferencia de resultados obtenidos entre grupos fue probablemente debido a

la procedencia del man. Nuestra muestra provena de un empaque cerrado, lo
que podra sugerir que ha pasado por un proceso de calidad ms extenuante. Por
lo contrario la muestra que present los niveles ms altos, era un man de grano
entero comprado a granel en un supermercado.