Endosporas bacterianas

Las endosporas son formas de reposo,

con el metabolismo prcticamente
detenido (criptobisis).
Debido a su diseo, resisten
condiciones fsicas y qumicas muy
agresivas (radiaciones UV, calor,
sequedad, disolventes, etc.).
Son producidas por ciertas bacterias
Gram positivas: Bacillus, Clostridium,
Sporosarcina.
http://pro.corbis.com/search/Enlargement.aspx?CID=isg&med
iauid=%7B1D5366E0-CE9E-4B38-982D-F452D1E583C0%7D

Endosporas bacterianas
Se producen cuando la bacteria detecta
bajos niveles de nutrientes (C, N, P).

La espora se forma dentro de la clula

vegetativa (endospora).
Al final de la esporulacin, la clula
madre se autolisa, y la espora queda libre.
La endospora resiste periodos largos en
ausencia de nutrientes y estrs
ambientales.

Cuando las condiciones son

apropiadas, la espora germina y se surge
una clula vegetativa.

Esporognesis
La esporognesis es un proceso de diferenciacin que apareci
evolutivamente en bacterias para lograr supervivencia en
ausencia de nutrientes.

http://ilovebacteria.com/spore.htm

Criterios taxonmicos

Su dimetro relativo al de la clula madre

~Deformantes
~No deformantes

Localizacin
~Subterminales
~Centrales
~Terminales

Partes de la endospora

Pared
Corteza
Protoplasto o ncleo

Cubiertas

Protoplasto
(ncleo de la endospora)

DPA

DPC

Sus componentes estn inmovilizados en una matriz de quelatos

de cido dipicolnico (DPA) con iones Ca2+ (dipicolinato de
calcio, DPC), que llega a representar el 15% del peso.

Protoplasto
(ncleo de la endospora)
Citoplasma muy deshidratado (10 - 30%)
Contiene el cromosoma, pocos ribosomas,
ARNt, ARN polimerasa, mono y di nucletidos
pero no tri nucletidos (no ATP).
Carece de componentes inestables:
~No ARNm
~No enzimas biosintticas
~No aminocidos ni bases nitrogenadas
~No cofactores reducidos (NADH, CoA, etc.)
Espora de Bacillus cereus
http://www.shef.ac.uk/mbb/staff/moir-a

Protoplasto
(ncleo de la endospora)
Gran cantidad de pequeas
protenas especiales, las pequeas,
cidas, solubles (SASP) que
mantienen le pH ms bajo que en
la clula vegetativa.
~Durante la germinacin se
usarn como fuente de amino
cidos.
~Acomplejan el ADN: protegen
de las radiaciones UV.

Fuente de energa:
3-fosfogliceratoPEP

Membrana interna de la espora.

Rodea al protoplasto, membrana citoplsmica que carece de
fluidez (estructura policristalina).

http://sitemaker.umich.edu/hanna_lab/home. A Bacillus anthracis endospore (False colored

transmission electron micrograph, 92,000X, as shown on the cover of the Jan. 1, 2004 issue of the
Journal of Bacteriology)

Pared de la endospora
A base de un Peptidoglucano similar al de la clula vegetativa.
Estructura muy delgada.
Constituye lo que ser la pared de la futura clula vegetativa.
Origen: se sintetiza a partir de la preespora

Pared

Corteza o crtex

Crtex

Al microscopio electrnico: gruesa, transparente a electrones,

lminas concntricas, formado de un Peptidoglucano especial:
~ 30% del NAM con tetrapptidos, pero con bajo grado de
entrecruzamiento
~ 15% del NAM tiene solo L-ala
~ 55% lactama del cido murmico

Corteza o crtex
Origen: a partir de la clula
madre.
Tiene un bajo grado de
entrecruzamiento:
~ Estructura ms laxa, floja y
flexible que el PG normal es
capaz de expandirse o
contraerse.
~ Rpida autolsis durante la
germinacin.

La lactama del murmico

presenta gran resistencia a la
lisozima.

Cubiertas

Aspecto muy
voluminoso, distinto
segn especies.
Partes densas a los
electrones.
Formada de una o ms
protenas de tipo
queratina, ricas en
cistena y amino cidos
hidrfobos.

Bacterial endospores. Panel A shows endospores from B. subtilis

one of which is still retained within the rod shaped 'mother cell'. In
B. subtilis, spores are approximately 1.2 m in length and are
ellipsoidal. Released spores have a clear protective shell known
as the spore coat and is comprised of as many as 25 different
protomeric components assembled into discrete layers. Panel B
shows a typical SDS-PAGE (12.5%) fractionation of solubilised
spore coat proteins revealing predominant species. Ricca and
Cutting Journal of Nanobiotechnology 2003
1:6 doi:10.1186/1477-3155-1-6

Estructura insoluble e
impermeable que
impide la entrada de
numerosos agentes
qumicos agresivos,
incluyendo txicos.

Exosporio
Estructura membranosa
transparente, a modo de
saco delgado y flojo a
base de protenas,
polisacridos complejos y
lpidos
Muy resistente a enzimas
proteolticas

Esporulacin
Estmulo desencadenante de la
esporulacin: estado de inanicin
(carencia de nutrientes)
Dura 7-8 horas en Bacillus subtilis o en
B. megaterium.

Las fases se nombran con un nmero

romano (I, II,....VII). Se suele indicar los
lmites de tiempo en los que
transcurre la fase (ej: t2-t3 significa
que la fase transcurre entre la 2 y la
3 hora)

Fase I (t0-t1)
Los dos cromosomas se condensan
formando un filamento.

Se inician dos tabiques, cada uno

cerca de un polo (espculas de PC
hacia el interior).
Se degradan protenas viejas y los
aminocios se emplean en fabricar
protenas especficas de la
esporulacin.
Se sintetizan y liberan al medio:
antibiticos y exoenzimas
(proteasas, amilasas, ribonucleasas,
etc.).
http://www.ugr.es/~eianez/Microbiologia/09esporas.htm

Fase II (t1-t2)

Se termina el septo acntrico en uno de los

polos (el otro septo no se completa, aborta).
Cada nucleoide queda en un:
~Compartimiento pequeo, la prespora.
~Compartimiento grande la clula
madre.
Sigue sntesis de antibiticos y exoenzimas
(proteasas, amilasas, ribonucleasas, etc.).

Fase III (t2-t3)

Formacin del protoplasto de la
espora debido a:
~Degradacin selectiva del PG
del septo
~La membrana citoplsmica
de la clula madre va
avanzando hacia el polo,
envolviendo a la prespora
Resultado: prespora posee dos
membranas, con polaridad
opuesta.
La sntesis de protenas sigue en la
clula madre, pero se detiene en
la prespora.

Fase IV (t3-t4)
Formacin de la corteza:
deposicin de PG de la clula
madre entre las dos membranas
de la prespora. Deposicin del
PG de la pared, procedente de
la prespora.
La espora puede verse ya
refrctil en fresco.
Comienza sntesis de DPA y
acumulacin de Ca2+.
Comienza la sntesis del
exosporio.

Fase V (t4-t5.5)
Deposicin de materiales de las
cubiertas por fuera de la membrana
externa de la espora.
Contina la acumulacin de DPA,
que secuestra iones Ca2+ para formar
el DPC en el protoplasto.

Fase VI (t5.5-t7)
Maduracin de prespora a endospora.
Maduracin de la corteza (PG especial, ms laxo, con pocos
entrecruzamientos).
Maduracin de las
cubiertas.
Citoplasma se hace
ms homogneo y
denso a los
electrones.
Resistencia al calor
y al cloroformo.
Resistencia a las
radiaciones UV.
Resistencia a la
lisozima.

Fase VII (t7-t8)

Autolisis de la clula madre y liberacin de la espora.

El exosporio pierde agua y se pega a las cubiertas.

Propiedades biolgicas de las

endosporas
Hipometabolia. La ms baja tasa metablica.

Dormancia. Gran inercia a los sustratos exgenos, la espora slo

perder la dormancia cuando se haya activado para la
germinacin.
Resistencia al calor. Es un subproducto de los cambios que
llevan a la deshidratacin como medio de lograr la
hipometabolia y la dormancia. Algunas resisten 120C durante
15 minutos lo que condiciona los parmetros para esterilizar
materiales.

Propiedades biolgicas de las

endosporas
Deshidratacin. Refrigencia al microscopio ptico. Mecanismo:
~ El DPA va entrando al protoplasto de la espora
~ El Ca2+ entra a la espora se forman quelatos de DPC.
~ La corteza se queda sin cationes, las cargas negativas del
PG cortical se repelen, la corteza se expande, se topa con
las cubiertas y hay extraccin de agua del protoplasto.
~ El protoplasto queda muy deshidratado, con componentes
inmovilizados.

Scanning Electron Micrograph of

the Endospores of Bacillus anthracis

Propiedades biolgicas de las

endosporas
Resistencia a los rayos UV:
~ Absorcin de UV por cubiertas.
~ Presencia del DPC.
~ Las protenas SASPs forman complejos con el ADN.
~ Por la deshidratacin del protoplasto no se generan
dmeros de pirimidina.
~ Por la presencia de las SASPs se genera fotoproducto de la
espora, que ser reparado durante la germinacin.
Resistencia a los agentes qumicos.
Debida principalmente a la gran
impermeabilidad de las cubiertas
(grosor, composicin a base de
protenas ricas en aminocidos
hidrfobos y con abundantes
puentes disulfuro.

Germinacin
de la
endospora
Fases:
Preactivacin
Activacin
Germinacin
Crecimiento ulterior (entrada
en fase vegetativa)

Preactivacin
Las cubiertas deben
erosionarse, de modo natural
por envejecimiento
progresivo y de modo
artificial se puede lograr:
~ 100C durante unos minutos
~ Radiaciones ionizantes
~ pH bajo
~ Tratamiento con sustancias
que posean grupos SH libres
como Mercaptoetanol
Electron micrograph of Bacillus
anthracis endospores (a) Viable and
(b) following lethal plasma exposure.

Activacin
Etapa an reversible.
Metabolismo an latente.
Desencadenada por un agente
germinante (iones inorgnicos [Mg2+,
Mn2+], L-ala, glucosa u otros azcares,
adenina u otras bases nitrogenadas).
~ El germinante es detectado por un receptor alostrico en la MI
de la espora.
~ El receptor activado adquiere capacidad proteoltica.
~ Rompe la proenzima unida covalentemente al PG de la corteza.
~ La enzima reconoce al anillo del NAM e hidroliza el PG de la
corteza.
Empieza a entrar agua al protoplasto espora pierde la
refringencia y comienza a perder resistencia al calor.

Germinacin

El proceso se hace ya irreversible,

se rompe la dormancia, hay
metabolismo, pero es endgeno:
~ Se pierde DPA y se supone la
prdida de Ca2+.
~ Ca2+ pasa a corteza y neutraliza
cargas negativas del PG hay
rehidratacin e hinchamiento
del protoplasto y ms
contraccin de la corteza.
~ El 3-fosfoglicerato 2fosfoglicerato PEP ATP
~ SASPs se hidrolizan por una
proteasa activa y los
aminocidos se reutilizan en
fabricar nuevas protenas.
~ Comienza la transcripcin de
genes vegetativos.

Terminacin
El metabolismo ya se hace exgeno.
Se sintetiza ADN.
Protoplasto crece.

La pared de la espora sirve como germen para la pared de la

clula vegetativa La clula vegetativa sale rompiendo las
cubiertas.

Cuerpos parasporales
Producidos en algunas
especies: Bacillus thuringiensis
y B. popiliae.
Cristales proteicos octadricos
(bipiramidales) formados en el
esporangio durante la
esporulacin.
Agregacin regular de
subunidades de una
glucoprotena de 120 kD en
fase IV (protenas Cry).
Son insecticidas ecolgicos,
especficos frente a larvas de:
colepteros y dpteros.

Toxinas Cry

Toxinas Cry

Acta como insecticida.

Oruga ingiere materia vegetal con bacterias esporuladas que
producen Cry.
La protena Cry se disuelve en el tracto digestivo. El pH alcalino
provoca la proteolsis que activa a la toxina.

La toxina altera la permeabilidad del epitelio intestinal, pasa a la

hemolinfa lo que provoca la parlisis y muerte de la larva.

Bacillus anthacis

Bacilo Gram positivo.

Esporulado.
Causa el carbunco o ntrax en
animales herbvoros.
Es de origen geoflico.
http://srs.dl.ac.uk/Annual_Reports/AnRep01_02/anthrax.htm

Clostridium tetani
Causante de ttanos
Toxina (Tetanospamina)
Afinidad por sistema nervioso
(neurotoxina)
Bloquea neurotransmisores
Provoca espasmo muscular

Clostridium botulinum
Botulismo
Intoxicacin alimentaria
Alimentos enlatados pH cidos
(vegetales)
Toxina resistente al calor
Parlisis flacida

Inhibe a la acetilcolina

Clostridium perfringens
Intoxicacin alimentaria
(Diarrea, enterotoxina)
Gangrena gaseosa
(hemolisinas, proteasas,
lipasas, colagenasas,
hialuronidasas, etc.)

Geobacillus stearothermophilus
Bioindicadores de
esterilizacin en autocalve

Negativo Positivo

Esporas bacterianas

Esporas fngicas
Reproduccin Sexual en
hongos filamentosos y
levaduriformes
Zigosporas

Ascosporas

Basidiosporas

Quistes o Cistos bacterianos

Quistes de Azotobacter

Se producen en algunas especies por engrosamiento de la pared

celular de la clula vegetativa, por deposicin de nuevos
materiales sobre la membrana citoplsmica (alginatos), al mismo
tiempo que se acumulan materiales de reserva en el citoplasma
(PHA). Poseen metabolismo endgeno y resisten el calor, la
desecacin y los agentes qumicos ms que la clula vegetativa
(pero menos que las endosporas

Mixobacterias
Microquistes de Mixobacterias,
llamados mixosporas.
Sus envolturas constan de una
corteza, rodeada de cubiertas
(interna y externa).
Estas cubiertas se componen de
una glucoprotena muy rica en
polisacridos.

http://cms.daegu.ac.kr/sgpark/microbiology/myxobacteria.jpg

Mixobacterias

Nature Reviews Microbiology 1, 45-54 (October 2003)

Quistes de Eucariotes

Entamoeba histolytica