REVISTA BRASILEIRA

DE TOXICOLOGIA
BRAZILIAN JOURNAL
OF TOXICOLOGY

SOCIEDADE
BRASILEIRA DE
TOXICOLOGIA

Revista Brasileira de Toxicologia 23, n.1-2 (2010) 17-21

Toxicidade do resduo areia de fundio utilizando o

teste com a bactria luminescente Vibrio fischeri
Wlace nderson Almeida Soares1; Gabriela Nenna Ferraresi2; Gilson Alves Quinglia1;
Gisela de Arago Umbuzeiro3*
1
Setor de Anlises Toxicolgicas, CETESB, Companhia Ambiental do Estado de So Paulo, So Paulo, Brasil.
2
Setor de Resduos Slidos, CETESB, Companhia Ambiental do Estado de So Paulo, So Paulo, Brasil.
3
Laboratrio de Ecotoxicologia e Microbiologia Ambiental Prof. Dr. Ablio Lopes, Faculdade de Tecnologia,
UNICAMP, Universidade Estadual de Campinas, Limeira, Brasil
Abstract

Toxicity of foundry sand wastes using the luminescent bacteria Vibrio fischeri assay
Wastes foundry sand can be contaminated by metals, depending on the kind of metal that is molten in the casting industry
and/or organics from chemical bindings used in these process. Because of the complexity of these mixtures it is difficult
to characterize using only chemical analyses. In order to obtain information about the ecological hazard of those samples,
biological tests can be used. The acute toxicity test with the luminescent bacteria Vibrio fischeri is a good choice due to
its simplicity, low cost and rapid response. In this work virgin and used foundry sands from four different mold-making
industries were analyzed. The aqueous extract of the nine virgin sands tested showed negative results for the luminescent
bacteria. Ten out of the eighteen used sand samples were positive and they all belonged to the organics chemical-bounded
sand process. The samples derived from the green sand mold-making process showed negative responses. Our work
confirms that the Vibrio fischeri acute test can be used as an additional tool to evaluate the ecotoxicological hazard of
foundry sands and that the toxicity seems to be related to the mold-making process.
Keywords: Foundry sand, Microtox, solid waste, toxicity assay, Vibrio fischeri, reuse

INTRODUO
Dentre os diversos geradores de resduos slidos
existentes atualmente tem-se ateno especial para as
indstrias de fundio de peas metlicas que, devido
s particularidades de seu processo, geram uma grande
quantidade do resduo areia de fundio (1). O Brasil
tradicionalmente um dos maiores produtores mundiais de
peas metlicas fundidas, estando em 2008 na stima posio
no ranking mundial, com mais de 3,3 milhes de toneladas
produzidas, sendo que s no estado de So Paulo a produo
ultrapassa a marca de 1,3 milho de toneladas por ano (2,3).
A indstria de fundio utiliza o processo de fuso metlica,
que consiste em aquecer o metal at que ele se funda e se
*Autor correspondente. Endereo de correspondncia: Faculdade
de Tecnologia, Universidade Estadual de Campinas, Rua Pascoal
Marmo, 1888, CEP 13484-3332. Limeira, So Paulo, SP. E-mail:
giselau@ft.unicamp.br
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transforme em um lquido homogneo e, em seguida, vertido

em moldes adequados onde, ao solidificar-se, adquirir a
forma desejada, como esculturas, ferramentas, peas de
automveis e de avies, entre outros (2). Existem muitos
processos de moldagem, porm o mtodo mais utilizado
em todo o mundo a moldagem em areia. Pode-se estimar
que mais de 80% das peas fundidas produzidas atualmente
utilizam esta tcnica (4).
Essas indstrias utilizam areias com caractersticas
refratrias para a preparao de moldes e machos que geram
as peas metlicas, sendo que os moldes conformam as faces
externas e os machos as internas. Os moldes, com os machos
montados em seu interior, so preenchidos com o metal
lquido que, ao solidificar, d origem s peas desejadas. Para
retir-las, promove-se a quebra e desagregao dos moldes e
machos, na operao denominada desmoldagem. O resduo
desta operao, denominado areia de fundio, pode ser
reutilizado em um novo ciclo de produo ou descartado como
resduo slido (2). Como a areia resultante da desagregao
dos moldes e machos , na maioria das vezes, misturada na
desmoldagem, estas no so usualmente distinguidas, sendo
denominadas simplesmente areia descartada de fundio.

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Soares, W.A.A./Revista Brasileira de Toxicologia 23, n.1-2 (2010)

O processo de fabricao de peas fundidas utiliza

grande quantidade de areia para confeco dos moldes e
machos, variando de 800 a 1.000 kg de areia para cada 1.000
kg de pea produzida. Essa areia normalmente retirada
de jazidas de cavas ou rios e, para o preparo dos moldes e
machos, misturada com um ligante que pode ser bentonita
e outros aditivos para o preparo da chamada areia verde,
utilizada na fabricao de peas menores e mais leves. J
para o preparo de peas maiores, utilizam-se as chamadas
areias ligadas quimicamente, que consistem na areia natural
misturada com ligantes que podem ser orgnicos (resina
furnica, fenlica, uretnica, alqudica, etc.), inorgnicos
(silicato de sdio, cimento portland, etc.) ou mistos (como
as resinas fenlicas alcalinas), alm de catalisadores (1,2).
A grande produo de peas exige que a indstria
de fundio brasileira utilize uma enorme quantidade de
areia nos processos de moldagem, cerca de 6 a 7 milhes
de toneladas anuais. Deste montante, grande parte, aps
a desmoldagem, reutilizada no prprio processo de
fabricao (entre 5 e 6 milhes de toneladas) e a diferena
(aproximadamente 2 milhes de toneladas) torna-se um
resduo que ser descartado. S no estado de So Paulo,
as indstrias geram cerca de 1 milho de toneladas deste
resduo por ano (2,4). A areia de fundio descartada,
aps a desmoldagem das peas, contm resduos de metais
e substncias provenientes dos ligantes empregados na
construo dos moldes e machos (1).
A norma tcnica NBR 10.004:2004 da Associao
Brasileira de Normas Tcnicas (ABNT) tem como objetivo
classificar os resduos slidos quanto aos seus riscos
potenciais ao meio ambiente e sade pblica para que estes
possam ser gerenciados adequadamente, segundo uma lista
de substncias qumicas com impacto conhecido sade e ao
ambiente, que devem ser determinadas em seus lixiviados e
solubilizados, alm de caractersticas como inflamabilidade,
patogenicidade e toxicidade. De acordo com esta norma,
os resduos slidos podem ser classificados em resduos
perigosos (Classe I) e no perigosos (Classe II). Os resduos
no perigosos podem ainda ser no inertes (Classe II A) e
inertes (Classe II B). O resduo areia de fundio consta
do Anexo H da NBR 10.004, de carter informativo, que
apresenta a codificao de alguns resduos classificados
como no perigosos. As caractersticas da areia de fundio
descartada dependero do metal fundido e do processo
empregado na moldagem (1).
A composio qumica do resduo areia de fundio
pode ser extremamente complexa, devido ao uso de ligantes
com frmulas desconhecidas ou ainda devido formao de
novos compostos durante o processo de moldagem. Assim
sendo, torna-se evidente que somente a anlise de um limitado
grupo de substncias qumicas pode no ser suficiente para
caracterizar as areias de fundio descartadas, o que pode
ser complementado com sucesso utilizando-se os testes de
toxicidade (5).
Dentre os diversos testes ecotoxicolgicos existentes,
o de toxicidade aguda utilizando a bactria luminescente

Vibrio fischeri vem sendo muito utilizado para determinao

de toxicidade em amostras ambientais (6). Esse teste se baseia
na medida da luminescncia produzida naturalmente por uma
cultura de aproximadamente um milho de clulas de Vibrio
fischeri. Quando a bactria entra em contato com substncias
txicas, as bactrias diminuem ou cessam a emisso de luz.
Esta diminuio na emisso de luz pelas bactrias medida
em porcentagem de inibio da luminescncia. Uma amostra
considerada txica quando a mesma causar uma inibio da
luminescncia igual ou maior que 20%, quando comparada
com um controle negativo, que neste caso uma soluo de
cloreto de sdio 2% (m/v) (6).
Os testes so realizados em um curto espao de
tempo, que no caso do Vibrio fischeri, pode ser de 5, 15 ou
30 minutos de contato com a amostra, sendo o de 15 minutos
de exposio o mais usual (7,8).
A comparao entre as caractersticas das areias de
fundio descartadas e as das areias virgens, assim como
os resultados obtidos nos testes de toxicidade com Vibrio
fischeri, so interessantes se utilizados como critrio de
aceitao desse resduo para reutilizao. Existem trabalhos
na literatura que demonstram a utilizao do teste com
Vibrio fischeri para a caracterizao de amostras do resduo
areia de fundio (5,9). Os resultados deste teste vm sendo
utilizados no estado de Indiana nos Estados Unidos pelo
Departamento de Transportes, como um dos critrios de
deciso para a reutilizao deste resduo na construo de
estradas (10).
O objetivo deste trabalho foi comparar os resultados
de areias virgens com as areias descartadas de fundio
de quatro diferentes processos de moldagem e macharia
utilizando o teste de toxicidade aguda com a bactria
luminescente Vibrio fischeri e verificar a aplicabilidade deste
teste para caracterizao das areias quanto a sua toxicidade,
em complementao s anlises qumicas.
MATERIAIS E MTODOS
A amostragem foi realizada em seis empresas de
fundio do estado de So Paulo que utilizam diferentes
processos industriais de moldagem e macharia para
conformao das peas metlicas fundidas: areia verde (areia/
bentonita/carvo) e areias ligadas quimicamente (resina
fenlica, alqudica e furnica). Na Tabela 1 esto relacionados
os processos de moldagem e o nmero de amostras coletadas
em cada empresa.
Para a coleta foram utilizados frascos de vidro
borossilicato, atxicos, de colorao mbar, com tampas
rosqueadas de material atxico, com capacidade para 500 g.
Os frascos foram preenchidos completamente com a amostra
e conservados a uma temperatura de 2 a 8 C. As amostras
foram homogeneizadas e solubilizadas em agitador rotatrio
de frascos. Massas de 100 g da amostra foram misturadas com
400 mL de soluo de cloreto de sdio (NaCl) 2% (m/v) e
mantidas em agitao durante 18 2 h a uma velocidade de 30
RPM. Os frascos foram deixados em repouso, a temperatura

Soares, W.A.A./Revista Brasileira de Toxicologia 23, n.1-2 (2010)

Tabela 1. Relao das amostras coletadas e os respectivos

processos de moldagem.
Empresa

Areia verde (areia/

bentonita/carvo)

Areias ligadas
quimicamente

Processo de
moldagem

Resina
fenlica
Resina
alqudica
Resina
furnica
Total

Nmero de Amostras
Virgens

Residuais

B
F

1
1

2
2

18

ambiente, por aproximadamente 1 hora. Em seguida o

sobrenadante foi centrifugado a uma velocidade de 10.000
g durante 16 minutos. O centrifugado foi filtrado em fibra
de vidro (AP20, Millipore) e, em seguida, em membrana de
acetato de celulose com porosidade de 0,45 m (5).
O pH foi medido e, quando necessrio, corrigido
utilizando uma soluo de hidrxido de sdio (NaOH) 1
mol/L ou cido clordrico (HCl) 1 mol/L. A faixa de pH ideal
para o teste com Vibrio fischeri de 6,0 a 8,5 (8).
Os solubilizados das amostras foram testados
imediatamente aps seu preparo ou, na impossibilidade,
preservados sob refrigerao (2 a 8 C) por no mximo
72 h.
Para a execuo do teste foi utilizado a aparelhagem,
software e bactrias do sistema Microtox (Strategic
Diagnostic inc.). O protocolo de teste utilizado foi o mesmo
que o adotado por Bastian e Alleman (5), denominado 90%
Comparison Test. A emisso de luz foi medida utilizandose um luminmetro de preciso (modelo M500 Analyzer,
Strategic Diagnostic inc.) e o teste realizado a 15 C. Para
cada amostra, 5 rplicas do solubilizado foram testados em
dose nica mxima e comparados com 5 rplicas do controle
negativo (soluo de NaCl 2% (m/v), a mesma utilizada para
a solubilizao das amostras).
Aps a reconstituio da cultura bacteriana liofilizada
(Strategic Diagnostic inc.), preservada sob congelamento
entre -20 e -25 C, a mesma diluda 1:10 em NaCl 2%
(m/v) e volumes de 100 L so transferidos para cada uma
das dez cubetas-teste. Aps 15 minutos de estabilizao da
bactria, mede-se a luz emitida pela soluo de bactria e,
ento, adiciona-se 900 L da soluo utilizada como controle
negativo em cinco cubetas-teste e 900 L do solubilizado
da amostra nas outras cinco. Aps 15 minutos, mede-se
novamente a luz emitida. Calcula-se a mdia das leituras

19

finais do controle negativo (Xc) e a mdia das leituras finais

da amostra (Xa) e a porcentagem de inibio da luminescncia
(%) causada pela amostra, em relao ao controle, usando a
seguinte frmula:
% = (Xc - Xa x 100) / Xc
Neste trabalho foi utilizado o Software MicrotoxOmni
(Azur Environmental), que gerencia todo o teste e realiza os
clculos estatsticos. Os resultados de toxicidade foram
expressos em mdia e intervalo de confiana da porcentagem
de inibio da emisso de luz da cultura bacteriana causada
pela concentrao de amostra testada, que neste estudo foi de
90%. As amostras cujos resultados da inibio da emisso de
luz da bactria foram superiores a 20% foram consideradas
txicas. Como controle positivo do ensaio foram realizados
testes utilizando soluo de ZnSO4.7H2O 100 mg/L.
RESULTADOS E DISCUSSES
Os valores de pH medidos nos solubilizados
apresentaram grande variao em relao s diversas amostras
testadas. As areias virgens apresentaram pH variando de
4,6 a 6,6. Os resduos de areia verde apresentaram pH entre
6,9 e 7,5, exceo apenas da amostra 2 da indstria F, que
apresentou pH 5,0. Das amostras de resduos de areias
ligadas quimicamente, as de resina fenlica apresentaram pH
entre 8,0 e 11,2 enquanto as de resina furnica e alqudica
permaneceram com pH mais prximo das areias virgens,
entre 4,0 e 6,1. Essa variao de pH nas areias residuais
deve estar relacionada aos diferentes compostos qumicos
utilizados como ligantes, adicionados s areias virgens em
cada um dos processos de fundio empregados. Como
descrito anteriormente, os solubilizados das amostras que
apresentaram pH fora da faixa indicada para o teste (6,0 a
8,5) foram corrigidos para essa faixa, portanto os valores de
pH medidos no esto correlacionados com os resultados de
toxicidade observados.
As nove amostras de areia virgem apresentaram
resultados negativos ou muito prximos ao valor limite. Sete
apresentaram inibio de luz inferior a 20% e duas entre 21
e 23% (Tabela 2). Respostas similares foram obtidas em
estudos anteriores (5,9).
Das dezoito amostras do resduo da areia de fundio
testadas, oito apresentaram resultados negativos para o teste
(entre -12 e 11%) e dez foram positivas, com valores de
inibio entre 41 e 99% (Tabela 3).
As amostras provenientes do processo de moldagem
que utiliza areia verde (indstrias A, B e F) apresentaram
resultados negativos para o teste de toxicidade empregado
(Tabela 3). As amostras que apresentaram toxicidade
so provenientes do processo que utiliza areia ligada
quimicamente, ou seja, das resinas fenlica, furnica
e alqudica (Tab ela 3). Resultados semelhantes foram
tambm observados por Bastian e Alleman (5) e Hung
et al. (9). Os autores testaram amostras provenientes de

Soares, W.A.A./Revista Brasileira de Toxicologia 23, n.1-2 (2010)

20

Tabela 2. Mdias da porcentagem de inibio das cinco

rplicas dos solubilizados das amostras de areia virgem
avaliadas pelo teste de toxicidade aguda com V. fischeri. Entre
parnteses, intervalo de confiana 95%.
Amostra
A
A2
B
B2
C
D
D2
E
F

Porcentagem de Inibio da
Luminescncia (%)
13 (7,2 a 17)
5 (-1,7 a 12)
21 (17 a 26)
2,6 (-1,3 a 6,6)
23 (18 a 28)
-0,8 (-13 a 11)
-2,9 (-5,9 a 0,1)
14 (11 a 16)
0,6 (-5,4 a 6,6)

Tabela 3. Mdias da porcentagem de inibio das cinco

rplicas dos solubilizados das amostras de areia de fundio
dos diferentes processos de moldagem avaliadas pelo teste de
toxicidade aguda com V. fischeri. Entre parnteses, intervalo
de confiana 95%.
Processo de
Moldagem

Areia verde

Resina fenlica

Resina alqudica

Resina furnica

Amostra

Mdia da Porcentagem
de Inibio da
Luminescncia (%)a

A1-1

11 (6,3 a 16)

A1-2

11 (5,4 a 16)

A2-1

-12 (-18 a -7)

A2-2

-5 (-15 a 5)

B1

8,7 (1,5 a 16)

B2

8,8 (4,9 a 13)

F-1

-12 (-18 a -7,2)

F-2

4,9 (-3,9 a 14)

B1-1

49 (44 a 56)

B2-1

67 (61 a 73)

E-1

87 (84 a 92)

E-2

85 (82 a 89)

C-1

54 (50 a 58)

C-2

48 (40 a 55)

D1-1

49 (42 a 55)

D1-2

41 (23 a 59)

D2-1

98 (90 a 106)

D2-2

99 (97 a 101)

Em negrito, amostras que apresentaram respostas positivas

(inibio maior que 20%).

processos que utilizam areia verde e que utilizam ligantes

qumicos orgnicos. No primeiro caso os testes com V.
fischeri apresentaram resultados negativos, com inibio
de luz prximas ou at menores que as observadas
nas areias virgens, enquanto que nas areias contendo
ligantes orgnicos a inibio de luz observada foi de 40
a 80% aproximadamente. Bastian e Alleman (5) tambm
correlacionaram os resultados obtidos com testes de
DQO (Demanda Qumica de Oxignio) realizados nos
solubilizados, obtendo baixos valores de DQO (2 a 28
mg/L) nas amostras que no apresentaram toxicidade e
valores de DQO mais altos (70 a 160 mg/L) nas amostras
que apresentaram toxicidade. A partir dos resultados
obtidos os autores sugerem que a toxicidade observada
pode ser atribuda a compostos orgnicos, provavelmente
liberados durante o processo de aquecimento. Como a
composio qumica das resinas utilizadas nas indstrias
de fundio muitas vezes no completamente conhecida,
torna-se difcil inferir quais substncias poderiam ser
responsveis pela inibio observada ao Vibrio fischeri.
Aplicao de procedimentos padronizados para identificao
de toxicidade - TIE (do ingls, Toxicity Identification
Evaluation) - poderiam auxiliar na identificao do grupo
de substncias ou da substncia que causa a inibio. O
TIE consiste na realizao de diversas manipulaes na
amostra (aerao, extrao orgnica, graduao de pH, etc.)
seguidas de testes de toxicidade, alm de anlises qumicas
especficas (11-14).
Como exposto anteriormente, a norma tcnica NBR
10.004:2004 classifica o resduo areia de fundio como no
perigoso em seu anexo H, de carter informativo. De acordo
com essa classificao, nos resduos de areia de fundio
no devem estar presentes nenhum dos compostos qumicos
listados na norma, no apresentando tambm caractersticas
de toxicidade. Porm os resultados de toxicidade obtidos
neste trabalho sugerem que podem estar presentes nestes
resduos, substncias qumicas que no esto listadas na
norma, provenientes dos ligantes utilizados, o que refora a
aplicabilidade do teste com Vibrio fischeri como ferramenta
auxiliar para a caracterizao dos resduos de areia de
fundio.
CONCLUSES
Pode-se concluir que o teste de toxicidade aguda
com a bactria luminescente Vibrio fischeri foi eficiente
para comparar as caractersticas das areias virgens com as
areias descartadas de fundies com diferentes processos de
moldagem, possibilitando ainda correlacionar os resultados
com o ligante utilizado, diferenciando as amostras de
areias verdes das areias ligadas quimicamente. Os resduos
provenientes dos processos de moldagem que empregam
areias ligadas quimicamente apresentaram-se positivos
para o teste utilizado. Mais estudos so necessrios para se
elucidar quais os compostos so responsveis pela inibio
de luz observada.

Soares, W.A.A./Revista Brasileira de Toxicologia 23, n.1-2 (2010)

resumo

4.

Toxicidade do resduo areia de fundio utilizando o teste

com a bactria luminescente Vibrio fischeri

O resduo areia de fundio gerado pelas indstrias que

fabricam peas metlicas pode conter diferentes metais,
dependendo do tipo de metal fundido, e compostos
orgnicos, provenientes dos ligantes qumicos utilizados,
de composio muitas vezes desconhecida. A complexidade
destas amostras dificulta sua caracterizao por anlises
qumicas. Como ferramenta complementar a estas
anlises, pode-se utilizar testes ecotoxicolgicos, como o
de toxicidade aguda com a bactria luminescente Vibrio
fischeri. Neste trabalho foram comparados os resultados
de amostras de areias virgens e areias de fundio
descartadas de quatro diferentes processos de moldagem
e macharia frente ao Vibrio fischeri com o objetivo de
verificar a aplicabilidade deste teste para caracterizao
das areias. Os solubilizados das nove amostras de areias
virgens apresentaram resultados negativos para o teste. Das
dezoito amostras do resduo areia de fundio testadas,
dez apresentaram resultados positivos, correspondendo
s areias que utilizam ligantes qumicos orgnicos.
As amostras provenientes dos processos denominados
areias verdes apresentaram resultados negativos.
Estes resultados, comparados com estudos existentes na
literatura, sugerem que o teste com Vibrio fischeri pode ser
utilizado como ferramenta adicional para a caracterizao
desses resduos. Pode-se observar uma relao entre o
ligante empregado no processo de moldagem e macharia
e as amostras que apresentaram resultados positivos.

5.
6.
7.

8.
9.
10.

11.

12.

Palavras-chave: areia de fundio, Microtox, resduos

slidos, testes de toxicidade, Vibrio fischeri, reutilizao
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13.

14.

21

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