SISTEMA DE

INYECTORES
Cristysweet

INGENIERIA EN BIOQUIMICA

Anlisis instrumental

SISTEMA DE INYECTORES

En cromatografa de gases, los lquidos se inyectan mediante una jeringa, a

travs de un disco (septo) de goma, en un inyector caliente que contiene un
tubo de vidrio salinizado .El gas portador arrastra la muestra vaporizada desde
el inyector a la columna. En cromatografa analtica, el volumen de muestra liquida que se inyecta suele ser de 0,1-2

l. Los productos de descomposicin y

los componentes no voltiles de la muestra se van acumulando en el tubo de

vidrio, que se debe reemplazar peridicamente.

Sistema de inyeccin
La inyeccin debe ser rpida y ocupar lo menos posible en el inicio de la
columna (como cuando se siembra en una capa bien fina en una columna
separativa manual).
Lo ms comn es inyectar con una jeringa dentro de un septum de goma o
silicona, pero tambin se usan llaves de 6 vas como las de HPLC que tienen
mayor repetitividad que una jeringa.

SISTEMAS DE INYECCIN DE MUESTRA

Sistemas de inyeccin, hay tres tipos bsicos.

Sin divisin (non Split)

Con divisin (Split inyeccin)
Directa o en columna (column injection)

con divisin: forma rutinaria de introducir una muestra pequea en la

columna

sin divisin: es la mejor forma para niveles traza de solutos de alto

punto de ebullicin en disolventes de bajo punto de ebullicin.

en columna: es la mejor para solutos trmicamente estables y

disolventes de alto punto de ebullicin; la mejor para anlisis
cuantitativos.

Con divisin (Split injection)

Las reas se vuelven no lineales y no se puede cuantificar bien.
Este tipo de inyeccin (ms conocida como inyeccin Split), es el ms sencillo
de los que se utilizan en cromatografa capilar), consta bsicamente de los
mismos elementos que un inyector normal, con la nica adicin de un sistema
de divisin de flujo a la salida de la cmara de mezcla. Dispone de un sistema
de apertura y cierre automticos para que nicamente permita la salida de gas
hacia la atmsfera durante el proceso de inyeccin.
Los inyectores de este tipo presentan dos inconvenientes; en primer lugar la
divisin de la muestra da lugar a que las cantidades de anlito que son
separadas y llegan al detector sean muy pequeas, por lo que los lmites de
deteccin aumentan bastante, lo que es un gran inconveniente a la hora de
realizar anlisis de trazas
Una inyeccin de disolvente de gran expansin de volumen puede provocar
una sobrecarga del linear del portal de inyeccin Esto puede resultar en la

prdida de muestra por la VALVULA DE PURGA as como contaminacin de la

lnea de gas portador entrante.
La inyeccin con divisin sirve para anlitos en concentracin apreciable, ya
que diluye mucho la muestra. Es la que da los picos ms finos y la mejor
separacin. Mal lmite de deteccin y baja repetitividad para anlisis
cuantitativo.
La inyeccin sin divisin es para anlito en muy baja concentracin y no
diluye la muestra. Baja repetitividad. Baja separacin, y si no se tiene cuidado
con al atrapamiento del disolvente enfriando el inicio de la columna, los picos
salen muy anchos.
Un tiempo de splitless insuficiente afectar a la sensibilidad y reproducibilidad
del mtodo
El tiempo de splitless deber ser tanto mayor cuanto menor sea el flujo por
columna, mayor el volumen que ocupe la muestra vaporizada en el linery
cuanto mayor sea el volumen de ste, por tanto tambin depende del tipo de
liner usado.
La utilizacin de la tcnica de splitless supone dos importantes ventajas. En
primer lugar, dado que no existe divisin de muestra, permite un aumento
notable de la sensibilidad, por lo que es muy adecuada para el anlisis de
trazas.
Por otra parte, la reconcentracin de la muestra en la cabeza de la columna
origina que las prdidas de eficacia debidas a una inyeccin inadecuada sean
de mucha menor importancia que en otras tcnicas de inyeccin.
La inyeccin directa en columna
Es la mejor para cuantificar (no se pierde anlito). Tambin hay que atrapar el
disolvente. til cuando no se puede calentar el anlito por descomposicin.
La calidad de separacin es intermedia directamente a la parte superior de la
columna (inyeccin directa en columna). La eleccin entre estos dos mtodos a
menudo depende del dimetro de la columna. Cualquiera de ellos es eficaz

para columnas empacadas, pero la introduccin de la muestra es un proceso

delicado en columnas capilares de menos de 1 mm de dimetro por dos
motivos: primero, el corte transversal abierto del capilar es muy pequeo y,
segundo, la muestra debe ser pequea para no sobrecargar la fase
estacionaria y provocar distorsin en la banda. Para mantener la cantidad de
muestra dentro del nivel correcto, se emplea un tipo especial de inyector que
reduce la cantidad de muestra que llega a la cabeza de la columna capilar.
La muestra es introducida directamente en la columna, mantenindose sta a
una temperatura inferior al punto de ebullicin del componente ms voltil de la
muestra. Una vez introducida la muestra, se inicia el programa de
calentamiento de la columna para proceder a la separacin.
El inyector divisor o sin divisin (Split/splitless inyector).
Las muestras con concentracin de anlito adecuadamente baja se inyectan en
el modo no divisor (splitless), y son transportadas a la columna por el gas de
arrastre como en un inyector normal. Cuando se emplea el modo de divisin
(Split), el gas de arrastre fluye continuamente por la entrada a razn de 50 a
1000 veces la velocidad con la que fluye por la columna. El exceso de flujo se
deja escapar y slo penetra una fraccin de la muestra a la columna.
En splitless para focalizar la muestra (introducida lentamente en la columna)
se deber:

trabajar con una temperatura inicial de horno 10-20 C por debajo del
punto de ebullicin del disolvente de la muestra (no utilizar mezclas de
disolventes). Si la temperatura es demasiado baja (30-60C por debajo
del punto de ebullicin.) pueden deformarse los picos ms voltiles.

y/o bien, los puntos de ebullicin de los anlito estn ms de 150 C por
encima de la temperatura inicial de la columna.

En splitless con el tiempo se requerir cortar de 0.5-1m de columna para

restablecer sus prestaciones.

La optimizacin fina (en intevalos0.1 min) del tiempo de inicio de la purga

puede permitir reducir el tamao del pico del disolvente
Un tiempo de splitless sin suficiente afectar a la sensibilidad y reproducibilidad
del mtodo
El tiempo de splitless deber ser tanto mayor cuanto menor sea el flujo por
columna, mayor el volumen que ocupe la muestra vaporizada en el linery
cuanto mayor sea el volumen de ste, por tanto tambin depende del tipo de
liner usado.