Universidad de Quintana Roo

Departamento de Ciencias
Ingeniera Ambiental
Anlisis Instrumental
PRCTICA No. 3
DEMANDA BIOQUMICA DE OXGENO (DBO5)

1. OBJETIVOS
1. Determinar la DBO5 de diferentes tipos de agua.
2. El alumno interpretar los resultados de la DBO 5 dependiendo del origen de la
muestra, a la normatividad y el tratamiento aplicado.
3. El alumno determinar la concentracin de Oxgeno Disuelto a diferentes tipos
de muestras.

2. INTRODUCCION
La determinacin de oxgeno disuelto (OD) es muy importante en Ingeniera
Ambiental por ser el factor que determina la existencia de condiciones aerobias o
anaerobias en un medio particular. La determinacin de Oxgeno Disuelto sirve
como base para cuantificar la Demanda Qumica de Oxgeno (DBO 5), aerobicidad
de los procesos de tratamiento, tasas de aireacin en los procesos de tratamiento
aerobio y grado de contaminacin de los ros. El oxgeno disuelto se presenta en
cantidades variables y bajas en el agua; su contenido depende de la
concentracin y estabilidad del material orgnico presente y es por ello, un factor
muy importante en la autopurificacin de los ros. Los valores de O.D. en aguas
son bajos y disminuyen con la temperatura. El oxgeno libre en solucin,
especialmente cuando est acompaado de CO 2es un agente de corrosin
importante del hierro y el acero. La demanda bioqumica de oxgeno (DBO 5) es
una prueba usada para la determinacin de los requerimientos de oxgeno para la
degradacin bioqumica de la materia orgnica en las aguas municipales,
industriales y en general aguas residuales; su aplicacin permite calcular los

efectos de las descargas de los efluentes domsticos e industriales sobre la

calidad de las aguas de los cuerpos receptores. Los datos de la prueba de la
DBO5 se utilizan en ingeniera para disear las plantas de tratamiento de aguas
residuales. En aguas residuales domsticas, el valor de la DBO 5 a 5 das
representa en promedio un 65 a 70% del total de la materia orgnica oxidable. La
DBO como todo ensayo biolgico, requiere cuidado especial en su realizacin, as
como conocimiento de las caractersticas esenciales que deben cumplirse, con el
fin de obtener valores representativos confiables.
El ensayo supone la medida de la cantidad de oxgeno requerido por los
organismos en sus procesos metablicos al consumir la materia orgnica presente
en las aguas residuales o naturales, por lo que es necesario garantizar que
durante todo el perodo del ensayo exista suficiente O.D. para ser utilizado por los
organismos. Adems, debe garantizarse que se suministran las condiciones
ambientales adecuadas para el desarrollo y trabajo de los microorganismos, as
que se deben proporcionar los nutrientes necesarios para el desarrollo bacterial
tales como N y P y eliminar cualquier sustancia txica en la muestra. Es tambin
necesario que exista una poblacin de organismos suficiente en cantidad y
variedad de especies, comnmente llamada simiente, durante la realizacin del
ensayo. Variaciones en el nmero inicial de bacterias tienen poco efecto sobre el
valor de D.B.O.5 siempre y cuando el nmero de bacterias sea mayor de 103/ml.
El efecto de una poblacin bacterial inicial baja sobre el valor de la DBO 5 puede
observarse en la figura 1.

Si no estn adaptadas al substrato particular existente en la botella de DBO 5, las

bacterias moriran o disminuiran en nmero hasta que logren adaptarse; es
importante, por lo tanto, obtener simientes aclimatadas para conseguir valores

verdaderos de la concentracin orgnica. El efecto de una simiente no aclimatada

sobre el valor de la DBO5 puede analizarse en la figura 2.
Las condiciones estndar del ensayo incluyen incubacin en la oscuridad a 20C
por un tiempo determinado, generalmente cinco das. Las condiciones naturales
de temperatura, poblacin biolgica, movimiento del agua, luz solar y la
concentracin de oxgeno no pueden ser reproducidas en el laboratorio. Los
resultados obtenidos deben tomar en cuenta los factores anteriores para lograr
una adecuada interpretacin.
Las muestras de agua residual o una dilucin conveniente de las mismas, se
incuban por cinco das a 20C en la oscuridad. La disminucin de la concentracin
de oxgeno disuelto (OD), medida por el mtodo Winkler o una modificacin del
mismo, durante el periodo de incubacin, produce una medida de la DBO 5.
LIMITACIONES E INTERFERENCIAS
Existen numerosos factores que afectan la prueba de la DBO 5, entre ellos la
relacin de la materia orgnica soluble a la materia orgnica suspendida, los
slidos sedimentables, los flotables, la presencia de hierro en su forma oxidada o
reducida, la presencia de compuestos azufrados y las aguas no bien mezcladas.
Al momento no existe una forma de corregir o ajustar los efectos de estos factores.
Durante la hidrlisis de protenas se produce materia no carbonosa como el
amoniaco, el cual es oxidado en nitrito y nitrato por bacterias autotrficas; el
oxgeno asociado con la oxidacin del nitrgeno amoniacal, en el proceso
biolgico de nitrificacin, constituye la llamada Demanda Bioqumica de Oxgeno
Nitrogencea (DBON).
El efecto del oxgeno requerido por nitrificacin, debido al requerimiento lento de
las bacterias nitrificantes, es importante en muestras de aguas residuales crudas
despus de los 8 a 10 das. Sin embargo, en efluentes de plantas de tratamiento el
efecto puede presentarse despus de 2 das debido a la presencia de un gran
nmero de bacterias nitrificantes en el efluente. La nitrificacin pude inhibirse en
las muestras de DBO5 por adicin de tiourea, de tal manera que se determine
solamente la demanda carbonosa. Debe recordarse que la nitrificacin es una
demanda de oxgeno que se ejerce eventualmente sobre la fuente receptora.

Las reacciones estequiomtricas para oxidacin del amonio a nitrito y nitrato por
las bacterias nitrificantes son:

Demanda Bioqumica Oxgeno carbonosa contra nitrogencea. La oxidacin de las

formas reducidas del nitrgeno como amoniaco y nitrgeno orgnico, mediada por
los microorganismos, ejercen una demanda nitrogencea, que ha sido
considerada como una interferencia en la prueba; sin embargo, esta puede ser
eliminada con la adicin de inhibidores qumicos. Cuando se inhiba la demanda
nitrogencea de oxgeno, reportar los resultados como demanda bioqumica de
oxgeno carboncea (DBOC5); cuando no se inhiba, reportar los resultados como
DBO5.
DESVENTAJAS DE LA PRUEBA DBO5
1. Su reproducibilidad no es muy buena y valores menores a 2 mg/l no son
adecuados.
2. Existen compuestos orgnicos recalcitrantes que no pueden ser
degradados por la materia.
3. El periodo arbitrario de 5 das, no corresponde al momento en que se
halla consumido en su totalidad la materia orgnica.
A pesar de sus limitaciones, el uso de la DBO 5 como parmetro de
regulacin es aceptable ya que la prueba representa el consumo
potencial de oxigeno que las aguas residuales pueden demandar en las

fuentes receptoras y el grado de tratamiento al que ha sido sometida

determinada agua residual.

4. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPO

Material para el agua de dilucin
NOTA: ESTA SOLUCIN SE PREPARA AL MENOS MEDIA HORA ANTES DE
QUE EMPIECE LA PRCTICA
Bomba de vaco, o pecera o parrilla de agitacin con agitador
magntico.
4 pipetas graduadas de 10 ml.
1 garrafn de 10 L para airear el agua de dilucin.
Material por cada equipo
2 Botellas de incubacin para DBO 5 por cada muestra que se vaya a
analizar. Por cada muestra usar dos botellas, una botella extra para un
blanco de reactivos.
1 Botella de incubacin para DBO5 por cada testigo que se vaya a
analizar
1 pipeta graduada de 10 ml
1 probeta de 100 ml
3.2 REACTIVOS Y SOLUCIONES
Preparacin de reactivos para DBO5
1. Solucin tampn de fosfato: Disolver 8,5 g de KH 2PO4, 21,75 g de K2HPO4,
33,4 g de Na2HPO4 7H2O, y 1,7 g de NH4Cl en aproximadamente 500 mL
de agua destilada y diluir a 1 L. El pH debe ser 7,2 sin posteriores ajustes.
Si se presenta alguna seal de crecimiento biolgico, descartar este o
cualquiera de los otros reactivos.
2. Solucin de sulfato de magnesio: Disolver 22,5 g de MgSO 7H2O en agua
destilada y diluir a 1 L.

3. Solucin de cloruro de calcio: Disolver 27,5 g de CaCl 2 en agua destilada y

diluir a 1L.
4. Solucin de cloruro frrico: Disolver 0,25g de FeCl 3 6H2O en agua
destilada, diluir a 1L.
5. Soluciones cida y alcalina, 1 N, para neutralizacin de muestras custicas
o cidas (en caso de que el agua muestreada este cida o alcalina).
6. Solucin de sulfito de sodio: Disolver 1,575 g de Na2SO 3en 1000 ml de
agua destilada. Esta solucin no es estable y se debe preparar diariamente.
7. Solucin de cloruro de amonio: Disolver 1,15 g de NH 4Cl en 500 ml de agua
destilada, ajustar el pH a 7,2 con solucin de NaOH, y diluir a 1 L. La
solucin contiene 0,3 mg de N/ml.
4. DESARROLLO EXPERIMENTAL
4.1. Procedimiento.
Determinar el agua de dilucin necesaria para la prctica a partir de la siguiente
ecuacin:
Agua de dilucin necesaria (ml) = (No. De muestras + 1 blanco) x 2Frascos x
300ml
Agregar por cada litro de agua de dilucin 1 ml de cada una de las siguientes
soluciones
1. Regulador de fosfatos pH 7.2,
2. MgSO4
3. CaCl2
4. FeCl3.
El agua de dilucin se debe airear durante 30 minutos con bombas o 45 minutos
con agitador magntico.
b) Pretratamiento de la Muestra
1. Si la muestra ha sido clorada, simbrese el agua de dilucin.
2. Muestras sobresaturadas con OD.- En aguas fras o en aguas donde se
produce la fotosntesis, es posible encontrar muestras que contienen ms de 9 mg
OD/L a 20C., calentar la muestra aproximadamente a 20 +1C en frascos
parcialmente llenos mientras se agitan con fuerza o se airean con aire limpio.

Determinacin de la DBO5
No.
1
2
3

Anlisis
Oxgeno Disuelto inicial del blanco de reactivos
Oxgeno Disuelto inicial de la muestra
Oxgeno Disuelto despus de 5 das de incubacin del blanco de

reactivos
Oxgeno Disuelto despus de 5 das de incubacin de la muestra

5.- RESULTADOS