TRANSPORTE A TRAVES DE LA MEMBRANA

INTRODUCCIN
Las membranas celulares cumplen dos importantes funciones, la
primera es aislarse del ambiente en s misma, dndole el control
sobre las condiciones intracelulares, y la segunda es que ayudan a las
clulas a organizar rutas intracelulares en compartimientos sub
celulares diferenciados, incluyendo orgnulos. La separacin de los
procesos tambin requiere mecanismos especficos de transferencia
de molculas a travs de las membranas (Moyes).
Muchos procesos celulares dependen de la capacidad de mover
molculas a travs de las membranas. Las clulas deben ser capaces
de obtener nutrientes y expulsar productos finales a travs de sus
membranas plasmticas.
Todas las clulas animales deben ser capaces de mover iones
especficos a travs de su membrana plasmtica para controlar sus
propiedades inicas y osmticas (Schulte).
La membrana celular acta como barrera semipermeable impidiendo
la entrada de la mayor parte de molculas, dejando pasar
relativamente a otras (Brown y Goldstein)
La smosis se conoce al fenmeno de difusin de agua a travs de
una membrana semipermeable. La presin osmtica se define como
la presin hidrosttica necesaria para detener el flujo neto de agua a
travs de una membrana semipermeable que separa soluciones de
composicin diferente. La presin osmtica es una propiedad de
tipo coligativa, es decir, depende del nmero de partculas. As por
ejemplo una solucin de NaCl 0,5 M, si estuviera totalmente disociada
en Na+y Cl-, sera equivalente a una solucin de glucosa 1M.
Las soluciones hipertnicas son aquellas, que con referencias al
interior de la clula, contienen mayor cantidad de solutos (y por lo
tanto menor potencial de agua).
Las hipotnicas son aquellas, que en cambio contienen menor
cantidad de solutos (o, en otras palabras, mayor potencial de agua).
Las soluciones isotnicas tienen concentraciones equivalentes de
solutos y, en este caso, al existir igual cantidad de movimiento de
agua hacia y desde el exterior, el flujo neto es nulo.

En esta prctica tuvimos el objetivo principal de conocer cmo se

lleva a cabo el transporte de sustancias a travs de la membrana, as
como tambin observar y tomar nota a las reacciones y respuestas de
eritrocitos a diferentes soluciones hipertnicas, isotnicas e
hipotnicas.

MATERIALES Y MTODOS:

En esta prctica de laboratorio se realizaron dos pruebas, la primera

consista en comprobar el transporte o pase de sustancias a travs de
la membrana de un buche de pollo, y la segunda prueba consista en
observar y tomar datos de los efectos osmticos observados en
sangre humana (eritrocitos).

Prueba de Difusin
Para la primera prueba, seleccionamos uno de los mejores buches de
pollo (buche n1), con una tijera procedimos a cortar uno de los
extremos del buche para poder introducir mediante una pipeta de 10
ml, 10 ml de agua destilada y con una pipeta de Pasteur, 3 gotas de
fenolftalena dentro del buche, luego amarramos el extremo cortado
con pabilo, y se agito el buche con la finalidad de mezclar los lquidos.
Luego en un vaso de precipitacin de capacidad de 500 ml, se llen
agua de cao a una capacidad de 200 ml, se agreg con una pipeta
de 10 ml, 10 ml de NaOH 1 M y se mezcl estas sustancias, moviendo
el vaso de precipitacin en forma circular.
El paso siguiente fue amarrar con pabilo los extremos del buche a una
varilla agitadora de vidrio, la cual fue posteriormente colocada sobre
el vaso de precipitacin de 500 ml, de tal manera que el buche quedo
sumergido parcialmente en la solucin dentro del vaso de
precipitacin, se dej reposar por un tiempo aproximado de 30 min.
Para ver las reacciones.
Para la segunda prueba se seleccion el siguiente buche de pollo
(buche n2), al cual se le hizo un corte en un extremo mediante una
tijera, y se introdujo mediante una pipeta de 10ml, 10 ml de almidn
al 1 %, luego se procedi a amarrar el extremo cortado con pabilo.
Luego en un vaso de precipitacin de 500 ml, se llen 200 ml de agua
de cao, y mediante una pipeta de Pasteur se agreg 20 gotas de

lugol, se procedi a mover el vaso con la finalidad de mezclar las

soluciones.
Al igual que en la primera prueba se procedi a amarrar los extremos
del buche de pollo a una varilla mezcladora de vidrio y colocarla sobre
el vaso de precipitacin de tal manera que el buche quede
parcialmente sumergido en la solucin.

Prueba
de
eritrocitos)

Osmosis

(Permeabilidad

en

En esta prueba se extrajo una muestra de sangre a un compaero de

estudio, para ello se us una aguja descartable #20 x 1 ,
previamente se prepar un frasco pequeo con heparina, en el cual
fue introducida la muestra sangunea y fue agitado durante unos 3
minutos.
Luego se rotulo 4 tubos de ensayos con 0.2 % de NaCl, 0.9 % de NaCl,
1.4 % de NaCl y H2O destilada y fueron colocados en una gradilla de
metal.
Luego mediante una pipeta de 10 ml se verti 10 ml de agua
destilada en un matraz de capacidad de 100 ml. Se repiti este
procedimiento 2 veces ms, con la finalidad de tener 3 matraces
listos para preparar las soluciones con sus concentraciones
correspondientes.
Luego se procedi al pesado de NaCl, para lo cual usamos una
balanza milimtrica, y sobre un papel pesamos 0.02, 0.09 y 0.14
gramos de NaCl, y se verti sobre sus matraces correspondientes.
Luego con una varilla mezcladora de vidrio se mezclaron cada una de
las soluciones.
Con una pipeta de 1 ml, se coloc 1 ml de sangre en cada uno de los
4 tubos de ensayo previamente rotulados, y mediante 4 pipetas de 2
ml, se verti 0.4 ml de cada solucin preparada y agua destilada en
cada tubo de ensayo segn su concentracin en el rotulado.
Luego mediante una pipeta de Pasteur colocamos una gota de sangre
en un portaobjetos y enseguida se coloc un cubreobjetos sobre la

gota, e inmediatamente se observ la muestra en un microscopio con

un aumento de 10x y luego de 40x.
Este mismo procedimiento se llev a cabo para las 4 soluciones
preparadas en los tubos de ensayo, durante este procedimiento se
fue observando una por una las soluciones conforme se fue
preparando las muestras, ya que la evaporacin del agua afecta la
osmolaridad de la solucin alterando los resultados.

RESULTADOS
Prueba de difusin
Para el buche n1, al cabo de unos 15 minutos observamos que la
solucin dentro del buche tomo un color rosado, esto fue porque el
buche de pollo actu como membrana selectiva permitiendo el paso
de iones Na+ que se encontraban en la solucin externa al buche,
esta solucin contena NaCl y agua de cao, el NaCl se disocio en sus
partculas gracias al agua y mediante protenas presentes en el buche
permiti el paso dentro del buche, cambiando el pH dentro y
permitiendo la accin de la fenolftalena, la fenolftalena es un
indicador de pH, que en soluciones cidas permanece incoloro, pero
en soluciones bsicas tiene el color rosado.
Para el buche n2, no se observaron cambios en la coloracin de
sustancias dentro o fuera del buche, y esto fue porque el almidn que
estaba dentro del buche no pudo pasar a travs de la membrana
como molcula en s, si no, pas como partculas de glucosa, y el
lugol no reacciona con azucares simples como la Glucosa.

Prueba de Osmosis (Permeabilidad en eritrocitos)

Para esta prueba realiza en laboratorio expondremos los resultados
en la siguiente tabla.

FROTIS

DIBUJE LO
OBSERVADO

MORFOLOGIA
DE
ERITROCITOS

SANGRE
SOLA

Tenan formas
ovaladas,
aplanadas,
unas juntas a
otras formando
filas.

ERITROCIT
OS
EXPUESTO
SA
SOLUCION
ISOTONICA
(0.9 %
NaCl)

Tenan formas
redondeadas,
distribuidos
casi
parcialmente
en toda la
muestra.

ERITROCIT
OS
EXPUESTO
SA
SOLUCION
HIPOTONI
CA (0.2 %
NaCl)

ERITROCIT
OS
EXPUESTO
SA
SOLUCION
HIPERTONI
CA

A QUE ATRIBUYE
ESTA
MORFOLOGIA?
Porque carecen de
ncleo y
mitocondrias, y
este diseo es
ptimo para el
intercambio de
oxigeno con el
medio que lo
rodea.
Se debe a que la
concentracin de
NaCl dentro del
eritrocito es de 0.9
%, igual al de la
solucin expuesta,
es por eso que la
forma del eritrocito
se mantuvo normal
ya que no existi
flujo de agua.

Se hincho debido a
que los solutos
Tenan formas
(NaCl) dentro del
redondeadas,
eritrocito eran
ms grandes,
mayores que los de
hinchadas,
fuera del eritrocito,
alguna con
jalando agua
presencia de
dentro del
una abertura,
eritrocito y
todas muy
permitiendo que se
juntas.
hincharan, alguna
reventaba.
Tenan formas
En este caso fue al
similares al de
revs, los
las pasas, todas
eritrocitos tenan
juntas.
menor
concentracin de
soluto que la
solucin fuera del

(1.4 %
NaCl)

ERITROCIT
OS
EXPUESTO
S A AGUA
DESTILAD
A

Tenan formas
redondeadas,
grandes,
hinchadas,
algunas con
presencia de
una abertura.

eritrocito, por tanto

existi un flujo de
agua del eritrocito
hacia fuera del
eritrocito,
causando que
estos queden con
forma de pasas.
Este caso fue
similar al del medio
hipotnico, ya que
fuera del eritrocito
haba menor
concentracin de
soluto que dentro
del eritrocito,
captando agua, y
permitiendo la
forma hinchada de
los eritrocitos.

DISCUSIN

Durante las pruebas de difusin, los resultados dieron positivo a

lo expuesto por Brown y Goldstein donde nos indican que la
membrana celular acta como barrera semipermeable
impidiendo la entrada de la mayor parte de molculas, dejando
pasar relativamente a otras, esto se cumple con ambos buches,

ya que en el primer buche solo permite el paso de iones Na+

por medio de protenas en la membrana y en el segundo buche
ya que no permiti pasar una molcula grande como el
almidn, sino sus molculas ms simples como la glucosa.

Durante la realizacin de la prueba de difusin con el buche n

1, luego de esperar durante uno 30 minutos, y observar la
reaccin, comenz a salir un poco de la solucin de fenolftalena
a fuera del buche, esto no tuvo mayor percance ya que
observamos los resultados antes de este incidente.

En la prueba de Permeabilidad de Eritrocitos, durante la

preparacin de soluciones con el NaCl, se desconoca la
concentracin de este, ya que hubo percances en cuanto a la
obtencin del NaCl, destinado para la prctica. Sin ms
prembulos, los resultados fueron obtenidos segn lo previsto.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

http://www.biologia.edu.ar/cel_euca/transporte.htm
https://es.wikipedia.org/wiki/Membrana
https://es.wikipedia.org/wiki/Eritrocito
Donald Voet, (2007), Fundamentos de Bioquimica: la vida a
nivel molecular, 2da edicin, pg. 634.
Cristopher D. Moyes y Patricia M. Schulte, (2007), Principios de
Fisiologa Animal, 1ra edicin, pg. 86, 89, 92 y 93.

ANEXOS

FOTO 1. Buche
colocado dentro
precipitacin.

n 1 recin
del vaso de

FOTO 2. Buche n 1, apreciando los resultados.

FOTO 3. Buche n2 apreciando resultados.

FOTO 4. Resultados de la primera prueba de difusin.

FOTO 5. Obtencin de muestra sangunea.

FOTO 6. Vertiendo 1 ml de sangre en cada tubo de ensayo

rotulado.

FOTO 7. Muestras sanguneas listas para revisar al

microscopio.

FOTO 8. Vista a microscopio (40x) de sangre.

FOTO 9. Vista al microscopio (40x) de sangre con solucin

isotnica.

FOTO 10. Vista al microscopio (40x) de sangre con solucin

hipotnica.

FOTO 11. Vista al microscopio (40x) de sangre con solucin

hipertnica.

FOTO 12. Vista al microscopio (40x) de sangre con agua

destilada.