Conceptos asociados al control del

crecimiento microbiano

Definiciones

Antisepsia
Prevencin de una infeccin o sepsis de tejidos vivos.
Antispticos
Agentes qumicos aplicados sobre tejidos vivos para la prevencin e inhibicin
del crecimiento de agentes patgenos.
Desinfeccin
Destruccin inhibicin o eliminacin de organismos patgenos.
Desinfectante
Agente, habitualmente qumico, usado para desinfectar. Generalmente sobre
objetos inanimados

Control del crecimiento

microbiano

Unidad II:
Fisiologa Bacteriana

Esterilizacin
Destruccin o eliminacin de todas las clulas vivas y/o esporas viables y/o virus
y/o viroides y/o priones de un objeto o hbitat.
Esterilizacin comercial
Tratamiento trmico suficiente para inactivar esporas de Clostridium botulium en
alimentos enlatados.
Saneamiento
Reduccin de la poblacin microbiana hasta niveles que se consideran seguros
para la salud pblica.

Microbiologa e Inmunologa.
Ingeniera en Biotecnologa
Departamento de Biotecnologa

Definiciones

Conceptos asociados al control del

crecimiento microbiano

Agentes antimicrobianos:
Agentes que eliminan a los microorganismos o que
inhiben su crecimiento:
El sufijo cida se emplea para agentes que matan:
germicida (elimina patgenos) y algunos no
patgenos pero no necesariamente endosporas).
Incluye bactericidas, fungicidas, algicidas y viricidas.
Control del crecimiento
microbiano

El sufijo esttico se emplea para agentes que

inhiben el crecimiento (Bacteriosttico, fungisttico).

Unidad II:
Fisiologa Bacteriana

Microbiologa e Inmunologa.
Ingeniera en Biotecnologa
Departamento de Biotecnologa

Agentes
antimicrobianos

Condiciones que afectan la efectividad

de los agentes antimicrobianos

Tamao de la poblacin.
Composicin de la poblacin microbiana.
Concentracin e intensidad de los agentes empleados.

Control del crecimiento

microbiano

Unidad II:
Fisiologa Bacteriana

Tiempo de la exposicin.

Temperatura.

Ambiente:
pH
Presencia de compuestos orgnicos
viscosidad

Microbiologa e Inmunologa.
Ingeniera en Biotecnologa
Departamento de Biotecnologa

Mtodos fsicos usados para el control

del crecimiento microbiano

Temperatura
Temperatura
Calor: denaturacin de macromolculas
La muerte por calor es una funcin
exponencial:
dN/dT = -KTN
En cada momento muere una fraccin
constante (KT) de la poblacin

La muerte se debe a la destruccin o

inactivacin irreversible
de
una
molcula
o
estructura
esencial:
protenas, ADN o membranas

Log D

D120 = 110

Z = 10

D110= 1100 min

Temperatura

Definiciones

Temperatura
Punto de muerte trmica: menor temperatura a la cual todos los microorganismos en un cultivo
lquido son eliminados en 10 minutos

Tiempo de muerte trmica: menor perodo de tiempo en el cual todos los microorganismos en
un cultivo lquido son eliminados a una temperatura determinada
Termodricos: capaces de sobrevivir a temperaturas elevadas

Tiempo de reduccin
decimal (D)
Tiempo para reducir al 10% el
nmero de microorganismos a
una temperatura determinada

Temperatura de reduccin
decimal Z
Incremento de temperatura
para reducir el valor de
D a un 10%

Mtodos fsicos usados para el control

del crecimiento microbiano

Agentes qumicos para el control

del crecimiento microbiano

Desinfectantes: Agentes qumicos usado sobre objetos

inanimados.

Antispticos: Agentes qumicos que puede aplicarse sobre

tejidos vivos

Quimioterapeticos: Un agente antimicrobiano que puede

utilizarse internamente

Caractersticas que debe presentar un agentes

qumicos

Idealmente los agentes deberan ser:

Caractersticas que debe presentar un agentes

qumicos

de bajo costo

de rpida accin y persistentes

estable durante el almacenamiento
Ser efectivo en contra de todos los microorganismos,
pero inocuo para humanos y animales
activo en presencia de materia orgnica

Mecanismos de accin

Desnaturalizacin de protenas: prdida de funcin

Hidrlisis
Oxidacin
Accin sobre tomos o grupos qumicos

Dao de la membrana celular: prdida de

contenido celular

Accin sobre otros componentes celulares

Interfieren en la divisin celular
Inhibicin fermentacin

Factores que afectan la efectividad de un agente

qumico

Nmero de microorganismos
(tamao de poblacin)
Susceptibilidad / resistencia de
los microorganismos (esporas y
virus son ms resistentes)
Concentracin del agente
Presencia de materia orgnica
Temperatura
pH

Efectividad de los agentes qumicos

De alto nivel, mata a todos los patgenos, incluyendo

endosporas
De nivel intermedio, mata mayora de patgenos no
afecta las endosporas
De bajo nivel, mata bacterias, hongos, protozoos, y
algunos virus

Agentes qumicos empleados para el

control del crecimiento microbiano

Agentes qumicos empleados para el

control del crecimiento microbiano

Coeficiente de fenol
Compara eficacia de agentes qumicos con fenol
Se preparan diluciones del agente qumico y de fenol
Se determina que dilucin de cada uno mata las bacterias despus de 10
min, pero no despus de 5 min
coeficiente de fenol = dilution del AQ / dilucin del fenol

Mtodo de difusin en disco (Kirby-Bauer)

Se disemina la bacteria con trula

agentes qumicos en los discos
colocados en agar
Se incuba, se mide la zona de
inhibicin
Se determina si el microorganismo
es susceptible o resistente al agente
qumico

Antibiticos

El origen de la palabra
antibitico es griego: anti
significa contra, y bios,
vida.
Los antibacterianos son
sustancias naturales,
semisintticas o sintticas,
que a concentraciones
bajas, inhiben el
crecimiento o provocan la
muerte de las bacterias

Relacin entre el crecimiento y formacin de

productos de inters industrial
Azcar

Clulas

Metabolito
primario

Azcar

Clulas

Metabolito
Primario

Metabolito
secundario

Antibiticos

Tener un apropiado espectro de

accin.

No ser toxico para el huesped y

ser bien tolerado.

Idealmente no desarrollar
resistencia.

Antibitico ideal

Profilaticos / tratamiento

10

Efectos de la accin de los antibiticos

Total cell count

Log Cell #

Viable cell count

Time

Mtodos para determinar la susceptibilidad a los

antibiticos
Mtodo de Kirby-Bauer

Difusin depende de:

Concentracin
Peso molecular
Solubiliad en agua
pH

Zonas de inhibicin (actividad antimicrobiana) depende:

pH
Componentes del medio
Estabilidad de la droga
Tamao del inoculo
Tiempo de incubacin
Actividad metablica de microorganismos
http://www.youtube.com/watch?v=O5NwOGazOAA

Staphylococcus aureus

Pseudomonas aeruginosa

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Mtodos para determinar la susceptibilidad a los

antibiticos
Concentracin inhibitoria mnima

(CIM)

Dilucin en tubos

S. aureus y tetraciclina

Mtodos para determinar la susceptibilidad a los

antibiticos
Concentracin inhibitoria mnima (CIM)

E test

12

Blancos de accin de los antibiticos

Mecanismos de accin de agentes antimicrobianos

13

Factores que promueven la resistencia a los

antibiticos

Exposicin a niveles sub-ptimos

Exposicin a microorganismos que portan genes de resistencia
Prescripcin no seguida correctamente
Empleo de antibiticos para infecciones virales
Administracin de antibiticos sin supervisin medica.
Diseminacin de microoorganismos resistentes en hospitales debido a
la perdida de higiene.

Bases genticas de la resistencia

Resistencia por mutaciones espontneas

Genes estructurales: extensin del espectro de actividad enzimtica,

modificacin del sitio blanco, defectos de transporte

14

Bases genticas de la resistencia

Adquisicin de genes exgenos

Bases genticas de la resistencia

Adquisicin de genes de resistencia

15

Resumen de mecanismos de resistencia

para diferentes antibiticos

Mecanismo de resistencia a los antibiticos

Permeabilidad alterada
tetracycline

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Mecanismo de resistencia a los antibiticos

Inactivacin
-lactamasa
Chloramphenicol

Mecanismo de resistencia a los antibiticos

Sitio blanco alterado

Protenas de unin a la
penicilina
RNA polimerasa
(rifampicina)
30S ribosoma
(streptomicina)

17

18