Microbiologia Celular

3 parte

Membranas biolgicas
Composio, estrutura e funo

General structure of the biological membranes

(Phospholipid bilayer)

Membrana citoplasmtica de uma bactria

Componentes

% peso seco
da membrana

Lpidos
Neutros
Fosfolpidos

9
28

Protenas
Glicolpidos

50
12

Semelhante em organismos
eucariotas e procariotas
(excepo: algumas bactrias do
domnio Archaea).
Triglicrido (lpido neutro)

Funes principais da membrana citoplasmtica

A bicamada de fosfolpidos

Fosfolpidos
molculas
anfipticas

Permeabilidade da bicamada lipdica das membranas biolgicas a molculas

Difuso
passiva

Maior parte dos

- Nutrientes
- metabolitos
essenciais

(In Lodish et al., Molecular Cell Biology, 2004)

Difuso passiva atravs da bicamada lipdica

- No-especfico
- A favor do gradiente de concentrao do soluto
- Moleculas pequenas; compostos lipoflicos (apolares / hidrfobos)

[soluto] alta
ext

Velocidade de
entrada
do soluto

[soluto]int baixa

RELEVNCIA DO CARCTER LIPOFLICO DE COMPOSTOS

EM TOXICOLOGIA AMBIENTAL
log P ou log Kow - medida quantitativa da
lipofilicidade de compostos
- coeficiente de Hansch
Kow =

[ X ] na fase octanol
[ X ] na fase aquosa

http://en.wikipedia.org/wiki/Partition_coefficient

Previso da capacidade de bioconcentrao e bioacumulao dos compostos em clulas

de microrganismos e em clulas de tecidos de animais ou de plantas
GRAU DE TOXICIDADE potencial do composto
Composto

Cl

Cl

Log P

Factor de
acumulao nas
clulas (aproximado)

1,46

1000

4,20

13000

Pentaclorobenzeno (pesticida)

5,69

260000

DDT (pesticida)

6,0

350000

fenol (solvente)
1,2,3 triclorobenzeno
(solvente)

Cl
Cl

Pentachlorobenzene

DDT

Funes principais da membrana citoplasmtica

Polar and hydrophilic

end

Long, nonpolar,
hydrophobic
fatty-acid chains

Ex. fosfolpido
cido gordo

cido gordo

saturado

(mono)insaturado

Temperaturas de transio de fase dos cidos gordos (a.g.)

a.g. saturados

Fluidez

>

a.g. (mono)insaturados

>

a.g. poli-insaturados

Funo

Membranes composition and adaptation to

Cold environments
(psychrophilic microorganisms)
Amostra de gelo mar Antrtico

Higher content in
unsaturated fatty acids
(poli- and mono-unsaturated)

Snow algae
Chlamydomonas nivalis
(red-pigmented spores)

Carotenoid pigments

Membranes composition and adaptation to

Hot environments
(thermophylic microorganisms)

Higher content in
saturated
fatty acids
Yellowstone National park (USA)

Fitanilo cadeia aliftica ramificada, composta

por unidades repetidas do hidrocarboneto
isopreno (C5)

Lipids and membrane structure

in some hyperthermophilic
bacteria of the domain Archaea

(Madigan et al., Brock Biology of Microorganisms, 10th Ed)

Diferences on the chemical bonds in lipids between

the organisms in the 3 domains
Bacteria and Eukarya
R fatty acid
Ester linkage between
glycerol and the
fatty acid side chains (R)

Archaea
R aliphatic lateral chain
Ether linkage between the glycerol molecule
and the aliphatic lateral chain (R) composed
of isoprene.

Archaea
Isoprene

five carbon
hydrocarbon; repeating unit
in R

Other membrane lipids

important for an
adequate fluidity

Regio hidrofbica

Esterides,
em membranas de clulas eucariticas.
(p.ex. o ergosterol em clulas de fungos,
ou o colesterol em clulas animais).
Regio
hidroflica

Hopanides,
em membranas de procariotas.
Regio hidroflica

Regio hidrofbica

Estrutura planar rigida conferem estabilidade, alguma rigidez

Estrutura das membranas biolgicas Modelo do mosaico fluido

Hopanide
(em procariotas)
Esteride
(em eucariotas)

Prescott, Harley & Klein, Microbiology, 5th edition,Mc GrawHill, 2002

PROTENAS MEMBRANARES
Protenas perifricas
Protenas integrais

Transporte transmembranar
transporte de solutos atravs da membrana
plasmtica

Transmembrane transport

Carrier-mediated transport systems

(involve the activity of enzymes: permeases or carriers)

- Facilitated difusion (difuso facilitada)

Facilitated difusion

Prescott, Harley & Klein, Microbiology, 5th edition,Mc GrawHill, 2002

Involves a membrane spanning protein (Permease; carrier) that suffers a

conformational modification during the transport of the solute.

Caractersticas gerais dos sistemas de transporte

de solutos mediados por permeases
Vmx
- Cintica de saturao
- Especificidade
V mx
- Induo

Ks

(external)

Transmembrane transport
Carrier-mediated transport systems
(involve the activity of enzymes: permeases or carriers)

Facilitated difusion (difuso facilitada)

Active transport (transporte activo)

Group translocation (Translocao de grupo)

WHY?
Cells must have mechanisms for accumulating nutrients to
higher levels than those in nature and at high rates in order to
meet their metabolic and growth needs.
This is obtained with a quite large diversity of transport
systems.

Active transport
Exemplo de transportador activo primrio
Transportadores do tipo ABC (ATP binding cassette-type transport system)
Aminocidos, acares, cidos orgnicos
(periplasmic protein)

bactria Gram negativa

Prescott, Harley & Klein, Microbiology, 5th edition,Mc GrawHill, 2002

Exemplos de sistemas
de transporte activo
secundrio

Nestes exemplos,
a energia
proveniente de
um gradiente
electroqumico de
protes (H+)
previamente formado

(Brock biology of microorganisms, McGraw-Hill, 11th ed)

Example.
Secondary active
transport in a bacteria
like
Escherichia coli
(viewing the
transportation of a
sugar molecule into
the cell)
Prescott, Harley & Klein, Microbiology, th edition,Mc GrawHill, 2002, Fig. 5.4

ANTIPORT
H+
M (toxic metabolite,
drug)

H+
M
M
(ex.toxic metabolite,
drug)

ATP

ABC

S+

ADP + Pi

UNIPORT
(p.ex. K+)

S+
H+

Facilitated
difusion

H+

S
(Ex. glucose)

+
-

ADP + Pi

H+

H+

Proton-motive force

pHext ~5-6

ABC

H+

H+

H+

ATP

S (maltose)
S (amino acids)
etc.

Examples of
transport systems
in the plasma membrane
of an eukaryotic
microorganism
(the yeast Saccharomyces
cerevisiae)

pHint ~ 7

SYMPORT

H+

H+

H+-ATPase
(H+-pump; Bomba de protes)

Group translocation (Translocao de grupo)

Molcula modificada quimicamente durante o transporte transmembranar

Consome energia

Sistema PTS (fosfoenolpiruvato-fosfotransferase), em bactrias

Transporte de glucose em algumas

bactrias (ex. Escherichia coli)
(Brock biology of microorganisms, McGraw-Hill, 11th ed)

Transporte de Ferro

Exemplos de siderforos produzidos por

diversos fungos

Quase todos os microrganismos

necessitam de ferro
(nos citocromos e diversas enzimas)

O io frrico, Fe3+, tem baixa

solubilidade em meio aquoso e
est, pois, pouco disponvel
para ser transportado para
o interior da clula

Os microrganismos produzem e
excretam siderforos para captar
esses ies por complexao

Os siderforos produzidos por

algumas bactrias so importantes
factores de virulncia

Escherichia coli

Prescott, Harley & Klein, Microbiology, 5th edition,Mc GrawHill, 2002

Diferenas principais entre os

organismos dos 3 domnios

Diferenas fisiolgicas entre os organismos dos 3 domnios

Diversidade metablica

Diferenas morfolgicas e genticas entre os organismos dos 3 domnios

Diferenas moleculares 3 domnios

NOTAS sobre
membranas biolgicas e
transporte transmembranar

Funes da membrana plasmtica

Separa a clula do seu meio ambiente

uma barreira com permeabilidade selectiva

(Previne a perda de metabolitos intracelulares essenciais e controla a entrada de
nutrientes e a sada de solutos (p.ex. compostos txicos) da clula)

Algumas molculas passam livremente atravs das membranas

para dentro e fora da clula.
Outras necessitam de sistemas de transporte mediado ou
catalizado por permeases (protenas transportadoras localizadas na
membrana)

onde se realizam processos metablicos essenciais, tais

como o transporte de electres e a fosforilao oxidativa,
que fazem parte da respirao ou da fotossntese
(em clulas de procariotas)

onde esto localizadas molculas receptoras envolvidas na

deteco e resposta a estmulos do meio ambiente

Difuso facilitada
semelhante difuso passiva, nos seguintes
aspectos:
A direco do movimento a favor do gradiente
de concentrao
movimento do soluto no depende do
fornecimento de energia
diferente da difuso passiva nos seguintes aspectos
essenciais:
Recorre a protenas transportadoras (permeases)
Basta haver um pequeno gradiente de concentrao para que
ocorra entrada de molculas
Em muitos microrganismos, serve para transportar glicerol,
acares, e aminocidos

Transporte activo

Envolve protenas transportadoras (permeases)

Observa-se uma cintica de saturao

um processo que gasta energia

A energia obtida com base em:
- hidrlise de 1 ou mais molculas de ATP
(sistemas de transporte activo primrio);
- um gradiente electroqumico de ies (p.ex. H+. Na+, K+)
previamente estabelecido
(sistemas de transporte activo secundrio)

Movimento faz-se contra o gradiente de concentrao da molcula

ocorre concentrao das molculas no interior da clula
( um processo acumulativo; permite assegurar taxas
metablicas elevadas)

Os siderforos so :
- Molculas de baixo peso molecular
- So sintetizadas e excretadas por bactrias e fungos
quando a concentrao de ferro no meio baixa
- Complexam o io frrico
- Existe uma protena receptora especfica na superfcie
da clula que reconhece esse complexo
-O complexo resultante transportado para a clula
-A composio qumica do siderforo difere consoante o
microrganismo em causa