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Proyecto de
Microbiologa II
Preparado por:
Mara vila
Ayline Blis
Mara Collins
David Garca
Profesor:
Alexis De La Cruz
II Semestre
2015
Introduccin
El suelo es uno de los ecosistemas ms complejos de la naturaleza y uno de los
hbitats ms diversos de la tierra: alberga una infinidad de organismos diferentes
que interactan entre s y contribuyen a los ciclos globales que hacen posible la
vida. No hay ningn lugar de la naturaleza con una mayor concentracin de
especies que los suelos; sin embargo, esta biodiversidad apenas se conoce al estar
bajo tierra y ser, en gran medida, invisible para el ojo humano. Estos
microorganismos, junto a los componentes de la microfauna, forman la llamada
microbiota del suelo. La actividad y diversidad de la microbiota condiciona la
fertilidad del suelo, la estabilidad y funcionamiento de ecosistemas naturales y los
agroecosistemas. La diversidad microbiana es esencial para garantizar los ciclos
de los nutrientes y los procesos de descomposicin del material vegetal en cualquier
ecosistema terrestre debido a los procesos biolgicos como la oxidacin, la
reduccin, la descomposicin de materia orgnica y la mineralizacin, as como las
interacciones interespecficas e intraespecficas que se establecen en el suelo. Por
lo tanto, el funcionamiento de los ecosistemas es gobernado por la dinmica
microbiana, la cual est influida directamente por los parmetros fsicos y qumicos
del suelo. Nuestros sistemas agrcolas tienen gran influencia sobre los organismos
del suelo, incluyendo sus actividades y su biodiversidad. Una disminucin del
nmero de especies vegetales con diferentes sistemas de races, de la cantidad y
calidad de sus residuos, o del contenido de materia orgnica del suelo, limita la
variedad de hbitats y alimentos para los organismos del suelo.
Objetivos
Medir la respiracin de la microbiota del suelo.
Observar como las diversas actividades que se realizan en un suelo pueden
afectar la diversidad y actividad microbiana.
Comparar la diversidad microbiana de tres tipos de suelo en base a las
actividades que en ellos se realicen.
Antecedentes
La primera aproximacin metodolgica para determinar la diversidad
bacteriana no cultivable en el suelo fue desarrollada por Torsvik y Goksoyr
a finales de la dcada de 1970 (Torsvik y vres, 2002), comparando la
tasa
de
reasociacin
un
equipo
formado
por investigadores
del Instituto
de
Justificacin
La importancia que hoy en da est adquiriendo la determinacin de la actividad
microbiana de suelos, mediante parmetros bioqumicos tales como las actividades
enzimticas de suelos, as como de aquellos relacionados con la biomasa
microbiana, es cada vez mayor en los estudios avanzados de la Ciencia del Suelo,
puesto que sin su ayuda sera imposible llegar a entender la funcionalidad de dicho
suelo; su medida dar idea de su actividad metablica, y esto es esencial para que
ese suelo realice sus funciones de manera correcta. La verdadera importancia de
los microorganismos en cuanto a su relacin con la calidad de un suelo, o con
procesos de degradacin o recuperacin del mismo, no es tanto conocer los tipos
de microorganismos que llevan a cabo funciones concretas, sino la actividad
microbiana en ese determinado ambiente. La actividad metablica es la
responsable en un suelo de procesos, por ejemplo, tan importantes como los de
mineralizacin y humificacin de su materia orgnica, lo cual incide sobre otra serie
de procesos en que se ven incluidos elementos fundamentales en el suelo (C, N, P
y S), as como todas las transformaciones en que interviene la biomasa microbiana
de dicho suelo. Su determinacin puede ser til en estudios que se lleven a cabo
sobre suelos naturales, donde los procesos microbianos, claves para su
conservacin y degradacin ambiental pueden monitorizarse a travs de
parmetros de la actividad metablica de dicho suelo. Tambin dichos parmetros
pueden resultar apropiados para estudios relativos a sistemas agrcolas modernos,
en particular cuando en dichos sistemas impera un manejo ecolgico y sostenible
del suelo. Adems de lo expuesto, la actividad metablica que muestre un suelo se
ver afectada por problemas de contaminacin y descontaminacin, siendo la
mencionada actividad un reflejo de la posibilidad de degradacin de compuestos
que pueden considerarse txicos para ese suelo, y que pueden haber sido
adicionados al mismo antropognicamente.
Marco Terico
El suelo no es una masa muerta o una mezcla de partculas y sustancias diversas,
sino ms bien una entidad viva con muy diferentes atributos y sujeta a la accin de
fuerzas fsicas, qumicas y biticas que continuamente estn cambiando. (Alzate R,
J.D.; Campio A, D. 2014).
Generalidades
Propiedades Fsicas del Suelo
Las propiedades fsicas del suelo determinan, en gran medida, la utilidad que se le
dar al suelo. La condicin fsica de un suelo determina la rigidez y la fuerza del
sostenimiento, la facilidad para la penetracin de races, la aireacin, la capacidad
de drenaje y de almacenamiento de agua, la plasticidad y la retencin de nutrientes.
Las propiedades del suelo, segn Fassbender y Bornemisza (1987), son las
siguientes:
*Textura
La textura representa el porcentaje en el que se encuentran los elementos que
constituyen el suelo: arena gruesa, arena media, arena fina, limo y arcilla.
*Porosidad
Dentro del espacio poroso se pueden distinguir macroporos y microporos. La
porosidad total, es la suma de macroporos y microporos. Las caractersticas del
espacio poroso, dependen de la textura y la estructura del suelo.
*Consistencia
La consistencia del suelo es usualmente definida como el trmino que designa las
manifestaciones de las fuerzas fsicas de cohesin y adhesin, actuando dentro del
suelo a varios contenidos de humedad.
*Aireacin y atmosfera
La respiracin aerbica de las races de las plantas implica una absorcin continua
de O2 y produccin de CO2. Los procesos metablicos de las races que crecen en
suelos bien drenados son detenidos casi inmediatamente si el intercambio de O2 y
CO2 es interrumpido.
Composicin Qumica del Suelo
Respecto a su composicin qumica, podremos encontrar componentes orgnicos
e inorgnicos.
Componentes orgnicos
Los componentes orgnicos son los compuestos de origen biolgico que se
encuentran en el suelo. La parte ms estable de la materia orgnica del suelo se
llama humus, que se puede definir como la fraccin ms o menos estable de la
materia orgnica del suelo, y que se obtiene despus que se ha descompuesto la
mayor parte de las sustancias vegetales o animales aadidas al suelo. La fraccin
orgnica del suelo tiene un papel importante, ya que regula los procesos qumicos
que all ocurren, influye sobre las caractersticas fsicas y es el centro de
aproximadamente todas las actividades biolgicas del suelo.
Componentes inorgnicos
Fassbender y Bornemisza dividen los componentes inorgnicos del suelo en:
*Minerales primarios
Son los componentes que no han sufrido cambios qumicos desde su formacin
inicial de la lava fundida o de otros procesos que originan rocas. Estos minerales se
encuentran principalmente en las fracciones ms gruesas del suelo.
*Minerales secundarios
Resultan de la descomposicin de los minerales primarios o de la recombinacin de
los productos que son consecuencia de ella. Estos minerales son con frecuencia de
pequeo tamao, del orden de las arcillas, y por ello se les llama tambin minerales
de arcilla
Microflora
Se considera a Sergui Vinogradski como el padre de la microbiologa del suelo. La
diversidad bacteriana puede ser definida como el nmero de especies o biotipos y
su abundancia relativa en un espacio y tiempo determinados dentro de una
comunidad. Esto incluye la diversidad de genes, hbitats, nichos y la diversidad
funcional de las poblaciones; de esta forma la diversidad puede considerarse un
atributo de la comunidad, relacionada con estabilidad, productividad y estructura
trfica (Stirling y Wilsey, 2001). La microflora es el grupo con la mayor diversidad de
especies dentro de la biota del suelo, componindose est por: bacterias, arqueas,
cianobacterias, hongos, actinomicetos, mixomicetos y levaduras. El nmero y tipo
de microorganismos presentes en el suelo dependen de diversos factores
ambientales, como lo son la disponibilidad de nutrientes, la humedad, la
temperatura, el pH, la aireacin del suelo y adems, las prcticas que en el suelo
se realicen. La mayor parte de los microorganismos son hetertrofos, siendo
comunes los bacilos esporulados. Tambin se encuentran los actinomicetos y en la
rizosfera a los gneros Rhizobium y Pseudomonas.
Las
propiedades
Suelo agrcola
Es aquel que se utiliza en el mbito de la productividad para hacer referencia a un
determinado tipo de suelo que es apto para todo tipo de cultivos y plantaciones, es
decir, para la actividad agrcola o agricultura. El suelo agrcola debe ser en primer
lugar un suelo frtil que permita el crecimiento y desarrollo de diferentes tipos de
cultivo que sean luego cosechados y utilizados por el hombre, por lo cual tambin
debe ser apto por sus componentes para el ser humano. Las principales
caractersticas del suelo agrcola es que se encuentra en zonas de clima que
favorecen el desarrollo y crecimiento de cultivos, teniendo en cuenta principalmente
la variacin de precipitaciones, temperatura, vientos, periodicidad de sucesos como
fenmenos climticos (tormentas elctricas, vientos fuertes, etc.); por otra parte, el
suelo debe ser rico en nutrientes, tambin influye la pendiente del suelo, que para
el caso de suelos aptos para la agricultura debe ser igual o menor a 5%. Respecto
a la microflora del suelo agrcola, esta sin duda es esencial a la hora de evaluar
diversos parmetros, como por ejemplo la productividad de un suelo en base a su
actividad microbiana. Ferrero y Alarcn (2001) sealan que una de las lneas de
investigacin con mayor estudio en la agricultura es la fijacin biolgica del
nitrgeno atmosfrico (FBN), con especial nfasis en la simbiosis Rhizobiumleguminosa.
Suelo ganadero
El uso puramente ganadero ha sido el clsico en suelos sin aptitud agrcola, algo
prcticamente inexistente en los suelos que la poseen. La ganadera tambin puede
jugar un papel importante en el mantenimiento de la fertilidad del suelo, y a la postre,
el buen funcionamiento de la actividad microbiana. Esto es debido a que los
sistemas cerrados de granjas mixtas pueden renovar o reponer una fraccin
sustancial de los nutrientes del suelo, y por consiguiente reducir la necesidad de
aplicar fertilizantes inorgnicos. Otra de las tecnologas utilizadas en el manejo y
conservacin de los suelos en el mundo es la de los microorganismos benficos
(MB) o efectivos (ME) (Snchez et al. 2011), desarrollados en Japn por el Dr. Teruo
Higa en la dcada de 1980. Los efectos de los microorganismos en el suelo estn
enmarcados en el mejoramiento de las caractersticas fsicas y biolgicas y en la
supresin de enfermedades. Entre estos, segn Correa (2008), se pueden
mencionar:
-Efectos en las condiciones fsicas del suelo: mejoran la estructura y la agregacin
de las partculas del suelo, reducen su compactacin, incrementan los espacios
porosos y mejoran la infiltracin del agua.
-Efectos en la microbiologa del suelo: suprimen o controlan las poblaciones de
microorganismos patgenos que se desarrollan en el suelo; incrementan la
biodiversidad microbiana, lo que genera las condiciones necesarias para que los
microorganismos benficos nativos prosperen.
Suelo urbano
El suelo urbano es el que se ha planeado como tal, bien porque cuenta con todos
los servicios y dotaciones necesarios (carreteras y abastecimiento y evacuacin de
aguas y suministro de energa elctrica), bien porque se encuentra consolidado en
su mayor parte por la edificacin. Su diversidad y actividad microbiana. Para efecto
de este trabajo, la muestra se tom de una zona destinada a ser un complejo
residencial, y a la que ya se le ha removido la cobertura vegetal original.
Marco Metodolgico
Tipo de estudio: Explicativo experimental.
Metodologa
Fig.1 Lugares de recoleccin de las tierras
Suelo ganadero
Suelo de siembra
Suelo urbano
Con un colador se filtran las muestras de los suelos para que as estas se
homogenicen y tener una tierra ms suelta.
Erlenmeyer.
Tomamos 4 matraces de 500 g en los cuales se vierte en cada uno los 50 g de tierra
de los tres tipos de suelo, dejando el cuarto como control.
Fig.10 Titulacin
Diversidad microbiana
Fig. 12 Disolucin
Fig.13 Siembra
Tomamos 5 platos con agar mHPC y 5 con Chromatic Coliform. Tambin tomamos
5 Petrifilm de hongos y levaduras y se procede a sembrar de la disolucin 5 hacia
la disolucin 1. Se coloca 0.1 ml en los platos Petri con los agares y 1 ml en Petrifilm.
Los platos Petri de, tanto de hMPC como de Chromatic Coliform, fueron incubados
a 25C por 24 horas, mientras que los Petrifilms de hongos y levaduras fueron
incubados a 37C durante 7 das.
Resultados
Actividad microbiana:
Se evalu la actividad microbiana en base a la liberacin de CO 2, utilizando la
tcnica de la titulacin. Con los valores obtenidos, se aplic la siguiente frmula:
mgCO2= (B-V) NE
Siendo:
B: Volumen de titulacin del sistema control.
V: Volumen de titulacin de la muestra de suelo
N: Normalidad del HCl usado en la titulacin
E: Peso equivalente, siendo 22 en trminos de CO2
*Suelo ganadero:
mgCO2= (33,1 ml-32 ml) [(0,1 N) (22)]
mgCO2= 2,42 mgCO2/50 g * 4 das
*Suelo de siembra:
mgCO2= (33,1 ml-31 ml) [(0,1 N) (22)]
mgCO2= 4,62 mgCO2/50 g * 4 das
*Suelo urbano:
mgCO2= (33,1 ml-30,5 ml) [(0,1 N) (22)]
mgCO2= 5,72 mgCO2/50 g * 4 das
El suelo que present mayor cantidad de CO2 liberado fue el suelo urbano. La
comparacin de las tres actividades se observa en la siguiente grfica.
mgCO2
mgCO2
Suelo de Siembra
Suelo Ganadero
Suelo Urbano
Diversidad Microbiana
HETEROTROFOS
COLIFORMES
HONGOS Y
LEVADURAS
TIPOS DE SUELO
SIEMBRA
GANADERA
URBANO
10-1
Incontable
Incontable
Incontable
10-2
incontable
Incontable
10-3
6 UFC
68 UFC
10-4
4 UFC
3 UFC
10-5
10-1
Incontable
Incontable
Incontable
10-2
Incontable
5 UFC
Incontable
10-3
9 UFC
10-4
5 UFC
37 UFC
10-5
5 UFC
10-1
Incontable
Incontable
Incontable
10-2
36 UFC
Incontable
10-3
6 UFC
10-4
2 UFC
10-5
1 UFC
60
50
40
30
20
10
UFC
0
Suelo Agrcola
Suelo Ganadero
Suelo Urbano
Tipo de Suelo
Hetertrofos
Coliformes
Hongos y levaduras
Recuento Final
MICROORGANISMO
HETERTROFOS
COLIFORMES
HONGOS
LEVADURAS
SUELO
SIEMBRA
10-3 6 UFC
0 UFC
10-3 68 UFC
GANADERO
10-3 9 UFC
10-2 5 UFC
10-4 37 UFC
URBANO
10-2 36 UFC
10-3 6 UFC
0 UFC
UFC/g
MICROORGANISMO
HETERTROFOS
COLIFORMES
HONGOS
LEVADURAS
SUELO
SIEMBRA
0 UFC/g
GANADERO
URBANO
0 UFC/g
Discusin
De los tres tipos de suelos a evaluar, el suelo del entorno urbano tuvo la mayor
actividad microbiana y la mayor presencia de organismos hetertrofos. En cuanto a
los hetertrofos en suelo urbano, Pezzullo et al. (2012) realizaron estudios sobre la
presencia de bacterias mesfilas hetertrofas aerbicas en zonas urbanas de
Argentina, relacionndolas con factores como la mala disposicin de las aguas y las
variaciones climticas. El estudio evidenci la presencia de estos organismos en
entornos urbanos, con valores encontrados dentro de un rango de 1,0 x 104 a 2,7 x
107 UFC/g. Respecto al hecho de que la muestra de suelo urbana presentar mayor
mayor actividad que la muestra del suelo agrcola, que present la menor presencia
de hetertrofos, pero sin embargo present la segunda mayor actividad, esta podra
estar relacionada a los tratamientos no controlados con agroqumicos en que se
someten los cultivos, mermando la diversidad y actividad microbiana en suelos de
siembra. Adems, la ausencia de hongos y levaduras en el suelo urbano estara
relacionada a la prdida de las coberturas vegetales propias de estas reas,
relacionndose con lo dicho por Lloret et al. (2014), en donde sealaban un aumento
en la diversidad de bacterias frente a la diversidad de hongos en zonas con prdidas
o disminucin de las coberturas vegetales. En cuanto la diversidad de hongos en
los suelos agropecuarios (ganadero y de siembra), estos son de vital importancia
tanto como indicadores, como modificadores de las propiedades del suelo y del
pasto y dems coberturas vegetales. Snchez et al. (2011) proponen que la
inoculacin de hongos micorrzicos arbusculares (HMA) puede ser una va
econmica y ecolgicamente efectiva para mejorar la nutricin de los pastos. La
presencia de coliformes es esperada en un suelo de actividad ganadera, donde de
por s no representan muchas veces riesgo, pero en muchos lugares, por los
diversos tipos de suelo estos pueden difundir hacia las fuentes de agua subterrnea
y contaminar las mismas.
Conclusiones
Los hongos y levaduras se presentan en mayor proporcin en el suelo que
los hetertrofos y coliformes, siendo la mayor concentracin de hongos la del
suelo de ganadero con 3,7 x 105 UFC/g.
La presencia de bacterias hetertrofas en el suelo urbano y la baja proporcin
de hongos podran estar relacionadas a las prdidas de las coberturas
vegetales, segn lo dicho por Lloret et al. en 2014.
La inesperada baja actividad respiratoria en el suelo de siembra podra
deberse a tratamientos mal ejecutados con agroqumicos.
Las actividades humanas que se realizan en los suelos, adems de las
propiedades intrnsecas de los mismos influyen de manera directa en la
diversidad y actividad microbiana.
El seguimiento correcto de los protocolos de toma de muestra de suelo,
adems del correcto procesamiento de las mismas es crucial para realizar un
buen trabajo. Muestras tomadas a poca profundidad no mostrarn los
resultados esperados. Se recomienda la toma de la muestra a una
profundidad al menos de 30 cm (1 pie) y deben ser procesadas en el
laboratorio para efectos de la evaluacin de la actividad microbiana en el
menor tiempo posible.
Bibliografa
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