TRANSFORMACIN DE SLICE DE LA CENIZA DE CASCARILLA DE ARROZ

POR MTODOS BIOLGICOS

B. RESUMEN:
La ceniza de la cascarilla de arroz es un residuo agroindustrial con un contenido
de slice importante apto para la transformacin biolgica y posterior recuperacin.
En Colombia se generan alrededor de 0.6 Toneladas de cascarilla de arroz al ao
[1] las cuales en ocasiones, para reducir su volumen, se incineran quedando en
una ceniza.
En este proyecto se pretende aprovechar la cantidad de slice presente en la
ceniza de cascarilla de arroz biotransformandola del estado amorfo hidratado a
nanopartculas en solucin utilizando como microorganismo el hongo Fusarium
oxysporum. Para esto se caracterizar la ceniza, simultneamente se van a
optimizar los parmetros operacionales como el pH para el crecimiento del hongo.
Luego se encontraran las condiciones optimas para el bioproceso de conversin
de la slice con un diseo de experimento para optimizar los valores de pH,
composicin de las clulas del hongo, tamao de partcula de la ceniza y la
concentracin de esta en la solucin, caracterizando por ltimo el producto
obtenido para encontrar porcentajes de recuperacin de la slice y establecer
energas de interaccin. Se espera obtener una ceniza blanca con un alto
porcentaje de nanopartculas de slice cristalina biotransformadas.

C. DESCRIPCION DEL PROYECTO:

1. Planteamiento del Problema:
La cascarilla de arroz es el principal residuo resultante de la produccin agrcola
de granos y su disposicin final es un problema existente en pases productores
como Colombia. Segn encuestas reportadas por FEDEARROZ y realizadas por
el DANE, en Colombia se produjeron cerca de 2.4 millones de toneladas de arroz
en el ao 2008 [1]. Se estiman que por cada tonelada de arroz producida, cerca de
un 25 % es cascarilla de arroz [2]. Estudios realizados en 1996 estimaron que
cada ao se generan ms de 100 millones de toneladas de cscara de arroz en el
mundo [3].

Normalmente, para reducir el volumen de estos residuos se quema la cscara de

arroz, con el objetivo de intentar darle una utilidad econmica como energtico en
calderas de secado del propio arroz, como combustible o para la generacin de
energa elctrica, entre otros. Sin embargo, las distintas alternativas de quema de
cscara de arroz acarrean otro problema que es el destino final de la ceniza
producida [3]. Al ser sometida a calcinacin produce una cantidad de ceniza, entre
13 y 29% del peso inicial, la cual est compuesta principalmente por slice, 8797%, y menores cantidades de sales inorgnicas. Estas sales inorgnicas son
impurezas que pueden ser eliminadas utilizando reflujos en medios cidos [4]. La
slice es un material inorgnico utilizado comercialmente en resinas, tamices
moleculares, soportes de catalizadores, rellenos en los polmeros, as como en
aplicaciones biomdicas. La slice presente en la ceniza se encuentra en una
forma amorfa hidratada, similar a la presente en la mayora de las otras entidades
en la biosfera [5].

Estudios previos reportados por Arcos et al. en 2007, muestran que por medio de
hidrlisis con HCL combinado con altas temperaturas, se puede obtener a partir de
la cascarilla de arroz una ceniza blanca constituida principalmente de SiO 2 con un
tamao de partcula manomtrico [4].

Los mtodos qumicos como el sol-gel para la sntesis de xidos se realizan por
medio de la hidrlisis de complejos metlicos adecuados, bajo condiciones
extremas de pH y temperatura. Estudios reportados por Bansal et al. en 2005,
utilizaron mtodos biolgicos para la sntesis del oxido de titanio y las partculas de
slice, presente en la cascarilla de arroz. Se realizaron experimentos de
biotransformacin por medio del hongo Fusarium oxysporum y se comprob que el
hongo secreta protenas capaces de hidrolizar SiF 62- y TiF62- de la ceniza. Lo
anterior para buscar alternativas y mitigar las deficiencias de los mtodos
qumicos. [6]

2. Impacto esperado:

Obtener partculas de slice en solucin para posterior recuperacin con un

alto valor comercial por medio de una hidrlisis con protenas producidas
por el hongo Fusarium oxysporum. Se espera que el producto sea de fcil
recuperacin ya que actualmente la bioqumica esta siendo una alternativa

para el desarrollo de nuevas reas de produccin y como posible

reemplazo de procesos qumicos.

Se espera que la ceniza de la cascarilla de arroz como residuo

agroindustrial pueda ser mayormente aprovechada como alternativa para
los ingresos del sector arrocero.

Se espera obtener slice que pueda ser comercializada en sectores como la

construccin ayudando al desarrollo de nuevas tecnologas.

3. Estado del arte:

Las espigas de arroz generalmente estn constituidas por cuatro componentes
principales: el germen, el endospermo, que representa alrededor del 70% del
volumen del grano y constituye al final del proceso el producto denominado arroz
blanco, la cutcula o polvillo que alcanza un 6,8% en volumen en el grano de arroz
y la cscara o pajilla que constituye aproximadamente el 20% en peso del grano y
que es separado en el proceso de pilado formndose montaas de cascarilla al
costado de los molinos, lo que ocasiona problemas de espacio por la acumulacin
de este desecho [7].

Estudios realizados por Solarte, muestran que la ceniza de cascarilla de arroz se

puede adicionar en mezclas de concretos modificando las propiedades mecnicas
y de durabilidad de estos. Los resultados demuestran que la ceniza aumenta la
resistencia a la compresin y reduce la permeabilidad ante agentes agresivos
como el ion cloro, si se adicionan al concreto en partculas finamente molidas. [8].
Tambin se han realizado estudios sobre la utilizacin de la ceniza de cascarilla de
arroz como adicin puzolnica para reducir el impacto ambiental causado por la
produccin del cemento, permitiendo el reemplazo parcial de este en los
materiales cementcios. Las partculas de ceniza de cascarilla de arroz amorfas
incrementan notablemente el valor de las principales constantes reolgicas
medidas en pastas de cemento [9].

Normalmente, la cascarilla se incinera para reducir su volumen ya que como

combustible genera calor, debido a su valor calorfico [7]. Al ser sometida a
calcinacin produce una cantidad de ceniza entre 13 y 29% del peso inicial, la

cual est compuesta principalmente por slice, 87-97%, y pequeas cantidades de

sales inorgnicas. Estas sales inorgnicas son impurezas que pueden ser
eliminadas utilizando reflujo en medio cido. Adems, la cascarilla de arroz
contiene alrededor de un 85% de material orgnico conformado por celulosa,
lignina, D-xylose y pequeas cantidades de D-galactose [4].

El dixido de silicio es un compuesto de silicio y oxgeno, llamado comnmente

slice. Es uno de los componentes principales de la arena. Una de las formas en
que aparece naturalmente es el cuarzo. Si se encuentra en estado amorfo
constituye el palo y suele incluir un porcentaje del 4-9 % de agua. El dixido de
silicio se usa, entre otras cosas, para la fabricacin de vidrio, cermicas y
cemento[7].

Ahumada y Rodrguez en 2006 realizaron ensayos sobre mtodo de precipitacin

controlada para sintetizar silicatos de calcio. Determinaron las condiciones ptimas
de sntesis para obtener silicatos de calcio con una cierta composicin y
distribucin de tamao de partcula. Analizaron los fenmenos fisicoqumicos que
ocurren durante el proceso de sntesis y estudiaron el efecto de ciertos parmetros
del proceso tales como la concentracin de los precursores, naturaleza del
precipitante y la temperatura sobre las fases cristalinas que se obtienen al final del
proceso. Estudiaron la evolucin de las fases cristalinas del compuesto al ser
sometido a tratamientos trmicos; para ello utilizaron difraccin de rayos X (DRX).
Adems emplearon anlisis trmico (ATD/TG) para conocer el comportamiento del
slido ante tratamientos trmicos y Microscopia Electrnica de Transmisin (MET)
para determinar la morfologa y el tamao de las partculas sintetizadas [10].

En Colombia se realizaron estudios como el reportado por Cardona et al. en 2003,

en el cual estudian la obtencin y caracterizacin de carburo y nitruro de silicio a
partir de la cascarilla de arroz por medio de dos pirolisis de la cascarilla de arroz
obteniendo cenizas las cuales fueron procesadas tcnicamente para obtener los
compuestos de inters. Las muestras obtenidas se caracterizaron por difraccin
de Rayos X y por microscopia electrnica de barrido, confirmando la obtencin de
SiC y Si3N4, ambos con morfologa de whiskers [11].

Otro estudio realizado por Arcos et al. en 2007, describe la recuperacin de la

slice presente en la ceniza de cascarilla de arroz con hidrlisis qumica con HCL,

lo que se utiliza para eliminar impurezas como Fe, Na, K entre otros. Estos
ensayos se realizan con HCL 0.1M y temperaturas de 500 C, del cual se obtiene
una ceniza blanca constituida principalmente de SiO 2, con impurezas de hierro (p.
p. m.). Los resultados de este estudio muestran que en la parte externa de la
cascarilla se nuclea la slice, y el SiO 2 obtenido de la misma es amorfo, con un
valor de superficie especifica de 277m 2/g aproximadamente, morfologa no
definida y tamao nanomtrico[4].

En 2004, Bansal et al. realizaron un estudio sobre la biosntesis de nanopartculas

de zirconio con el hongo Fusarium oxysporum. Encontraron que el hongo secreta
protenas capaces de hidrolizar iones ZrF 62- extracelularmente del dixido de
zirconio a temperatura ambiente. El hongo es capaz de hidrolizar los precursores
de haluro de metal duro en condiciones de acidez. Por ltimo concluyeron que los
hongos como el Fusarium oxysporum son capaces de hidrolizar los complejos
metlicos que no se encuentran en su ciclo de crecimiento, mostrando una
promesa para el desarrollo, en particular en la sntesis a gran escala de xidos
metlicos [12].

El Fusarium oxysporum se trata de un hongo de distribucin universal. Se asla

como saprofito del suelo y de plantas (cereales, soja, algodn, pltanos, cebolla,
patatas, manzanas, etc.). Como fitopatgeno causa grandes prdidas econmicas.
Tiene una gran variedad morfolgica y sufre frecuentes mutaciones en cultivo,
apareciendo progresivamente ms micelio y desapareciendo las esporodoquias y
la coloracin. En APD presenta un crecimiento rpido: 50 mm en una semana. Al
principio la colonia es lisa y algodonosa. Con el tiempo toma un aspecto como el
fieltro, de color blanco o salmn plido, tindose de prpura en su zona central.
El reverso es prpura o azul oscuro. Produce un pigmento prpura-violeta que
difunde al medio. La esporodoquia, presente en algunas cepas, da una coloracin
crema anaranjada al cultivo [13].

Bansal et al. en 2005 determinaron que el hongo Fusarium oxysporum secreta

protenas catinicas capaces de hidrolizar SiF 62- y TiF62- extracelular para formar
slice y xido de titanio a temperatura ambiente en soluciones de K 2SiF6 y K2TiF6.
Como resultado de este estudio se formaron 0.77 mg de nanopartculas de slice
por gramo de biomasa hmeda de hongos y el rendimiento de las nanopartculas
de xido de titanio puro por cada gramo de biomasa hmeda se estim en 0,765
mg [6].

Otro estudio reportado por Bansal et al. en 2006 demostr que el hongo Fusarium
oxysporum es un excelente microorganismo para la biosntesis de nanopartculas
de metales y xidos de metales de sus sales precursoras. En este trabajo reportan
que a pesar de los estudios in vitro de diferentes macromolculas naturales o
sintticas, en este contexto, slo el sistema basado en Fusarium oxysporum fue
capaz de producir las estructuras de slice citado para las condiciones estudiadas
hasta esa fecha. Este estudio realiza la biotransformacin del estado natural de la
slice amorfa presente en la cascarilla de arroz a nanopartculas esfricas de slice
cristalina y su extraccin extracelular en medio acuoso y a temperatura ambiente.
La biotransformacin de slice se produce dentro de 1 da de reaccin de la
biomasa de hongos con la cscara de arroz. Esta transformacin se debe a las
protenas que libera el hongo es su proceso de crecimiento [5].

4. Objetivos:
- Objetivo General: Transformar la slice amorfo hidratada presente en la ceniza
de la cascarilla de arroz por mtodos biolgicos con Fusarium oxysporum.

- Objetivos Especficos:

Caracterizar la ceniza de la cascarilla de arroz fsica y qumicamente.

Optimizar los parmetros operacionales de crecimiento de las hifas del
hongo Fusarium oxysporum.
Encontrar los parmetros operaciones adecuados para el bioproceso de
conversin la slice amorfa presente en la ceniza de cascarilla de arroz con
el hongo fusarium oxysporum.
Caracterizar fsica y qumicamente el producto obtenido de la
biotransformacin.

5. Metodologa Propuesta:
5.1 Obtencin y caracterizacin de la Ceniza de la Cascarilla de Arroz:

La ceniza de la cascarilla de arroz ser proporcionada por el Grupo de

Investigacin Ambiental de la universidad Pontificia Bolivariana (GIA), la cual
proviene de un reactor de lecho fluidizado con cascarilla de arroz.
Se
caracterizar a partir de las siguientes pruebas por triplicado:

5.1.1 Granulometra

Se selecciona una serie de tamices adecuada, se pesa cada uno por separado y
luego se agrega al tamiz superior 200gr de la ceniza, se encajan, se tapan los
tamices y se montan en el Ro-Tap, dejndolo agitar durante 30 minutos. Luego se
toma cada tamiz y se pesa nuevamente con el material contenido.

5.1.2 Medida del Potencial Zeta

Las medidas del potencial zeta para la ceniza de cascarilla de arroz sern
determinadas por un equipo de electroforesis. Este equipo permite determinar el
valor del potencial zeta basado en la velocidad de la particula sometida a una
diferencia de voltaje entre dos electrodos. Las medidas del potencial zeta se harn
en funcin del pH del medio para la biotransformacin.

5.1.3 Microscopio electrnico de barrido

La microscopia electrnica de barrido usa electrones en lugar de luz para formar

una imagen. Tiene una gran profundidad de campo, la cual permite que se
enfoque a la vez una gran parte de la muestra. Tambin produce imgenes de alta
resolucin, que significa que caractersticas espacialmente cercanas en la muestra
pueden ser examinadas a una alta magnificacin. La preparacin de las muestras
es relativamente fcil pues la mayora de SEMs slo requieren que estas sean
conductoras. La muestra es recubierta con una capa de metal delgado, y es
barrida con electrones enviados desde un can. Un detector mide la cantidad de
electrones enviados que arroja la intensidad de la zona de muestra, siendo capaz
de mostrar figuras en tres dimensiones, proyectado en una imagen de TV. Su

resolucin est entre 3 y 20 nm, dependiendo del microscopio. Esta prueba ser
realizada en la Universidad de Santa Catarina en Brasil.

5.1.4 Difraccin de Rayos X

La difraccin de rayos X es uno de los fenmenos fsicos que se producen al

interaccionar un haz de rayos X, de una determinada longitud de onda, con una
sustancia cristalina. La difraccin de rayos X se basa en la dispersin coherente
del haz de rayos X por parte de la materia (se mantiene la longitud de onda de la
radiacin) y en la interferencia constructiva de las ondas que estn en fase y que
se dispersan en determinadas direcciones del espacio. La aplicacin fundamental
de la Difraccin de Rayos X es la identificacin cualitativa de la composicin
mineralgica de una muestra cristalina. Esta prueba ser realizada en la
Universidad de Santa Catarina en Brasil.

5.1.5 Fluorescencia de Rayos X

La tcnica de Fluorescencia de Rayos X consiste en la excitacin de una muestra

por una fuente de rayos X. Esta fuente excita los electrones de los elementos que
constituyen la muestra de tal manera que algunos de ellos abandonan sus niveles
orbitales originales. Posteriormente, otros electrones ocuparn los lugares dejados
por aquellos, emitindose un fotn con una energa caracterstica para cada
elemento. La concentracin de cada elemento se detecta midiendo la intensidad
de la energa asociada a cada transicin electrnica. Esta prueba ser realizada
en la Universidad de Santa Catarina en Brasil.

5.1.6 Emisin de Rayos X

Los rayos X son radiaciones electromagnticas cuya longitud de onda va desde

unos 10 nm hasta 0,001 nm (1 nm o nanmetro equivale a 10-9 m). Cuanto menor
es la longitud de onda de los rayos X, mayores son su energa y poder de
penetracin. Los rayos de mayor longitud de onda, cercanos a la banda
ultravioleta del espectro electromagntico, se conocen como rayos X blandos; los

de menor longitud de onda, que estn ms prximos a la zona de rayos gamma o

incluso se solapan con sta, se denominan rayos X duros. La muestra es
bombardeada por electrones acelerados, puede emitir rayos x siendo la longitud
de onda caracterstica del elemento; analizando estas longitudes de onda pueden
conocerse los elementos presentes. La muestra debe ser plana (seccin fina) y
recubierta de una capa de material conductivo. El anlisis realizado es cualitativo.
Esta prueba ser realizada en la Universidad de Santa Catarina en Brasil.

5.1.7 Espectroscopia Infrarrojo con transformada de Fourier (FTIR)

La espectroscopia infrarroja se basa en el hecho de que las molculas tienen

frecuencias a las cuales rotan y vibran, es decir, los movimientos de rotacin y
vibracin moleculares tienen niveles de energa discretos. Las frecuencias
resonantes o frecuencias vibracionales son determinados por la forma de las
superficies de energa potencial molecular. Para medir una muestra, un rayo de luz
infrarroja atraviesa la muestra, y se registra la cantidad de energa absorbida en
cada longitud de onda. Esto puede lograrse escaneando el espectro con un rayo
monocromtico, el cual cambia de longitud de onda a travs del tiempo, o usando
una transformada de Fourier para medir todas las longitudes de onda a la vez. A
partir de esto, se puede trazar un espectro de tranmitancia o absorbancia, el cual
muestra a cuales longitudes de onda la muestra absorbe el IR, y permite una
interpretacin de cuales enlaces estn presentes.

5.1.8 Angulo de Contacto

Para este caso se emplea el mtodo de la gota en reposo, que consiste en dejar
caer una pequea gota de solvente sobre la superficie del slido y a partir del tipo
de interaccin establecido, estimar el ngulo de contacto. Para estimar el ngulo
se emplea un equipo denominado medidor ptico de ngulo de contacto, el cual
consta de una cmara de alta velocidad que capta 50 cuadros por segundo. Al
caer la gota sobre la superficie la cmara graba un video, en el que se registra la
cada y estabilizacin de la gota sobre la superficie. A partir de este video que
equivale a diferentes fotos, se escoge una foto; sobre sta se establece una lnea
base y con la ayuda de un paquete o software, se extrae un perfil del ngulo de
contacto de la gota en el tiempo.

5.2 Cultivo del microorganismo

El micelio del hongo Fusarium oxysporum es inoculado en un Erlenmeyer de 500

ml que contienen 100 ml del medio de cultivo MGYP e incubado por 72 horas con
agitacin continua de 200 rpm y a 27 oC. Las condiciones de pH se varan para
encontrar el valor ptimo para el crecimiento.
5.3 Bioproceso de conversin

El proceso de biotransformacin se realiza en un Erlenmeyer de 500 ml con 100

ml de agua destilada y un contenido inicial de 10 gr de ceniza de cascarilla de
arroz con un tamao de partcula establecido lo cual se lleva a un autoclave. La
cantidad de ceniza y el tamao de partcula de la misma, sern un factor a
optimizar con un diseo de experimento. Luego la biomasa del hongo cultivado es
suspendida con agua destilada esterilizada y puesta en contacto con la ceniza de
la cascarilla de arroz. La cantidad de hongo en la mezcla as como el pH final de la
solucin, sern factores a optimizar por medio de un diseo de experimento. La
reaccin entre el hongo y la ceniza se lleva a cabo con agitacin constante de 200
rpm y a temperatura ambiente por un periodo de 24 horas. Durante este periodo
se toman muestras de la solucin en el tiempo a las cuales se les somete a
filtracin para separar los micelios del hongo y la ceniza de la parte acuosa. El
filtrado obtenido es tratado con fenol-cloroformo (1:1) y centrifugado a 6000 rpm
por 10 min para remover las protenas extracelulares del hongo libres en la
solucin acuosa. La solucin que contiene nanopartculas de slice es evaporada a
bajas presiones hasta tener un polvo, el cual se lleva a calcinacin a 400 oC
durante 2 horas.

5.4 Caracterizacin de la ceniza obtenida

Luego de la biotransformacin, se caracteriza el producto obtenido con las mismas

tcnicas con las que se caracteriz la ceniza de la cascarilla de arroz sin tratar.

7. Estrategia Comunicacin:
Para la comunicacin del desarrollo de esta investigacin se realizara la siguiente:

Ponencia en encuentro de semilleros de investigacin.

Publicacin de artculo dentro de la Universidad.

Entrega de una copia del trabajo de grado a la biblioteca de la Universidad

Pontificia Bolivariana para consultas.

8. Estrategia con el medio

El sector arrocero podr utilizar esta investigacin para darle una valorizacin
comercial a la ceniza de la cascarilla de arroz como residuo agroindustrial, de tal
forma que se tengan menores ndices de contaminacin a los recursos naturales
(suelo, agua y aire) y se genere un producto de alta calidad para la
comercializacin. Por otra parte incentivar a los agricultores a que le den un valor
agregado a los residuos agroindustriales que generan para que incrementen sus
ingresos.