Confiabilidad Soldadura

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rea o proceso que lo gener a:
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Co nte nido
1
PROCESO DE INMUNOHEMATOLOGA DONANTES......................................................6
RECEPCIN DE MUESTRAS DE DONANTES..................................................................6
MANTENIMIENTO DIARIO DE EQUIPOS..........................................................................7

3.1
Equipos utilizados en la seccin....................................................................................8
3.1.1 Instructivo Formato Registro Diario de Mantenimiento de Equipos de

Inmunohematologa 2 cdigo F91 BS01 versin 1..............................................................8
3.1.2 Instructivo Formato Mantenimiento de Equipos de Inmunohematologa 1 cdigo
F92 BS01 versin 1............................................................................................................. 9
4
ALISTAMIENTO DE REACTIVOS.....................................................................................10
CONTROL DE CALIDAD DEL PROCESO........................................................................10
5.1
Tecnica Utilizada..........................................................................................................10
5.2
Principio....................................................................................................................... 10
5.3
Reactivos..................................................................................................................... 10
5.4
Materiales y equipos....................................................................................................11
5.5
Procedimiento..............................................................................................................11
5.6
Montaje manual........................................................................................................... 11
5.7
Montaje en el equipo SWING...................................................................................... 11
LECTURA E INTERPRETACIN DE RESULTADOS.......................................................12

6.1
Para leer las microplacas iremos al modulo Lyra........................................................12
6.2
Para leer las tarjetas iremos al mdulo Banjo.............................................................14
IMPRESIN DE RESULTADOS EN EL SOFTWARE MAESTRO....................................16
TAMIZAJE INMUNOHEMATOLGICO DE DONANTES................................................. 17

8.1
Tcnicas manuales vs aglutinacin en gel.................................................................. 17
HEMOCLASIFICACIN SANGUNEA.............................................................................. 18
9.1
Principio....................................................................................................................... 18
9.2
Reactivos..................................................................................................................... 19
9.3
Materiales.................................................................................................................... 19
9.4
Procedimiento..............................................................................................................19
9.5
Automatizado...............................................................................................................20
9.6
Lectura De Resultados................................................................................................ 20
9.7
Interpretacin De Los Grupos Sanguneos De Acuerdo A La Reaccin Presentada.20
10
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DETERMINACION SUBGRUPOSA.........................................................................................20
10.1
Principio....................................................................................................................20
10.2
Muestra.....................................................................................................................21
10.3
Reactivos..................................................................................................................21
10.4
Materiales Y Equipos................................................................................................21
10.5
Procedimiento...........................................................................................................21
10.6
Lectura E Interpretacin........................................................................................... 21
11
DETERMINACIN DE ANTI D VI - MONOCLONAL......................................................22
11.1
Principio....................................................................................................................22
11.2
Muestras...................................................................................................................22
11.3
Reactivos..................................................................................................................22
11.4
11.5
Procedimiento...........................................................................................................23
11.6
Automatizado............................................................................................................23
11.7
Lectura De Resultados.............................................................................................24
11.8
Interpretacin De Resultados...................................................................................24
12
FENOTIPO Rh MS PROBABLE...................................................................................24
12.1
13
Principio:...................................................................................................................24
FENOTIPO CON DIAMED-MP TEST DETERMINATION OF C, c, E, e, K, CTL...........27
13.1
Reactivos..................................................................................................................27
13.2
13.3
Procedimiento...........................................................................................................27
13.4
Automatizado............................................................................................................27
13.5
13.6
14
FENOTIPO SUBGRUPOS DEL RH Y KELL CON ID GEL TEST DIAMED...................28
14.1
Principio....................................................................................................................28
14.2
Reactivos..................................................................................................................28
14.3
14.4
Procedimiento...........................................................................................................28
14.5
Automatizado............................................................................................................29
14.6
14.7
15
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PRUEBA DE ANTIGLOBULINA DIRECTA O COOMBS DIRECTO.............................. 30
15.1
Principio....................................................................................................................30
15.2
Muestra.....................................................................................................................30
15.3
Reactivos..................................................................................................................30
15.4
15.5
Procedimiento...........................................................................................................30
15.6
Automatizado............................................................................................................31
15.7
Lectura de resultados...............................................................................................31
15.8
Interpretacion de resultados.....................................................................................32
16
RASTREO DE ANTICUERPOS IRREGULARES PARA DONANTES...........................32
16.1
17
Principio....................................................................................................................32
RASTREO DE ANTICUERPOS IRREGULARES CON DIACELL POOL.......................32
17.1
Reactivos..................................................................................................................32
17.2
17.3
Procedimiento...........................................................................................................32
17.4
Automatizado............................................................................................................33
17.5
17.6
18
RASTREO DE ANTICUERPOS IRREGULARES CON ID DIACELL I-II-III....................35
18.1
Muestra.....................................................................................................................35
18.2
Reactivos..................................................................................................................35
18.3
18.4
Procedimiento...........................................................................................................35
18.5
Automatizado............................................................................................................35
18.6
18.7
19
RASTREO DE ANTICUERPOS IRREGULARES CON EL PANEL DE CELULAS........ 36
20
Muestra........................................................................................................................... 36
21
Reactivos.........................................................................................................................36
22
Materiales Y Equipos...................................................................................................... 36
23
Procedimiento................................................................................................................. 36
24
Automatizado.................................................................................................................. 36
25
Lectura De Resultados....................................................................................................36
25.1
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INGRESO DATOS AL SISTEMA HEXABANK............................................................... 37
27
REVISIN POR PARES DEL TAMIZAJE INMUNOHEMATOLOGICO......................... 40
28
SOLUCIN DE DISCREPANCIAS................................................................................. 40
28.1
La interpretacin de discrepancias en la tipificacin de grupos sanguneos abo....41
28.2
Interpretacin de discrepancias en la Tipificacin de RH........................................ 46
28.3
Resolver discrepancias en el rastreo de anticuerpos............................................. 47
28.4
Interpretacin de discrepancias en la prueba de coombs directo...........................48
28.5
Segregacin De Unidades No Aptas........................................................................49
28.6
Rechequeo De Unidades Selladas.......................................................................... 49
28.6.1
Reactivos........................................................................................................... 49
28.6.2
Materiales Y Equipos.........................................................................................50
28.6.3
Procedimiento....................................................................................................50
28.7
29
Reorganizacin Del rea Y Disposicin Final Del Material Usado.........................50
GESTIN ADMINISTRATIVA DE INMUNOHEMATOLOGA.........................................50
29.1
Indicadores Del Proceso De INMUNOHEMATOLOGA.......................................... 51
29.2
Reportes Externos....................................................................................................52
30
BIBLIOGRAFIA............................................................................................................... 52
31
CONTROL DE CAMBIOS............................................................................................... 53
32
RESPONSABILIDAD...................................................................................................... 53
Teniendo en cuenta las directrices del Banco de sangre en la seccin de inmunohematologa donde se cuenta con
una bacteriloga encargada, hay funciones ya preestablecidas que se deben realizar como son:
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
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Recepcin de muestras de donantes

Mantenimiento diario de equipos
Alistamiento de reactivos
Control de Calidad del Proceso
Lectura e interpretacin de resultados
Tamizaje inmunohematolgico de donantes
Ingreso de resultados en el sistema Hexabank
Revisin por pares del tamizaje inmunohematolgico
Resolucin de discrepancias
10. Segregacin de las unidades no aptas

11. Validacin del tamizaje inmunohematolgico
12. Reorganizaci n del rea
13. Disposicin final del material usado
14. Gesti n administrativa de inmunohematologa
15. Reportes externos
PROCESO DE INMUNOHEMATOLOGA DONANTES
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RECEPCIN DE MUESTRAS DE DONANTES

1. Se reciben las muestras tomadas en tubo con anticoagulante EDTA (Tapa lila)
2. Se verifica que estn debidamente marcadas, con el respectivo cdigo de barras y
nmero de cdula del donante en correcta posicin y limpio.
3. Revisar que la cantidad y el aspecto fsico de las muestras sea el adecuado,
verificando presencia o ausencia de hemlisis o cogulos.
4. Centrifugar las muestras durante dos minutos obteniendo sedimento celular y plasma
5. Organizarlas ascendentemente segn el consecutivo del cdigo de barras (sede y/o
campaa).
6. Almacenarlas en refrigeracin hasta el momento en que se d inicio a su proceso de
tamizaje.
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7. Si falta alguna muestra inmediatamente buscar la encuesta y la bolsa de sangre total

para obtenerla si la causa fue algn inconveniente presentado durante el proceso de
flebotoma
MANTENIMIENTO DIARIO DE EQUIPOS
Consideraciones Generales
3.1
Se usan los formatos FBS 010 y FBS 011

Los formatos deben ser foliados en orden ascendente
El formato ser diligenciado diariamente en forma completa.
Debe ser diligenciado con letra legible y sin enmendaduras
A fin de mes lo debe revisar y validar firmando la coordinadora
Equipos utilizados en la seccin
ID CENTIFUGE 12 S II: utilizada para centrifugacin de tarjetas.
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ID INCUBADOR 37 SI: utilizada para incubacin de tarjetas.

ID-PIPETTE EP-3: Utilizada para dispensar muestras y reactivos en el montaje de las
pruebas, sta permite programar varios volmenes de acuerdo a lo que se necesite.
FINNPIPETTE NOVUS MULTICHANNEL: Utilizada para dispensar muestras y
reactivos en el montaje de las pruebas, permite programar varios volmenes de
acuerdo a lo que se necesite, permite servir 12 pozos a la vez con el volumen
programado.
SWING: Utilizado para el montaje de las microplacas y tarjetas de forma automatizada.
BANJO ID-READER: Utilizado para realizar la lectura de las tarjetas.
LYRA MP-READER: Utilizado para realizar centrifugacin, agitacin y la lectura de las
microplacas.
ID-Dispenser Red: Utilizado para dispensar diluente 1 en el montaje de las pruebas,
sta permite programar varios volmenes de acuerdo a lo que se necesite.
ID-Dispenser Green: Utilizado para dispensar diluente 2 en el montaje de las pruebas,
sta permite programar varios volmenes de acuerdo a lo que se necesite.
Monitor, teclado, mouse, CPU e impresora: Utilizados para contener el software
maestro con el cual se programa el swing, lyra, y banjo, para realizar los montajes,
centrifugar, leer, interpretar, validar e imprimir los resultados de las pruebas, la
limpieza de estos equipos integrantes del computador se registran en el formato de
Limpieza y Desinfeccin de reas, muebles, enceres y equipos cdigo FBS 113
versin 2 que es diligenciado y realizado por el personal de aseo, slo en caso de
inconvenientes se llamara a los ingenieros de la casa comercial y quedara un registro
de mantenimiento preventivo o correctivo segn corresponda.
NOTA: Para Procedimientos operativos, mantenimientos (limpieza y descontaminacin),
transporte y almacenamiento, Remtase a los manuales de uso de Diamed que se
encuentran: en medio fsico en la oficina del banco de sangre en la seccin del rea
administrativa, y en medio magntico en el computador de la oficina y en el computador de
inmunohematologa, en el escritorio.
3.1.1 Instructivo Formato Registro Diario de Mantenimiento

Inmunohematologa 1 cdigo FBS 010 versin 3
de
Equipos
de
MES y AO: registrar el mes y ao que se estn controlando

MAANA, TARDE Y NOCHE: Responsable: se debe escribir el nombre de la bacteriloga
del turno correspondiente que es la persona quien debe realizar el mantenimiento diario y
diligenciar el formato para dejar evidencia
LYRA: limpieza: se registra un ok si sta es satisfactoria, si no lo es se debe limpiar y
registrar; 1000 RPM: se debe revisar la velocidad que muestra el dial en que est trabajando
el equipo (debe ser 1000) y se registra un ok si sta es satisfactoria, si no lo es se debe
llamar inmediatamente al ingeniero de la casa comercial
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BANJO: limpieza: se registra un ok si sta es satisfactoria, si no lo es se debe limpiar y

registrar;
ID Incubador 37 SI: Limpieza: se registra un ok si sta es satisfactoria, si no lo es se debe
limpiar y registrar; TC: se debe revisar la temperatura que muestra el dial en que est
trabajando el equipo (debe ser 37C +/- 1C) y se registra el dato numrico exacto si sta es
satisfactoria, si no lo es se debe llamar inmediatamente al ingeniero de la casa comercial.
ID-Centrifuga 12 SII: Limpieza: se registra un ok si sta es satisfactoria, si no lo es se debe
limpiar y registrar; 1030 RPM: se debe revisar la velocidad que muestra el dial en que est
trabajando el equipo (debe ser 1030) y se registra un ok si sta es satisfactoria, si no lo es
se debe llamar inmediatamente al ingeniero de la casa comercial
SWING: Se realiza generalmente en la noche que es cuando se usa para montar la tanda de
pruebas de donantes, utilizando el software maestro se busca las opciones de priming y
cleaning y da la orden para realizarse en el equipo si estas han sido realizadas con xito sin
que en el monitor notifique alguna alarma se registra ok, si el equipo notifica alguna alarma
se reinicia y vuelve a realizar y si no se tiene xito llamar inmediatamente al ingeniero de la
casa comercial
3.1.2 Instructivo Formato Mantenimiento de Equipos de Inmunohematologa 2 cdigo FBS

011 versin 2
ID Dispenser Red: Realizar diariamente una revisin del volumen dispensado por medio de
observacin macro de una medida calibradora de lquido si es correcto se registra C si no lo
es se registra NC y se llama al ingeniero de la casa comercial inmediatamente y se le
notifica; de igual forma se debe realizar una limpieza diaria externa con un trapo humedecido
con agua e internamente con solucin salina y se registra R si se realiz o NR si no se
pudo realizar y escribir el nombre de la bacteriloga encargada de este proceso.
ID Dispenser Green: Realizar diariamente una revisin del volumen dispensado por medio
de observacin macro de una medida calibradora de lquido si es correcto se registra C si
no lo es se registra NC y se llama al ingeniero de la casa comercial inmediatamente y se le
con agua e internamente con solucin salina y se registra R si se realiz o NR si no se
pudo realizar y escribir el nombre de la bacteriloga encargada de este proceso.
Pipeta automtica EP-3: Realizar diariamente una revisin del volumen dispensado por
medio de observacin macro de una medida calibradora de lquido si es correcto se registra
C si no lo es se registra NC y se llama al ingeniero de la casa comercial inmediatamente y
se le notifica; de igual forma se debe realizar una limpieza diaria externa con un trapo
humedecido con agua e internamente con un isopo humedecido en alcohol y se registra R
si se realiz o NR si no se pudo realizar y escribir el nombre de la bacteriloga encargada
de este proceso.
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Pipeta Multicanal: Realizar diariamente una revisin del volumen dispensado por medio de
observacin macro de una medida calibradora de lquido si es correcto se registra C si no lo
es se registra NC y se llama al ingeniero de la casa comercial inmediatamente y se le
con agua e internamente con un isopo humedecido en alcohol y se registra R si se realiz o
NR si no se pudo realizar y escribir el nombre de la bacteriloga encargada de este proceso.
4
ALISTAMIENTO DE REACTIVOS
1. Sacar de la nevera y almacn los reactivos nicamente cuando se vayan a utilizar.
2. Revisar el aspecto fsico de todos los reactivos que no estn hemolizadas las clulas,
ni precipitados los diluentes, ni deshidratados, sellado defectuoso, gotas de gel o de
sobrenadante en la parte superior de los microtubos o en la superficie del interior del
aluminio de sellado de las tarjetas o las microplaca
3. Verificar que las fechas de vencimiento de todos los reactivos estn vigentes.
4. En el formato Control de Calidad de Inmunohematologa Aspecto fsico de los
Reactivos cdigo FBS 016 Versin 2, registrar S si es satisfactorio para todos los
aspectos y si no lo es se registra NS pero se debe llamar inmediatamente al asesor
de calidad de la casa comercial, tenga en cuenta registrar el mes y ao a controlar y el
nombre de la bacteriloga responsable del control y de la coordinadora y el folio
correspondiente.
CONTROL DE CALIDAD DEL PROCESO
5.1
Tecnica Utilizada
DiaClon-Mp test. Microplacas con anticuerpos monoclonales deshidratados, para

determinacin de grupos sanguneos ABO / Rh D para Hemoclasificacin sangunea, la
tcnica de ID gel Test Diamed para rastreo de anticuerpos, coombs directo, fenotipo,
confirmatoria del D, y tcnica en tubo para lectina anti A1.
5.2
Principio
Validar el proceso de tamizaje utilizando muestras conocidas para verificar el correcto

funcionamiento de los reactivos necesarios para el proceso.
5.3
Reactivos
Microplacas DiaMed-MP Test A,B,DVI-, DVI+, ctl / A1, A2, B (monoclonal antibodies)
Tarjetas ID-Card LISS/Coombs
Tarjetas ID-Card Anti-DVI neg (monoclonal antibodies)
Tarjetas ID-Card Rh-Subgroups + Cw + K (Human antibodies)
ID-Diluyente 1 solucin de bromelina
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ID-Diluyente 2 solucin de liss

Clulas DiaCell MP-ABO
Clulas ID-DiaCell I-II-III
Clulas ID-DiaCell Pool
AntiA1 Lectin
ID- Internal Quality Control que incluye sueros control y clulas control.
5.4
TIPO DE DOCUMENTO
Materiales y equipos
Id centifuge 12 s ll
Id incubador 37 s I
Id-pipette EP-3
Finnpipette novus multichannel
Equipo swing
Banjo ID-reader
Lyra mp-reader
Tubos para diluciones
Puntas desechables
5.5
Procedimiento
5.6
Alistar los reactivos (como se describe en el proceso de alistamiento de reactivos)

Identifique las filas de las microplacas a utilizar y los pozos de las tarjetas
Determine que sangre total y suero control se va a utilizar
Centrifugar el tubo de sangre total
Mezcle u homogenice el suero control a utilizar
Montaje manual
Se realiza el montaje de cada una de las pruebas a controlar de acuerdo a los parmetros
establecidos para cada una de estas en los insertos correspondientes de los reactivos y los
mapas de procesos que se presentan ms adelante en el paso a paso del tamizaje
inmunohematolgico de donantes.
5.7
Montaje en el equipo SWING

1.
2.
3.
4.
Prender el SWING botn lateral izquierdo posterior

Abrir la interfaz del software maestro
Seleccionar el modulo del equipo SWING
Aparece en la ventana del modulo del SWING, en la parte superior izquierda una
flecha hacia abajo, dar clic y seleccionar la opcin de inicializacin y espere que el
equipo se inicialice y la pantalla del software vuelva a quedar en el inicio.
5. En la misma flecha, dirigirse a la opcin Cleaning y posteriormente a la opcin de
complete priming, de esta forma el equipo realiza su automantenimiento y queda listo
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para montar las pruebas que se vayan a seleccionar quedando la pantalla del software
en el inicio.
6. En el mdulo del SWING, hacer clic en Cover para abrir la tapa.
7. Colocar todos los reactivos teniendo en cuenta para la microplaca la marca de postura
y para las tarjetas y frascos que queden con el cdigo de barras de frente al lector
correspondiente.
8. Cerrar la tapa
9. Hacer clic en Start
10. Cuando salga la identificacin de las muestras, verificar que estn bien.
11. Hacer clic en Validate
12. Cuando salga la pantalla de pruebas, verificar que estn todas las pruebas que le
vamos aplicar a las muestras
13. Hacer clic en Validate
14. Observar que el equipo dispense las muestras y reactivos correspondientes en la
microplaca y tarjetas de acuerdo a lo programado
15. Cuando el equipo finaliza el montaje permite retirar las microplacas para ser llevadas
al lyra y las tarjetas para ser incubadas 15 minutos a 37, seguidamente centrifugadas
por 10 minutos y por ltimo ser llevadas al banjo para su lectura.
6
LECTURA E INTERPRETACIN DE RESULTADOS
Para leer los resultados de las microplacas y tarjetas lo primero que se debe hacer, es abrir la
interfaz del software maestro. En el escritorio hacer doble click en el icono MAESTRO
SOFTWARE.
6.1
Para leer las microplacas iremos al modulo Lyra
Lectura manual consta de los siguientes pasos: insercin, identificacin, centrifugacin,

agitacin, lectura e interpretacin de la microplaca. Se utiliza esta opcin cuando las pruebas
son montadas manualmente y no con el equipo SWING.
Prenda el Lyra en botn lateral derecho
Seleccione el comando File Interpretation - Manual (Archivo Interpretacin Manual).
En la lista Category, seleccione la categora que contenga la prueba realizada.
Haga doble clic o utilice la barra espaciadora sobre las pruebas que desee.
Inserte las dos placas en el cabezal de la centrfuga. Asegrese de que las
microplacas se introducen totalmente en sus ranuras con el cdigo de barras hacia
fuera. Se deben introducir dos microplacas para equilibrar el cabezal de la centrfuga.
Haga clic en Read (Leer) o pulse F9 para continuar.
Aparecen las ventanas Confirm solicitando si se debe realizar la centrifugacin.
Confirme el ciclo de centrifugacin.
Aparecen las ventanas Confirm solicitando si se debe realizar la agitacin.
Confirme el ciclo de agitacin
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Aparecer la ventana Identification

Seleccione la primera microplaca.
Seleccione la columna (1 a 12) donde se pipete la muestra.
Teclee el nombre de la muestra en el campo
Haga clic en el botn OK (Aceptar).
Despus seleccionar la segunda microplaca, repita los pasos,
Si la segunda microplaca es de balanceo (equilibrar el cabezal durante la
centrifugacin y la agitacin), seleccinela y marque la casilla Balance microplate.
Contine con la prueba.
Lectura automtica consta de los siguientes pasos: insercin, identificacin, centrifugacin,

agitacin, lectura e interpretacin de la microplaca. Se utiliza esta opcin cuando las pruebas
son montadas por el equipo SWING.
Prenda el Lyra en botn lateral derecho

Seleccione el comando File Interpretation - Automatic
Inserte las dos placas en el cabezal de la centrfuga. Asegrese de que las
microplacas se introducen totalmente en sus ranuras con el cdigo de barras hacia
fuera. Se deben introducir dos microplacas con cdigos de barras para equilibrar el
cabezal de la centrfuga.
Haga clic en Read (Leer) o pulse F9 para continuar.
Interpretacin de la microplaca: Despus de la identificacin de la microplaca se lleva a

cabo la lectura y la interpretacin automtica. Los resultados de cada pocillo concreto se
muestran con los smbolos siguientes:
++
+
-
Positivo fuerte
Positivo dbil
Negativo
Comprobar y validar los resultados: Se deben comprobar y validar todos los resultados
tras la interpretacin automtica comparando de forma visual con la placa. El resultado
control debe ser negativo para que la determinacin sea vlida. Los resultados positivos
dbiles y los indeterminados se deben comprobar y, si es necesario, corregirse.
Para corregir un resultado:
Haga clic derecho sobre el mismo.
Seleccione el resultado correcto de la lista. Los resultados modificados manualmente
se identifican con un asterisco " * " Si en las impresiones siguientes no aparecen todas
las imgenes de pocillos, haga clic en la casilla de verificacin correspondiente de
abajo. Esto no tiene ningn efecto sobre los datos que se van a guardar.
Haga clic en el botn Information para introducir notas adicionales.
Introduzca los comentarios y confirme. Cuando se corrija un resultado, SIEMPRE debe
hacerse la nota aclaratoria, explicando porque se hace la correccin del resultado
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Para avanzar a la muestra siguiente, haga clic en el botn Next de la parte superior
derecha.
Cuando se hayan comprobado todos los resultados, haga clic sobre el botn OK para
validarlos.
6.2
Para leer las tarjetas iremos al mdulo Banjo
Lectura manual Se utiliza esta opcin cuando las pruebas Son montadas manualmente y no
con el equipo SWING.
1. Prenda el Banjo botn lateral derecho
2. Seleccione en el software maestro en el mdulo del banjo Archivo - Interpretacin Manual.
3. De la lista de categoras, seleccione la categora que contiene las pruebas que se han
realizado.
4. Haga click en la prueba deseada.
5. Coloque la tarjeta-ID preparada en la cubierta de modo que el cdigo de barras quede
frente a la parte posterior de la unidad.
6. Haga click en Leer o presione F9 para proceder.
7. Inserte la identificacin de la muestra analizada.
8. La ventana de la validacin de la tarjeta-ID aparece. El operador puede ahora
comprobar y validar resultados.
Lectura automtica Se utiliza esta opcin cuando las pruebas son montadas por el equipo
SWING.
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1. Prenda el Banjo botn lateral derecho

2. Coloque una tarjeta preparada en la cubierta de modo que el barco de quede frente a
la parte posterior de la unidad.
3. Seleccione en el software maestro en el mdulo del banjo Archivo - Interpretacin Automtica.
4. Haga click en Leer o presione F9 para proceder.
5. La ventana de validacin de la tarjeta de identificacin aparece. El operador puede
ahora comprobar y validar resultados.
Interpretacin de la tarjeta: Despus de la identificacin de la tarjeta se lleva a cabo la
lectura y la interpretacin automtica. Los resultados de cada microtubo concreto se
muestran con los smbolos siguientes:
dp
++++
+++
++
+
+/-
Doble poblacin
Positivo 4+
Positivo 3+
Positivo 2+
Positivo 1+
Positivo dbil
Negativo
Comprobar y validar los resultados: Se deben comprobar y validar todos los resultados
tras la interpretacin automtica comparando de forma visual con la tarjeta. El resultado
control debe ser negativo para que la determinacin sea vlida. Los resultados positivos
dbiles y los indeterminados se deben comprobar y, si es necesario, corregirse.
Para corregir un resultado: Se realiza de la misma forma que para microplaca
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IMPRESIN DE RESULTADOS EN EL SOFTWARE MAESTRO
En la interfaz del software maestro, abrir el mdulo de SAMPLES

Hacer clic en Samples Filter
Aparece una ventana, y el recuadro titulado First Reading Batch.
Llenar los espacios (Filtros) que se deseen como: Date (fecha), Operator (Operador)
etc.
Ir a Apply filter o dar F3
Seleccionar los resultados que se deseen imprimir oprimiendo la tecla Ctrl y haciendo
clic simultneamente hasta que los resultados deseados queden seleccionados en rojo.
cuando es lectura automtica en la parte de abajo dar clic en Print e Imprimir el reporte
con el mismo paso a paso del Software maestro.
Archivarlo en la carpeta Control de calidad interno de inmunohematologa y los
resultados del tamizaje de donantes deber ser archivado en la carpeta
Inmunohematologa Donantes, la bacteriloga que procesa deber adems, firmar
dichos printers, ver copia del impreso en la seccin de los formatos
Nota: cada 15 das se deber montar el control de calidad completo, es decir que se
evaluaran todas las pruebas con dicho control (Tarjeta de Rechequeo, Anti -D, Fenotipo,
hemoclasificacin para recin nacidos, lectina Anti- A1, Hemoclasificacion en placa, Rastreo
de anticuerpos)
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TAMIZAJE INMUNOHEMATOLGICO DE DONANTES
8.1
Tcnicas manuales vs aglutinacin en gel
Procedimiento Manual: resultados falsos negativos por
Omisin del suero en el tubo.

Uso de antisueros poco potentes.
Tiempo de incubacin insuficiente.
Uso de suspensiones de glbulos rojos muy concentrados o muy diluidos.
Uso de muestras viejas o mal almacenadas.
Muestras hemolizadas
Lavados insuficientes.
Resultados falsos positivos por:

Exceso de centrifugacin.
Tubos sucios.
Tcnica ID GEL TEST
Procedimientos siempre idnticos que permiten una estandarizacin de toda la rutina

Lecturas objetivas
Bioseguridad por que utiliza bajas cantidades de muestra
Reacciones estables: en tarjeta de 48 horas a temperatura ambiente, 30 das en
refrigeracin y 1 ao en parafina. En microplaca un mximo de 15 minutos por la
accin proteoltica de la bromelina.
Almacenamiento de tarjetas ID de 18 a 25C y de 2 a 8 C de clulas, dluentes y
microplacas
Suprime los lavados tradicionales en tubo para la eliminacin de las protenas sricas
no ligadas
Volmenes exactos de muestra y reactivo
Clulas estables por seis semanas con fecha de expiracin idntica
Disminucin de causas de error
Sensibilidad y especificidad incomparable
Total seguridad en los resultados
Racionalizacin del tiempo de trabajo
Elimina el proceso de agitacin del tubo para detectar las aglutinaciones
Elimina las lecturas al microscopio objetivizando el proceso de lectura.
Las tarjetas tienen configuracin de 6 columnas y plstico de alto contraste
La desventaja es que no se detectan anticuerpos fros ya que se salta este proceso
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HEMOCLASIFICACIN SANGUNEA
La clasificacin sangunea se determina a travs de una reaccin de aglutinacin o hemlisis

entre los antgenos de las clulas sanguneas y los anticuerpos correspondientes.
La clasificacin sangunea de rutina comprende la determinacin de grupos y Subgrupos del sistema
ABO denominado grupo sanguneo y la deteccin del Antgeno D (Rh) incluyendo el antgeno dbil
del D.
TCNICA UTILIZADA: DiaClon-Mp test. Microplacas con anticuerpos monoclonales deshidratados,
para determinacin de grupos sanguneos ABO/RhD.
9.1
Principio
Para realizar la clasificacin sangunea se debe realizar dos pruebas simultaneas, una prueba celular
o directa, la cual determina los antgenos presentes en el glbulo rojo y la otra una prueba srica o
inversa donde se determinan los anticuerpos presentes. Se debe realizar a temperatura ambiente
puesto que la incubacin a 37 C debilita la reaccin. En la tcnica de microplaca Diamed se
encuentran pozos anti A, anti -B, DVI-, DV+, para realizar la prueba directa, un pozo control celular
ctrl, y los tres ltimos utilizados para la prueba inversa con clulas A1, A2, B.
9.2
Reactivos
Microplacas DiaMed-MP Test A,B,DVI-, DVI+, ctl / A1, A2, B (monoclonal antibodies)
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Clulas DiaCell MP-ABO
9.3
Materiales
9.4
Id-pipette ep-3
Finnpipette novus multichannel
Equipo swing
Lyra mp-reader
Gradilla
Procedimiento
Deje que las microplacas, los eritrocitos reactivos y controles alcancen la temperatura ambiente antes
de utilizarlos
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.5
Aliste las muestras como se describe en el paso de recepcin de muestras de donantes.

Realizar el alistamiento de reactivos segn lo descrito en el aparte de control de calidad.
Identifique las filas de las microplacas a utilizar y los tubos donde realizar las diluciones
realice la dilucin al 1% de hematies pipeteando 1 mililitro de diluyente bromelina en cada tubo y
10 uL de concentrado celular de cada muestra segn la marcacin de los tubos, deje de 10 a 15
min en reposo
Pipetee el suero segn el marcaje en los pocillos correspondientes de la microplaca A1, A2, B
Aada los eritrocitos reactivos A1, A2, B a los pocillos correspondientes de la prueba inversa
Pipetee la dilucin de las clulas de las muestras segn el marcaje en los pocillos
correspondientes anti A, anti -B, DVI-, DV+ ,ctl
Coloque la placa en el equipo Lyra
Automatizado
Seguir el procedimiento del montaje del equipo SWING descrito en el aparte del control de calidad
interno. Vigilando el dispensado de las muestras y reactivos en el equipo.
9.6
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Lectura De Resultados
Realizar la lectura, interpretacin e impresin de resultados de acuerdo al procedimiento explicado en

el control de calidad, ya sea manual o automatizado, archive los printers de los resultados en la
carpeta inmunohematologa donantes, ver copia de los impresos en la seccin de los formatos.
NOTA: El codigo del test (test code) debe ser MP6040, y el nombre del test (test name) es MP-Test:
A-B-D(VI-)-D(VI+)-ctl / A1-A2-B (6040)
9.7
Interpretacin De Los Grupos Sanguneos De Acuerdo A La Reaccin Presentada

Anti A
2+
0
2+
0
2+
0
2+
0
Anti B
0
2+
2+
0
0
2+
2+
0
DVI0
0
0
0
2+
2+
2+
2+
DV+
0
0
0
0
2+
2+
2+
2+
CONTROL
0
0
0
0
0
0
0
0
Clulas A1 Clulas A2 Clulas B Interpretacin

0
0
2+
A negativo
2+
2+
0
B negativo
0
0
0
AB negativo
2+
2+
2+
O negativo
0
0
2+
A positivo
2+
2+
0
B positivo
0
0
0
AB positivo
2+
2+
2+
O positivo
10 DETERMINACION SUBGRUPOS A
10.1 Principio
El antgeno A se presenta en diferentes formas que difieren entre ellas cualitativa y
cuantitativamente, dichas diferencias se relacionan con la cantidad de antgeno presente en
glbulo rojo, el cual disminuye progresivamente desde A1 hasta las formas ms dbiles.
Las dos formas ms comunes son A1 y A2, estas no difieren significativamente en el grado
de aglutinacin con los antisueros Anti A, la distincin serolgica radica en su reactividad con
la lectina anti A1 (Dolichus biflorus) que aglutina con las clulas A1 pero no las A2.
Aproximadamente El 80 % de las personas A reaccionan con la lectina anti A1 y son
clasificadas como A1 A1B el restante 20% no son aglutinadas y son clasificadas como A2
A2B. El 8% de las personas A2 y 35 % las A2B pueden desarrollar anticuerpos anti A1
considerado como anticuerpo natural, pues con frecuencia se encuentra en personas sin
antecedentes transfusionales o de embarazo y sin importancia clnica a menos que
reaccione a 37 C.
El antgeno H se encuentra en cantidades variables en los eritrocitos humanos dependiendo
del ABO. La mxima cantidad se da en GR del grupo O, existen cantidades intermedias de
los grupos A2 y A2B.
10.2 Muestra
Glbulos rojos en estudio (suspensin 3 a 5%) de grupo sanguneo A
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LECTINA ANTI-A1
10.3 Reactivos
AntiA1 Lectin
solucin salina 0.9%
10.4 Materiales Y Equipos
Id-pipette ep-3
Puntas desechables
gradilla
10.5 Procedimiento
I. Realizar el alistamiento de reactivos segn lo descrito en el aparte de control de calidad.
II. Realice control de calidad positivo y negativo para el antisuero lectina Anti A1, con clulas A1
(control positivo) y clulas O (control negativo).
III. Aliste las clulas en suspensin de 3 a 5 % de las muestras a procesar con solucin salina. Pipetee 1
ml de solucin salina en un tubo y 100ul de sangre total o 50 ul de concentrado eritrocitario.
IV. Marque los tubos con el nmero de las muestras en estudio.
V. Dispense una gota (50 ul) del antisuero lectina anti A1 en cada tubo.
VI. Agregue a cada tubo segn el marcaje una gota (50ul) de suspensin de glbulos rojos (3 a 5%) de
la muestra.
VII.Centrifugue 1 minuto a 125 g o 1000 rpm, retire los tubos de la centrifuga cuando pare y
resuspenda el botn celular suavemente, lea y registre los resultados en el impreso de las
hemoclasificaciones obtenidas en el software maestro en el nmero de la muestra analizada.
LECTINA ANTI-H
10.6 Reactivos
Anti-H Lectin
solucin salina 0.9%
Id-pipette ep-3
Puntas desechables
gradilla
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10.8 Procedimiento
I. Lave los eritrocitos una vez.
II. Prepare una suspensin de eritrocitos entre el 3-5% con solucin salina, adicionando
50l de eritrocitos concentrados a 1 ml de solucin salina
III. En un tubo de vidrio aadir 50 l de la suspensin de eritrocitos y 100 l (2 gotas) de
Lectina Anti- H
IV. Mezcle bien e incube por 5 minutos a temperatura ambiente
V. Centrifugue durante 1 minutoa 1000 rpm o 125 g, retire los tubos de la centrifuga
cuando pare y resuspenda el botn celular suavemente, lea y registre los resultados
en el impreso de las hemoclasificaciones obtenidas en el software maestro en el
nmero de la muestra analizada.
10.9 Lectura e Interpretacin
Con ayuda de fuente de luz blanca lea los tubos agitando suavemente, y registre los
resultados en el protocolo correspondiente as:
Positivo: Presencia de aglutinacin registrando el grado de aglutinacin desde dbil o weak
hasta 4 +
Negativo: Ausencia de aglutinacin.
Nota: se realizara la lectina Anti- A1 a todas las unidades cuya Hemoclasificacin sea A o AB
y en caso de que esta sea negativa se proceder a realizar la lectina Anti-H para confirmar el
subgrupo.
11 DETERMINACIN DE ANTI D VI - MONOCLONAL
11.1 Principio
La mayora de los eritrocitos D positivo, muestran aglutinacin macroscpica despus del
contacto con antisuero anti D y es fcil clasificarlos como tales. En otros casos los eritrocitos
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D positivo no muestran aglutinacin directa, sin embargo no pueden ser clasificados como
Rh negativo, debido a:
Los glbulos rojos presentan el antgeno D estructuralmente completo
dbilmente, en este caso se denomina: Antgeno dbil del D.
pero se expresa
Los glbulos rojos no expresan estructuralmente por completo el antgeno D, en este caso
se denominan: Antgeno D parcial.
En cualquiera de los dos casos anteriores se requiere de pruebas adicionales como la de la
antiglobulina, para poder demostrar la presencia del antgeno D.
La tarjeta ID Card DiaClon Anti D VI- contiene una mezcla de anti D monoclonal con lneas
celulares TH28, MS26; 175-2
11.2 Muestras
Sedimento globular
11.3 Reactivos

Tarjetas ID-Card Anti-DVI neg (monoclonal antibodies)
Id centifuge 12 s ii
Id-pipette ep-3
Banjo id-reader
Puntas desechables
Gradilla
11.5 Procedimiento
1. Realizar el alistamiento de reactivos segn lo descrito en el aparte de control de calidad.
2. Prepare una suspensin de glbulos rojos al 5 % con 50 uL de sangre total o 25uL de sedimento
globular en 0.5 ml de diluyente 2
3. Abra el pozo a utilizar y marque la tarjeta
4. Dispense 10 uL de la dilucin en el pozo a utilizar
5. Centrifugar la tarjeta por 10 minutos a 1030 rpm
6. Poner las tarjetas en el lector Banjo
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11.6 Automatizado
Seguir el procedimiento del montaje del equipo SWING descrito en el aparte del control de
calidad interno. Vigilando el dispensado de las muestras y reactivos en el equipo.
11.7 Lectura De Resultados
Realizar la lectura, interpretacin e impresin de resultados de acuerdo al procedimiento
explicado en el control de calidad, ya sea manual o automatizado, archive los printers de los
resultados en la carpeta inmunohematologa donantes, ver copia de los impresos en la
seccin de los formatos.
11.8 Interpretacin De Resultados
Se considera un resultado positivo la aglutinacin de hemates en la parte superior del pozo o
dispersos en el gel. Resultado negativo se observa la sedimentacin de los glbulos rojos en
el fondo del pozo.
NOTA: El cdigo del test (test code) debe ser MO09E, y el nombre del test (test name) es
Antigen: Anti-D Monoclonal (5017)
12 FENOTIPO Rh MS PROBABLE
12.1 Principio:
El fenotipo : es la determinacin de los antgenos presentes en la membrana del glbulo rojo,
la ausencia de un antgeno debe corresponder a la presencia del alelo alterno , el cual estar
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en doble dosis (homocigoto) , por el contrario si ambos estn presentes , se definen como
heterocigotos.
A partir del fenotipo se deduce el genotipo, que expresa la constitucin gentica del individuo
con respecto a un rasgo caracterstica determinados.
En la actualidad existen cinco reactivos para la determinacin de los respectivos antgenos de
Rh: anti D, anti C, anti c, anti E, anti e; y debido a que estos antgenos pueden ser el producto
de diferentes complejos genticos, no siempre es posible deducir el GENOTIPO con
certeza por lo que este se expresa en trminos de probabilidad. (Observese el cuadro de
Frecuencia de fenotipificacin RH)
La determinacin GENOTIPO Rh es til en la resolucin de problemas de aloinmunizacin.
Resultados con
los 5
antis ueros Rh
principales
D C E
+ + 0
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Otr os
antis ueros
Fenot ipos
FisherRace
Notacin
Ce
( CDE)
rpida
CcDe
R1r
+ + 0 0
CDe
R1
+ + + +
0
CDEe
+ +w + +
+ 0 + +
+ 0
+ + 0
+ 0
+ +0
+ 0 0
cDEe
R2r
cDE
R2
cDe
Ro
+ 0
CDEe
R1Rz
CcDE
RzR2
+
0
+ + 0
+ +w + + 0
R1R2
Genot ipos Rh
posibles
FisherRace
Wiener
Frec uenc ia del genot ipo

en la poblacin
(CDE)
Rh-hr
B lanco%
Negros%
CDe/Cde
CDe/CDe
Cde/cDe
CDe/CDe
CDe/Cde
CDe/cDE
cDE/Cde
CDe/cdE
CDE/cde
CDE/cDe
cDe/CdE
cDE/cde
cDE/cDe
cDe/cdE
cDE/cDE
cDE/cdE
cDe/cde
cDe/cDe
CDe/CDE
CDe/CdE
CDE/Cde
CDE/cDE
CDE/cdE
cDE/CdE
R1r
R1R
r'R
R1R1
R1r'
R1R2
R2r'
R1r''
Rzr
RzR
Rry
R2r
R2R
Rr''
R2R2
R2r''
Rr
RR
R1Rz
R1ry
Rzr'
RzR2
Rzr''
R2ry
31,1
3,4
0,2
17,6
1,7
11,8
0,8
0,6
8,8
15
1,8
2,9
0,7
3,7
<0,1
0,4
<0,1
<0,1
10,4
1,1
<0,1
2
0,3
3
0,2
5,7
9,7
<0,1
1,2
<0,1
22,9
19,4
<0,1
<0,1
A loanticuer po Rh
com nmente
Fenot ipo Rh
comn
produc ido debido al

embarazo o la
transfu sin
compat ible
anti-E
R1r,R1,r,r'r
anti-C
anti-c+E
R1
anti-ce (-f)
R1,R2,R1R2
ninguno
anti-C o anti-Ce
R2r,rr''r
anti-e o anti-Ce
anti-e+C
anti-C+E
R2
<0,1
anti-c
R1
<0,1
anti-e
R2
Ro, r
+ +w + 0 0
00
+ + 0
0 + 0 + +
0 + 0 0 +
+
+
0 +w + 0 0
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CDE/CDE RzRz
CDE/CdE Rzry
<0,1
<0,1
ce
cde/cde
Rr
15
Cce
Ce
r'r
r'
Cde/cde
Cde/Cde
Ccde
s/cde
cdE/cde
cdE/cdE
r'r
r'r'
<0,2
<0,1
<0,1
<0,1
Ccees
cEe
cE
CcEe
+
0
Rz
0 +w + + + 0
CDE
0 +w 0 + + +wv +
00 + + + 0
+
00 + + 0 0
0
0 + + + +
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CE
r's
r''r
r''
r'sr
r''r
r''r''
<0,1
<0,2
<0,1
2
<0,2
<0,1
r'r''
Cde/cdE r'r''
<0,1
<0,1
ryr
CdE/cde Ryr
<0,1
<0,1
ryr
CdE/CdE Ryry
<0,1
<0,1
anti-c
anti-e
tanti-D o
C+D
(debido
embarazo)
tanti-D
(debido
embarazo)
R1
R2
antir,r''r
al (r'r si anti-C no
est presente)
al
r,rr,r"r
tSangre
Dnegativo es
generalmente
seleccionada
para receptores
D-negativo
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13 FENOTIPO CON DIAMED-MP TEST DETERMINATION OF C, c, E, e, K, CTL

13.1 Reactivos
Microplacas DiaMed-MP Test Determination of C, c, E, e, K, ctl (monoclonal antibodies)
Id-pipette ep-3
Equipo swing
Lyra mp-reader
Puntas desechables
gradillas
13.3 Procedimiento
1.
2.
3.
4.

Centrifugue las muestras con EDTA para obtener sedimento globular y plasma
Identifique las filas de las microplacas a utilizar
Realice la dilucin al 1% de hematies con 1 mililitro de diluyente bromelina y 10 uL de
concentrado celular de la muestra, deje de 10 a 15 min en reposo
5. Pipetee 50 uL de la dilucin de las clulas de la muestra en los pocillos correspondientes
C-c-E-e-K-Ctrl.
6. Coloque la placa en el equipo Lyra
13.4 Automatizado
calidad interno.
NOTA: El codigo del test (test code) debe ser MP6030 el nombre del test (test name) es MPTest: C-c-E-e-K-ctl (6030)
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13.6 Interpretacin De Resultados.

Se considera un resultado positivo la aglutinacin de hemates en el fondo del pozo.
Resultado negativo se observa la suspensin de los glbulos rojos en el pozo.
14 FENOTIPO SUBGRUPOS DEL RH Y KELL CON ID GEL TEST DIAMED
14.1 Principio
Determinar los antgenos Rh presentes en la membrana del eritrocito que son de alta
incidencia en la poblacin, capaces de desarrollar respuesta inmune en los individuos que los
posean, adems de orientarnos en la posible expresin gentica del donante
14.2 Reactivos
Tarjetas ID-Card Rh-Subgroups + Cw + K (Human antibodies)

Id incubador 37 si
Id-pipette ep-3
Equipo swing
Banjo ID-reader
Puntas desechables
Gradilla
14.4 Procedimiento
2. Prepare una suspensin de glbulos rojos al 5 % con 50 uL de sangre total o 25uL de sedimento
globular en 0.5 ml de diluyente 1
3. Abra el pozo a utilizar y marque la tarjeta
4. Dispense 10 uL de la dilucin en el pozo a utilizar
5. Centrifugar la tarjeta por 10 minutos a 1030 rpm
Poner la tarjeta en el lector Banjo
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14.5 Automatizado
calidad interno.
NOTA: El codigo del test (test code) debe ser PR09, y el nombre del test (test name) es
Phenotype C-Cw-c-E-e-K (5012)
aparecen dispersos en el gel. Resultado negativo se observa la sedimentacin de los
glbulos rojos en el fondo del pozo.
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15 PRUEBA DE ANTIGLOBULINA DIRECTA O COOMBS DIRECTO

15.1 Principio
Esta prueba es de gran utilidad para:
Investigacin de Reacciones Transfusionales
Diagnstico de Enfermedad Hemoltica del Recin Nacido
Diagnstico de Anemia Hemoltica Autoinmune
Investigacin de sensibilizacin causada por medicamentos
La prueba de Antiglobulina Directa detecta anticuerpos de tipo IgG o fracciones del complemento
adherido a la superficie de los glbulos rojos y pueden causar su destruccin prematura. La actividad
anti C3d es importante para la prueba de la antiglobulina directa en la investigacin de la anemia
hemoltica autoinmune. Un resultado positivo de antiglobulina directa indica generalmente que los
eritrocitos estn recubiertos in vivo con inmunoglobulina, complemento o ambos.
15.2 Muestra
Sangre total con EDTA o cualquier anticoagulante o sedimento globular. Tambin es posible utilizar
muestras recogidas en tubos sin anticoagulantes. Cuando es necesario emplear suero en vez de plasma,
el suero debe someterse a la centrifugacin a 1500g durante 10 minutos antes de su uso, para evitar
residuos de fibrina que podran interferir con el patrn de reaccin
15.3 Reactivos
Id incubador 37 si
Id-pipette ep-3
Equipo swing
Banjo id-reader
Puntas desechables
Gradilla
15.5 Procedimiento

Centrifugar la muestra para obtener el sedimento globular y plasma
Marque los microtubos correspondientes con el nmero del donante
Abra los pozos a utilizar de la tarjeta LISS/Coombs AHG y marque
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Prepare una suspensin de hemates con un mililitro de diluyente 2 y 10-12.5 uL de sedimento de

hemates o 25 uL de sangre total
Dispensar en cada pozo 50 uL de la suspensin de glbulos rojos
Centrifugar 10 minutos a 1030 rpm
Poner las tarjetas en el lector Banjo
15.6 Automatizado
calidad interno.
15.7 Lectura de resultados
NOTA: El codigo del test (test code) debe ser PR17, y el nombre del test (test name) es
Dir ect Antiglobulin Test (IAT) 5053
15.8 Interpretacion de resultados.
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aparecen dispersos en el gel. Resultado negativo se observa la sedimentacin de los
glbulos rojos en el fondo del pozo.
Una reaccin negativa indica la ausencia de anticuerpos IgG o componentes de complemento C3d
detectable en los eritrocitos
Una reaccin positiva indica que los eritrocitos del paciente estn sensibilizados
16 RASTREO DE ANTICUERPOS IRREGULARES PARA DONANTES

16.1 Principio
La deteccin de anticuerpos irregulares en suero y plasma distintos a las isoaglutininas del sistema
ABO y que a 37 C tienen una importancia clnica ya que son capaces de causar hemolisis o
aglutinacin de los glbulos rojos
En el suero de los donantes se debe estudiar la presencia de anticuerpos irregulares de tipo IgG,
mediante el uso de glbulos rojos que poseen antgenos conocidos. La caracterstica fisicoqumica de
los anticuerpos en estudio hace necesario la utilizacin de temperaturas y medios de reaccin diferentes
para su ptima deteccin.
17 RASTREO DE ANTICUERPOS IRREGULARES CON DIACELL POOL
17.1 Reactivos
ID-Diacell Pool
Id incubador 37 si
Id-pipette ep-3
Banjo id-reader
Puntas desechables
Gradilla
17.3 Procedimiento
2. Centrifugar la muestra para obtener el sedimento globular y plasma
3. Abra los pozos a utilizar de la tarjeta LISS/Coombs AHG y marque
4.
5.
6.
7.
8.
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Dispensar 50 uL de ID Diacell Pool

Dispensar en cada pozo 25 uL del plasma donante
Incubar 15 minutos a 37 C
Centrifugar 10 minutos a 1030 rpm
Poner las tarjetas en el lector Banjo
17.4 Automatizado
calidad interno.
NOTA: El cdigo del test (test code) debe ser CH08, y el nombre del test (test name) es
Ab.screening: Diacell Pool I + II (IAT) 5053
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dispersos en el gel. Resultado negativo se observa la sedimentacin de los glbulos rojos en
el fondo del pozo.
Una reaccin negativa indica la ausencia de anticuerpos irregulares detectables en el suero o
plasma del donante
Cuando un resultado en pool es positivo debe realizarse inmediatamente el RAI con clulas I,
II y III si este resultado es negativo se reporta, pero si es positivo se llama inmediatamente a
casa comercial para solicitar prestado el panel de 11 clulas y realizar la identificacin.
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18 RASTREO DE ANTICUERPOS IRREGULARES CON ID DIACELL I-II-III

18.1 Muestra
Plasma positivo para clulas pool
18.2 Reactivos
ID-Diacell I-II-III
Los mismos que se usan para el RAI con clulas pool
18.4 Procedimiento
Seguir el procedimiento del montaje manual para RAI con clulas pool descrito en el aparte
inmediatamente anterior.
18.5 Automatizado
calidad interno.
NOTA: El cdigo del test (test code) debe ser PR15B, y el nombre del test (test name) es
Ab.screening I II III (IAT) 5053
Una reaccin positiva indica la presencia de anticuerpos irregulares, introduzca las
reacciones obtenidas en la tabla de antgenos. Segn el patrn de las reacciones obtenidas y
la configuracin de antgenos pueden indicarse el tipo de anticuerpo presente.
Una reaccin positiva a uno o ms tipos de eritrocitos y un autocontrol negativo sugieren la
presencia de un anticuerpo especfico.
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Si existe una reaccin positiva a todos los eritrocitos del panel y un autocontrol positivo pero
uno o ms tipos de eritrocitos muestran una reaccin positiva ms intensa que el autocontrol,
deben realizarse pruebas adicionales para estudiar la posibilidad de un aloanticuerpo
subyacente.
19 RASTREO DE ANTICUERPOS IRREGULARES CON EL PANEL DE CELULAS
20 Muestra
Plasma positivo para clulas I, II, III
21 Reactivos
Panel de 11 clulas
22 Materiales Y Equipos
Los mismos que se usan para el RAI con clulas pool
23 Procedimiento
Seguir el procedimiento del montaje manual para RAI con clulas pool descrito en el aparte
inmediatamente anterior.
24 Automatizado
calidad interno.
25 Lectura De Resultados
NOTA: El cdigo del test (test code) debe ser PR93A, y el nombre del test (test name) es
Identification: 11 test cells IAT + AC (5053)
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Una reaccin positiva indica la presencia de anticuerpos irregulares, introduzca las

reacciones obtenidas en la tabla de antgenos. Segn el patrn de las reacciones obtenidas y
la configuracin de antgenos pueden indicarse el tipo de anticuerpo presente.
Una reaccin positiva a uno o ms tipos de eritrocitos y un autocontrol negativo sugieren la
presencia de un anticuerpo especfico.
Si existe una reaccin positiva a todos los eritrocitos del panel y un autocontrol positivo pero
uno o ms tipos de eritrocitos muestran una reaccin positiva ms intensa que el autocontrol,
deben realizarse pruebas adicionales para estudiar la posibilidad de un aloanticuerpo
subyacente.
26 INGRESO DATOS AL SISTEMA HEXABANK
Ingrese al sistema mediante el icono HEXABANK
Digite su clave de ingreso. (USUARIO Y CLAVE) dar ENTER para ingresar
Ya dentro del sistema, digitar la teclar F2 para llegar a la siguiente ventana
En el icono de la lupa,
resultados.
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buscar el nmero de donacin para el cual se van a ingresar
Para el ingreso del grupo ABO y Rh, dirigirse al icono Abo y factor Rh y se desplegara
la siguiente ventana:
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Para ingresar las lectina anti A y anti H segn corresponda se deber

resultado en la siguiente ventana:
ingresar el
Se despliegan las flechas de resultado y se da guardar.

Diligenciar todos los campos: ABO, Rh, CDE. Para ingresar el fenotipo, dar click en Grilla
de fenotipos y se desplegara la siguiente ventana, donde nos ayudaremos con las flechas
desplegando el resultado que se quiere ingresar, al finalizar, dar click en Confirmar . Para
regresar a la ventana anterior presionar la tecla Esc
Para ingresar el sistema kell, marcar la casilla Otros sistemas y posteriormente, dar
click en el icono
donde se desplegara la siguiente ventana:
8.
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Dar doble click al icono + donde se desplegara la siguiente ventana.
9.
Dar doble click en el sistema Kell, y automticamente el sistema regresa a la ventana
anterio, pero ya muestra la opcin de ingresar resultado del sistema Kell
10.
Dar click en Resultado y ayudndonos con las flechas, seleccionar el resultado que
queremos ingresar, posterior a esto dar click en el icono
de esta forma se guardara el
resultado.
11.
Con la tecla Esc regresaremos a la siguiente ventana:
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Para el ingreso de los anticuerpos irregulares, dirigirse al icono Anticuerpos irregulares

y se desplegara la siguiente ventana:
En la casilla de Resultado nos ayudaremos con las flechas para seleccionar el resultado
que queremos ingresar, posterior a esto, dar click en el icono
y de esta forma el resultado
quedara guardado.
Para el ingreso del Coombs directo, dirigirse al icono Coombs directo donantes y se
desplegara la siguiente ventana:
En la casilla de poliespecifico seleccionamos s o n para seleccionar el tipo de reactivo

que manejamos, posterior a Resultado nos ayudaremos con las flechas para seleccionar
el resultado que queremos ingresar, posterior a esto, dar click en el icono
forma el resultado quedara guardado.
y de esta
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27 REVISIN POR PARES DEL TAMIZAJE INMUNOHEMATOLOGICO

Este proceso debe ser realizado por la bacteriloga encargada del proceso y la coordinadora
tcnica del banco de sangre, se realiza comparando los resultados ingresados en el sistema
HEXABANK, con los printers del software maestro y enfrentando las microplacas con cada
resultado impreso para comprobar su concordancia. (Esta revisin por pares tambin se
puede hacer entre dos bacterilogas y se debe registrar la firma de las personas que
intervinieron)
28 SOLUCIN DE DISCREPANCIAS
Es importante que quienes trabajan en el banco de sangre, posean conceptos claros sobre
la responsabilidad que tienen frente a la vida del paciente y para ello se requiere que estn
familiarizados con los ms recientes avances que se produzcan en el campo de la medicina
transfusional y que adems tengan conocimiento sobre la inmunologa ya que
fundamentalmente el objetivo de un banco de sangre, es aplicar los principios inmunolgicos
para el estudio de los antgenos presentes en los elementos que conforman la sangre y su
comportamiento serolgico.
Pero de igual forma se deben estudiar los desrdenes o discrepancias hematolgicas
relacionadas con el estado inmune del paciente y tratar de resolver en forma eficaz cualquier
problema con el propsito de garantizar una transfusin segura. Por esto presentamos una
gua que contiene las posibles discrepancias que se pueden presentar durante en el
procesamiento de cualquier tcnica aplicada.
28.1 La interpretacin de discrepancias en la tipificacin de grupos sanguneos abo
El procedimiento rutinario para la determinacin del grupo ABO es sin duda uno de los
procedimientos ms simples en inmunohematologa, Tambin es uno de los
ms
importantes. Es esencial que esta prueba se efecte cuidadosamente para facilitar la
deteccin y resolucin de discrepancias.
Se produce una discrepancia cuando la interpretacin de las pruebas de determinacin del
grupo globular la directa no concuerda con la srica.
Muchas de las discrepancias son productos de errores tcnicos. El Primer paso que se debe
tomar para la resolucin debe ser eliminar la posibilidad de que se haya cometido un error
tcnico asegrese de lo siguiente:
El registro de las reacciones e interpretaciones es correcto.

El suero y los hemates utilizados son concordantes.
Los reactivos usados no estn contaminados y funcionan adecuadamente.
Se utiliza la concentracin y proporcin adecuada de reactivos.
Las pruebas han sido centrifugadas a la velocidad y tiempos adecuados.
Muchas de las discrepancias en la tipificacin de ABO o de cualquier otro sistema de grupos

sanguneos tienen su origen en detalles tcnicos; que pueden resolverse repitiendo la prueba
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teniendo cuidado de evitar las fuentes comunes de error como son:
Material sucio o con restos de detergentes.

Concentracin inadecuada clulas / suero.
Contaminacin o inactivacin de reactivos.
Falla en la identificacin de hemlisis como resultado positivo.
Lectura inadecuada.
Identificacin incorrecta de la muestra o del antisuero.
Registro inadecuado de los resultados.
Suspensin celular muy ligera o muy fuerte.
Olvido en adicionar los reactivos.
Empleo de glbulos rojos viejos (perdida de reactividad del antgeno).
Baja reactividad de los antgenos por efecto de alta temperatura.
Uso de reactivos policlonales con baja reactividad.
Uso de reactivos vencidos.
Mala conservacin de los reactivos.
Interpretacin inadecuada del grado de aglutinacin.
Falsa aglutinacin por aumento de protenas (Autoaglutinacin).
Sobrecentrifugacin.
Infracentrifugacin.
Empleo inadecuado de reactivo.
Tiempo de incubacin inadecuada.
La prueba se debe repetir utilizando hemates lavados y resuspendidos en solucin salina si

la discrepancia persiste, puede ser de ayuda eliminar la posibilidad de que la muestra este
contaminada con bacterias o material extrao. Obtenga una nueva muestra de la bolsa del
donante o reactivos de lotes diferentes. Si no se elimina la discrepancia debe seguir los
pasos necesarios para resolverla:
Obtener informacin sobre el donante.
Medicamentos.
Historia de embarazo o transfusiones.
Pruebas serolgicas anteriores.
Resultados de otros anlisis de sangre.
Discrepancias relacionadas con las clulas:

Fenmeno de Rouleaux: se puede presentar cuando las clulas estn suspendidas en
su propio suero y se ven afectadas por: exceso de protenas , protenas anormales ,
gelatina de wharton (sangre de cordn) o de otras macromolculas simulando
aglutinacin: En este caso , los glbulos rojos que van a ser usados en la prueba
directa y Rh deben ser lavados previamente con solucin salina bufferizada, con el fin
de eliminar dichas sustancias. Agregue solucin salina bufferizada a la muestra, si se
trata de fenmeno de rouleaux las clulas se dispersan uniformemente por el
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contrario la verdadera aglutinacin no ser afectada.

Altas concentraciones de sustancias de grupo sanguneo en el suero, pueden
neutralizar los reactivos anti A y anti B, inhibiendo su reaccin con los antgenos
celulares. Dicho fenmeno puede ser eliminado empleando glbulos rojos lavados y
suspendidos en solucin salina bufferizada.
La clasificacin sangunea de muestras coombs directo positivo, que aglutinan con
todos los antisueros incluso con los controles negativos, deben ser tratadas mediante
una elucin suave que no modifique los antgenos, con el fin de remover buena
cantidad del anticuerpo unido y realizar una efectiva tipificacin para ABO.
En casos como las hipergamaglobulinemias, los sueros puede expresar caractersticas
especiales produciendo la agregacin de los glbulos rojos en forma de pilas de
monedas, esto ha sido denominado fenmeno de rouleaux. Algunas veces dicho
fenmeno es fcilmente reconocible pero en otras ocasiones los agregados son
irregulares y simulan una verdadera aglutinacin. Desaparicin o debilitamiento de
antgenos reaccionantes.
Por genotipo raro: Los antgenos A o B pueden tener expresin dbil como
consecuencia de un genotipo poco usual como por ejemplo los subgrupos de A y B.
En algunas personas, los antgenos del ABO pueden estar muy deprimidos. Tambin
se ha documentado la disminucin de antgenos A1 y H.
Por sustancias especficas de grupo sanguneo: En ciertas condiciones, las sustancias
especficas de grupo sanguneo pueden estar muy elevadas en forma soluble en el
suero, causando la neutralizacin de anti-A y anti-B cuando se emplean clulas sin
lavar.
Por B adquirido: El antgeno B adquirido puede ser el resultado de la accin de las
bacterias Gram negativas asociadas al tracto digestivo inferior. Se han estudiado dos
mecanismos para la adquisicin del antgeno B: el primero y l ms comn es debido
a la accin de enzimas bacterianas sobre la sustancia A en individuos con
enfermedades del colon o recto.
El otro mecanismo ocurre por el incremento en la permeabilidad de la pared intestinal
que conlleva a la absorcin al torrente sanguneo de los polisacridos bacterianos y
absorcin de estos sobre los eritrocitos, resultando en inmunoespecificidad B en
pacientes grupo A u O con infecciones por Proteus vulgaris o Escherichia coli O. Se
ha documentado un antgeno A adquirido en asociacin con infecciones por Proteus
mirabilis. Se observa entonces una reaccin dbil con apariencia de campo mixto.
Por colorantes: Anticuerpos contra colorantes pueden causar falso positivos con anti B.
Por anticuerpos en los reactivos: pueden estar presentes anticuerpos contra antgenos
de baja incidencia en los reactivos policlonales anti A y anti B que pueden reaccionar
con los correspondientes antgenos en los eritrocitos del donante, simulando la
presencia de un antgeno dbil. Resolucin: Los subgrupos A y B siguiendo la tcnica
indicada. En el caso de sustancias especficas de grupo sanguneo, el lavado de los
eritrocitos con solucin salina y el uso de clulas suspendidas en este medio salino
podr eliminar el problema. En el caso de B adquirido, la acidificacin del reactivo antiB a pH 6 puede solucionar el problema, ya que el antisuero B reacciona acidificado.
Con relacin a los colorantes, las clulas pueden ser lavadas tres veces y chequeadas
de nuevo. En el caso de anticuerpos contra antgenos de baja incidencia en los
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reactivos, la mejor forma de solucionar el problema es usar otros reactivos con nmero
de lote diferente.
Discrepancias relacionadas con el suero:
Presencia de anticuerpos irregulares fros, que reaccionan con otros antgenos
presentes en los hemates A o B usados en la prueba inversa. Para el manejo de esta
situacin se recomienda precalentar el suero y las clulas antes de mezclarse.
Por anticuerpos de bajo ttulo o ausente, este problema puede observarse con un
variado grupo de donantes con hipogammaglobulinemia o agammaglobulinemia
secundarias por uso de frmacos inmunodepresivos y otras
condiciones
inmunosupresivas.
Las Discrepancias ocasionadas por desaparicin o debilitamiento de anticuerpos
reaccionantes: La forma ms efectiva para resolver las discrepancias en este grupo es
incrementar la potencia de la reaccin a ser observada durante la Hemoclasificacin
inversa. Esto puede lograrse algunas veces incubando el suero del paciente con los
eritrocitos prueba a temperatura ambiente por 15 minutos. Si esto no logra incrementar
la reaccin, la mezcla puede ser incubada a 4 C por 15 minutos; en este caso debe
montarse autocontrol y control de clulas O ya que la baja temperatura incrementa la
reactividad de autoaglutininas - fras de ocurrencia natural que estn presentes en
casi todos los individuos.
En presencia de un anticuerpo fro donde toda la prueba inversa incluyendo las clulas
O presentan aglutinacin; el precalentamiento del suero en estudio y las clulas de la
prueba inversa y/o el recambio salino a 37 C puede solucionar la discrepancia.
Los aloanticuerpos irregulares que reaccionan a temperatura ambiente (anti P1, anti M,
anti Le a y Le b) pueden aglutinar todas las clulas de la prueba inversa, si estas
expresan el correspondiente antgeno, tal discrepancia puede ser aclarada
determinando el anticuerpo con panel de identificacin y repitiendo la prueba
empleando clulas que carezcan del antgeno.
Anticuerpos adicionales. Por autoanticuerpos: Los autoanticuerpos fros potentes
pueden causar aglutinacin de los eritrocitos del paciente. Si el anticuerpo reacciona
con todas las clulas ( p.ej. anti I) este tambin reaccionar con las clulas A y B
usadas en la prueba inversa. Los que reciben medicamentos como metildopa pueden
tener sus clulas recubiertas con tal cantidad de anticuerpo que presentan aglutinacin
espontnea a temperatura ambiente y a 37 C. Que resulten en produccin de
anticuerpos debido a antgenos exgenos recibidos. Lo cual puede aparecer como una
aglutinacin de campo mixto o completo.
Por anti A: Individuos A2 y A2B pueden producir aglutininas naturales anti-A1
adicionalmente, individuos A1B pueden producir anti-H.
Por anticuerpos irregulares: Adicionalmente a los anticuerpos no esperados y que
reaccionan con los antgenos A1Bo H, anticuerpos irregulares en otros sistemas de
grupos sanguneos al estar presentes reaccionarn con antgenos respectivos
presentes en la clula A y A usadas en la prueba inversa.
POR CIS AB: El suero de la mayora de personas cis-AB contiene un anti-B dbil.
Por poliaglutinacin: Los eritrocitos pueden tener anomalas de superficie, congnitas
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o adquiridas, que los convierten en poliaglutinables. Resolucin: En el caso de

anticuerpos fros, los eritrocitos del paciente se deben lavar con solucin salina a 37 C
y chequeados nuevamente. Con respecto al suero, el autoanticuerpo fro puede ser
detectado y luego autoadsorbido para remover el anticuerpo del suero. En el caso de
anticuerpos irregulares, el anticuerpo puede ser identificado con el uso de paneles
apropiados de clulas. En cuanto a la poliaglutinacin, pueden hacerse estudios con
lectina; segn las reacciones observadas, el tipo de poliaglutinacin puede ser
detectado.
Por incremento en las globulinas: Los niveles elevados de globulinas, resultan en la
formacin de rouleaux.
Por protenas anormales: Tanto las protenas anormales, como las proporciones
alteradas de globulinas y concentraciones altas de fibringeno pueden causar la
formacin de rouleaux.
Discrepancias entre la prueba globular y la prueba srica: cuando los resultados entre ambas
pruebas no concuerdan, generalmente se debe a cualquiera de las causas anotadas
anteriormente, para lo cual se recomienda aplicar los correctivos propuestos.
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28.2 Interpretacin de discrepancias en la Tipificacin de RH
Anticuerpo contaminado: cuando el anti-Rho(D) contiene adems del anti-D, anticuerpos

de otra especificidad. Esto se soluciona empleando anticuerpos monoclonales puros.
Anticuerpo complejo: Si se usa un anticuerpo complejo como el anti-G, en lugar de anti-D
puro, las clulas que carezcan de Rho(D) pero que posean el antgeno C sern
aglutinadas. No sucede si se usa el anticuerpo anti-D monoclonal puro.
Poliaglutinacin: Los eritrocitos poliaglutinables pueden ser aglutinados por cualquier
reactivo proteico humano ya que los anticuerpos presentes causales estn en todos los
sueros humanos.
Exceso de tiempo: Si las clulas y el antisuero permanecen juntos durante mucho tiempo
antes de leer la prueba, el medio con alta protena puede producir rouleaux y dar una falsa
aglutinacin
Efecto del suero; Sucede con clulas suspendidas en el suero de un donante con
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protenas sricas anormales, lo cual puede llevar a la formacin de rouleaux. Esta

situacin puede ser detectada utilizando un control de albmina y usando clulas bien
lavadas, suspendidas en salina y reactivos que reaccionen en medio salino.
Olvido: No se coloc el antisuero.
Elusin: Si las clulas y el suero permanecen juntos mucho tiempo antes que la prueba
sea leda, los anticuerpos pueden eluirse de clulas dbilmente reactivas y los pequeos
aglutinados dispersarse.
Anticuerpo parcial: Sucede cuando un antisuero reconoce solo un antgeno compuesto
por lo tanto no reaccionar con eritrocitos que posean las especificidades individuales
como productos gnicos separados. Por ejemplo, anti-hr (f) (ce) o clulas.
Cde/cDE o con cualquiera otra clula en la cual el antgeno hr (e) sea parte de un
producto gnico que no incluya al antgeno compuesto..
Variantes: Clulas con variantes de los antgenos como Cw pueden no reaccionar con
Reactivo estndar. Este problema solo se puede solucionar con estudios familiares.
Antgeno dbil: En individuos con expresin dbil del D, sus eritrocitos pueden ser no
Aglutinados por todos los anti-D monoclonales disponibles.
Expresin dbil del antgeno D (Du): La mayora de los antgenos D dbiles de bajo grado,
tienen una reaccin negativa o muy dbil con el anti-D, pero suelen detectarse fcilmente
cuando se usan los mismos reactivos en una prueba de antiglobulina. La idea
ampliamente difundida de que no debe administrarse sangre Du a los receptores D
negativos se basa en el hecho de que los eritrocitos Du, aunque solo son dbilmente D
positivos podran causar una respuesta inmune frente a D negativo, por lo tanto se
establece que las sangres Du positivo se deben etiquetar como D positivo, pero los
pacientes Du positivos recibirn transfusiones de sangre RH negativo.
28.3 Resolver discrepancias en el rastreo de anticuerpos

Los anticuerpos son molculas lbiles y con facilidad pierden su actividad. Por esta razn siempre que
sea posible, se deben usar sueros frescos para todas las pruebas de rastreo de anticuerpos. Las altas
temperaturas conducen a una prdida rpida de la actividad del anticuerpo y este es uno de los
principales problemas que se presentan con aquellos anticuerpos dbiles. Como sabemos la prueba de
coombs Indirecta permite detectar la sensibilizacin in vitro de los glbulos rojos Por lo cual es
necesario tener en cuenta varios factores que pueden afectar la prueba como son:
Temperatura: Los anticuerpos de la clase IgG reaccionan ptimamente a 37 C; la sensibilizacin.

Por el complemento tambin ocurre a 37 C. La incubacin a temperatura menor puede reducir la
unin del anticuerpo a su antgeno respectivo; las temperaturas mayores de 37 C pueden daar las
clulas o el anticuerpo produciendo una incongruencia en el resultado.
Medio de reaccin: La solucin de fuerza inica debe ser baja (Add liss), Albmina etc.
Tiempo de incubacin: Un periodo de incubacin de 15 a 30 minutos es suficiente para detectar la
mayora de anticuerpos clnicamente importantes esto est determinado Por el tipo de solucin de
fuerza inica baja.
El empleo de plasma interfiere con la actividad del complemento y conduce a falsos negativos.
Uso de sueros viejos: El suero viejo, el calentamiento, la descongelacin repetida, altera la
reactividad de los anticuerpos y el complemento.
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28.4 Interpretacin de discrepancias en la prueba de coombs directo
Una prueba de coombs con resultado positivo no se puede

interpretar como evidencia de una anemia hemoltica ya que es
necesario conocer el diagnstico del paciente, el tratamiento
farmacolgico, la historia transfusional reciente y los resultados
de laboratorio.
Son causa de resultados falsos negativos de la prueba de
coombs directo:
Suspensin incorrecta de las clulas.

Contaminacin con protenas.
Suspensin de clulas muy fuerte o muy dbil.
Eritrocitos viejos o mal conservados.
Anticuerpos que fijan complemento.
Recuento elevado de reticulocitos.
Resolucin: Es necesario realizar un correcto manejo de

reactivos y de las clulas para evitar inconvenientes en las
pruebas, seguir estrictamente las recomendaciones de la casa
comercial y evaluar la calidad de las muestras utilizadas.
Es causa de falsos positivos:
La contaminacin bacteriana o reactivos contaminados.

La contaminacin de la solucin salina con sustancias
coloidales.
Las muestras de sangre coaguladas y refrigeradas
provenientes de donantes con anticuerpos fros.
La administracin de drogas tales como la alfa metildopa,
penicilina y cefalosporinas.
El uso de expansores plasmticos y la inyeccin de
inmunoglobulinas.
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En cuanto a la contaminacin bacteriana, se ha comprobado que

los glbulos rojos provenientes de pacientes spticos contienen
un antgeno T activado que conduce a una prueba falsa positiva.
La solucin salina se puede contaminar con sustancias coloides
provenientes de los envases de vidrio por esto es recomendable
no envasar esta solucin en este tipo de material, no emplear
tubos rayados ni conservar la solucin salina en envases
metlicos. Las muestras de sangre para esta prueba de coombs
se deben tomar con anticoagulantes (ACD, CPD, EDTA), que
inactivan el complemento.
Es necesario tener en cuenta que los glbulos rojos pueden
sensibilizarse por el complemento a travs de dos mecanismos
principales:
Por efecto de anticuerpos que fijan complemento.

Por complejos inmunes presentes en el plasma, los cuales se
depositan sobre los glbulos rojos y causan activacin no
especfica del complemento, cuyos componentes se fijan en la
membrana eritrocitaria. Para esto se deben utilizar sueros
monoclonales especficos tales como IgG y complemento
(C3d).
Instructivo Formato DISCREPANCIAS INMUNOHEMATOLOGICAS cdigo FBS 013 versin

2
Los formatos deben ser foliados en orden ascendente en la casilla folio.
FECHA: se ingresa el da, mes y ao de la realizacin del las pruebas
N. UNIDAD: Se registra el nmero de la unidad del donante
ABO DIRECTA: Registro del resultado de grupo ABO directo
RH: Se registra positivo o negativo
ABO INVERSA: Registro del resultado de grupo ABO con las clulas A1,.A2 y B.
SOLUCIN DE LA DISCREPANCIA: se registra como se solucion la discrepancia
HEMOCLASIFICACION FINAL: Registre el resultado final de la Hemoclasificacin
OBSERVACIONES: Se registra cualquier comentario
RESPONSABLE: Nombre o sello del profesional que realizo las pruebas
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28.5 Segregacin De Unidades No Aptas

Las unidades cuyos rastreos de anticuerpos irregulares (productos plasmticos) y coombs
directo (glbulos) hayan dado positivos, deben ser sacadas del inventario y ser llevadas a la
nevera de descarte marcadas con la razn por la cual son desechadas. Y las unidades que
tienen fenotipos especiales deben quedar debidamente marcadas para su uso adecuado.
28.6 Rechequeo De Unidades Selladas
Es un proceso que se realiza con el fin de brindar completa seguridad de que la unidad est
correctamente hemoclasificada y que el grupo sanguneo que est en el sello de calidad de la
bolsa corresponda a la misma.
28.6.1 Reactivos
Tarjetas ID-Card DiaClon ABD-Confirmation for patients (monoclonal antibodies)
28.6.2 Materiales Y Equipos
Id centifuge 12 s ll
Id-pipette EP-3
Banjo ID-reader
Puntas desechables
28.6.3 Procedimiento
Preparar una suspensin de eritrocitos al 5% en con 500 uL de diluyente 2 y 25 uL de
sedimento globular de un piloto de la bolsa a rechequear
Retirar la lmina de sellado slo de los microtubos que se vayan a utilizar.
Pipetear 10uL de suspensin de eritrocitos de la primera bolsa a requechear en los
Primeros 3 microtubos de la tarjeta lD-Card
Centrifugar las tarjetas lD-Card durante 10 minutos en la lD-Centrifuge
Leer
Poner un sticker que diga UNIDAD RECHEQUEADA a cada bolsa a la cual se le
realizo este procedimiento.
NOTA: Por tarjeta se deben rechequear NICAMENTE dos unidades, una en los primeros 3
microtubos y otra en los 3 siguientes.
28.7 Reorganizacin Del rea Y Disposicin Final Del Material Usado
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Despus de terminar el montaje de las unidades, se deben limpiar los mesones, las pipetas,
los equipos y descartar los materiales desechables como puntas, tubos etc. Los tubos con
EDTA pertenecientes a las unidades montadas deben ser llevados al lavado donde su
contenido se inactivara con hipoclorito 5.000PPM y posteriormente sern depositados en
bolsas rojas para su incineracin.
29 GESTIN ADMINISTRATIVA DE INMUNOHEMATOLOGA
El manejo de una estadstica bien llevada diariamente y mensualmente permite el anlisis de
costos, consumo de reactivos, nmero de pruebas realizadas y gastos necesarios en cada
seccin; permite sacar los ndices necesarios en cada rea del Banco de Sangre para saber
datos como incremento de pruebas, uso adecuado de los reactivos, pruebas ms requeridas
y muchos datos ms segn el inters administrativo para analizar cada seccin.
Diariamente al terminar de procesar el tamizaje de los donantes se debe contabilizar
cuantos donantes, repeticiones y controles proceso y cuanto reactivo se gasto.
Estas se deben entregar a la direccin del banco de sangre el primer da del mes
siguiente. Usar una hoja por mes y llenar todas las casillas debidamente.
La limpieza de escritorio, computador, basura de papeles o barrer la seccin se le
solicita a la persona encargada del aseo del banco de sangre.
Mantenimiento preventivo y correctivo del rea fsica y equipos de la seccin: en lo
que se refiere a los equipos propios o en comodato se debe llamar a la empresa
correspondiente y si es del rea fsica se llama al rea de mantenimiento fsico del
hospital y se le informa a la coordinacin del banco de sangre para que realice el
tramite respectivo con la oficina de servicios generales
Manejo del archivo de documentos y registros de la seccin: los documentos de la
seccin se mantienen all durante el ao en que se estn usando cuando se dejan de
usar se pasan a archivo activo del banco durante cinco (5) aos y luego de all lo
dispone la administracin del hospital pasar a archivo muerto hasta que cumplan (20)
veinte aos
Plan de contingencia de la seccin toda opcin alternativa en esta seccin cambio de
equipos o insumos o necesidades extraordinarias que muy poco ocurren deben ser
primero comentadas con la direccin, y coordinacin del banco de sangre para recibir
su aval y as actuar dependiendo el caso que se presente
Programa de entrenamiento para personal nuevo en la seccin: toda persona nueva
que llegue a la seccin primero debe leerse la carpeta de presentacin y POEBS de la
seccin y las normas legales vigentes y luego los manuales de los equipos que se
usan en la seccin, si amerita solicitar por parte de los proveedores un entrenamiento
de los equipos que se usan y debe tener conocimiento de sistemas, Internet y
comunicacin.
Programa de reentrenamiento y actualizacin del personal antiguo de la seccin: debe
leerse anualmente el POEBS no solo para actualizarlo sino para recordar
procedimientos y definiciones y siempre estar buscando en Internet o en la red de
Bancos de sangre o las normas legales para estar siempre al da con lo nuevo en
Promocin y Bancos de Sangre
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Manejo de cambios, no conformidades, mejora continua, correctivos de la seccin

todos estos se deben comentar y tomar decisiones respectivas con la direccin, y
coordinacin del Banco de sangre y los correctivos realizarlos con el rea implicada
29.1 Indicadores Del Proceso De INMUNOHEMATOLOGA
Instructivo Formato DE CONSUMO DE REACTIVOS DE INMUNOHEMATOLOGA cdigo
FBS 014 versin 2
MICROPLACAS ABO/INV: Se registra el nmero de microplacas y/o filas utilizadas en el da
en la Hemoclasificacin
LISS COOMBS: Se registra el nmero de tarjetas y/o pozos utilizados en el da en rastreo de
anticuerpos o coombs de unidades
FENOTIPO. Se registra el nmero de microplacas y/o filas utilizadas en el da en la
realizacin de la prueba
ANTI D. Se registra el nmero de tarjetas y/o pozos utilizados en el da en la realizacin de la
prueba
Instructivo Formato DE ESTADISTICA MENSUAL INMUNOHEMATOLOGA cdigo FBS 015
versin 2
HEMOCLASIFICACION: Se registra el nmero de grupos ABO realizados en prueba globular
e inversa de los donantes, repeticiones y controles utilizados
VARIANTES DEBIL: Se registra el nmero de variantes Du o antgeno D dbil realizadas de
los donantes, repeticiones y controles utilizados.
FENOTIPIFICACION: Se registra el nmero de fenotipificaciones realizadas de los donantes,
repeticiones y controles utilizados
COOMBS DIRECTO: Se registra el nmero de pruebas realizadas de los donantes, repeticion
es y controles utilizados
RASTREO DE ANTICUERPOS: Se registra el nmero de pruebas realizadas de los donantes,
repeticiones y controles utilizados
LECTINA: Se registra el nmero de pruebas realizadas de los donantes, repeticiones y
controles utilizados
29.2 Reportes Externos
Son los reportes que se realizan al INS, secretara distrital, o departamental o a la casa
comercial referente a los temas de control de calidad de inmunohematologa. Peridicamente
envan un juego de clulas y sueros para realizarles las pruebas inmunohematolgicas
correspondientes y/o un caso clnico relacionado para pruebas pretransfusionales que deben
ser realizadas y analizadas para el envo de resultados. El montaje de cada una de las
pruebas es realizado por cada bacteriloga de la seccin y tan pronto se obtengan los
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resultados se entregarn a la direccin del banco de sangre para su revisin y envo

correspondiente al ente solicitante dentro de una fecha lmite.
30 BIBLIOGRAFIA
Estndares de trabajo para Bancos de Sangre 7, segunda edicin, programa de
medicamentos esenciales y tecnologa, divisin de desarrollo de sistemas y servicios de
salud, Organizacin Panamericana de la salud, Organizacin mundial de la salud, noviembre
de 1999
Gua de control de Implementacin de los estndares de trabajo para Bancos de Sangre 7.1,
programa de medicamentos esenciales y tecnologa, divisin de desarrollo de sistemas y
servicios de salud, Organizacin Panamericana de la salud, Organizacin mundial de la salud,
febrero de 2000
Estndares de Bancos de Sangre y Servicios de Transfusin AABB ed. 21 Junio 2001
Buenas prcticas de manufactura de sangre y componentes sanguneos, Ministerio de Salud,
Instituto Nacional de Salud, Bogot, agosto de 1999
Decreto 1571 de 1993 SANGRE SEGURA PARA TODOS ministerio de salud Repblica de
Colombia
Technical Manual Edition 14 AABB 2009
Boletn Epidemiolgico Distrital. Volumen 4. Nmero 1.3-30. Enero 1999. Secretara Distrital
de Salud
Corts, Armando. Administracin, Tcnicas y procedimientos en los servicios de transfusin.
Ministerio de Salud. 1998. Colombia
Vega, Marn, Montaro, Albeola. Manual de Medicina Transfusional. Editorial Mov. 1994.
Barcelona, Espaa.
Decreto 1543 Julio 1997- Jess Linares
Inmunohematologa y Transfusin Principios y
Procedimientos, Primera Edicin, Editorial Cromotip C. A. Caracas Venezuela. Ao 1986
Capitulo 16, Preparacin de Glbulos Rojos, pginas, 306, Preparacin Plasma Fresco
Congelado pagina 311, Preparacin de Plaquetas, pag 308, Preparacin de Factor Octavo,
pag 313
Mtodo OptiSystem The Botton and Top System : A New technique for Blood Component
preparation and Storage C Hogman et al. Vox Sang 1988 Pag 55 , 211, 217.
Concepts About current conditions for the prepazration and storage of platelets . G Morroff
Transfusion Medicine 1991 pag, 1, 48, 49.
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2. Amrica Association of Blood Banks Tecnical Manual 12 th Edition , ao 1996 Serologic

Principales and Trans fusion Medicine
Pginas 695 a la 709.
31 CONTROL DE CAMBIOS
Versin
tem
Descripcin de cambios
Aprob
Fecha
32 RESPONSABILIDAD
NOMBRE
ELABORO Dra. MARCELA HERNANDEZ
Dr. JOS MONGUI
REVISO
LILIBETH ESCAMILLA RUBIO
APROB Dr. LEONIDAS OLAYA
CARGO
FECHA
BACTERILOGA
AGOSTO 2014
SUBDIRECTOR CIENTFICO
AGOSTO 2014
DIRECCIN ADMINISTRATIVA
DIRECTOR CIENTFICO
AGOSTO 2014

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rea o proceso que lo gener a:

PROCESO DE INMUNOHEMATOLOGA DONANTES......................................................6

RECEPCIN DE MUESTRAS DE DONANTES..................................................................6

MANTENIMIENTO DIARIO DE EQUIPOS..........................................................................7

Equipos utilizados en la seccin....................................................................................8

3.1.1 Instructivo Formato Registro Diario de Mantenimiento de Equipos de

CONTROL DE CALIDAD DEL PROCESO........................................................................10

Montaje en el equipo SWING...................................................................................... 11

LECTURA E INTERPRETACIN DE RESULTADOS.......................................................12

Para leer las microplacas iremos al modulo Lyra........................................................12

Para leer las tarjetas iremos al mdulo Banjo.............................................................14

IMPRESIN DE RESULTADOS EN EL SOFTWARE MAESTRO....................................16

TAMIZAJE INMUNOHEMATOLGICO DE DONANTES................................................. 17

Tcnicas manuales vs aglutinacin en gel.................................................................. 17

Interpretacin De Los Grupos Sanguneos De Acuerdo A La Reaccin Presentada.20

rea o proceso que lo gener a:

DETERMINACIN DE ANTI D VI - MONOCLONAL......................................................22

FENOTIPO CON DIAMED-MP TEST DETERMINATION OF C, c, E, e, K, CTL...........27

FENOTIPO SUBGRUPOS DEL RH Y KELL CON ID GEL TEST DIAMED...................28

rea o proceso que lo gener a:

PRUEBA DE ANTIGLOBULINA DIRECTA O COOMBS DIRECTO.............................. 30

RASTREO DE ANTICUERPOS IRREGULARES PARA DONANTES...........................32

RASTREO DE ANTICUERPOS IRREGULARES CON DIACELL POOL.......................32

RASTREO DE ANTICUERPOS IRREGULARES CON ID DIACELL I-II-III....................35

RASTREO DE ANTICUERPOS IRREGULARES CON EL PANEL DE CELULAS........ 36

rea o proceso que lo gener a:

INGRESO DATOS AL SISTEMA HEXABANK............................................................... 37

REVISIN POR PARES DEL TAMIZAJE INMUNOHEMATOLOGICO......................... 40

La interpretacin de discrepancias en la tipificacin de grupos sanguneos abo....41

Interpretacin de discrepancias en la Tipificacin de RH........................................ 46

Resolver discrepancias en el rastreo de anticuerpos............................................. 47

Interpretacin de discrepancias en la prueba de coombs directo...........................48

Segregacin De Unidades No Aptas........................................................................49

Rechequeo De Unidades Selladas.......................................................................... 49

Reorganizacin Del rea Y Disposicin Final Del Material Usado.........................50

GESTIN ADMINISTRATIVA DE INMUNOHEMATOLOGA.........................................50

Indicadores Del Proceso De INMUNOHEMATOLOGA.......................................... 51

rea o proceso que lo gener a:

Recepcin de muestras de donantes

10. Segregacin de las unidades no aptas

PROCESO DE INMUNOHEMATOLOGA DONANTES

rea o proceso que lo gener a:

RECEPCIN DE MUESTRAS DE DONANTES

rea o proceso que lo gener a:

7. Si falta alguna muestra inmediatamente buscar la encuesta y la bolsa de sangre total

MANTENIMIENTO DIARIO DE EQUIPOS

Se usan los formatos FBS 010 y FBS 011

rea o proceso que lo gener a:

ID INCUBADOR 37 SI: utilizada para incubacin de tarjetas.

3.1.1 Instructivo Formato Registro Diario de Mantenimiento

MES y AO: registrar el mes y ao que se estn controlando

rea o proceso que lo gener a:

BANJO: limpieza: se registra un ok si sta es satisfactoria, si no lo es se debe limpiar y

3.1.2 Instructivo Formato Mantenimiento de Equipos de Inmunohematologa 2 cdigo FBS

rea o proceso que lo gener a:

CONTROL DE CALIDAD DEL PROCESO

DiaClon-Mp test. Microplacas con anticuerpos monoclonales deshidratados, para

Validar el proceso de tamizaje utilizando muestras conocidas para verificar el correcto

rea o proceso que lo gener a:

ID-Diluyente 2 solucin de liss

Alistar los reactivos (como se describe en el proceso de alistamiento de reactivos)

Montaje en el equipo SWING