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SUPEROVULAO E
TRANSFERNCIA DE EMBRIES EM
TEMPO FIXO
(SOVTF / TETF)
2010
O protocolo de superovulao (SOV) deve possibilitar que todos, ou a maior parte, dos folculos
recrutados se desenvolvam e ovulem. O uso de um hormnio folculo estimulante FSH
(FOLLTROPIN) exgeno essencial para que isso ocorra, porque suplanta o efeito inibitrio do
folculo dominante, favorecendo o crescimento dos folculos subordinados.
Para se conseguir a ao estimulante sobre todos os folculos em crescimento, com produo de
ocitos viveis, o FSH deve ser administrado antes do momento da divergncia da onda folicular, isto
, na ausncia do folculo dominante. Caso contrrio, os folculos que estiverem em processo de
atresia nesse momento, apesar de responder ao estmulo de crescimento, iro produzir ocitos de
baixa qualidade que, por sua vez, tero baixa taxa de fertilizao e/ou produziro embries de baixa
qualidade ou mesmo degenerados. O excesso de estmulo devido a altas doses de FSH tambm
produz diminuio da qualidade dos ocitos.
A melhor referncia para se avaliar se o protocolo e a dose de FSH foram adequados para a doadora
coletada a relao: n de estruturas viveis x n de estruturas totais. Se essa relao est acima de
70%, o resultado da coleta foi positivo. No entanto, se o n de estruturas viveis for abaixo de 70%,
preciso reavaliar alguns parmetros para que a prxima coleta seja mais eficiente. O departamento
tcnico da Tecnopec pode auxili-lo nessa avaliao e tomada de deciso.
Para se obter sucesso no programa de SOV imprescindvel iniciar a aplicao de FSH na
emergncia da onda folicular.
Face aos novos conhecimentos de dinmica folicular, conclui-se que, um importante componente
aleatrio responsvel pela variabilidade dos resultados da SOV nos protocolos clssicos, a
imprevisibilidade do incio da onda folicular e do momento da presena ou no do folculo dominante,
uma vez que a fmea pode apresentar um ciclo de 2 ou mais ondas.
Outro componente aleatrio muito importante nos protocolos clssicos a baixa eficincia de
deteco de estro (cio), uma vez que o estro determina o incio do tratamento SOV e o momento
para inseminao da doadora nesses protocolos (Tabela 01).
Cios detectados
43 %
50 %
50 %
71 %
89 %
Superovulao
Superovulao em
em tempo
tempo fixo
fixo
PGF
PGF2
LH
LH
2
BE
BE
P4
P4
14
14
FSH
FSH
10
10
mm
mm
66
22
Dia
Dia00
Dia
Dia44
Dia
Dia77
Dia
Dia88
Vantagens da SOVTF
Elimina-se a necessidade de observao de cio para iniciar um protocolo
Aplicao do FSH no momento ideal, resultando em melhores respostas de superestimulao
ovariana
Viabilidade da reduo de doses
Melhora da qualidade e padronizao dos embries produzidos
Retorno mais rpido das doadoras ciclicidade
Economia nos custos da superovulaco
Melhor aproveitamento do tempo do profissional (agendamento das coletas e possibilidade de
programar vrias doadoras ao mesmo tempo)
Melhor aproveitamento do smen, possibilitando diminuir o nmero de inseminaes
Melhora da taxa de ovulao e diminuio da incidncia de cistos
Em vista do exposto at aqui, conclui-se que o controle hormonal do ciclo estral da doadora melhora
significativamente a produtividade na Transferncia de Embries.
Caractersticas e seleo dos hormnios utilizados na SOVTF
O Benzoato de Estradiol (RIC-BE) o anlogo que apresenta farmacologia mais semelhante ao
17-Estradiol, permanecendo ativo por 3 dias aps a aplicao. Quando associado progesterona,
induz atresia de todos os folculos ovarianos, em qualquer fase do ciclo estral, com a emergncia de
nova onda folicular de forma precisa, em 4 dias (com alta confiabilidade > 95%), o que permite
iniciarmos as aplicaes de FSH no momento ideal, melhorando os resultados.
Num protocolo de SOV, no se deve utilizar os estrgenos, como indutores de ovulao por que:
1) Provocam maior variabilidade do momento de ovulao que o GnRH ou LH.
2) H um risco de estimulao excessiva por estrgenos. Lembrar que na SOV, tem-se um grande
nmero de folculos produzindo estrgenos e, adicionado aplicao exgena, cria-se problemas em
relao fertilizao do vulo, sua migrao tubrica e qualidade do ambiente uterino, podendo
diminuir os resultados.
O crescimento dos folculos induzido por aplicaes exgenas de FSH (FOLLTROPIN). O
hormnio utilizado para superovulao deve ter baixos nveis de contaminao por LH. Excesso de
LH prejudica a qualidade dos embries produzidos, diminui a taxa de ovulao (cistos) e dificulta a
captao oocitria pela tuba (crescimento exacerbado do estroma ovariano).
Tab 2. Comparao entre diferentes nveis de contaminao de LH no hormnio utilizado na superovulao
(400 mg de FSH) em vacas holandesas. (Mapletoft, R.; Canad, 2002).
vulos / Embries
Tipo de
Gonadotrofina
100% LH
32% LH
16% LH
(Folltropin)
0% LH
CL
Total
Fert%
Transf%
21
20
10,2
11,1
7,3
6,4
5,3 (73%)
4,6 (72%)
4,0 (55%)
3,9 (61%)
20
15,6
13,6
9,7 (71%)
7,7 (57%)
20
17,2
13,2
8,3 (63%)
5,5 (42%)
O GnRH (Gestran Plus) se mostra mais eficaz que os estrgenos, por produzir uma sincronizao
melhor da ovulao e, por no induzir efeitos indesejveis. Sua ao normalmente produz respostas
ovulatrias excelentes. Como o Gestran Plus estimula o pico endgeno de LH da doadora, a
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variabilidade na idade dos embries (gerada pela ovulao no simultnea dos folculos) e a taxa de
ovulao depende diretamente da quantidade e do padro de liberao de LH hipofisrio da mesma.
O LH exgeno (LUTROPIN) tem a mesma farmacologia que o LH endgeno e, como administrado
em uma nica aplicao, atinge rapidamente a circulao sangnea, mimetizando o pico provulatrio, em alta dose, garantindo a ovulao bem sincronizada de todos os folculos responsivos.
Consequentemente, na coleta se observa uma padronizao dos estgios de desenvolvimento
embrionrio devido a maior concentrao das ovulaes, viabilizando a diminuio do nmero de
inseminaes por doadora, melhor taxa de ovulao e maior proporo de embries de tima
qualidade.
Tab 3. Comparao entre GnRH (Gestran Plus ) e LH (Lutropin ) na induo de ovulao de doadoras Nelore
superovuladas em tempo fixo (P24). Baruselli et al, 2006.
Estruturas totais
Embries Grau 1
No fertilizados
Congelveis
LH (n=10)
5,9 0,3
5,0 0,4
0,0 0,0
5,4 0,3
GnRH (n=10)
6,0 0,5
3,9 0,5
0,7 0,3
4,8 0,4
B. AVALIAES PR-COLETA
fundamental para o sucesso das tcnicas reprodutivas, avaliar as caractersticas dos animais que
sero trabalhados, antes de iniciar um protocolo de SOV, quanto ao:
Estado sanitrio do animal e da propriedade
Animais com problemas clnicos, ou soropositivos para doenas como brucelose, leptospirose, IBR,
BVD entre outras, no devem participar dos programas de SOV e TE (Transferncia de Embries),
visto que, alm de comprometer os resultados, podero disseminar essas doenas atravs dos
embries (caso no seja utilizada a tripsina na manipulao dos mesmos).
Da mesma forma, se o animal em questo est sadio, mas o rebanho apresenta animais doentes,
lembre-se que esse animal est num local de alto risco sanitrio, sujeito a problemas que
comprometam o sucesso da tcnica e do profissional.
Estado corporal do animal
Animais com baixo escore corporal no respondem adequadamente a tecnologias reprodutivas em
geral. Contudo, as doadoras bovinas, na maioria das vezes, so obesas. O excesso de peso tambm
compromete a obteno de resultados, devendo-se evitar trabalhar com essas duas categorias
animais.
Manejo nutricional da propriedade
Vrios tipos de manejo nutricional so relacionados diminuio de resultados, podendo citar o uso
de nitrognio no protico na alimentao de doadoras ou receptoras; dietas com nveis
excessivamente altos de protenas ou carboidratos; deficincias minerais e vitamnicas; variaes
bruscas na dieta, gerando estresse ao animal e perda da adaptabilidade da flora digestiva, entre
outros.
Seleo de animais melhoradores
Se a SOVTF / TETF visa multiplicar a gentica de animais superiores, devemos dar preferncia em
colocar num programa, animais com bons ndices reprodutivos e produtivos e sem indcios de
patologias que possam ser geneticamente transmitidas descendncia.
Infra-estrutura e mo-de-obra
A presena de troncos adequados, laboratrios limpos, equipamentos de desinfeco, entre outras
estruturas so essenciais para a realizao adequada do servio de coleta, manipulao embrionria
e inovulao nas receptoras.
Outro ponto fundamental a mo-de-obra da propriedade. Deve-se sempre lembrar que, em grande
parte, o sucesso depende da ajuda de colaboradores. Portanto, preciso cercar-se de pessoas
cuidadosas e responsveis. O treinamento dos funcionrios deve ser feito de forma criteriosa, para
que realizem, adequadamente, os procedimentos necessrios.
C. PROTOCOLOS DE SOVTF
Abaixo esto descritos protocolos de SOVTF que apresentam resultados muito consistentes. Existem
outras possibilidades de protocolos que tambm proporcionam bons resultados, contudo, so
variaes desse mesmo princpio. No intuito desse manual divulgar receitas prontas, mas sim,
fornecer parmetros para que os profissionais selecionem o mtodo de trabalho que melhor se
adapte sua realidade.
Tab.4 Protocolo SOVTF Tecnopec Doadoras Zebunas
Manh (6:00)
Dia 0
Inserir PRIMER +
3 ml RIC-BE
Dia 4
Folltropin 20%
Dia 5
Dia 6
Tarde (18:00)
Folltropin 15%
Folltropin 10%
Folltropin 20%
Folltropin 15%
Folltropin 10%
+ 2ml Prolise
Dia 7
Folltropin 5%
Folltropin 5% + retirar
PRIMER
Dia 8
Lutropin
1 IA
Dia 9
2 IA
Dia 15
Nos anos de 2006 e 2007 a Tecnopec, em parceria com a FMVZ-USP, realizou experimentos
objetivando diminuir o nmero de aplicaes de Folltropin para facilitar o manejo dos programas
SOVTF (Tab. 5), demonstrando ser vivel o uso deste protocolo em fmeas zebunas.
Tab.5 Protocolo SOVTF Tecnopec Doadoras Zebunas 3 aplicaes FSH
Manh (6:00)
Dia 0
Inserir PRIMER +
3 ml RIC-BE
Dia 4
Folltropin 39%
Tarde (18:00)
Folltropin 39%
Dia 5
Dia 6
Folltropin 22%
Dia 7
+ 2 ml Prolise +
retirar PRIMER
Dia 8
Lutropin
Dia 9
Dia 15
1 IA
2 IA
Coleta dos Embries
Para as doadoras taurinas deve-se seguir o protocolo com 8 aplicaes de Folltropin, descrito na
tab. 6.
Tab 6. Protocolo SOVTF Tecnopec - Doadoras Taurinas
Manh (6:00)
Dia 0
Inserir PRIMER +
3 ml RIC-BE
Dia 4
Folltropin 20%
Dia 5
Dia 6
Dia 7
Folltropin 15%
Folltropin 10%
Dia 15
Folltropin 20%
Folltropin 15%
Folltropin 10%
+ 2 ml Prolise
Folltropin 5%
Folltropin 5% + retirar
PRIMER
Lutropin
Dia 8
Dia 9
Tarde (18:00)
1 IA
2 IA
10
BE
P4
P4
14
10
mm
6
2
Dia 0
Dia 5
Dia 8
Dia 17
Inovulao
Este protocolo apresenta timos resultados at em lotes de receptoras com condio corporal um
pouco abaixo do ideal, mas necessrio o cuidado de aplic-lo somente em animais pberes.
Tab.11. Protocolo de TETF Tecnopec
Manh (8:00 h)
Dia 0
Dia 8
Dia 17
Inovular Embrio
progesterona. Os resultados a campo desse protocolo, acima citado, variam de 70 a 80% de taxa de
aproveitamento, muito mais expressiva que o aproveitamento observado em outros mtodos
(prostaglandinas ou cios naturais).
Econmica e tecnicamente falando, isso representa:
Alta taxa de aproveitamento das receptoras
Diminuio do perodo ocioso das receptoras
Alto giro de receptoras
Maior nmero de prenhezes produzidas, num mesmo perodo de tempo, em relao a outros
mtodos
Diminuio dos custos de manuteno dos animais
Viabiliza-se trabalhar com lotes menores, mantendo a exigncia de animais aptos
inovulao
Maior lucratividade propriedade
DICAS TECNOPEC
2 ml RIC-BE
1 ml RIC-BE
PRIMER
D0
Reavaliao do lote
D8
D20 - 30
Concluses finais
As tcnicas de SOVTF e TETF melhoram expressivamente a produtividade de embries,
preservando a fertilidade dos animais tratados, possibilitando a programao das coletas e
inovulaes independentemente da observao de cios e, finalmente, reduzindo os custos do
programa.
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PROLISE - (PGF2), hormnio base de D-cloprostenol, de alta potncia e eficcia. Utilizado para lise do
corpo lteo em programas de IA, TE, induo de partos e tratamento de cistos luteinicos. Apresentao:
Frascos de 20 e 50 ml.
FOLLTROPIN - (FSH-p), hormnio folculo estimulante purificado, com baixa contaminao de LH, utilizado
para superovulao de doadoras de embries bovinas, caprinas e ovinas e tambm nos programas IATF e
TETF. Apresentao: Frasco com 400 mg de FSH e diluente de 20 ml.
LUTROPIN - (LH-p), hormnio luteinizante puro, utilizado para induo de ovulao e formao de corpo
lteo, tratamento de cistos foliculares, induo da liberao de testosterona em machos. Utilizado em
protocolos de superovulao em doadoras (como indutor da ovulao) e na IATF de novilhas. Apresentao:
Frasco de 20 ml (25 mg).
GESTRAN PLUS - anlogo sinttico de GnRH, base de Lecirelina, de alta potncia, longa durao e melhor
custo. Suas indicaes so induo de ovulao em programas reprodutivos (IA, IATF, TETF e SOVTF) e no
tratamento de vacas repetidoras de cio e cistos ovarianos. Apresentaes: Frascos de 20 ml.
RIC-BE Benzoato de Estradiol na concentrao de 1 mg/ml. Associado progesterona induz atresia folicular
com posterior emergncia de nova onda folicular em 3 a 4 dias. Aps a retirada da progesterona, pode ser
utilizado como indutor da ovulao em programas IATF. Apresentao: Frascos de 50 ml.
SYNGRO - meio de cultivo utilizado para manter embries oriundos de coleta das doadoras de embrio (SOV)
ou produzidos atravs da fertilizao in vitro (FIV), por mais de 12 horas. No contm produtos de origem
animal. Apresentao: Bolsas de 50 ml e caixa com 6 ampolas de 8 ml cada.
Em caso de dvidas, dispomos de uma equipe tcnica capacitada e pronta a lhe atender.
reproducao@tecnopec.com.br
Tecnopec Ltda.
Rua Emilio de Souza Docca, 480
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(11) 5671-7070.
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