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Journal of the Mexican Chemical Society

ISSN: 1870-249X
editor.jmcs@gmail.com
Sociedad Qumica de Mxico
Mxico

Lpez, Andrea C.; Plata, Mara T.; Del Cueto, Eusebio; Leal, Hermilo; Valdivia, Mara de los A.
Aprovechamiento de los residuos protenicos generados en un novedoso proceso de curtido con bajo
consumo de agua (Proceso Xipe)
Journal of the Mexican Chemical Society, vol. 43, nm. 5, septiembre-octubre, 1999, pp. 165-170
Sociedad Qumica de Mxico
Distrito Federal, Mxico

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Proyecto acadmico sin fines de lucro, desarrollado bajo la iniciativa de acceso abierto

Revista de la Sociedad Qumica de Mxico, Vol. 43, Nm. 5 (1999) 165-170

Nota tcnica

Aprovechamiento de los residuos protenicos generados en un novedoso


proceso de curtido con bajo consumo de agua (Proceso Xipe)
Andrea C. Lpez, Mara T. Plata, Eusebio Del Cueto, Hermilo Leal, Mara de los A. Valdivia
Departamento de Alimentos y Biotecnologa, Facultad de Qumica, Conjunto E, Universidad Nacional Autnoma de Mxico,
Ciudad Universitaria, Circuito Exterior, Coyoacn, C.P. 04510, Laboratorio 323, Tel. 56-22-53-12;
e-mail: mavald@servidor.unam.mx

Resumen. La primera etapa del proceso de curtido de pieles se conoce como trabajo de ribera. En ella se extraen algunos componentes
y se acondiciona la piel para el posterior curtido con cromo. El trabajo de ribera presenta serios problemas ecolgicos debido al gran consumo de agua y generacin de residuos txicos. Recientemente se desarroll un proceso de curtido innovador llamado proceso Xipe, que
reduce drsticamente el consumo de agua y elimina el uso de sustancias que generan residuos peligrosos. En esta investigacin se empleo
el mtodo Xipe para el curtido de materiales de bajo costo como la
piel de cazn y la de patas de pollo, caracterizando los subproductos
generados por cromatografa de exclusin molecular y anlisis de
aminocidos. La principal protena presente en los residuos lquidos
fue colgeno de 575,440 daltons, el cual puede tener un gran potencial de aplicaciones en la industria alimentaria y cosmetolgica.
Palabras clave: Curtido de pieles, proceso Xipe, colgeno.

Abstract. In the first stage of the tanning process, skin is conditioned


to the subsequent chrome tanning by extracting fat and proteinaceous
materials from raw skin. In this stage of the tanning process large
amounts of water are consumed and toxic effluents are produced.
Recently, a new process (Xipe process) was proposed a reduced consumption of water. In this study, low cost materials as rockfish skin
and chickens feet skin were tanned using the Xipe method. Characterization by molecular exclusion chromatography and aminoacid of
analysis the liquid residues indicated that the main protein present in
the liquid extracts was collagen, 575,440 daltons molecular weight, a
substance of great potential use for the food and cosmetic industries.
Keywords: Tanning process, Xipe process, collagen.

Antecedentes

producida precisamente en esta etapa y principalmente por el


remojo y el depilado [4, 5-10].
El uso de los mtodos tradicionales de curtido se encuentra muy difundido an en la actualidad a pesar de que ya existen algunas propuestas para curtir de una forma ms ecolgica.
Una de estas propuestas es el proceso de curtido conocido
como Xipe, que no solo evita los daos ecolgicos ya que
reduce el consumo de agua a un mnimo y usa sustancias que
no generan residuos peligrosos, si no tambin puede permitir
el empleo de sus efluentes para obtener protenas de la piel a
bajo costo [4, 5-13]. Con esta alternativa, las pieles son tratadas durante el trabajo de ribera nicamente con soluciones salinas y soluciones de NaOH y HCl (Fig. 2). Diversas ventajas
se obtienen con este proceso respecto al curtido tradicional, ya
que adems de reducirse el consumo de agua a un mnimo se
evita la descarga de materiales txicos en los efluentes. En la
fase slida de los efluentes se encuentran principalmente lpidos y protenas de la piel que es posible coagular o flocular al
modificar el pH con HCl o NaOH. Dentro de estas protenas la
principal es el colgeno, protena fibrilar que es posible identificar a travs de su peso molecular y de su perfil de aminocidos caracterstico porque cuenta con aminocidos en proporciones nicas, como es el caso del 20% de glicina, el 12%

Dentro de las industrias ms antiguas se encuentra la industria


de la curtidura, que transforma las pieles para su posible comercializacin y uso, mediante el empleo de diferentes procedimientos y sustancias qumicas. En todos los procesos existentes se requiere de una primera etapa que se conoce como
trabajo de ribera, en donde se realiza la depilacin de la piel,
la extraccin de la materia grasa y cierto tipo de protenas al
mismo tiempo que se acondiciona la piel residual para el posterior curtido con cromo (Fig. 1). Con el trabajo de ribera, llamado as porque se realizaba cerca del ro, se presentan serios
problemas ecolgicos debido a las grandes cantidades de agua
que se consumen y a la generacin de residuos txicos como
resultado del uso de diversas sustancias qumicas como hidrxido de calcio o sodio, sulfuros, cidos y bactericidas. De
esta forma, importantes volmenes de aguas residuales, desperdicios, basura y contaminacin son algunas secuelas que
actualmente se presentan en la industria de la curtidura, teniendo la no envidiable reputacin de ser una de las ms sucias y mal olientes de las industrias conocidas [17]. Es bien sabido que la mayor parte de la carga contaminante (75-80 %)
en las aguas residuales de las teneras del cuero al cromo, es

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Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 43, Nm. 5 (1999)

Andrea C. Lpez et al.

PROCESO DE CURTIDO TRADICIONAL


Piel

TRABAJO DE
RIBERA

Conservacin
sol. salina, bactericidas

Residuo 1
Conservadores*

Remojo
sol. salina, humectantes
bactericidas

Residuo 2
sol. de
detergentes

Depilado
Ca(OH)2, Na 2S

Residuo 3
sol. saturada de
Ca(OH)2, Na2S

Desencalado
Agua a 40-45C

Residuo 4
sol. de Ca(OH) 2

Rendido
Enzimas

Residuo 5
sol. de enzimas

Picle
H2SO4, azcares
Curtido
Cromo

Residuo 6
sol. de HCOOH,
H2SO4 y cromo

Neutralizacin
sol. bsicas

Residuo 7
sol. bsicas**

Recurtido
Teido Engrase
y Acabado

Residuo 8
sol. de taninos
y colorantes

*Fluoruro sdico, cido brico, xido de zinc y metabisulfito sdico.


**Brax, hidrxido de sodio, bicarbonato de sodio, bicarbonato de amonio y tiosulfato de
sodio.

Figura 1. Diagrama del proceso de curtido al cromo.

que presenta en hidroxiprolina y el 13% de prolina. El peso


molecular tambin determina las caractersticas funcionales y
por lo tanto la posible aplicacin de la protena. La fase lquida residual es neutralizada y ajustada a concentraciones salinas adecuadas para su posterior uso en el curtido de nuevas
pieles. Dada la sencillez del proceso en relacin al uso de sustancias qumicas, los subproductos recuperados dentro de los
efluentes de este proceso (protenas de la piel) adems de que
se encuentran libres de contaminantes txicos, no han sufrido
modificaciones importantes en sus caractersticas originales
por lo que resultan atractivos para su eventual aplicacin en la
industria de alimentos y farmacutica [1-14].

En la presente investigacin se estudi el curtido con el proceso Xipe de materiales de bajo costo como piel de cazn y de
patas de pollo, al igual que la caracterizacin fisicoqumica y
qumica de los subproductos presentes en los efluentes con el
objeto de promover este mtodo de curtido como una alternativa
limpia y econmica en lugares donde existe acopio de este tipo
de pieles, adems de crear la posibilidad del uso de los residuos
slidos para obtener protenas de la piel a costos menores.

Parte Experimental
El presente trabajo se dividi en tres etapas:
a) Influencia de la concentracin de NaOH.
En la primera etapa se realizaron pruebas en el proceso de curtido Xipe, empleando 6 lotes diferentes de pieles de cazn y 6
lotes diferentes de pieles de patas de pollo. Con el propsito
de obtener la mayor concentracin de material protenico sin
sacrificar la apariencia, textura y resistencia de la piel curtida
se vari la concentracin de NaOH empleando valores de 14,
18, 20 y 22Be., los residuos obtenidos se clasificaron como
residuo cido (R.Ac.), neutro (R.N.), alcalino (R.A.) y neutro
final (R.N.F) (Fig. 2). Para cada concentracin de NaOH se
tomaron 2 lotes distintos de piel realizndose para cada lote y
cada residuo por duplicado los siguientes anlisis fisicoqumicos. Determinacin de slidos totales (Secado en estufa) Determinacin de protena total (A.O.A.C., 1990. Mtodo
954.01). Determinacin de cenizas (A.O.A.C., 1990. Mtodo
930.04). Determinacin de carbohidratos totales (por diferencia). Determinacin de carbohidratos solubles (Southgate,
1990. Mtodo Fenol-Sulfrico). Determinacin de grasa Extraccin en fro con ter etlico
b) Caracterizacin cromatogrfica de los residuos protenicos.
Las protenas presentes correspondientes a los residuos alcalinos para el pollo y cidos y alcalinos para el cazn, obtenidos
del curtido a 20Be fueron tratadas con (NH 4) 2 SO 4 para una
prepurificacin [9]. Posteriormente las fracciones obtenidas se
aplicaron a un sistema de separacin por cromatografa de exclusin molecular (CEM) [12]. Se utiliz una columna de 30
2.6 cm, una fase estacionaria con un tamao de partcula de
0.32-0.063 mm (Fractogel TSK HW-55(F) MERCK) y una
fase mvil de boratos (pH 12) con un flujo de 1ml/min. Se utiliz como estndar una mezcla de protenas con un intervalo
de pesos moleculares de 1,350-670,000 daltons (BIO-RAD)
para la curva de calibracin y una solucin de colgeno 0.2%
(MERCK).
c) Anlisis de aminocidos de la fraccin protenica.
A las fracciones protenicas obtenidas en la CEM se les realiz
un anlisis de aminocidos [3-11] empleando el Autoanalizador
de aminocidos Beckman 6300, usando como estndares una
mezcla de 18 aminocidos (100nmol/ml Beckman), una mezcla
de prolina e hidroxiprolina (1.25 g/ml SIGMA) y una solucin
de protenas de colgeno (8 g/100l MERCK).

Aprovechamiento de los residuos protenicos generados en un novedoso proceso de curtido con bajo consumo de agua (Proceso Xipe)

Resultados y Discusin
a)Influencia de la concentracin de NaOH.
Para evaluar el efecto sobre la concentracin del material protenico en los residuos y la calidad de la piel producida, se
curti la piel de cazn y de patas de pollo por medio del proceso Xipe empleando diferentes concentraciones de NaOH
(14, 18, 20 y 22Be). Del curtido de cada lote de las pieles
de patas de pollo se obtuvieron 3 residuos; neutro inicial, alca-

PROCESO XIPE
Piel fresca

Conservar en salmuera
concentrada

Tratamiento cido
50ml, solucin salina:
HCl (1:1)
exclusivo para el cazn

Residuo cido
(R.Ac)
sol. salina y de
HCl vol. 40 ml

Acondicionamiento en
400 ml solucin salina
(18Be)
20 min. de agitacin

Residuo neutro
(R.N)
sol. salina 350 ml

Tratamiento alcalino
28 ml NaOH (18Be)
agitar 1 hr. Reposar 24 hrs.

Residuo alcalino
(R.A.) sol. de
NaOH 250 ml

Lavado con 94 ml sol.


salina. Agitar 15 min.
Repetir tres veces
este paso

Residuo neutro
(R.N) sol. salina
265 ml

lino y neutro final. Del curtido de cada lote de la piel de cazn


se recolectaron 4 residuos; cido, neutro inicial, alcalino y
neutro final, en este caso se requiri como primer paso un tratamiento cido para eliminar la dentina presente en la superficie de la piel de cazn (Fig. 2). Con las diferentes concentraciones de NaOH se observ una muy elevada cantidad de
cenizas en los residuos neutro iniciales tanto de piel de cazn
como de patas de pollo, 78.43% 1.265 y 66.49% 1.382
respectivamente, debido al empleo exclusivo de soluciones
salinas. Este residuo no resulta de inters debido a su bajo
contenido de protena, 1.10% 1.309 en el curtido de pollo y
1.59% 1.199 en el de cazn, as como a la escasa funcionalidad de las protenas presentes, ya que principalmente son protenas globulares, como enzimas, globulinas y albminas que
se solubilizan en la solucin salina. Las mayores concentraciones de protena se observaron en los residuos alcalinos del
curtido de patas de pollo (9.39% 1.365) al igual que en los
residuos alcalinos y cidos del cazn (8.93% 1.151 y
11.14% 1.381 respectivamente). Estas corresponden a las
protenas fibrilares de la piel como el colgeno y la elastina
principalmente, que bajo las condiciones alcalinas y cidas se
solubilizan y posteriormente se precipitan con (NH 4 ) 2 SO 4 ,
siendo estos los residuos de principal inters. En contraste, en
los residuos neutros finales se observan cantidades menores
de protena, 1.47% 1.401 en los del pollo y 4.58% 1.291
en los de cazn, la cual probablemente corresponde a protenas fibrilares remanentes de los residuos alcalinos, que son
diluidas en la solucin salina de lavado, por lo que no resultan
de inters. Los residuos con mayor concentracin de protena
se obtuvieron al emplear NaOH, como resultado de una mayor
solubilizacin de las protenas fibrilares de la piel. En la Tabla
1 se presentan los resultados promedio de las 4 repeticiones
realizadas para cada concentracin de NaOH donde se aprecia
la influencia del lcali, la cual es ms acentuada para el caso
del curtido del cazn donde la cantidad de protena aumenta
un 100% al incrementar la concentracin de NaOH de 18 a
20Be. Las pieles que se obtienen al usar esta concentracin
de NaOH presentan tambin una apariencia, textura y resistencia aceptable para su uso en las industrias del ramo. En con-

Apelambrado con 288 ml


solucin salina (18Be)
agitar 15 min. reposar
24 hrs.

NaOH
( Be)

Descarnado

14

7.35 1.282

N.D.

18

8.76 1.404

4.76 1.111

20

9.39 1.365

8.93 1.151

22

N.D.

15.45 1.395*

Curtido al cromo

Recurtido, engrase,
Secado y acabado

Figura 2. Diagrama del proceso de curtido Xipe para 100 g de piel.

167

Contenido de protena
(g de protena/100 g de slidos totales)
Pollo
Cazn

* Esta concentracin no result favorable ya que provoca severos daos en la piel


N.D. No determinada.

Tabla 1. Efecto de la concentracin de hidrxido de sodio sobre el


contenido de protena en los residuos alcalinos del curtido de piel de
patas de pollo y de cazn.

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Andrea C. Lpez et al.

(NH4)2 SO4
(g/100 ml)

Peso molecular
(Da)

Proporcin
(g/100 g de protena total)

30

933,254

35.21

173,780

42.48

141,253

20.20

40

Tabla 2. Composicin de las fracciones protenicas precipitadas al


tratar el residuo alcalino del curtido de piel de patas de pollo con
concentraciones crecientes de (NH4)2 SO4 .

(NH4)2 SO4
(g/100 ml)

30

Residuo cido
P. M.
Proporcin
(Da)
(g/100 g de
protena total)

Residuo alcalino
P. M.
Proporcin
(Da)
(g/100 g de
protena total)

575,440

2.08

575,440

17.71

208,929

2.75

31,622

8.23

114,815

15.64

15,135

4.69

251,188

39.78

295,121

45.09

23,442

2.73

17,782

2.28

50

112,201

30.58

165,958

10.37

60

8,128

2.78

56,234

9.16

40

traste, al emplear concentraciones de NaOH de 22Be la concentracin de protena aumenta debido a la mayor solubilizacin; sin embargo, queda descartado su uso debido a que
las pieles presentan severos daos como la poca resistencia al
desgarre e incluso el rompimiento impidiendo as, su posible
comercializacin.

Tabla 3. Composicin de las fracciones protenicas precipitadas al


tratar los residuos cido y alcalino del curtido de piel de cazn con
concentraciones crecientes de (NH4)2 SO4 .

b) Caracterizacin cromatogrfica de los residuos protenicos.


Fue importante caracterizar las protenas presentes en los diferentes residuos con el objeto de definir sus usos potenciales,
para lo cual, el peso molecular fue un parmetro fundamental.
Para efectuar esta determinacin, los residuos fueron tratados
con diferentes concentraciones de (NH4) 2 SO 4, y as precipitar
las protenas presentes de manera secuencial eliminando otros
compuestos no protenicos. Se recuperaron conglomerados
protenicos cuyos pesos moleculares fueron determinados cromatogrficamente a travs de la CEM. Se encontr que las
protenas presentes en el residuo alcalino de la piel de patas de
pollo solo precipitaron al emplear concentraciones de 30 y
40% de (NH 4 )2 SO 4 . En los residuos cido y alcalino de la piel
de cazn, se obtuvieron precipitados con las 4 concentraciones
de (NH4 )2 SO 4 utilizadas, 30, 40, 50 y 60%. Al separar estos

precipitados por CEM se registraron, en todos los residuos,


protenas con pesos moleculares superiores al del colgeno el
cual es de aproximadamente 300,000 daltons (Tablas 2 y 3),
esto hace suponer la presencia de protenas de gran tamao o
bien de conglomerados en donde pueden estar atrapadas molculas de colgeno que no es posible separar por medio de esta
tcnica, pero que ser esencial analizarlos posteriormente a
travs de otras metodologas para caracterizarlos con mayor
precisin.
En las fracciones obtenidas para los residuos alcalino y
cido del curtido de la piel de cazn y patas de pollo, se observa la presencia de protenas que presentan pesos moleculares
semejantes y precipitan a diferente concentracin de sulfato de
amonio, lo cual concuerda con el comportamiento de las protenas frente a los efectos de las sales.

Fig. 3. Aminograma del estandar de colgeno. Los aminocidos mayoritarios son glicina, alanina, prolina* e hidroxiprolina,** aminocidos caractersticos del colgeno. (Lehninger, 1993).

Fig. 4. Aminograma tpico de las fracciones protenicas purificadas


que presentan un perfil de aminocidos similar al colgeno. Los
aminocidos mayoritarios son glicina, prolina* e hidroxiprolina.**
Residuo pollo PM 173,780.

Aprovechamiento de los residuos protenicos generados en un novedoso proceso de curtido con bajo consumo de agua (Proceso Xipe)

Fig. 5. Anlisis de aminocidos de las 2 fracciones precipitadas con 30% (NH4 )2 SO4
del curtido de pollo.

c) Anlisis de aminocidos de la fraccin protenica.


Al analizar el contenido de aminocidos de las
distintas muestras se observ que la mayora de
las fracciones del curtido de piel de pollo y cazn
presentan un perfil de aminocidos semejante al
del colgeno comercial (Figs. 3 y 4).
Esto resulta evidente en las fracciones de
piel de pollo precipitadas con 30% de
(NH4) 2SO 4 y con pesos moleculares de 933,254
y 173,780 daltons (Fig. 5). Lo mismo se observa
en las fracciones con peso molecular de 575,440
daltons que precipitaron a 30% de (NH4 ) 2SO 4
del residuo cido y del alcalino de cazn (Fig.
6). No obstante, a pesar de las pequeas diferencias que se presentaron en los perfiles de aminocidos, tanto en las muestras como en el estn-

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dar se observa un mismo patrn en relacin con


los aminocidos glicina, prolina e hidroxiprolina.
Estos tres aminocidos conforman un factor
poco comn en la mayora de las protenas, sin
embargo son caractersticos de la protena colgeno [2-6, 7], por lo que es posible suponer que
esta protena esta mayoritariamente presente en
las fracciones purificadas.
A pesar de que la protena elastina tambin
presenta proporciones similares al colgeno en
relacin con los aminocidos glicina (33%) y
prolina (10-13%) sta no contiene hidroxiprolina
y se caracteriza por una proporcin elevada de
aminocidos hidrofbicos (40%). Las grandes
cantidades de hidroxiprolina y la proporcin de
menos de 25% de aminocidos hidrofbicos descarta la presencia de elastina en estas muestras.

Fig. 6. Anlisis de aminocidos de la fraccin de 575,440 daltons precipitada con 30%


(NH 4 )2SO4 en los residuos cidos y alcalinos del curtido de la piel del cazn.

Fig. 7. Anlisis de aminocidos de la fraccin precipitada con 40% (NH4 )2 SO4 de los
residuos alcalinos del curtido de cazn.

Por otro lado, ciertas fracciones muestran un


perfil de aminocidos con una alta proporcin de
tirosina y cido glutamico y una baja proporcin
de aminocidos hidrofbicos lo que descarta la
posibilidad de que se trate de colgeno o elastina, tal es el caso de la fraccin de peso molecular de 17,782 daltons recuperada del residuo
alcalino del cazn precipitada a 40% de (NH4) 2
SO 4 (Fig. 7); perfiles similares presentan las
fracciones con pesos moleculares de 31,622 daltons, 15,135 daltons y 56,234 daltons correspondientes al residuo alcalino de la piel de cazn y
las fracciones de 23,442 daltons y 8,128 daltons
del residuo cido de la misma piel sin embargo,
las fracciones con perfiles de aminocidos semejantes al colgeno representan la mayora de
las protenas solubilizadas 90% en los residuos
cidos y 73% en los alcalinos. En el caso de los

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Rev. Soc. Qum. Mx. Vol. 43, Nm. 5 (1999)

residuos alcalinos de la piel de pollo las 3 fracciones recuperadas poseen perfiles semejantes al del colgeno.

Conclusiones
Se estableci que el tratamiento con NaOH a 20Be resulta
ptimo para obtener la mayor cantidad de protena en los
residuos del curtido de las pieles de patas de pollo y cazn en
el proceso Xipe, permitiendo al mismo tiempo obtener pieles
con buena apariencia, textura ptima y resistencia aceptable
para su comercializacin, de acuerdo con las pruebas realizadas por una tenera en los que se observ un comportamiento
semejante a las pieles curtidas de manera tradicional. De las
fracciones precipitadas con sulfato de amonio del residuo alcalino del curtido de patas de pollo se separaron por medio de
CEM tres protenas cuyos pesos moleculares fueron 933,254;
173,780 y 141,253 daltons. Del residuo cido de piel de cazn
se separaron siete protenas con pesos moleculares de 8,128
hasta 575,440 daltons, mientras que del residuo alcalino se separaron tambin siete protenas cuyos pesos moleculares se
encuentran en el intervalo de 15,135 a 575,440 daltons. Se
estableci que en las fracciones obtenidas del curtido de las
pieles de patas de pollo la protena encontrada fue colgeno,
mientras que de la piel de cazn 90% de la protena solubilizada en los residuos cidos fue colgeno y en los residuos alcalinos el 73%, esta protena por sus caractersticas fisicoqumicas puede encontrar aplicaciones interesantes en la industria
farmacutica y cosmetolgica.

Andrea C. Lpez et al.

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