MARCO TERICO

Los hidratos de carbono, sacridos o glcidos se definen sencillamente como polihidr

oxicetonas y sus derivados.
Son los compuestos orgnicos ms abundantes de la biosfera, constituyeb una de las b
ases qumicas de la vida, cumpliendo dos funciones fundamentalmente: la energtica y
la estructural.
La mayora de ellos (sobre todo monosacridos) poseen las siguientes propiedades fsic
as:
*Son slidos, blancos y cristalinos
*Hidrosolubles, debido a la alta polaridad de la molcula
*Dulces
*Actividad ptica. La presencia de uno o ms carbonos asimtricos, permite a l
as molculas que los poseen
presentar ismeros pticos
Las propiedades qumicas de los carbohidratos son:
*Son reductores. En general, los monosacridos tienen carcter reductor
*Pueden formar steres mediante la siguiente ecuacin qumica general:
Alcohol + cido --> ster + Agua
*Pueden formar glucsidos; es decir, steres formados entre dos grupos hidro
xilo (-OH) de dos monosacridos
o entre un hidroxilo (-OH) de uno y un Hidrgeno d
e un grupo amino (-NH2)
En cuanto a su determinacin cualitativa existen una gran variedad de pruebas colo
rimtricas para poder reconocer estos compuestos ales como: la reaccin de Molisch.
Sin embargo, el grupo m numerosode reacciones generales de los glcidos es el const
ituido por los que detectan la presencia de materiales reductores, como son los
monosacridos y buena parte de los disacridos. Algunas de ellas son: la prueba de T
rommer, la de Fehling, la de Benedict, entre otras. Existen ensayos bioqumicos ms
especficos como la prueba de Tollens que permite la identificacin de pentosas, al
igual que la prueba de Bial; la prueba de Seliwanoff que detecta la presencia de
cetohexosas, la prueba de Bang caracterstica de la Fructosa y la Sacarosa y la p
rueba del cido Mrico caracterstico de la Galactosa.
*Ensayo de Fehling: La reaccin est basada en la accin reductora que tienen los azcar
es sobre los iones cpricos en medio alcalino. El ensayo de Fehling que emplea el
reactivo de igual nombre forado por volmenes iguales de dos disoluciones Fehling
A y Fehling B conduce igualmente al cido Glucnico, pasando el Cu+2 coplejo con ion
es tartrato en medio bsico (-OH) de color azul-verdoso a Cu+ que precipita en for
ma de Cu2O rojo ladrillo. El ensayo se fundamenta en el poder reductor del grupo
carbonilo de un aldehdo. ste se oxida a cido y reduce la sal de cobre (II) en medi
o alcalino a xido de cobre (I), que forma un precipitado de color rojo. Un aspect
o importante de esta reaccin es que la forma aldehdo puede detectarse fcilmente aun
que exista en muy pequea cantidad. Si un azcar reduce el reactivo de Fehling a xido
de cobre (I) rojo, se dice que es un azcar reductor. Esta reaccin se produce en m
edio alcalino fuerte, por lo que algunos compuestos no reductores como la fructo
sa que contiene un grupo cetona puede enolizarse a la forma aldehdo dando lugar a
un falso positivo. Al reaccionar con monosacridos toma el color rojo ladrillo.
*Ensayo de Molisch-Udransky: Este ensayo es una prueba para reconocimiento gener
al de carbohidratos en la que los polisacridos y disacridos se hidrolizan con cido
sulfrico concentrado hasta monosacridos y se convierten en derivados del furfural
o 5-dihidroximetil furfural los cuales reaccionan con a-naftol formando un color
prpura violeta. La prueba de Molisch es una prueba cualitativa para la presencia
de carbohidratos en una muestra de composicin desconocida. Para determinar la ca
ntidad y naturaleza especfica de los carbohidratos se requieren otras pruebas. Es
ta prueba sirve para detectar la presencia de grupos reductores presentes en la
muestra. Todos los glcidos por accin del cido sulfrico concentrado se deshidratan fo
rmando compuestos furfricos reaccionan positivamente con el reactivo de Molisch (
solucin alcohlica de alfa-naftol).

*Ensayo de Benedict: Permite el reconocimiento de carbohidratos reductores, al i

gual que el reactivo de Fehling, el de Benedict contiene ion cprico en medio alca
lino que se reduce hasta xido cuproso en presencia de azcares con el hidroxilo hem
iacetlico libre. La prueba de Benedict identifica azcares reductores (aquellos que
tienen su OH anomrico libre), como la lactosa, la glucosa, la maltosa y celobios
a. En soluciones alcalinas, pueden reducir el Cu2+ que tiene color azul a Cu+, q
ue precipita de la solucin alcalina como Cu2O de color rojo-naranja. El fundament
o de esta reaccin radica en que en un medio alcalino el in cprico (otorgado por el
sulfato cprico) es capaz de reducirse por el efecto del grupo aldehdo del azcar (CH
O) a su forma Cu+. Este nuevo in se observa como un precipitado rojo ladrillo cor
respondiente al xido cuproso (Cu2O). En medio alcalino facilita que el azcar est de
forma lineal, puesto que el azcar en solucin forma un anillo de piransico o furansi
co. Una vez que el azcar est lineal, su grupo aldehdo puede reaccionar con el in cpri
co en solucin. En estos ensayos es posible observar que la fructosa (una cetohexo
sa) es capaz de dar positivo. Esto ocurre por las condiciones en que se realiza
la prueba: en un medio alcalino caliente esta cetohexosa se tautomeriza (pasando
por un intermediario enlico) a glucosa (que es capaz de reducir el in cprico). Los
disacridos como la sacarosa [enlace B(1->4)O] y la trehalosa [enlace a(1->1)O],
no dan positivo puesto que sus OH anomricos estn siendo utilizados en el enlace gl
ucosdico.
*Ensayo con Lugol: Contiene una mezcla de Yodo y yoduro, permite reconocer polis
acridos, paricularmente el almidn por la formacin de una coloracin azul violeta inte
nsa y el glucgeno y las dextrinas por formacin de coloracin roja ya que reacciona f
ormando un complejo de inclusin.
*Ensayo de Seliwanoff: Este ensayo es especfico para cetosas y se basa en la conv
ersin de la cetosa en 5-hidro-metil-furfural y su posterior condensacin con Resorc
inol formando as complejos coloreados. Reaccin del furfural a hidroximetil-furfura
l con Resorcinol, dando lugar a derivados de color rosa-rojo. Es una prueba espe
cfica de hexosas. Las cetosas en medio cido se deshidratan ms rpidamente que las ald
osas, por lo que ambos grupos pueden diferenciarse en funcin del tiempo que tarda
en aparecer el producto coloreado.
*Ensayo de Bial: El reactivo de Bial contiene Orcinol en cido Clorhdrico, el cual
forma complejos de coloracin solo con las pentosas. Reaccin del furfural e hidroxi
metil-furfural con orcinol en medio con HCl, dando lugar a derivados de color az
ul.
*Ensayo de Tollens: Sirve para identificar aldehdos que se oxidan carboxilatos de
positndose un espejo de plata sobre las paredes interiores del recipiente que los
contiene. Cuando se calienta nitrato de plata en medio amoniacal y en presencia
del grupo carbonilo (aldehdo), el in plata se reduce a plata metlica, que se depos
ita en las paredes del tubo de cristal, formando un espejo de plata. Al aadir amo
niaco a la disolucin de nitrato de plata en primer lugar se forma precipitado, qu
e luego se solubiliza por formacin del complejo de plata amoniacal.
Referencias:
*Lehninger, A.L. (1988). "Bioqumica: Las bases moleculares de la estructura y fun
cin celular". Espaa: Ediciones Omega.
*Mucio, C.A.; Smano, J.B.; Arrizabalaga, A.M.; Enrquez, C.E. (2010). Bioqumica Bsica:
Manual de Prcticas.