UNIVERSIDAD DE CIENCIAS Y ARTES DE CHIAPAS

INSTITUTO DE CIENCIAS BIOLOGICAS

MICROBIOLOGA
Dr. Javier Gutirrez Jimnez.

PRCTICA 7.
Tipos de medios de cultivo.

- ALEJANDRA DEL CARMEN GONZLEZ CANCINO

Tuxtla Gutirrez, Chiapas.

Octubre 2016.

INTRODUCCIN: Un medio de cultivo consiste en un gel o una solucin

que cuenta con los nutrientes necesarios para permitir (bajo condiciones

favorables de pH y temperatura) el crecimiento de virus, microorganismos, clulas,

tejidos vegetales o incluso pequeas plantas, esto con propsitos variados. Segn
qu se quiera hacer crecer, el medio requerir unas u otras condiciones.
Generalmente se presentan desecados en forma de polvo fino o granular antes de
ser preparados. Al prepararse podemos encontrarlos en estado slido, semislido
y lquido.(Lpez and Lpez 2004)
OBJETIVO: Que el alumno aprenda a reconocer diferentes morfotipos coloniales,
as como la utilidad de los indicadores qumicos presentes en algunos medios de
cultivo para clasificar e identificar a las bacterias.
PROCEDIMIENTO
Sesin 1.
1. Prepar placas con agar de MacConkey, agar de eosina y azul de metileno
(E.M.B.), agar Salmonella-Shigella (SS), agar de sal y manitol y agar nutritivo.
Tambin adquir de forma comercial el agar sangre de carnero.
Sesin 2.
1. Sembr por estra cruzada los microorganismos tipo proporcionados en los
medios de cultivo. Adems de las cepas puras, sembrar una muestra de materia
fecal reciente de ave, as como una de agua encharcada.
2. Incub las placas con el medio hacia arriba a 37oC durante 24-48 h.
Sesin 3.
1. Describir la morfologa de las colonias que hayan crecido en los medios
comunes
2. Esterilic el material contaminado, lav y entregu al laboratorista.

RESULTADOS:

Se prepararon 10 placas en total de los medios:

-

Agar Sangre
Agar Chocolate
2 Agar Mac Conkey
2 Agar Sal y Manitol
2 de Eosina y Azul de Metileno (EMB Eosyne Methylene Blue)
2 Agar Salmonella Shigella

En Agar Sangre, Sal y Manitol, Mac Conkey, S.

Shigella y EMB se hizo un sembrado del
Exudado bucal del expediente 83407 con VIH,
El raspado se realiz de la lengua y paladar.
Solo
presentan crecimiento bacteriano.

Agar Mac Conkey

Agar

Mac

Conkey

Agar

Sangre

Sirve como un indicador visual de pH, distinguiendo as las

bacterias Gram negativas que pueden fermentar la lactosa (Lac+)
si se vuelven rojas y las que no pueden (Lac-) amarillas o
incoloras.
Bacterias que no fermenten la lactosa como utilizaran peptona en
su lugar, formando amoniaco, lo cual incrementa el pH del agar.
Logramos observar a un costado una parte amarilla donde hubo
crecimiento bacteriano, la bacteria del exudado bucal no fermenta
lactosa pero consumi peptona.
Presento una forma irregular, elevacin plana y margen ondulado.

Agar Sangre
Es un medio de aislamiento especialmente diseado para facilitar
el crecimiento de microorganismos exigentes.
Suplementado con sangre, es altamente nutritivo y, por tanto, est adaptado para
el cultivo de la mayora de las especies bacterianas, con independencia de su
metabolismo. El exudado bucal presento un crecimiento exitoso en el Agar
Sangre. Presento formas irregulares, circulares, Una elevacin plana y un margen
enterado, ondulado y lacerado.

Para el material Biolgico se utilizaron eses

fecales de un perro, y usamos los medios Agar
chocolate, Sal y Manitol, Mac Conkey, S. Shigella
y EMB. Afortunadamente se presento crecimiento
bacteriano en todas las placas.
Agar Chocolate.
Es un medio de cultivo enriquecido y no selectivo. Es una variante del agar
sangre. Contiene glbulos rojos, que han sido lisados por el suave calentamiento a
56 C. Este agar se usa para el delicado y exigente crecimiento de bacterias
respiratorias.
Presento formas puntiformes circulares, elevacin plana y un margen entero y
ondulado.

SAL Y MANITOL

Se trata de un medio altamente selectivo debido a

su alta concentracin salina. Los estafilococos
coagulasa positiva hidrolizan el manitol acidificando
el medio; las colonias aparecen rodeadas de una
zona amarilla brillante. Los estafilococos coagulasa
negativos, presentan colonias rodeadas de una zona
roja o prpura. Las colonias sospechosas, se
repicarn en un medio sin exceso de cloruro de
sodio para efectuarles, posteriormente, la prueba de
la coagulasa.
En el caso del este todo hidrolizo y presenta formas
puntiformes, margen entero, elevacin plana.

Agar Mac Conkey

Sirve como un indicador

visual de pH,

distinguiendo as las

bacterias Gram

negativas que pueden

fermentar la lactosa

(Lac+) si se vuelven

rojas y las que no

pueden (Lac-) amarillas

o incoloras.

Al utilizar la lactosa en el

medio, bacterias Lac+

producen acidez, lo cual

baja el pH bajo 6,8 lo

que tiene como

consecuencia la

aparicin de colonias de

color rosadas o rojas.

Lo que se presenta son

colonias de color rosa o

purpura presento una forma irregular, una

elevacin convexa y un

margen ondulado

Salmonella Shigella
Es un medio de cultivo selectivo y diferencial.
Los pocos microorganismos fermentadores de
lactosa capaces de desarrollar, acidifican el medio
haciendo virar al rojo el indicador de pH,
obtenindose colonias rosadas o rojas sobre un
fondo rojizo.
Se observa que a un costado esta rojo, este
presento formas puntiformes y circulares, una
elevacin convexa y un margen entero.

EMB
Es un medio de cultivo selectivo y diferencial:
inhibe el crecimiento de bacterias Gram positivas
y algunas Gram negativas y muestra si las Gram
negativas que crecen son o no fermentadoras de
lactosa. Esto lo realiza gracias a la eosina y el
azul de metileno.
Presento un color guinda, forma irregular,
elevacin convexa y umbilica, y un margen
ondulado y lacerado.(Mucci et al. 2006)

DISCUSIN:
Se destaca el resultado positivo que tuvieron la mayora de los medios ya que con
esto se logra observar distintas caractersticas de la misma bacteria, los tipos de
medios son de gran diversidad para distintas funciones, otros ms especficos que
algunos, y la evaluacin de formas del crecimiento de bacterias.

CONCLUSIN:
Los medios de cultivo son uno de los mtodos ms usados para el anlisis de
microorganismos con varios fines, como el de multiplicacin, identificacin,
antibiograma, entre otros, y puede ofrecer informacin valiosa sobre los mismos si
se realiza de manera adecuada e higinica para evitar la contaminacin del medio
y la alteracin de los resultados.

CUESTIONARIO:
1. Cmo funciona el opern lac en un microorganismo lactosa positivo y en
un lactosa negativo?
El opern lac es un opern requerido para el transporte y metabolismo de la
lactosa en la bacteria Escherichia coli, as como en algunas otras bacterias
entricas. Presenta tres genes estructurales adyacentes, un promotor, un
regulador y un operador. El opern lac es regulado por varios factores, incluyendo
la disponibilidad de glucosa y de lactosa. La regulacin gnica del opern lac fue
el primer mecanismo regulatorio de la expresin gentica en ser elucidado, y es
utilizado a menudo como un ejemplo clsico de la regulacin gnica en
procariotas.
El opern lac se encuentra bajo un tipo de regulacin negativa, donde los genes
pueden transcribirse siempre, salvo cuando la protena represora Lac I se
encuentra unida a la regin operadora, por la cual presenta una elevada afinidad.
En este caso, el promotor del gen lac I es constitutivo, por lo que la protena Lac I
se expresa permanentemente y permanece unida en forma de tetrmero a la zona
operadora, impidiendo la transcripcin de los genes estructurales. La regulacin
del opern funcionara de la siguiente forma:
En presencia de lactosa: la lactosa es el inductor del opern. Es capaz de unirse a
la protena represora Lac I y generar un cambio conformacional que disminuye su
afinidad por la regin operadora. De esta forma, la regin operadora queda libre, la
RNA polimerasa puede transcribir libremente los genes estructurales y la
galactosidasa puede degradar la lactosa a glucosa ms galactosa.
En ausencia de lactosa: en ausencia de inductor, la protena represora Lac I
mantiene su elevada afinidad por la regin operadora, impidiendo que la RNA
polimerasa transcriba los genes estructurales. De esta forma, el sistema
permanece cerrado con el consecuente ahorro energtico para la bacteria.(Bava
and Zuliani 2009)

2. Por medio de qu mecanismo los microorganismos haloflicos pueden

soportar altas concentraciones de soluto?
Algunos microorganismos se las han ingeniado para desarrollarse en ambientes
con altas concentraciones salinas. Las primeras evidencias de contaminacin de
alimentos por bacterias halfilas, o amantes de la sal, provienen de principios del
siglo XX, cuando se observaba crecimientos bacterianos de coloracin rojo
prpura en algunos alimentos salados. Entonces, si la idea era preservar por
largos periodos de tiempo los alimentos salados, la presencia de esas manchas
color rojo-prpura era muy mala noticia. Sucede que las bacterias halfilas
secretan carotenoides, un tipo de pigmentos que les permite obtener energa y
protegerse de la radiacin UV. Ese era el origen de las manchas coloridas; seal
de la irremediable descomposicin de los alimentos. En ambientes naturales con
elevadas concentraciones de bacterias halfilas, esa caracterstica coloracin
rosada predomina.
Hoy sabemos que las bacterias halfilas requieren concentraciones mayores a
10% de sal, o cloruro de sodio (NaCl), para vivir, y que pueden tolerar hasta 34%
de NaCl.
Las halfilas forman parte de un grupo de organismos conocidos como
extremfilos; es decir: amantes de las condiciones extremas. Los organismos
extremfilos estn adaptados a condiciones ambientales muy difciles de soportar
para la mayora de los seres vivos. Por ejemplo, pueden vivir en ambientes ms
cidos que el jugo de limn, soportar temperaturas mayores al punto de ebullicin
del agua y muy elevadas condiciones de salinidad o de radiacin.(Santanilla,
Oviedo and Vargas 2006)

3. En el caso de los medios de cultivo que emple en la presente prctica Qu

ingredientes de la formulacin funcionan como inhibidores para determinado grupo
de microorganismos? De qu manera estos inhibidores afectan a algunos
microorganismos?
4. Investigue algunos tipos de bacterias que elaboran pigmentos naturalmente.
Cul es la utilidad de stos para dichos organismos?

5. A qu se le denomina swarming, qu bacterias pueden efectuarla y con qu

finalidad?
A nivel del laboratorio clnico este es el fenmeno ms comn de los mencionados
anteriormente y se asocia con un comportamiento indeseable de Proteus spp., que
le hace extenderse sobre las placas de agar sangre, formando una pelcula de
crecimiento que obstaculiza el aislamiento de cualquier otro agente. (El-Gallad,
Sallam and El-Hawary 2001)
BIBLIOGRAFIA:
Bava, A. J. & M. V. Zuliani (2009) Desarrollo de Cryptococcus neoformans en
medios de cultivo empleados para diagnstico bacteriolgico. Acta
bioqum. cln. latinoam, 43, 195-199.
El-Gallad, A. I., A. A. Sallam & M. E. El-Hawary (2001) Swarming of intelligent
particles for solving the nonlinear constrained optimization problem.
International journal of engineering intelligent systems for electrical
engineering and communications, 9, 155-164.
Lpez, D. & M. O. Lpez (2004) Influencia de diferentes tipos de agar y del
sellado de las placas sobre la pigmentacin y el crecimiento micelial de
las especies de Fusarium. Fitosanidad, 8, 3.
Mucci, N., J. F. Aller, G. G. Kaiser, F. Hozbor & R. H. Alberio (2006) Produccin in
vitro de embriones bovinos: suplementacin de los medios de cultivo con
suero. Archivos de medicina veterinaria, 38, 97-104.
Santanilla, E. B. F., A. M. Oviedo & I. J. Vargas (2006) Hidrlisis cida de
sustratos residuales agroindustriales colombianos. Umbral cientfico, 511.