INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL

CECyT 10 "CARLOS VALLEJO MARQUEZ"

ANALISIS DE LA CALIDAD DEL AGUA

INVESTIGACIN SOBRE COLIFORMES FECALES

EQUIPO NO.7

INTRODUCCIN

Debido a las dificultades que existe para investigar en el agua a todos los
microorganismos patgenos que provoquen enfermedades de tipo hdrico, se ha
tenido que recurrir a microorganismos indicadores de contaminacin o
microorganismo testigo para evaluar la contaminacin del agua con indicadores de
contaminacin.
Tradicionalmente los coliformes fecales y los huevos de Helminto son los grupos de
bacterias y parsitos que se toman como indicadores para determinar la
contaminacin del agua.
Las bacterias coliformes fecales se encuentran en el sistema digestivo de la
mayora de los animales de sangre caliente.
Estos organismos contribuyen a la digestin de los alimentos, por lo que cantidades
sustanciales de ellos se encuentran en el tracto intestinal y se expulsan en las
heces. Los altos niveles de bacterias coliformes fecales en el agua no son peligrosas
por s mismas, sino que se utilizan como un indicador fiable para otros patgenos
que se encuentran comnmente en las aguas contaminadas con heces. Las mismas
condiciones ambientales que fomentan los altos niveles de bacterias coliformes
fecales, tambin son favorables para una amplia gama de organismos que causan
enfermedades, las cuales pueden tener un impacto significativo sobre el medio
ambiente y la salud pblica.
En esta investigacin se dar a conocer que son las coliformes fecales, que
bacterias incluyen, la importancia de su medicin, como de determinan, miden y se
muestrean las pruebas de agua para su anlisis y posteriores tratamientos.

ORGANISMOS COLIFORMES FECALES

Los coliformes fecales, que son bacterias causantes de diarreas y malestares

estomacales leves, su dosis infectiva es de aproximadamente 102 nmero ms
probable (NMP)1 por 100 mililitros de agua.
Son organismos termotolerantes de crecimiento aerbico a 44C 0.5C en un
medio de cultivo lactosado con produccin de cido y gas dentro de un periodo de
48 horas.
Las bacterias coliformes fecales se encuentran en el sistema digestivo de la
mayora de los animales de sangre caliente.
Tradicionalmente se los ha considerado como indicadores de contaminacin fecal en
el control de calidad del agua destinada al consumo humano en razn de que, en
los medios acuticos, los coliformes son ms resistentes que las bacterias
patgenas intestinales y porque su origen es principalmente fecal. Por tanto, su
ausencia indica que el agua es bacteriolgicamente segura.
Asimismo, su nmero en el agua es directamente proporcional al grado de
contaminacin fecal; mientras ms coliformes se aislan del agua, mayor es la
gravedad de la descarga de heces.
Las bacterias coliformes fecales forman parte del total del grupo coliforme. Son
definidas como bacilos gram-negativos, no esporulados que fermentan la lactosa
con produccin de cido y gas a 44.5 C +/ 0.2 C dentro de las 24 +/ 2 horas.
Generalmente, las bacterias coliformes se encuentran en mayor abundancia en la
capa superficial del agua o en los sedimentos del fondo.
Los niveles recomendados de bacterias coliformes fecales son:

Agua potable: 0 colonias por 100 ml de la muestra de agua.

Natacin: menos de 200 colonias por 100 ml de la muestra de agua
Navegar/Pescar: menos de 1,000 colonias por 100 ml de la muestra de
agua.
Revisar la NOM-004-SEMARNAT-2002, es una fuente ms confiable.

BACTERIAS QUE SE INCLUYEN DENTRO DE LOS COLIFORMES FECALES

Escherichia coli
Citrobacter
Klebsiella
Enterobacter

Escherichia coli
Tiene capacidad para producir indol a partir de triptfano o por la produccin de la
enzima -glucuronidasa. E. coli est presente en concentraciones muy grandes en
las heces humanas y animales, y raramente se encuentra en ausencia de
contaminacin fecal, aunque hay indicios de que puede crecer en suelos tropicales.
Fuentes y prevalencia:
Hay grandes cantidades de Escherichia coli en las heces humanas y animales, en
las aguas residuales y en el agua que ha estado expuesta recientemente a
contaminacin fecal. Es muy poco probable que la disponibilidad de nutrientes y la
temperatura del agua en los sistemas de distribucin de agua de consumo
favorezcan la proliferacin de estos microorganismos.
Sin embargo, el aislamiento de este microorganismo no permite distinguir si la
contaminacin proviene de excretas humanas o animales, lo cual puede ser
importante, puesto que la contaminacin que se desea habitualmente controlar es
la de origen humano.
Citrobacter
El gnero Citrobacter es un grupo de bacilos Gram negativos aerobios que se
encuentran frecuentemente en el agua, el suelo, la comida, vegetacin y como flora
saprfita en el tracto intestinal de muchos animales adems del hombre. Se trata
de microorganismos ubicuos que son causa frecuente de infecciones importantes,
especialmente en huspedes inmunodeprimidos. Es uno de los patgenos ms
importantes en unidades de cuidados neonatales hospitalarios. En los seres
humanos producen, por ejemplo, infecciones urinarias, meningitis neonatal y
abscesos cerebrales.
Klebsiella
Los organismos bacteriales del gnero Klebsiella pueden encabezar un amplio rango
de estados infecciosos, sobre todo neumona. Entre ellos, cabe destacar los
siguientes:

Klebsiella pneumoniae: infecciones

infecciones de tejidos blandos.

del

tracto

urinario,

septicemia,

Klebsiella ozaenae: rinitis atrfica.

Klebsiella rhinoscleromatis: infecciones en vas respiratorias, causando
rhinoescleroma o escleroma.

Las especies del gnero Klebsiella son fijadoras de nitrgeno y son ubicuas en la
naturaleza.
Enterobacter
Enterobacter es un gnero de bacterias Gram negativas facultativamente
anaerbicas de la familia de las Enterobacteriaceae. Muchas de estas bacterias son
patgenas y causa de infeccin oportunista, otras son descomponedoras que viven
en la materia orgnica muerta o viven en el ser humano como parte de una
poblacin microbiana normal. Algunas enterobacterias patgenas causan
principalmente infeccin del tracto urinario y del tracto respiratorio.

IMPORTANCIA DE DETERMINAR ESTOS MICROORGANISMOS EN EL AGUA

Los agentes patgenos transmitidos por el agua constituyen un problema mundial
que demanda un urgente control mediante la implementacin de medidas de
proteccin ambiental a fin de evitar el incremento de las enfermedades
relacionadas con la calidad del agua.
El agua de calidad apta para consumo humano cuando entra al sistema de
distribucin, puede contaminarse a travs de conexiones cruzadas, retrosifonaje,
rotura de las tuberas del sistema de distribucin, conexiones domiciliarias,
cisternas y reservorios defectuosos, grifos contraincendios daados y durante el
tendido de nuevas tuberas o reparaciones realizadas sin las mnimas medidas de
seguridad
Los indicadores bacteriolgicos son organismos de un grupo especfico, el cual por
su sola presencia demuestra que ocurri contaminacin y en ocasiones sugiere el
origen de dicha contaminacin. Tradicionalmente los coliformes fecales es el grupo
de bacterias indicadoras que se consideran en los estudios y trabajos para evaluar
la calidad del agua.
Histricamente, una gran cantidad de microorganismos han causado epidemias de
origen hdrico: Las Salmonellas y las Shigellas fueron las que se identificaron
primero.
MUESTRA
Y
PRESERVACIN
MICROBIOLOGICO

DE

MUESTRAS

PARA

EL

ANLISIS

Al tomar la muestra de coliformes fecales, el frasco o la bolsa, debe llenarse a 2/3

partes de su capacidad para que quede un espacio de aire en el recipiente para
facilitar el mezclado por agitacin.
Toma de muestras de un grifo situado en una caera de agua corriente
Se elige un grifo que est conectado directamente con la caera de distribucin, es
decir, que el ramal donde el grifo se encuentra no est en comunicacin con
tanques domiciliarios, filtros ablandadores u otros artefactos similares. Tampoco es
conveniente extraer muestras de grifos colocados en puntos muertos de la caera.
Como norma general, deber evitarse en absoluto extraer muestras de bocas de
incendio
y
de
los
locales
en
condiciones
higinicas
deficientes.
Se quitan del grifo los tubos de goma o dispositivos destinados a evitar el salpicado.
Luego se limpia la boca del grifo, cuidando de eliminar la suciedad que a veces se
acumula en la parte interna del orificio. Despus se deja salir agua abundante
durante 2 3 minutos y se cierra perfectamente el grifo para esterilizarlo. Es
importante comprobar, en este momento, si existen prdidas de agua por la vlvula
de cierre, pues en tal caso es prcticamente imposible efectuar una buena
esterilizacin
y conviene desechar ese grifo por otro mejor.
Se esteriliza el grifo calentndolo durante un par de minutos con la llama de una
lmpara de alcohol o de nafta (lmpara para soldar), o un hisopo de algodn
embebido
en
alcohol.

Se abre con cuidado y se deja salir el agua durante medio minuto en forma tal que
el chorro no sea intenso. Sosteniendo el frasco por la parte inferior se destapa
cuidadosamente. Evitando todo contacto de los dedos con la boca del frasco, se
llena
y
se
tapa.
Toma de muestra de un grifo situado en la caera de un pozo semisurgente
Puede tratarse del grifo de una bomba accionada a mano o molino o a motor.
Conviene elegir un grifo que est comunicado directamente con la caera
ascendente del pozo, salvo que por circunstancias especiales se desee conocer la
calidad del agua del depsito intermediario o que por lo general, se encuentra a
continuacin del pozo (tanque elevado de molino, depsito de reserva, etc.).
Es muy importante cuando se examinan aguas de pozos semisurgentes, extraer
muestras cuyas caractersticas bacteriolgicas correspondan exactamente a las del
agua del pozo. As por ejemplo, si el antepozo se encuentra en malas condiciones
de higiene, esto influir en los resultados del examen y ellos nos indicarn fielmente
la
calidad
del
agua.
Se retiran del grifo los tubos de goma, o dispositivos destinados a evitar el
salpicado.
Se limpia la boca del grifo cuidando eliminar la suciedad que se acumula en su
interior y se deja salir el agua libremente, si se trata de un pozo en uso continuo,
basta dejar correr el agua durante media hora, si el pozo en cambio, se utiliza muy
poco o est fuera de servicio, se debe dejar salir el agua durante 5 horas como
mnimo.
Una vez cerrado el grifo, se comprueba si existen prdidas de agua en la vlvula de
cierre, pues en caso afirmativo es prcticamente imposible efectuar una buena
esterilizacin
y
convendr
sustituirlo
por
otro
mejor.
Se esteriliza el grifo calentndolo durante un par de minutos, con la llama de una
lmpara de alcohol o nafta (lmpara para soldar) o la de un hisopo de algodn
embebido
en
alcohol.
Se abre con cuidado el grifo y se deja salir el agua durante medio minuto evitando
que el corro sea intenso. Sosteniendo el frasco por la parte inferior se destapa
cuidadosamente. Evitando todo contacto de los dedos con la boca del frasco, se
llena y se tapa.

DETERMINACIN DE COLIFORMES TOTALES POR EL METODO DEL NMERO

MS PROBABLE
La determinacin de microorganismos coliformes totales por el mtodo del Nmero
ms Probable (NMP), se fundamenta en la capacidad de este grupo microbiano de
fermentar la lactosa con produccin de cido y gas al incubarlos a 35C 1 C
durante 48 h., utilizando un medio de cultivo que contenga sales biliares. Esta
determinacin consta de dos fases, la fase presuntiva y la fase confirmativa.
En la fase presuntiva el medio de cultivo que se utiliza es el caldo lauril sulfato de
sodio el cual permite la recuperacin de los microorganismos daados que se
encuentren presentes en la muestra y que sean capaces de utilizar a la lactosa
como fuente de carbono. Durante la fase confirmativa se emplea como medio de
cultivo caldo lactosado bilis verde brillante el cual es selectivo y solo permite el

desarrollo de aquellos microorganismos capaces de tolerar tanto las sales biliares

como el verde brillante.