Biotecnologa ambiental

Taller de Biominera:

Muestreo

Crecimiento del microorganismo

Preparacin del medio
Se disolvieron las sales en 1 litro de agua destilada se ajust el pH final de 2 con H2SO4 10 N y
se esteriliz por autoclavado a 121 C y 15 libras de presin por 15 minutos, posteriormente se
aadi 50mM de FeSO4. 7H2O esterilizado por filtros de 0.22m.
Siembra
Se utilizo el consorcio bacteriano y se aadi aun 5% de inoculo.
Condiciones de cultivo
Se deja en una incubadora Shaker a 150RPM y a 30C hasta notar viraje de color.

Tabla 1: Se observa la composicin del medio ABS1X Y ABS50X.

Cabe aadir que se agrego 1ml/1L de elementos traza (tabla 4) antes de autoclavar.

Medio cultivo solido ABS1X con 50mM de Fe (II)

Para la preparacin de medio ABS1X solido se prepar lo siguiente:

Solucin A: est constituida por 500ml de medio ABS 2X, regulado el pH a 1.5 y
autoclavado a 121 C y 15 libras de presin por 15 minutos.
Solucin B: est compuesto por agarosa 2X la cual se calienta hasta disolver
totalmente.
Posteriormente se mezclan ambas soluciones en condiciones de esterilidad y se aade
50mM de FeSO4. 7H2O esterilizando por filtros de 0.22m.
Se trasvasa a placas unos 15ml y se deja gelificar.
Siembra
Se realiza la siembra por extensin con la asa de drigalsky con 100l de muestra, se
deja incubando a 30C por 5 a 10 das a ms.
Nota: Purificacin despues de seleccionar colonias en medio solido ABS1X.

Estudio de cintica de crecimiento

7 clulas

Reactores para evaluacin de extraccin de cobre

Columnas de lixiviacin

Taller de biorremediacin:

Aislamiento e Identificacin de bacterias

degradadoras de crudo de petrleo.

GRACIAS