INTRODUCCIN

El microscopio es el instrumento ms frecuentemente utilizado y el

ms til en el laboratorio, debido a que proporciona la amplificacin o
agrandamiento aparente que nos permite ver organismos y estructuras
invisibles a simple vista, con una amplificacin desde cien a cientos de miles
de veces (Alarcn, L. y Olivas, E. 2001).
Un microscopio es un sistema ptico que transforma un objeto en una
imagen. En general lo que interesa es hacer la imagen mucho ms grande
que el objeto, y esto se puede conseguir de diferentes formas. Existen varias
tcnicas, algunas de ellas muy sofisticadas, para ampliar imgenes de
pequeos objetos. Sin embargo, los principios implicados en ellas son los
mismos que aquellos que se desarrollaron para microscopios pticos de luz
hace ya 400 aos (Albella, J. y col., 1993).
Cabe destacar, que el microscopio ptico es el instrumento por
excelencia para el estudio de las ciencias biolgicas, sin l no sera posible
observar estructuras cuyo tamao est por debajo del lmite de resolucin del
ojo humano y este instrumento ha sido esencial para el avance del estudio
de las clulas.

MARCO TERICO

El microscopio de luz.
Es un instrumento designado para magnificar el tamao de un objeto
que no puede ser observado a simple vista. Est conformado por tres
grandes sistemas: el sistema mecnico, sistema ptico y el sistema de
iluminacin (Ver Figura 1); (Crdenas, M. y col., 2009).
Partes del microscopio.
El sistema mecnico:
Busca dar soporte a la estructura del microscopio, as como facilitar el
desplazamiento de la lmina de estudio y su enfoque. (Crdenas, M. y col.,
2009). Se encuentra conformado por:

Tubo ptico: Modulo que contiene los lentes oculares (Rodrguez, J. y

Salazar, M. 2014).
Base: Es el pie del microscopio y permite la estabilidad del aparato. Por
lo general dentro de la base se ubica el sistema de iluminacin

(Rodrguez, J. y Salazar, M. 2014).

El brazo o columna: Parte curva del microscopio que da soporte al

tubo, al revolver y a la platina (Rodrguez, J. y Salazar, M. 2014).

La platina: Plataforma sobre la que se coloca la preparacin a
observar. Tiene un agujero en el centro por el cual pasa la luz hacia el

material (Rodrguez, J. y Salazar, M. 2014).

Tornillos de focalizacin: Estn ubicados a ambos lados del brazo. El
tornillo macromtrico, el ms grande, permite el desplazamiento vertical
de la platina para acercar o alejar la muestra de los lentes objetivos. El
tornillo micromtrico, el ms pequeo, posibilita enfocar y dar nitidez a
la imagen que se observa (Rodrguez, J. y Salazar, M. 2014).

El revlver o disco porta objetivos: Dispositivo giratorio ubicado en la

parte posterior del tubo. En este se ubican los lentes objetivos
(Rodrguez, J. y Salazar, M. 2014).
El sistema ptico:
Es aqul conformado por los diferentes lentes que buscan concentrar

el haz de luz en la muestra, y aumentar la imagen de sta. (Crdenas, M. y

col., 2009). Se encuentra conformado por:

Lente ocular: Generalmente son uno o dos, segn el tipo de

microscopio. Dicha lente est formada por un cilindro ubicado en el tubo
que contiene varios lentes, que en conjunto aumentan la imagen el
nmero de veces indicado en ellos (por ejemplo 10X); (Rodrguez, J. y

Salazar, M. 2014).
Lentes objetivos: Ubicados en el revlver, por lo general son cuatro.
Cada lente posee un poder de aumento diferente, el de menor aumento
es el de 4X, los de aumento intermedio son de 10X y 40X y el de mayor
aumento es de 100X, el cual requiere que se coloque una gota de
aceite de inmersin entre la preparacin y el lente (Rodrguez, J. y
Salazar, M. 2014).
El sistema de iluminacin:
Se encarga de proveer luz adecuada para evidenciar la muestra,

controlar su intensidad y longitud de onda. (Crdenas, M. y col., 2009). Este

sistema se encuentra compuesto por:

Fuente de luz: Generalmente se encuentra ubicada en la base del

microscopio. Es una lmpara cuyo haz atraviesa el diafragma, el
condensador y la lmina fija; tras ello, penetra por el objetivo y atraviesa
los oculares hasta los ojos del observador (Rodrguez, J. y Salazar, M.

2014).
Condensador: Es un lente ubicado debajo de la platina, la cual dirige la
luz hacia el lente objetivo y ocular y la concentra sobre la muestra a

observar; se acciona con un tornillo ubicado debajo de la platina

(Rodrguez, J. y Salazar, M. 2014).

Diafragma: Se encuentra debajo del condensador, es una serie de
placas yuxtapuestas que funciona como el iris del ojo. Este sistema
contribuye a corregir la aberracin cromtica, que puede ser de
percepcin de la distancia del objeto (aberracin cromtica longitudinal)
o de percepcin de variacin del tamao de la imagen (aberracin
cromtica lateral). El diafragma se manipula por medio de una pequea
palanca lateral ubicada en el mismo (Rodrguez, J. y Salazar, M. 2014).
Cabe destacar, que algunos microscopios utilizan, en lugar de la

lmpara un espejo que recoge la luz natural, o la generada por una lmpara
externa (Ver Figura 1.1), y que la refleja hacia el condensador, situado entre
el espejo y la platina (despus del diafragma); (Crdenas, M. y col., 2009).

Caractersticas del Microscopio de Luz.

Generalmente, el microscopio de luz es capaz de producir
magnificaciones hasta de unos 1000 dimetros, con un lmite til cercano a
los 2000 dimetros. Se dice que existe este lmite til porque con
magnificaciones mayores las imgenes que se obtienen no se ven bien
definidas, sino borrosas. Por lo tanto, un microscopio de luz que lograra
aumentos mayores a los 2000 dimetros, sin la posibilidad de distinguir
detalles, es decir, sin mayor poder de resolucin, no brindara beneficio
alguno (Garca, V., 2004).
El poder de resolucin de un microscopio depende de la longitud de
onda de luz utilizada, y de una propiedad ptica del lente objetivo, llamada
abertura numrica. El grado en que los objetos pueden ser modificados para
aumentar su abertura numrica es limitado (Garca, V., 2004).
Segn lo anterior, el poder de resolucin del microscopio de luz est
limitado por la abertura numrica de los lentes objetivos y por la longitud de

onda de la luz visible. El lmite de resolucin, o sea, el objeto ms pequeo

que pueda verse ntidamente, se logra cuando se usa la longitud de onda
ms pequea de la luz visible y un objetivo que tenga la mxima abertura
numrica (Garca, V., 2004).
Son pocos los materiales que pueden ser examinados al microscopio
tal como se presentan en la naturaleza. Para ser observada, la muestra debe
ser delgada, y lo suficientemente transparente para que transmita la luz
necesaria para ser vista (Garca, V., 2004).

Tipos de Microscopio.
El microscopio ptico o de luz utiliza un sistema de lentes pticos que
va amplificando la imagen sucesivamente y comprende:
Microscopio de campo claro:
Es el instrumento ms utilizado para microscopia de rutina. All el rea
observada esta brillantemente iluminada y los objetos en estudio aparecen
ms oscuros. Generalmente producen un aumento til de unos 1000
dimetros (Ver Figura 2); (Alarcn, L. y Olivas, E. 2001).
Microscopio de campo oscuro:
Es similar al de campo claro, excepto que va equipado con un
condensador de campo oscuro y una abertura numrica baja. Esta clase de
condensador dirige os rayos de luz dentro del campo de la muestra formando
un ngulo tal, que solo los rayos que chocan contra el objeto que hay en el
campo de la muestra que son refractados y penetran en el objetivo. As, el
objeto queda brillantemente iluminado y destaca sobre el fondo oscuro (Ver
Figura 2); (Alarcn, L. y Olivas, E. 2001).
Microscopio de contraste de fases:

Es un tipo de microscopio ptico que permite un mayor contraste entre

sustancias de diferente grosor o diferente ndice de refraccin, mediante el
uso de un condensador y un objetivo especial que controlan la iluminacin
del objeto de manera que acenta las ligeras diferencias en el espesor p en
los ndices de refraccin de las estructuras celulares (Ver Figura 2.1). Las
diferencias se revelan en forma de distintos grados de brillo o de oscuridad,
pudiendo localizarse estructuras dentro de las clulas sin teir, que no son
visibles en la microscopia de campo claro (Alarcn, L. y Olivas, E. 2001).

Ventajas y Desventajas del Microscopio de luz.

Ventajas:
La utilizacin de lentes para ampliar las imgenes de los objetos
observados, permite una mejor percepcin de la imagen con mayor

nitidez en algunos detalles (Montoya, H. 2008).

Se utiliza especialmente en el estudio de clulas vivas, adems, provee

comodidad al momento de observar (Montoya, H. 2008).

El microscopio ptico o de luz puede ser monocular o binocular

(Montoya, H. 2008).
Desventajas:
El aumento obtenido con este microscopio es reducido, debido a la
longitud de onda de la luz visible que impone limitaciones (Montoya, H.

2008).
No se pueden realizar investigaciones muy profundas debido a la baja

resolucin de los lentes (Montoya, H. 2008).

En l no es posible la revelacin de los organelos (Montoya, H. 2008).

Aportes del microscopio de luz al rea de la salud.

Con el microscopio ptico, el profesor de anatoma Joseph Gerlach en
1854 descubri que las soluciones lcali de carmn tenan selectivamente los
ncleos, que permitan la distincin de estructuras celulares y subcelulares
(Gmez, A. 2002).

Adicional a esto el bacterilogo dans Hans Christian Joachim Gram

mediante las tinciones anilina y violeta de genciana y luego de una solucin
yodada y etanol, encontr que algunas bacterias retenan el color violeta
(gram positivas) y otras no (gram negativas) y este gran aporte sigue siendo
de enorme utilidad en el estudio de la taxonoma bacteriana y tambin de la
teraputica antibitica en la cual se asoci la utilizacin de la penicilina.
Esta invencin dio la posibilidad de estudiar las bacterias y microbios lo que
dio marcha a la bacteriologa y los anlisis de sangre donde se descubrieron
los glbulos rojos y blancos, que supuso un fuerte avance en el mundo del
Bioanlisis (Gmez, A. 2002)

CONCLUSIN

Los microscopios poseen una importancia enorme en la investigacin

cientfica, gracias a ellos hemos descubierto miles de cosas que no se
7

pueden ver a simple vista pero es muy importante saber de ellas

como: las clulas, microorganismos y bacterias.
La invencin del microscopio fue el punto de partida de una gran
variedad de avances en el mundo de la ciencia, ya que mediante la
observacin con el microscopio ptico se llega a la comprensin de
fenmenos y procesos que se producen en la naturaleza.
El microscopio ha sido una de las herramientas esenciales para el
estudio de la ciencia de la vida, con l se abri al ojo humano hacia
una nueva dimensin.
La disminucin de la longitud de la onda permite ver objetos cada
vez ms pequeos de manera individualizada, lo que a su vez
aumenta la calidad en los detalles de lo que se observa, los
sistemas pticos no son perfectos, pueden presentar ciertos
defectos que interfieren con la calidad de las imgenes formadas.
El microscopio es uno de los instrumentos ms utilizados en el
laboratorio, su uso debe ser de forma correcta para que la
observacin sea lo ms clara posible, adems de que se deben
mantener las medidas para su uso, manipulacin y mantenimiento.
El microscopio ptico ha aportado gran cantidad de informacin a la
ciencia y gracias a ellos existen promotores y forjadores de salud,
es de gran importancia el conocimiento y desarrollo de destrezas en
este instrumento ya que con l se puede combatir enfermedades,
realizar experimentos que contribuirn en la
problemas de salud, crear medicinas

prevencin de

que acaben con las

infecciones bacterianas que afectan al gnero humano.

REFERENCIA

Alarcn, L. y Olivas, E. (2001).

Manual de prcticas de

Microbiologa bsica y Microbiologa de alimentos. Primera Edicin,

Editorial Universidad Autnoma de ciudad Jurez. Pp 09-10.
Albella, J., Cintas, A., Miranda, T. y Serratosa, J. (1993). Introduccion a
la Ciencia de materiales. Primera Edicion, Editorial Consejo Superior de
Investigaciones Cientficas. Pp 555.
Case, C., Funke, B. y Tortora, G. (2007). Introduccin a la
Microbiologa. Novena Edicin, Editorial Medica Panamericana. Pp 60,61, 22.
Crdenas, M., Cediel, J., Chuaire, L.,Garca, A., Payn, C., Snchez,
C. y Villegas, V. (2009). Manual de Histologa tejidos fundamentales. Primera
Edicin, Editorial Universidad del Rosario. Pp 20-21.
Donnersberger, A. y Lesak, A. (2002). Libro de laboratorio de
Anatoma y Fisiologa. Primera Edicin, Editorial Paidotribo. Pp 18.
Garca, V. (2004). Introduccin a la Microbiologa.Segunda Edicin,
Editorial Universidad Estatal a Distancia. Pp 26.
Gmez, A. (2002). Del Macroscopio al Microscopio. Primera Edicin,
Editorial Universidad Javeriana. Pp 258.
Montoya, H. (2008). Microbiologa bsica para el rea de la salud y
afines. Segunda Edicin, Editorial Universidad de Antioquia. Pp 18.
Rodrguez, J. y Salazar, M. (2014). Manual de prcticas de laboratorio
de biologa general. Primera Edicin, Editorial Universidad Estatal

Distancia San Jos. Pp 21-23.

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ANEXOS

Figura 1. Caractersticas pticas y mecnicas del microscopio.

11

Fuente: Donnersberger, A. (2002).

Figura 1.1. Diagrama de un microscopio de luz.

12

Fuente: Garca, V. (2004).

13

Figura 2. Microscopio de campo claro y campo oscuro.

Fuente: Case, C. y col.,(2007).

Campo Claro: (Parte superior) Trayecto de la luz en el microscopio de campo claro. (Parte inferior)
La iluminacin brillante muestra las estructuras internas y el contorno de la cubierta externa. Campo
oscuro: (Parte superior) La nica luz que llega a la muestra incide en ngulo: as, solo la luz reflejada
por la muestra (rayos azules) alcanzan el objetivo. (Parte inferior) Contra el fondo negro que se ve con
la microscopa de campo oscuro los bordes de las clulas son brillantes, algunas estructuras internas
parecen brillar y la cubierta externa es bastante visible.

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Figura 2.1. Microscopio de contraste de fase.

Fuente: Case, C. y col., (2007).

(Parte superior) En la microscopa de contraste de fase la muestra es iluminada por la luz que pasa
a travs de un diagrama anular. Los rayos luminosos directos (no alterados por la muestra) siguen un
trayecto diferente del de los rayos de luz que son reflejados o difractados cuando atraviesan la
muestra. Estos dos conjuntos de rayos se combinan en el ojo. Los rayos de luz reflejados o
difractados se indican en azul; los rayos directos estn en rojo. (Parte inferior) La microscopa de
contraste de fases revela una mayor diferenciacin de las estructuras internas y muestra con claridad
la cubierta externa.

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