SISTEMAS PTICOS Y MECNICO DEL MICROSCOPIO

RELACIN ENTRE EL AUMENTO TOTAL Y EL REA DEL CAMPO

VISUAL
AUTORES: Martnez- Aguilar, Lina, Cardona- Chves, Angie, Garzn- Galindo,
Jenny, Lpez- Galindo, Mara.
RESUMEN
El microscopio es la herramienta ms importante del laboratorio, por eso se deben
conocer todas sus partes y funcionamiento a la hora de analizar una muestra, y el
tamao en que sta se puede visualizar logrando un enfoque detallado. El objetivo
de este trabajo, es lograr identificar las partes, forma de manejo, y la relacin entre
el aumento total y el rea del campo visual de un microscopio, para ello, se
realiz un montaje de letra impresa, adems, se hizo un montaje hmedo donde
se procedi a utilizar papel milimetrado para hallar el dimetro del campo visual.
Se encontr que la letra se vio al revs y al trasladarla de lado a lado, se mueve
en la direccin contraria, al igual que se pudo hallar el aumento total y el rea de
campo visual con las respectivas frmulas.
Las observaciones se deben en base al conjunto de lentes que tiene el
microscopio, y la corta longitud focal existente. Por tanto, se encuentra que los
sistemas de lentes son convexos (Pia, 2013).
Se espera que en la prxima prctica, los lentes de los objetivos se encuentren
totalmente limpios para tener una mejor claridad de lo que se observa y poder
completar todo el procedimiento dado.
Palabras clave: microscopio, lentes, campo visual.

INTRODUCCIN
El microscopio naci de los primeros microscopistas como van Leeuwenhoek
(1632-1723) usaron un microscopio simple, que despus otros como Hooke
cambiaron por microscopios compuestos primitivos en carencia de aberracin
cromtica para sus lentes simples que mejoro en 1827 por Lister que introdujo los
microscopios acromticos mejorados y se ha seguido desarrollando hasta hoy.
los microscopios de luz moderno tiene un aumento hasta 2000 veces (x2000), ya
que la resolucin limita un mayor aumento de la luz visible, as la resolucin se
define con la longitud de onda de luz que usa el microscopio definido como
0.6
r=
la apertura numrica de la lente (NA), producto del seno de la apertura
NA
angular

y el ndice de fraccin n, que es el medio por el cual pasan los rayos

de luz ,su valor mximo es de 1.4, debido a que dos objetos ms cercanos del
lmite se observan como una estructura y as el lmite de resolucin con longitud
de onda 560 mm es cerca de 0.24m .
El microscopio de luz compuesto est formado por dos sistemas al ptico y el
mecnico. Las partes del microscopio ptico son, el ocular es la lente visual
cerca del ojo observador, que ampla la imagen del objetivo , el objetivo es la
lente situada cerca de la muestra, amplia la imagen de la muestra por medio del
Estudiante
Biologa,
1ercantidad
Sem., Universidad
los Llanos
los Llanos. que son
diafragma
que
regula la
de luz quedeentra
en el de
condensador
dirigidos por el foco. Esta mecanismo se sostiene del mecanismo mecnico,
donde el soporte mantiene la parte ptica con dos partes, el pie o base y el
brazo, otro es la platina, es fija y es donde se deposita la preparacin, el cabezal
contiene los sistemas de lentes oculares donde varia si es monocular o
binoculares y el revolver contiene los sistemas de lentes llamados objetivos ,que
al girar cambia los objetivos para enfocar los tornillos de enfoque, donde el macro
mtrico mejora el enfoque y as para desplazar la preparacin se usa el carro. El
microscopio ptico, de luz convencional es un sistema de dos lentes diseados
para aumentar iluminacin de forma uniforme y adecuada. La lente objetivo
aumenta y forma una imagen real en el tubo del microscopio; esta imagen es
objeto de la lente ocular que crea una segunda imagen virtual de la muestra,
aumentada. Segn el poder de aumento de las dos lentes las lentes ocular solo
puede crear una imagen aumentada formada por el objetivo pero no puede
mejorar la resolucin. (Chris A. Smith)
En un microscopio la muestra se ilumina con un rayo de la luz modulado por una
serie de lentes y diafragmas. Debajo de la platina est situada la lente del
condensador que proporciona un cono angular de luz que cubre precisamente la
apertura angular del objetivo, as la apertura numrica de la lente (NA) del
objetivo y del condensador deben coincidir muy cercanamente. Debajo de la
lente del condensador est el diafragma del iris que es ajustable, su funcin es
ajustar y limitar el ngulo del cono de luz que sale del condensador. Para
obtener una resolucin optima del diafragma de iris debe ajustarse correctamente
para cada objetivo , si se utiliza la mxima apertura , lo que da la mxima NA para
el objetivo, que resulta un brillo excesivo ;si la apertura no logra mxima NA no
tendr mxima resolucin , de esta forma se debe dar un equilibrio entre la
iluminacin ptima y la resolucin mxima , as entonces se usa el condensador
para ajustar la luz que ilumina de tres cuartas partes de la apertura del lente del
objetivo que se use.
El aumento no es suficiente para sacar el mejor partido del microscopio, pues otro
factor es la resolucin que determina el detalle de lo que se ver, as el poder de
una lente est determinado por el grado de curvatura de su superficie y distancia
focal, as las dos lentes es capaz de producir una imagen aumentada cuyo valor
se enuncia con la letra x, donde 10x significa que la imagen fue aumentada 10
veces. Para conocer el aumento total se usa la siguiente formula:
AUMENTO TOTAL: aumento del objetivo x aumento del ocular

Aunque con esta frmula se obtiene el aumento total, por medio de otras tcnicas
se logra aumento suplementario, aunque el poder de aumento tiene sus lmites y
el aumentar imgenes significa la perdida de informacin y detalles, lo cual es
resuelto por la resolucin, que es la capacidad que tiene el sistema ptico de aislar
dos puntos que se encuentran muy prximos entres si, de manera que se puedan
ver individualizados uno del otro, donde mientras ms corta sea la distancia entro
esos puntos y el objeto, ms finos sern los detalles, esta distancia se conoce
como lmite de resolucin con un aumento mximo de 1000x. El aumento total y el
dimetro del campo visual me permiten conocer el rea de campo visual para as
saber el tamao del objeto que observo segn el lente. Al observar objetos entre
ms pequeos al microscopio, mayor ser la desviacin de la luz incidente
proveniente del objeto, as a ms rayos capturados mayor resolucin. Para
aumentar la resolucin se coloca un lquido en la lmina cubreobjetos y el objetivo
como ciertos aceite (aceite de cedro) cuyo ndice de refraccin es igual al vidrio.
(Armas.)
La tcnica ms utilizada es la convencional de campo brillante pero hay otras
tcnicas de microscopio de luz, como la microscopa de campo oscuro se usan
un bloqueador de luz en la parte central del condensador para evitar que la
muestra se ilumine, lo que forma una imagen brillante con un fondo oscuro
muestra sin teir, sin embargo la resolucin es la misma o inferior. Por otro lado
est la microscopia de contraste de fases que es posible por variaciones en las
propiedades de la luz que se perciben con cambios en la intensidad ( ) y
cambio en el color ( ), normalmente una muestra debe estar teida para crear
contraste a colorear regiones. Sin embargo tambin se pueden dar variaciones
en la fase de luz por grosor, o por diferencia en el ndice de refraccin dentro de
la muestra. El microscopio de contraste de fases aumenta 90 de diferencia de
fases entre rayos, el contrate es alto lo que permite estudiar celular y tejidos
vivos. Otro tipo de microscopio es La de Fluorescencia que es la capacidad de
ciertas sustancias de absorber energa como radiacin de una longitud de onda
mayor, con un microscopio convencional con adhesin e inclusin de filtros que
excita rayos de luz con radiacin entre el ocular para observar la muestra,
aunque su resolucin no es mejor pero es posible obtener mejores resultados.
(Chris A. Smith)
Debido a que el microscopio compuesto puede alcanzar un aumento mximo de
1000x con un poder de resolucin 0,2 m; esta limitacin ha sido resuelta
empleando el microscopio electrnico que emplea un haz de electrones en lugar
de un rayo de luz visible para mejorar el estudio morfolgico. Donde el lmite de
resolucin es de 0,2 nm y el tejido se somete a un tratamiento especial. El
microscopio electrnico fue construido y mostrado pblicamente en el ao 1931,
es el nico mtodo que hace posible la toma de imgenes directas de estas
estructuras a niveles supramoleculares, detalles que son denominados tambin
con el termino ultra estructura celular que podran ser observan con un haz de
electrones enfocado con lentes electromagnticas. (Armas.)

MATERIALES Y METODOS
Fig. 1. Diagrama de flujo (Fuente: elaborado por los autores)

RESULTADOS
Montaje de letra impresa

Muestra: papel impreso

Tinta
sobr
e

Tipo de coloracin: no aplica

Ocular: 10x
Objetivo: 4x
Aumento total: (10x) (4x)= 40x
Fibras vegetales
de celulosa del
papel

Fig 2. Montaje de letra impresa en

microscopia ptica, aumento 40x (Fuente:
Elaborado por los autores)

Se observ que la letra e se proyecta al revs, se aprecian las fibras de celulosa

que tiene el papel, adems, la tinta de la letra no cubre todos los espacios,
haciendo que la textura se vea deformada.

Cmo se observa la imagen?

Se observa inversa la letra (Figura 2).

Al desplazar el carro a la derecha y a la izquierda, cmo se ve el

desplazamiento de la imagen?

La imagen se mueve en el sentido inverso (Vdeo 1).

Montaje hmedo
Muestra: papel milimetrado
Tipo de coloracin: no aplica
Ocular: 10x
Objetivo: 4x
Aumento total: (10x) (4x)= 40x

Papel
milimetrad

Fig. 3. Montaje hmedo (Fuente: Elaborado por

los autores).

Muestra: papel milimetrado

Tipo de coloracin: no aplica
Ocular: 10x
Objetivo: 10x
Aumento total: (10x) (10x)= 100x
Papel
milimetrad

Fig. 4. Montaje hmedo (Fuente: Elaborado por los autores).

Muestra: papel milimetrado

Tipo de coloracin: no aplica
Ocular: 10x
Objetivo: 40x
Aumento total: (10x) (40x)= 400x
Papel
milimetrad

Fig. 5. Montaje hmedo (Fuente: Elaborado por los autores).

Tabla 1. Anlisis entre el aumento total y rea del campo visual del
microscopio
Objetiv
o

Ocular

Aument
o total

Dimetro
(mm)

Radi
o
(mm)

rea campo
visual
(mm)

Papel
milimetrad

4x

10x

40x

4,5

2,25

15,90435

10x

10x

100x

1,7

0,85

2,269806

40x

10x

400x

0,7

0,35

0,384846

100x
10x
1000x
*
*No pudo ser determinado porque el objetivo no estaba en ptimas condiciones.
Se observ que se puede determinar el dimetro del campo visual del
microscopio, contando el nmero aproximado de cuadros que se puedan ver. Con
la medida aprox. del dimetro, hallamos el radio y posteriormente, el campo visual.
Atotal= (Aocular) (Aobjetivo)
Dimetro= 2r
2
ACV= ( )(r )

Qu tipo de relacin encuentra entre el aumento total y la superficie del

campo visual?

Cuanto mayor sea el aumento total, el rea de campo visual va disminuyendo

(inversamente proporcionales).

DISCUSION DE RESULTADOS
El microscopio, se compone de dos sistemas: ptico y mecnico. La parte
mecnica est formada por todo aquello que no se involucre en la formacin de la
imagen, por ejemplo: platina, tornillo micro y macromtrico, etc. La parte ptica la
conforman todos los elementos que se involucren en ampliar la imagen, por
ejemplo, objetivos, oculares, etc. (Annimo., 2015).
Las dos lentes son capaces de producir una imagen aumentada cuyo valor es x,
donde 10x significa que la imagen fue aumentada 10 veces.
La letra se proyecta al revs (Figura 2 y 6), debido a que se compone de dos
lentes convexas el microscopio, el objetivo y el ocular, interpuesta entre el ojo y un
objetivo cercano, se encarga de reducir la diferencia (Narvez, 2005). En las
lentes convexas, mientras mayor sea la curvatura, menor ser la distancia focal y
mayor ser el aumento. Lo mismo sucede al desplazar el carro de un lado a otro,
el montaje se mueve en sentido inverso (Vdeo 1).
As observamos que, entre ms crezca el aumento total, tendremos menor campo
visual, pero en la resolucin mientras ms corta sea la distancia entre esos
puntos, ms finos sern los detalles. La distancia entre esos dos puntos se conoce
como Lmite de Resolucin, donde es posible alcanzar un aumento mximo de
1000x referido como el Poder de Resolucin y, se usa como un indicador del
rendimiento del microscopio.

En la figura 3, se puede observar que se llev a cabo para hallar la relacin entre
el aumento total y el rea del campo visual. El campo visual, es el rea en la cual
un objeto puede ser detectado por el ojo humano
mientras este est enfocado en un punto central
desde una visin perifrica; el campo visual de un
microscopio es circular y cambia con el aumento
total (que depende del objetivo y el ocular), cuando
tenemos el montaje hmedo en 40x (Figura 3), el
rea del campo visual fue de 15,90435 mm, es
decir, se observ entre aproximadamente un 4.5 mm
de 1cm ; en el siguiente objetivo (100x) (Figura 4), el
rea del campo visual fue de 2,269806 mm, es
decir, aproximadamente lo que se poda ver del
papel milimetrado era 1.7 mm; para el tercer objetivo
(Figura 5) (400x), el rea del campo visual fue de
0,384846 mm, por lo que eran aproximadamente
unos 0.7 mm del papel milimetrado. De acuerdo al
mayor aumento que se tenga, as ser la desviacin
de la luz incidente proveniente del objeto desde su
trayectoria inicial, es decir, entre ms rayos
capturados, mayor ser la resolucin, lo que conlleva
a que, para aumentar la resolucin se usa el aceite de inmersin sobre la
muestra, cuyo ndice de refraccin es igual al del vidrio cubreobjetos, eliminando
toda reflexin de los rayos luminosos donde la relacin de apertura y resolucin es
directamente proporcional, en otras palabras, a mayor apertura, mayor resolucin.
Se espera que en la prxima prctica, se pueda determinar el rea de campo
visual en un aumento total de 1000 (con ayuda del aceite de inmersin), ya que no
fue posible porque nuestros objetivos se encontraban en malas condiciones.
Fig. 6. Poder del microscopio
(Fuente:
http://datateca.unad.edu.co/c
ontenidos/201101/curso/Micr
oscopio.htm).
En conclusin:

La relacin de los lentes objetivo y ocular invierten la imagen por ser

cncavo y convexo.
Entre mayor apertura numrica del objetivo, mayor resolucin.
El poder de aumento del lente se determina por el grado de curvatura de su
superficie y distancia focal.
La relacin apertura numrica del objetivo y condensador (resolucin), es
directamente proporcional, entre mayor apertura, mayor resolucin.

La relacin de longitud de onda y resolucin es inversamente proporcional,

donde a menor longitud de onda mayor resolucin.
El aumentar las imgenes acarrea prdida de informacin o detalles del
objeto estudiado
A mayor es el aumento total, menor es el campo visual
A mayor apertura, mayor resolucin.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

Aguilar, L., Chves, A., Galindo, J., & Galindo, M. (2016). Montaje de letra impresa
y montaje hmedo.
Medicinas. (2016). Estructura del espermatozoide.
Retrieved from <span
lang="ES-CO" style="font-size:11.0ptRetrieved from mso-bidi-language:ARSA">https://www.google.com.co/search?q=espermatozoide+tama
%C3%B1o&espv=2&biw=1366&bih=667&tbm=isch&tbo=u&source=univ&sa
=X&ved=0ahUKEwiWj_jHtrOAhVJ82MKHf3dC1QQsAQIJA&dpr=1#imgrc=TcGMZ0NDUb_SWM
%3A<span lang="ES-CO" style="font-size:12.0pt
Moreno, A. (2016). UROCORDADOS (= TUNICADOS).
Retrieved from
http://www.ucm.es/data/cont/docs/465-2013-08-22M2%20UROCORDADOS.pdf
Narvez,
D.
(2005).
La
microscopia.
Retrieved
from
http://www.medic.ula.ve/histologia/anexos/microscopweb/MONOWEB/capitu
lo3_4.htm#factores
Pia,
C.
(2013).
Microscopa.
Retrieved
from
http://datateca.unad.edu.co/contenidos/201101/curso/Microscopio.htm
Rojas, E. (2016). Paramecio. Retrieved from <span lang="ES-CO" style="fontsize:11.0ptRetrieved from mso-bidi-language:AR-SA"><span style="fontsize:12.0ptRetrieved
from
ES-CO">http://eca-ensenanzamediabiologia.blogspot.com.co/2011/04/paramesio.html

ANEXOS

Identificar las diferentes partes del microscopio

a)
b)
c)
d)
e)
f)

Oculares
Objetivos
Portador del objeto
Lentes de iluminacin
Sujecin del objeto
Espejo de iluminacin

Fig. 7. Partes del microscopio (Fuente: gua de

laboratorio).

Video 1. (Aguilar, Chves, Galindo, & Galindo, 2016). Montaje de letra impresa y
montaje
hmedo,
https://www.youtube.com/watch?
v=8lOLy9_wXQw&feature=youtu.be

CUESTIONARIO
1. Que son los tunicados y que caractersticas tienes especiales estos
organismos? Son una especie marina hermafrodita, y solitarias o coloniales.
Se les llama tunicados a los urocordados adultos, en el cual no se mantienen
la notocordio, el cordn nervioso ni la cola posnatal; las caractersticas
distintivas de los Cordados slo aparecen en la larva. El cuerpo est cubierto
por una tnica de secrecin, la tnica o manto; est formada por una secrecin
ectodrmica gelatinosa de tunicina (un tipo de celulosa); contiene agua,
protenas y carbohidratos. Hacia ella migran clulas mesodrmicas que le
confieren un carcter conjuntivo y tambin algunos vasos sanguneos. Con
faringotremia; alimentacin por filtracin. (Moreno, 2016)

2. Cul es el tamao promedio de un espermatozoide? Investigue la

organizacin estructural interna del espermatozoide.
Los espermatozoides son invertebrados. Forman parte de los procordados y
tienen tres caractersticas: presencia de notocordio, tubo neuronal y hendiduras
farngeas. Tiene una cola veinte veces ms larga que su propio cuerpo, que
puede medir ochenta y ocho milmetros de longitud. Tamao aproximado de 50
micras

Fig 8. Partes del espermatozoide. (Fuente: https://www.google.com.co/search?

q=espermatozoide+y+sus+partes&espv=2&biw=1366&bih=667&tbm=isch&tbo=u&
source=univ&sa=X&ved=0ahUKEwjsqeC3turOAhXKKh4KHZe5BnYQsAQIGQ#img
rc=XKjLlfYWuwzbJM%3A)
Partes del espermatozoide
En los gametos masculinos se identifican tres partes principales (Figura 8):
Cabeza: consta de ncleo y en su parte superior existe una zona ms gruesa
llamada acrosoma encargada de perforar la membrana del vulo para lograr
la fertilizacin. La cabeza del espermatozoide contiene ADN que, al combinarse
con el del gameto femenino, crear el cigoto humano.
Porcin media: cuerpo alargado con gran cantidad de mitocondrias, orgnulos
que proporcionan energa para lograr el movimiento.
Cola: tambin llamada flagelo, es apndice en forma de ltigo que permite el
desplazamiento de estas clulas sexuales en el lquido seminal, a fin de alcanzar
el tero y la trompa de Falopio en el aparato reproductor femenino y fertilizar el
vulo. La cola se divide en pieza principal (que es la que da la movilidad) y pieza
terminal.

3) De qu est compuesta la pared celular de los hongos.

La pared fngica est compuesta por glucanos, glucosamina, glicoprotenas y

quitina. sta ltima es el componente principal del exoesqueleto de insectos y se
encuentra tambin en la pared bacteriana.
Las glicoprotenas son la parte de la pared con capacidad de reconocimiento,
tanto para mantener la cohesin tisular del hongo como para reconocer sustancias
exteriores. (medicinas, 2016)
4) En organismos como el Paramecium qu funcin cumplen los cilios.
El paramecio es un organismo unicelular que mide menos de 100 a 300
micrmetros.
Carecen de flagelos pero tiene una superficie cubierta de una pelcula elstica
bien definida, por fuera se extienden diminutas proyecciones con aspecto de
pelos, llamados cilios. Los cilios estn ordenados en hileras espirales, son muy
abundantes y recubren toda su superficie, le sirven para proporcionar movimiento
al organismo o locomocin y para la captura de alimento. (Rojas, 2016)