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Atividade antimicrobiana de
Cymbopogon citratus (DC.) stapf sobre Candida spp.
Rosilene Batista de Aguiar ALMEIDAa, Claunencil de Ftima Pires CARRETTOa,
Rosemary Soares de SANTANAa, Marcos Roberto FURLANb,
Juliana Campos JUNQUEIRAa, Antonio Olavo Cardoso JORGEa
Departamento de Biocincias e Diagnstico Bucal, Faculdade de Odontologia, UNESP,
12245-000 So Jos dos Campos - SP, Brasil
b
Departamento de Agronomia, Universidade de Taubat, 12020-270 Taubat - SP, Brasil
Almeida RBA, Carreto CFP, Santana RS, Furlan MR, Junqueira JC, Jorge AOC. Antimicrobial
activity of Cymbopogon citratus (DC.) stapf against Candida spp. Rev Odontol UNESP. 2008;
37(2): 147-153.
Resumo: O uso de extratos de plantas medicinais para tratamento da candidose tem sido
investigado, procurando-se contornar o desenvolvimento de cepas de Candida resistentes aos
antifngicos. O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antimicrobiana de Cymbopogon citratus
(DC.) Stapf, conhecido como capim-limo ou erva cidreira, sobre cepas de Candida isoladas da
cavidade bucal humana. Extrato hidroalcolico de Cymbopogon citratus (DC.) Stapf foi testado
em 60 cepas, sendo 30 C. albicans, 10 C. glabrata, 10 C. tropicalis, 8 C. parapsilosis e 2 C. krusei.
Foi determinada a concentrao inibitria mnima (CIM) por meio do mtodo da diluio em
caldo, seguindo-se de subcultivos em gar Sabouraud dextrose (Difco, Detroit, Michigan, EUA)
para determinao da concentrao fungicida mnima (CFM). O grupo controle foi constitudo por
etanol a 72 GL (Miyako, So Paulo, Brasil). A CIM foi considerada como a menor concentrao
do extrato testado capaz de inibir o crescimento microbiano em caldo. A CFM foi determinada
como sendo a menor concentrao do extrato que apresentou efeito fungicida. Observou-se que,
para as espcies C. albicans e C. tropicalis, 70% das amostras apresentaram CIM do extrato
hidroalcolico menor que a CIM do grupo controle, para C. parapsilosis 62,5% e C. krusei 50%,
enquanto que 80% das cepas de C. glabrata apresentaram CIM do extrato hidroalcolico igual
a do grupo controle. Observou-se que, para C. krusei, C. albicans e C. parapsilosis, 100, 96,67
e 50% das cepas apresentaram, respectivamente, CFM do extrato hidroalcolico menor que a do
grupo controle, enquanto que 90% para cepas de C. tropicalis e 60% das cepas de C. glabrata
apresentaram CFM do extrato hidroalcolico igual CFM do grupo controle. Concluiu-se que
Cymbopogon citratus (DC.) Stapf apresentou atividade antimicrobiana para vrias cepas de
C.albicans, C. glabrata, C. tropicalis, C. parapsilosis e C. krusei.
Palavras-chave: Cymbopogon citratus; Candida; concentrao inibitria mnima;
concentrao fungicida mnima.
Abstract: The use of medicinal plants extracts for treatment of candidosis was investigated
in order to cease the development of Candida yeasts that are resistant to antifungal. The main
objective of this study was to evaluate the antimicrobial activity of Cymbopogon citratus (DC.) Stapf
(lemon-grass) over Candida yeast isolated within human oral cavity. The Cymbopogon citratus
(DC.) Stapf ethanol extract was tested in 60 Candida yeasts, being 30 C. albicans, 10C.glabrata,
10 C. tropicalis, 8 C. parapsilosis and 2 C. krusei. During the experiment, the minimal inhibitory
concentration (MIC) was determined by agar dilution method, following by subcultivation in agar
Sabouraud dextrose (Difco, Detroit, Michigan, EUA) in order to determine the minimal fungicide
concentration (MFC). The control group was constituted by 72 GL ethanol (Miyako, So Paulo,
Brasil). The MIC was considered as the extracts lowest tested concentration able to inhibit
microbial growth in broth. The MFC was determined as the extracts lowest concentration that
presented fungicide effect. For species C. albicans and C. tropicalis, 70% of samples presented MIC
ethanol extract higher than the MIC for the control group while for C. parapsilosis and C.krusei
148
Almeida et al.
the values were 62.5%, 50% respectively. For C. glabrata, 80% of yeasts presented MIC ethanol
extract equal to the control group. It was observed that for C. krusei, C. albicans e C. parapsilosis
100%, 96.67% and 50% of yeasts presented MFC ethanol extract higher than the control group,
while 90% of yeasts C. tropicalis and 60% C. glabrata presented MFC ethanol extract equal to the
control group. The conclusion was that the Cymbopogon citratus (DC.) Stapf presented fungicidal
action over yeasts of C. albicans, C. glabrata, C. tropicalis, C. parapsilosis and C. krusei.
Keywords: Cymbopogon citratus; Candida; minimal inhibitory concentration; minimal
fungicide concentration.
Introduo
A palavra fitoterapia foi criada para designar tradies
populares de tratamento, nas quais as plantas medicinais so
usadas como medicamentos. O uso teraputico de plantas
medicinais ficou restrito abordagem popular desde o desenvolvimento tecnolgico da indstria farmacutica, ocorrido
nas dcadas de 50 e 601.
As plantas medicinais representam um importante
recurso teraputico desde a antigidade at nossos dias.
No passado, representavam o principal recurso teraputico
conhecido. O uso de plantas medicinais um dos traos
mais caractersticos da espcie humana, sendo conhecido
desde a antiguidade. to antigo quanto o Homo sapiens, e
encontrado em praticamente todas as civilizaes ou grupos
culturais conhecidos.
Atualmente, um dos grandes desafios da medicina e
odontologia tem sido o manejo adequado das intercorrncias infecciosas bacterianas e fngicas que acometem a
populao. Apesar da disponibilizao de novos antibiticos, o ritmo do desenvolvimento de resistncia bacteriana
nos diferentes patgenos tem aumentado e representa um
constante desafio teraputico, fenmeno observado em todo
mundo2.
Diversas plantas com atividades antimicrobianas e
antifngicas vm sendo estudadas para serem utilizadas na
farmacologia para produo de medicamentos que visem
melhorar a qualidade de vida das pessoas, tentando reduzir
ao mximo os efeitos colaterais e tambm a resistncia dos
microrganismos.
Trabalhos de pesquisa com plantas medicinais, via de
regra, originam medicamentos em menor tempo, com custo
muitas vezes inferior queles produzidos artificialmente e,
conseqentemente, mais acessveis populao3.
A espcie Cymbopogon citratus (DC.) Stapf, tambm
conhecida como capim-limo ou erva cidreira, entre outros,
pertence famlia Gramineae e caracteriza-se por ser uma
erva perene, com folhas estreitas e de alto valor comercial.
Tem sido amplamente estudada, pois apresenta atividade
antifngica4, antibacteriana5, anti-helmntica6, inseticida7,
diurtica8 e anticarcinognica9, sendo estas propriedades atribudas aos leos volteis a-citral, b-citral e mirceno10,11.
Os microrganismos do gnero Candida so, geralmente, comensais da cavidade bucal, mucosas, trato digestivo,
genital e urinrio de indivduos sadios, mas dependendo do
estado fisiolgico do indivduo e de fatores predisponentes
podem transformar-se na forma parasitria, produzindo
candidoses12,13. A candidose bucal causada por C. albicans,
assim como outras espcies, acomete grande parte dos
indivduos, principalmente idosos, imunossuprimidos e
portadores de prteses totais14,15.
As espcies do gnero Candida mostram-se cada vez mais
resistentes aos antifngicos disponveis25. Este fato deve-se ao
crescente uso de antifngicos em pacientes imunossuprimidos,
principalmente em portadores do vrus da imunodeficincia
humana (HIV), xerostomia, uso de prteses, respirao bucal,
alteraes endcrinas, discrasias sanguneas, uso de aparelhos
ortodnticos, fatores mecnicos14,16,17.
O tratamento da candidose bucal, principalmente por
mtodos alternativos, constitui assunto de importncia para
a odontologia, considerando-se a freqncia da doena,
principalmente quando do uso de prteses17,18.
A estomatite por prtese total, leso associada com
Candida, alm de difcil tratamento apresenta recidivas
constantes14,15.
Assim, faz-se necessrio a criao de novas terapias
alternativas para a candidose bucal, conseqentemente melhorando a qualidade de vida dos pacientes acometidos por
esse tipo de infeco. O objetivo desse estudo foi determinar
a concentrao inibitria mnima e concentrao fungicida
mnima do extrato hidroalcolico de Cymbopogon citratus
(DC.) Stapf sobre leveduras do gnero Candida.
Material e mtodo
Coleta de Cymbopogon citratus (DC.) Stapf
O trabalho foi aprovado pelo Comit de tica em Pesquisa da Faculdade de Odontologia de So Jos dos Campos
- UNESP (protocolo n 043/2007-PH/CEP). Cymbopogon
citratus (DC.) Stapf foi coletado no horto medicinal da Faculdade de Cincias Agrrias da Universidade de Taubat
- UNITAU entre 9 e 10 horas da manh em perodo sem
2008; 37(2)
149
Para cada cepa de Candida, foi preparada uma suspenso contendo 106 clulas viveis/mL. Para a obteno da
suspenso, a cepa foi semeada em gar Sabouraud dextrose
(Difco, Detroit, Michigan, EUA) e incubada a 37 C por
24horas. O crescimento foi suspenso em soluo fisiolgica
a 0,85% esterilizada (Cloreto de Sdio, Cromoline Qumica,
Diadema, So Paulo, Brasil). A concentrao da suspenso
foi quantificada em espectrofotmetro (Micronal B582/
Verso 3.0.4, So Paulo, Brasil) com comprimento de onda
de 530 nm e densidade ptica de 0,284.
Determinao da concentrao inibitria mnima (CIM)
e concentrao fungicida mnima (CFM) do extrato
hidroalcolico
Para determinao da CIM do extrato hidroalcolico de Cymbopogon citratus (DC.) Stapf, foi utilizado
o mtodo de diluio em caldo. Diluies seriadas do
extrato hidroalcolico foram preparadas em tubos contendo caldo Sabouraud (Difco, Detroit, Michigan, EUA),
de forma a representarem 1/2 (250 mg.mL1), 1/4 (125
mg.mL1), 1/8 (62,5 mg.mL1), 1/16 (31,25 mg.mL1),
1/32 (15,62mg.mL1), 1/64 (7,81mg.mL1) e 1/128 (3,90
mg.mL1) da concentrao original. Posteriormente, foram
acrescentados 100 L da suspenso padronizada (106viveis/mL) de cada cepa de Candida a ser testada. Os testes
do extrato foram feitos em duplicata. O grupo controle foi
constitudo de caldo Sabouraud dextrose (Difco, Detroit,
Michigan, USA) com etanol 72 GL (Miyako, So Paulo,
Brasil). Aps incubao por 24 horas a 37 C, foi realizada
a leitura por meio da observao visual da turvao do
meio. A CIM foi considerada a menor concentrao do
extrato hidroalcolico testado, capaz de inibir o crescimento microbiano em caldo.
Para determinao da CFM, trs inculos do teste anterior, que no apresentaram crescimento em caldo, foram
subcultivados em placa contendo gar Sabouraud dextrose
(Difco, Detroit, Michigan, USA).
Determinou-se a CFM como sendo a menor concentrao do extrato hidroalcolico testado, que apresentou efeito
fungicida e foi capaz de inibir totalmente o crescimento
microbiano em meio de cultura slido, em placas de Petri.
Resultado
Concentrao inibitria mnima do extrato hidroalcolico de Cymbopogon citratus (DC.) Stapf
Cymbopogon citratus (DC.) Stapf apresentou atividade
fungisttica para todas as espcies de Candida estudadas.
A porcentagem de cepas de Candida inibidas pelo extrato
hidroalcolico de Cymbopogon citratus e pelo grupo controle esto apresentadas na Tabela 1.
A CIM do extrato hidroalcolico de C. citratus foi de
31,25 mg.mL1 para 56,6% das cepas de C. albicans e 70%
150
Almeida et al.
Discusso
O estudo das leveduras do gnero Candida de grande interesse na odontologia, pois essas leveduras podem
ocasionar nmero freqente de infeces na mucosa bucal.
Tabela 1. Porcentagem das amostras de Candida inibidas pelo extrato hidroalcolico de Cymbopogon citratus e pelo grupo controle em
relao CIM
Amostras de
Candida
C. albicans
(n = 30)
C. tropicalis
(n = 10)
C. glabrata
(n = 10)
C. parapsilosis
(n = 8)
C. krusei
(n = 2)
250
100
125
100
62,5
100,0
31,25
56,60
15,62
0,00
7,81
0,00
3,90
0,00
C
E
C
E
100
100
100
100
100
100
100
100
83,4
100,0
100,0
100,0
3,33
70,00
0,00
20,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
C
E
C
E
C
100
100
100
100
100
100
100
100
100
100
90,0
100,0
75,0
100,0
100,0
10,00
37,5
0,00
50,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
Espcies
C. albicans (n = 30)
C. tropicalis (n = 10)
C. glabrata (n = 10)
C. parapsilosis (n = 8)
C. krusei (n = 2)
CIM
Extrato < Controle
70,0%
70,0%
20,0%
62,5%
50,0%
Extrato = Controle
30,0%
30,0%
80,0%
37,5%
50,0%
2008; 37(2)
151
Tabela 3. Porcentagem de amostras de Candida inibidas pelo extrato hidroalcolico de Cymbopogon citratus e pelo grupo controle em
relao CFM
Amostras de Candida
C. albicans
(n = 30)
C. tropicalis
(n = 10)
C. glabrata
(n = 10)
C. parapsilosis
(n = 8)
C. krusei
(n = 2)
E
C
E
C
E
C
E
C
E
C
250
125,0
100
100
100
100
100
100
100
100
100
100
100,0
96,6
100,0
60,0
100,0
80,0
100,0
50,0
100,0
50,0
3,33
3,33
0,00
0,00
10,00
10,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
7,81
3,90
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
Espcies
C. albicans (n = 30)
C. tropicalis (n = 10)
C. glabrata (n = 10)
C. parapsilosis (n = 8)
C. krusei (n = 2)
CFM
Extrato < Controle
96,67%
10,00%
40,00%
50,00%
100,00%
Extrato = Controle
3,33%
90,00%
60,00%
50,00%
0,00%
152
Almeida et al.
Concluso
Diante dos resultados deste trabalho, concluiu-se que
Cymbopogon citratus (DC.) Stapf apresentou atividade fungisttica para todas as espcies de Candida estudadas, sendo
esse efeito maior para as cepas de C. albicans e C.tropicalis.
Cymbopogon citratus (DC.) Stapf exibiu atividade fungicida
para todas as espcies de Candida analisadas, com maior
efeito sobre C. albicans e C. krusei.
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2008; 37(2)
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