UNIVERSIDAD TECNOLOGICA DEL USUMACINTA

Divisin acadmica de Procesos Alimentarios, Biotecnolgicos y Paramdico

CARRERA: TSU en Qumica rea Biotecnologa

ASIGNATURA: Anlisis clnicos
UNIDAD: II NOMBRE: Hematologa

TRABAJO: Reporte de prctica de laboratorio

NOMBRE DE LA PRCTICA: determinacin de grupo sanguneo, pruebas de
compatibilidad cruzadas y tiempos de coagulacin.
ALUMNA:
Sofa Amisada Bentez Uco
CATEDRATICO: Qum. Felipe Rubisel Jimnez Prez
CUATRIMESTRE: 3 A

EMILIANO, ZAPATA A 16 DE JUNIO DEL 2015

INTRODUCCIN
La determinacin del grupo sanguneo es un mtodo para determinar qu tipo de
sangre tiene una persona. Se utilizan tres reactivos llamados: suero anti A (de
sangre b), de color azul y que contiene aglutininas alfa, suero anti B (de sangre a),
de color amarillo y que contiene aglutininas beta, existe adems otro suero, el anti
AB que contiene las dos aglutininas, alfa y beta. El tipo de sangre depende de si
hay o no ciertas protenas, llamadas antgenos, en los glbulos rojos o si hay
anticuerpos para estas sustancias.
Los mdicos necesitan conocer el tipo de sangre de una persona cuando se van a
someter a una transfusin de sangre o a un trasplante, debido a que no todos los
tipos de sangre son compatibles entre s.
Las pruebas cruzadas son una prueba inmuno-hematolgica cuyo principio es la
hemaglutinacin y su objetivo es evitar la destruccin o la aglutinacin de los
hemates en un receptor. Esta es una de las pruebas ms importantes efectuadas
en un servicio de transfusin.
La tcnica para determinar tiempos de coagulacin mide el funcionamiento de las
plaquetas para solidificar la sangre. Como es bien sabido, al causarse una herida
en la piel, las plaquetas participan formando un tapn temporal que impide la
salida de la sangre al exterior.

Todas estas pruebas son ampliamente utilizadas en los laboratorios de anlisis

clnicos ya que nos indican si una persona (receptor) puede recibir sangre de otra
(donador) y viceversa, y por otro lado, conocer si una persona no tiene problemas
de sangrado o coagulacin.

OBJETIVOS:
Realizar la tipificacin ABO sangunea
Aplicar la metodologa correctamente para la realizacin de pruebas de
compatibilidad cruzada.
Determinar los tiempos de coagulacin sangunea a travs de la prueba PT
y TPT.

MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS:

1 par de guantes
1 gradilla de metal
Muestra de sangre en tubo

anticuerpos A, B, AB y D (RH)
centrfuga
Muestra de sangre en tubo

vacutainer tapn lila

Puntillas color amarillo
Aguja vacutainer color verde
Micropipeta de 20-200 l
1 placa de porcelana para

vacutainer tapn azul

4 tubos de ensayo
Solucin salina
Albmina
Activador de KCl (reactivo de

grupo sanguneo
3 tubos de ensayo
Muestra de suero
Antiiglobulina

TP)
Equipo fibritainer
Reactivo de TPT

DESARROLLO
-tipificacin ABO 1.- se tomaron muestras de sangre en tubos con tapn lila.
2.- se colocaron 20 l de sangre en los pocillos marcados como: anti-A,
anti-B, anti-AB y anti D en la placa de porcelana con la micropipeta.
3.- se le aadi una gota de anticuerpo anti A, anti B y anti D segn el
pocillo indicado
4.- se mezcl con un palillo la sangre y se observ si haba aglutinacin.
5.- este procedimiento se realiz 3 veces; la primera vez se obtuvo que la
sangre era tipo B+, la segunda vez, se analiz otra muestra y result ser
tipo A+ y por ltimo, en otra muestra sangunea result ser tipo O+.
6.- el factor Rh se manifest en todos los casos.
-prueba de compatibilidad cruzada Se llev a cabo la prueba mayor como sigue:
1.- primero se determin el grupo sanguneo en 2 muestras de sangre
diferentes al procedimiento anterior. Las muestras dieron como resultado
A+ y O+. stos corresponden a los receptores.
2.- seguidamente, se determin el grupo sanguneo de otra muestra, dando
como resultado ser sangre tipo A+ correspondiente al donador.

 3.- se centrifugaron las muestras de sangre de los receptores para obtener

suero durante 15 minutos.
4.- se pipete y coloc 100 l de sangre del donador en un tubo de ensayo
limpio y se coloc solucin salina hasta la mitad del tubo.
5.- se pipete 50 l de la mezcla de solucin salina con sangre del donador
y se coloc en 4 tubos diferentes (50 l en cada tubo)
6.- se agreg 100 l del suero del receptor 1 a uno de los tubos y 100 l del
suero del receptor 2 en otro tubo. Se agitaron, y al hacer esto, se form un
cogulo en el caso del receptor 2.
7.- se centrifugaron los tubos y se observ la formacin de un botn en los
tubos. Al agitarlos suavemente, uno de los botones presentes se pudo
disolver, mientras que el otro no.
8.- se agreg 3 gotas de albmina al tubo que mostr compatibilidad, luego
se incub 15 minutos a 37C.
9.- se introdujo el tubo a la centrifuga por 15 segundos a una velocidad de
3500 rpm.
10.- seguidamente se mezcl y se disolvi el botn formado.
11.- se colocaron 3 gotas de antiglobulina y se dej reposar 10 minutos.
12.- se centrifug y se observ que se mantuvo la compatibilidad del suero
del receptor 1 y la sangre del donador.
-determinacin de tiempos de coagulacin 1.- se extrajeron 2 muestras de sangre de una persona en tubos vacutainer
con tapn azul.
2.- se centrifugaron los tubos durante 10 minutos.
3.- para la prueba de TP, se program el equipo fibritainer, se colocaron 50
l de las muestras en las celdas para el equipo y se incub por 60
segundos a 37C, luego se tom 100 l de reactivo de TP, y se deposit en
las celdas. En el equipo, se hizo la lectura. Por ltimo se desecharon las
celdas.
4.- para la prueba de TPT, se volvi a programar el equipo, se tom 50 l de
muestra en dos celdas, luego se agreg 50 l de reactivo de TPT y se
incub por un lapso de 2 minutos, posteriormente se le agreg 50 l de KCl
a 0.25 M. el equipo hizo la lectura y se desecharon las celdas.

RESULTADOS
Para la tipificacin ABO en la sangre, se obtuvo:
Muestra #1 dio como resultado sangre tipo B+
Muestra #2 dio como resultado sangre tipo A+
Muestra #3 dio como resultado sangre tipo O+

En las pruebas cruzadas, se observ que desde un principio la sangre O+ y

A+ no son compatibles. El suero del receptor 1 y la sangre del donador
eran compatibles por tener el mismo tipo de sangre (A+), en cambio, al
combinar el suero del receptor 2 (de sangre tipo O+) y la sangre del
donador (A+), se mostr que no eran compatibles ya que se form un
pequeo cogulo o botn de eritrocitos en el tubo

En los tiempos de coagulacin se obtuvo que:

La prueba de Protrombina (PT) dio como resultado 18.3 y 15.9 segundos
La prueba parcial de Tromboplastina arroj un resultado de 41.5 y 40.1
segundos.

 Comparando estos resultados con los valores de referencia, se deduce que

la coagulacin en esta muestra es normal. Los valores de referencia para
PT es de 10-16 segundos, para TPT es de 25-41 segundos.

ANEXOS

fig. 1 Sangre tipo B+

fig. 2 Sangre tipo A+

fig
3 Sangre
tipo O+

fig. 4 sueros que contienen anticuerpos

A, B, AB y factor Rh (D)

fig. 5 tubos con suero de receptores

y sangre del donador en solucin salina

fig. 6 tubos con suero de sangre tipo A+

(izquierda) y O+ (derecha) mezclados con sangre de tipo A+. Se observa la
formacin de un cogulo en el de la derecha.

CONCLUSIONES
La sangre tiene propiedades antignicas distintas en cada individuo al igual
que propiedades inmunitarias diferentes, estas diferencias permitieron el
descubrimiento de varios sistemas de grupos sanguneos.
El estudio de los grupos sanguneos tiene gran inters para los
investigadores de mltiples disciplinas, adems que sus aplicaciones estn
inmiscuidas en la prctica mdica por su importancia clnica. El
conocimiento del tipo de grupo sanguneo es indispensable, por la
susceptibilidad que tiene cada individuo de sufrir accidentes en el diario
vivir, lo que conlleva a la necesidad de recibir transfusiones sanguneas.
Las transfusiones de sangre y de sus componentes constituyen el
tratamiento ms utilizado para corregir las prdidas de sangre agudas y las
anemias crnicas.
La prueba cruzada se basa en hacer reaccionar in vitro, en medio salino y
albuminoso, eritrocitos y plasma del donador y receptor.
La protrombina es una protena del plasma sanguneo, forma parte del
proceso de coagulacin mediante la reaccin de sta con la enzima
"tromboplastina", una enzima ubicada en el interior de los trombocitos,

liberada al romperse la frgil membrana celular de los trombocitos. En esta

etapa tambin participa el Ca++ (calcio), actuando como factor coenzimtico.

BIBLIOGRAFA

http://es.scribd.com/doc/48619620/Pruebas-cruzadas#scribd
http://es.slideshare.net/mdmarcetrovera/pruebas-de-laboratoriopretransfusionales
http://www4.ujaen.es/~esiles/Transpsangre2006.pdf