Unidad III.

Absorcin en el UV VIS
1- Ley de Lambert Beer
Los descubridores fueron Johann Heinrich Lambert, suizo alemn,
naci en Mulhausen, astrnomo, matemtico, fsico y hombre docto, y
August Beer Trveris, (1825 Bonn, 1863), fsico alemn, profesor en la
Universidad de Bonn, estudi diversos fenmenos pticos. El principio de
Lambert era que un cuerpo que radia obedece a la ley de Lambert si su
luminancia espectral energtica es la misma para un elemento
cualquiera de su superficie, y no depende de la direccin de emisin, y
el de Beer se basaba en la absorbancia de una sustancia o especie es
directamente proporcional a la concentracin de la misma. De esta
manera uniendo los dos principios tenemos que la absorbancia de una
especie en solucin homognea es directamente proporcional a su
actividad ptica, longitud del paso ptico y su concentracin. Es una
relacin emprica que relaciona la absorcin de luz con las propiedades
del material atravesado.
Esta ley expresa la relacin entre absorbancia de luz
monocromtica (de longitud de onda fija) y concentracin de un
cromforo en solucin:
I
A=log = . c . I
I0
La absorbancia de una solucin es directamente proporcional a su
concentracin a mayor nmero de molculas mayor interaccin de la luz
con ellas; tambin depende de la distancia que recorre la luz por la
solucin a igual concentracin, cuanto mayor distancia recorre la luz por
la muestra ms molculas se encontrar; y por ltimo, depende de ,
una constante de proporcionalidad denominada coeficiente de extincin
que es especfica de cada cromforo. Como A es adimensional, las
dimensiones de
magnitud
(c )

(I)

dependen de las de

se expresa siempre en

cm

resultan ser

I.

La segunda

mientras que la primera

se hace, siempre que sea posible, en

dimensiones de

m . cm

m , con lo que las

. Este coeficiente as

expresado, en trminos de unidades de concentracin molar (o un

submltiplo apropiado), se denomina coeficiente de extincin molar

(M ) .
La ley de Lambert Beer se cumple para soluciones diluidas; para
c

valores de
altos,
vara con la concentracin, debido a
fenmenos de dispersin de la luz, agregacin de molculas, cambios
del medio, entre otros.
Limitaciones: desviaciones reales, desviaciones instrumentales,
desviaciones qumicas.
Limitaciones propias de la ley de Beer:
Es una ley limite (<0.01M).
A concentraciones mayores >0.01M la distacia promedio entre las
especies disminuye hasta el punto en que cada una afecta la
distribucin de carga de sus vecinas alterando la capacidad de
absorcin a una .
En soluciones de baja concentracin del absorbente pero a
concentraciones elevadas de especies (electrolitos), la gran
proximidad de iones al absorbente altera (interacciones
electrostticas) la absortividad molar. Este efecto se reduce al
diluir.
Desviaciones reales:
Las desviaciones reales provienen de los cambios en el ndice de
refraccin del sistema analtico, pues como e depende del ndice de
refraccin de la muestra, la ley de Beer slo se cumple para bajas
concentraciones, en donde el ndice de refraccin es esencialmente
constante, ya que no es la absortividad la que es constante sino la
expresin:
e=e verdadero h/( h2+ 2)2 [ 2

Donde

es el ndice de refraccin de la solucin.

Desviaciones instrumentales:
Las desviaciones instrumentales provienen, en primer lugar de
la utilizacin de luz no monocromtica, ya que la pureza espectral del
haz de radiacin proveniente de la fuente, depende del ancho de banda

espectral del monocromador. La deduccin de la ley de Beer supone

radiacin monocromtica y los monocromadores en realidad
proporcionan una banda de longitudes de onda.
Entonces, la ley de Beer puede cumplirse con pequeos intervalos
de error, si la variacin de la absortividad con la longitud de onda es
constante en el intervalo de longitudes de onda que el selector del
instrumento deja pasar, siempre que el ajuste de la longitud de onda
nominal sea muy reproducible.
En el mximo de la curva del espectro de absorcin, el coeficiente
de absortividad cambia ms lentamente que en el resto de la banda,
igualmente la sensibilidad a la concentracin es mayor en el mximo de
la banda de absorcin, porque la absortividad tiene el valor mximo en
ese punto.
Desviaciones qumicas:
Las desviaciones qumicas a la ley de Beer tambin se
llaman desviaciones aparentes porque dependen de la naturaleza
qumica del sistema en estudio y si se trabaja bajo ciertas condiciones
(pH, concentracin de reactivos, entre otros.) es posible hacer que el
sistema cumpla dicha ley. Las desviaciones son causadas, generalmente,
por equilibrios en solucin que involucran a la especie absorbente y
alteran su concentracin originando desviaciones positivas o negativas.
Si alguna reaccin qumica que ocurra en el sistema origina un
producto que absorba ms fuertemente que la sustancia ensayada, a la
longitud de onda a la cual se hace la medida o longitud de onda
analtica, se producir una desviacin positiva. Si, al contrario, se
origina un producto que no absorbe a la longitud de onda analtica, la
concentracin de la sustancia se ver disminuida y se originar
una desviacin negativa.
2- Espectro de absorcin molecular en el UV VIS
Los espectros de absorcin son de utilidad tanto para seleccionar
la longitud de onda ms adecuada para una medida cuantitativa
(longitud de onda a la que la absorcin es mxima), como para fines de
identificacin cualitativa. En la qumica analtica instrumental, el trmino
espectro posee diversas variantes. Un espectro de emisin se obtiene
por separacin de las longitudes de onda individuales de la energa
emitida por una fuente de luz. Un espectro de absorcin es el conjunto

de lneas o, ms frecuentemente, bandas cuyas longitudes de onda son

absorbidas por el medio al pasar por ste la luz compuesta.
Posicin e intensidad de la banda de absorcin:
Aunque los espectros UV-visible no permiten una identificacin
absoluta, se usan frecuentemente para confirmar la identidad de una
sustancia mediante la comparacin del espectro medido con uno de
referencia. Cuando los espectros son muy similares, pueden utilizarse
espectros derivados EL nmero de bandas aumenta con el orden de
derivada. Este aumento de complejidad de los espectros derivados
puede ser til en el anlisis cualitativo, para caracterizar materiales o
para identificacin.
Para la mayora de anlisis espectroscpicos se necesita una
radiacin constituida por un grupo limitado y continuo de longitudes de
onda estrechas denominado banda. Un ancho de banda estrecho tiende
a aumentar la sensibilidad de las medidas de absorbancia, puede hacer
ms selectivos tanto los mtodos de absorcin como los de emisin y
con frecuencia es una exigencia con miras a obtener una relacin lineal
entre la seal ptica y la concentracin. La seal de salida de un selector
de longitud de onda correspondera, idealmente a una radiacin de una
nica longitud de onda o frecuencia.
3- Instrumentos utilizados en espectroscopia de absorcin
Colormetros: Colormetro significa medidor de color, cualquier
instrumento que cuente con la capacidad de identificar un color para
facilitar su medida es un colormetro. El colormetro es el dispositivo que
permite la cuantificacin de un color y permite su comparacin con otro.
Una vez hecha la cuantificacin, el valor numrico asignado al color
estudiado permitir su adecuada clasificacin en la escala de colores. El
colormetro tiene tres funciones especficas, que son:
Determinar el valor numrico de un color.
Llevar a cabo una comparacin entre colores.
Establecer la intensidad y los matices del color estudiado.

Fotmetros: Un fotmetro es un aparato destinado a medir la luz.

Existen diferentes tipos segn la propiedad de la luz que midan siendo el
ms comn los fotmetros destinados a medir la intensidad. La

fotometra ha existido desde hace muchos aos y es una herramienta

bsica hoy en da en numerosas disciplinas, entre ellas la astronoma o
la fotografa digital. Se puede decir que el primer fotmetro de la
historia, el primer instrumento para medir la intensidad de la luz, fue el
propio ojo humano. Los fotmetros actuales pueden medir todos los
tipos de luz y un amplio rango de caractersticas, principalmente
intensidad, absorbancia y fluorescencia.
El uso ms comn de los fotmetros actualmente es sin duda en el
campo de la fotografa digital. Los fotmetros tambin tienen aplicacin
industrial, por ejemplo, para medir los colores exactos en la fabricacin
de pintura. Tambin pueden determinar la intensidad de una llama al
medir la cantidad de luz infrarroja que desprende. En cualquier situacin
que se requiere una medida de luz los fotmetros son los instrumentos
de eleccin.

Espectrofotmetros: El espectrofotmetro permite comparar la

radiacin absorbida o transmitida por una solucin que contiene una
cantidad desconocida de soluto con una que contiene una cantidad
conocida de la misma sustancia. Se mide la transmitancia de la muestra
que se expresa habitualmente como porcentaje (%T), o bien la
absorbancia (A).
El equipo se compone generalmente de una fuente de luz (por lo
general una lmpara incandescente (de tungsteno) para las longitudes
de onda en el rango visible, o una lmpara de arco de deuterio en el
ultravioleta), un soporte para la muestra, una red de difraccin o
monocromador para separar las diferente longitudes de onda de luz y un
detector. El detector duele ser un fotodiodo o un CCD.

4- Aplicacin de la espectroscopia UV VIS

Es una tcnica eficaz para identificar o asignar una estructura a los

compuestos qumicos (orgnicos o inorgnicos) y medir sus

concentraciones, ya sean en sistemas de uno o ms componentes

absorbentes. La principal ventaja de esta tcnica es que incluso se
puede determinar trazas de sustancias de una manera sencilla, que no
es posible hacerlo con los mtodos clsicos de anlisis como son los
procedimientos gravimtricos y volumtricos.

Absorcin
por
compuestos
transferencia de carga:

orgnicos,

inorgnicos

Compuestos orgnicos: Los compuestos orgnicos, especialmente

aquellos con un alto grado de conjugacin, tambin absorben luz en las
regiones del espectro electromagntico visible o ultravioleta. Los
disolventes para estas determinaciones son a menudo el agua para los
compuestos solubles en agua, o el etanol para compuestos orgnicos
solubles. Los disolventes orgnicos pueden tener una significativa
absorcin de UV, por lo que no todos los disolventes son adecuados para
su uso en espectrometra UV. El etanol absorbe muy dbilmente en la
mayora de longitudes de onda. La polaridad y el pH del disolvente
pueden afectar la absorcin del espectro de un compuesto orgnico. La
tirosina, por ejemplo, aumenta su mximo de absorcin y su coeficiente
de extincin molar cuando aumenta el pH de 6 a 13, o cuando disminuye
la polaridad de los disolventes.

Compuestos inorgnicos: En general los iones y complejos de las dos

primeras series de transicin absorben radiacin VIS al menos en uno de
sus estados de oxidacin y son, en consecuencia, coloreados. Aqu, la
absorcin supone transiciones entre orbitales d ocupados y libres. Las
diferencias de energa entre estos orbitales d (y, por tanto, la posicin
del correspondiente pico de absorcin) dependen de la posicin del
elemento en el sistema peridico, su estado de oxidacin y la naturaleza
del ligando al que est unido.

Absorcin por transferencia de carga: Este es el tipo de absorcin

ms importante con fines analticos de las especies inorgnicas, puesto

que las absortividades molares de los picos son muy grandes

( >10000) . Muchos complejos inorgnicos, como el hierro (III)tiocianato, exhiben este tipo de absorcin y se denominan complejos de
transferencia de carga. En estos complejos es necesario que un
componente tenga carcter dador de electrones y el otro de aceptor, por
lo que la absorcin implica la transicin de un electrn del dador a un
orbital asociado con el aceptor. El estado excitado es por tanto el
producto de un proceso interno de oxido reduccin.
5- Titulaciones fotomtricas
Las medidas fotomtricas o espectrofotomtricas pueden utilizarse
provechosamente para localizar el punto de equivalencia de una
valoracin, siempre que el analito, el reactivo o el producto de la
valoracin absorban radiacin. En otros casos un indicador absorbente
puede proporcionar el cambio de absorbancia necesario para localizar el
punto de equivalencia.
Curvas de valoracin:
Una curva de valoracin fotomtrica es una representacin d la
absorbancia, corregida por los cambios de volumen, en funcin del
volumen de valorador. Si se eligen las condiciones de manera adecuada,
la curva constar de dos regiones lineales con diferentes pendientes,
una tiene lugar al principio de la valoracin y la otra localizada mas all
de la zona del punto de equivalencia; el punto final se toma como la
interseccin de las dos porciones lineales extrapoladas. La valoracin de
una especie no absorbente con un valorador coloreado que origina un
producto de reaccin incoloro da lugar a una lnea horizontal en las
etapas iniciales, seguido de un rpido ascenso de la absorbancia pasado
el punto de equivalencia. Por otro lado, la formacin de un producto
coloreado, a partir de reactivos incoloros, produce inicialmente un
aumento lineal en la absorbancia seguido de una regin en la cual la
absorbancia se mantiene independientemente del volumen del reactivo
aadido. Con objeto de obtener un punto final fotomtrico satisfactorio,
es necesario que el(los) sistema(s) absorbente(s) cumpla(n) la ley de
Beer; de otro modo la curva de valoracin carecer de las regiones
lineales necesarias para la extrapolacin al punto final. Adems, como
consecuencia de los cambios de volumen, es necesario corregir la
absorbancia; aqu, los valores observados se multiplican por (V +v )/V ,

donde

es el volumen original de la disolucin y

es el volumen

de valorador aadido. Se introduce un pequeo error como resultado de

suponer que los volmenes V y v son aditivos.
6- Anlisis cuantitativo: de una especie absorbente, de una
mezcla de especies absorbentes.

Especies Absorbentes: La absorcin de radiacin ultravioleta y visible

por una especie M, puede considerarse como un proceso en dos etapas,
la primera de las cuales corresponde a la excitacin segn:
M+h.v M

Donde

representa la partcula atmica o molecular en su

estado electrnico excitado que se produce como resultado de la

absorcin del fotn h . v . Este estado excitado tiene un breve tiempo de
existencia

(108 a 109 s)

y desaparece a travs de travs de algunos de

los diferentes procesos de relajacin (calor).

M M +calor
La absorcin de la radiacin ultravioleta o visible, se produce por lo
general como consecuencia de la excitacin de los electrones de enlace;
debido a esto, la longitud de onda de los picos de absorcin se puede
correlacionar con los tipos de enlace existentes en la especie que se
estudia.

Anlisis de una especie de mezclas absorbentes: La absorbancia

total de una solucin a una longitud de onda dada, es igual a la suma de
las absorbancias de los componentes individuales en la solucin.
A m =A 1+ A 2 + A 3 += 1 bc 1+ 2 bc 2 + 3 bc 3 +

Esta relacin hace posible en principio determinar las

concentraciones de los constituyentes individuales de una mezcla,
incluso si su espectro se superpone por completo. Considrese el caso
de una solucin que contiene una mezcla de la de la especie M y N, la
cual tiene espectros que no presentan una longitud de onda en la cual la
absorbancia de esta mezcla se deba exclusivamente a uno de los
componentes. Para analizar la mezcla, primero se determina la
1 y 2
absortividad molar para M y N a longitudes de onda
con
concentraciones suficientes de las dos soluciones patrn pare estar
seguros de que se cumple con la ley de Beer en un intervalo de
absorbancia que abarque la absorbancia de la muestra. Estas dos
longitudes de onda se seleccionan de manera que las absortividades
molares de los componentes difieren de manera importante. Por
1
consiguiente, a
, la absortividad molar del componente M es mucho
mayor que la del componente N. Lo inverso se cumple para

. Para

terminar el anlisis, la absorbancia de la muestra se determina a las

mismas dos longitudes de onda. A partir de las absortividades molares
conocidas y la longitud de la trayectoria, se cumplen las siguientes
ecuaciones:
A 1= M bc M + N bc N
1

A 2= M bc M + N bc N
2

Donde el subndice 1 indica medicin a la longitud de onda

el subndice 2 quiere decir medicin a la longitud de onda
valores conocidos de

yb

se pueden conocer las incgnitas

,y

. Con los
CM y CN

. Las relaciones son vlidas slo si se cumple la ley de Beer en ambas

longitudes de onda y los dos constituyentes se comportan de manera
independiente uno del otro. La exactitud mayor se obtiene al elegir
longitudes de onda a las cuales las diferencias en absortividades
molares son grandes.

Repblica Bolivariana de Venezuela

Ministerio del Poder Popular para la Educacin Universitaria
Ciencia y Tecnologa

Absorcin
en el UV
VIS
Prof.:
Carmen Mrquez

Bachiller:
Ruth SulbaranC.I:26.984.240

Seccin:
PQ - 01
TII - TIV

14/07/2016