AULA PRTICA

Profa Alessandra Barone

Prof. Archangelo P. Fernandes
WWW.profbio.com.br

TCNICAS DE DIAGNSTICO PARASITOLGICO

EXAME DE FEZES

EXAME MACROSCPICO
Procedimentos
1- Observar a consistncia da amostra.
Fezes moles ou lquidas sugerem a possvel presena de trofozotos de
protozorios intestinais. Cistos de protozorios so encontrados com mais
freqncia em fezes formadas. Ovos e larvas de helmintos podem ser
encontrados tanto em fezes lquidas quanto em fezes formadas.
2- Examinar a superfcie da amostra para observar a presena de proglotes de
tnias, ancilostomdeos ou oxiros adultos, por exemplo.
3- Examinar a amostra fecal com auxlio de um palito (sorvete) para verificar a
presena de outros helmintos adultos.
4- Examinar as fezes quanto presena de sangue e/ou muco.
a) sangue fresco (vermelho vivo) indica hemorragia aguda no trato intestinal.
b) muco sanguinolento sugere ulceraes e uma poro desse material deve, de
preferncia, ser examinada, ao microscpio, para a procura de trofozoitos.
Os vermes adultos, quando encontrados, devem ser imediatamente examinados
e identificados.
As tnias so identificadas especificamente pelo exame das proglotes
grvidas. As proglotes devem ser fixadas em formol a 10% e depois
clarificadas por imerso em glicerina ou soluo de lactofenol (1:1).

EXAME MICROSCPICO
Permite a visualizao de trofozoitos, cistos e oocistos de protozorios e de
ovos e larvas de helmintos.
recomendvel, como rotina, o emprego de 03 procedimentos distintos
a) exame direto a fresco, para observao dos movimentos do trofozoito,
b) tcnicas de concentrao de parasitas
c) um esfregao de fezes com colorao permanente
O exame pode ser quantitativo ou qualitativo. Os mtodos quantitativos so
aqueles nos quais se faz contagem de ovos para avaliao da carga parasitria.
O mais conhecido o de Stoll, mas, o mais empregado atualmente o de KatoKatz.
Os mtodos qualitativos so os mais utilizados para a demonstrao da
presena das formas parasitrias. Freqentemente o nmero das formas
parasitrias pequeno, assim necessrio recorrer a processos de
enriquecimento dessas formas para concentr-las.

Os principais mtodos de enriquecimento ou de concentrao utilizados so:

Sedimentao espontnea: mtodo de Hoffmann, Pons e Janer ou mtodo de
Lutz. Este mtodo permite o encontro de ovos e larvas de helmintos e cistos
de protozorios;
Sedimentao por centrifugao: Mtodo de Blagg, conhecido por MIFC;
Mtodo de Ritchie, e o Coprotest. Usados para a pesquisa de cistos de
protozorios e de ovos e larvas de helmintos.
Flutuao: Mtodo de Willis. Indicado para pesquisa de ovos leves
(ancilostomdeos).
Centrfugo-flutuao: Mtodo de Faust. Utilizado para pesquisa de cistos e
oocistos de protozorios e de ovos leves.

Concentrao de larvas de helmintos: Mtodo de Baermann-Moraes e o

mtodo de Rugai usados para pesquisa de larvas de Strongyloides stercoralis.
As fezes enviadas ao laboratrio clnico devem ser submetidas a um desses
mtodos citados. Como no existe um mtodo capaz de diagnosticar, ao mesmo
tempo, todas as formas parasitrias o que se faz de rotina o emprego de um
mtodo geral como o de Lutz ou de Hoffmann, Pons e Janer (de fcil execuo
e pouco dispendioso), um especfico para cistos de protozorios e um para a
pesquisa de larvas de helmintos.

Exame direto a fresco

1- Colocar duas a trs gotas de salina a 0,85% em uma lmina de vidro.
2- Tocar com a ponta de um palito em vrios pontos das fezes, transferindo
uma pequena poro para a lmina de microscopia.
3- Espalhar as fezes, fazendo um esfregao e examinar ao microscpio. A
espessura do esfregao no deve impedir a passagem de luz.
4- Este mtodo indicado principalmente para a pesquisa de trofozoitos de
protozorios em fezes diarricas recm emitidas; para a identificao de
cistos de protozorios e larvas de helmintos cora-se a preparao com Lugol. O
uso de lamnula facultativo.
Soluo de Lugol
Iodo
Iodeto de potssio
gua destilada

2g
4g
100ml

Mtodo de Lutz ou de Hoffmann, Pons e Janer (sedimentao espontnea).

1- Colocar aproximadamente 2g de fezes em um frasco de Borrel ou em um
copo plstico descartvel, com cerca de 5 ml de gua e dissolver bem com
auxlio de um palito de sorvete descartvel.
2- Acrescentar mais 20 ml de gua
3- Coar a suspenso (para isto, usa-se gaze cirrgica umedecida, dobrada em
quatro, e colocada em um coador de plstico pequeno) num clice cnico de 200
ml de capacidade. Os detritos retidos na gaze so lavados co mais 20 ml de
gua.
4- Completar o volume do clice com gua.

5- Deixar essa suspenso em repouso durante duas a 24 horas.

6- Desprezar o lquido sobrenadante cuidadosamente, homogeneizar o
sedimento e coletar uma poro do mesmo.
7- Colocar parte do sedimento numa lmina, corar com Lugol e cobrir com
lamnula (facultativo). Examinar no mnimo duas lminas de cada amostra.

Mtodo de Faust (centrfugo-flutuao em sulfato de zinco)

1- Diluir 10g de fezes em 20 ml de gua
2- Homogeneizar bem.
3- Filtrar em gaze dobrada em quatro, num copo plstico, e transferir para um
tubo de Wasserman.
4- Centrifugar por um minuto a 2.500 rpm.
5- Desprezar o lquido sobrenadante e ressuspender o sedimento em gua
6- Repetir as operaes 4 e 5 at que o sobrenadante fique claro.
7- Desprezar o sobrenadante claro e ressuspender o sedimento com uma
soluo de sulfato de zinco a 33%, densidade de 1,18 g/ml.
8- Centrifugar novamente por um minuto a 2.500 rpm.
9- Os cistos e os ovos leves presentes estaro na pelcula superficial; a mesma
recolhida com ala de platina, colocada numa lmina junto com uma gota de
Lugol e coberta com lamnula.
O material deve ser examinado imediatamente. O sulfato de zinco pode
deformar os cistos e os ovos.
Mtodo de Willis
1- Colocar 10g de fezes num frasco de Borrel ou no prprio recipiente onde
esto as fezes
2- Homogeneza-las com um pouco de soluo saturada de sal (NaCl) ou de
acar
3- Completar o volume at a borda do frasco.
4- Colocar na boca do frasco uma lmina, que dever estar em contato com o
lquido.
5- Deixar em repouso por 5 minutos.
6- Findo esse tempo, retirar rapidamente a lmina, deixando a parte molhada
voltada para cima.
7- Cobrir com lamnula, corar com Lugol e examinar com objetiva 10x.

Mtodo de Rugai
1- Retirar a tampa do recipiente que acondiciona as fezes e envolv-lo em ter
gazes, fazendo uma pequena trouxa.
2- Colocar o material assim preparado, com a abertura voltada para baixo, num
clice de sedimentao, contendo gua aquecida (45C), em quantidade
suficiente para entrar em contato com as fezes.
3- Deixar em repouso por uma hora
4- Coletar o sedimento no fundo do clice, com ajuda de uma pipeta.
5-Corar as larvas com Lugol e observ-las com o maior aumento para identificlas.
Fezes diarricas (as larvas morrem muito rapidamente) ou coletadas em
conservador no se prestam para esses mtodos.

Referncias bibliogrficas
1. DE CARLI, G. A. Parasitologia clnica: seleo de mtodos e tcnicas de
laboratrio para o diagnstico das parasitoses humanas. 2 ed. So
Paulo: Aheneu, 2007.
2. NEVES, D. P. Parasitologia Humana. 9 e 10 ed - So Paulo: Atheneu, 1998
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3. REY, L. Bases da Parasitologia mdica. Rio de Janeiro 2 ed. -:
Guanabara-Koogan, -1992.
4. CHIEFFI, P. P. Parasitoses intestinais: diagnstico e tratamento. So
Paulo: Lemos Editorial, 2001.
5. LEVENTHAL, R.; CHANDLER, R. Parasitologia Mdica. So Paulo: Editora
Premier, 1997.
6. TIERNEY, L.M.; MCPHEE, S. J. & PAPADAKIS, M. A. Diagnstico &
Tratamento. So Paulo: Atheneu Editora So Paulo Ltda, 2004.
7. GOLDMAN, L & BENNETT, J.C. Cecil Tratado de Medicina, 21 ed. Rio de
Janeiro: Guanabara Koogan, 2001