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regular
Estrategias de Estudio
son generalmente
clulas tisulares o
de los
Identificacin
La electroforesis es un proceso muy til como mtodo analtico de
protenas. Su ventaja es que adems de separar las protenas, permite
visualizarlas, con lo que es posible hacer una estimacin rpida del
nmero de protenas en una mezcla o del grado de pureza de una
preparacin proteica. Tambin permite la determinacin de propiedades
cruciales de una protena como su punto isoelctrico y su masa
molecular aproximada.
Se lleva a cabo generalmente en geles de poliacrilamida. El gel acta
como un tamiz molecular retrasando la migracin de las protenas de
manera aproximadamente proporcional a su cociente carga/masa.
Aunque puede ser afectada por la forma de la protena. En la
electroforesis, la fuerza que mueve a las macromolculas es el potencial
elctrico, E. Su movilidad electrofortica, , es el cociente de la
velocidad de la partcula, V, y el potencial elctrico. Tambin es igual a
la carga neta de la molcula, z, entre el coeficiente friccional, f, que
refleja en parte la forma de la protena. Por lo tanto, el desplazamiento
de la protena est en funcin de su tamao y forma.
SDS: Generalmente se emplea el dodecil sulfato sdico, SDS, que se une
a la mayora de las protenas, en una cantidad aproximadamente
proporcional a la masa molecular de la protena (una molcula de SDS
por c/ 2 residuos aminocidos). El SDS da una gran carga negativa,
haciendo insignificante la carga intrnseca de la protena y confiere a
todas las protenas un cociente carga/masa similar. Las electroforesis en
presencia de SDS separa casi exclusivamente en funcin de masa, de
modo que polipptidos pequeos se desplazan ms rpido. Despus, las
protenas se visualizan aadiendo un colorante que se fija a estas pero
no al gel. De esta manera, se comparan las posiciones de diferentes
se
usan
Determinacin de la Secuencia.
mtodos
de