ESPECTROFOTOMETRIA UV VISIBLE

DETERMINACION DE HIERRO
1. OBJETIVO
Determinacin de hierro.
2. MARCO TEORICO
La espectroscopia ultravioleta-visible o espectrofotometra ultravioleta-visible (UV/VIS) es
una espectroscopia de emisin de fotones y una espectrofotometra. Utiliza radiacin
electromagntica (luz)
de
las
regiones visible, ultravioleta cercana
(UV)
e infrarroja cercana (NIR) del espectro electromagntico, es decir, una longitud de onda
entre 380nm y 780nm. La radiacin absorbida por las molculas desde esta regin del
espectro provoca transiciones electrnicas que pueden ser cuantificadas.
La espectroscopia UV-visible se utiliza para identificar algunos grupos funcionales de
molculas, y adems, para determinar el contenido y fuerza de una sustancia.
Se utiliza de manera general en la determinacin cuantitativa de los componentes de
soluciones de iones de metales de transicin y compuestos orgnicos altamente
conjugados.
Se utiliza extensivamente en laboratorios de qumica y bioqumica para determinar
pequeas cantidades de cierta sustancia, como las trazas de metales en aleaciones o la
concentracin de cierto medicamento que puede llegar a ciertas partes del cuerpo.
Una diferencia obvia entre ciertos compuestos es su color. As, la quinona es amarilla; la
clorofila es verde; los 2,4-derivados del dinitrofenilhidrazona de aldehdos y de cetonas se
extienden en color de amarillo brillante a de color rojo oscuro, dependiendo de la
conjugacin del enlace doble; y el aspirin es descolorido.

Longitud de onda: se define como la distancia entre los picos adyacentes y puede
ser medida en metros, centmetros, o nanmetros (10^(-9) metros).

Frecuencia: es el nmero de ciclos (picos y valles) por segundo, sus unidades

estn dadas en Hertz que son ciclos por segundos (Hz).

La luminiscencia ocurre debido a la emisin de luz por una sustancia determinada y esto
ocurre cuando un electrn regresa a su estado inicial despus de haber sido excitado y
libera una energa como un fotn. Podemos encontrar tres tipos de nombres para la
espectroscopia de luminiscencia, para diferentes tcnicas:

Espectroscopia de fluorescencia molecular

Espectroscopia de fosforescencia molecular

Espectroscopia de quimiluminiscencia
3. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

1. Pesar aproximadamente 5 gramos de la muestra

2. Tarar el crisol
3. Calcinar la muestra a 550C
4. Retirar la muestra, enfriar y agregarle 5 -10 ml. de HC1 1:1.Calentar la muestra con el
cido suavemente para ayudar la disgregacin
5. Pasar a un vaso de precipitados, lavando con agua lo que quede en el crisol, luego
llevar a ebullicin el contenido del vaso hasta reducir a la mitad del volumen.
6. Filtrar si es necesario y enrasar en una fiola de 100 ml.
7. Preparar el stock de fierro de 200 ppm, con sulfato ferroso y amonio ppm; pesar 0.7021
gramos y disolver con agua destilada en una fiola de 500 ml.
8. Preparar los estndares de:2,4,8 ppm fierro en 100 ml. cada uno a partir del stock
preparado.
9. Extraer 10 ml. del stock de fierro y verterlo a un vaso de precipitado y agregar 0.5 ml.
de Acetato de sodio al 5%, 1.0 ml. de clorhidrato de hidroxilamina al 1%, 1.0 ml. de
ortofenantrolina al 0.1% y verificar el pH que este aproximadamente a 3.5 en caso de no
estar regular agregando gota a gota de acetato de sodio, contando el nmero de gotas.
10. Preparar el blanco de la siguiente manera:
10 ml. de agua destilada
0.5 ml. De acetato de sodio
0.5 ml. de acetato de sodio .1.0 ml. de clorhidrato de hidroxilamina
1.0 ml. de ortofenantrolina.
11. Preparar la curva de calibracin con los estndares de 2,4,6 ppm. Leyendo a una
absorbancia de 508 nm, de la siguiente manera :
12. De cada estandar extraer 10 ml., verterlo a un tubo de ensayo y a cada uno de ello
agregar:
0.5 ml. de acetato de sodio mas el volumen (gotas)de acetato de sodio,que fueron
necesarios para llegar al pH = 3.5,en la prueba del paso No 9
1.0 ml. de clorhidrato de hidroxilamina
1.0 ml. de ortofenantrolina.
Dejar en reposo durante 10 minutos y efectuar las lecturas.
13. Tomar 10 ml. de la muestra y verterlo a un vaso de precipitado y agregar 0.5 ml. de
Acetato de sodio, 1.0 ml. de clorhidrato de hidroxilamina, 1.0 ml. de ortofenantrolina,
verificar el pH que este aproximadamente a 3.5 en caso de no estar regular agregando
gota a gota de acetato de sodio, contando el nmero de gotas.
14. Tomar 10 ml. de la muestra y agregar:
0.5 ml. de acetato de sodio ms el volumen utilizado para regular el pH.

 1.0 ml. de clorhidrato de hidroxilamina

1.0 ml. de ortofenantrolina
Dejar en reposo durante 10 minutos y efectuar la lectura absorbancia a la misma
longitud de onda.
15. Expresar los resultados en mg. De hierro/100 g. de muestra realizando el clculo
mediante la curva de calibracin, por regresin lineal y mediante la expresin A = Ebc
4. RESULTADOS

5. CUESTIONARIO
1. Cmo se determinara la absortividad molar de una sustancia por ejemplo hierro y
colorante del paprica.
Se determina con la formula:
E=A/bc
E=absortividad molar,
A=absorbancia,
b=tamao de la celda (por lo general suelen ser de 1cm),

c=concentracion de la muestra
La concentracin debe estar en mol/lt,