UNIVERSIDAD NACIONAL DE TUMBES

FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS

ESCUELA DE INGENIERIA FORESTAL Y MEDIO AMBIENTE

PRACTICA N 05
SIEMBRA Y AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS

DOCENTE

: Mblga. LILIANA SOLIS CASTRO

ESTUDIANTE

: JUANA DE LOS MILAGROS CHIROQUE ZETA

ESCUELA

: INGENIERIA FORESTAL Y MEDIO AMBIENTE

CICLO

: VI CICLO

Tumbes, marzo de 2010.

I.

INTRODUCCIN
Los medios de cultivo son utilizados para identificar microorganismos, aislarlos y
observar su desarrollo con diversos fines.
En la prctica clnica e industrial se recurre a diversas tcnicas para el aislamiento de los
microorganismos dependiendo de los objetivos especficos de cada actividad. El grado
de cuidado que se tenga en la siembra de los microorganismos repercutir en la calidad
de los resultados.
La prctica microbiolgica es muy sensible a la destreza de los operadores, a la asepsia
y a la pertinencia de los equipos, instrumentos y materiales para conseguir que los
micoorganismos sembrados prosperen. Pero, generalmente la pericia del observador es
el principal factor para el xito.

II.

OBJETIVOS
1. Familiarizarse con la tcnica de siembra en estra para la obtencin de colonias
microbianas aisladas.
2. Aislar cultivos puros de una muestra conteniendo flora mixta

III.

REVISION BIBLIOGRAFICA
SIEMBRA DE MEDIOS DE CULTIVO
Un microorganismo se siembra en un medio lquido o en la superficie de un medio
slido de agar. Los medios de cultivo contienen distintos nutrientes que van, desde
azcares simples hasta sustancias complejas como la sangre o el extracto de caldo de
carne. Para aislar o purificar una especie bacteriana a partir de una muestra formada por
muchos tipos de bacterias, se siembra en un medio de cultivo slido donde las clulas
que se multiplican no cambian de localizacin; tras muchos ciclos reproductivos, cada
bacteria individual genera por escisin binaria una colonia macroscpica compuesta por
decenas de millones de clulas similares a la original. Si esta colonia individual se
siembra a su vez en un nuevo medio crecer como cultivo puro de un solo tipo de
bacteria.
Muchas especies de microbios habitan normalmente las diferentes partes de nuestro
cuerpo, como son la cavidad bucal, conducto intestinal y la piel, en donde se encuentran
en cantidades extraordinarias. De igual manera nuestro ambiente aire, suelo y agua-, se
compone de toda una diversidad de bacterias y otros microorganismos. El estudio de los
microorganismos en estos hbitats exige que se conozcan los microorganismos
especficos presentes. Para lograr esto es necesario aplicar tcnicas que ayuden a
desenmaraar las poblaciones mixtas y complejas de microorganismos, o cultivos
mixtos, y obtener cultivos puros de especies distintas y separadas. Un cultivo puro est
formado de poblaciones de clulas derivadas de una sola clula
El cultivo puro representa las condiciones artificiales para el desarrollo de las bacterias
y otros microorganismos y las condiciones impuestas a los microorganismos mediante
el manejo del laboratorio; es imperativo que el organismo se asle y se desarrolle en el
laboratorio como un cultivo puro
TECNICAS DE SEMBRADO DE MEDIOS DE CULTIVO
Se tienen diversas tcnicas para el sembrado, dependiendo del tipo de organismo y la
consistencia del medio de cultivo, estas pueden ser:

Por estras, utilizando asa de cultivo y asas de vidrio.

Por extensin en placas petri
Por picadura en medios slido y semislido

IV.

EQUIPOS, MATERIALES, REACTIVOS Y MUESTRAS.

-

Asa de siembra
Balanza de brazo marca OHAUS.
Mechero de alcohol.
Placas petri
Tubos de ensayo Probeta.
Medio de cultivo (AGAR)
Guantes

Balanza de brazo

Tubos de ensayo

Mechero de alcohol

Probeta

Placas petri

Medio de cultivo Agar

V.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
1. E medio de cultivo a preparar en esta practica fue el agar; paro lo cual se hizo una
operacin bsica usando la regla de 3 simple para preparar una cantidad de 50 ml.,
teniendo en cuenta las indicaciones del proveedor del producto, el mismo que indica que
se debe usar 60g del medio de cultivo granulado en 1 litro de agua.
60 g 1000 ml
Xg

50 ml

60 g x 50 ml.
1000 ml
3 g.

2. Se pes 3g de Agar y se midi 50 ml de agua destilada.

3. Se ech el agua en el matraz de Erlenmeyer y se le agreg los 3 g., luego se agit la

mezcla.

4. Se tapone el matraz con algodn y se calent la solucin en el mechero, con la

finalidad de disolver y esterilizar la solucin, quedando de esta manera listo el medio
de cultivo.

VI.

CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
1. La siembra de medios de cultivo para la obtencin de colonias microbianas aisladas
se puede realizar con diversas tcnicas, una de ellas es la siembra en estras en
medios slidos.
2. El desarrollo de las colonias de microorganismos sembrados en medios de cultivo
requiere un rango de temperatura permanente. Para el caso de la incubacin de
Escherichia coli se recomienda entre 35 37 C.
3. La inoculacin requiere de procedimientos que aseguren la asepsia para evitar la
contaminacin de los medios de cultivo con otros microorganismos, es necesario
tener el cuidado respectivo y el uso de materiales adecuados a fin de tener colonias
aisladas.

BIBLIOGRAFIA
PIATKIN K.D. y Yu. S. KRIVOSHEIN
1990
Microbiologa con Virologa e Inmunologa. Espaa: Editorial Mir. Pp.
582.
http://www.educa.madrid.org/web/ies.alpajes.aranjuez/argos/actividades/3ESO/bacterias_1.pdf