Sie sind auf Seite 1von 6

Page -1-

Gua de Estudio Para el Cuarto Examen de Anlisis Instrumental


Preparado por: Prof. Jorge Castillo

Mayo / 2011

El examen cubrir los captulos 26, 27, 20 y 28 de ellos se recomienda hacer los siguientes problemas de su libro1:
(recuerde, el guin entre nmeros ejem. 1-10 significa todos los problemas del 1 al 10)
Captulo 26
1-11, 13-14, 16-17, 19-22, 26, 2930

Captulo 27
1, 4-7, 10-13

Captulo 20
NA

Captulo 28
1, 2, 3, 4, 5, 7, 9

Captulo 26
1.

Establezca en que consisten y determine las diferencias entre las siguientes clasificaciones de los mtodos
cromatogrficos en columna:

2.

Establezca en que consisten, determine las diferencias y de ejemplos de sus aplicaciones de los siguientes
procesos de separacin (equilibrios) empleados en las tcnicas anteriores:

3.

Cromatografa de Gases
Cromatografa de Lquidos
Cromatografa de Fluido Supercrtico
Electrofresis capilar

Absorcin
Particin
Exclusin Molecular
Intercambio inico
Afinidad
Electrofresis

Estudie las definiciones y trminos siguientes:

Fase mvil y fase estacionaria


Tiempo de retencin
Tiempo muerto
Tiempo de retencin relativo
Ancho de base
Velocidad lineal
Nmero de platos tericos
Altura de plato terico
Coeficiente de particin
Factor de retencin
Factor de separacin
Resolucin

4.

Estudie y practique la forma de obtener el nmero de platos tericos (N) y la altura de un plato terico (H)

5.

Estudie y practique la forma de obtener la resolucin de una columna; Establezca los lmites numricos de una
buena resolucin e Identifique los factores de los cuales depende.

Douglas A. Skoog, James Holler y Stanley R. Crouch, Principles of Instrumental Analysis, 6th ed., Editorial: Thomson/Brooks/Cole, 2007

Page -26.

Estudie y practique la forma de obtener el US Pharmacopeia (USP) tailing factor y sus diferencias del factor
de asimetra (As) establezca los lmites numricos de un tailing aceptable. Identifique las causas que dan
origen al tailing, los problemas que puede crear y las formas en las que se puede eliminar.

7.

Estudie los factores que afectan el ensanchamiento de los picos cromatogrficos empleando las curvas de van
Deemter.

8.

Estudie el significado de cada uno de los trminos de la ecuacin de van Deemter y las variables que afectan
cada uno esos trminos.

9.

Estudie las ventajas, desventajas y factores que involucran las formas para mejorar una separacin
Cromatogrfica:

Incrementando la separacin de las bandas


Disminuyendo el ensanchamiento de las bandas

10. Estudie en que consiste el problema general de la elusin y estudie las formas de eliminarlo (en HPLC y GC)
11. Estudio las opciones con que se cuenta para aumentar el factor de separacin () en las separaciones
cromatograficas.
12. Estudie en que consisten los factores de respuesta (absolutos y relativos) y la importancia de su uso apropiado.
13. Recuerde practicar problemas del tipo:

Curva de calibracin con estndar externo (de un paso nivel)


Mtodo de normalizacin

Captulo 27
1.

Identifique las partes esenciales de un instrumento de cromatografa de gases y estudie la funcin e importancia
de cada una de esas partes.

2.

Identifique los requisitos para analizar una muestra por GC

3.

Estudie las razones que justifiquen el uso de un determinado gas de arrastre en GC (ej. H2 vs He vs N2)

4.

Explique el funcionamiento, ventajas, desventajas y diagrama (con flujos) de partes de un inyector en modo:
Split y Splitless

5.

Estudie los requisitos con que debe cumplir el inyector y el horno de un GC

6.

Estudie las diferencias, ventajas y desventajas de una separacin cromatografica Isotermal y una Programada

7.

Explique las diferencias, ventajas


Megabore .

8.

Estudie en que consisten las columnas FSOT

9.

Estudie las diferencias y las ventajas entre las fases: Adsorbidas, Enlazadas y Crosslinked

desventajas y componentes de las columnas: Empacadas, Capilares y

10. Estudie la reaccin empleada para enlazar la fase estacionaria a las columnas capilares FSOT
11. Estudie y de ejemplos de la reaccin que da lugar a la obtencin fases enlazadas
12. Identifique las propiedades deseables de una fase estacionaria para ser empleada en cromatografa de gases
13. Identifique cuales sern las caractersticas ideales de un detector ideal en GC

Page -314. Estudie los efectos que tendr sobre una separacin cromatografica los siguientes factores:

Volumen de inyeccin
Temperatura del Horno
Dimetro de la columna
Dimetro del film de fase estacionaria
Polaridad de la fase estacionaria
Split empleado

15. Estudie el funcionamiento de los siguientes detectores de GC:

TCD (Detector de Conductividad Trmica)


FID (Detector de Ionizacin de Flama)
AED (Detector de Emisin Atmica)
ECD (Detector de Captura de Electrones)

Captulo 20
1.

Estudie la funcin, importancia y distribucin de los siguientes componentes de un espectrmetro de masa:

Sistema de entrada
Fuente de iones
Analizador de Masa
Detector
Sistema de vaci

2.

Estudie el funcionamiento de la forma de introduccin de muestra (Interface) empleando columnas capilares

3.

Estudie el funcionamiento (diagrama) ventajas y desventajas de las siguientes fuentes de iones:

4.

EI (Electrn-Impact) Impacto de electrones y CI (Chemical-Ionization) Ionizacin Qumica

Estudie el funcionamiento de los siguientes analizadores de Masa:


Trampa de iones y Cudruplo

5.

Estudie el funcionamiento del multiplicador de electrones como detector

Captulo 28
1.

Identifique y explique las ventajas de las tcnicas de HPLC y GC

2.

Identifique las partes esenciales de un instrumento de HPLC y estudie la funcin e importancia de cada una de
esas partes.

3.

Identifique los problemas que presenta el bombeo de lquidos e indique las formas de eliminarlas

4.

Estudie el funcionamiento (diagrama) de las bombas reciprocas

5.

Estudie la forma de eliminar las pulsaciones de una bomba reciproca

6.

Estudie como funciona y las diferencias los sistemas de mezclado a baja y alta presin

7.

Estudie en que consiste un diagrama de gradiente empleado en una separacin y su diferencias, ventajas y
desventajas sobre la separacin isotermal.

Page -48.

Estudie el funcionamiento y diagrama del inyector de HPLC

9.

Estudie el funcionamiento bsico y diagrama de los siguientes detectores:

Detector de absorbancia (UV/Vis)


Detector de ndice de refraccin
Detector de fluorescencia

10. Establezca y estudie las diferencias entre:

Cromatografas de Absorcin, Particin, Intercambio inico, y Exclusin molecular


Fase Normal y Fase Inversa
Filtracin en gel y Permeacin en gel
Resina catinica y resina aninica
Cromatografa de particin y cromatografa de absorcin
Separacin isocratica y separacin con gradiente

11. Estudie en que consisten los siguientes tipos de Soporte: Pelicular y poroso
12. Estudie los efectos sobre la separacin cromatogrfica si se modifican los siguientes factores:

Dimetro de la columna
Dimetro de la partcula
Longitud de la columna
Temperatura de la columna
Largo de onda empleado (UVVis)
Efecto de la pureza de la silica empleada en el soporte

Preguntas Adicionales
1.

Normalmente que tipos de fases mviles empleamos en columnas:

Cromatografa de particin de Fase Normal


Cromatografa de particin de Fase Inversa

2.

Cual es la diferencia entre una fuente de ionizacin fuerte y una dbil? Indique las ventajas y desventajas de
ellas.

3.

Que tipos de gases se emplean en CI?

4.

En que difieren las cmaras de ionizacin de EI con la empleada en CI?

5.

Cual es la diferencia entre ion molecular (precursor, padre) y ion base

6.

Porque es tan importante el tener el espectrmetro de masas al vaci?

7.

Explique el funcionamiento de: CI y EI

8.

Que tipo de informacin reportan los factores de respuesta relativos?

9.

Cual es la importancia de las curvas de Van Deemter

10. Explique en que consiste el problema general de la elusin. Indique las formas para su eliminacin y/o control
11. En que consiste el fenmeno de difusin de Eddy? Porque afecta el ensanchamiento de las bandas y como se
elimina
12. Indique mediante un diagrama la forma de trabajar de un inyector de gases del tipo Split y splitless
13. Cules son las ventajas de HPLC sobre GC? Y Cules son las ventajas de GC sobre HPLC? Explique sus
respuestas

Page -514. En que consiste el soporte pelcular?


15. Cules son las propiedades ideales de un detector de HPLC?
16. Como afecta la Temperatura una separacin cromatografica de lquidos?
17. Cules son las partes de una bomba de HPLC? Cmo funciona?
18. Como trabajo un inyector manual de HPLC?
19. Cules son las diferencias entre mezclado a baja y alta presin? Cul fue el que Ud. Empleo en el laboratorio?
20. Cul es la funcin del horno en HPLC?
21. Cul de los gases de arrastre (H2 , He , N2 ) es el mejor y porque?
22. En que consiste el factor de transferencia de masas y como se relaciona con el ensanchamiento de las bandas?
23. Cul es la frmula para calcular: Resolucin, N, H, u, tM, Tf
24. Cul es la reaccin qumica empleada para enlazar las fases estacionarias a la silica?
25. Porque se prefiere usar la rea de los picos en lugar de la altura de los picos para hacer los anlisis
cuantitativos?
26. Cul es el diagrama de un detector de fluorescencia y cual el de Indice de refraccin? Cules son las ventajas
de ellos?
27. Cuando se inyecta una mezcla en un cromatgrafo de gases que contiene 1.7% v/v de benceno en
diclorometano se obtiene un rea de 2345 para el pico de benceno y 25333 para la seal del diclorometano.
Cuando una solucin de concentracin desconocida de los mismos componentes se inyecta bajo las mismas
condiciones cromatogrficas se obtiene un rea de 3721 para el benceno y 24525 para el diclorometano.
a). Determine los factores de respuesta absolutos y los relativos para cada componente
b). Determine la composicin porcentual de benceno en la mezcla de concentracin desconocida
28.

Se preparan 100 ml de una solucin que contiene 40 mg de cafena y 20 mg de acetanilida en metanol. Al


ser analizada en un cromatgrafo de lquidos se encontr un rea de 21345 para el pico de cafena y 9345 para
acetanilida. Se preparan adems 100 ml de una solucin que contiene 100 mg de un desconocido que se sabe
contiene cafena y 20 mg de acetanilida. Cuando se inyecta en el cromatgrafo se obtiene un rea de 8234 para
el pico de cafena y 8102 para acetanilida.
a). Calcule el factor de respuesta relativo de la cafena
b). Determine el % de cafena en el desconocido.

29. La Neomicina es un antibitico de amplio espectro, cuyo uso est bastante difundido. Su empleo NO est
aprobado en vacas productoras de leche ya que su uso ilegal puede dejar residuos en la leche que pueden ser
peligrosos para el consumidor, principalmente los infantes; la FDA establece que el nivel de tolerancia en la
leche sea de 0.15 ppm. Su determinacin puede llevarse a cabo empleando HPLC de la siguiente manera: A una
muestra de 20.0 ml de leche se agrega 10.0 ml de una solucin de Neomicina (0.3 ppm), la solucin resultante
se pasa a travs de una resina de intercambio que retiene selectivamente la Neomicina (Amberlite CG-50), la
columna se lava con agua destilada y se agregan 0.6 ml del reactivo OPA (Ortho-Phtalaldehyde) que reacciona
con la Neomicina. El producto de reaccin de la Neomicina con el OPA es eluido de la resina con 4 ml de
metanol/buffer alcalino. Esta solucin se almacena por 15 min a -8oC para dejar reaccionar la Neomicina
completamente, finalmente se inyectan 50 L al cromatgrafo y el rea del pico de Neomicina fue de 2345 u2.
Una segunda muestra de 20.0 ml de leche son tratados con 10.0 ml de la solucin de Neomicina (0.6 ppm) y la
solucin resultante se trata de igual forma que la primera. En este caso el rea del pico cromatografico
correspondiente al producto de la Neomicina fue de 3152. Calcul la concentracin de Neomicina (ppm) en la
Leche y determine si est dentro de las restricciones establecidas

Page -6-

30. El disolvente orgnico (Thinner) empleado para diluir pinturas, resinas y pegamentos puede ser analizado por
cromatografa de gases para determinar su composicin porcentual. Para esto se inyecta primeramente 1 L de
una solucin estndar de cada componente presente en la mezcla, los cuales son: Acetona, etanol, agua, y
xileno(s). Los datos obtenidos de cada una de las soluciones se muestran en la tabla siguiente. Una vez
analizados los estndares se estableci la identidad de cada componente en la mezcla mediante el tiempo de
retencin, al inyectar 1L de la mezcla en el cromatgrafo de gases, empleando las mismas condiciones de los
estndares, se encontr las reas de cada componente las cuales se presentan tambin en la tabla:

Componente
Acetona
Etanol
Agua
Xileno(s)

Area del
Componente
en la mezcla
34235635
22645367
11123456
12123

Area del Componente


en el estndar

Peso de cada componente en


la mezcla estndar

42134609
10234551
23443309
312673

0.7455
0.3426
0.0765
0.0854

Calcule:
a). El % de cada componente en la mezcla, Suponiendo un factor de respuesta de 1 para cada componente
b). El Factor de respuesta de cada componente (tome como estndar de comparacin a la acetona)
c). El % de cada componente en la mezcla, empleando el mtodo de normalizacin de rea.
31. La determinacin de herbicidas e insecticidas clorados en alimentos, agua potable, suelo, etc. pueden ser
determinados a niveles de trazas empleando la tcnica de cromatografa de gases, empleando un detector de
captura de electrones, mismo que mejora notablemente la sensitividad y el limite de deteccin de estos
compuestos. Adems para mayor precisin se emplea comnmente en cromatografa de gases la tcnica de
estndar interno. El 4,4'-DDT fue determinado en una muestra de 5.0 gr del suelo de una granja donde se
empleo el insecticida, la muestra se coloca dentro de un extractor Soxlet y se reflujarn 50 ml de hexano para
extraer el plaguicida durante 1 hr. A 1.0 ml del extracto se le aade 1.0 ml de una solucin de Adrin
(0.001:g/ml), de esta solucin se inyecta 1.0 :L en el cromatgrafo y las reas resultantes para cada insecticida
fueron de: 4, 4'-DDT= 13454 y Adrin= 2335682. Una mezcla estndar comercial que contiene 100 pg/ml de
Adrin y 400 pg/ml de 4,4'-DDT fue inyectada en el mismo cromatgrafo empleando las mismas condiciones
que para la extraccin, para esta solucin se reporta una rea de 1273 para el Aldrin y 23455 para el 4,4'-DDT.
Calcule la concentracin del DDT en la muestra de suelo (en pg/gr de suelo)

Das könnte Ihnen auch gefallen