Prctica 2

La presente prctica consisti en elegir el filtro ms adecuado para llevar a cabo la

determinacin de glucosa por el mtodo GOD-POD, utilizando para ello un
fotmetro. Se realiz una investigacin documental con el fin de conocer el
contexto tanto del mtodo enzimtico como del principio y caractersticas del
instrumento utilizados. La metodologa empleada fue proporcionada por el
profesor, se puso en prctica al realizar la medicin de la absorbancia de cuatro
patrones y un blanco de reactivos en cinco diferentes filtros (340, 450, 505, 546 y
578 nm). Con los resultados obtenidos, para cada filtro se graficaron la
absorbancia (eje y) vs concentracin (eje x), se analizaron las pendientes y
coeficientes de correlacin para elegir el filtro adecuado, siendo este el de 505 nm
por tener una mejor pendiente.
Discusin
Al tabular los resultados obtenidos en cada filtro se analizaron las pendientes y los
coeficientes de correlacin, en dicho anlisis el filtro elegido (505 nm) fue elegido
debido a que fue el que presentaba una mejor pendiente, es decir, se aproximaba
ms a los 45 y por tanto se esperara que el coeficiente de correlacin tambin
fuera el mejor (ms prximo a 1). Sin embargo, esto no fue as ya que el
coeficiente de correlacin fue el que menos se aproxim a 1, esto puedo deberse
a errores durante la preparacin de los patrones ya que se puedo haber pipeteado
errneamente algn componente del patrn y por tanto la absorbancias obtenidas
se vieron afectadas , de igual forma el error se pudo producir durante el anlisis de
los patrones ya que las primeras la mediciones se realizaron con lentitud debido a
la falta de prctica en el uso del equipo por lo que los movimientos para la
manipulacin de la celda fueron algo torpes, dado que el reactivo se degradaba
con el tiempo la tardanza en las mediciones pudieron afectar la concentracin y
por ende la absorbancia. De igual forma se observaron ciertas anomalas en las
celdas proporcionadas, estas presentaban rayones en el exterior y pelusas en la
parte interior, esto pudo influir en las mediciones ya que la luz que llega a la celda
puede ser menor.
Conclusiones
-Se logr elegir el filtro ms adecuado para la determinacin de glucosa por el
mtodo GOD-POD mediante el anlisis de las pendientes de los datos obtenidos
para cada patrn
-Se debe mejorar en las habilidades para la utilizacin del espectrofotmetro de
una manera ms fluida

Practica 3
La presente prctica consisti en determinar la precisin y exactitud analtica en la
medicin de la concentracin de glucosa por el mtodo GOD-POD utilizando
sueros controles, para este fin se realiz una investigacin documental en la que
se expone el contexto del tratamiento estadstico de los datos obtenidos en el
laboratorio, de los parmetros a analizar, as como la evaluacin de la variabilidad
analtica de los instrumentos por medio de grficas. La metodologa empleada fue
proporcionada por el profesor, se puso en prctica al realizar le medicin
fotomtrica de 20 sueros control, un calibrador y un blanco de reactivos a 505 nm.
Con los resultados obtenidos se calcularon la media, desviacin estndar y el
coeficiente de variacin, de igual forma se realiz una grfica de Levey-Jennings
para determinar la variabilidad analtica del instrumento.

Discusin
Una vez calculadas la media aritmtica y la desviacin estndar de las
concentraciones realiz la grfica de Lever-Jennings, en el anlisis de la grfica no
se observaron puntos de control que violen alguna de las reglas de Westgard, los
puntos control correspondientes a los tubos 12 y 19 estn ligeramente sobre -2s
pero no estn fuera de sus lmites. La mayora de los puntos se encuentra entre la
media (x) y 1s. Lo anterior indica que los resultados obtenidos en el equipo
pueden ser considerados fiables ms no se debe afirmar ya que las mediciones
fotomtricas de cada tubo tenan una variacin significativa en cuanto a la
observancia y concentracin, esto pudo deberse a que se utilizaron celdas lavadas
provenientes de la prctica anterior, ya que las celdas proporcionadas no fueron
suficientes, por lo que por lo que los residuos de agua destilada pudieron influir en
las mediciones. De igual forma otra posible causa de la variacin de las
mediciones pudo ser el tiempo de incubacin de los tubos, el espectrofotmetro
utilizado no tena espacios suficientes para todos los tubos por lo que se utiliz
otro equipo para poner a incubar los tubos restantes, en este proceso se tuvo el
inconveniente de que algunos tubos no caban en los espacios destinados para la
incubacin por lo que se procedi a trasvasar el contenido a tubos ms pequeos
lo que a su vez se traduce en diferentes tiempos de incubacin y posible
degradacin del reactivo.
Conclusiones
-

El mtodo enzimtico GOD-POD para la determinacin de glucosa por

espectrofotometra se encuentra funcionando de manera adecuada
Se debe mejorar en el manejo del instrumento fotomtrico
Se debe mejorar en la deteccin de errores o faltas a las reglas de
Westgard en las grficas de Lever-Jennins

Practica 4
La presente prctica consisti en verificar la sensibilidad y la linealidad de un
fotmetro como parte del control de calidad interno, para este fin se realiz una
investigacin documental en el que se expone el contexto de los parmetros
analticos evaluados y el principio de funcionamiento del instrumento. La
metodologa empleada fue proporcionada por el profesor, se puso en prctica al
verificar la sensibilidad del instrumento mediante la determinacin del espectro de
absorbancia de una solucin de cloruro de cobalto y al determinar a travs de la
medicin de la absorbancia de soluciones de diferentes concentraciones
conocidas de dicromato de potasio. El resultado obtenido para la sensibilidad fue
favorable, por otro lado la linealidad.