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VICERRECTORA DE DOCENCIA
INSTITUTO TECNOLGICO
METROPOLITANO ITM
MANUAL DE SEGURIDAD Y
BIOSEGURIDAD PARA LOS
LABORATORIOS DE INGENIERA
BIOMDICA DEL ITM
GENERALIDADES DE BIOSEGURIDAD EN UN LABORATORIO DE
BIOLOGA CELULAR Y MOLECULAR NIVEL II
AO 2012
ELABOR APROB
Versin 01
Johanna Carolina Arroyave Ospina Sara Mara Lpez lvarez
Fabian Mauricio Corts Mancera
Maria Teresa De Ossa Jimnez Documento
Firma:
Sara Isabel Duque Vallejo MGL 007
Sara Mara Lpez lvarez
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CONTENIDO
1. INTRODUCCIN.................................................................................... 6
1.1 PRINCIPIOS GENERALES ............................................................. 6
2. BIOPROTECCION EN EL LABORATORIO ......................................... 10
2.1 Ropas y Equipos de Proteccin Personal ...................................... 10
2.2 Comportamientos adecuados del laboratorio ................................ 12
2.3 Inmunizacin del Personal ............................................................. 13
3 CLASIFICACIN DE RIESGOS ........................................................... 14
3.1 Riesgos Biolgicos......................................................................... 14
3.2 Riesgos Qumicos .......................................................................... 17
3.3 Riesgos Fsicos.............................................................................. 27
4 LABORATORIOS DE BIOLOGA MOLECULAR: NIVEL
BIOSEGURIDAD II...................................................................................... 31
4.1 Cdigo de Prcticas ....................................................................... 31
4.2 Diseo e instalaciones del laboratorio ............................................... 33
5. CMARAS DE SEGURIDAD BIOLOGICA (CSB) ................................ 36
6. MANEJO DE RESIDUOS ..................................................................... 38
6.1 Generalidades en la disposicin de residuos ................................. 38
7. DESINFECCIN Y ESTERILIZACIN ................................................. 42
7.1 Definiciones ................................................................................... 42
7.2 Descontaminacin de espacios y superficies ................................ 42
7.3 Descontaminacin de Cmaras de Seguridad Biolgica ............... 43
7.4 Lavado y Descontaminacin de manos ......................................... 44
7.5 Desinfectantes utilizados ............................................................... 44
8. PRIMEROS AUXILIOS ......................................................................... 47
8.1 Botiqun de Primeros Auxilios ............................................................ 47
BIBLIOGRAFA ........................................................................................... 49
ANEXOS ................................................................................................................................. 50
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LISTA DE TABLAS
3
LISTA DE FIGURAS
4
LISTA DE ANEXOS
5
1. INTRODUCCIN
Riesgo individual y
Agentes tienen baja probabilidad
1 poblacional escaso o
de producir enfermedad.
nulo.
6
Agentes que producen
Riesgo enfermedades graves, de alta
transmisibilidad directa o
4 Individual y poblacional indirecta. No existen medidas
elevado. preventivas ni teraputicas
eficaces.
7
bioseguridad.
a
Conveniente, dependiendo de los procesos especficos
realizados en el laboratorio.
b
Segn la localizacin de la salida del aire
8
c
Segn los empleados en el la laboratorio.
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2. BIOPROTECCION EN EL LABORATORIO
2.1.4 Guantes.
Los guantes son imprescindibles en cualquier procedimiento de laboratorio.
Las manos pueden contaminarse fcilmente en el laboratorio, siendo fuente
de contaminacin no solo para el personal de laboratorio sino tambin para
las personas con quien se tenga contacto. Adicionalmente si hay micro-
heridas (alergias, ueros, etc.) estas facilitan la entrada de agentes
patgenos. Una vez usados, estos deben ser descartados dependiendo de
lo que se haya manipulado (sustancias qumicas o biolgicas) en los
recipientes correspondientes.
Los guantes pueden ser de diferentes materiales, siendo los ms comunes
para el trabajo en el laboratorio los guantes de ltex con talco. Otros
utilizados, son los guantes de nitrilo o los guantes quirrgicos. En el caso
del laboratorio de biologa molecular, es importante tener en cuenta que los
guantes ideales, no deben tener talco ya que esto interfiere en algunos de
los procedimientos realizados.
Adicionalmente se debe tener en cuenta, que algunas personas presentan
alergias o dermatitis despus de usar guantes de ltex.
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2.2 COMPORTAMIENTOS ADECUADOS DEL LABORATORIO
12
2.3 INMUNIZACIN DEL PERSONAL
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3 CLASIFICACIN DE RIESGOS
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Tabla 3. Va de Entrada de los Agentes Patgenos
Actividades de
Va de Entrada Mecanismo
Riesgo
-Centrifugacin de
muestras
-Agitacin de Tubos
Inhalacin de
Respiratoria* -Mezcla de muestras-
aerosoles
reactivos
-No uso de mascara
de proteccin
-Comer-Beber en el
laboratorio
-Pipetear en la boca
Digestiva Ingestin directa
-Inadecuado lavado de
manos
-No uso guantes
-Manejo y
Salpicaduras,
procesamiento de
pinchazos: contacto
Piel y mucosas muestras, No uso de
con mucosa oral,
elementos de
ocular, nasal o piel
proteccin
-Toma de muestras,
Sangunea,
Pinchazos material cortopunzante
Percutnea
contaminado
*Es importante tener en cuenta, que el flujo de aire del rea de trabajo y
la presencia de aire acondicionado, afectan la movilizacin de aerosoles.
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agua y jabn. Utilizar un desinfectante si es posible.
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Oxidantes y perxidos orgnicos: Los oxidantes son sustancias que
contienen altas cantidades de oxgeno, causan o contribuyen a la
combustin (Perxido de Hidrgeno, Nitrato de Potasio). Los perxidos, son
sustancias orgnicas que contienen estructuras inestables (-O-O-), las
cuales son altamente reactivas con otras sustancias, por lo tanto favorecen
explosin y pueden quemarse rpidamente (Perxido de benzolo,
Metiletilcetona perxido).
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Figura 9. Smbolo Sustancias Corrosivas.
Sustancias y artculos peligrosos miscelneos: En esta categora se
clasifican las sustancias o materiales que no se encuentran en las
anteriores clasificaciones y que por sus caractersticas requieren de un
manejo especial. Pueden ocasionar daos en el medio ambiente por
bioacumulacin o toxicidad (Asbesto, fibra de vidrio, slice)
Donde,
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antes de almacenar se deben tener en cuenta las incompatibilidades
qumicas. En general deben tenerse en cuenta las siguientes generalidades
de incompatibilidad qumica:
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Estabilidad y reactividad. Condiciones a evitar e incompatibilidades.
Informacin adicional.
Cubos.
Detergente no inflamable
Extintor
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debe existir una estrategia de contencin para cada una.
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ellos mismos o por alterar nuestras condiciones de trabajo o de alerta, por
ejemplo, el ruido intenso.
Recomendaciones:
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aislados o hmedos, apoyado en una pared, etc.), toma contacto con el
cable vivo.
Entre los factores elctricos que le pueden causar mal al trabajador estn:
el no hacer control de calidad a la maquinaria o equipos que funcionan con
electricidad, ya que los cables pueden tener peladuras o no se les est
dando un buen manejo lo que conlleva a un riesgo para el trabajador.
Tambin el sitio donde est ubicado el equipo, pues este no debe estar en
sitios donde se puedan tropezar con l o donde estn en contacto con agua
porque puede haber una explosin o una descarga elctrica para los que
estn cerca.
Para evitar el riesgo elctrico, se debe aplicar una serie de medidas de
proteccin:
3.3.3 Riesgos con equipos emisores de lser; rayos X; U.V.; infra rojo.
Corresponden a este grupo las emisiones de radiacin infrarroja (I.R.);
ultravioleta (U.V.); lser; etc.
La luz infrarroja puede daar la vista; acta como una fuente puntual
de calor y puede aumentar los efectos dainos de otras radiaciones.
Deben emplearse lentes apropiados que filtren la radiacin infrarroja.
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4 LABORATORIOS DE BIOLOGA MOLECULAR: NIVEL
BIOSEGURIDAD II
4.1.1 Acceso
Estar prohibido usar las prendas protectoras fuera del laboratorio, por
ejemplo en cantinas, cafeteras, oficinas, bibliotecas, salas para el
personal y baos.
4.1.3 Procedimientos
Las paredes, los techos y los suelos sern lisos, fciles de limpiar,
impermeables a los lquidos y resistentes a los productos qumicos y
desinfectantes normalmente utilizados en el laboratorio. Los suelos
sern antideslizantes.
En cada sala del laboratorio habr lavabos, a ser posible con agua
corriente, instalados de preferencia cerca de la salida.
Tanto los laboratorios como los locales destinados a los animales son
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a veces objeto de actos de vandalismo. Hay que prever sistemas de
proteccin fsica y contra incendios. Cabe mejorar la seguridad
reforzando las puertas, protegiendo las ventanas y limitando el nmero
de llaves en circulacin. Se podrn estudiar y aplicar otras medidas,
segn proceda, para incrementar la seguridad
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5. CMARAS DE SEGURIDAD BIOLOGICA (CSB)
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6. MANEJO DE RESIDUOS
GRIS
Material Reciclable: Plstico, Papel, Desechables, Cartn
VERDE
Basura Comn: Papel plastificado, Icopor, barrido del laboratorio,
ROJA
Residuos Biolgicos: Plstico, sanitarios, algodones, servilletas,
cortopunzantes o cualquier materia contaminado con fluidos
biolgicos.
Residuos Qumicos: Plstico, servilletas, sanitarios contaminados con
qumicos, recipientes de sustancias qumicas.
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El material plstico de las bolsas para residuos infecciosos, es polietileno de
alta densidad, el peso individual de la bolsa con los residuos no excede los
8 Kg., las bolsas para residuos peligrosos tienen un calibre mnimo de 1.4
para bolsas pequeas y de 1.6 milsimas de pulgada para bolsas grandes,
suficiente para evitar el derrame durante el almacenamiento en el lugar de
generacin, recoleccin, movimiento interno, almacenamiento central y
disposicin final.
6.1.3.1 Biolgicos.
Los residuos biolgicos son recolectados, inactivados por autoclave y
dispuestos finalmente a la ruta de basura comn de EEVV o al operador
especial para que sean incinerados. Cuando se dispone de sangre o
derivados, estos deben congelarse en bolsa roja, y despus son llevados a
incineracin.
Estos deben ser entregados en bolsa roja sin mezclarlos e identificados as:
Tipo de material
Fecha
NOTA: Si el material Biolgico est contaminado con reactivos qumicos
este residuo se considera un residuo qumico y no biolgico.
Material contaminado con Biolgicos
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Biosanitarios: Son todos aquellos elementos como: gasa, apsitos,
aplicadores, algodones, drenes, vendajes, mechas, guantes,
servilletas.
6.1.3.2 Qumicos.
Deben utilizarse recipientes plsticos en buen estado, bien cerrados que no
presenten fugas, para aquellos reactivos qumicos que atacan el plstico se
recibirn en frasco de vidrio
Los recipientes deben rotularse as:
Concentracin
Responsable
Adicionalmente al momento de entregar la mezcla qumica, se debe
hacer entrega al coordinador del laboratorio de los siguientes
datos:
Concentracin
Presentacin
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Cantidad
Ficha de seguridad
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7. DESINFECCIN Y ESTERILIZACIN
7.1 DEFINICIONES
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situaciones de alto riesgo. Para la descontaminacin de espacios y
superficies, las soluciones de leja pueden sustituirse por frmulas que
contengan un 3% de perxido de hidrgeno (H2O2), o alcohol al 70%.
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7.4 LAVADO Y DESCONTAMINACIN DE MANOS
El personal de laboratorio deber lavarse las manos siempre que salga del
laboratorio, y especialmente despus de realizar cualquier procedimiento.
Se deben lavar con agua y jabn, frotndose durante un mnimo de 10
segundos; a continuacin se aclararn en agua limpia y se secarn con una
toalla de papel o un pao limpio. Cuando no se puedan lavar las manos, y
solo estn ligeramente sucias pueden frotarse con alcohol al 70% o con gel
desinfectante.
7.5.2 Formaldehdo
El formaldehdo (HCHO) es un gas que destruye todos los agentes
infecciosos y esporas a temperaturas superiores a los 20C. Sin embargo,
no tiene actividad contra los priones.
Su accin es relativamente lenta y requiere una humedad relativa de
alrededor del 70%. Se comercializa en forma de polmero slido
(paraformaldehdo), en copos o comprimidos, o como formol, solucin del
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gas en agua con aproximadamente 370 g/l (37%) y con metanol (100 ml/l)
como estabilizante. Ambas formulaciones se calientan para liberar el gas,
que se utiliza en la descontaminacin y la desinfeccin de espacios
cerrados como CSB y locales y puede utilizarse como desinfectante lquido
(un 5% de formol en agua).
El formaldehdo es un gas peligroso de olor acre que puede irritar los ojos y
las mucosas, por lo que debe almacenarse y utilizarse con una campana
extractora de vapores o en zonas bien ventiladas. Adicionalmente se
presume, que tiene efecto cancergeno.
7.5.3 Alcoholes
El etanol (alcohol etlico, C2H5OH) y el 2-propanol (alcohol isoproplico,
(CH3)2CHOH) tienen propiedades desinfectantes similares. Son activos
contra las formas vegetativas de las bacterias, los hongos y los virus con
envoltura lipdica, pero no contra las esporas. Su accin sobre los virus sin
envoltura lipdica es variable. La mxima eficacia, se obtiene utilizando
concentraciones acuosas de aproximadamente un 70% (v/v): las
concentraciones ms altas o ms bajas pueden no tener tanto poder
germicida.
Las mezclas con otros agentes son ms eficaces que el alcohol por s solo;
por ejemplo, el alcohol al 70% (v/v) con 100 g/l de formaldehdo, o el alcohol
con 2 g/l de cloro libre. Las soluciones acuosas de etanol al 70% (v/v)
pueden utilizarse en la piel, las superficies de trabajo de las mesas de
laboratorio y las CSB, as como para sumergir pequeas piezas de
instrumental quirrgico. Los alcoholes son voltiles e inflamables y no
deben utilizarse en las proximidades de llamas desnudas. Las soluciones de
trabajo deben almacenarse en recipientes apropiados para evitar la
evaporacin.
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7.5.5 Perxido de hidrgeno y Percidos
Como el cloro, el perxido de hidrgeno (H2O2) y los percidos son
oxidantes enrgicos y pueden servir como potentes germicidas de amplio
espectro. Son tambin ms inocuos que el cloro para el ser humano y para
el medio ambiente. El perxido de hidrgeno se suministra en forma de
solucin al 3% lista para usar o como solucin acuosa al 30% que debe ser
diluida hasta 510 veces su volumen en agua esterilizada. Sin embargo,
esas soluciones al 36% por s solas son relativamente lentas y limitadas
como germicidas. El perxido de hidrgeno puede utilizarse para
descontaminar las superficies de trabajo del laboratorio y de las CSB, y las
soluciones ms potentes pueden servir para desinfectar el material sensible
al calor. El perxido de hidrgeno y los percidos pueden ser corrosivos
para metales como el aluminio, el cobre, el latn y el zinc, y tambin pueden
descolorar tejidos, cabellos, piel y mucosas. Siempre deben almacenarse
alejados del calor y protegidos de la luz.
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8. PRIMEROS AUXILIOS
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BIBLIOGRAFA
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ANEXOS
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ANEXO 2. TIPOS DE RESIDUOS GENERADOS Y MANIPULADOS
Biolgicos
Anatomopatolgicos: Sangre y Derivados, Cultivos celulares
(Primarios y lneas celulares).
Material plstico contaminado con biolgicos.
Qumicos:
Reactivos: TRIzol, Cloroformo, Etanol, Isopropanol, Citrato de
Sodio, NaOH, EDTA, TBE 1X, Glicgeno, Syber Green, Bromuro
de etidio, Sanitarios, Mezclas de soluciones orgnicas, Soluciones
sales.
Material plstico contaminado con qumicos.
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