Factores genticos y epigenticos en la etiologa de la

Diabetes Mellitus tipo 1

La Diabetes mellitus tipo 1 (T1D) es una enfermedad compleja resultante de
la interaccin de la Gentica, epigentica y factores ambientales. Los recientes
avances en la comprensin de las bases genticas del T1D se ha traducido en
un mayor reconocimiento de la heterogeneidad de la diabetes infantil. Tras el
xito inicial de la familia basada en anlisis del varillaje, que descubri la
fuerte vinculacin y asociacin entre variantes de genes HLA y T1D, estudios
de asociacin genmica realizada con una elevada densidad de polimorfismo
de nucletido simple plataformas de genotipado aport pruebas para una
serie de nuevos loci, aunque bien el mapeo y caracterizacin de estas nuevas
regiones que queda por realizar. T1D es una de las enfermedades ms
comunes hereditarios, y entre las enfermedades autoinmunes y posee la
mayor variedad de tipos de concordancia en gemelos monozigticos. Este
hecho, junto con las pruebas de diversas modificaciones epigenticas de la
expresin gnica, proporciona una prueba convincente de la compleja
interaccin entre factores genticos y ambientales. En T1D, fenmenos
epigenticos, como la metilacin del ADN, las modificaciones de las histonas,
y la desregularizacin de microarn, han sido asociados con la alteracin de la
expresin gnica. Y epidemiolgico creciente evidencia experimental que
apoya el papel de alteraciones genticas y epigenticas en la etiopatogenia de
la diabetes. Discutimos resultados recientes relacionados con el papel de
factores genticos y epigenticos implicados en el desarrollo de T1D.
La diabetes mellitus tipo 1 (T1D) es una enfermedad compleja que resulta de
la interaccin de factores genticos, epigenticos y ambientales. En todo el
mundo, la epidemia de T1D representa una creciente carga a la salud pblica
mundial, y la incidencia de T1D entre los nios ha ido en aumento. En las
ltimas dcadas se ha producido un aumento general de la incidencia de T1D
del 3% al 5% po ao, y se calcula que hay aproximadamente 65.000 nuevos
casos por ao en nios de 15 aos de edad. Este importante aumento mundial
de la incidencia de T1D sugiere la importancia de las interacciones entre la
predisposicin gentica y los factores ambientales en la etiologa
multifactorial de la T1D. Los factores ambientales implicados hasta el
momento incluyen la infeccin por enterovirus o retrovirus endgenos y el
consumo de protenas de la leche, as como la influencia de los contaminantes
ambientales, las variaciones de la fluctuacin intestinal y la exposicin a la
vitamina D.
Slo entre el 10% y el 15% de los pacientes recin diagnosticados tienen
antecedentes familiares positivos de T1D. Sin embargo, se puede heredar una
mayor susceptibilidad a T1D, ya que el riesgo de prevalencia promedio en
 nios de una persona con T1D es de entre el 6% y el 7% en hermanos,
mientras que entre el 12% al 67.7% de gemelos idnticos de T1D estn en
riesgo, en comparacin con el 0,4% de la poblacin general. De hecho, la T1D
es una de las enfermedades ms comunes hereditarias, con el riesgo relativo
de hermanos estimado en 15 y el rango ms grande en las tasas de
concordancia en gemelos monozigticos entre las enfermedades
autoinmunes (como el SIDA). Esto, junto con la evidencia de varias
modificaciones epigenticas de la expresin gnica, proporciona una prueba
importante y convincente de la compleja interaccin entre factores genticos
y ambientales (Fig. 1). En la T1D, los fenmenos epigenticos, como la
metilacin del ADN, las modificaciones de histonas y la desregulacin de
microARN (miARN), se han asociado con la alteracin de la expresin gnica.

Respuesta autoinmune contra las clulas beta del pncreas

Desarrollo de autoanticuerpos, insulitis y, posteriormente, la diabetes tipo 1.

FIGURA 1
Factores genticos, exgenos y epigenticos y biomarcadores en la diabetes T1D.
Los extensos estudios genticos y familiares de la poblacin durante los
ltimos 30 aos han proporcionado una explicacin de casi el 80% de la
heredabilidad de T1D, lo que sugiere el papel primario de varios alelos
(un alelo es cada una de las formas alternativas que puede tener un gen) de
riesgo en la susceptibilidad a la diabetes. Los principales genes de
susceptibilidad actualmente aceptados para T1D son los alelos HLA clase II,
que representan hasta un 50% del riesgo gentico de T1D. Entre los genes
HLA clase I, una de las asociaciones ms fuertes con T1D se informa para el
alelo B * 39, lo que aumenta significativamente el riesgo de T1D. Mltiples loci
(loci es una posicin fija en un cromosoma) no HLA contribuyen al riesgo de
enfermedad con efectos ms pequeos. Estos incluyen el gen de la insulina,
CTLA4, PTPN22, el receptor de la interleucina 2 (IL2RA), el interfern
inducido con el dominio 1 de la helicasa C (IFIH1), el bloque CAPSLIL7R, la
lectina CLEC16A, el factor de transcripcin Th1 STAT4, la tirosina fosfatasa
PTPN2 y otros loci recientemente descubiertos.
Las variantes comunes en la TD1 representan slo una parte de los riesgos
asociados con los fenotipos de enfermedades complejas. El resto de la
susceptibilidad gentica (es decir, falta de heredabilidad) puede ser explicada
por la influencia de variantes adicionales que siguen estando
insuficientemente representadas en las actuales plataformas de genotipado
aplicados en estudios de potencia, que son insuficientes para detectar el gen-
gen (gen episttica) y las interacciones del gen-ambiente. Estas interacciones
biolgicas son crticas para la Regulacin Gnica, la transduccin de seales,
redes bioqumicas y fisiolgicas y numerosas otras vas de desarrollo. El
concepto de epistasis implica que los anlisis de haplotipo, combinaciones y
sus interacciones con los factores ambientales son necesarios para establecer
el perfil de riesgo para T1D. Por lo tanto, la aplicacin de mtodos estadsticos
y computacionales que detectan patrones de epistasis en todo el genoma,
implementado en un sistema biolgico marco, puede ayudar a resolver el
problema de falta de heredabilidad.
Un importante ejemplo de una interaccin epistatic entre 2 locus es la
susceptibilidad conferida por loci HLA y PTPN22: El efecto de la codificacin
de PTPN22 para una variante R620W de protena LYP, medida por riesgo
relativo, es mayor en genotipos HLA de bajo riesgo. Experimentos en ratones
vivos sugieren que esta variante comn de PTPN22 promueve la degradacin
de la protena LYP, lo que indica un alelo de prdida de funcin. Sin embargo,
cuando se incluyen los efectos principales y los resultados se convierten en
riesgos absolutos, se puede observar que el riesgo adicional debido a PTPN22
es mayor en el grupo de alto riesgo HLA. En comparacin con PTPN22, no hay
evidencia de una interaccin estadstica con HLA de clase II genotipos INS
locus variantes, lo que apoya la hiptesis de que rs2476601 / R620W es la
ms probable causal variante de T1D.
Los ltimos avances en genmica mdica personalizada que se realizan en las
clnicas estn dirigidos a la secuenciacin integral de la enfermedad genoma,
exome, epigenoma y transcriptomes. La tecnologa de secuenciacin de
prxima generacin y varios pasos especficos en la traduccin de
informacin a travs de la transcripcin han contribuido a la cartografa
precisa y a la cuantificacin de las caractersticas de la cromatina y las
modificaciones del ADN.
El aumento de la evidencia epidemiolgica y experimental apoya el papel de
las alteraciones genticas y epigenticas en la etiopatogenia de la diabetes.
Esta revisin pretende analizar brevemente los resultados recientes
relacionados con el papel de los factores genticos y epigenticos en el
desarrollo de la T1D.

ETIOLOGA MULTIFACTORIAL DE LA T1D

La T1D resulta de la produccin deficiente de insulina, como consecuencia de
la destruccin auto inmunitaria de clulas b pancreticas mediada por clulas
T. Los eventos iniciadores en la patognesis de T1D que provocan la provisin
de antgenos de clulas B (el antgeno descrito primero es la insulina) a las
clulas dendrticas y la presentacin a las clulas T para su activacin an no
se han dilucidado. Como se representa en la Fig. 2, las citoquinas
proinflamatorias, producidas por leucocitos infiltrantes y clulas de islote,
incluyendo interleucina-1b (IL-1b), factor de necrosis tumoral-a (TNF-a) e
interfern g (IFN-g), juegan un papel central en el fracaso de clulas B y el
desarrollo de la diabetes. La destruccin es causada por la infiltracin de los
islotes de Langerhans por las clulas dendrticas, los macrfagos y los
linfocitos T, es especfica para las clulas b productoras de insulina, y no afecta
a las clulas productoras de glucagn (a) o omatostatina (d). La exposicin
prolongada a citocinas conduce a una disminucin de la capacidad de las
clulas b para producir y liberar insulina en respuesta a secretagogos y, a
largo plazo, la destruccin de las clulas por apoptosis o necrosis.
La T1D afecta tpicamente a nios pequeos, inicia en edades tan tempranas
como el primer ao de la edad; la mayora de los casos se diagnostican antes
de que el paciente tenga 18 aos de edad. El proceso autoinmune comienza
incluso antes, como lo demuestra la presencia de autoanticuerpos en el suero
frente a los antgenos especficos de T1D. Los 4 autoantgenos principales
implicados son la insulina misma, la descarboxilasa del cido glutmico, la
isoforma de 65 kDa (GAD65), el autoantgeno de insulina 2 (una fosfatasa
intracelular) y el transportador de zinc 8. Los autoanticuerpos, tales como el
autoanticuerpo de insulina, el anticuerpo de descarboxilasa de cido
glutmico, el anticuerpo asociado a protena 2 y el anticuerpo transportador
de zinc 8, son marcadores de la destruccin de clulas B mediada por
linfocitos T. Los subgrupos de linfocitos T CD4 + (auxiliar) y CD8 +
(citotxicos) son importantes en T1D. Los primeros reconocen antgenos
extracelulares y promueven la inflamacin a travs de la liberacin de
citoquinas, mientras que los ltimos responden a antgenos sintetizados
endgenamente y matan directamente clulas diana. En el momento en que
aparecen los sntomas que conducen al diagnstico clnico, se ha perdido la
mayor parte de la capacidad de secrecin de insulina de las clulas b. Por lo
tanto, la prediccin y la prevencin de T1D son de crucial importancia, y se
espera que un mejor conocimiento de los fundamentos genticos de T1D
facilitar enormemente a ambos.
Adems de los efectores de la muerte de clulas B mediados por clulas T,
otros estmulos apoptticos tambin contribuyen a la apoptosis de las clulas
. Las clulas pancreticas b rodeadas por el inflamatorio infiltrado estn
expuestas a mltiples mediadores de estrs celular, hiperglucemia y especies
reactivas de oxgeno, y en tal entorno celular se puede desarrollar tambin el
estrs endoplsmico (RE). Varios investigadores han sugerido la relacin
entre el estrs por ER y T1D mellitus. Se necesita un equilibrio entre la carga
de protena ER y la capacidad de plegado para el plegamiento adecuado de la
insulina dentro de la ER. La gran carga biosinttica, los defectos en la
maquinaria de plegado ER y las alteraciones en la regulacin de Ca 2+ pueden
interrumpir la homeostasis de ER, conduciendo a la acumulacin de protenas
mal plegadas dentro de la luz ER y el estrs ER. El estrs de ER activa un
elaborado proceso adaptativo llamado respuesta de protena desplegada. La
respuesta proteica desplegada protege contra el desarrollo de la T1D
asegurando que la funcin eficiente se mantenga en las clulas b, a pesar de
las grandes fluctuaciones en el flujo de la protena ER.
RESUMEN DE LOS FACTORES GENTICOS INVOLUCRADOS EN LA
ETIOPATOGENESIS DE LA T1D
El progreso reciente en la comprensin de la base gentica de la T1D ha
llevado a un mayor reconocimiento de la heterogeneidad de la diabetes
infantil. Se ha hecho evidente que no todas las diabetes que se presentan en
la infancia son de tipo 1. La diabetes mellitus de tipo 1 puede tener diferencias
marcadas en el tratamiento y las complicaciones de T1D. Aunque las formas
monognicas de la diabetes no se reconocen principalmente, su diagnstico
molecular ha proporcionado una visin de los genes que controlan la funcin
de las clulas b humanas, y su estudio ha puesto de manifiesto los mecanismos
bsicos de la diabetes patognesis. Estas raras formas de diabetes
 monognica tienen una importancia clnica y cientfica significativa, porque
su reconocimiento y diagnstico permiten la prevencin y el tratamiento de
las complicaciones y requieren el asesoramiento gentico apropiado para
otros miembros de la familia. Por lo tanto, es importante diagnosticar
correctamente la diabetes monognica. Las formas monognicas especficas
ms frecuentes de la diabetes en nios son la diabetes de la madurez, que
representa el 10% de la recin presentada diabetes tipo 1 y la diabetes
monognica sindrmica multisistmica, como el sndrome de Wolfram, el
sndrome de Alstrm y Wolcott -Sndrome de Rallison.

FIGURA 2
Mecanismos patgenos y factores ambientales que desencadenan el inicio de T1D en personas genticamente
susceptibles, dando como resultado la apoptosis de clulas B y la diabetes. ROS, especies reactivas del oxgeno.

La susceptibilidad a la T1D est determinada por interacciones complejas

entre varios loci genticos y factores ambientales. Las variantes allicas
comunes en los loci HLA clase II representan el mayor riesgo gentico de T1D
en nios y adultos jvenes (principalmente los genes HLA-DRB1, HLA-DQA1
y HLA-DQB1). Los alelos en el locus HLA en el cromosoma 6p21, que codifican
las protenas antgeno presentes son altamente polimrficas, explican hasta
el 50% de la agrupacin familiar de T1D a travs de una gran variedad de
haplotipos protectores y predisponentes, y el resto es aportado por mltiples
loci, slo 4 se conocan hasta hace poco. Dos haplotipos HLA clase II, DR4-DQ8
y DR3-DQ2, estn presentes en un 90% de los nios con T1D. Dentro de los
principales haplotipos de complejo de histocompatibilidad de clase II, el alelo
DRB1 * 1501-DQA1 * 0102-DQB1 * 0602 est fuertemente asociado con la
proteccin T1D. La proteccin asociada con DQA1 * 0102-DQB1 * 0602 es
dominante sobre la susceptibilidad de todos los otros haplotipos DQ, y se
piensa que esta proteccin en nios ocurre incluso en presencia de
anticuerpos de clulas de islote. La diabetes de inicio precoz (EOD)
(diagnosticada antes de los 5 aos de edad) se caracteriza por diferencias
significativas en las frecuencias de alelos HLA y haplotipos de otros grupos de
T1D. Ninguno de los 40 pacientes con EOD analizados en un estudio de
Hathout (con una edad promedio 2,6 aos) tena cualquiera de los alelos
protectores (DRB1 * 1501 o DQB1 * 0602). En esta cohorte EOD, hubo una
correlacin negativa entre GAD65 y el haplotipo predisponente DR3 / DQ2.
Otros loci establecidos asociados con el riesgo de T1D tienen efectos menores
que HLA, lo que confiere un riesgo relativo que oscila entre odds ratio (OR) =
2,38 (11p15,5, INS) a OR = 1,05 (17q21,2; SMARCE1). En la Tabla 1 se
proporciona una lista completa de variantes de loci genticos que
predisponen a T1D.
Desde la finalizacin del proyecto HapMap y el desarrollo de tecnologas de
genotipificacin de matriz masiva paralela, los resultados de los estudios de
asociacin del genoma (GWASs) han descubierto docenas de loci adicionales
slidamente replicados. Varios consorcios analizaron un nmero notable de
individuos dentro de cohortes de casos y controles (con tros en un estudio),
utilizando >200 000 marcadores para GWASs. Los resultados identificaron
slo 5 loci asociados con T1D, y en la segunda etapa de tipificacin en cohortes
adicionales, 18 loci alcanz el genoma de ancho lo que significa (P< 10-7) .
Estos resultados de GWAS se enriquecen con el reciente examen de
asociaciones del metanlisis ms grande hasta la fecha entre T1D y 2,54
millones de polimorfismos de singlenucletidos (SNPs), involucrando una
cohorte combinada de 9934 casos y 16956 controles procedentes de 6
consorcios y resultando en la replicacin de 3 loci. El seguimiento selectivo de
53 SNPs, con efectos fijos P< ,00001, en un conjunto de replicacin de 1120
tros caso-padre afectados del consorcio T1DGC, descubri 3 nuevos loci
asociados con T1D que alcanzaron significacin en todo el genoma.
Las GWAS han identificado 140 regiones con variantes polimrficas que
tienen asociacin estadsticamente significativa con la susceptibilidad a la
AID, incluyendo T1D. Numerosos ejemplos de variantes de susceptibilidad
compartidos por mltiples AIDs se resumen en la Fig. 3. Se estima que al
menos el 44% de SNPs asociados con 1 AID estn asociados con otro,
proporcionando un ejemplo de pleiotropa biolgica (una variante gentica o
un gen que tiene un efecto directo e influencia biolgica sobre el rasgo
fenotpico >1). El alelo comn de prdida de funcin de PTPN22 disminuye el
riesgo de enfermedad de Crohn, pero aumenta el riesgo de artritis reumatoide
(AR) y T1D. Otro anlisis de asociacin se realiz con mltiples SNPs de una
manera alelo-especfica, para comparar los perfiles de variacin gentica de
esclerosis mltiple (MS), espondilitis anquilosante, enfermedad tiroidea
autoinmune, AR, enfermedad de Crohn y T1D con 5 no AIDs. Este enfoque
result en la identificacin de SNPs y genes especficos con perfiles de riesgo
opuestos en 2 clases de enfermedades: la AR y la espondilitis anquilosante
forman una de estas clases, y la MS y la enfermedad tiroidea autoinmune otra.
Los genes relacionados con HLA asociados con T1D que residen en HLA clase
II DR y DQ loci son compartidos por otros AID, como la AR, la EM, el lupus
eritematoso sistmico y la enfermedad celaca. El anlisis de los puntos de
riesgo de enfermedad celaca y de T1D en una gran muestra de pacientes con
AR y controles produjo evidencia significativa de asociacin del locus TAGAP,
que se asocia con riesgo de enfermedad celaca y proteccin contra T1D. De
acuerdo con el reciente meta-anlisis de cruce fenotpico, que apoya
estadsticamente la hiptesis de que cada SNP independiente tiene mltiples
asociaciones fenotpicas, 2 clusters de genes se asociaron con T1D y otros AID.
Este anlisis se extendi a las interacciones protena-protena, revelando que
las protenas codificadas por variantes dentro de los grupos eran ms
propensas a interactuar entre s que las protenas codificadas por variantes
en otros grupos, proporcionando ms pruebas de pleiotropa biolgica en los
AID. El inmunochip es un enfoque rentable en AIDs que comparten varios loci
comunes, incluyendo T1D. Para el genotipo de variantes comunes y raras,
para mapear heredabilidad restante, y para localizar los loci establecidos, se
ha desarrollado una matriz de 200 000 SNP conocidos. Sin embargo,
probablemente ser necesario complementarla con nuevos SNP identificados
a partir de datos recientes de resecuenciacin.
Para entender la patognesis T1D utilizando los datos GWAS, es importante
aplicar un enfoque basado en la integracin de la red o va. Los datos de los
estudios piloto del Proyecto Genoma 1000 y otros datos de secuenciacin
mostraron que la secuenciacin profunda de prxima generacin en las
regiones candidatas ha sido exitosa en el descubrimiento de las 4 variantes
raras protectoras en el gen IFIH1. Este enfoque combinado de la prxima
generacin de tecnologas de secuenciacin y GWASs fortaleci la hiptesis
de la patognesis de la enfermedad que implican la interaccin virus-gentica
y aument los niveles de interfern tipo 1 como un cofactor en la destruccin
de clulas beta ().
Otra informacin interesante sobre la patognesis de T1D fue proporcionada
por la cartografa del bloque de desequilibrio de ligamiento (LD) asociado con
T1D con el gen del ligando de IL-2-IL-21 y variante en la subunidad del gen
IL2RA del receptor de IL-2. La protena codificada por IL2RA se regula
positivamente en clulas T efectoras y la protena expresada a partir del alelo
protector es mayor en clulas de memoria CD4 +, como un ejemplo de prdida
de funcin de activacin de la respuesta inmune adaptativa que se atena en
T1D. La disminucin de la expresin de la citocina de IL-2 a partir del alelo de
riesgo en ratones no obesos (NOD) da como resultado la supresin de las
clulas T reguladoras (T), indicando la complejidad y especificidad celular de
la auto-tolerancia.
La iniciacin de una respuesta inmune mediante el reconocimiento de un
antgeno especfico por los receptores transmembrana de clulas T (TcR)
puede resultar en un ataque autoinmune, potenciado adicionalmente por
variantes genticas que alteran la presentacin del antgeno o la sealizacin
de las clulas T durante la autoproteccin tmica. Tales variantes, que regulan
negativamente la respuesta de activacin de TcR, se mapean en loci PTPN22,
UBASH3A y CTLA4. Al igual que la variante PTPN22 R620W, que puede
interferir con la induccin de tolerancia adecuada en el timo a travs de una
menor secrecin de IL-2 e IL-10 por las clulas T sobre la activacin de TcR,
una T1D asociada A17T CTLA4 variante afecta de manera similar a la
activacin de clulas T. UBASH3A se expresa especficamente en linfocitos,
con un alelo de riesgo asociado con la ganancia de funcin mediante la
sobreexpresin de protenas en las lneas linfoblastoides de pacientes con
T1D. Estos conocimientos sobre las alteraciones de las vas genticas
asociadas con las variantes de riesgo en T1D representan objetivos para los
esfuerzos de medicina traslacional, ejemplificados por la prevencin y
reversin de la diabetes en ratones mediante la suplementacin con IL-2 y
descubrimiento de inhibidores de molcula pequea del producto de la
protena Lyp PTPN22.

Las ideas funcionales sobre el papel de los loci de susceptibilidad a T1D

revelaron que los genes candidatos estn implicados en funciones
relacionadas con la respuesta inmune adaptativa mediada por clulas T y los
mecanismos de tolerancia y tambin a la inmunidad innata implicada en el
reconocimiento de los antgenos de clulas B. La cartografa fina post-GWAS
y la caracterizacin funcional de los loci de riesgo T1D an no se han
realizado. Uno de los desafos ms importantes en la caracterizacin funcional
postGWAS es distinguir la prdida de funcin de las mutaciones de ganancia
de funcin y los mecanismos que causan pequeos cambios en la dosificacin
gnica con consecuencias fenotpicas especficas de la enfermedad. Muchos
SNPs identificados en GWASs son slo SNPs de etiquetas que estn en LD con
la variante causal, adems de estar localizados en regiones no codificantes de
protenas del genoma, tales como elementos reguladores de genes que no
afectan directamente a la estructura proteica. Por lo tanto, es particularmente
importante realizar una cartografa sistemtica de sitios de unin de factor de
transcripcin y miARN, modificaciones de cromatina y locus de rasgo
cuantitativo de expresin, porque estas variaciones pueden ser
fenotpicamente relevantes. El enlace existente y los resultados de GWAS para
los loci predisponentes a T1D pueden mejorarse identificando las variantes
restantes asociadas con un riesgo ms alto. Se estima que los SNP validados
hasta la fecha explican una fraccin del 10% al 40% de la heredabilidad total
en la mayora de las enfermedades de rasgos complejos. Muchas ms
variantes adicionales pueden identificarse aumentando el tamao de la
muestra y la potencia de anlisis, combinando la informacin de GWAS con
los perfiles de expresin gnica para la construccin de redes gnicas
derivadas de los datos de genmica y protemica integrados y teniendo en
cuenta tambin las interacciones gen-gen (epistasis) como tambin los
factores epigenticos y ambientales.

FACTORES EPIGENTICOS EN LA ETIOLOGA DE LA T1D

La epigentica puede definirse como el estudio de la herencia estable de la
expresin gnica que se produce sin modificacin de la secuencia de ADN,
mediante mecanismos que incluyen metilacin del ADN, una variedad de ARN
no codificantes y modificaciones de histonas postraductora catalizadas
enzimticamente. El progreso reciente en la comprensin de la
susceptibilidad gentica en T1D se encuentra en una dinmica compleja con
otras hiptesis propuestas para explicar la creciente incidencia de T1D,
incluyendo infecciones; Factores socioeconmicos, de estilo de vida y
dietticos; Contaminantes; Ambiente prenatal; Variabilidad del microbiota
intestinal; Y factores epigenticos como la metilacin del ADN y la
modificacin de las histonas. El desarrollo, el mantenimiento, el metabolismo
y la regeneracin de las clulas b pueden estar influenciados por mecanismos
epigenticos. Adems, las respuestas inmunes, incluyendo la activacin de
clulas T y la induccin de clulas T, se basan en la regulacin epigentica
apropiada. Adems, el metabolismo de la insulina y la glucosa in fl uyen en el
epigenoma de tejidos como el hgado y potencialmente el pncreas, lo que
podra contribuir a patologas asociadas a la T1D. La esperanza es que los
avances en epigenomics T1D proporcionar una nueva comprensin de la
patognesis, el tratamiento potencial, o incluso la prevencin de T1D.

CONTROL EPIGENTICO DE LA TRANSCRIPCIN GENTICA

EN LA DIABETES
La metilacin del ADN es un mecanismo epigentico especfico del tejido
celular como respuesta celular al estrs esencial para regular la expresin de
los genes. Las ADN metiltransferasas catalizan la adicin covalente de un
grupo metilo a la posicin C5 en los dinucletidos de citosina guanina (CpG),
usualmente encontrados en las regiones promotoras de genes, induciendo as
el silenciamiento gnico transcripcional. En los AIDs, incluyendo T1D, los
defectos en la metilacin de CpG, resultantes de la disminucin de la actividad
de metiltransferasa de ADN, estn asociados con la expresin de genes
desregulados, inestabilidad cromosmica y una mayor susceptibilidad al
desarrollo de la enfermedad. Varios factores nutricionales, incluyendo dietas
deficientes en metionina, cido flico y colina, estn asociados con la
hipometilacin global. La hipometilacin especfica del tejido de ADN en los
hepatocitos se observa en modelos animales como resultado de las
perturbaciones inducidas por la diabetes del grupo metilo y del metabolismo
de la homocistena, lo que conduce a deficiencia de metila funcional. Adems,
un estudio reciente de los patrones de metilacin del ADN de 7 CpG proximal
al sitio de inicio de transcripcin en el promotor del gen INS revel que los
pacientes con T1D tienen una metilacin reducida de CpG19, CpG-135 y CpG-
234 (P = 23 1078) Y el aumento de la metilacin de CpG-180 en comparacin
con los controles. Se aplic con xito en la deteccin de ADN de clulas B
circulante en sangre perifrica de ratones diabticos un mtodo novedoso, el
ensayo de reaccin en cadena de polimerasa cuantitativa altamente especfica
de metilacin y es muy prometedor para el futuro monitoreo de la muerte de
clulas B y la prediccin del inicio de la diabetes. Otro estudio, un estudio de
asociacin de todo el epigenoma, que incluy 27 458 sitios diferentes de CpG
dentro de 14 475 promotores en los monocitos de 15 pares de gemelos
monocigticos discordantes T1D, identific 132 sitios diferentes de CpG
donde las diferencias significativamente correlacionadas con el estado
diabtico. Este estudio incluy la identificacin de las posiciones variables de
la metilacin de la T1D en pacientes antes de la aparicin de autoanticuerpos
T1D, demostrando as que la variable de metilacin especfica de la T1D
presenta la enfermedad clnica del anttato, incluyendo cambios epigenticos
en el gen HLA de clase II, HLA-DQB1, orinGAD2, Un autoantgeno T1D
importante implicado en la etiologa T1D.
Varias clases de ARN pequeo pueden regular los genes dirigiendo
transcripciones en el citoplasma, tales como miARNs, ARN de interferencia
pequeos, ARNs de repeticin asociados y ARNs especficos de la lnea
germinal. El genoma humano codifica numerosas molculas no codificantes,
incluyendo> 1.600 precursores de miARN, generando hasta 2237 miRNAs
maduros. La unin de miRNAs a 3 regiones no traducidas (UTRs) de mRNA
objetivo es coherente con un papel de miRNAs como reguladores negativos
clave de la expresin gnica, que participan en el control de los procesos
celulares y patognesis de la enfermedad. Se ha sugerido que la capacidad de
las molculas de ARN no codificantes de asociarse con 3 UTR de ARNm diana
y de reprimir su traduccin es necesaria para el desarrollo y la funcin
adecuados de las clulas b. Durante las etapas iniciales de T1D, las clulas
se someten a diversos tipos de estmulos de estrs, causando disfuncin y
muerte que pueden estar asociadas con modificaciones en la localizacin de
miARN, lo que podra resultar en disfuncin de clulas B. Los miRNAs
maduros pueden ser liberados por las clulas en el compartimiento
extracelular. Basado en un modelo experimental, el aumento de los niveles de
miR-375 circulante se puede utilizar como un marcador de la muerte de las
clulas b y un predictor potencial de la diabetes, antes de la aparicin de la
hiperglucemia. En muestras de suero de nios con T1D de inicio reciente y
edad similar. Los controles sanos, la funcin residual de las clulas b y el
control glucmico despus de 3 meses de enfermedad clnica se asociaron con
la sobreexpresin de miR-25, presente poco despus del diagnstico,
proporcionando evidencia del papel de los miARN como biomarcadores
clnicamente aplicables en T1D. Los niveles de expresin de miR-326 son
significativamente ms altos en linfocitos de sangre perifrica de pacientes
con anticuerpos T1D positivos que en pacientes con T1D sin autoanticuerpos.
Anlisis de miARN expresin en clulas T en los pacientes con T1D revelaron
que miR-342 y miR-19 se downregulated, mientras que miR-510 mostr
significativamente ms alta expresin. A la luz de estos resultados, la
medicin de los niveles especficos de miARN puede ser til para identificar a
las personas en riesgo de desarrollar T1D, posiblemente previniendo el
desarrollo de la enfermedad. La transgnesis lentiviral se ha utilizado para
generar ratones NOD en los que el gen candidato a Slc11a1 T1D fue silenciado
por interferencia de ARN. Silenciamiento redujo la frecuencia de T1D, lo que
demuestra un papel de Slc11a1 en la modificacin de la susceptibilidad a T1D.

PERFILES DE LAS MODIFICACIONES POSTTRANSLACIONALES DE LA

HISTONA EPIGENEA EN LA DIABETES
El estado de cromatina de los promotores de genes determina la modulacin
de la expresin gnica como respuesta a diversos estmulos. Dentro de la red
identificada en los linfocitos, las modificaciones postraduccionales (PTM) en
los aminocidos N-terminales de las histonas, incluyendo la acetilacin,
metilacin, fosforilacin o ubiquitinacin, podran afectar la etiologa de la
T1D y sus complicaciones. Estudios recientes han demostrado que los
estmulos diabticos, incluyendo la hiperglucemia, pueden alterar los niveles
de PTM histona clave, incluyendo H3K9Ac, H3K9me2, H3K9me3 y H3K9me1,
en los promotores de varios genes relacionados con la patognesis de la
diabetes. CLTA4, un conocido gen de susceptibilidad a T1D, tambin est
sobreexpresado en los linfocitos de los pacientes con T1D en comparacin con
los controles, adems de mostrar metilacin diferencial H3K9me2. Los datos
recientes obtenidos por la inmunoprecipitacin de cromatina unida a
microarrays mostraron variaciones marcadas en los niveles de H3K9Ac en las
regiones aguas arriba de HLA-DRB1 y HLA-DQB1 dentro del locus T1D en los
monocitos de pacientes con T1D con respecto a los controles.
En resumen, T1D es una AID polignica de origen complejo, causada por la
interaccin de factores genticos, epigenticos y ambientales. Nuestro
conocimiento actual de la etiopatogenia T1D ha sido significativamente
mejorado por GWAS y recientes anlisis del estudio de la asociacin de todo
el epigenoma con el objetivo de identificar mecanismos epigenticos con el
potencial de revelar las redes especficas que pueden estar involucrados en
las interacciones gen-medio ambiente. Los avances en la investigacin
epigentica pueden permitir la identificacin y el uso potencial de los miARN
circulantes como biomarcadores sanguneos epigenticos para la deteccin
de la muerte de las clulas y la prediccin de la diabetes.