EROS e Exercicio Fisico

1
UNIVERSIDADE DO ESTADO DE SANTA CATARINA UDESC

CENTRO DE CINCIAS DA SADE E ESPORTES CEFID
PROGRAMA DE PS-GRADUAO EM CINCIAS DO MOVIMENTO
HUMANO
LILIAN CARDOSO VIEIRA
EFEITOS DA SUPLEMENTAO DE TAURINA SOBRE OS

PARMETROS DE ESTRESSE OXIDATIVO MUSCULAR INDUZIDOS
POR EXERCCIO EXCNTRICO
FLORIANPOLIS SC
2009
2

Dissertao de Mestrado apresentada

banca examinadora como requisito para
obteno do ttulo de Mestre no Programa de
Ps-Graduao Stricto Sensu em Cincias
do Movimento Humano, da Universidade do
Estado de Santa Catarina.
Orientador: Prof Dr. Magnus Benetti
FLORIANPOLIS SC
2009
3

Dissertao de Mestrado aprovada como requisito para obteno do ttulo de Mestre no

Programa de Ps-Graduao Stricto Sensu em Cincias do Movimento Humano, da
Universidade do Estado de Santa Catarina.
Banca examinadora:
Orientador: _________________________________________
Prof. Dr. Magnus Benetti
UDESC - SC
Membro: _________________________________________
Prof. Dr. Ricardo Aurino de Pinho
UNESC - SC
Membro: _________________________________________
Prof. Dr. Fabrizio Caputo
UDESC - SC
Membro: _________________________________________
Prof. Dr. Patrcia Faria Di Pietro
UFSC SC
Florianpolis - SC, 30/10/2009.

4
Dedico minha me Gerci, que sempre me

incentivou a buscar os meus sonhos, e ao
meu pai Fermiano, exemplo de um vencedor.
5
AGRADECIMENTOS
Chegou a hora... Dizer obrigada um gesto complexo, muitas vezes temos

dificuldade de reconhecer que simples atos nos levaram a conquista to grande. E
nesses simples atos esto envolvidas pessoas que passaram to sutilmente por nossas
vidas que cometemos injustias de no as agradec-las. Mas, na realidade, elas
estaro sempre presentes no decorrer das nossas histrias.
Um dos aprendizados que adquiri, neste processo, foi de que nada ns
conseguimos por acaso. Nossas conquistas so feitas de esforos! Agradeo por todos
os momentos difceis que passei, que chorei, que me desesperei. Sei que esses
momentos foram decisivos para eu atingir esta meta e contriburam para me tornar cada
vez mais forte para agentar at aqui. Muitas vezes pedi auxlio a foras divinas, rezei
e tenho certeza de que fui atendida, que existe Deus por trs de todos ns, olhando
todos os nossos passos, inclusive colocando pessoas maravilhosas, outras nem tanto,
em nossos caminhos. Mas tudo aprendizado!
No conseguiria atingir os meus objetivos sem o alicerce da minha famlia que
sempre acreditou no meu potencial. O apoio psicolgico da minha me e a
racionalidade de meu pai foram essenciais nesse caminho. Os exemplos dos meus
irmos me incentivaram a lutar e a buscar integralmente o que realmente quero.
Em certo momento esta minha entrega integral gerou conflitos entre o meu
trabalho e a minha vida acadmica. Agradeo ao meu orientador e a Prof. Thais pelos
conselhos e por terem me orientado para a escolha que fiz!
Meus agradecimentos ao meu orientador, Prof. Dr. Magnus Benetti, pela
oportunidade de realizar este sonho, pelas suas idias (que ele tem muitas), pela
pacincia e pelo incentivo em dar continuidade minha vida acadmica. Suas aulas
eram verdadeiras viagens fisiolgicas as quais me marcaram e me fizeram reconhecer
um dos melhores professores que eu tive na vida!
Ao Prof. Dr. Ricardo Aurino de Pinho no tenho palavras para agradecer o
presente que me deu: o meu projeto! Abriu as portas para o trabalho no LAFIBE
6
(Laboratrio de Fisiologia e Bioqumica do Exerccio) da UNESC, Cricima; um

maravilhoso mundo de pesquisas! Tambm as pessoas do LAFIBE, as bolsistas (Meri,
Dbora, Karol) que me ensinaram muito sobre as anlises e aos momentos passados
no laboratrio. Um obrigada do fundo do corao ao Luciano, Doutorando que foi de
extrema importncia neste processo.
Ao Prof. Dr. Fabrizio Caputo pelo aprendizado adquirido em suas aulas, a ajuda
no projeto e a oportunidade de fazer docncia orientada.
Professora Patricia Faria Di Pietro, muito especial em minha vida por ter me
orientado no meu primeiro estgio e pelas oportunidades.
No poderia de deixar de citar aqui a administrao, funcionrios, jogadores e
grandes amigos do Figueirense Futebol Clube que estiveram comigo em um ano e meio
de mestrado, sempre me dando foras. Um agradecimento especial ao Dr. Srgio
Eduardo Parucker, Anderson Barros e Alexandre Gallo pela oportunidade de ingressar
nesta profisso pela qual eu me apaixonei.
Aos colegas do Mestrado, como a Raffa e a Adri, que indiretamente fizeram parte
dessa caminhada. Gilmar, pelas aulas e momentos de estudo na disciplina de
Estatstica. Clber, pelas dvidas sanadas e companheirismo.
Ao Claudio, pessoa muito especial em minha vida. Trazia a minha paz, me
acalmava. Muitas vezes, longe, mas tenho certeza de que seu corao estava sempre
comigo!
Minhas amigas Camilinha, Cris, Patty e Aline que estavam sempre ao meu lado
nos momentos difceis. Um agradecimento especial Monique pela pacincia, pelas
longas conversas no telefone e o coleguismo at mesmo na hora de escrever o projeto.
Encerro agradecendo a Deus sobre todas as coisas, por ter me dado foras e por
ter colocado pessoas to especiais na minha vida. Sem as quais, no conseguiria
alcanar os meus objetivos!
7
MENSAGEM
Tua caminhada ainda no terminou....

A realidade te acolhe
dizendo que pela frente
o horizonte da vida necessita
de tuas palavras
e do teu silncio.
Se amanh sentires saudades,

lembra-te da fantasia e
sonha com tua prxima vitria.
Vitria que todas as armas do mundo
jamais conseguiro obter,
porque uma vitria que surge da paz
e no do ressentimento.
certo que irs encontrar situaes

tempestuosas novamente,
mas haver de ver sempre
o lado bom da chuva que cai
e no a faceta do raio que destri.
Tu s jovem.
Atender a quem te chama belo,
lutar por quem te rejeita
quase chegar a perfeio.
A juventude precisa de sonhos
e se nutrir de lembranas,
assim como o leito dos rios
precisa da gua que rola
e o corao necessita de afeto.
No faas do amanh
o sinnimo de nunca,
nem o ontem te seja o mesmo
que nunca mais.
Teus passos ficaram.
Olhes para trs...
mas v em frente
pois h muitos que precisam
que chegues para poderem seguir-te.
(Charles Chaplin)
8
RESUMO
VIEIRA, Lilian C. Efeitos da suplementao de Taurina sobre os parmetros de

Estresse Oxidativo Muscular induzidos por Exerccio Excntrico. 2009.
Dissertao (Mestrado em Cincias do Movimento Humano) Universidade do Estado
de Santa Catarina. Programa de Ps-Graduao em Cincias do Movimento Humano,
Florianpolis, 2009.
O objetivo deste estudo foi investigar os efeitos da suplementao de taurina sobre

biomarcadores do estresse oxidativo aps o exerccio excntrico. Vinte e quatro ratos
da raa Wistar machos foram divididos nos seguintes grupos (n = 6): controle (C);
exerccio excntrico (EE); exerccio excntrico com a suplementao de taurina (EET);
exerccio excntrico com a suplementao de salina (EES). A quantidade de taurina
administrada foi de 300mg/Kg de peso corporal / dia em soluo de 1 ml de gua
deionizada por gavagem oral, por duas semanas antes e 2, 12, 24 e 48 horas aps a
sesso de exerccio. Os animais foram submetidos a uma sesso nica de corrida em
declive com durao de 90 minutos e velocidade constante de 16,6 m.min -1. Quarenta e
oito horas aps a sesso de exerccio, os animais foram sacrificados e os msculos do
quadrceps removidos cirurgicamente. Produo do nion superxido, lipoperoxidao,
carbonilao das protenas, contedo total de tiis e atividade de enzimas superxido
dismutase (SOD) e catalase (CAT) foram analisados. Os resultados mostram que o
grupo EET apresentou uma reduo significativa (p<0,05) na produo do nion
Superxido (0,9 0,2 nmol/min/mg protena) quando comparado com o grupo EE (1,62
0,2 nmol/min/mg protena) e o grupo EES (1,55 0,3 nmol/min/mg protena). A
lipoperoxidao foi diminuda j que EET apresentou quantidade de espcies reativas
ao cido tiobarbitrico (TBARS) de 0,13 0,001nmol/mg protena, significativamente
menor (p<0,05) aos outros grupos (EES - 0,18 0,03 nmol/mg protena e EE - 0,18
0,05 nmol/mg protena). O contedo total de tiis apresentou-se aumentado (p<0,05) no
grupo EET (18,8 0,3 nmol TNB/mg protena) em comparao com EES (13,8 1 nmol
TNB/mg protena) e EE (12,2 1 nmol TNB/mg protena). O grupo EET demonstrou um
valor menor (p<0,05) na carbonilao de protenas (0,20 0,2 nmol/mg protena) em
relao aos demais grupos (EES - 0,30 0,03 nmol/mg protena; e EE - 0,30 0,025
nmol/mg protena). Entretanto, a atividade das enzimas antioxidantes SOD e CAT no
teve diferena significativa (p<0,05) com a suplementao da taurina. Os valores da
atividade da SOD nos grupos foi de: EE 1,22 0,25 U de SOD/mg protena; EET
1,18 0,15 U de SOD /mg protena; EES 1,22 0,12 U de SOD /mg protena; e da
CAT foi: EE - 6,12 0,19 U de CAT/mg protena; EET- 5,85 0,62 U de CAT/mg
protena; EES 5,61 0,45 U de CAT/mg protena. Em concluso, o estudo demonstra
que a suplementao de taurina diminuiu o dano oxidativo, mas no afetou a atividade
das enzimas antioxidantes aps exerccio excntrico.
Palavras-chave: Taurina. Suplementao. Estresse oxidativo. Exerccio excntrico.

Ratos.
9
ABSTRACT
VIEIRA, Lilian C. Taurine Supplementation Effects on Muscle Oxidative Stress

Induced by Eccentric Exercise. 2009. Dissertao (Mestrado em Cincias do
Movimento Humano) Universidade do Estado de Santa Catarina. Programa de Ps-
Graduao em Cincias do Movimento Humano, Florianpolis, 2009.
This study was to investigate the effects of taurine supplementation on biomarkers of

oxidative stress after eccentric exercise. Twenty four male rats Wistar were divided into
the following groups (n=6): control (C); eccentric exercise (EE); eccentric exercise plus
taurine (EET); eccentric exercise plus saline (EES). Taurine was administered with
solution of 1ml water 300mg/Kg body weight (BW)/day by oral lavage, for two weeks
before and 2, 12, 24 and 48 hours after the exercise session. The animals were
submitted to one downhill run session with duration of 90 minutes and velocity constant
of 16,6 m.min-1. Forty-eight hours after the exercise session, the animals were killed and
the quadriceps muscle were surgically removed. Production of superoxide anion,
lipoperoxidation, carbonylation, total thiol content and antioxidant enzyme were analyze.
The results show the EET group had a significant reduction (p <0.05) in the production
of superoxide anion (0,09 + 0.2 nmol / min / mg protein) when compared with the EE
group (1.62 0.3 nmol / min / mg protein) and the EES group (1,55 0,3 nmol/ min/ mg
protein). Lipid peroxidation was diminished as EET showed 0,13 0,001nmol/ mg
protein of tiobarbituric acid reactive species (TBARS) significantly lower (p < 0,05) than
other groups (EES - 0,18 0,03 nmol/mg protein and EE - 0,18 0,05 nmol/mg
protein). The total thiol content were higher (p < 0,05) in EET (18,8 0,3 nmol TNB/ mg
protein) when compared with EES (13,8 1 nmol TNB/ mg protein) and EE (12,2 1
nmol TNB/ mg protein). The EET group showed a lower value (p < 0.05) of proteins
carbonyl (0,20 0,2 nmol/ mg protein) compared to other groups (EES - 0,30 0,03
nmol/ mg protein and EE - 0,30 0,025 nmol/ mg protein). The activity of antioxidant
enzymes superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) had no significant difference
(p <0.05) with supplementation of taurine. The values of SOD activity in the groups
were: EE 1,22 0,25 U of SOD/ mg protein; EET 1,18 0,15 U of SOD / mg protein;
EES 1,22 0,12 U of SOD / mg protein; and the values of CAT were: EE - 6,12 0,19
U of CAT/ mg protein; EET- 5,85 0,62 U of CAT/ mg protein; EES 5,61 0,45 U of
CAT/ mg protein. In conclusion, the present study demonstrates that taurine
supplementation decreased damage oxidative but did not affect antioxidant enzyme
activity after eccentric exercise.
Key-words: Taurine. Supplementation. Oxidative Stress. Eccentric Exercise. Rats.

10
LISTA DE ILUSTRAES
Figura 1: Desenho do estudo..........................................................................................43

Figura 2: Produo de nion superxido (O2 -) no msculo do quadrceps de ratos,
aps uma sesso de exerccio excntrico......................................................48
Figura 3: Nveis de TBARS no msculo do quadrceps de ratos, aps uma sesso de
exerccio excntrico........................................................................................49
Figura 4: Contedo total de tiis no msculo do quadrceps de ratos, aps uma sesso
de exerccio excntrico...................................................................................50
Figura 5: Nveis de carbonilao de protenas no msculo do quadrceps de ratos, aps
uma sesso de exerccio excntrico..............................................................51
Figura 6: Atividade da enzima Superxido Dismutase (SOD) no msculo do quadrceps
de ratos, aps uma sesso de exerccio excntrico.......................................52
Figura 7: Atividade da CAT no msculo do quadrceps de ratos aps uma sesso de
exerccio excntrico........................................................................................53
11
LISTA DE TABELAS
Tabela 1: Principais antioxidantes enzimticos...............................................................27

Tabela 2: Principais antioxidantes no-enzimticos........................................................29
Tabela 3: Composio bsica da rao (Nuvilab CR-1) / kg do produto......................41
12
LISTA DE ABREVIATURAS, SIGLAS E SMBOLOS
L Microlitro
mol Micromol
AMP Adenosina Difosfato
ATP Adenosina Trifosfato
C Grupo Controle
Ca2+ on Clcio
CAT Catalase
CoQ Ubiquinona
CoQH Semiquinona
CoQH2 Ubiquinol
Cu2+ - on Cuproso
Cu3+ - on Cprico
DMT Dor Muscular Tardia
e- - Eltron
EE Grupo Exerccio Excntrico
EES Grupo Exerccio Excntrico + Salina
EETGrupo Exerccio Excntrico + Taurina
EPM Erro Padro Mdio
ER Espcies Reativas
ERO Espcies Reativas de Oxignio
FADH Flavina Adenina Dinucleotdeo Reduzido
Fe2+ - on Ferroso
Fe3+ - on Frrico
GPX Glutationa Peroxidase
GSH Glutationa
H+ - on Hidrognio
H2O gua
H2O2 Perxido de Hidrognio
HClO cido Hipocloroso
13
K Ca2+ Potssio dependente de Clcio

Kg Quilo
m - Metro
M Molar
MDA Malondialdedo
mg Miligrama
min Minuto
ml Mililitro
mM Milimolar
NAC N-acetil cistena
NADH Nicotinamida Adenina Dinucleotdeo Reduzido
NADPH Nicotinamida Adenina Dinucleotdeo Fosfato
nm Nanmetro
O2 Oxignio
O2 - nion Superxido
O2H Radical Hidroperoxil
OH Radical Hidroxil
PGE Prostaglandinas
PMN Clulas polimorfonucleadas
RL Radicais Livres
RLO Radicais Livres de Oxignio
SOD mt Superxido Dismutase mitocondrial
SOD Superxido Dismutase
TBA cido Tiobarbitrico
TNF Fator de Necrose Tumoral
VO2mx Consumo Mximo de Oxignio
XO Xantina oxidase
14
SUMRIO
1 INTRODUO ............................................................................................... ....17

1.1 PROBLEMA .................................................................................................... 17
1.2 JUSTIFICATIVA .............................................................................................. 18
1.3 OBJETIVOS .................................................................................................... 20
1.3.1 Objetivo Geral .............................................................................................. 20
1.3.2 Objetivos Especficos ................................................................................... 20
1.4 HIPTESES .................................................................................................... 21
1.4.1 Hiptese geral .............................................................................................. 21
1.4.2 Hipteses Especficas .................................................................................. 21
1.5 DELIMITAES DO ESTUDO ....................................................................... 21
1.6 LIMITAES DO ESTUDO ............................................................................ 21
2 REFERENCIAL TERICO .................................................................................23
2.1 RADICAIS LIVRES .......................................................................................... 23
2.2 PRINCIPAIS ESPCIES REATIVAS DE OXIGNIO ...................................... 23
2.3 SISTEMA DE DEFESA ANTIOXIDANTE ........................................................ 25
2.3.1 Antioxidantes enzimticos ............................................................................ 26
2.3.1.1 Superxido Dismutase (SOD) ................................................................... 27
2.3.1.2 Catalase (CAT) .......................................................................................... 28
2.3.1.3 Glutationa Peroxidase (GPX) .................................................................... 28
2.3.2 Antioxidantes no enzimticos ..................................................................... 29
2.4 TAURINA......................................................................................................... 30
2.4.1 Regulao dos canais de clcio ................................................................... 32
2.4.2 Equilbrio osmtico celular............................................................................ 32
2.4.3 Neutralizao direta de ERO ........................................................................ 33
2.5 EXERCCIO FSICO E ESTRESSE OXIDATIVO ............................................ 34
2.5.1 Formao de ERO durante o met. do oxignio na cadeia respiratria ......... 35
2.5.2 Formao de ERO durante isquemia-reperfuso ......................................... 35
2.5.3 Formao de ERO durante processo inflamatrio ....................................... 37
2.6 RELAO ENTRE EXERCCIO EXCNTRICO E ESTRESSE OXIDATIVO . 37
15
2.7 LESES NO EXERCCIO EXCNTRICO ....................................................... 38

3 MTODOS .........................................................................................................40
3.1 CARACTERIZAO DA PESQUISA .............................................................. 40
3.2 AMOSTRA ....................................................................................................... 40
3.3 TRATAMENTO EXPERIMENTAL ................................................................... 41
3.4 PROTOCOLO DE ADAPTAO AO EXERCCIO .......................................... 41
3.5 PROTOCOLO DE EXERCCIO EXCNTRICO DE LONGA DURAO ........ 41
3.6 SUPLEMENTAO ........................................................................................ 42
3.7 EUTANASIA .................................................................................................... 42
3.8 DESENHO DO ESTUDO ................................................................................ 43
3.9 ENSAIOS BIOQUMICOS ............................................................................... 43
3.9.1 Produo de Espcies Reativas de Oxignio ............................................... 43
3.9.1.1 nion Superxido ...................................................................................... 43
3.9.2 Marcadores de Danos Oxidativos................................................................. 44
3.9.2.1 Espcies Reativas ao cido Tiobarbitrico (TBARS) ................................ 44
3.9.2.2 Carbonilao de protenas ........................................................................ 44
3.9.2.3 Sulfidrilas ................................................................................................... 45
3.9.3 Atividade de enzimas antioxidantes ............................................................. 45
3.9.3.1 Superxido dismutase (SOD) .................................................................... 45
3.9.3.2 Catalase (CAT) .......................................................................................... 46
3.9.4 Determinao da Protena............................................................................ 46
3.10 CLCULO E TAMANHO DA AMOSTRA ....................................................... 47
3.11 TRATAMENTO ESTATSTICO ..................................................................... 47
4 RESULTADOS ...................................................................................................48
4.1 PRODUO DE ESPCIES REATIVAS DE OXIGNIO................................ 48
4.1.1 nion Superxido ......................................................................................... 48
4.2 MARCADORES DE DANOS OXIDATIVOS .................................................... 49
4.2.1 Espcies Reativas ao cido Tiobarbitrico (TBARS) ................................... 49
4.2.2 Contedo total de tiis .................................................................................. 50
4.2.3 Carbonilao de protenas ........................................................................... 50
4.3 ATIVIDADES DE ENZIMAS ANTIOXIDANTES............................................... 51
16
4.3.1 Superxido dismutase (SOD) ....................................................................... 51

4.3.2 Catalase (CAT) ............................................................................................. 52
5 DISCUSSO ......................................................................................................54
6 CONCLUSO ....................................................................................................59
REFERNCIAS .....................................................................................................60
ANEXOS..................................................................................................................73
17
1 INTRODUO
1.1 PROBLEMA
Segundo Albert (2002), nos ltimos anos nenhum outro aspecto de carga
muscular (tenso especfica aplicada unidade msculo tendnea) tem sido mais
descrito, estudado, discutido e investigado na literatura cientfica e prtica clnica do
que o movimento excntrico. Garret Jr. (1996) afirma que muitos so os danos e/ou
alteraes musculares provocados pelas contraes excntricas. Entretanto, este tipo
de contrao no utilizado apenas em laboratrio para testes, est presente nos
movimentos dirios, bem como nos frequentadores de academias e praticantes de
esportes como basquete, futebol e rgbi (CLEBIS e NATALI, 2001).
O exerccio excntrico uma ao muscular dupla de alongamento e contrao
(fora) simultnea, ocasionando efeitos deletrios acentuados em indivduos treinados
e destreinados (APPEL et al., 1992; LEE et al., 2002; LEE e CLARKSON, 2003). Esses
efeitos deletrios ocasionam fadiga, dor muscular tardia, reduo da fora, inflamao e
diminuio de performance (AVERY et al., 2003; CROSIER et al., 1996; KONNING et
al., 2001; LI et al., 2002; PETERSEN et al., 2001; SHAFAT et al., 2004). Estes fatores
possivelmente esto associados formao de espcies reativas (ER), o que
provavelmente dificulta o processo de recuperao e agrava ainda mais a diminuio
de performance em atletas (BYER et al., 2006; CLEBIS e NATALI, 2001; PASCHALIS
et al., 2006; STUPKA et al., 2000).
O estresse oxidativo induzido pela produo exacerbada das ER tem contribudo
como um dos mecanismos mais importantes na leso muscular induzida pelo exerccio
excntrico (ARMSTRONG et al., 1991; BALNAVE et al., 1993; MCBRIDE et al., 1998;
SAXTON et al., 1994). Em resposta aos danos musculares induzidos pelo exerccio
excntrico, neutrfilos e macrfagos migram e infiltram-se no tecido muscular lesado,
ativando citocinas pr-inflamatrias e produzindo ER adicionais. As ER apresentam alta
reatividade para outras biomolculas, principalmente lipdios e protenas das
membranas celulares e, at mesmo, o DNA (HALLIWEL e GUTTERIDGE, 2007).
18
As leses causadas pelos radicais livres nas clulas podem ser prevenidas ou
reduzidas por meio da atividade de antioxidantes (KNIG e BERG, 2002). Os
antioxidantes podem agir diretamente na neutralizao da ao dos radicais livres ou
participar indiretamente de sistemas enzimticos com essa funo (POWERS e
LENNON, 1999).
O antioxidante denominado Taurina um aminocido no essencial sulfuroso,
metablico da metionina e com efeito antagonista ao da homocistena, presente em
alguns alimentos (CHANG, 2004; TANG, 2000; WILLIAMS, 2005). Apesar de no
participar da estrutura de protenas e enzimas (WILLIAMS, 2005), essa tambm tem
importante funo reguladora nos fluxos de clcio, sdio e potssio e de proteo ao
DNA (LOURENO e CAMILO, 2002), na estabilizao da estrutura de membranas
celulares (TANG, 2000) e na metabolizao de gorduras (YOGOSHI et al., 1999). Alm
disso, a taurina vem demonstrando um poderoso efeito antioxidante em alguns estudos
(DAWSON et al., 2002; ROIG-PREZ et al., 2004; ZEYBEK et al., 2006).
Por fim, considerando o pressuposto potencial deletrio dos exerccios fsicos
excntricos, a sua relao oxidante e inflamatria no msculo esqueltico e a ao
antioxidante da Taurina, formulou-se a seguinte questo a ser investigada neste estudo:
quais so os efeitos da suplementao do antioxidante taurina sobre os parmetros de
estresse oxidativo muscular induzidos por exerccio excntrico?
1.2 JUSTIFICATIVA
A relao entre o estresse oxidativo e o exerccio fsico tem sido amplamente

investigada nos ltimos 30 anos (FISCHER-WELLMAN e BLOOMER, 2009). O
interesse acerca dos mecanismos de gerao e adaptao das ER ao exerccio
aumentou significativamente a partir da demonstrao de sua relao com o consumo
de oxignio (CHILDS et al., 2001) e a inflamao no tecido muscular (GLEESON et al.,
1998; KAURANEN et al., 2001; KNIG e BERG, 2002; MACINTYRE et al., 2000;
MACINTYRE et al., 2001).
H evidncias na literatura que durante a contrao excntrica ocorre um
aumento demasiado na produo de espcies reativas de oxignio (ERO), que as
19
defesas antioxidantes andrgenas no conseguem neutralizar (ARMSTRONG et al.,

1991; BALNAVE et al., 1993; CLEBIS e NATALI, 2001; MCBRIDE et al., 1998; SAXTON
et al., 1994).
Alm disso, o aumento das taxas metablicas como resultado de exerccio fsico
intenso pode aumentar excessivamente o consumo de oxignio em at 20 vezes em
relao aos valores de repouso (CARMELI et al., 2000). Esse aumento seguido por
um concomitante aumento na produo de radicais livres (ALESSIO e GOLDFARB,,
1998). Embora os benefcios do aumento no VO 2mx sejam bem estabelecidos, um
paradoxo bioqumico verificado. O aumento no consumo mximo de oxignio (O2)
essencial para a aptido cardiovascular e performance, porm o aumento no consumo
durante o exerccio pode ser prejudicial em nvel srico e bioqumico (KNIG e BERG,
2002), gerando o estresse oxidativo.
No exerccio excntrico, o estresse oxidativo contribui para o desenvolvimento de
leso muscular (ARMSTRONG et al., 1991; BALNAVE et al., 1993; CLEBIS e NATALI,
2001; MCBRIDE et al., 1998; SAXTON et al., 1994). Este desequilbrio bioqumico
torna-se um poderoso comprometimento para o sistema muscular, pois as ER podem
alterar os sistemas orgnicos por meio de sua ao txica.
O estresse oxidativo tem sido associado com a diminuio da performance,
fadiga, dano muscular e excesso de treinamento - overtraining. Por essa razo, alguns
pesquisadores (CARMELI et al., 2000; POLIDORI et al., 2000; POWERS et al., 1999;
RDAK et al., 1999) sugerem que reduzir o estresse oxidativo pode melhorar a
tolerncia ao exerccio, bem como a performance fsica. Os danos celulares
ocasionados pelo estresse oxidativo podem ser revertidos pela ao de defesas
antioxidantes (enzimticas e no-enzimticas), restabelecendo o equilbrio entre a
produo de ER e o sistema de defesa antioxidante (SILVA, 2006).
O aminocido taurina, encontrado em alimentos de origem animal, vem
demonstrando um poderoso efeito antioxidante em alguns estudos (LOURENO e
CAMILO, 2002; TANG, 2002). Porm, o efeito antioxidante da taurina ainda no est
bem esclarecido no exerccio fsico, pois existem poucos estudos a esse respeito.
Dawson et al. (2002) utilizou a suplementao de taurina para amenizar os efeitos
20
deletrios nas miofibrilas, aps sesses de exerccios fsicos em ratos e obteve

resultados positivos.
Dessa forma, os achados desta pesquisa pretendem contribuir para o
entendimento do mecanismo da ao antioxidante da taurina em exerccios fsicos,
especificamente em treinamento excntrico. Assim, espera-se que esses resultados
sejam de relevncia para a rea da Atividade Fsica e Sade, objetivando a busca de
benefcios entre a relao da suplementao e exerccio fsico.
1.3 OBJETIVOS
1.3.1 Objetivo Geral
Avaliar os efeitos da suplementao de taurina sobre os parmetros de estresse

oxidativo muscular aps exerccio excntrico.
1.3.2 Objetivos Especficos
Verificar as respostas da suplementao de taurina sobre a produo de

superxido no msculo esqueltico, aps exerccio excntrico.
Verificar os efeitos da suplementao da taurina sobre os marcadores de danos
oxidativos no msculo esqueltico, aps exerccio excntrico.
Verificar os efeitos da suplementao da taurina sobre a atividade das enzimas
antioxidantes no msculo esqueltico, aps exerccio excntrico.
21
1.4 HIPTESES
1.4.1 Hiptese geral
A suplementao de taurina causar uma diminuio nos parmetros de

estresse oxidativo aps uma sesso de exerccio excntrico em ratos.
1.4.2 Hipteses Especficas
A produo de superxido no msculo ser atenuada com a suplementao de

taurina.
Os marcadores de danos oxidativos no msculo sero atenuados com a
suplementao de taurina.
A atividade enzimtica no msculo ser mantida com a suplementao de
taurina.
1.5 DELIMITAES DO ESTUDO
A amostra foi composta por ratos Wistar machos, do biotrio da Universidade do

Extremo Sul de Santa Catarina (UNESC). O treinamento e as anlises foram realizados
nas dependncias do Laboratrio de Fisiologia e Bioqumica do Exerccio (LAFIBE) da
UNESC, localizado em Cricima, SC.
1.6 LIMITAES DO ESTUDO
Como limitao do estudo, reporta-se falta das dosagens do contedo de

taurina muscular e sistmica, da atividade de outros antioxidantes enzimticos e no
enzimticos, das enzimas creatina quinase e lactato desidrogenase e da produo de
citocinas pr e anti-inflamatrias aps o exerccio excntrico. Esses marcadores
22
poderiam complementar a compreenso dos mecanismos pelos quais a Taurina

associada ao exerccio exerce atividade antioxidante.
23
2 REFERENCIAL TERICO
2.1 RADICAIS LIVRES
A definio de radical livre (RL) pode ser expressa como uma molcula
altamente reativa ou um fragmento molecular que contm pelo menos um eltron mpar
em seu orbital externo. Tende a extrair eltrons de outras molculas para alcanar um
estado quimicamente mais estvel (HALLIWEL e GUTTERIDGE, 2007).
Os radicais livres de oxignio (RLO) so produzidos naturalmente no organismo
durante a respirao e pelos processos metablicos oxidativos para produo de
energia (THOMAS, 2000). Quando se encontram em baixa a moderada concentrao,
eles exercem efeitos benficos na defesa contra agentes infecciosos, em sistemas
celulares de sinalizao e na funo mitognica (VALKO et al., 2007). No entanto, um
aumento desequilibrado na produo dessas molculas pode lesionar componentes
celulares indispensveis para a vida da clula, tais como DNA, lipdios, protenas e
carboidratos (KNIG e BERG, 2002). Durante o exerccio fsico, a produo elevada
dos RLO pode promover disfuno contrtil do msculo esqueltico, resultando em
fadiga muscular (POWERS e JACKSON, 2008).
2.2 PRINCIPAIS ESPCIES REATIVAS DE OXIGNIO
As espcies reativas (ER) so definidas como molculas orgnicas altamente

reativas e instveis, podendo ter ou no um eltron desemparelhado na ltima camada
de sua estrutura (HALLIWEL, 1994). O termo ERO no engloba somente as espcies
reativas derivadas do oxignio, mas tambm as RLO (POWERS e JACKSON, 2008).
Apesar de existirem ER derivadas de outras molculas orgnicas como as Espcies
Reativas de Nitrognio (ERN) e Espcies Reativas de Enxofre (ERX), as ERO esto em
maior quantidade no organismo (FINAUD et al., 2006).
A maioria das ERO so produzidas na cadeia de transporte de eltrons
mitocondrial durante a respirao sob condies fisiolgicas normais. De acordo com
24
Halliwell e Gutterigde (2007), o oxignio respirado metabolizado sendo que

aproximadamente 90 a 95% so utilizados pela mitocndria, por meio da cadeia de
transporte de eltrons e reduzidos a gua durante a produo de energia. Na parte
terminal da cadeia de transporte de eltrons, a enzima citocromo oxidase remove um
eltron (e-) de cada uma das quatro molculas reduzidas de citocromo C, oxidando-as e
adiciona os quatro eltrons ao O2 para formar gua (H2O) - Reao 1 (MATSUO e
KANEKO, 2000).
Reao 1:
O2 + 4e- + 4H+ 2 H2O + energia
De 2 a 5% do oxignio respirado so reduzidos univalentemente em ERO

(HALLIWEL e GUTTERIDGE, 2007). Durante o processo de formao de trifosfato de
adenosina (ATP), o eltron da nicotinamida adenina dinucleotdeo reduzida (NADH) e
da flavina adenina dinucleotdeo reduzida (FADH) doado (via complexo I e II) para
ubiquinona (CoQ) (complexo III) reduzida formando a semiquinona (CoQH ) que em
contato com o oxignio forma o superxido (O2 -) Conjunto de Reaes 2 (HALLIWEL
e GUTTERIDGE, 2007; NELSON e COX, 2007).
Reaes 2:
CoQH2 + O2 CoQH + O2 -
CoQH + O2 CoQ + H+ + O2 -
O superxido recebe mais um eltron e dois ons hidrognio e rapidamente

reduzido pela superxido dismutase mitocondrial (SOD-mt) a perxido de hidrognio
(H2O2) Reao 3 (HALLIWEL e GUTTERIDGE, 2007). Quando formado, assim como
o nion superxido, se no for eliminado ou convertido em outro radical menos potente
pode causar estragos a sistemas biolgicos. No entanto, baixas quantidades desses
ERO so necessrias para alguns processos fisiolgicos. Na inflamao, os leuccitos
produzem mieloperoxidase que utiliza o perxido de hidrognio (H2O2) para produzir
cido hipocloroso (HClO) e ajudar no combate de antgenos invasores das clulas
25
(THOMAS, 2000). Nos neutrfilos, a produo de O2 - catalizada pela nicotinamida

adenina dinucleotdeo fosfato (NADPH) oxigenase gera o burst respiratrio necessrio
para para a destruio de bactrias (VALKO et al., 2006).
Reao 3:
2O2 - + 2H+ H2O2 + O2
O H2O2 ao receber mais um eltron ou um on de hidrognio forma ento o

radical hidroxil (OH ), que a ERO mais reativa dos intermedirios, pois pode reagir e
alterar qualquer estrutura celular que esteja prximo a ele, influenciando enzimas,
lipdeos da membrana ou cidos nuclicos (BIESALSKI, 2000; VANCINI et al., 2005). O
radical hidroxil pode ser formado por mais duas reaes conhecidas como reao de
Fenton (FENTON, 1894) e Haber- Weiss (HABER, WEISS, 1934). Primeiro, o OH
formado quando o H2O2 reage com ons de ferro (Fe3+ e Fe2+ ) ou cobre (Cu3+ e Cu2+ ).
Segundo, quando os ons de ferro e cobre catalisam a reao entre o O2 - e o
H2O2(Reaes 4). Como caractersticas comuns, estas espcies apresentam grandes
reatividades e possuem uma meia vida muito curta, o radical hidroxila, por exemplo, tem
10-9 segundos de vida, j o nion superxido decai a perxido de hidrognio em 4,5 x
105 milissegundos (SIES e CADENAS, 1989).
Reaes 4:
O2 - + H+ O2H
O2H + O2 - + H+ H2O2 + O2
Fe3+ + O2 -
Fe2+ + O2
Fe2+ + H2O2 Fe3+ + OH + OH- (Reao de Fenton)
2.3 SISTEMA DE DEFESA ANTIOXIDANTE
Um antioxidante pode ser definido como qualquer substncia que reduz, previne
ou atrasa os danos ocasionados pela ao dos ER (HALLIWEL e GUTTERIDGE, 2007).
26
Estas molculas trabalham num complexo processo bioqumico e agem com o objetivo
de prevenir a produo demasiada de radicais livres e reduzir um possvel efeito
deletrio (BIESALSKI, 2000).
Os antioxidantes podem agir diretamente na neutralizao da ao dos radicais
livres ou participar indiretamente de sistemas enzimticos com essa funo
(BARREIROS e DAVID, 2006). Especificamente, os antioxidantes podem atuar na
preveno da propagao de RL, na hidrlise enzimtica de ligaes estricas para
remoo de cidos graxos peroxidados, no sequestro de ons metlicos e na reduo
cataltica-enzimtica dos perxidos (THOMAS, 2000).
O processo de neutralizao dos ER por antioxidantes pode acontecer em trs
condies. A primeira previne a formao das substncias agressoras. A segunda a
varredura, em que o antioxidante intercepta diretamente a ao da ER, neutralizando-o.
A ltima condio o reparo que ocorre quando as duas condies anteriores no
foram bem sucedidas, e a ao do ER acaba desenvolvendo dano estrutura celular. O
antioxidante nesta condio tem a funo de ajudar na recuperao da estrutura
danificada (KONG e LILLEHEI, 1998).
Segundo Pinho (2005), as defesas antioxidantes podem atuar de forma
associada ou independente por duas vias: enzimticas; sistema composto pelas
enzimas superxido dismutase (SOD), a catalase (CAT) e a glutationa peroxidase
(GPX) as quais so ativadas normalmente durante o metabolismo celular, porm suas
atividades podem aumentar em funo da presena de ER; e no enzimticas, incluem
as vitaminas E, C e betacaroteno, glutationa (GSH), taurina entre outros. Grande parte
dos antioxidantes no enzimticos encontrada na alimentao e eles podem ser
suplementados por uma dieta alimentar.
2.3.1 Antioxidantes enzimticos
A ao cataltica das enzimas antioxidantes a primeira ao de defesa contra

as ER e desempenham um papel nico na preservao da homeostase. Em geral, o
organismo tem reservas suficientes para antioxidantes lidar com a produo de ERO
27
em condies fisiolgicas e sob exerccio fsico leve (BANERJEE et al., 2003). As

principais enzimas antioxidantes esto apresentadas na tabela 1 abaixo.
Tabela 1 Principais antioxidantes enzimticos (Adaptado de: POWERS e JACKSON,

2008)
Antioxidantes Localizao Funo

enzimticos
Superxido Matriz mitocondrial, citosol Scavenger de O2 -
Dismutase (SOD) e meio extracelular
Catalase (CAT) Citosol, principalmente dos Scavenger de H2O2

peroxissomos
Glutationa Citosol, mitocndria, Scavenger de H2O2

Peroxidase (GPX) membrana e meio
extracelular
2.3.1.1 Superxido Dismutase (SOD)
A SOD constitui a primeira linha de defesa enzimtica contra a produo

intracelular de radicais livres, catalisando a dismutao do O 2 - (HOLLANDER et al.,
2000; MOOREN e VLKER, 2004). Embora o O 2 - no seja altamente danoso, um
precursor do OH e pode extrair eltrons de alguns componentes celulares, causando
reaes em cadeia de radicais livres (HALLIWELL e GUTTERIDE, 2007).
O produto resultante da reao catalisada pela SOD o H2O2 (Reao 5) que
deve ser retirado do meio o mais rpido possvel. estimado que mais de 80% de O2 -
formado na mitocndria seja reduzido pela SOD (MOOREN e VLKER, 2004).
Reao 5:
2 O2 -+ 2 H+ H2O2 + O2
28
2.3.1.2 Catalase (CAT)
A enzima CAT catalisa a degradao do H 2O2, uma hemeprotena (PRYOR e

GODBER, 1991) e est localizada principalmente no peroxissoma celular (FINAUD et
al., 2006). Tambm est presente em outras organelas como as mitocndrias e retculo
endoplasmtico (MOOREN e VLKER, 2004). Na reao, uma das molculas de
perxido de hidrognio oxidada a oxignio molecular e a outra reduzida gua
Reao 6 (CHANGE et al., 1979).
Reao 6:
2 H2O2 2 H2O + O2
A CAT pode tambm usar o H2O2 para reagir com alguma substncia txica, via
reao catalisada pela peroxidase (Reao 7). Esta reao necessita de um substrato
como fenol, lcool (A) ou cido frmico para reagir com H 2O2 (FINAUD et al., 2006).
H2O2 + H2A (substrato) 2 H2O + A (Reao 7)
A catlise do H2O2 muito importante, pois na presena de Fe2+ ou Cu2+ leva

formao de radical hidroxil (OH ) (reao de Fenton- Conjunto de reaes 4)
(CHANGE et al., 1979).
2.3.1.3 Glutationa Peroxidase (GPX)
A GPX uma enzima selnio-dependente presente no citosol celular e na

mitocndria que catalisa a reduo do H2O2 e hidroperxidos orgnicos (ROOH) para
H2O e lcool, usando a GSH como doador de eltrons Reao 8 (FINAUD et al.,
2006; FLOH e GUNZLER, 1984). GPX e CAT tm aes parecidas, mediante ao
ataque a H2O2 . A GPX mais eficiente em uma alta concentrao e a CAT em baixa
concentrao de ERO (FINAUD et al., 2006).
29
Reao 8:
H2O2 +2 GSH GSSH (glutationa oxidada) + 2 H2O
2.3.2 Antioxidantes no enzimticos
Incluem as substncias encontradas nos alimentos como as vitaminas (C e E),

minerais (zinco, selnio), provitaminas (alguns carotenides), aminocidos (taurina),
flavonides e polifenis conforme mostra a tabela 2. Substncias orgnicas como
protenas com grupo tiol (Glutationa - GSH), e vrias outras substncias de baixo peso
molecular orgnicas como a ubiquinona e o cido rico tambm tm ao antioxidante
e consideradas defesas exgenas (KNIG e BERG, 2002; BIESEK et al., 2005).
Tabela 2 Principais antioxidantes no-enzimticos (Fonte: KNIG e BERG, 2002)

Antioxidantes Localizao Funo
no-enzimticos
Vitamina C Ambiente aquoso da Scavenger de RL
clula Recicla Vit. E
Vitamina E Membranas Impede a

celulares lipoperoxidao
Reduz vrios ERO
para a forma menos reativa
Carotenides Membranas Scavenger de RL

celulares Protege da
liperoxidao
Glutationa Em todo o ambiente Scavenger de RL

celular Remove H+ e
perxidos orgnicos na
reao catalizada por GPX
Recicla Vit. C e E.
Flavonides/ Membranas Scavenger de RL

Polifenis celulares Quelador de metais
Ubiquinonas Membranas Scavenger de

celulares radicais de O2 e O2 singlet
Recicla Vit. E
30
Alguns estudos mostram que a suplementao de alguns antioxidantes no-

enzimticos diminuiu o dano oxidativo em diferentes tecidos e doenas. Pinho et al.
(2005) observou que a administrao de N-Acetilcistena (NAC) reduziu a resposta
inflamatria e os parmetros de estresse oxidativo pulmonar em ratos expostos poeira
de carvo. No estudo de Jain et al. (2009), os autores suplementaram vitamina C e E
em coelhos diabticos e verificaram uma diminuio no dano do DNA plasmtico.
Ramirez-Tortosa et al. (2008) comprovou que a suplementao de coenzima Q 10
reduziu o estresse oxidativo em mitocndrias do fgado de coelhos com aterosclerose.
No exerccio fsico, vrias pesquisas demonstram os efeitos positivos de alguns
antioxidantes. Silva et al. (2008) demonstrou que o tratamento com NAC pode ter
alguns efeitos anti-inflamatrios e age sobre a regulao de citocinas pr-inflamatrias
aps o exerccio excntrico. Arajo (2008) suplementou licopeno aos pacientes com
Doena Arterial Coronariana e confirmou que a diminuio do dano oxidativo ocorreu
naqueles pacientes que estavam submetidos a um treinamento de exerccio fsico
intenso e controlado. No estudo em que Sureda et al. (2008) suplementou vitamina C e
E em corredores amadores e a suplementao com nveis moderados desses
antioxidantes reduziu o dano oxidativo, sem bloquear a adaptao celular ao exerccio.
J Zoppi et al. (2006) verificou que a suplementao dessas duas vitaminas em
jogadores profissionais de futebol pode reduzir a peroxidao lipdica e o dano
muscular durante o perodo de treinamento mas no tem nenhum efeito sobre a
performance.
2.4 TAURINA
A taurina ou cido 2-aminoetanosulfnico um aminocido no essencial

sulfuroso e possui um efeito antagonista ao da homocistena (NONAKA et al., 2001).
Pode ser obtida diretamente por uma dieta rica em frutos do mar, carne e ovos ou
indiretamente a partir da metionina e cistena na presena de vitamina B6 no fgado
(HUXTABLE, 1992, LOURENO e CAMILO, 2002). Organicamente, a taurina
produzida a partir da oxidao da cistena pela cistena dioxigenase, que a transforma
em cistena cido sulfinco na qual descarboxilada pela enzima cistena cido sulfnico
31
descarboxilase para sintetizar a hipotaurina que oxidada taurina

(BOUCKENOOGHE et al., 2006).
um dos aminocidos intracelulares mais abundantes do organismo e no faz
parte da estrutura de protenas. Uma pequena quantidade est presente nos peptdoes
do crebro (LOURENO e CAMILO, 2002). Nos tecidos, encontra-se uma maior
concentrao de taurina nos msculos e no crebro (GOODMAN et al., 2009). Faz
parte da estrutura do cido tauroclico, um cido bilitico, produzido no fgado que
ajuda na digesto de lipdeos (NELSON e COX, 2007).
A taurina faz parte de vrios processos metablicos como contrao cardaca,
atividade anti-oxidante, permeabilidade e proteo da membrana e contrao muscular
(WILLIAMS, 2005). Cuisinier et al. (2000) relatou em um estudo que o miofilamento
clcio-sensvel e as caractersticas mecnicas so dependentes da taurina. Ela pode
controlar a homeostase do on clcio (Ca2+) intracelular e ajudar no controle de
excitao-contrao muscular (CONTE-CAMERINO et al., 2004).
A suplementao de taurina tem mostrado em estudos benefcios sade.
Nonaka et al. (2001) relatou que um maior consumo de taurina pode prevenir a
progresso de aterosclerose e isquemia cardaca.
Durante o exerccio, Zhang (2004) reportou que sete dias de suplementao de
taurina induziram significantemente o aumento do VO 2max e o tempo para chegar
exausto na pedalada. O autor sugeriu que os efeitos ergognicos foram ocasionados
pela propriedade antioxidante da taurina e proteo das membranas celulares. No
estudo feito por Galloway et al. (2008), o mesmo tempo de suplementao de taurina
no alterou a concentrao de carboidratos e oxidao de lipdeos no msculo
esqueltico, mas causou impacto na metabolizao, metabolismo ou transporte de
indispensveis aminocidos no msculo durante exerccio prolongado.
A funo antioxidante da taurina ainda no bem esclarecida fisiolgica e
bioquimicamente, como comprovaram alguns estudos. Evidncias considerveis
mostram que a ao antioxidante da taurina pode estar relacionada a alguns processos:
regulao dos canais de eletrlitos, equilbrio osmtico celular e neutralizao de ERO.
32
2.4.1 Regulao dos canais de clcio
A taurina pode diminuir o dano oxidativo, regulando os Ca2+ que esto envolvidos
na patognese do dano celular mediados por RL na rota da xantina oxidase (XO)
(Chang et al., 2004).
Em um estudo em que os autores examinaram as propriedades contrteis do
msculo esqueltico de ratos e a quantidade de taurina presente no msculo, observou-
se a reduo de fora no grupo que apresentou o nvel de taurina muscular inferior ao
grupo controle. Os autores atriburam esta situao relao que a taurina tem com o
controle excitao-contrao muscular que influencia na liberao de Ca2+ celular e na
produo de fora (HAMILTON et al., 2006). Os resultados alcanados por Bakker e
Berg (2001) mostram que a taurina um modulador da contrao do msculo
esqueltico pelo aumento do acmulo do Ca2+ do retculo sarcoplasmtico e liberao
de Ca2+ da clula.
Pelo ponto de vista farmacolgico, a suplementao de Taurina pode ser
benfica, pois esse aminocido pode diminuir a hipercalemia observada durante a
reperfuso pelo bloqueio de canais de potssio dependentes do clcio (KCa2+). Este
processo pode estar relacionado com a produo demasiada de molculas reativas de
xido ntrico e consequentemente, estresse oxidativo (CONTE-CAMERINO et al.,
2004).
2.4.2 Equilbrio osmtico celular
A taurina um osmoltico orgnico utilizado pelas clulas para a regulao do

volume celular para adaptao ao desbalano osmtico que pode ser produzido
durante os exerccios intensos (CUISINIER, 2002). Ela aumenta a condutibilidade do
canal de clorido e modula a abertura e a cintica do canal de sdio (Na) voltagem-
dependente, com absoluto efeito na estabilizao do sarcolema do micito. Tambm
modula a atividade de canais de potssio (K) e a habilidade de associar o estado
metablico das fibras estriadas com a atividade eltrica pelos canais de K ATP-
dependente (KATP) ou KCa2+ (CONTE-CAMERINO et al., 2004). sugerido que a
33
ativao do canal KATP possa ser a chave do mecanismo para a adaptao para a
hipxia tecidual, apoptose celular e proteo cardaca contra a isquemia (MURZAEVA
et al., 2008).
Pode existir, ainda, uma relao entre a atividade da Aquaporin-4 (canal de gua
da clula) e o contedo de taurina muscular no momento em que h a necessidade de
estabelecer um equilbrio de gua para amenizar os efeitos adversos do lactato
formado durante o exerccio anaerbio (CONTE-CAMERINO et al., 2004).
2.4.3 Neutralizao direta de ERO
A taurina est presente abundantemente em clulas fagocitrias (KIM e CHA,

2008) e age como um scavenger de HClO gerado endogenamente, que constitui uma
molcula muito txica ao organismo. A taurina cloramina um aldedo estvel e no
txico formada por meio da reao entre a taurina e HClO e age como uma molcula
sinalizadora do decrscimo do processo de alguns mediadores como xido ntrico
(NOS), fator de necrose tumoral (TNF-), prostaglandina 2 (PGE2) e enzima
ciclooxigenase 2 (COX-2) envolvidos em reaes inflamatrias (QUINN, 1998).
A taurina ainda exerce uma ao anti-inflamatria por meio do seu efeito
antioxidante, que inibe a peroxidao lipdica e a ativao de neutrfilos (KIM et al.,
1996). No estudo em que Zeybek et al. (2006) induziu danos no tecido do rim com
sulfato de protamina em ratos, o tratamento com a taurina estabilizou os estoques de
GSH dos tecidos danificados e protegeu-os da peroxidao lipdica. Com relao ao
ataque de neutrfilos ao tecido danificado, observou-se no mesmo estudo que a taurina
potencializou um efeito protetor, inibindo o processo por meio da preservao da
atividade fagocitria dos neutrfilos.
34
2.5 EXERCCIO FSICO E ESTRESSE OXIDATIVO
Os efeitos benficos da atividade fsica j so bem conhecidos. Em indivduos

saudveis a prtica regular de exerccio promove um aumento na aptido fsica e
previne vrias doenas como cardiopatias, obesidade e diabetes. O aumento do
VO2max em atletas, a melhora a resistncia insulina em pacientes diabticos e a
diminuio da morbidade ocasionada pelo infarto agudo do miocrdio so alguns
efeitos favorveis do treinamento fsico verificado em alguns estudos (FAISAL et al.,
2009; PRAET et al., 2007; RISTOW et al., 2009).
O estresse oxidativo tem sido associado a diminuio da performance, fadiga,
dano muscular e overtraining (CARMELI et al., 2000). Por essa razo, alguns
pesquisadores sugerem que reduzir o estresse oxidativo pode melhorar a tolerncia ao
exerccio fsico bem como a performance (ALESSIO et al., 1999).
Embora os benefcios do aumento no VO 2 mx sejam bem estabelecidos, um
paradoxo bioqumico verificado. O aumento no consumo de O2 essencial para
aptido cardiovascular e performance, porm o aumento no consumo durante ou aps
o exerccio pode ser prejudicial, quando excedida a capacidade normal do individuo
(PINHO, 2005).
A gerao de ERO durante o exerccio depende do tipo (aerbia ou anaerbia),
intensidade, durao, exigncia de energia, os nveis de consumo de oxignio
e tenses mecnicas impostas sobre os tecidos (FISCHER-WELLMAN, 2009). O
exerccio fsico intenso provoca um aumento de 10 a 20 vezes no consumo total de
oxignio do organismo e um aumento de 100 a 200 vezes na captao de oxignio pelo
tecido muscular, favorecendo o aumento na produo de ERO (SAXTON et al., 1994).
Entretanto, estudos tm demonstrado que o treinamento de endurance aumenta as
defesas antioxidantes, assim como a capacidade oxidativa do msculo (PINHO et al.,
2006; RDAK et al., 1999; TERBLANCHE, 2000).
A formao de ERO durante o exerccio fsico decorre de diversos processos
fisiolgicos como a metabolizao do oxignio celular, isquemia-reperfuso, inflamao
do tecido muscular e oxidao de catecolaminas (JI e LEICHTWEIS, 1997; KNIG e
35
BERG, 2002). Esses processos geram um acmulo de ERO em algumas situaes que
podem ocasionar prejuzos relevantes na performance.
2.5.1 Formao de ERO durante o metabolismo do oxignio na cadeia respiratria
A fosforilao oxidativa resulta na produo de ATP na mitocndria em

situaes normais. A oxidao do substrato ocorre no ciclo de krebs e na cadeia
transportadora de eltrons com o oxignio como receptor de eltrons. Na cadeia
respiratria, 95-99% do oxignio consumido reduzido em gua por reduo
tetravalente (reao 1) catalizada pela CoQ (FINAUD et al., 2006).
Entretanto, 1-5% de O2 do fluxo da cadeia tranportadora de eltrons so
desviados para a formao de superxido (FINAUD et al., 2006). No complexo I, a
principal rota de fuga para o oxignio reagir com o ferro e o enxofre encontrados no
local e no complexo III. O produto formado pelas duas reaes o superxido, sendo
que o complexo III libera-o por ambos os lados do interior da membrana mitocondrial.
No est claro se este superxido atravessa a membrana externa mitocondrial ou
dismutado por Cu / Zn-SOD localizada na mitocndria localizada no espao inter-
membrana. Durante o exerccio, a gerao de ERO que ocorre durante a atividade
contrtil est diretamente relacionada com o elevado consumo de oxignio que ocorre
com o aumento da atividade mitocondrial (POWERS e JACKSON, 2007).
2.5.2 Formao de ERO durante isquemia-reperfuso
Interrupes temporrias das bombas de ATP dependentes de Ca2+ levam ao

aumento das concentraes intracelulares de Ca2+, o que durante o exerccio pode
ativar a via da XO. Concentraes aumentadas de Ca2+ intramusculares durante
perodos de exerccio de alta intensidade podem ativar as proteases dependentes de
Ca2+, as quais convertem a xantina desidrogenase em XO. A XO usa o oxignio
molecular ao invs do NADH como aceitante de eltrons e assim gera o radical
superxido (HALLIWELL E GUTTERIDGE, 2007).
36
A alta concentrao de Ca2+ em situaes isqumicas tem sido associada com

outra via de produo de ERO. O acrscimo das concentraes de Ca2+ pode ativar a
enzima fosfolipase A2 a qual libera o cido araquidnio a partir dos fosfolipdeos. Zuo et
al. (2004) concluiu que o metabolismo do cido araquidnico, em associao com a
atividade da lipoxigenase, a maior fonte de O2 - no msculo esqueltico.
Exerccios intensos podem aumentar a produo de ERO devido hipxia e
reoxigenao temporrias que ocorrem no msculo exercitado em funo de
contraes e relaxamentos estabelecidos ciclicamente. Durante a contrao, a
compresso vascular estabelece um quadro de isquemia, gerando uma hipxia.
Entretanto no relaxamento, acontece a reperfuso, e, consequentemente, a
reoxigenao (HALLIWELL E GUTTERIDGE, 2007).
Sob condies aerbias, o oxignio suficiente assegura que o ATP seja reposto
primeiramente via fosforilao oxidativa mitocondrial e que a hipoxantina/xantina sejam
convertidas para cido rico pela xantina desidrogenase do que pela xantina oxidase.
Alm disso, o msculo esqueltico tem baixa atividade da XO. Todavia a XO pode ser
um importante caminho quando o msculo apresentar um dficit de adenina
dinucletdeo. Essa situao teoricamente pode acontecer em situao isqumica,
exerccio isomtrico, sprint, dficit de O2, exerccios com limitao vascular de fluxo
sanguneo (BEJMA e JI, 1999, CHEVION et al., 2003).
De acordo com Chevion et al. (2003) as reaes catalisadas pela XO tm sido
consideradas algumas das mais importantes fontes de RL na isquemia/reperfuso do
corao. Durante a isquemia o ATP degradado em adenosina difosfato (AMP) devido
demanda de energia do miocrdio. Se o O2 for insuficiente, o AMP continuamente
degradado para hipoxantina que pode ser convertido para xantina e cido rico pela
XO, ligando-se a 1e- da reduo do O2 e formando superxido. A XO tambm pode ser
convertida da forma reduzida (xantina desidrogenase) para forma oxidada por
proteases intracelulares que pode ser ativada pelo Ca2+. O O2 tambm pode ser
disponvel como aceptor de eltrons.
37
2.5.3 Formao de ERO durante processo inflamatrio
Danos musculares provocados por exerccios levam a migrao de vrias clulas

do sistema de defesa como leuccitos, neutrfilos, moncitos e macrfagos que so
capazes de produzir ERO (MOOREN e VLKER, 2004). A ativao de leuccitos aps
o dano muscular, induzido pelo exerccio fsico, pode estimular a produo de RL para
atacar os antgenos invasores. Em particular os neutrfilos so as maiores fontes de
produo de O2 - pela reao NADPH-oxidase (Reao 9). Na presena de H2O2 e on
clorido, os neutrfilos geram o potente HClO via reao catalizada pela enzima
mieloperoxidase. A netrofilia induzida pelo exerccio ocorre como resultado da
desmarginao de neutrfilos de tecidos endoteliais (mediados por catecolaminas) e
medula ssea (mediado pelo cortisol) (TREVOR E SANDY, 2001). A produo
demasiada de ERO responsveis pelo ataque ao agente invasor no processo
inflamatrio chamada de burst oxidativo e responsvel pela primeira linha de defesa
contra o desenvolvimento de patogenias (DRGE, 2002).
Reao 9:
2 O2 + NADPH 2 O2 - + NADP+ + H+
Uma concentrao relevante de ERO pode modular o sinal sensvel-redox para

aumentar as funes imunolgicas dos linfcitos (DRGE, 2002). Embora isso seja
uma reao de proteo do organismo, pode ser causa de inflamaes agudas, devido
produo de mediadores pro-inflamatrios adicional como interleucinas 1,6 e 8, TNF-
e PGE, levando a produo de processo inflamatrio adicional e aumentando a
produo de ERO (MASTALOUDIS et al., 2001).
2.6 RELAO ENTRE EXERCCIO EXCNTRICO E ESTRESSE OXIDATIVO
A inflamao e o dano celular podem acontecer por exerccio traumtico como

esportes com impacto ou exerccios excntricos. As respostas isqumicas e
inflamatrias induzidas pela contrao isqumica trazem em contingncia a formao
38
de ERO (FINAUD et al., 2006). O ferro liberado neste processo da hemoglobina e

ferritina pode ser fator preponderante na formao adicional de ERO, pois o ciclo redox
do ferro promove a reao de Fenton e Haber-Weiss (Conjunto de Reaes 4) as quais
resultam na produo de radical hidroxila. Esse radical livre altamente danoso,
capaz de retirar um tomo de hidrognio dos cidos graxos poliinsaturados (PUFA) da
membrana celular e iniciar a peroxidao lipdica (WELCH et al., 2002).
Estudos em animais (DUAN et al., 1990; WARREN et al., 1996) tm mostrado
que aps a prtica de exerccios excntricos acontece um acmulo de Ca +2
mitocondrial, produzindo uma queda no potencial da membrana mitocondrial para a
produo de ATP e, consequentemente, diminuio das contraes musculares. Isto
pode ocorrer pois o exerccio excntrico pode desequilibrar a homeostase do clcio
devido excessiva atividade de contrao e leso muscular e isquemia tecidual. Esse
conjunto de processos pode aumentar a gerao de ERO pela via xantina-oxidase
(KNIG e BERG, 2002).
2.7 LESES NO EXERCCIO EXCNTRICO
A leso muscular causada por exerccios fsicos extenuantes em msculos no

habituados a receberem certos estmulos, principalmente quando envolvem contraes
musculares excntricas quando os msculos so alongados enquanto exercem fora
(CLARKSON e SAYERS, 1999). No exerccio excntrico, as leses ocorrem porque as
aes de alongamento provocam uma extenso alm do normal de alguns sarcmeros,
causando danos a essas estruturas (CLEBIS e NATALI, 2001). Um exemplo de
exerccio excntrico a corrida em declive, em que na descida a contrao do msculo
do quadrceps sofre o processo de alongamento a fim de controlar o grau de flexo do
joelho contra a fora da gravidade (PROSKE e MORGAN, 2001).
Vrios fatores podem estar relacionados ao aparecimento de leses nas fibras
musculares que realizaram trabalho excntrico. Clebis e Natali (2001) e Clarkson e
Sayers (1999) ressaltam a possvel influncia da fadiga muscular, quebra da
homeostase celular do Ca+2, produo de ERO, falta de substrato energtico e
processos mecnicos como tenso e alongamento do msculo. No entanto, Soricher et
39
al. (2006) afirmam que as leses ocorridas pela ao excntrica podem causar
diminuio do alongamento do msculo, dor muscular tardia e inflamao do msculo.
Em um de seus estudos com treinamento excntrico em humanos, Sorichter et
al. (2006) evidenciou que a mxima fora muscular associada ao excntrica causa
a rpida dissociao e/ou degradao e remoo imediata de troponina do tipo I. Dessa
forma, so possveis alteraes no complexo do filamento da troponina imediatamente
aps a leso muscular, induzida por exerccio fsico.
Alm disso, mudanas na funo muscular a nvel celular foram observadas
aps o exerccio excntrico. Ocorre uma diminuio na quantidade de protenas
transportadora de glicose e lactato/ H+ e sua ao torna-se prejudicada (CLARKSON e
SAYERS, 1999). Estudos mostram a elevao de creatina quinase e lactato
desidrogenase por vrios dias, aps treinamento excntrico (DONNELY et al., 1992;
ESTON et al., 1996; NOSAKA e CLARKSON, 1994), confirmando assim a ao
deletria do exerccio excntrico nas fibras musculares.
Os exerccios excntricos induzem a dor muscular tardia (DMT) (GLEESON et
al., 1997). Funciona como um mecanismo de proteo que age para diminuir a
atividade muscular e prevenir leses mais graves (ZAINUDDIN et al., 2006).
Caracterizada pela sensibilidade local ou generalizada nos msculos estressados,
manifesta-se depois de oito horas do trmino do exerccio e progride de intensidade nas
primeiras 24 horas, alcanando seu pico entre 48 e 72 horas (TRICOLI, 2001). Gleeson
et al. (1997) afirma que a DMT inicia entre seis e dez horas aps o exerccio excntrico
e o pico acontece entre 24 e 48 horas depois do exerccio.
Smith (1991) sugere que a DMT decorre do processo inflamatrio no msculo
exercitado. Clulas polimorfonucleadas (PMN) migram para o tecido lesionado e
liberam PGE2, que ativam receptores locais de dor, intensificando a sensao dolorosa
(CROSIER et al., 1996). As PGE aumentam a sensibilidade dos receptores de dor tipo
III e IV. Os receptores do tipo III identificam primeiramente estmulos mecnicos,
enquanto os do tipo IV so responsveis pela transmisso da dor causada por agentes
qumicos. O tempo para que estes eventos ocorram, explicam em parte a demora entre
o dano na estrutura do tecido muscular e a percepo de dor (MILES et al., 1994).
40
3 MTODOS
Todos os procedimentos foram aprovados pelo Comit de tica no Uso de

Animais da Universidade do Extremo Sul de Santa Catarina (UNESC) Brasil e
realizados conforme a Lei n 11.794/08 (DOU 196, Seo 1, Outubro/2008).
3.1 CARACTERIZAO DA PESQUISA
Esta pesquisa caracteriza-se por ser do tipo experimental com delineamento

experimental (THOMAS e NELSON, 2002), pois se trata de comparar a resposta da
suplementao do antioxidante em grupo experimental e controle.
3.2 AMOSTRA
Fizeram parte da amostra 24 ratos Wistar machos (60 dias de idade, 200-250g
de peso), oriundos do Biotrio da Universidade do Extremo Sul Catarinense. Os animais
foram agrupados em gaiolas e tiveram acesso livre gua e comida (rao para
camundongos e ratos da Nuvilab CR-1 Tabela 3) com temperatura ambiente de
23oC graus e ciclo de claro e escuro de por um perodo de 12 horas.
41
Tabela 3: Composio bsica do produto (rao Nuvilab CR-1) / kg do produto
Valor Nutricional da dieta padro % por kg do produto

Umidade (mx.) 12,5
Protena Bruta (min.) 22
Extrato tereo (min.) 4,5
Matria mineral (mx.) 10
Matria fibrosa (mx.) 8
Clcio (mx.) 1,4
Fsforo 0,8
3.3 TRATAMENTO EXPERIMENTAL
Os animais foram divididos em quatro grupos (n=6): controle (C); exerccio

excntrico (EE); exerccio excntrico + taurina (EET) e exerccio excntrico + salina
(EES).
3.4 PROTOCOLO DE ADAPTAO AO EXERCCIO
Todos os animais foram ambientados em esteira ergomtrica sem estimulao

eltrica durante uma semana, antes da sesso de exerccio excntrico (10 minutos de
corrida), com velocidade constante (10 m.min-1) e sem inclinao.
3.5 PROTOCOLO DE EXERCCIO EXCNTRICO DE LONGA DURAO
O modelo de exerccio excntrico utilizado foi o de corrida em declive (-16
graus) baseado em um estudo de Armstrong et al. (1991). Os ratos foram submetidos a

uma sesso de exerccio com durao de 1,5 hora com velocidade constante de 16,6
m.min-1 em esteira ergomtrica e este protocolo foi realizado 48 horas depois a ltima
42
sesso de treinamento de adaptao. A intensidade do exerccio realizado pode ser

considerada moderada (+ 60% do VO2 mx.) de acordo com Brooks e White (1978).
3.6 SUPLEMENTAO
A taurina sinttica (marca Sigma) foi administrada neste estudo de acordo com
o experimento de Myasaki et al. (2004). A taurina foi manipulada por gavagem
(300mg/kg de peso corporal diludo em 1ml de gua deionizada) em dose nica diria
por um perodo de 14 dias consecutivos antes da sesso de exerccio e 2, 12, 24 e 48
horas depois dela. Foi utilizada 1ml de salina (NaCl 0,9%) como veculo.
3.7 EUTANASIA
Quarenta e oito horas depois da sesso exerccio excntrico os ratos foram

sacrificados por decapitao e o quadrceps foi retirado cirurgicamente, processado,
aliquotado e armazenado em freezer -70C para posterior anlise.
43
3.8 DESENHO DO ESTUDO
Figura 1 Desenho do estudo Efeitos da suplementao de taurina sobre os

parmetros de estresse oxidativo induzidos pelo exerccio excntrico.
3.9 ENSAIOS BIOQUMICOS
3.9.1 Produo de Espcies Reativas de Oxignio
3.9.1.1 nion Superxido
O superxido determinado pela oxidao da adrenalina em tampo contendo

SMP, succinato (inibidor da cadeia de transferncia de eltrons) e catalase. Um controle
negativo determinado com a presena de SOD (PODEROSO et al., 1996).
Para esta anlise, uma alquota do quadrceps foi retirada e homogeneizada em
tampo isolamento (MSTE). A amostra foi centrifugada e retirada uma parte do
sobrenadante. Logo aps, ressuspendeu-se o pellet que foi homogeneizado logo depois
em MSTE. Centrifugou-se por 10 minutos e o sobrenadante foi novamente retirado. Os
dois sobrenadantes foram misturados e centrifugados. O pellet dessa soluo foi
retirado e centrifugado duas vezes. A amostra foi congelada 3 vezes em 70C por
cinco minutos. Foi adicionado 5 l de soluo de SMP (partculas sub-mitocondriais) e
44
tampo lavagem amostra. Centrifugou-se por mais 10 minutos e o pellet foi

ressuspendido. Esta ltima fase foi realizada 2 vezes antes de dosar.
3.9.2 Marcadores de Danos Oxidativos
3.9.2.1 Espcies Reativas ao cido Tiobarbitrico (TBARS)
Este mtodo foi utilizado para a avaliao do estado de oxidao dos cidos
graxos em sistemas biolgicos. O dano em lipdeos da membrana determinado pela
formao de subprodutos da lipoperoxidao (malondialdedo-MDA), que so
substncias reativas ao aquecimento do cido tiobarbitrico (TBA), formadas durante a
peroxidao em sistemas de membranas e microssomos. O MDA reage com o TBA
gerando um produto rseo lido em espectrofotmetro (DRAPER e HADLEE, 1990).
Esta anlise foi realizada conforme descrito por Draper e Hadlee (1990). As
amostras foram homogeinizadas em tampo TBA, lisadas em TCA 5% e centrifugadas
por 10 min. O sobrenadante foi fervido por 30 min em TBA 67%. Aps o resfriamento
em temperatura ambiente, as substncias reativas ao cido tiobarbitrico foram
quantificadas a 532 nm.
3.9.2.2 Carbonilao de protenas
Este mtodo foi utilizado para dosar a oxidao de protenas. Baseia-se no

princpio de que vrios RL atacam resduos de protenas como aminocidos
(principalmente histidina, arginina, lisina e prolina) resultando em produtos com o grupo
carbonil, o qual pode ser medido pela reao com dinitrofenihidrazina (LEVINE et al.,
1990).
Nesta anlise, aps homogenizao das amostras de quadrceps em tampo
carbonil (120 mM KCL, 30mM KH2PO4), as mesmas foram centrifugadas a 7000g por
15min a 4C e lisadas em TCA 20%. As amostras lisadas foram novamente
centrifugadas a 14000 g por 5 minutos. O pellet foi ressuspenso em 100 L de 0,2 M de
NaOH e as amostras foram incubadas por 1 hora temperatura ambiente com 2 M de
45
HCl (1:3) adicionado de 10 mM de DNPT. Aps o perodo de incubao, adicionou-se

100 L de TCA 20% e as amostras foram centrifugadas a 14000g por trs minutos. O
pellet foi lavado com 500 L de etanol-etilacetato. As amostras foram incubadas por
mais 30 minutos a 60C, centrifugadas novamente a 14000g por 3 minutos. O contedo
de formao de carbonil foi determinado espectrofotometricamente em 370nm, usando
um coeficiente 22.0000 molar-1.
3.9.2.3 Sulfidrilas
O cido ditionitrobenzico (DTNB) reduzido por tiis gerando um derivado

amarelo (TNB) e lido espectrofotometricamente a 412 nm. Este mtodo determina os
tiis totais da amostra, sendo um parmetro de medida de dano oxidativo s protenas
(AKSENOV e MARKESBERY, 2001).
As amostras do quadrceps foram homogeneizadas em 1 ml de tampo PBS (7.4
pH) com 1 mM de EDTA. Logo aps, foi adicionado a amostra DTNB e incubada por 30
minutos temperatura ambiente no escuro. Por fim, as amostras foram lidas
espectrofotometricamente.
3.9.3 Atividade de enzimas antioxidantes
3.9.3.1 Superxido dismutase (SOD)
O produto resultante da reao catalisada pela SOD o H 2O2 que deve ser
retirado do meio o mais rpido possvel. Uma unidade de enzima definida pela
quantidade transformada em 1mol de substrato por minuto. A atividade enzimtica foi
determinada pela inibio da auto-oxidao da adrenalina medida
espectrofotometricamente (480nm), segundo Bannister e Calabrese (1987).
O tecido do quadrceps foi homogenizado em 1 ml de tampo glicina (10,2 pH).
Foram utilizados 10l, 20l e 30l de amostra para fazer a leitura. Foi pipetado 10l de
catalase e 970 l de tampo glicina (32) e em seguida foi dado o branco. A adrenalina
(17l) foi acrescentada soluo que foi lida durante 180 segundos. Aps a primeira
46
leitura, adicionou-se 10 l de catalase e 970 l de tampo glicina quantidade de

amostra (10, 20 ou 30 l) e logo depois zerou-se o espectro. Foi adicionado 17 l de
adrenalina e leu-se novamente em 180 segundos.
3.9.3.2 Catalase (CAT)
Esta anlise mediu a atividade da enzima produzida pelas clulas e organelas da

frao retirada do quadrceps em resposta a quantidade de perxido de hidrognio
determinada pela queda na absorbncia (240nm), conforme previamente descrito por
Aebi (1984).
O procedimento iniciou com a homogeinizao das amostras em tampo fosfato.
Foram centrifugadas em 3000g por 10 minutos. Foram pipetadas 50l de amostra e 1ml
de tampo fosfato em cubeta de quartzo. Logo depois foi zerado o espectro. Foi
utilizado o tampo fosfato com perxido de hidrognio para fazer a leitura. Foi
adicionado 1ml de perxido de hidrognio 50l de cada amostra e feita a leitura nos
tempos de 0 segundos, 30 segundo e 60 segundos.
3.9.4 Determinao da Protena
A quantidade de protenas de todos os ensaios foram mensurados usando a

tcnica de LOWRY et al. (1951). O princpio do mtodo baseia-se em uma mistura
contendo molibdato, tungstato e cido fosfrico, reagente Folin-Ciocalteau, que sofre
uma reduo quando reage com protenas, na presena do catalisador cobre (II) e
produz um composto com absoro mxima em 750 nm.
O tecido foi homogeneizado em tampo correspondente de cada experimento.
Foi pipetada a curva utilizando a relao de 0,5mg de albumina (BSA) para 1ml de H2O.
Foi colocado 10 l da amostra homogeneizada em 190 H2O e depois pipetado 1 ml de
reagente C em todos os pontos e misturado no Vortex. Foram esperados 10 minutos
para se acrescentar 100 l de folin em todos os tubos e esperou-se mais 30 minutos.
Para se fazer a leitura em espectofotmetro a 700nm em cubeta de plstico.
47
3.10 CLCULO E TAMANHO DA AMOSTRA
Baseando-se em Silva et al. (2009) em que uma relao mdia ( Erro padro
mdio - EPM) de TBARS de 0,14 0,07nmol/mg protena antes do protocolo de
exerccio excntrico e de 0,24 0,08nmol/mg protena aps a sesso de exerccio, no
presente estudo o tamanho do grupo amostral necessrio para detectar uma diferena
significativa, considerando um nvel de significncia de 5% e poder de 80%, foi de 6
animais por grupo totalizando 24 animais em todo experimento.
3.11 TRATAMENTO ESTATSTICO
Os dados foram expressos em mdia e erro padro mdio (EPM) e analisados

estatisticamente pela anlise de varincia (ANOVA) one-way, seguido pelo teste post
hoc Tukey. O nvel de significncia estabelecido para o teste estatstico foi de p<0,05.
Foi utilizado o SPSS (Statistical Package for the Social Sciences) verso 16.0 como
pacote estatstico.
48
4 RESULTADOS
4.1 PRODUO DE ESPCIES REATIVAS DE OXIGNIO
4.1.1 nion Superxido
Houve um aumento significativo na produo de superxido aps a sesso de

exerccio excntrico em todos os grupos em relao ao grupo controle - C (0,52 0,17
nmol/min/mg protena). O grupo EET apresentou uma reduo na produo do nion
Superxido (0,9 0,2 nmol/min/mg protena) quando comparado com o grupo EE (1,62
0,2 nmol/min/mg protena) e o grupo EES (1,55 0,3 nmol/min/mg protena) -Figura 2.
Figura 2: Produo de nion superxido (O2 -) no msculo do quadrceps de ratos, aps

uma sesso de exerccio excntrico: grupo controle (C), grupo exerccio excntrico
(EE), grupo exerccio excntrico com suplementao de taurina (EET) e grupo
exerccio excntrico com placebo (EES). Os valores esto representados em
mdia+EPM e os resultados expressos em nmol/min/mg protena. Diferenas
significativas em relao ao grupo controle (*) e em relao ao EES (#) com nvel de
significncia p<0,05.
49
4.2 MARCADORES DE DANOS OXIDATIVOS
4.2.1 Espcies Reativas ao cido Tiobarbitrico (TBARS)
Na figura 3, a quantidade de TBARS aumentou em todos os grupos em

comparao ao C (0,06 0,006 nmol/mg protena). No entano, EET apresentou
quantidade de TBARS menor (0,13 0,001nmol/mg protena) em relao a ambos os
grupos (EES - 0,18 0,03 nmol/mg protena e EE - 0,18 0,05 nmol/mg protena).
Figura 3: Nveis de TBARS no msculo do quadrceps de ratos, aps uma sesso de

exerccio excntrico: grupo controle (C), grupo exerccio excntrico (EE), grupo
exerccio excntrico com suplementao de taurina (EET) e grupo exerccio excntrico
com placebo (EES). Os valores esto representados em mdia+EPM e os resultados
expressos em nnmol/mg protena. Diferenas significativas em relao ao grupo
controle (*) e em relao ao EES (#) com nvel de significncia p<0,05.
50
4.2.2 Contedo total de tiis
Ocorreu uma diminuio no contedo total de tiis em todos os grupos aps a

sesso de exerccio excntrico em relao ao grupo C (Figura 4). Entretanto, o grupo
EET apresentou um maior contedo total de tiis (18,8 0,3 nmol TNB/mg protena) em
comparao com os demais grupos (EES -13,8 1 nmol TNB/mg protena; EE - 12,2
1 nmol TNB/mg protena).
Figura 4: Contedo total de tiis no msculo do quadrceps de ratos, aps uma sesso
de exerccio excntrico: grupo controle (C), grupo exerccio excntrico (EE), grupo
com placebo (EES). Os valores esto representados em mdia+EPM e os resultados
expressos em nmol TNB/mg protena. Diferenas significativas em relao ao grupo
4.2.3 Carbonilao de protenas
Houve um aumento nos nveis de carbonilao de protenas em todos os grupos

aps a sesso de exerccio excntrico em relao ao grupo controle (Figura 5).
Contudo, o grupo EET apresentou um valor menor na carbonilao de protenas (0,20
51
0,2 nmol/mg protena) quando comparado com ambos os grupos (EES- 0,30 0,03
nmol/mg protena; e EE - 0,30 0,025 nmol/mg protena).
Figura 5: Nveis de carbonilao de protenas no msculo do quadrceps de ratos, aps

uma sesso de exerccio excntrico: grupo controle (C), grupo exerccio excntrico
(EE), grupo exerccio excntrico com suplementao de taurina (EET) e grupo
exerccio excntrico com placebo (EES). Os valores esto representados em mdia +
EPM e os resultados expressos em nmol /mg protena. Diferenas significativas em
relao ao grupo controle (*) e em relao ao EES (#) com nvel de significncia
p<0,05.
4.3 ATIVIDADES DE ENZIMAS ANTIOXIDANTES
4.3.1 Superxido dismutase (SOD)
Em todos os grupos (EE 1,22 0,25 U de SOD/mg protena; EET 1,18 0,15
U de SOD /mg protena; EES 1,22 0,12 U de SOD /mg protena) houve aumento na
atividade da SOD aps a sesso de exerccio excntrico em relao ao grupo controle
(C - 0,49 0,12 U de SOD /mg protena). A suplementao com Taurina no alterou os
resultados conforme ilustra figura 5.
52
Figura 6: Atividade da enzima Superxido Dismutase (SOD) no msculo do quadrceps

de ratos, aps uma sesso de exerccio excntrico: grupo controle (C), grupo exerccio
excntrico (EE), grupo exerccio excntrico com suplementao de taurina (EET) e
grupo exerccio excntrico com placebo (EES). Os valores esto representados em
mdia + EPM e os resultados expressos em U de SOD /mg protena. Diferenas
significativas em relao ao grupo controle (*) e em relao ao EES (#) com nvel de
significncia p<0,05.
4.3.2 Catalase (CAT)
Foi verificado um aumento na atividade da CAT em todos os grupos (EE - 6,12

0,19 U de CAT/mg protena; EET- 5,85 0,62 U de CAT/mg protena; EES 5,61
0,45 U de CAT/mg protena) quando comparados ao grupo controle (C 3,98 0,19 U
de CAT/mg protena). A suplementao da taurina no alterou os resultados (Figura 7).
53
Figura 7: Atividade da CAT no msculo do quadrceps de ratos aps uma sesso de

exerccio excntrico: grupo controle (C), grupo exerccio excntrico (EE), grupo
com placebo (EES). Os valores esto representados em mdia + EPM e os resultados
expressos em U de CAT/mg protena. Diferenas significativas em relao ao grupo
54
5 DISCUSSO
Neste estudo foi possvel observar que uma sesso de exerccio excntrico
ocasionou um aumento na produo de ERO (representado pelo nion superxido), no
dano oxidativo de lipdeos e protenas e na atividade das enzimas antioxidantes (SOD e
CAT). Corroborando com outros autores (BLOOMER et al., 2004; CHILDS et al., 2001;
SILVA et al., 2008), possvel confirmar que este tipo de exerccio provoca um
desequilbrio no sistema oxidante/antioxidante, causando o estresse oxidativo.
Com o objetivo de atenuar os efeitos deletrios ocasionados pelo exerccio
excntrico, utilizou-se a suplementao de taurina como recurso antioxidante. A
quantidade suplementada de taurina neste trabalho foi adaptada de acordo com
Miyazaki et al. (2004) que encontrou efeitos positivos na performance de ratos, com
doses entre 100 e 500mg de taurina /kg de peso corporal.
Diversos estudos mostram que o exerccio excntrico provoca alteraes nos
marcadores de estresse oxidativo em um perodo entre 24 e 72 horas ps-exerccio
(GOLDFARB et al., 2005; LEE et al., 2002, SILVA et al., 2008). Neste estudo optou-se
por avaliar os parmetros de estresse oxidativo 48 horas depois de uma sesso de
exerccio excntrico.
A gerao de nion superxido, durante o exerccio fsico, ocorre por diversas
vias, sendo que algumas delas so: o aumento no fluxo de eltrons na cadeia
transportadora, ativao da xantina-oxidase e NADPH-oxidase durante e depois das
contraes excntricas (HALLIWEL e CROSS, 1994; ZUO et al., 2004; BUTTERFIELD
et al., 2006).
Na inflamao do tecido muscular, micitos e outras clulas liberam citocinas
como interleucinas 1, 6 e 8 e TNF os quais ativam a migrao das clulas
polimorfonucleadas (PMN) no local. As clulas PMN ativam mieloperoxidase que
acabam produzindo substncias citotxicas como superxido, hipoclorido, cido
hipocloroso e perxido de hidrognio (BUTTERFIELD et al., 2006; MASTALOUDIS et
al., 2001; TREVOR e SANDY, 2001). Uma alta produo destes metablitos pode
desencadear o processo de estresse oxidativo. Os resultados deste trabalho
demonstraram que a suplementao de taurina diminuiu a produo de superxido.
55
Este efeito antioxidante da taurina pode ser atribudo capacidade que ela tem de se
ligar ao HClO e gerar um produto menos txico, a taurina cloramina (TauCl) que possui
a capacidade de neutralizar o nion superxido e o xido ntrico (KIM e CHA, 2009). A
TauCl pode ainda inibir as aes do fator nuclear kappa B (NFB), um fator de
transcrio que participa da resposta inflamatria (GURUJEYALASHMI et al., 2000) e
pode bloquear a produo de quimiocinas nos macrfagos alveolares que esto
envolvidos no recrutamento de neutrfilos (LIU e QUINN, 2002; ZEYBEK et al., 2006)
diminuindo o processo inflamatrio. Outra possibilidade, segundo Hansen et al. (2006)
que a taurina pode atuar como antioxidante em locais com alta produo de ERO,
incluindo a mitocndria, corroborando com a hiptese que a taurina pode estar
envolvida no metabolismo oxidativo.
Os danos em lipdeos das membranas celulares (lipoperoxidao) induzidos por
ERO podem ocasionar prejuzos irreversveis para a clula como a apoptose (FINAUD
et al., 2006). A lipoperoxidao pode agravar o dano da membrana por aumento da
permeabilidade (PASANTES-MORALES e CRUZ, 1985). Neste estudo, a
suplementao de taurina diminuiu os nveis de TBARS (marcador indireto de
lipoperoxidao) aps o exerccio excntrico em comparao com os demais grupos.
Alguns autores mostraram resultados similiares quanto ao efeito protetor da taurina
sobre a lipoperoxidao (KIM et al., 1996; ZEYBECK et al., 2006). A taurina
demonstrou reduzir o dano induzido pelo exerccio no msculo, bloqueando o aumento
de TBARS no msculo extensor longo de ratos no estudo de Dawson et al. (2002).
Bakker e Berg (2002) reportam que ela altera indiretamente o funcionamento de canais
de Cl- no msculo esqueltico pela interao com os fosfolipdeos prximos ao canal. O
efeito protetor que a taurina exerce sobre este tipo de lipdeo pode ser atribudo a essa
capacidade de interao com os fosfolipdeos da membrana e a melhora nas
propriedades de estabilizao das paredes celulares, limitando o ataque de ERO
(GOODMAN et al., 2009; ZHANG et al., 2004).
Similarmente lipoperoxidao, a suplementao de taurina ajudou a proteger
as protenas celulares, diminuindo a carbonilao das protenas e preservando
contedo de tiis totais e em relao aos demais grupos. A alta concentrao de ERO
pode modificar aminocidos por reaes em cadeias pelo o ataque a agregados de
56
protenas suscetveis a degradaes proteolticas (REPINE et al., 1997). Os grupos

carbonilas so formados principalmente a partir da oxidao de alguns aminocidos
atacados por ERO, como lisina, argenina e cistena. (DALLE-DONNE et al., 2003).
Alguns estudos (PINHO, 2006; SILVA, 2008; ARAUJO, 2008) tm mostrado o efeito
protetor de alguns antioxidantes na carbonilao de protenas aps o exerccio.
Dawson et al. (2002) utilizaram a suplementao de taurina e encontraram reduo no
dano de protenas, corroborando com os presentes resultados.
possvel que um dos mecanismos de proteo da taurina sobre as protenas,
alm de reduzir a produo de ERO, possa estar relacionado com o metabolismo
protico, uma vez que a degradao de protenas, durante o exerccio e nos dias
seguintes, torna-se necessria para a reconstruo de novas fibras musculares
(MEYDANI et al.,1997). A taurina pode estar envolvida, tambm, no processo de
proteo de protenas musculares acometidas pelo ataque de ERO produzidas durante
a atividade oxidativa da xantina (CHANG et al., 2004). Nos momentos de hipxia
tecidual e alta produo de ERO, a taurina modula a disponibilidade do clcio
intracelular (CONTE-CAMERINO et al., 2004; GALLER e HUTZLER, 1990). Por esta
razo, ela pode ter afetado a hiperexcitabilidade celular pelo aumento da conduo da
membrana de potssio e ons clorido (IZUMI et al., 1977), estabilizando a
permeabilidade da membrana.
A quantificao da concentrao dos grupamentos sulfidrila totais fornece uma
idia do nvel de ataque oxidativo s protenas. A produo demasiada de ERO pode
promover a oxidao e degradao de protenas celulares (YU e KIM, 2008). As
protenas teciduais possuem resduos de cistena (com grupamentos sulfidrila livres)
que podem ser oxidados pela ao de radicais livres (ZOPPI et al., 2006). Os resultados
deste estudo mostram reduo do contedo de tiis total em todos os grupos aps o
exerccio.
A diminuio do contedo de tiis totais nos grupos EE tambm pode ter
ocorrido pela reduo da disponibilidade de glutationa. A glutationa
predominantemente regenerada no fgado e msculo esqueltico, as custas de
NADPH+, um dos produtos da via das pentoses. O NADPH+ utilizado como substrato
pela enzima glutationa redutase, gerando como produto glutationa, o principal substrato
57
para a reao da GPX. A maior requisio de energia reduz os estoques endgenos de

glicognio durante o exerccio prolongado, o que levaria a uma consequente reduo
nas concentraes de glicose-6-fosfato. A disponibilidade do substrato para a via das
pentoses diminuiria, comprometendo a regenerao de glutationa. Nessas condies, a
baixa disponibilidade da glutationa favorece a alterao do estado redox intracelular
para um estado mais oxidado, o que poderia levar ao aumento na oxidao dos grupos
tiis de protenas com funes sinalizadoras importantes durante a atividade muscular,
incluindo enzimas do metabolismo oxidativo (SILVEIRA et al., 2008).
A prtica de exerccios tende a produzir uma resposta adaptativa no organismo.
O estresse oxidativo minimizado pela regulao do sistema antioxidante em resposta
ao exerccio (FISHER-WELLMAN e BLOOMER, 2009; JACKSON, 2005). O estudo de
Silva et al. (2009) reporta que depois de cinco sesses de exerccio excntrico a
atividade de SOD aumentou a e a de CAT diminuiu em fgado de ratos. Neste estudo, a
atividade das duas enzimas dosadas no estudo (SOD e CAT) aumentou aps o
exerccio. O aumento de O2 - requer uma maior produo desses antioxidantes,
descartando-se a possibilidade destes resultados serem uma resposta adaptada ao
exerccio. No entanto, a suplementao de taurina no alterou os resultados em relao
aos outros grupos. Acredita-se, com base em outros estudos (EPPLER et al., 2001;
OBROSOVA et al., 1999; ZEYBEK et al., 2006), que a taurina tenha uma estreita
relao com o metabolismo da glutationa, aumentando a atividade da GPX. Esta
ligao pode ocorrer pelo fato da cistena ser a maior precursora na biossntese de
glutationa e tambm precursora da taurina (MOOREN e VLKER, 2004). No estudo em
que Zeybek et al. (2006) induziu danos no tecido do rim de ratos com protamina sulfato
e o tratamento com taurina estabilizou os estoques de GPX dos tecidos danificados e
protegeu do dano oxidativo. Porm, na presente pesquisa a atividade da GPX no foi
analisada.
As observaes deste estudo mostraram que a taurina pode ter efeitos
benficos no msculo esqueltico por reduzir estresse oxidativo por meio de vrios
mecanismos. Os resultados deste estudo demonstram que a suplementao de taurina
reduziu a produo de radical superxido, os nveis de lipoperoxidao e de
58
carbonilao; e aumentou o contedo total de tiis. Entretanto, a atividade antioxidante

enzimtica no foi alterada.
59
6 CONCLUSO
De acordo com os resultados e discusso apresentados, pode-se concluir que a

taurina melhorou o estresse oxidativo gerado no exerccio excntrico. No entanto, essa
relao ainda no est bem estabelecida. Para prescrio deste antioxidante na
preveno e modulao dos danos oxidativos musculares causados pelo exerccio
excntrico so necessrios mais estudos para explicar melhor o funcionamento da
Taurina, principalmente em humanos. Assim cabe destacar que:
A suplementao de Taurina diminui a produo de EROs no msculo aps o

exerccio excntrico;
A suplementao de Taurina minimiza os danos oxidativos dos lipdeos e
protenas das clulas musculares aps o exerccio excntrico;
A suplementao de Taurina no influenciou na produo das enzimas
antioxidantes SOD e CAT no msculo aps o exerccio excntrico neste estudo.
Assim, concluiu-se que novos estudos so necessrios a fim de elucidar os

efeitos da suplementao de taurina sobre os parmetros de estresse oxidativo no
exerccio excntrico.
60
REFERNCIAS
AEBI, H. Catalase in vitro. Methods Enzymol, v. 105, p. 121-126, 1984.
AKSENOV, M. Y.; MARKESBERY, W. R. Changes in thiol content and expression of

glutathione redox system genes in the hippocampus and cerebellum in Alzheimer's
disease. Neuroscience Letters, n. 302, p. 141-145, 2001.
ALBERT, M. Treinamento excntrico em esportes e reabilitao. So Paulo, SP:

Manole, 2002.
ALESSIO, H. M. ; GOLDFARB, A. H. Lipid Peroxidation and scanvenger enzymes

during exercise: adaptative response to training. Journal of Applied Physiology, n. 64,
p.1333-1336, 1998.
ALESSIO, H. M.; HAGERMAN, A. E.; FULKERSON, B. K. Generation of reactive

oxygen species after exhaustive aerobic and isometric exercise. Medicine Science of
Sports Exercise, v. 32, p.1576-81, 1999.
APPEL, H. J.; SOARES, J. M.; DUARTE, J.A. Exercise, muscle damage and fatigue.
Sports Medicine, n. 13, p.108-15, 1992.
ARAUJO, M. C. Efeitos do exerccio fsico regular e suplementao de licopeno

sobre marcadores de estresse oxidativo na Doena Arterial Coronariana.
Dissertao de Mestrado. Laboratrio de Fisiologia e Bioqumica do Exerccio (LAFIBE)
UNESC, 2008.
ARMSTRONG, R. B.; WARREN, G. L.; WARREN, J. A. Mechanisms of exercise-

induced muscle fiber injury. Sports Medicine, n. 12, p. 184-207, 1991.
AVERY, N. G.; KAISER, J. L.; SHARMAN, M. J.; SCHEET, T. P.; BARNES, D. M.;
GMEZ, A. L.; KRAEMER, W. J.; VOLEK, J. S. Effects of vitamin E supplementation on
recovery from repeated bouts of resistance exercise. The Journal of Strength
Conditioning Research, n.17, p. 801-809, 2003.
BALNAVE, C. D. e THOMPSON, M. W. Effect of training on eccentric exercise induced

muscle damage. Journal of Applied Physiology, n. 75, p. 1545-1551, 1993.
BANERJEE, A. K.; MANDAL, A.; CHANDA, D.; CHAKRABORTI, S. Oxidant, antioxidant

and physical exercise. Molecular and Cellular Biochemistry, n. 253, p. 307312,
2003.
BANNISTER, J.V.; CALABRESE, L. Assays for SOD. Methods Biochemestry Anal, v.

32, p. 279-312, 1987.
61
BAKKER, A. J.; BERG, H. M. The effect of taurine on sarcoplasmic reticulum function

and contractile properties in skinned skeletal muscle fibers of the rat. Journal of
Physiology, n. 538, p. 185194, 2001.
BARREIROS, A. L. S.; DAVID, J. M. Estresse oxidativo: relao entre gerao de

espcies reativas e defesa do organismo. Qumica Nova, n.29, v.1, p.113-123. 2006.
BEJMA, J.; JI, L.L. Aging and acute exercise enhance free radical generation in rat
skeletal muscle. Journal of Applied Physiology, n. 87, p. 465-470, 1999.
BIESEK, S.; ALVES, L. A.; GUERRA, I. Estratgias de Nutri e suplementao no

Esporte. Barueri, SP: Manole, 2005.
BIESALSKI, H. K. The role of Antioxidants in Nutritional Support. Nutrition, n.16, p. 593

596, 2000.
BLOOMER, R. J.; GOLDFARB, A. H.; MCKENZIE, M. J.; YOU, T.; NGUYEN, L. Effects
of antioxidant therapy in women exposed to eccentric exercise. International Journal
of Sport Nutrition and Exrecise Metabolism, n. 14, p. 377 388, 2004.
BOUCKENOOGHE, T.; REMACLE, C.; REUSENS, B.. Is Taurine a functional nutrient?

Current Opinion in Clinical Nutrition and Metabolic Care, n. 6, v. 9, p. 728 733,
2006.
BROOKS, G. A.; WHITE, T. P. Determination of metabolic and heart rate responses of

rats to treadmill exercise. The American Physiological Society, 1978.
BUTTERFIELD, T. A.; BEST, T. M.; MERRICK ,M. A. The dual roles of neutrophils and
macrophages in inflammation: a critical balance between tissue damage and repair.
Journal of Athletic Trainning, n.41(4), p.457 465, 2006.
BYER, S. C.; GOLDFARB, A. H. Effect of high dose vitamin C supplementation on

muscle soreness, damage, function, and oxidative stress to eccentric exercise.
Internationational Journal of Sport Nutrition and Exercise Metabolism, n.16, p.
270-280, 2006.
CARMELI, E.; LAVIAM, G.; REZNICK, A.Z. The role of antioxidant nutrition in exercise
and aging. In: Radk Z, editor. Free radicals in exercise and aging. Champaign:
Human Kinetics, p. 73-115, 2000.
CHANCE, B., SIES, C. H., BOVERIS, A. Hydroperoxide metabolism in mammalian

organs. Physiology, n.59, p. 527-605, 1979.
CHANG, L.; XU, J. X.; ZHAO, J.; PANG, Y. Z.; TANG, C. S.; YONG, Q. I. Taurine
antagonized oxidative stress injury induced by homocysteine in rat vascular smooth
muscle cells. Acta Pharmacologica Sinica, n.25, p. 341-346, 2004.
62
CHEVION, S.; MORAN, D. S.; HELED, Y.; SHANI, Y.; REGEV, G.; ABBOU, B.;
BERENSHTEIN, E.; STADTMAN, E. R.; EPSTEIN, Y. Plasma antioxidant status and
cell injury after severe physical exercise. Proceedings of the National Academy
Science, n. 100, p. 5119-5123, 2003.
CHILDS, A.; JACOBS, C.; KAMINSKI, T.; HALLIWELL, B.; LEEUWENBURGH, C.

Supplementation with vitamin C and N-acetyl-cysteine increases oxidative stress in
humans after an acute muscle injury induced by eccentric exercise. Free Radical
Biology Medicine, n.31, p.745-753, 2001.
CLARKSON, P. M.; SAYERS, S. P. Etiology of exercise-induced muscle damage.

Journal of Applied Physiology, n. 24, p. 234-248, 1999.
CLEBIS, K. N. e NATALI, M. R. Leses musculares provocadas por exerccios

excntricos. Revista Brasileira de Cincia e Movimento, n. 4, p. 47-53, 2001.
CONTE-CAMARINO, D; TRICARICO, D.; PIERNO, S.; DESAPHY, J.; LIANTONIO, A.;

PUSCH, M.; BURDI, R.; FRAYSE, B. Taurine and skeletal muscle disorders.
Neurochemical Research, n.1, p. 135-142, 2004.
CROISIER, J. L; CAMUS, G; DEBY-DUPONT, G; BERTRAND, F; LHERMEROUT, C;

CRIELAARD, J. M; JUCMES-FERIR; LAMY, M. Myocellular enzyme leakage,
polymorphonuclear neutrophil activation and delayed onset muscle soreness induced by
isokinetic eccentric exercise. Archives of Physiology Biochemistry, n.28, p.332-329,
1996.
CUISINIER, C.; GAILLY, P.; FRANCAUX, M.; LEBACQ, J. Effects of guanidinoethane

sulfonate on contraction of skeletal muscle. In: DELLA CORTE, L.; HUXTABLE, R. J.;
TIPTON, K. F. Taurine 4: taurine and excitable tissues. New York: Kluwer Academic
Plenum, p. 403409, 2000.
CUISINIER, C.; MICHOTTE DEL WELLE, J.; POORTMANS, J. R.; WARD, R.;
STURBOIS, X. Role of taurine in osmoregulation during endurance exercise. European
Journal of Applied Physiology, v. 6, n.87, p. 489-495, 2002.
DALLE-DONNE, I.; GIUSTARINI, D.; COLOMBO, R.; ROSSI, R.; MILZANI, A. Protein
carbonylation in human Diseases. Trends in Molecular Medicine v.4, n.9, p.169 176,
2003.
DAWSON, R.; BIASETTI JR., M.; DOMINY, J. The cytoprotective role of taurine in
exercise-induced muscle injury. Amino Acids, n. 22, p. 309-324, 2002.
DONNELLY, A. E.; CLARKSON, P. M.; MAUGHAN R. J. Exercise-induced muscle

damage: effect of light exercise on damage muscle. European Journal of Applied
Physiology, n.64, p.350-353, 1992.
63
DRAPER, H.H.; HADLEE, M. Malondialdehyde determination as index of lipid

peroxidation. Methods Enzymol, v. 186, p. 421-431, 1990.
DRGE, W. Free radicals in the physiological controlo f cell function. Physiological

Reviews, v. 82, p. 47 95, 2002.
DUAN, C.; DELP, M. D.; HAYES, D. A.; DELP, P. D.; ARMSTRONG, R. B. Rat skeletal
muscle mitochondrial [Ca2+] and injury from downhill walking. Journal of Applied
Physiology, n.68, p.1241-1251, 1990.
EPPLER, B.; DAWSON Jr, R. Dietary taurine manipulations in aged male Fischer 344
rat tissue: taurine concentration, taurine biosynthesis, and oxidative markers.
Biochemical Pharmacology, n. 62, p. 29 39, 2001.
ESTON, R. G.; FINNEY, S.; BAKER, E.; BALTZOULOS. Muscle tenderness and peak
torque changes after downhill running following a prior of isokinetic eccentric exercise.
Journal of Sports Science, n.14, p.291-299, 1996.
FAISAL, A.; BEAVERS, K. R.; ROBERTSON, A. D.; HUGHSON, R. L. Prior moderate

and heavy exercise accelerate oxygen uptake and cardiac output kinetics in endurance
athletes. Journal of Applied Physiology, n. 106, p.15531563, 2009.
FENTON, H. J. H. Oxidation of tartaric acid in presence of iron. Journal of Chemical

Society, n. 65, p. 899 911, 1894.
FINAUD, J.; LAC, G.; FILAIRE, E. Oxidative stress: relationship with Exercise end
training. Sports Medicine, n.36, p. 327-358, 2006.
FISHER-WELLMAN, K.; BLOOMER, R. J. Acute exercise and oxidative stress: a 30

year history. Dynamic Medicine, v. 8, n.1, p. 1 25, 2009.
FLOH, L.; GUNZLER, W. Assay of glutatione peroxidase. Methods Enzymol, n. 21,

p.105: 114, 1984.
GALLOWAY, S. D. R.; TALANIAN, J. L.; SHOVELLER, A. K.; HEIGENHAUSER, G. J.

F.; SPRIET, L. L. Seven days of oral taurine supplementation does not increase muscle
taurine content or alter substrate metabolism during prolonged exercise in humans.
Journal of Applied Physiology, n.105, p.643-651, 2008.
GARRETT JR, W. E. Muscle strain injuries. The American Journal of Sports

Medicine, v.24, n.6, p.2-8, 1996.
GALLER, S., HUTZLER, C. Effects of taurine on Ca2-dependent force

development of skinned muscle fibre preparations. The Journal of Experimental
Biology, n.152, p. 255264,1990.
64
GLEESON, M.; BLANNIN, A. K.; WALSH, N. P.; FIEI.D, C. N.; PRITCHARD; J. C..
Effect of exercise-induced muscle damage on the blood lactate response to incremental
exercise in humans. European Journal of Applied Physiology, n. 77, p. 292-295,
1998.
GOLDFARB, A. H.; BLOOMER, R. J.; MCKENZIE, M. J. Combined antioxidant

treatment effects on blood oxidative stress after eccentric exercise. Medicine Science
of Sports Exercise, v. 37, p. 234 239, 2005.
GOODMAN, C. A.; HORVATH, D.; STATHIS, C.; MORI, T.; CROFT, K.;
GURUJEYALASHMI, G.; WANG, Y.; GIRI, S. N. Taurine and niacin block lung and
fibrosis by down-regulating bleomycin-induced activation of transcription nuclear factor-
kB in mice. The Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics, n. 293, p.
82 90, 2009.
GURUJEYALASHMI, G.; WANG, Y.; GIRI, S. N. Taurine and naicin block lung and
fibrosis by down regulating bleomicin-induced activation of transcription nuclear factor-
B in mice. The Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics, n. 293, p.
82-90, 2000.
HABER, F.; WEISS, J. On the catalysis of hydroperoxide. Naturwissenshaften, n. 20,

p. 948-950, 1932.
HALLIWELL, B.; CROSS, C. E. Oxygen-derived species: their relation to human disease

and environmental stress. Environmental Health Perspectives, n. 102 (Suppl 10), p. 5
-12, 1994.
HALLIWELL, B; GUTTERIDGE, J. M. C. Free radicals in biology and medicine. 4.ed.

Oxford, UK: Clarendon Press, 2007.
HAMILTON, E. J.; BERG, H. M.; EASTON, C. J.; BAKKER, A. J. The effect of taurine
depletion on the contractile properties and fatigue in fast-twitch skeletal muscle of the
mouse. Amino acids, n.31, p. 273 278, 2006.
HANSEN, S. H.; ANDERSEN, M. L.; BIRKEDAL, H.; CORNETT, C.; WIBRAND, F. The
important role of taurine in oxidative metabolism. In OJA, S. S.; SARASAARI, P.
Advances in Experimental Medicine and Biology: Taurine 6, United States: Springer
vol. 583, chapter 48, 2006.
HOLLANDER, J.; BEJMA, J.; OOKAWARA; T. OHNO, H.; JI, L.L. Superoxide dismutase
gene expression in skeletal muscle: fiber-specific effect of age. Mechanism of Ageing,
n.116, p. 33-45, 2000.
HUXTABLE, R. J. Physiological actions of taurine. Physiology Review, v. 72, p. 101

163, 1992.
65
IZUMI, K.; BUTTERWORTH, R. F.; BARBEAU, A. Effect of taurine on calcium binding to

microsomes isolated from rat cerebral cortex. Life Science, n. 20, p. 94350, 1977.
JACKSON, M. J. Reactive oxygen species and redox-regulation of skeletal muscle

adaptations to exercise. Philosophical Transactions of the Royal Society B:
Biological Sciences, n. 360, p. 22852291, 2005.
JAIN, N.; NASEEMA, I.; AHMADB, J. Evaluation of DNA damage and metabolic
syndrome parameters in diabetic rabbits supplemented with antioxidants. Fundamental
& Clinical Pharmacology, n. 23, p. 197205, 2009.
JI, L. L.; LEICHTWEIS, S. Exercise and oxidative stress sources of free radicals and
their impacto n antioxidant systems. Age, v. 20, p. 91-106, 1997.
KAURANEN, K.; SIIRA, P.; VANHARANTA, H. Delayed-onset muscle soreness and

motor performance of the upper extremity. . European Journal of Applied Physiology,
n. 84, p. 302-309, 2001.
KIM, C.; CHA, Y. Production of Reactive Oxygen and Nitrogen Species in phagocytes is
regulated by Taurine Chloramine. In AZUMA, J. et al. Advances in Experimental
Medicine and Biology: Taurine 7. United States: Springer , vol. 643, chapter 48, 2008.
KIM, S. M.; KIM, H. K.; YANG, W. B.; KIM, B. K. Protective effect of taurine on
indomethacin-induced gastric mucosal injury. In: HUXTABLE, R. J.; AZUMA, J.;
KURIYAMA, K.; KAKAGAWA, M.; BABA, A. Taurine. Plenum Press, New York, p. 147
155; 1996.
KONG, Q.; LILLEHEI, K. O. Antioxidant inhibitors for cncer therapy. Medical

Hypotheses, v. 51, p.405 409, 1998.
KNIG, D.; BERG, A. Exercise and oxidative stress: is there a need for additional
antioxidants. sterreichisches Journal Fr Sportmedizin, n.3, p. 6-15, 2002.
KONING, D.; WAGNER, K. H.; ELMADFA, I.; BERG, A. Exercise and oxidative stress
significance of antioxidants with reference to inflammatory muscular, and systemice
stress. Exercise Immunololy Review, n.7, p.108-13, 2001.
LEE, J.; CLARKSON, P. M. Plasma creatine kinase activity and glutathione after
eccentric exercise. Medicine Science of Sports Exercise, n.35, p.930-936, 2003.
LEE, J.; GOLDFARB, A. H.; RESCINO, M. H.; HEGDE, S.; PATRICK, I.; APPERSON,
K. Eccentric exercise effect on blood oxidative stress markers and delayed onset of
muscle soreness. Medicine Science of Sports Exercise, n.34, p.443-448, 2002.
66
LEVINE, R.L.; GARLAND, D.; OLIVER, C.N.; AMICI A.; CLIMENT, I., LENZ, A.G.; AHN,
B.W; STADTMAN, E.R. Determination of carbonyl content in oxidatively modified
proteins. Methods Enzymol, v. 186, p. 464-478; 1990.
LI, J. L.; WANG, X. N.; FRASER; S. F.; CAREY, M. F.; WRIGLEY, T. V.; MCKENNA, M.
J. Effects of fatigue and training on sarcoplasmic reticulum Ca2+ regulation in human
skeletal muscle. Journal of Applied Physiology, n.92, p.912-922, 2002.
LIU, Y.; QUINN, M. R. Chemokine production by rat alveolar macrophages is inhibited

by taurine chloramine. Immunology Letters, n.80, p. 27 32, 2002.
LOURENO, R.; CAMILO, M. E. Taurine: a conditionally essencial amino acid in

humans? An overview in health and disease. Nutricion Hospitalaria, n. 17, p. 262-270,
2002.
LOWRY, O. H.; ROSEBOUGH, N. G.; FARR, A. L.; RANDALL, R. J. Protein

measurement with the folin phenol reagent. The Journal of Biological Chemistry, v.
193, p. 265-275; 1951.
MACINTYRE, D. L.; REID, W. D.; LYSTER, D. M.; McKENZIE, D. C. Different effects of

strenuous eccentric exercise on the accumulation of neutrophilis in muscle in women
and men. European Journal of Applied Physiology, n. 81, p. 47-53, 2000.
MACINTYRE, D. L.; SORICHTER, S.; MAIR, J.; BERG, A.; McKENZIE, D. C. Markers of
inflammation and myofibrillar proteins following eccentric exercise in humans. European
Journal of Applied Physiology, n. 84, p. 180-186, 2001.
MASTALOUDIS, A.; LEONARD, S. W.; TRABER, M. G. Oxidative stress in athletes

during extreme endurance exercise. Free radical biology & Medicine, n. 31, p. 911-
922, 2001.
MATSUO, M.; KANEKO, T. The chemistry os reactive oxygen species and related free
radicals. In: Radk Z. Free radicals in exercise and aging. Champaign: Human
Kinetics, p. 73-115, 2000.
MCBRIDE, J. M.; KRAEMER, W. J.; TRIPLETT, T. M.; SEBASTIANELLI, W. Effect of

resistance exercise on free radical production. Medicine Science of Sports Exercise,
n.30, p.67-72, 1998.
MEYDANI, S. N. M.; MEYDANI, J. B.; BLUMBERG, L. S.; LEKA, G.; SIBER,

R.;LOSZEWSKI, C. ;THOMPSON, M. C.; PEDROSA, R. D; STOLLAR B.D. Vitamin E
supplementation and in vivo immune response in healthy elderly subjects: s
randomized controlled trial. The Journal of American Medical Association, n. 277, p.
1380-1386, 1997.
MILES, M. P.; CLARKSON, P. M. Exercise-induced muscle pain, soreness, and

cramps. Journal of Sports Medicine and Physical Fitness, n.34, p. 203-216, 1994.
67
MIYAZAKI, T.; MATSUZAKI, Y.; IKEGAMI, T.; MIYAKAWA, S.; DOY, M.; TANAKA, N.;
BOUSCAREL, B. Optimal and effective oral dose of taurine to prolong exercise in rat.
Amino Acids, n. 27, p. 291-298, 2004.
MOOREN, F.; VLKER, K. Molecular and Cellular Exercise Physiology. Human

Kinetcs, p. 179-197, 2004.
MURZAEVA, S. V.; BELOSLUDTSEVA, N. V.; GAVROVSKAYA, L.; MIRONOVA, G. D.

The effect of taurine on the ion transport system in mitochondria. Biophycs, n. 6, p.
515-518, 2008.
NELSON, D. L.; COX, M. M. Lehninger: Principles of Biochemistry. 5. ed, 2007.
NONAKA, H.; TSUJINO, T.; WATARI, Y.; EMOTO, N.; YOKOYAMA, M. Taurine
prevents the decrease in expression and secretion of Extracellular Superxide
Dismutase induced by Homocysteine: Ameliioration of Homocysteine-Induced
Endoplasmatic Reticulum Stress by Taurine. Circulation, n. 104, p. 1165 1170. 2001.
NOSAKA, K. P; CLARKSON, M. Effect of eccentric exercise on plasma enzyme

activities previously elevated by eccentric exercise. European Journal of Applied
Physiololy, n.69, p.492-497, 1994.
OBROSOVA, I. G.; STEVENS, M. J. Effect of dietary taurine supplementation on GSH

and NAD(P)-redox status, lipid peroxidation, and energy metabolism in diabetic
precataractous lens. Investigative Ophthalmology & Visual Science, n.40, p. 680
688, 1999.
PASANTES-MORALES, H.; CRUZ, C. Taurine and hypotaurine inhibit light-induced lipid

peroxidation and protect rod outer segment structure. Brain Research, n. 330, p. 154-
157, 1985
PASCHALIS, V.; GIAKAS, G.; BALTZOPOULOS, V.; JAMURTAS, A. Z.; THEOHARIS,

V.; KOTZAMANIDIS, C.; Koutedakis, Y. The effects of muscle damage following
eccentric exercise on gait biomechanics. Gait & Posture, n.19, p.1-7, 2006.
PETERSEN, E.W., K. OSTROWSKI, T. IBFELT, M. RICHELLE, E. OFFORD, J.

HALKJAER-KRISTENSEN, AND B.K. PEDERSEN. Effect of vitamin supplementation on
cytokine response and on muscle damage after strenuous exercise. American Journal
of Physiology: Cell Physiology, n. 280, p.1570-1575, 2001.
PINHO, R.A.; ANDRADES, M. E.; OLIVEIRA, M.R.; PIROLA, A.C. ; ZAGO, M.S. ;.
SILVEIRA, P.C.L; DAL- PIZZOL, F.; MOREIRA, J.C.F. Imbalance in SOD/CAT activities
in rats skeletal muscles submitted to treadmill training exercise. Cell Biology
International, n. 30, p. 848-853, 2006.
68
PINHO, R. A. Efeito da suplementao de n-acetilcistena e do exerccio fsicos

sobre os marcadores de estresse oxidativo pulmonar induzido pela exposio
aguda ao carvo mineral. Tese de Doutorado. Departamento de Bioqumica-UFRGS,
2005.
PINHO, R. A.; SILVEIRA, P. C. L.; SILVA, L. A.; STRECK, E. L.; DAL-PIZZOL, F.;
MOREIRA, J. C. F. N-Acetylcysteine and deferoxamine reduce pulmonary oxidative
stress and inflammation in rats after coal dust exposure. Environmental Research, n.
99, p.355360, 2005.
PODEROSO, J. J.; CARRERAS, M. C.; LISDERO, C. Nitric oxide inhibits electron

transfer and increases superoxide radical production in rat heart mitochondrial and
submitochondrial particles. Archives of Biochemestry and Biophisics, n. 328, p. 85
92, 1996.
POLIDORI, M. C.; MECOCCI, P.; CHERUBINI, A.; SENIN, U. Physical activity and
oxidative stress during aging. International Journal of Sports Medicine, n.21, p. 154
157, 2000.
POWERS, S. K.; JACKSON, M. J. Exercise-induced Oxidative Stress: Cellular

mechanisms and Impact on Muscle Force Production. Physiology Review, n. 88, p.
1243 1276, 2008.
POWERS, S. K.; JI, L. L.; LEEUWENBURG, C. Exercise training-induced alterations in

skeletal muscle antioxidant capacity: a brief review. Medicine Science of Sports
Exercise, n. 31, p. 987 997, 1999.
POWERS, S. K.; LENNON, S. L. Analysis of cellular responses to free radicals: focus on

exercise and skeletal muscle. Proceedings of the Nutrition Society, n. 58, p. 1025-
1033, 1999.
PRAET, S. F. E.; VAN LOON, L. J. C. Optimizing the therapeutic benefits of exercise in

Type 2 diabetes. Journal of Applied Physiology, n.103, p. 11131120, 2007.
PROSKE, U.; MORGAN, D. L. Muscle damage from eccentric exercise: mechanism,

mechanical signs, adaptation and clinical applications. Journal of Physiology n. 537, p.
333 345, 2001.
PRYOR, W. A.; GODBER, S. S. Noinvasive measures of oxidative stress status in

human. Free radical Biology and Medicine, v. 10, p.177-184, 1991.
QUINN, M. R. Taurine chloramine inhibits production of nitric oxide and prostoglandin

E2 in activated C6 glioma cells by suppressing inducible nitric oxide synthase and
cyclooxygenase- 2 expression. Molecular Brain Research, n.59, p. 189 195, 1998.
RDAK, Z.; KANEKO, T.; TAHARA, S.; NAKAMOTO, H.; OHNO, H.; SASVRI, M.;
NYAKAS, C; GOTO, S. The effect of exercise training on oxidative damage of lipids,
69
proteins, and dna in rat skeletal muscle: evidence for beneficial outcome. Free Radical
Biology & Medicine, n.27,p.69 74, 1999.
RAMIREZ-TORTOSA, M.; GRANADOSA, S.; RAMIREZ-TORTOSA, C. L.;

OCHOAC, J. J.; CAMACHOC, P.; GARCIA-VALDESA, L.; BATTINOD, M.; QUILESC
J. L. Oxidative stress status in liver mitochondria and lymphocyte DNA damage of
atherosclerotic rabbits supplemented with water soluble coenzyme Q10. BioFactors,
n.32, p. 263273, 2008.
REPINE, J. E.; BAST, B.; LANKHORST, I. Oxidative stress in chronic obstructive

pulmonary disease. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine,
n.156, p. 341-357, 1997.
RISTOW, M.; ZARSEA, K.; OBERBACH, A.; KLO TING, N.; BIRRINGER, M;
KIEHNTOPF, M; STUMVOLLC, M; KAHNE, R. BLU HERC, M. Antioxidants prevent
health-promoting effects of physical exercise in humans. Proceeding of the National
Academy of Science, n.21, v. 106, p. 8665 -8670, 2009.
ROIG-PREZ, S.; GUARDIOLA, F.; MORET, M.; FERRER, R. Lipid peroxidation

induced by DHA enrichment modifies paracellular permeability in Caco-2 cells:
protective role of taurine. Journal of Lipid Research, v. 45, p. 1418 1428, 2004.
SAXTON, J. M.; DONNELLY, A. E.; ROPER, H. P. Indices of free-radical-mediated

damage followings maximum voluntary eccentric and concentric muscular work.
European Journal of Applied Physiology, n.68, p.189-193, 1994.
SHAFAT, A., P.; BUTTER, R. L.; JENSEN, A. E.; DONNELLY, A. Effects of dietary
supplementation with vitamins C and E on muscle function during and after eccentric
contractions in human. Euroupean Journal of Applied Physiology n. 93, p. 196-202,
2004.
SIES, H.; CADENAS, E. Antioxidant activity of 5-hydroxytryptophan, 5-hydroxyindole,

and DOPA against microsomal lipid peroxidation and its dependence on vitamin E.Free
Radical Research Community, n. 6, p.11-7, 1989.
SILVA, L. A. Efeitos da suplementao de antioxidantes sobre marcadores de

estresse oxidativo e resposta inflamatria aguda aps a leso muscular induzida
pelo exerccio excntrico. Dissertao de Mestrado. Laboratrio de Fisiologia e
Bioqumica do Exerccio (LAFIBE) UNESC, 2006.
SILVA, L. A.; PINHO, C. A.; ROCHA, L. G. C.; TUON, T. SILVEIRA, P. C. L.; PINHO, R.
A. Effect of different models of physical exercise on oxidative stress markers in mouse
liver. Applied Physiology, Nutrition and Metabolism, n.34, p. 6065, 2009.
SILVA, L. A.; SILVEIRA, P. C. L.; PINHO, C. A.; TUON, T.; DAL-PIZZOL, F.; PINHO, R.
A. N-Acetylcysteine Supplementation and Oxidative Damage and Inflammatory
70
Response After Eccentric Exercise. International Journal of Sport Nutrition and

Exercise Metabolism, n. 18, p. 379-388, 2008.
SILVEIRA, L. S.; HIRABARA, S. M.; LAMBERTUCCI, R. H.; LEANDRO, C. V.;

FIAMONCINI, J.; PINHEIRO, C. H. J.; DANGELO, A. C. A.; BASSIT, R. A.; CURI, R.
Regulao metablica e produo de espcies reativas de oxignio durante a contrao
muscular: efeito do glicognio na manuteno do estado redox intracelular. Revista
Brasileira de Medicina do Esporte, v. 14, n. 1, p. 57 63, 2008 .
SMITH, L. L. Acute inflammation: the underlying mechanism in delayed onset muscle

soreness? Medicine & Science in Sports & Exercise, n. 23, p. 542-551, 1991.
SORICHTER, S.; MARTIN, M.; JULIUS, P.; SCHWIRTZ, A.; HUONKER, M.;
LUTTMANN, W.; WALTERSPACHER, S.; BERG, A. Effects of unaccustomed and
accustomed exercise on the imune response in runners. Official Journal of the
American College of Sports Medicine, n. 10; p. 1739-1745, 2006.
STUPKA, N.; LOWTHER, S. K.; CHORNEYKO, J. M.; BOURGEOIS, C.; HOGBEN, C.;
TARNOPOLSKY, M. A. Gender differences in muscle inflammation after eccentric
exercise. Jounal of Applied Physiology, n.89, p. 2325 - 2332, 2000.
SUREDA, A.; TAULER, P.; AGUIL, A.; CASES, N.; LLOMPART, I.; TUR, J.; PONS,
A. Influence of an Antioxidant Vitamin-Enriched Drink on Pre- and Post-Exercise
Lymphocyte Antioxidant System. Annals of Nutrition & Metabolism, n. 52, p. 233240,
2008.
TANG, X. C.; RAO, M. R.; HU, G.; WANG, H.. Alterations of amino acid levels from
striatum, hippocampus, and cerebral ischemia in gerbil. Acta Pharmacologica Sinica,
n.21, p.819-823. 2000.
TERBLANCHE, S. E. The effects of exhaustive exercise on the activity levels of catalase

in various tissues of male and female rats. Cellular Biology International, n.23, p. 749-
753, 2000.
THOMAS, J. R; NELSON, J. K. Mtodos de Pesquisa em Atividade Fsica. 3. ed.,

So Paulo: ArtMed, 2002.
THOMAS, M. J. The Role of Free Radicals end Antioxidants. Nutrition, n.16, p. 716
718, 2000.
TREVOR, C. C; SANDY, S. H. Effects of a 7-day eccentric training period on muscle

damage and inflammation. Medicine Science Sports of Exercise, n. 33, p. 1732-1738,
2001.
TRICOLI, V. Mecanismos envolvidos na etiologia da dor muscular tardia. Revista

Brasileira de Cincia e Movimento, n.2, p. 39-44, 2001.
71
VALKO, M.; LEIBFRITZ, D.; MONCOL, J.; CRONIN, M. T. D.; MAZUR, M.; TELSER, J.
Free radicals and antioxidants in normal physiological functions and disease. The
International Journal of Biochemistry & Cell Biology, n. 39, p. 44 48, 2007.
VANCINI, R. L.; LIRA, C. A. B.; ABOULAFIA, J.; NOUAILHETAS, V. L. A. Radical livre,

estresse oxidativo e exerccio. Revista do Centro de Estudos de Fisiologia do
Exerccio, Universidade Federal de So Paulo, p. 1 -10, 2005.
WARREN, G. L.; WILLIAMS, J. H.; WARD, C. W.; MATOBA, H.; INGALLS, C. P.;
HERMANN, K. M.; ARMSTRONG, R. B. Decreased contraction economy in mouse EDL
muscle injured by eccentric contractions. Journal of Applied Physiology, n.81, p. 2555
- 2564, 1996.
WELCH, K. D.; DAVIS, T. Z.; VAN EDEN, M. E.; AUST, S. D. Deleterius iron-mediated
oxidation of biomolecules. Free Radical Biology and Medicine, v. 32, p. 577-583,
2002.
WILLIAMS, M. Dietary supplements and sports performance: Amino acids. Journal of

International Society of Sports Nutrition, n. 2, p. 63-67, 2005.
YOKOGOSHI, H.; MOCHIZUKI,H.; NANAMI, K.; HIDA Y.; MIYACHI, F.; ODA, H. Dietary
Taurine Enhances Cholesterol Degradation and Reduces Serum and Liver Cholesterol
Concentrations in Rats Fed a High-Cholesterol Diet. The Journal of Nutrition, n. 129,
p. 1705 1712, 1999.
YU, J.; KIM, A. K. Effect of Taurine on Antioxidant Enzyme System in B16F10

Melanoma Cells In AZUMA, J. et al. Advances in Experimental Medicine and
Biology: Taurine 7. United States: Springer , vol. 643, chapter 48, 2008.
ZAINUDDIN, Z.; SACCO, P.; NEWTON, M.; NOSAKA, K. Light concentric exercise has
a temporally analgesic effect on delayed-onset muscle soreness, but no effect on
recovery from eccentric exercise. Applied Physiology, Nutrition and Metabolism, n.
31, p. 126-134, 2006.
ZEYBEK, A.; SAGLAM, B.; CIKLER, E.; CETINEL, S.; ERCAN, F.; SENER, G.
Protective effects of taurine on protamine sulfate induced bladder damage. World
Journal of Urology, n. 24, p. 438-444, 2006.
ZHANG, M. Role of taurine supplementation to prevent exercise-induced oxidative

stress in healthy young men. Amino Acids, n.26, p. 203-207, 2004.
ZOPPI, C. C.; HOHL, R.; SILVA, F. C.; LAZARIM, F. L.; ANTUNES NETO, J. M. F.;
STANCANNELI, M.; MACEDO, D. V.. Vitamin C and E supplementation effects in
Professional soccer players under regular training. Journal of the International of
Society of Sports Nutrition, n.3, p.37-44, 2006.
72
ZUO, L.; CHRISTOFI, F. L.; WRIGHT, V. P.; BAO, S.; CLANTON, T. L. Lipoxygenase-
dependent superoxide release in skeletal muscle. Journal Applied of Physiology,
n.97, p.661- 668, 2004.
73
ANEXOS
74
ANEXO 1
Documento de aprovao do Comit de tica e Pesquisa da Universidade do

Extremo Sul de Santa Catarina (UNESC) para a realizao da pesquisa.
75
ANEXO 2
Carta do envio do artigo Taurine supplementation decreases superoxide radical

production and consequently oxidative damage, but does not increase antioxidant
enzime activity in skeletal muscle of exercise rats ao European Journal of
Pharmacology.
Universidade do Extremo Sul Catarinense - UNESC

Laboratrio de Fisiologia e Bioqumica do Exerccio/Bloco da Sade
Av. Universitria, 1105 Bairro Universitrio
88806-000 Cricima Santa Catarina - Brazil
Editorial Office
European Journal of Pharmacology
Dear Editor
We would like to submit the manuscript entitled Taurine supplementation decreases
superoxide radical production and, consequently oxidative damage, but does not
increase antioxidant enzyme activity, in skeletal muscle of exercised rats for your
appreciation (Original Contribution). I hereby confirm that all authors have seen and
approved the manuscript. I also confirm that the manuscript has not previously been
published in journal form and it is not being considered for publication elsewhere.
Yours Sincerely,
Luciano Acordi da Silva

76
ANEXO 3
Confirmao do recebimento do artigo Taurine supplementation decreases

superoxide radical production and consequently oxidative damage, but does not
increase antioxidant enzime activity in skeletal muscle of exercise rats pelo
European Journal of Pharmacology.
Elsevier Editorial System(tm) for European Journal of Pharmacology

Manuscript Draft
Manuscript Number:
Title: Taurine supplementation decreases superoxide radical production and consequently

oxidative damage, but does not increase antioxidant enzyme activity in skeletal muscle of
exercised rats.
Article Type: Research Paper
Section/Category: Immunopharmacology and inflammation
Keywords: taurine supplementation; oxidative damage; antioxidant enzyme; eccentric exercise
Corresponding Author: Professor Luciano Silva, Msc
Corresponding Author's Institution: University of Southern Santa Catarina - UNESC

First Author: Luciano Silva, Msc
Order of Authors: Luciano Silva, Msc; Paulo Silveira ; Merieli M Merieli M Ronsani ; Dbora
Scheffer ; Lilian Vieira; Magnus Benetti ; Cludio Souza ; Ricardo Pinho
Abstract: This study was to investigate the effects of taurine supplementation on biomarkers of
oxidative stress after eccentric exercise. Twenty four male rats were divided into the following groups
(n=6): control; eccentric exercise (EE); eccentric exercise plus taurine (EE + Taurine); eccentric
exercise plus saline (EE + Saline). Taurine was administered with solution of 1mL water 300mg/Kg
77
body weight (BW)/day by oral lavage, for two weeks before and 2, 12, 24 and 48 hours after the
exercise session. The animals were submitted to one downhill run session with duration of90min and
velocity constant of 1.0Km.h-1. Forty-eight hours after the exercise session, the animals were killed
and the quadriceps muscles were surgically removed. Production of superoxide anion,
lipoperoxidation, carbonylation, total thiol content and antioxidant enzyme were analyze. Results
show taurine supplementation decrease superoxide radical production, lipoperoxidation,
carbonylation, but not increase superoxide dismutase and catalase activity. In conclusion, the
present study demonstrates that taurine supplementation decreased damage oxidative but did not
affect antioxidant enzyme activity after eccentric exercise.

EROS e Exercicio Fisico

Hochgeladen von

Dokumentinformationen

Copyright

Verfügbare Formate

Dieses Dokument teilen

Dokument teilen oder einbetten

Freigabeoptionen

Stufen Sie dieses Dokument als nützlich ein?

Sind diese Inhalte unangemessen?

Copyright:

Verfügbare Formate

EROS e Exercicio Fisico

Hochgeladen von

Copyright:

Verfügbare Formate

1

UNIVERSIDADE DO ESTADO DE SANTA CATARINA UDESC

LILIAN CARDOSO VIEIRA

EFEITOS DA SUPLEMENTAO DE TAURINA SOBRE OS

LILIAN CARDOSO VIEIRA

EFEITOS DA SUPLEMENTAO DE TAURINA SOBRE OS

Dissertao de Mestrado apresentada

Orientador: Prof Dr. Magnus Benetti

LILIAN CARDOSO VIEIRA

EFEITOS DA SUPLEMENTAO DE TAURINA SOBRE OS

Dissertao de Mestrado aprovada como requisito para obteno do ttulo de Mestre no

Florianpolis - SC, 30/10/2009.

Dedico minha me Gerci, que sempre me

Chegou a hora... Dizer obrigada um gesto complexo, muitas vezes temos

(Laboratrio de Fisiologia e Bioqumica do Exerccio) da UNESC, Cricima; um

Tua caminhada ainda no terminou....

Se amanh sentires saudades,

certo que irs encontrar situaes

VIEIRA, Lilian C. Efeitos da suplementao de Taurina sobre os parmetros de

O objetivo deste estudo foi investigar os efeitos da suplementao de taurina sobre

Palavras-chave: Taurina. Suplementao. Estresse oxidativo. Exerccio excntrico.

VIEIRA, Lilian C. Taurine Supplementation Effects on Muscle Oxidative Stress

This study was to investigate the effects of taurine supplementation on biomarkers of

Key-words: Taurine. Supplementation. Oxidative Stress. Eccentric Exercise. Rats.

Figura 1: Desenho do estudo..........................................................................................43

Tabela 1: Principais antioxidantes enzimticos...............................................................27

LISTA DE ABREVIATURAS, SIGLAS E SMBOLOS

K Ca2+ Potssio dependente de Clcio

1 INTRODUO ............................................................................................... ....17

2.7 LESES NO EXERCCIO EXCNTRICO ....................................................... 38

4.3.1 Superxido dismutase (SOD) ....................................................................... 51

A relao entre o estresse oxidativo e o exerccio fsico tem sido amplamente

defesas antioxidantes andrgenas no conseguem neutralizar (ARMSTRONG et al.,

deletrios nas miofibrilas, aps sesses de exerccios fsicos em ratos e obteve

1.3.1 Objetivo Geral

Avaliar os efeitos da suplementao de taurina sobre os parmetros de estresse

1.3.2 Objetivos Especficos

Verificar as respostas da suplementao de taurina sobre a produo de

1.4.1 Hiptese geral

A suplementao de taurina causar uma diminuio nos parmetros de

1.4.2 Hipteses Especficas

A produo de superxido no msculo ser atenuada com a suplementao de

1.5 DELIMITAES DO ESTUDO

A amostra foi composta por ratos Wistar machos, do biotrio da Universidade do

1.6 LIMITAES DO ESTUDO

Como limitao do estudo, reporta-se falta das dosagens do contedo de

poderiam complementar a compreenso dos mecanismos pelos quais a Taurina

2.1 RADICAIS LIVRES

2.2 PRINCIPAIS ESPCIES REATIVAS DE OXIGNIO

As espcies reativas (ER) so definidas como molculas orgnicas altamente

Halliwell e Gutterigde (2007), o oxignio respirado metabolizado sendo que

De 2 a 5% do oxignio respirado so reduzidos univalentemente em ERO

O superxido recebe mais um eltron e dois ons hidrognio e rapidamente

(THOMAS, 2000). Nos neutrfilos, a produo de O2 - catalizada pela nicotinamida

O H2O2 ao receber mais um eltron ou um on de hidrognio forma ento o

2.3 SISTEMA DE DEFESA ANTIOXIDANTE

2.3.1 Antioxidantes enzimticos

A ao cataltica das enzimas antioxidantes a primeira ao de defesa contra

em condies fisiolgicas e sob exerccio fsico leve (BANERJEE et al., 2003). As

Tabela 1 Principais antioxidantes enzimticos (Adaptado de: POWERS e JACKSON,

Antioxidantes Localizao Funo

Catalase (CAT) Citosol, principalmente dos Scavenger de H2O2

Glutationa Citosol, mitocndria, Scavenger de H2O2

2.3.1.1 Superxido Dismutase (SOD)