1.1.

METODO MICRO-KJELDAHL

A. PROPSITO ESPECFICO DE LA PRCTICA.

El Alumno en formacin a travs del conocimiento adquirido en la teora del curso,
sea capaz de realizar la determinacin de protenas en muestras de alimentos, por
medio de un mtodo para determinar nitrgeno orgnico, convirtindolos con un
factor en las protenas presentes en el alimento, analizando las bondades del
mtodo y su aplicacin en la prctica.

B. CRITERIOS DE DESEMPEO:
El Alumno ser competente cuando sepa realizar e interpretar los resultados del
anlisis de protenas y explique sus resultados.

C. RESULTADOS ESPERADOS:
El equipo de trabajo determinara el mtodo, que es aplicable a alimentos slidos y
lquidos. Analizarn y expresarn los resultados.

D. FUNDAMENTO:
El procedimiento de Micro-Kjeldahl se determina mediante la digestin, destilacin
y valoracin con cido clorhdrico de una pequea muestra para determinar su
material nitrogenado total, dando un viraje de color caf rojizo a verde esmeralda,
y la conversin del % de nitrgeno en protenas.

E. MATERIAL Y EQUIPO:
Matraz Kjeldahl de 30 mL
Bureta de 25 mL
Vaso de precipitados de 100 mL
Matraz Erlenmeyer de 250 mL
Balanza analtica
Aparto de digestin Micro-Kjeldahl
Aparato de destilacin Kjeldahl
Cuerpos de ebullicin

F. REACTIVOS:
HCl 0.01N
NaOH 60%
Solucin de cido brico con indicador. Pesar 2.5g de cido brico,
colocarlo en un matraz aforado de 500 mL, adicionar agua destilada hasta
disolver. Agregar 17.5 mL de indicador A (25mg de fenolftalena aforados a
25 mL de etanol), y 5 mL de indicador B (8mg de verde de bromocresol y 15
mg de rojo de metilo aforados a 25 mL de etanol). Se ajusta el color a un
tono caf rojizo con cido o base segn se requiera y se afora a 500 mL.
 Mezcla digestiva. Mezclar 0.75g de CuSO4 pentahidratado, 75 mL de cido
sulfrico concentrado y 25 mL de cido fosfrico, ms 10 mL de agua.

G. PROCEDIMIENTO:

Digestin: Pesar de 20 a 40 mg de muestra, colocar la muestra en un

matraz Micro-Kjeldahl de 30 mL, aadir 3mg de xido de mercurio, 2mL de
mezcla digestiva y cuerpos de ebullicin.
Colocar el aparato en digestin y calentar durante una hora y media o bien
hasta observar que el lquido del matraz se encuentre transparente. Enfriar
el matraz y adicionar 10 mL de agua destilada; vaciar el contenido al matraz
de destilacin enjuagando con 1 a 2 mL de agua destilada varias veces (no
ms de 25 mL)
Destilacin: Aadir por la copa de adicin del aparato de destilacin 5 mL
de NaOH al 60% en forma lenta pero continua para lograr desprendimiento
de amoniaco el cual se recibe en un vaso de precipitados de 100 mL que
contenga 50 mL de solucin de cido brico con indicadores, destilar un
volumen de 80 a 100 mL aproximadamente. El cido brico vira de color
rojizo a verde esmeralda. Si esto no ocurre (cuando el volumen del
destilado llegue a 70 mL) agregar otros 5 mL de NaOH al 60%.
Valoracin: Valorar el lquido destilado con HCl 0.001N. Hacer un blanco
con los reactivos el cual se realiza con sacarosa pura.

H. CLCULOS:

( AB ) ( meq. N ) ( Conc . de HCl )

%N= Peso de la muestra
(100)

donde:

A= mL de HCl gastados por la muestra

B= mL de HCl gastados por el blanco
Meq de N= 0.014
El contenido de nitrgeno finalmente calculado se multiplica por un factor
caracterstico de cada alimento y se obtiene entonces el contenido de protenas
totales.

Protena= (%N) (Factor)

I. SISTEMA DE EVALUACIN
Los conocimientos y habilidades sern evaluados a travs del formato de prctica
como se indicar, adems se le cuestionar sobre los contenidos. El formato se
revisa y acatara las observaciones para mejorar la calidad de la misma. Las
actitudes se evaluarn a travs de la responsabilidad del alumno ante su prctica
y su entorno.

J. MTODO DE ASIGNACIN DE CALIFICACIONES.

Asistir a laboratorio y cumplir con las actividades es obligatorio para tener
calificacin en cada prctica.
Lista de cotejo 5%
Entrega y calidad del formato 5%
Nota: la calificacin y su ponderacin ser de acuerdo a lo estipulado en el plan de
estudios. 5 %