Mtodos de esterilizacin

Microbiologa II
Dra. Rosalina Matehuala

- Gustavo Abel Solis Segura

- Patricia Obregn Reyes
- Thania Cervantes Aguilar
- Ana Luisa Gonzlez Serrano
- Eduardo Lpez Salazar
Introduccin
Soluciones esterilizantes
La esterilizacin es un proceso a travs del que se logra la destruccin
total de los microorganismos viables presentes en un determinado
material.
Este procedimiento es de gran utilidad dentro del campo
farmacutico, ya que existen muchos procesos que requieren la
utilizacin de materiales estriles. Entre stos podemos destacar:

La esterilizacin de equipos quirrgicos y otros materiales de uso

mdico con el propsito de reducir el riesgo de infecciones en
pacientes.

El acondicionamiento del material (pipetas, tubos, placas de Petri,

pinzas, etc.) que va a ser utilizado en los laboratorios de microbiologa.

La preparacin de medios de cultivo que sern empleados con

diferentes propsitos (cultivo de microorganismos, control de ambiente,
equipos o personal, anlisis microbiolgico de medicamentos,
cosmticos, alimentos, etc.)

La des contaminacin de material utilizado.

Para desinfectar una superficie, el nmero de microorganismos dainos

deben reducirse hasta niveles en los que uno no se enferme. Una
solucin esterilizante es un producto de limpieza que reducir el
nmero de bacterias y otros microorganismos nocivos sobre las
superficies del hogar y otros objetos. En contraste, desinfectar una
superficie es matar el 99,9 por ciento de todos los microorganismos.

Agentes Esterilizantes
Alcoholes

Iodo

Agentes catinicos, aninicos y

Antispticos
anfteros

Organo Mercuriales

Colorantes

Cloro y Compuestos clorados

Aldehdos

Desinfectantes y/o Esterilizantes Oxido de Etileno

Compuestos Fenlicos

cidos y Alcalis

Objetivos
- Comprender los procesos de Esterilizacin, Desinfeccin y Antispticos
por medio de agentes qumicos.
- Evaluar la eficacia del kit EBA en procesos de desinfeccin en el
laboratorio.
- Realizar siembras provenientes de la superficie cutnea del cuerpo en
cajas Petri y en cada uno poner un integrante del kit EBA para ver los
resultados al inhibir el crecimiento bacteriano.
- Comparar los resultados de los diferentes agentes qumicos y saber
cul de los integrantes del kit EBA tiene un mejor efecto al inhibir la
 poblacin bacteriana.

Materiales y mtodos
9 hisopos estriles.
3 cajas de Petri con agar sangre.
Kit de limpieza EBA

Preparar Con un Sembrar Con otro Para Una vez Incubar por
placas con hisopo cada hisopo ombligo desinfectado 48hr. a 37C.
agar sangre. esteril tomar muestra en desinfectar desinfectar tomar una Pasado el
muestra de la mitad de la zona de con benzal, muestra con tiempo
ombligo, la caja petri. donde espalda con otro hisopo evaluar el

Resultados
De acuerdo a las observaciones de crecimientos en las cajas Petri
con el Kit EBA obtuvimos los siguientes resultados que muestran en la
siguiente tabla.

Kit Muestra Crecimiento Crecimiento

Extran Cuello No mostr ningn
crecimiento de
hongos o bateras
en la superficie del
agar
Sin extran Cuello Mostr algunas
formaciones de
bateras de color
amarilla y
blancas, con
textura mocoidal,
viscosidad con
forma circular
poco crecimiento
en la superficie del
agar.
Benzal Ombligo Mostr un poco
de crecimiento
bacteriano de
forma circular de
color blancos
algunos amarillos,
eran distribuidos
ampliamente en
la superficie.
Sin benzal Ombligo La formacin de
un Hongo
predomino en el
agar de tamao
grande de color
blanco forma
amorfa y
 algodonosa con
relieve.
alcohol odo No haba
crecimiento en la
superficie del
agar.
Sin alcohol odo El crecimiento de
bateras fue el
mismo que en el
caso de extran de
color amarillas y
algunas blancas .

Taba 1. Comparacin de crecimiento con y sin Kit EBA

El crecimiento en el extran se debi a una posible contaminacin y mal

manejo de la muestra ya que no deba crecer nada.
el kit demostr ser ampliamente eficaz en la limpieza de superficies
para esterilizar las zonas de trabajo como bactericida y
bacteriosttico.

Discusiones
El uso del kit EBA (Extran, Benzal y Alcohol), es de uno de los principales
kits de limpieza para el laboratorio de microbiologa, ya que estos
presentan acciones desinfectantes como lo son de bactericida y
bacteriosttico. En esta prctica se analiz estas principales
caractersticas de estas tres soluciones.
El Extran se monstro como un bacteriosttico ya que aunque hubo
crecimiento, este no fue tan exponencial comparado con el control.
Esto se debe a que el Extran tiene efectos inhibidores en reacciones
enzimticas, por esta razn, el Extran afecta en la parte de
metabolismo de las bacterias impidiendo su crecimiento o su divisin
celular teniendo un efecto bacteriosttico. El Benzal, su accin se ha
atribuido a la inactivacin de las enzimas productoras de energa,
desnaturalizacin de las protenas celulares esenciales y la ruptura de
la membrana celular, por esta razn se le da una cataloga como un
bactericida, nuestros resultaron dieron como si fuera una
bacteriosttico ya que si creci una pequea cantidad de bacterias,
pero esto se puede deber a que el Benzal con el que se contaba en el
momento estaba diluido, y de esta manera no obtendra su mximo
efecto como un bacteriosttico. El alcohol se comport como un
bactericida ya que al comprar con el control se observ un
crecimiento nulo, esto se debe a que el alcohol desnaturaliza las
protenas de los microorganismos y podra tener cierta accin
bacteriosttica al inhibir la produccin de metabolitos esenciales para
la divisin celular rpida.

Conclusiones
Los procesos de esterilizacin o desinfeccin en el laboratorio, son
fundamentales para evitar la contaminacin de medios de cultivos,
placas, alimentos, etc.
La esterilizacin es el proceso mediante el cual se alcanza la muerte de
todas las formas de vida microbianas, incluyendo bacterias y sus
formas esporuladas altamente resistentes, hongos y sus esporos, y virus.
En cambio la Antisepsia es el proceso que por su baja toxicidad, se
utiliza para la destruccin de microorganismos presentes sobre la
superficie cutnea y en las mucosas.
En la Desinfeccin, existen diversos niveles, desde una esterilizacin
qumica a una mnima reduccin del nmero de microorganismos
contaminantes, se aplica nicamente a objetos inanimados.
En el experimento llevado a acabo se compar el nivel de eficiencia
de los agentes qumicos que conforman el kit EBA (Extran, Benzal,
Alcohol), el cual es muy usado en nuestra universidad para procesos
de esterilizacin, desinfeccin y antispticos en la realizacin de
experimentos a diario.
Se realiz una comparacin a partir de cada uno de los integrantes del
kit EBA. Para ver su efecto antisptico se obtuvieron muestras cutneas
de diferentes partes del cuerpo humano (Ombligo, espada, oreja) con
la ayuda de un hisopo estril y se realiz una siembra directa con el
hisopo a los medios de cultivo, los cuales a su vez contenan a los
integrantes del kit EBA. Los medios fueron llevados a la encubadora a
37 C, por 48 horas.
Las cajas Petri estaban divididas en dos, en cada parte se llev a cabo
la siembra directa con el hisopo, el cual haba tenido contacto previo
con una parte de cuerpo.
A una parte de cada caja se le agrego un integrante del kit EBA y a
la otra no, para poder ver el contraste de las bacterias que crecieron
en nuestros cultivos y saber cual agente qumico tena una mejor
eficiencia.
Los cultivos quedaron de la siguiente manera: a la caja con muestra
proveniente del ombligo se le agrego Extran, a la muestra de la
espalda se le agrego Benzal y a la de la oreja se le agrego Alcohol.
Al ver los resultados podemos ver que el alcohol presenta el mejor nivel
de antisepsia ya que inhibi de manera parcial el crecimiento
bacteriano y de microrganismos presentes en la superficie cutnea de
la oreja. Los cultivos con Extran y Benzal tambin inhibieron el
crecimiento bacteriano, pero en con menor eficacia en contraste con
el efecto que causo el alcohol en el medio.

Bibliografas
http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedra
Micro/10_Mtodos_de_esterilizacin.pdf

Martin MA, Wenzel RP. Esterilizacin, desinfeccin y eliminacin de

deshechos infecciosos. En: Mandell.

Bennett, Dolin, Mandell, Douglas y Bennett. Enfermedades Infecciosas.

Principios y prcticas. 4ta ed. Ed.Panamericana. 1995;2892-2900.

Hernndez L, Malagn G, Silva J. Antisepsia. En: Malagn,

Hernndez. Infecciones hospitalarias. Ed. Panamericana.
1995;185-227.