Catalasa[editar]

Los estafilococos y los micrococos se diferencian de los estreptococos y los enterococos

por esta prueba. Esta prueba detecta la presencia de enzimas-citocromo oxidasa. La prueba
se realiza agregando una gota de perxido de hidrgeno (3% vol) sobre la muestra en un
portaobjetos de vidrio. Es positiva si se observa un burbujeo intenso. Entre la causa ms
frecuente de falsos positivos se encuentra el realizarla en un medio que contenga sangre
(los eritrocitos pueden causar burbujeo) y la presencia de pseudocatalasa en algunas cepas
estafiloccicas.

Prueba de la coagulasa

La prueba de la coagulasa se usa para diferenciar el Staphylococcus aureus del

coagulase-negative staphylococci. S.aureus produce 2 formas de coagulasa
(por ejemplo, coagulasa ligada y coagulasa libre). La coagulasa ligada tambin
conocida como "factor de Clumping " se puede detectar mediante la realizacin
de una prueba de portaobjetos y la coagulasa libre con una prueba de
coagulasa de tubo.
Prueba de portaobjetos

Prueba del portaobjetos se hace conjuntamente con un control negativo para

descartar auto aglutinacin. Se ponen 2 gotas de solucin salina en un
portaobjetos rotulado con el nmero de muestra, Test (T) y control (C). Las 2
gotas son emulsionadas con el organismo de prueba mediante el uso de un
cable de lazo, cable recto, o un aplicador de madera. Se pone una gota de
plasma (plasma de conejo con anticoagulante (EDTA)1 ) en la gota de solucin
salina inoculada correspondiente a la prueba y se mezcla bien con un aplicador
de madera. Agitar el portaobjeto con cuidado unos 10 segundos.

Si es positivo: Se podr observar aglutinacin macroscpica en el plasma en

los 10 segundos, mientras que no se observar aglutinacin en la gota de
solucin salina.
Si es negativo: No se observara aglutinacin.

NOTA: Si la prueba de la coagulasa de portaobjetos fuera negativa, debera

hacerse una prueba de tubo como confirmacin. El aglutinamiento en las dos
gotas es un indicativo de auto aglutinacin y por lo tanto debemos descartar la
prueba de tubo.
Prueba del tubo de ensayo
cogulos formados por la reaccin de la coagulasa en un tubo de ensayo

La prueba se utiliza plasma que ha sido inoculado con una colonia de

staphylococcal (por ejemplo, con un coco gram positivo catalasa positivo).
Luego el tubo se incuba a 37 grados Celsius en 1 horas. Si es negativo
entonces continuamos la incubacin por unas 18 horas.

Si sale positivo (por ejemplo, la colonia problema es S. aureus), el suero

coagular,2 dando como resultado un cogulo (a veces el cogulo esta tan
desarrollado que el lquido se solidifica completamente).
Si sale negativo, el plasma permanece lquido. Un resultado negativo podra
indicar que se podra tratar de S. epidermidis pero solo con unas pruebas ms
precisas se puede confirmar este hecho, como por ejemplo el API o mtodos de
BBL CRYSTAL.

Lista de staphylococci coagulasa positivo : Staphylococcus aureus subsp.

anaerobius, Staphylococcus aureus subsp. aureus, Staphylococcus delphini,
Staphylococcus hyicus, Staphylococcus intermedius, Staphylococcus lutrae,
Staphylococcus schleiferi subsp. coagulans.

Lista de' 'staphylococci coagulasa negativo de relevancia clnica:

S.saprophyticus, S.cohnii subsp. cohnii, S.cohnii subsp. urealyticum, S.captitus
subsp. captitus, S.warneri, S.hominis, S.epidermidis, S.caprae.
Sensibilidad novobiocina
La sensibilidad al antibitico novobiocina se utiliza para distinguir diferentes especies de
estafilococo. Se asla una pequea cantidad de colonia bacteriana del paciente y se la coloca
en platos medios de cultivo con el antibitico novobiocina. La presencia de cultivo despus
de una incubacin a 98.6 grados Fahrenheit (37 C) por 18 horas indica la presencia de las
especies saprofiticus de estafilococos.