Instituto Nacional

Nivel 4 Medio
Depto. Biologa

GUA INFORMACIN GENETICA

Descubriendo los cidos nucleicos.

Los cidos nucleicos fueron aislados por primera vez por el bioqumico suizo Miescher en
1869. Durante su investigacin de las funciones del ncleo, Miescher extrajo un material de una
fraccin nuclear cruda de leucocitos presentes en pus obtenido de vendajes quirrgicos. El
material extrado tena una Mr alta, era cido y contena cantidades apreciables de fsforo.
Miescher lo nombr nuclena. Ahora se sabe que es un complejo de un cido nucleico y una
protena (lo que actualmente se llama nucleoprotena).

De las experiencias de transplante de ncleo realizadas tanto en clulas animales como en

clulas vegetales, se ha demostrado que el ncleo es la estructura que contiene la informacin
gentica en las clulas eucariontes. Para responder a esto se ha planteado la siguiente
interrogante:
Qu molcula es la responsable de la transmisin hereditaria?

La evidencia experimental que permiti dilucidar la naturaleza qumica de la informacin

hereditaria fueron los experimentos de TRANSFORMACIN GENTICA, realizados en
bacterias por el bilogo ingls F. Griffith en 1928.
Griffith estudi los cultivos de neumococo (bacteria que causa la neumona en el hombre,
Streptococcus pneumoniae), encontrando una cepa que produca la enfermedad y otra que no la
causaba, por lo que presentaban morfologa diferente:
A. Una era la CEPA S: colonias de superficie lisa y brillante, presentan una envoltura o cpsula
de polisacridos, cepa que produce la enfermedad, por lo tanto presentan un carcter de
virulencia o patogenecidad.
B. Otra, la CEPA R: colonias de superficie rugosa y de color mate, no presentan cpsula por lo no
son patgenas, es decir no producen la enfermedad.

Departamento de Biologa Coordinacin Instituto nacional

 Instituto Nacional
Nivel 4 Medio
Depto. Biologa

Griffith al inyectar las cepas S y R a ratones de laboratorio observ que:

la cepa S posea cpsula y provocaba la muerte de los ratones

la cepa R careca de cpsula y era inofensiva para los ratones
la cepa R se originaba por mutaciones en la cepa virulenta S.
el material gentico es un portador activo de la informacin gentica, por lo tanto:

Si se calentaba la cepa S hasta destruirla y se inyectaba en los ratones estos no

desarrollaban la enfermedad, pero si se inyectaba la cepa S muerta y la inofensiva R
los ratones moran.
Griffith pudo comprobar que las nuevas bacterias S vivas presentaban propiedades
de la cepa R y de la cepa S por lo que demostr que la informacin hereditaria se
haba transmitido de una cepa a otra mientras haban estado juntas.
Como conclusin, Griffith plante dos hiptesis:
1.- La cepa S muerta por el calor fue reanimada o resucit!
2.- La cepa R viva fue modificada por algn factor transformador

ACTIVIDAD N 1.

1. Qu ventajas presenta el uso de bacterias para este tipo de experimento?

2. Qu ocurre con las bacterias cuando se exponen a altas temperturas?

3. Por qu al mezclar bacterias encapsuladas muertas con bacterias no encapsuladas vivas el

ratn muere?

4. A qu se llama factor de transformacin?

5. Por qu las bacterias hijas resultantes heredaban el fenotipo virulento?

6. Cul es la naturaleza qumica de lo que causa la transformacin?

En 1944 los bilogos americanos Avery. Mac Leod y Mac Carty separaron los distintos tipos de
molculas que se encuentran en las clulas S muertas y estudiaron su capacidad de

Departamento de Biologa Coordinacin Instituto nacional

 Instituto Nacional
Nivel 4 Medio
Depto. Biologa

transformacin por separado. Estas pruebas demostraron en primer lugar que los polisacridos no
transformaban a las clulas rugosas, por lo tanto la cubierta de polisacrido, aunque claramente
estaba implicada en la virulencia, corresponde solamente a la expresin fenotipica de dicha
virulencia. De acuerdo con todo esto indique:

ACTIVIDAD N 2.

De qu forma los investigadores antes mencionados demostraron que el PRINCIPIO

TRANSFORMANTE corresponde al ADN y no a otras sustancias orgnicas, observe la imagen y
explique

Los experimentos de Avery y sus

colaboradores eran definitivos, pero
muchos cientficos se resistieron a
aceptar como material gentico al ADN.
La prueba definitiva se obtuvo en 1952
por Alfred Hershey y Martha Chase,
usando el fago T2.

ACTIVIDAD N 3

1. Qu es un fago?

Departamento de Biologa Coordinacin Instituto nacional

 Instituto Nacional
Nivel 4 Medio
Depto. Biologa

2. Describa la experiencia realizada por estos investigadores.

3. Analice la investigacin.

4. Qu conclusiones pudieron obtener estos estudiosos?

COMPOSICIN MOLECULAR DE LOS ACIDOS NUCLEICOS.

Los cidos nucleicos son macromolculas, polmeros formados por la repeticin de

monmeros llamados nucletidos, unidos mediante enlaces fosfodister. Se forman, as, largas
cadenas o polinucletidos, lo que hace que algunas de estas molculas lleguen a alcanzar tamaos
gigantes (de millones de nucletidos de largo).
Actualmente se sabe que los organismos procariontes y eucariontes, contienen tanto ADN
como ARN. En contraste, los virus pueden contener ADN o ARN, pero NO ambos.
Existen dos tipos de cidos nucleicos: ADN (cido desoxirribonucleico) y ARN (cido
ribonucleico),
Los bloques de construccin son los Nucletidos. El ADN (cido desoxirribonucleico) es un
polmero de alto peso molecular formado por la combinacin de cuatro monmeros Cada nucletido
est conformado por molculas ms pequeas:
una base nitrogenada (purina o pirimidina),
un azcar (desoxirribosa) y (ribosa) y
un grupo fosfato
Los cuatro tipos de nucletidos difieren solamente en el tipo de base nitrogenada, la cual
puede ser una de las purinas (adenina o guanina) o una de las pirimidinas (citosina, uracilo y
timina).

Departamento de Biologa Coordinacin Instituto nacional

 Instituto Nacional
Nivel 4 Medio
Depto. Biologa

Esquema de un nucletido
Si analizamos el tipo de azcar:
El ARN contiene un azcar D-ribosa y el ADN contiene 2D-Desoxirribosa.
Ambos azucares tiene configuracin de anillo.

ACTIVIDAD N 4: Observa y luego responde:

Qu diferencias puedes establecer entre ambas
azcares?

Las bases nitrogenadas de los cidos nucleicos pueden ser:

Purinas o pricas: Poseen 2 anillos y son ADENINA (A) y GUANINA (G)
Pirimidinas o pirimdicas: Poseen un anillo y son CITOSINA (C) TIMINA (T) URACILO (U).

Departamento de Biologa Coordinacin Instituto nacional

 Instituto Nacional
Nivel 4 Medio
Depto. Biologa

ACTIVIDAD N 5.
1. Qu molculas forman un nucletido?

2. Qu tipos de enlaces qumicos estn presentes en el DNA?

3. Si una cadena de DNA est conformada por las siguientes secuencias de bases
nitrogenadas: ATCGAA, cul es la cadena complementaria?

Un avance en conocer como estaban organizados los nucletidos en el ADN fue realizado por:
Erwin Chargaff en 1950, quien rompi molculas de ADN y separo las bases. Realiza un
estudio de la composicin de bases del ADN expresadas como porcentaje del total para
diferentes especies.

PURINAS PIRIMIDINAS
Especie Adenina Guanina Citosina Timina
Hombre 30.4 19.6 19.9 30.1
Buey 29.0 20.2 21.2 28.7
Bacteria 24.7 26.0 25.7 23.6
Erizo de mar 32.8 17.7 17.3 32.1

Departamento de Biologa Coordinacin Instituto nacional

 Instituto Nacional
Nivel 4 Medio
Depto. Biologa

Observa la tabla puedes establecer alguna relacin entre las bases?

FACTORES QUE ESTABILIZAN EL ADN.

Cmo se unen los nucletidos entre s?

ESTRUCTURA DEL ADN

El modelo estructural presentado por Watson y Crick para la molcula del ADN es la siguiente:
1. Tiene 2 hebras de cadenas enrolladas en forma de doble hlice.
2. Las dos cadenas no son iguales, son complementarias, una base prica se aparea con una
base pirimidica (G-C y A-T).
3. La guanina y la citosina se unen mediante un puente triple de hidrogeno y la adenina y
timina con un puente doble de hidrogeno.
4. Las cadenas estn orientadas en forma contraria (antiparalelas), una va en direccin
azcar-fosfato 3---5 la otra va fosfato-azcar 5---3.
5. La molcula de ADN es bastante larga, pero su dimetro es pequeo (0,000002 cm.)

Para su estudio emplearon los rayos X y propusieron un modelo para la estructura del
ADN: este estara formado por dos cadenas de polinucletidos con tendencia a girar hacia la
derecha, formando una doble hlice alrededor de un eje central. Su estructura se asemeja a una
escala con los peldaos formados por los pares de bases nitrogenadas y los lados de la escala hecha
de fosfatos y de azcares. Es una molcula con una estructura tridimensional en alfa-hlice y cada
filamento con una orientacin antiparalela.

Departamento de Biologa Coordinacin Instituto nacional

 Instituto Nacional
Nivel 4 Medio
Depto. Biologa

ACTIVIDAD N 6:

1. Cual es el ancho entre las bases nitrogenadas?

2. Cual es la distancia entre cada vuelta de la hlice?

3. Cuantos pares de bases nitrogenadas hay en cada vuelta de la hlice?

Departamento de Biologa Coordinacin Instituto nacional

 Instituto Nacional
Nivel 4 Medio
Depto. Biologa

DIFERENCIAS BSICAS ENTRE ADN Y ADN

ADN ARN
Posee azcar desoxirribosa Posee azcar ribosa
Posee la base pirimidica Timina (T) Posee la base pirimidica Uracilo (U)
La molcula es doble (bicatenaria) La molcula es monocatenaria
La molcula es helicoidal (escalera de caracol La molcula es lineal

Departamento de Biologa Coordinacin Instituto nacional

 Instituto Nacional
Nivel 4 Medio
Depto. Biologa

REPLICACIN DEL ADN

Una vez que se comprob que el ADN era el material hereditario y se descifr su
estructura, lo que quedaba era determinar cmo esta molcula copiaba su informacin, es decir, su
replicacin. En 1953, James Watson y Francis Crick propusieron el modelo semiconservativo o
bidireccional. Este modelo supone que el ADN doble hlice separa sus dos cadenas y cada una sirve
de modelo para sintetizar una nueva cadena siguiendo las reglas de especificidad (guanina con
citosina y adenina y timina) de las bases nitrogenadas.
Aos despus, en 1957, Matthew Meselson y Franklin W. Stahl fueron quienes
confirmaron experimentalmente este modelo.
Ms tarde se postularon otros dos modelos de replicacin que no han tenido mucha
Aceptacin hasta hoy, uno se llam modelo conservativo y el otro modelo dispersivo.

Semiconservativa (correcta): En cada una de las molculas hijas se conserva una de las
cadenas parentales.
Conservativa: Se sintetiza una molcula totalmente nueva.
Dispersiva: Las cadenas hijas constan de fragmentos de la cadena antigua y
fragmentos de la nueva.

Para comprobar Cul de las tres hiptesis era correcta?, Meselson y Stahl (1958)
cultivaron bacterias (Escherichia coli) en un medio con nitrgeno pesado (N15) en vez de nitrgeno
normal (N14). El experimento de Meselson-Stahl permiti demostrar la hiptesis de que la
replicacin es semiconservativa. Para ello se hicieron crecer clulas de Escherichia coli en presencia
de Nitrgeno-15, un istopo del nitrgeno ms pesado de lo habitual. En consecuencia, el istopo se
adhiri a las cadenas de ADN, hacindolas ms pesadas.

Una vez conseguido el primer objetivo, las clulas fueron transferidas a un medio que
contena Nitrgeno-14, es decir, un medio ms ligero, y se les dej replicarse. El ADN fue
extrado para hacer una centrifugacin

Departamento de Biologa Coordinacin Instituto nacional

 Instituto Nacional
Nivel 4 Medio
Depto. Biologa

En la primera generacin se obtuvo una nica banda de ADN con densidad intermedia. En
la segunda generacin se obtuvieron dos bandas, una con densidad ligera y otra con densidad
intermedia o semihbrida. En la tercera generacin se obtuvieron dos bandas, una ligera (que
ocupaba el 75%) y otra intermedia (que ocupaba el 25% restante).

La banda intermedia o hbrida representa una molcula de ADN que contiene una cadena
pesada (parental) y otra ligera (recin sintetizada). Las cadenas ligeras representan una molcula
de ADN en la que las dos cadenas han sido sintetizadas (no estaban cuando las clulas se pusieron
en presencia de nitrgeno-15.

El hecho de que cada vez haya ms cadenas ligeras y se mantenga el nmero de cadenas
intermedias demuestra que la replicacin del ADN es semiconservativa. Si fuera conservativa,
aparecera siempre una banda pesada y el resto ligeras. Si fuera dispersiva slo apareceran
bandas hbridas de densidad intermedia en todas las generaciones.

La duplicacin del ADN se produce segn las siguientes normas:

1. Es semiconservativa
2. Es bidireccional
3. Presenta un punto de inicio, que es nico en procariontes y varios en organismos
eucariontes.
4. Es semidiscontinua.
5. Avanza por adicin de mononucletidos en el sentido 5 3
6. La iniciacin requiere un extremo hidrxilo libre proporcionado por un ARN cebador

La REPLICACION DEL ADN se lleva a cabo por una serie de protenas que actan
coordinadamente formando una compleja maquinaria celular.

Las enzimas ms importantes son:

1. TOPOISOMERASAS: desenrollan el ADN y relajan la tensin. Se destaca la ADN girasa.
2. HELICASA: separan las dos hebras del ADN para que cada una acte de molde. Enzima que
consume ATP.
3. ADN POLIMERASA: enzima capaz de sintetizar una cadena nueva de ADN. Para que se active
necesita:
a) 4 desoxinucletidos trifosfato (dNTP).
b) Una cadena de ADN que sirva de molde.
c) Un extremo 3 OH que sirva de iniciador.

NOTA: el ADN pol incorpora un nuevo nucletido en el extremo 3 OH y

copia la cadena molde en direccin 3 ------- 5 y la cadena nueva crece de
5 ------- 3 colocando el nucletido correspondiente.

Existen tres formas distintas de ADN pol:

ADN pol III: responsable de la copia de la cadena hija.
ADN pol II: repara pequeas roturas en una hebra de ADN. EXO, 3 5

Departamento de Biologa Coordinacin Instituto nacional

 Instituto Nacional
Nivel 4 Medio
Depto. Biologa

ADN pol I: escinde el ARN cebador, es correctora de pruebas, rellena con el dNTP
el hueco resultante al eliminar el ARN CEBADOR.
4. PRIMASAS: forma parte de un agregado de protenas llamado PRIMOSOMA. Esta enzima
sintetiza
un pequeo fragmento de ARN que actuar como iniciador suministrando un extremo 3 OH
para que comience la sntesis por parte de la ADN polimerasa. Las primasas originan los ARN
CEBADORES que son complementarios del ADN correspondiente.
5. LIGASA: cataliza la formacin del enlace fosfodister entre un extremo 3 OH y uno 5
fosfato de un ADN situados adyacentes uno del otro.
6. PROTEINAS SSB: protenas de unin al ADN de cadena simple. La protena ssb se une al ADN
cubrindolo y facilitando el trnsito a la maquinaria replicadora, mantienen separadas las dos
hebras monocatenarias, actan conjuntamente con las helicasas.

ACTIVIDADES: desarrolla cada una de las preguntas que a continuacin se presentan. Utiliza el
espacio indicado.

Departamento de Biologa Coordinacin Instituto nacional

 Instituto Nacional
Nivel 4 Medio
Depto. Biologa

1. Determina la funcin de cada una de las enzimas que forman el complejo estabilizador de la
molcula de ADN en la duplicacin:
a) HELICASA

b) TOPOISOMERASA O GIRASA

c) SSB.

2. Describe la funcin del primosoma.

3. Qu es un cebador

4. Como se llama la enzima que sintetiza a la molcula de ADN.

MECANISMO DE REPLICACION DEL ADN

Los ladrillos de la construccin

del ADN corresponden a los
trifosfatos de nuclesidos que pierden
dos de sus fosfatos cuando se unen al C
3 de azcar en el extremo de
crecimiento de la cadena.

Departamento de Biologa Coordinacin Instituto nacional

 Instituto Nacional
Nivel 4 Medio
Depto. Biologa

La replicacin avanza por adicin de mononucletidos en el sentido 5 ----- 3.

La cadena lider sintetiza

continuamente hacia la Horquilla de
replicacin.

La cadena rezagada sintetiza en

pequeas porciones en forma discontinua,
porciones llamadas Fragmentos de
Okazaki.

1. Describe cmo ocurre la sntesis de ADN en la cadena continua cuyo sentido corre de 5----- 3.

2. Describe cmo ocurre la sntesis en la cadena discontinua cuyo sentido corre de 3 ----5.

3. A que denominamos fragmentos de OKAZAKI y donde se ubican?

4. Dnde actan y que funcin tienen las enzimas ADN polimerasa I y la enzima ligasa?

5. Explica por qu NO acta la enzima ADN polimerasa en el extremo5 de la cadena discontinua?

6. Qu funcin cumple la enzima ADN polimerasa II?

Departamento de Biologa Coordinacin Instituto nacional

 Instituto Nacional
Nivel 4 Medio
Depto. Biologa

Aunque existen algunas diferencias entre procariontes y eucariontes y los principios generales de la
duplicacin son universales, el proceso es bsicamente igual:

La secuencia de nucletidos en el origen de replicacin del ADN acta como seal de

iniciacin.
La enzima helicasa separa las dos hebras de la doble hlice para que sirvan de molde. El
desenrollamiento de la hlice da lugar al superenrollamiento en los extremos de la horquilla
de replicacin, actuando entonces las enzimas topoisomerasas que liberan esta tensin. La
topoisomerasa I corta una hebra y la topoisomerasa II (denominada girasa en E. coli) Una
vez liberada la tensin vuelven a sellar la doble hlice.
Mientras se separan las dos hebras se van uniendo las protenas estabilizadoras (SSB), de
forma que se mantengan separadas ambas hebras y se estabilice la horquilla de replicacin.
El proceso de duplicacin es bidireccional; hay dos horquillas de replicacin por cada
burbuja de replicacin.
La primasa (una ARN-polimerasa) sintetiza los fragmentos de ARN que sirven de cebador
(primer) para la ADN-polimerasa.
La ADN-polimerasa III incorpora en direccin 5'---- 3' los nucletidos, formando una nueva
hebra de crecimiento continuo denominada hebra conductora.
Sobre la otra hebra antiparalela, primero, a unos mil nucletidos del origen de replicacin,
se sintetizarn unos cincuenta nucletidos de ARN que servirn para que la ADN-
polimerasa III incorpore los desoxinucletidos, formndose los fragmentos de Okazaki a
medida que se va abriendo la horquilla. Una vez formados, la ADN-polimerasa I, gracias a
su funcin exonucleasa, ir eliminando los tramos de ARN y los ir rellenando con ADN,
sintetizados gracias a su actividad polimerasa.
Finalmente interviene la ADN-ligasa, que empalma entre s los distintos fragmentos de la
hebra de crecimiento discontinuo, denominada hebra retardada.

Departamento de Biologa Coordinacin Instituto nacional

 Instituto Nacional
Nivel 4 Medio
Depto. Biologa

a) La sntesis del ADN se inicia en una secuencia especfica de bases: origen de replicacin.
b) Las bandas se separan de su origen y se desenrollan por la ADN helicasa. Las protenas
desestabilizadoras evitan que una cadena sencilla forme nuevamente una doble. La sntesis
opera en una direccin 5 ---- 3.
c) En tanto que la cadena nueva crece en una direccin, el desenrollamiento y la replicacin se
inician al otro lado del sitio de origen, por lo tanto la replicacin ocurre en ambos sentidos.
d) Al completarse la replicacin con la formacin de las dos molculas hijas, cada una de ellas
contiene una cadena recin sintetizada.

Departamento de Biologa Coordinacin Instituto nacional

Instituto Nacional
Nivel 4 Medio
Depto. Biologa

Departamento de Biologa Coordinacin Instituto nacional