Beruflich Dokumente
Kultur Dokumente
North Carolina Center for Public Health PreparednessThe North Carolina Institute for Public Health
FOCUS ON FIELD EPIDEMIOLOGY Pgina 2
podran ser los microorganismos causantes del brote. las infecciones probablemente no fueron adquiridas de
Las bacterias son organismos unicelulares. Las bacte- la misma fuente, y por lo tanto no estn relacionadas.
rias que generalmente causan enfermedades en los se- El determinar que los pacientes estn infectados con el mis-
res humanos son Salmonella, Streptococcus, Staphylo- mo tipo de virus o bacteria puede ayudar a identificar brotes
coccus y Escherichia Coli (E choli). que ocurren ms all de los lmites del estado. Esto podra
ocurrir cuando un alimento es contaminado en la planta
Los virus no tienen una estructura de clula. Estn com-
procesadora y luego distribuido a una amplia regin geogr-
puestos de ADN (o ARN) rodeado de una capa protectora
hecha de protenas. Entre los virus que infectan a los fica
seres humanos se encuentran la Influenza, HIV, el virus Por ejemplo, en el otoo de 2006, los oficiales del CDC
del Nilo, Noroviruses (tambin conocidos como virus simi- en Estados Unidos fueron notificados de varios conglo-
lares a Norwalk) y los virus del resfro comn, tales como merados pequeos de infecciones por E. coli 0157:H7
Coronavirus y Rhinovirus. en los estados de Wisconsin y Oregon (1). La espinaca
fresca fue implicada como probable origen de estas in-
Otros patgenos que pueden infectar a los seres huma-
fecciones. Ese mismo da, los epidemilogos de Nuevo
nos y causar brotes son las toxinas producidas por bacte-
Mxico contactaron a epidemilogos de Wisconsin y
rias, parsitos, hongos, y qumicos. Oregon en relacin a un conglomerado similar de infec-
Por qu es necesario el diagnstico de Laboratorio? cin por E. coli 0157:H7 en su estado, que tambin se
crea estar asociado al consumo de espinacas frescas.
La identificacin por parte del laboratorio del agente cau-
Unos das ms tarde, PulseNet de la CDC (descrito en
sante de un brote es crucial. El diagnstico, por lo gene-
FOCUS volumen 4 edicin 2) pudo confirmar a travs de
ral no debe basarse slo en sntomas clnicos, porque
pruebas de laboratorio, que las cepas de E. coli
muchos agentes pueden causar sntomas iguales o simi-
0157:H7 obtenidas de pacientes infectados en Wiscon-
lares en las personas. Por ejemplo, varios agentes que
sin tenan el mismo patrn de electoforesis en gel de
infectan el tracto gastrointestinal pueden causar snto-
campo pulsado, y tambin identificaron ese patrn en
mas de dolor abdominal y diarrea. Los sntomas clnicos
pueden tambin ser poco claros o demasiado generales pacientes aislados de otros estados
para identificar el patgeno definitivamente. Adems, es
posible que los mdicos que registran los sntomas no
reconozcan una enfermedad rara o que jams hayan
encontrado y entonces podran hacer un diagnstico erra- Diagnstico de Laboratorio y Programas de Vigilancia
do del paciente. El diagnstico adecuado de laboratorio Los laboratorios de diagnstico locales y estatales partici-
es, por tanto, importante no slo para conectar casos pan en programas nacionales de vigilancia de enfermeda-
individuales que podran estar involucrados en un brote, des del CDC. El Consejo de Epidemilogos estatales y terri-
sino tambin para asegurar el tratamiento adecuado pa- toriales (CSTE, por sus siglas en ingls), con informacin de
ra el paciente. parte del CDC recomienda la vigilancia de una larga lista de
Por ejemplo, tanto las infecciones por Norovirus co- patgenos. Con base en las recomendaciones del CSTE,
mo Shigella causan diarrea, dolor y sntomas gas- cada estado decide cules patgenos debern, por ley es-
trointenstinales relacionados, pero Norovirus slo tatal, ser notificados por parte de proveedores de salud y
puede ser tratado dando alivio sintomtico, mientras laboratorios.
que Shigella puede ser tratado con un antibitico. Si se identifica, en un laboratorio un organismo causante
La identificacin general del organismo responsable de de enfermedad que puede ser reportado, el laboratorio lo
un brote es muchas veces el primer paso en una investi- informa al departamento estatal de salud mediante un sis-
gacin de laboratorio. En algunos casos, es necesario tema de notificacin de enfermedades. Las pautas especi-
realizar estudios de laboratorio adicionales para determi- fican qu mtodos de identificacin deben usarse para
nar la cepa especfica, o serotipo, de un virus o bacteria notificar acerca de ciertos organismos y asegurar que slo
responsable de la enfermedad. Este proceso se conoce se reporten casos confirmados. Por ejemplo, slo se notifi-
como subtipificacin y es, por lo general, parte importan- can casos de Salmonella confirmados por cultivo.
te de una investigacin de un brote. El laboratorio estatal es el responsable de la identificacin
Por ejemplo, existen docenas de cepas potenciales cuando los laboratorios locales no tienen la experiencia
de Norovirus incluyendo el virus Hawaii, el virus necesaria, y adems tiene la responsabilidad final de infor-
Snow Mountain, el virus Desert Shield y el virus To- mar estos casos al departamento estatal de salud. En al-
ronto. Varias personas podran estar infectadas con gunos casos, la identificacin de un organismo puede no
un Norovirus, pero si todas tienen cepas distintas, ser posible a nivel estatal, y se podr pedir ayuda al CDC.
North Carolina Center for Public Health PreparednessThe North Carolina Institute for Public Health
VOLUMEN 4, NMERO 3 Pgina 3
Tabla 1. Mtodos de identificacin y tipificacin de patgenos y ejemplos de pruebas de laboratorio usadas en cada mtodo
Mtodo de identificacin Pruebas Pros (+) and contras (-)
Microscopa Despus de la preparacin con varios coloran- + relativamente rpido y puede dar respuestas inme-
Observacin de organis- tes y reactivos, las muestras se ponen en placas diatas
mos bajo aumento de vidrio y se examinan con un microscopio - la muestra clnica puede no contener un nmero sufi-
bsico ciente de microorganismos para ser visualizados sin
Los organismos mas pequeos (virus) pueden cultivo
requerir del uso de un microscopio electrnico
Cultivo El organismo se hace crecer en un medio de + es el patrn de oro: el crecimiento del organismo
Propagacin de microor- nutrientes (cultivo en agar slido o semislido, proporciona un diagnstico definitivo.
ganismos en un medio de cultivo lquido) O - limitado por la calidad de la muestra a partir de la
crecimiento El organismo se hace crecer en clulas vivas o cual se cultiva el organismo
tejido (cultivo de clulas o cultivo de tejidos) - no todos los patgenos son cultivables
- no detecta infeccin previa
Antigen detection Aglutinacin de ltex, fijacin de complemento, + los resultados son generalmente discernibles a sim-
Uses antibodies to detect anlisis inmunolgico con tipos de enzimas, ple vista (no se necesita microscopio)
antigens anlisis con anticuerpos fluorescentes - no detecta infeccin previa
- no es posible para todos los patgenos
Serologa Aglutinacin de ltex, fijacin de complemento, + segura, porque no requiere mayor crecimiento del
Detecta cualquier re- anlisis inmunolgico con tipos de enzimas, patgeno
spuesta inmunolgica anlisis con anticuerpos fluorescentes + mtodos rutinarios de medicin disponibles
previa a un patgeno + detecta infeccin pasada
- no todos los patgenos crean respuesta inmune
- puede requerir de muestras secuenciales
Mtodo de tipificacin Pruebas Pros (+) and contras (-)
Fagotipificacin Pruebas que usan los fagos lamda, gamma, T4, + muy til para tipos especficos (estafilococos)
Usa virus (fagos) que levivirus, microvirus - muchos organismos no son tipificables mediante este
infectan bacterias es- mtodo
pecficas - no estn estandarizados para muchos organismos
Identificacin y mtodo Pruebas Pros (+) and contras (-)
de tipificacin
Tcnicas moleculares Electroforesis en gel de campo pulsado (PFGE), + relativamente rpidas
Usa mtodos de identifi- polimorfismo de la longitud de los fragmentos + alta sensibilidad
cacin por cido nucleico de restriccin (RFLP), amplificacin al azar del - generalmente caras al comienzo (altos costos de ini-
polimorfismo del ADN (RAPD), ribotipificacin cio)
Tomado de: Herwaldt, et al. Microbial Molecular Techniques. In: Epidemiologic Methods for the Study of Infectious Diseases, JC Thomas, DJ Weber, eds.
Oxford University Press, 2001: 163-191.
North Carolina Center for Public Health PreparednessThe North Carolina Institute for Public Health
FOCUS ON FIELD EPIDEMIOLOGY Pgina 4
tras que bacterias Gram-negativas se manchan de dad y nutrientes para que un patgeno prospere y se re-
rojo. produzca, introduce una muestra, y espera a ver qu cre-
ce, si algo lo hace. El patgeno que crece en este ambien-
Al igual que la tintura, la forma de un microorganismo da
te controlado de laboratorio puede entonces ser identifica-
una pista acerca de su identidad. Dos formas bacteriales
do. En algunas situaciones de brote, la definicin del caso
comunes son redonda (cocci), y de bastn (bacilli). Ms
puede requerir un que caso definitivo sea confirmado por
an, las bacterias se pueden agrupar en parejas, cadenas,
cultivo.
u otra ordenacin que ayudan a su identificacin.
Por ejemplo, en un brote de infecciones por E. coli
Por ejemplo, la E. coli es un bastn Gram-negativo,
0157:H7 entre residentes de Colorado en junio de
mientras que S.pneumoniae o pneumococcus es un
2002, parte de la definicin de caso fue que las
diplococo Gram-positivo, una bacteria redonda que se
muestras tomadas de los pacientes eran cultivos posi-
agrupa en parejas. tivos para E. coli. En este brote se implic una carne
Las formas y patrones de crecimiento tambin pueden ser contaminada y ms de 350,000 libras de carnes ven-
usados para ayudar a identificar hongos y esporas de hon- didas en mercados fueron confiscadas (2).
gos. El cultivo tambin puede ser usado para aumentar la can-
Los virus tambin son posibles de observar bajo un mi- tidad del organismos disponibles para llevar a cabo otros
croscopio. Sin embargo, los virus son mucho ms peque- tipos de pruebas, como pruebas de deteccin de antge-
os que las bacterias u hongos y requieren un alto grado nos o pruebas de cido nucleico (discutidos ms adelante
de amplificacin, por lo tanto se utiliza generalmente un en esta edicin).
microscopio electrnico. Este microscopio dispara electro-
Los diferentes microorganismos requieren de distintos
nes al virus para poder fotografiarlo, de manera similar al
ambientes de crecimiento. Las bacterias se cultivan por lo
flash de una cmara que dispara luz a un objeto para cap-
general en una placa de Petri conteniendo un medio de
turar la imagen. Muchos virus tienen una forma caracte-
crecimiento (por lo general una solucin gelatinosa llama-
rstica y pueden ser identificados con bastante precisin a
da agar, como tambin con nutrientes y otros materiales
partir de una imagen microscpica. (Ver recursos adicio-
que hagan a la bacteria sentirse cmoda). Si las bacterias
nales en la pgina 7 para ejemplos fotogrficos). sobreviven, se apilarn unas sobre otras para formar colo-
Cultivo nias con una apariencia caracterstica, las cuales un tcni-
co de laboratorio podr identificar slo con mirarlas (figura
Otro mtodo de identificacin es el cultivo. El tcnico 1a). Algunas bacterias son ms felices cuando crecen al
del laboratorio dispone la temperatura adecuada, hume- interior de los nutrientes del cultivo en lugar de sobre
ellos. Para estas bacterias, se llena un tubo de ensayo
con agar y nutrientes, se introduce un alambre estril en
Cultivo de una muestra clnica la muestra de bacteria que se har crecer y luego se mete
Por lo general una muestra clnica se cultiva por los
tipos de microorganismos que se sabe sobreviven en un
ambiente especfico y que estn asociados a ciertos Figura 1.
sntomas clnicos. Por ejemplo: a). Cultivo de Nocardia asteroids, una micobacteria comnmente
encontrada en la tierra. Causa enfermedades en las personas
Las muestras fecales en enfermedades diarreicas con defectos en la inmunidad celular.
se cultivan por la presencia de bacterias patgenas
b) Cultivo por puncin de Legionella pnuemophita, el agente que
entricas, incluyendo serotipos de Salmonella causa la enfermedad del legionario. Se encuentra en ambientes
(Typha, enteriditis, typhimurium, etc.), Shigella, acuosos.
Campylobacter, Yersinia, Escherichia coli 0157:H7,
y Vibrio, para identificacin o serotipificacin. a b
Las muestras respiratorias se cultivan por patge-
nos tales como streptococo pneumoniae, Bordete-
lla pertussis, Haemophilus influenzae, Influenza,
Legionella, mycobacterium, u otros organismos,
dependiendo de las circunstancias clnicas.
Las muestras cervicales, vaginales o del pene pue-
den cultivarse para buscar Neisseria gonorrhoeae,
herpes u otros organismos que causen infecciones
genitales. Las fotografas son cortesa del CDC: http://phil.cdc.gov
North Carolina Center for Public Health PreparednessThe North Carolina Institute for Public Health
VOLUMEN 4, NMERO 3 Pgina 5
North Carolina Center for Public Health PreparednessThe North Carolina Institute for Public Health
FOCUS ON FIELD EPIDEMIOLOGY Pgina 6
IgG Ubicados en todos los fluidos corpora- Infeccin crnica de largo Macroglobulinemia
les trmino (por ejemplo, SI- Algunos tipos de leucemia
Constituyen un 75-80% de los anticuer- DA) Dao al rin
pos presentes en el cuerpo humano Mieloma mltiple IgG
Considerados los ms importantes en Hepatitis a largo plazo
la batalla contra infecciones virales y Esclerosis mltiple
bacteriales. Algunas condiciones auto-
El nico tipo de anticuerpo capaz de inmunes
atravesar la placenta, son por tanto
importantes durante el embarazo.
North Carolina Center for Public Health PreparednessThe North Carolina Institute for Public Health
VOLUMEN 4, NMERO 3 Pgina 7
North Carolina Center for Public Health PreparednessThe North Carolina Institute for Public Health
REFERENCIAS:
CONTACTO:
1. Centers for Disease Control and Prevention. Ongoing multistate
outbreak of Escherichia coli serotype O157:H7 infections associ-
The North Carolina Center for Public Health ated with consumption of fresh spinach --- United States, Sep-
Preparedness tember 2006. MMWR Morb Mort Wkly Rep. 2006;
The University of North Carolina at Chapel Hill 55(Dispatch):1-2. Available at: http://www.cdc.gov/mmwr/ pre-
Campus Box 8165 view/mmwrhtml/mm55d926a1.htm. Accessed December 8,
Chapel Hill, NC 27599-8165 2006.
2. Centers for Disease Control and Prevention. Multistate outbreak
Phone: 919-843-5561 of Escherichia coli O157:H7 infections associated with eating
ground beef --- United States, June--July 2002. MMWR Morb Mort
Fax: 919-843-5563
Wkly Rep. 2002;51:637639. Available at:
Email: nccphp@unc.edu http://www.cdc.gov/mmwr/preview/mmwrhtml/mm5129a1.htm
. Accessed November 30, 2006.
3. Centers for Disease Control and Prevention. Multistate outbreak
of monkeypox-Illinois, Indiana, and Wisconsin, 2003. MMWR
Equipo de trabajo FOCUS: Morb Mort Wkly Rep. 2003;52:537-540. Available at:
http://www.cdc.gov/mmwr/PDF/wk/mm5223.pdf. Accessed
Lorraine Alexander, DrPH November 30, 2006.
Meredith Anderson, MPH
4. Martynowicz MA, Prakash, UBS. Pulmonary blastomycosis: An
David Bergmire-Sweat, MPH
appraisal of diagnostic techniques. Chest. 2002;121:768-773.
Lauren N. Bradley, MHS
Anjum Hajat, MPH
5. Mayer G. Bacteriology Chapter 7: Bacteriophage. In: University of
South Carolina School of Medicine. Microbiology and Immunol-
Pia D.M. MacDonald, PhD, MPH
ogy On-line [Internet]. September 11, 2003. Available at:
Gloria C. Mejia, DDS, MPH http://www.med.sc.edu:85/mayer/phage.htm. Accessed No-
Amy Nelson, PhD, MPH vember 30, 2006.
Tara P. Rybka, MPH
6. Herwaldt, et al. Microbial Molecular Techniques. In: Epidemi-
Rachel A. Wilfert, MD, MPH ologic Methods for the Study of Infectious Diseases, JC Thomas,
DJ Weber, eds. Oxford University Press, 2001: 163-191.
NOMBRE: ____________________________________
PRXIMOS TEMAS
TTULO (S): ___________________________________
_____________________________________________________
_____________________________________________________
North Carolina Center for Public Health PreparednessThe North Carolina Institute for Public Health