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ISSN 1665-0514

Divisin Acadmica de Ciencias Biolgicas

Vo l u m e n X V Nmero 27 Julio - Diciembre 2008

Universidad Jurez Autnoma de Tabasco


ISSN 1665-0514

REVISTA DE
DIVULGACIN
Divisin Acadmica de Ciencias Biolgicas
Universidad Jurez Autnoma de Tabasco
Kuxulkab Voz chontal - tierra viva, naturaleza

CONSEJO EDITORAL Publicacin citada en:

El ndice bibliogrfico PERIDICA., ndice de


Dra. Lilia Gama Revistas Latinoamericanas en Ciencias.
Editor en jefe Disponible en http://www.dgbiblio.unam.mx
E-mail: publicaciones@cicea.ujat.mx
Dr. Randy Howard Adams Schroeder httm:// www.ujat.mx/publicacion
Dr. Jos Luis Martnez Snchez
Editores Adjuntos

Biol. Ma. Leandra Salvadores Baledn


Editor Asistente KUXULKAB' Revista de Divulgacin de la Divisin Acadmica
de Ciencias Biolgicas, publicacin semestral de junio 2001.
Nmero de Certificado de Reserva otorgado por Derechos:
COMIT EDITORIAL EXTERNO 042003-031911280100-102. Nmero de Certificado de
Licitud de Ttulo: (11843). Nmero de Certificado de Licitud de
Dra. Silvia del Amo Contenido: (8443). Domicilio de la publicacin: Km. 0.5
Universidad Veracruzana Carretera Villahermosa-Crdenas, entronque a Bosques de
Dra. Carmen Infante Saloya. Villahermosa, Tabasco. Tel. y fax (93) 54 43 08.
Servicios Tecnolgicos de Gestin Avanzada Imprenta: Imagen Grfica, Morelos y Pavn No. 211. Col
Miguel Hidalgo C. P. 86150 Villahermosa, Tabasco.
Venezuela
Distribuidor: Divisin Acadmica de Ciencias Biolgicas Km.
Dr. Bernardo Urbani 0.5 Carretera Villahermosa-Crdenas, entronque a Bosques
Universidad de Illinois de Saloya. Villahermosa, Tabasco.
Dr. Guillermo R. Giannico
Fisheries and Wildlife Department,
Oregon State University
Dr. Joel Zavala Cruz
Colegio de Posgraduados, Campus Tabasco
Nuestra Portada:
Dr. Wilfrido Miguel Contreras Snchez
Divisin Acadmica de Ciencias Biolgicas
Universidad Jurez Autnoma de Tabasco
Diseada por:
Lilianna Lpez Gama
Estudiante de diseo y
comunicacin visual
FES Cuautitln
Editorial
E ditorial

Estimados lectores de Kuxulkab.

D urante este segundo semestre del 2008, hemos visto otra vez como la naturaleza
puede causar afectaciones importantes en este territorio, de tal forma que nos
requiera buscar alternativas de adaptacin a estas circunstancias y por ende tener cada da una
mayor conciencia de los impactos que ocasionamos al ambiente y que seguramente se
magnifican dada la vulnerabilidad geogrfica de nuestro estado.

En este nmero tenemos una diversidad de temas que tocan informacin importante de
los recursos naturales de Tabasco y que van del agua como un recurso de inters global y los
peces, al latex, incluyendo datos de los cambios que ha sufrido el territorio debido a la
deforestacin. En ellos se presentan resultados de tesis que se desarrollan en nuestros diferentes
programas educativos, que se vinculan a algunos de los proyectos de investigacin que se
realizan en nuestra escuela por acadmicos y estudiantes. Los ocho artculos incluidos en este
nmero presentan principalmente resultados de investigaciones aplicadas en una amplia gama
de temas como: medir la deforestacin importante problema ambiental de la actualidad o una
propuesta de control biolgico adems de tcnicas de acuacultura. Se presenta a su vez,
informacin resultante de investigaciones relacionadas con la gestin en el rea ambiental.

Les recordamos que esta es la revista de todos y les invitamos a enviarnos sus
manuscritos, en espera de que cada vez ms estudiantes se incorporen a la divulgacin de la
ciencia con temas que consideren sern de inters a sus compaeros y se unan a aquellos que han
terminado o se encuentran realizando sus proyectos de tesis y cuyos resultados de sus
investigaciones comparten con nosotros. Como siempre agradecemos a los colaboradores de
otras instituciones interesadas en la divulgacin de la ciencia que comparten con nosotros temas
de inters general, as como los resultados de sus proyectos y los exhortamos a continuar
hacindolo. Reiteramos nuestro sincero y continuo agradecimiento a los colegas que
desinteresadamente colaboran en el arbitraje que nos permite mantener la calidad de los trabajos.

Lilia Gama Wilfrido Miguel Contreras Snchez


Editor en Jefe Director
Divisin Acadmica de Ciencias Biolgicas
Universidad Jurez Autnoma de Tabasco
Produccin de insulina a partir de organismos bacterianos:
Revisin bibliogrfica para la tcnica molecular

Viridiana Rosabelhi Soto Pol*


Javier Hernndez Guzmn
Yazmn Morales Hernndez
Onsimo Dios de la Cruz
Divisin Acadmica de Ciencias Biolgicas
Universidad Jurez Autnoma de Tabasco
Km 0.5 carretera Villahermosa-Crdenas entronque Bosques de Saloya
vrspbjr@hotmail.com*

Resumen a la resistencia a la insulina, estado que precede a la


diabetes y adems, se suele acompaar de otros factores
La diabetes millitus es una de las enfermedades con de riesgos cardiovasculares como la dislipidemia, la
mayor impacto en la sociedad. Esta problemtica hipertensin y factores protrombticos y otras
provoca que las personas presenten la glucosa elevada alteraciones como la debilidad, sueo, delgadez,
en la sangre (hiperglucemia) y otras alteraciones que obesidad, infarto, ceguera o insuficiencia renal (Bosch
cambian el metabolismo. Las enzimas de restriccin se et al., 2002; Hryciw et al., 2004).
utilizan para cortar de manera abierta un plsmido, por
lo que la misma enzima se utiliza para cortar el gen En 1978, se logr la clonacin en donde se
deseado fuera del cromosoma; esta reaccin hace dos produjeron una gran cantidad de copias idnticas de
cortes que emparejan y cuando se combina el gen y el bacterias capaces de producir la insulina, para que fuese
plsmido forman un enlace temporal. Otra enzima utilizada por las personas con la enfermedad de la
denominada ADN ligasa se utiliza para crear un sello diabetes, sin embargo, no fue hasta 1982 que se pudo
permanente. De esta manera se induce a las bacterias comercializar la insulina producida por las bacterias
que tomen los plsmidos mientras que estas mismas se hacia la disposicin de los enfermos (Caputo et al.,
desarrollan y se multiplican en el medio, generando la 2005; Bericevik et al., 2002).
insulina de manera natural a partir de bacterias.
Debido a que la Biotecnologa, con la ayuda de la
Introduccin Ingeniera gentica ha logrado extraer la insulina que
son capaces de producir las bacterias y otras especies
La diabetes mellitus es una de las enfermedades con complejas como los porcinos y los vacunos muchas de
mayor impacto sociosanitario, no solo por su elevada las personas hoy da tiene la capacidad de presentar una
frecuencia, sino por las consecuencias de las vida con mayor normalidad (Muniappan y Ozcan,
complicaciones crnicas que comporta esta 2007; Erb, 1980).
enfermedad. Esta se caracteriza por tener una
insuficiente produccin de insulina por clulas Por toda la importancia que tiene esta enfermedad
denominadas beta del pncreas, esta problemtica ante la poblacin actual y por el avance de la
provoca que las personas presenten una elevacin de la manipulacin gentica a nivel molecular en
glucosa en la sangre, la cual es llamada hiperglucemia y microorganismos bacterianos, se pretende lograr la
otras alteraciones que cambian el metabolismo insercin de un ADN recombinante a otro organismo
(Santisteban-Segundo, 1999; Bosch et al., 2002). para lograr que produzca una nueva protena, para que
esta sea fabricada naturalmente por las personas.
En el caso de los individuos genticamente
predispuestos, la obesidad y el sedentarismo conducen

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Produccin de insulina a partir de organismos bacterianos: Revisin bibliogrfica para la tcnica molecular.

Metodologa

Tcnica general

Se utilizan enzimas especiales para insertar genes


humanos en el ADN de las bacterias. Los genes
humanos hacen que las bacterias elaboren un nuevo
material, que no eran capaces de producir con
anterioridad. En condiciones adecuadas, los
microbios se multiplican rpidamente, de modo que
se puede generar una gran cantidad de la nueva
sustancia en un corto perodo de tiempo. De esta
manera, los genes que controlan la produccin de
insulina humana, se pueden colocar en una clula
bacteriana, con el fin de que los microbios elaboren la
insulina humana. Despus, esta sustancia es extrada
del cultivo de bacterias y preparada para su uso por
parte de los enfermos que la precisen (Finochieto et
al., 2008)

Mtodo recombinante para la produccin de


insulina

Primeramente, se clonan los genes con la -


galactosidasa en el plsmido pBR322 (Figura 1). La
recombinacin de los plsmidos son amplificados en
E. coli. Se lleva a cabo una transformacin de la
bacteria, en dos nucletidos diferentes, luego la
reaccin entre la protena -gal y el gen de la insulina
con la metionina hace que el complejo proteico
cambie, expulsando de esta manera la molcula de la
metionina y produciendo al final la insulina con
menos aminocidos que al inicio del proceso por el
mtodo de la recombinacin (Ladisch y Kohlmann,
1992).

El mecanismo de la separacin de la insulina es a


travs del sistema RP-HPLC (Reversed-Phase High Figura 1. Produccin de la insulina a travs de la bacteria
Escherichia coli.
Performance Liquid Chromatography) por sus siglas en
ingls, la cual es utilizada para separar la insulina de
Resultados
otras especies, basada en una gran variedad de
diferentes aminocidos y gracias a la hidrofobicidad de
Para lograr el correcto funcionamiento se necesita
la insulina relacionada con otros componentes. La
llevar a cabo ciertos pasos: primero, el gen del inters
tendencia de las protenas debe ser generalmente con
debe ser identificado, por ejemplo, el gen de la insulina
las protenas ms grandes que se encuentren en una fase
tendra que ser aislado de las clulas bacterianas. Un
estacionaria, en la cual tienen una gran limitacin del
plsmido es una secuencia circular, double-stranded de
soporte de alcalinidad.
ADN, que las replica en bacterias y que son parte del
cromosoma bacteriano. El gen se inserta en el plsmido
en donde es tomada por una bacteria. Las bacterias se

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Produccin de insulina a partir de organismos bacterianos: Revisin bibliogrfica para la tcnica molecular.

reproducen y comienzan a generar la protena deseada Plsmidos bacterianos (Kimball, 2004)


(Shehata, 2008).
Las enzimas de restriccin fueron descubiertas en
1968, las cuales son parte importantes durante el
proceso de produccin de insulina. En la naturaleza, las
enzimas de restriccin cortan en una secuencia de
nucletidos, llamada vista de restriccin, la cual se
presenta con 4-8 nucletidos largos. La secuencia en la
cadena de ADN que se presenta en las bacterias se
complementa con un grupo metlico (-CH3) en donde
la adenina y la citosina evita que la enzima de
restriccin acte de manera adecuada. El ADN que en
algn momento es externo, tal como un fago (un virus o
una bacteria) es dividido en secciones a travs de la
enzima de restriccin. Aunque no todas las bacterias
cuentan con las enzimas de restriccin hay en la
actualidad un gran nmero de estas enzimas que se han
descubierto y que son igual de efectivas (Arakaki et al.,
2008).

Las enzimas de restriccin se utilizan para cortar un


plsmido abierto, la misma enzima se utiliza para cortar
el gen deseado fuera del cromosoma. Esto hace dos
cortes que emparejan y cuando se combina el gen y el
plsmido forman un enlace temporal, posteriormente
Figura 2. Ilustracin que demuestra como la insulina este es sellado con el ADN ligasa (Moks et al., 1987).
humana se puede producir por las bacterias, usando el ADN
recombinante (Fuente: Thinkquest, 2008 modificado).

Figura 3. Micrografa electrnica de una clula de E. coli


donde se realiza la ruptura del ADN. Una porcin de la
molcula de ADN se enlaza a partir de 4.6 millones de pares Figura 4. El funcionamiento de una enzima de restriccin. El
de bases, codificando aproximadamente 4100 genes. Los sitio de restriccin es GGATCC (Kimball, 2004
crculos pequeos son los plsmidos. modificado).
(Fuente: Thinkquest, 2008 modificado).

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Produccin de insulina a partir de organismos bacterianos: Revisin bibliogrfica para la tcnica molecular.

desean combinar con los plsmidos. En donde se


inducen a las bacterias que interacten con los
plsmidos, al interactuar, las bacterias cambian de
color. Despus de la interaccin de las bacterias con los
plsmidos, estos se multiplican en un medio de
ampicilina (Ladisch y Colhmann, 1992).

Si un grupo de bacterias toma un plsmido que


tiene el gen intacto de lacZ, significa que ese plsmido
no es recombinante, en donde tomar un color azulado.
Mientras que las bacterias que no tomaron ningn
plsmido no tendrn la capacidad crecer dentro de la
ampicilina, por lo que solamente aquellas bacterias que
tomaron el plsmido crecern y aquellas que tengan
insertado el gen de lacZ tendrn una apariencia
blanquecina (Ladisch y Kohlmann, 1992).

Para realizar los marcadores de forma radiactiva o


con un marcador fluorescente en el ADN
desnaturalizado de las bacterias se puede efectuar con
variaciones de temperatura o con productos qumicos.
Cuando estas son marcadas, la cadena complementaria
del ADN de la bacteria se enlaza con el gen de la
insulina. De esta manera sabemos cual es la bacteria
que tiene el gen deseado de la insulina, en donde esta
misma puede colocarse como medio de cultivo para que
Figura 5. Interaccin de la enzima de restriccin con el ADN se pueda duplicar el gen de la insulina, tambin es
en un plsmido. El sitio de restriccin es GAATTC (Fuente:
Thinkquest, 2008 modificado).
conocida como la tcnica de hiperhibridacin del cido
nucleico (Ladisch y Kolhmann, 1980).
En la actualidad, los cientficos producen un ADN
recombinante a gran escala, en donde millones de Conclusin
plsmidos se mezclan con millones de genes, millones
de enzimas de restriccin realizan una gran cantidad de La tcnica de recombinacin de ADN de los plsmidos
cortes, los plsmidos atan a los genes mltiples, bacterianos es parte de una de las tecnologas de la
haciendo de esta tcnica muy compleja (Muniappan y ingeniera gentica con grandes aplicaciones de inters
Ozcan, 2007). cientfico y econmico. Estas aplicaciones tienen un
amplio espectro de beneficios, no solo para la medicina
Los plsmidos que comienzan el procedimiento se sino tambin para la industria farmacutica y la
llaman vectores reproductivos que es una molcula que fabricacin en masa de gran cantidad de productos
puede llevar el ADN externo a una clula y replegarla derivados de la produccin de protenas. En general,
en esta misma. Este plsmido tambin incluye un gen gracias a las actuales tcnicas para la manipulacin del
que le confiere resistencia a la ampicilina y un segundo ADN es posible producir en gran cantidad insulina
gen denominado lacZ. El sito de restriccin en donde la genticamente compatible con el paciente. Es
enzima de restriccin realiza un corte se localiza en el prcticamente idntica a la producida de manera
gen lacZ, si el ADN externo se inserta en el gen lacZ natural en el organismo humano y por lo tanto
donde la enzima de restriccin realiz su corte, el gen completamente til y aprovechable para aquellas
lacZ da como terminado su funcin. Las enzimas de personas que no pueden producir la insulina
restriccin se mezclan con los plsmidos y se agregan denominados personas diabticas. La produccin de la
los genes deseados, es decir, aquellos genes que se insulina mediante los procesos anteriormente

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Produccin de insulina a partir de organismos bacterianos: Revisin bibliogrfica para la tcnica molecular.

expuestos abre las puertas a una nueva industria de Hryciw, D. H., Lee, E. M., Pollock, C. A. and
produccin en masa que beneficia a millones de Poronnik, P. 2004. Molecular changes in proximal
personas en Tabasco y de todo el mundo. tubule function in diabetes mellitus. Proceedings of the
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CONTENIDO

El Valor Socio-Ambiental del Agua: El Reto Futuro de la Poltica Pblica en Mxico


JOS A. OSEGUERA PONCE 5

Anlisis de Regresin Lineal en un Sistema de Informacin Geogrfico para determinar la Tasa de


Deforestacin en el Estado de Tabasco
JUAN JAVIER CASTILLO RAMIRO, LILLY GAMA Y CAROLINA ZEQUEIRA LARIOS 15

El camino hacia el Homo sapiens


ARMANDO ROMO LPEZ Y JULIA MARA LESHER GORDILLO 19

Hongos Entomopatgenos como una alternativa en el control Biolgico


MANUEL ANTONIO GARCA GARCA, SILVIA CAPPELLO GARCA,
JULIA MARA LESHER GORDILLO Y RENE FERNANDO MOLINA MARTNEZ 25

Produccin de insulina a partir de organismos bacterianos: Revisin bibliogrfica para la tcnica molecular
VIRIDIANA ROSABELHI SOTO POL, JAVIER HERNNDEZ GUZMN,
YAZMN MORALES HERNNDEZ Y ONSIMO DIOS DE LA CRUZ 29

El ltex en Mxico, Una Visin Histrica


REN FERNANDO MOLINA MARTNEZ Y JULIA MARA LESHER GORDILLO 35

Determinar el Anlisis de Riesgo Toxicolgico de los Hidrocarburos Aromticos Policclicos a la salud


humana de los trabajadores, utilizando el modelo Caltox
JOS GUADALUPE CARMEN MORALES FORTANEL 41

Tcnicas de Reversin Sexual Aplicadas en Acuicultura


JUAN MANUEL VIDAL LPEZ, WILFRIDO MIGUEL CONTRERAS SNCHEZ,
CARLOS ALFONSO LVAREZ GONZLEZ, ARLETTE AMALIA HERNNDEZ FRANYUTTI
Y ULISES HERNNDEZ VIDAL 49

NOTA

Preferencias alimenticias de las especies comerciales ms importantes del genero Lutjanus en el litoral
costero del estado de Tabasco, Mxico
ARTURO GARRIDO MORA, PAVEL ALEKSEI CASTILLOENRIQUEZ Y FCO. JAVIER FELIX TORRES 55

Buscadores Verdes (Green Browsers)


LILLY GAMA 59

NOTICIAS

Proyectos de Investigacin 63

Avisos 69

ISSN - 1665 - 0514


DACB

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