Multiplication vgtative des Vgtaux

Dfinition : Ceci reprsente du type de reproduction des plantes ne faisant pas intervenir le
phnomne sexuel. Ce qui revient dire que la multiplication vgtative est tout mode de
reproduction conservant l'intgralit du gnome du vgtal de dpart. On obtient alors des clones.

Ce type de reproduction est extrmement frquent chez les vgtaux et souvent trs efficace.
Stolons du fraisier Bulbilles des Kalanchoces
Rhizomes des Gramins Drageons des Rosaces
Tubercules de pomme de terre Plantules et tiges florales des Chlorophytums
Bulbes et carieux des Liliaces

En horticulture on effectue du bouturage, greffage, marcottage, culture in vitro qui sont tous
des procds de reproduction vgtative. La multiplication vgtative comme fixatrice des
caractristiques acquises par une espce au cours des vicissitudes (succession) de la reproduction
sexue.
Elle permet d'assurer la conservation indfinie (thoriquement) des vgtaux auquel le
patrimoine gntique interdit la reproduction sexue (espces triplodes : Bananiers, hybrides
infconds Clmentine (orange sans ppin), espces dioques (Clode, Vigne) ou encore des varits
formes d'une mosaque coordonne de cellules de divers gnotype chimres
Cela est trs frquent chez les plantes cultives (illets, pommiers, rables) et qui ne
peuvent tre conserves que par cette voie. La multiplication vgtative permet de conserver des
variations intressantes (adaptation divers conditions d'environnement cologiques que l'on
obtient par multiplication en laboratoire)
Les mutations ou des variations dans le monde de fonctionnement du gnome peuvent
intervenir sur les cellules servant la multiplication vgtative et constituant ainsi le point de dpart
d'un clone, d'une structure gntique ou morphologique modifie.

I Le bouturage :
C'est un trs ancien moyen de multiplication vgtative et il est largement utilis
actuellement par les ppiniristes, horticulteurs et chercheurs.

A) Dfinition :
Une bouture est une fraction de rameau portant un ou plusieurs bourgeons que l'on
place dans des conditions d'humidit, de temprature et de lumire tel qu'elles lui permettent de
dvelopper sa base des racines adventives et son sommet des rameaux, conservant ainsi toutes
les caractristiques de la plante mre.
On le ralise soit avec un fragment de vgtal spar de la plante mre soit avec un rameau
restant associ la plante mre. Il ne sera spar du plant mre qu'une fois qu'il aura form ses
propres racines. C'est le principe du marcottage ou provignage.

B) Les bases scientifiques du bouturage :

La noformation des racines partir d'un tissu qui n'en produit normalement pas est appel
rhizogense.
Il faut donc une ddiffrenciation des cellules de la tige pour qu'elles puissent montrer une
activit mitotique intense pour difier un massif mristmatique. Une fois termin, on a la formation
de l'bauche racinaire et sa croissance. Ce sont des mcanismes complexes qui entre en jeu pour
cette noformation.
Chez de nombreux vgtaux, les racines ne se forment gnralement pas n'importe o, en
n'importe quel point des tiges. Ces tiges prsentent une polarit plus ou moins accentue.
 1) Polarit des tiges :
(Figure n1 page 1) 2 expriences on permit de la mettre en vidence. Le rameau de saule est plac
en de bonnes conditions de bouturage. On observe la formation de l'extrmit morphologique
infrieure (des racines) quelque soit sa posture dans l'espace. Il existe un ple caulinogne et un
autre rhizogne. Cependant cette polarit n'est pas absolue.

2) Dcortication annulaire :
On enlve l'corce et le liber d'un rameau sans toucher au bois. On observe la formation d'un
bourrelet au dessus de la dcortication et la formation de racines. On remarque aussi la base du
rameau la formation de racines. Sur le bourrelet et l'extrmit infrieure se produit une
accumulation de substance rhizogne qui se dplacent toujours vers les extrmits infrieures
et dans la partie externe de la plante.
Pour raliser un bouturage de gymnosperme on doit raliser une dcortication annulaire,
placer la plaie dans une enceinte vitant la dessiccation et appliquer de l'auxine.

C) Localisation des racines sur les boutures de vignes:

(Figure n3 page1)
Lorsque les racines apparaissent sur les boutures de vigne, leur localisation est diffrente
selon leur varit. Formation au niveau des noeuds, internoeuds et/ou la base de la section. Chez
Vitis vinifera (celle qui porte les raisins pour le vin) la rhizogense se fait au niveau des noeuds.

Ces expriences suggrent que les yeux (bourgeons) ont un rle important dans les
phnomnes de rhizogense.

D) Influence de l'oeil : BOEHM (1867)

Corrlation dans le dveloppement des tiges feuills et l'enracinement des boutures. Le
bourgeon un effet stimulant sur la rhizogense mais pas dans tous les cas (il peut tre aussi
inhibiteur).
En 1966 BOUARD constate que l'oeil en voie de croissance joue un rle sur la rhizogense.

1) Position de l'oeil :
Elle dtermine la localisation des racines sur les boutures des Ugni-Blanc (U.G). Ceci est
dmontr par 3 expriences. (Figures n3, 4, 5 et 3') boutures ralises plusieurs entre noeuds
(mrithalles)

2) Greffage : (Figure n7 page 2)

Une substance permet donc la formation. De A B les racines sont mises sous l'oeil et dcroissent
en taille. De B C pas de racines et de C D nouveau des racines.

3) Sans bourgeon :
On obtient des racines difformes au niveau de la base

4) Action de l'oeil est due l'mission d'une substance : (figure n6 page 2)

La formation de racine ne se fait qu'au niveau du sol. Les racines en pointilles existeraient si le
rameau tait plac verticalement. La pesanteur donc un rle dans la rhizogense.

Tout ce passe comme si l'efficacit de la substance diminuait progressivement de A vers

B limitant ainsi le dveloppement des racines. De B C pas de substance, de C D accumulation de
la substance au niveau de l'apex caulinaire. Une certaine concentration issue du bourgeon est
capable de provoquer une stimulation bien dtermine de la rhizogense.
Chez les Rupestris du Lot (R.L) une seule racine se forme la base. L'efficacit de la
substance est fonction de la concentration, sa circulation se fait par la phlome et est ralentie
ou bloque au niveau des noeuds.

5) Proprits et nature de la substance mise par l'oeil : (Figure n8 page2)

Les rsultats sont quasi identiques aprs les changes et les greffes. Formation de racines sur un
fragment d'une autre plante et inversement. Cette substance n'est pas spcifique des plantes, elle
est universelle. La rhizogense ne dpend pas seulement de la substance mise par l'oeil mais
aussi de la qualit du mristhalle. La potentialit des futures cellules gnratrices prsentent tout
le long de la tige est universelle, toutes les cellules de la tige peuvent devenir des centres
mristmatiques (rotation des greffons le prouve)
Si ces potentialits ne sont pas rveilles par les substances de l'oeil, il ne se forme pas
d'auxine. La rhizogense ncessite donc 2 facteurs, l'un issu de l'oeil l'autre prsent dans le
mristhalle. On parle de facteurs C (complmentaires) du mristhalle.

Il peut s'agir d'un cocktail de gibbrellines et d'auxine ou seulement de l'auxine. Le

stimulus est vhicul par la circulation du liber. L'acide naphtalne actique (ANA) est un quasi
remplaant de l'auxine. Il enclenche les mmes ractions.
Le facteur C est bien fix tout le long de la tige chez les varits diffrentes. Le traitement
par des substances de croissance de synthse provoque la croissance de racines tout le long du
mristhalle.
Vitis riparia (Figure n9 page2) Diffrente taille de mrithalle. On constate que les
premires racines apparaissent toujours la base des racines et non sur la tige. Les racines peuvent
se former partout o entre 2 noeuds.

6) Le facteur C et le bourgeon dans la disposition des racines (Figure n10 page 2) :

Diffrence dans l'efficacit des bourgeons sur le nombre de racines. R.L n'est pas efficace sur les
greffe d'autres espces. On a vu que ce n'est pas la qualit de la substance mais la quantit qui
influence la rhizogense. Il faut un rythme d'mission particulier pour la rhizogense.

Le bourgeon greff UB ne rvle pas toutes les potentialits de la R.L ce qui nous permet de
penser que le seuil de ractivit du facteur C la substance mise par les bourgeons est plus
levs chez R.L. Il serait donc variable selon les espces.

7) Localisation et nature du facteur C : (Figures page 3)

L'assise rhizognique de la vigne est le cambium. Les racines apparaissent au niveau des rayons
mdullaires (parenchyme horizontal) interfaciculaire et les tissus vont laisser la place la jeune
racine en tant progressivement dissocis. Le facteur C est donc localis dans l'assise rhizomiale.

Facteurs prsents trs tt dans les de l'anne (sans bois), les racines peuvent se former sur le
bois de 2 ans et aussi sur le vieux bois mais plus difficilement.
Ce n'est pas un facteur particulier, propre la tige car on peut faire des bouturages avec des
feuilles, ptioles (traits l'auxine).

BOUARD : Le facteur C existe dj dans le bourgeon et est une proprit spcifique gntiquement
fixe, prsente dans chaque centre gnrateur et distribu dans toutes les cellules cambiales. Le tissu
parenchymateux sont plus mous ce qui explique pourquoi les cellules cambiales d'exterioriser les
racines.

Conclusion:
(Figure n16 page3)
II Les conditions ncessaires la russite du bouturage :
A) Les conditions lies au matriel vgtal :

1) La bouture doit avoir un bourgeon :

Il faut qu'il soit prsent pour produire la substance qui agit sur le cambium pour la
formation des racines.

2) L'espce ou la varit doit tre apte la rhizogense :

Cpages reprise facile :
Vitis vinifera, Ugni blanc, Merlo, Cabernet, Rupestris du Lot
Cpages reprise difficiles :
Vitis barlandiera, Vitis riparia, Vitis candicano. Ce sont tous des cpages amricains qui servent de
porte greffe aux cpages europens car insensible au phylloxera.

3) Il faut du matriel vgtal vivant, riche en eau et en rserves :

Le pourcentage de reprise au bouturage est conditionn par la maturit des bois.
Aotement des sarments (moment o les rameaux ou tiges qui taient herbacs, verts, stoppent leur
croissance et se lignifient et subrifient : apparition d'corce, lige). Au cours de cette priode,
modification mtabolique accumulation d'amidon (rserves) dans les rameaux.
En effet la possibilit du bouturage en vert s'accorde mal avec l'ide que les rserves sont
ncessaires au bouturage. En effet les rameaux herbaces ont peu ou pas de rserves et ne sont pas
lignifis. Pour certaines varits on a de meilleurs bouturages avec des rameaux verts qu'avec des
rameaux aots. Les possibilits de rhizogne ne sont pas propre aux conditions de l'aotement

* Teneur de glucides des sermants et rhizogne :

BOUARD a tudi des varits diffrentes diffrents moments de bouturage et constat
que le teneur en glucides tait sensiblement la mme. (Figure 12 page 3)
Les plus petites boutures contiennent naturellement moins de glucides que les grandes mais
donnent naissance des plants normaux. Ce sont mme celles qui dorment le plus de tissus
nouveaux. La capacit de production des tissus nouveaux parat inversement proportionnel au point
des boutures. Les rserves auraient un rle dfavorable.
Boutures prlves la base donne les plantes les plus belles. Celles de l'extrmit, les moins
riches ont l'aptitude la plus grande produire de nouveaux tissus. Celles du centre ont des proprits
intermdiaires, l, o il y a le plus de yeux.

Les boutures de trs faibles diamtres manifestent une rhizogense plus rapide et une plus
grande aptitude la formation de tissus nouveaux alors que les moyens plus vigoureux sont plus
lents.
Les rserves n'ont donc pas d'influence sur la reprise du bouturage.

* Rserves et survie de la bouture :

Elles ont un rle important dans les possibilits de survie de la bouture. Elles sont utilises
par les racines pour leur croissance tant que la photosynthse ralise par la jeune plante n'est pas
suffisante. Le bourgeon en voie de croissance les utilise aussi. Un bois bien aot permet d'obtenir
un tronc solide immdiatement.

4) Le dormance des bourgeons doit tre leve :

Inaptitude l'longation des bauches de bourgeons. Chez la vigne, les bourgeons
entrent en dormance fin Juin, dbut Juillet et est leve l'automne (fin t, dbut automne). Les
possibilits sont voisines de zro si l'on prlve des bourgeons dans l't. Il faut en moyenne 7
jours de temprature infrieure 11C pour lever la dormance. Le prlvement des sarments se
fait vers les 1res geles (entre Dcembre et Janvier).
5) Bon tat sanitaire :
Les prlvements doivent tre faits sur des pieds sains, exempts de parasites
(champignons, insectes, bactries) ou de blessures.

B) Conditions lies aux facteurs externes :

1) Conservation, humidit, temprature, aration, luminosit :
Tous ces facteurs agissent sur la conservation des bois de boutures et lors de leur
stratification.

a) Temprature :
Il faut des tempratures comprises entre+5 et-5C. Leve des dormances des bourgeons latents
mais diminue les changes gazeux respiratoires et permettent des teneurs en H2O et en rserve un
niveau stable. En dessous de -5C, l'eau du vgtal gle entranant des lsions cellulaires
irrversibles alors que des tempratures leves favorisent la combustion des rserves et la
dessiccation des bois.

b) Humidit :
Le dfaut d'enracinement est souvent li la dessiccation des bois de boutures pendant leur
conservation. Il faut qu'ils soient conservs sous une HR (humidit relative) de 90 100% (sable
humide, sciure humide, mousse synthtique, ...). Si ds le prlvement et au cours de leur
conservation les bois perdent de l'eau, ils pourront ensuite en rabsorber au cours de 24h
d'immersion mais n'mettront pas de racines.
(figure page 4). Les barres reprsentent la quantit d'eau dont les boutures sont capables
d'absorber mais le seuil de dshydratation est de 20% au del duquel les bois ne font plus de
racines. On peut augmenter la teneur en eau des bois en les trempant dans de l'eau contenant un
antifongique pour viter qu'ils ne pourrissent.

c) L'aration :
Les bois respirent, ils sont conservs dans des sacs plastiques impermables l'eau mais pas aux
gaz. Cela vite les fermentations et le dveloppement de microorganismes anarobiotes

2) Stratification :
On fait des stratifications (couches) de boutures dans des caisses que l'on arrose et qu'on
laisse en chambre chaude pour la rhizogense.

a) L'humidit : (figure 15 page 3) Les racines se sont formes uniquement en contact

avec la sciure humide. Rle donc indispensable de l'humidit. La rhizogense est lie une
modification locale du mtabolisme et non un tat particulier de l'ensemble de la bouture. L'eau
semble mme tre le stimulus initial qui modifie localement le mtabolisme cellulaire. L'eau
provoquerait une reprise intense de l'activit enzymatique qui permettrait aux facteurs C de l'assise
rhizogne de ragir aux facteurs hormonaux provenant des bourgeons. Certaines techniques sont
parfois appliques pour facilit la pntration de l'eau (corage, torsion des bois, maillochage
(crasement des bois avec un maillet).Enfin on peut aussi retarder la dessiccation en arrosant, buter
les boutures et les ombrer.

b) La temprature :
La stratification des boutures se fait entre 25 et 30C. La vitesse d'mission des racines pour un
mme degr d'humidit dpend de la temprature. La temprature agit sur la vitesse de
rhydratation et les vitesses de divisions cellulaires.
 c) Aration :
Elle entrane la formation de cale favorable la greffe mais dfavorable pour la formation des
racines.

d) La lumire :
L'obscurit n'empche pas le dbourrement et favorise la croissance des racines et vite
l'vaporation de l'eau au niveau des stomates (pour peu que les plants aient des feuilles). Cependant
l'obscurit ne doit pas applique trop longtemps car sans photosynthse, la plante s'tiole. La
lumire est donc rapidement indispensable aux jeunes feuilles. L'laboration de substances par
les feuilles remplacent les rserves des bois de boutures et permettent le dveloppement de la
plante.

e) Application d'hormones exognes :

L'mission des racines peut-tre favorise par l'application d'auxines la base des boutures qui
favorisent et renforcent l'action des hormones endognes scrtes par la bouture.

III Obtention de boutures fructifres :

La croissance des rameaux et des racines est privilgie dans les premiers temps par la
plante. On peut cependant obtenir des grappes sur des rameaux de cinq mois.
C'est de la biotechnique appele boutons fructifres. Cela consiste obtenir en continu en
laboratoire des grappes tout le long de l'anne en contrlant les conditions de dveloppement de
chaque organe. Tout ceci a permis galement de mettre en vidence les stimulateurs naturels et les
voies hormonales responsables de la fructification d'un plant.

A) Prlvement et conservation des sarments :

Toutes les varits ne sont pas favorables la bouture. Par exemple on prend des boutures de
Cabernet Sauvignon pendant la phase de pr dbourrement (dbut
Janvier Mars). Les inflorescences (figure n1,65 page 8) sont
inities au cours du cycle vgtatif prcdant la taille (inities au
printemps de l'anne prcdente). On conserve les boutures en
chambre froide et en atmosphre humide.

B) Prparation des boutures :

La partie mdiane des sarments (zone la plus propice au
bouturage) est conserve en conservant 2 mrithalles (entre
nuds), en tenant compte du rythme morphologique de croissance
des rameaux. On a donc 3 nuds. N0 n'a pas de vrille tandis que
N1 et N2 en ont. Les vrilles sont par exemple les crampons de la
vigne vierge. Il y a un meilleur aptitude la rhizogense au niveau
d'un nud sans vrille. On limine aussi tous les bourgeons sauf
celui de N2. On rhydrate le sarment 24h 30C puis on
abandonne les boutures sur la paillasse pour qu'elles vacuent le
trop plein d'eau. La base des boutures est plonge dans une
solution d'AIB 1000ppm ce qui favorisent la rhizogense.
Chaque bouture est ensuite plante dans de la laine de roche humidifie.

C) Dveloppement des racines :

La formation des racines se fait dans une enceinte climatise dont l'atmosphre est
maintenue 4C au niveau du bourgeons pour viter le dbourrement. La base des boutures est
maintenue 30, 25C. Au bout de 4 ou 5 semaines les racines se forment sans dbourrement, on
transfert les boutures dans une serre.
D) Dbourrement, croissance et fructification : (poly page 5 figure n16)
Chaque bouture est dans un pot individuel dont le substrat est du sable et de la perlite (sable
siliceux). Les plants sont arross au goutte goutte (150ml de solution/jour) et soumis une
photopriode de 15h de jour et 9h de nuit. L'apparition de la bourre est la manifestation de la
croissance du bourgeon (reprise du cycle vgtatif). Stade B de Baggiolini qui se produit 1 2
semaines aprs la mise en serre. Suppression du bourgeon secondaire et l'on retire les feuilles
jusqu'au stade E.
Dans un cas normal, les cytoquinines produites par les raines ne sont pas assez prsentes
pour viter de perdre la grappe. Il faut aussi dtourner galement les cytoquinines vers la grappe
d'o la dfoliation et la suppression de l'apex.
On obtient une inflorescence pseudo terminale que l'on laisse voluer par les diffrents
stades phnologiques d'une grappe normale.
Apparition de boutons floraux.
Floraison
Fcondation nouaison (formation des grains de raisin sur la grappe)
Vraison (gonflement du raisin, dbut de sa coloration)
Maturit (raisin mr)

Son alimentation est ralise par les rserves de la bouture et la photosynthse ralise par les
feuilles du premier entre cur qui se dveloppe (rameau secondaire issue d'un prompt bourgeon).
On conserve donc le prompt face l'inflorescence de faon ce qu'il porte 4 feuilles puis l'on
supprime l'apex du ce rameau.

(Calendrier du bouturage page 7).