Aktivts Biokimia Ulfah

AKTIVITAS BIOKIMIA MIKROORGANISME
BAB I
PENDAHULUAN
A. Latar Belakang
Dalam kehidupan, mahluk hidup memerlukan energy yang
diperoleh dari proses metabolisme. Metabolisme terjadi pada semua
mahluk hidup termasuk kehidupan mikroba. Pada hewan atau tumbuhan
yang berderajat tinggi enzim yang di sediakan untuk keperluan
metabolisme reatif stabil, selama terjadi perkembangan individu memang
terjadi perubahan susunan enzim, akan tetapi pada pergantian
lingkungan perubahan itu sangat kecil. Metabolisme merupakan
serentetan reaksi kimia yang terjadi dalam sel hidup.
Dalam metabolisme ada dua fase yaitu katabolisme dan
anabolisme. Metabolime ini selalu terjadi dalam sel hidup karena di
dalam sel hidup terdapat enzim yang diperlukan untuk membantu
berbagai reaksi kimia yang terjadi. Suatu proses reaksi kimia yang terjadi
dapat menghasilkan energi dan dapat pula memerlukan energi untuk
membantu terjadinya reaksi tersebut.
ANDI ULFAH MAGEFIRAH RASYID JEHAN FADHILAH
150 270 163

B. Rumusan Masalah
Adapun rumusan masalah pada percobaan ini adalah bagaimana
melihat aktivitas biokimia mikroorganisme dari suatu sampel
C. Maksud Percobaan
Adapun maksud pada percobaan ini untuk mengetahui dan
memahami aktivitas biokimia mikroorganisme dari sampel dengan kode
SPSE.
D. Tujuan Percobaan
Adapun tujuan dilakukan percobaan ini untuk melihat aktivitas
biokimia mikroorganisme yang dilakukan dengan beberapa uji yaitu Uji
TSIA, Hidrolisis Glukosa, Hidrolisis sukrosa , Uji Voges Praskouer,
Hidrolisis Laktosa, Uji Motilitas , Metil red , Gelatin , Hidrolisis lemak,
Hidrolisis Karbohidrat, dan Uji katalase dari sampel mikroba dengan kode
SPSE.
E. Manfaat Percobaan
Adapun manfaat percobaan ini adalah mengetahui aktivitas
biokimia mikroorganisme berdasarkan Uji TSIA, Hidrolisis Glukosa,
Hidrolisis sukrosa , Uji Voges Praskouer, Hidrolisis Laktosa, Uji Motilitas ,
150 270 163

Metil red , Gelatin , Hidrolisis lemak, Hidrolisis Karbohidrat, dan Uji
katalase dari sampel mikroba dengan kode SPSE.
F. Kerangka Pikir
Uji TSIA
Hidrolisis Glukosa
Hidrolisis sukrosa
Uji Voges Praskouer
Sam Hidrolisis Laktosa Aktivitas

pel Biokimia
Mikroba Mikroorganisme
Uji Gelatin
Uji Motilitas
Hidrolisis lemak
Hidrolisis
Karbohidrat
Uji Katalase
Uji Metil Red
150 270 163

BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
A. Dasar Teori
Mikroorganisme seperti halnya juga makhluk hidup yang lainnya,
memerlukan energi untuk kelangsungan hidupnya. Energi ini diperoleh
dari lingkungan sekitarnya dalam bentuk senyawa kimia tertentu yang
dapat diurai. Kemampuan mikroorganisme untuk mengurai senyawa
tertentu dan mensintesa senyawa yang baru merupakan sifat khas masing-
masing mikroorganisme. Semua aktivitas metabolisme ini hamper
seluruhnya dapat diamati, bahkan dapat diukur kekuatannya. Reaksi
metabolisme ini berbeda untuk setiap mikroorganisme, sehingga hal ini
merupakan sifat yang sangat penting untuk mengidentifikasi
mikroorganisme (Anonim, 2009).
Metabolisme merupakan reaksi-reaksi kimia yang terjadi pada
makhluk hidup. Proses metabolisme dibedakan menjadi dua jenis yaitu
150 270 163

anabolisme dan katabolisme. Anabolisme (biosintesis) yaitu reaksi
biokimia yang merakit molekul-molekul sederhana menjadi molekul-
molekul yang lebih kompleks. Misalnya pembentukkan protein dari asam
amino. Secara umum proses anabolik membutuhkan energi. Sedangkan
katabolisme yaitu reaksi biokimia yang memecah atau menguraikan
molekul-molekul kompleks menjadi molekul-molekul yang lebih
sederhana. Proses katabolik melepaskan energi yang dibutuhkan oleh sel
(Waluyo, 2004).
Sifat metabolisme bakteri dalam uji biokimia biasanya dilihat dari
interaksi metabolit-metabolit yang dihasilkan dengan reagen-reagen
kimia. Selain itu dilihat kemampuannya menggunakan senyawa tertentu
sebagai sumber karbon dan sumber energi (Waluyo, 2004).
Aktivitas metabolisme tidak terlepas dari adanya enzim.
Berdasarkan tempat bekerjanya, bakteri memiliki juga jenis enzim yaitu
endoenzim dan eksoenzim. Endoenzim yaitu enzim yang bekerja dalam
sel. Sistem endoenzim selain bersifat anabolik dapat juga bersifat
katabolik.sedangkan eksoenzim yaitu enzim yang disekresikan ke luar sel
dan berdifusi ke dalam media. Sebagian besar eksoenzim bersifat
hidroliktik, yang berarti bahwa eksoenzim menguraikan molekul
150 270 163

kompleks menjadi molekul yang molekul-molekul yang lebih sederhana.
Molekul-molekul yang lebih kecil ini kemudian dapat memasuki sel dan
digunakan untuk kepentingan sel (Waluyo, 2004).
Berikut beberapa uji Biokimia yang digunakan untuk identifikasi
bakteri antara lain (http://hafizluengdaneun.multiply.com/journal/item/1/):
a. Indol
Media ini biasanya digunakan dalam indetifikasi yang cepat.
Hasil uji indol yang diperoleh negatif karena tidak terbentuk lapisan
(cincin) berwarna merah muda pada permukaan biakan, artinya
bakteri ini tidak membentuk indol dari tryptopan sebagai sumber
carbon, yang dapat diketahui dengan menambahkan larutan kovacs.
Asam amino triptofan merupakan komponen asam amino yang lazim
terdapat pada protein, sehingga asam amino ini dengan mudah dapat
digunakan oleh mikroorganisme akibat penguraian protein.
b. MR-VP
1. Uji MR
Hasilnya positif, terjadi perubahan warna menjadi merah
setelah ditambahkan methyl red. Artinya, bakteri ini
mengahasilkan asam campuran (metilen glikon) dari proses
150 270 163

fermentasi glukosa yang terkandung dalam medium MR-VP.
Terbentuknya asam campuran pada media akan menurunkan pH
sampai 5,0 atau kurang, oleh karena itu bila indikator metil
ditambahkan pada biakan tersebut dengan pH serendah itu maka
indikator tersebut menjadi merah. Hal ini menandakan bahwa
bakteri ini peragi asam campuran.
2. Uji VP
Hasilnya negatif, karena tidak terbentuk warna merah pada
medium setelah ditambahkan -napthol dan KOH, artinya hasil
akhir fermentasi bakteri ini bukan asetil metil karbinol (asetolin).
c. SIM
Hasil yang diperoleh pada uji ini adalah positif, hal ini terlihat
adanya penyebaran yang berwarna putih seperti akar disekitar
inokulasi. Hal ini menunjukan adanya pergerakan dari bakteri yang
diinokulasikan, yang berarti bahwa bakteri ini memiliki flagella. Dari
uji juga terlihat ada warna hitam, yang berarti bakteri ini menghasilkan
Hidrogen Sulfit (H2S).
d. Simmons Citrate
150 270 163

Hasil uji sitrat yang diperoleh negatif, yang ditandai dengan
tidak terjadinya perubahan warna. Artinya bakteri ini tidak
mempunyai enzim sitrat permiase yaitu enzim spesifik yang membawa
sitrat ke dalam sel.
e. TSIA
Pada uji TSIA warna media slant berubah menjadi merah
karena bakteri bersifat basa ini menandakan bahwa bakteri ini tidak
memfermentasi laktosa dan sukrosa.
Pembentukan gas positif ini hasil dari fermentasi H2 dan Co2
dapat dilihat dari pecahnya dan terangkatnya agar. Pembentukan H2S
positif ditandai dengan adanya endapan berwarna hitam, endapan ini
terbentuk karena bakteri mampu mendesulfurasi asam amino dan
methion yang akan menghasilkan H2S, dan H2S akan bereaksi dengan
Fe++ yang terdapat pada media dan menghasilkan endapan hitam.
Pada media daerah butt media berubah berwarna kuning ini
menandakan bakteri memfermentasi glukosa. Media ini biasanya
digunakan untuk membedakan Salmonella dan Shigella dengan bakteri
150 270 163

Gram negatif bentuk batang lainnya bedasarkan pola fermentasi
penghasil hydrogen sulfide. Untuk pengamatan pola-pola pengunaan
karbohidrat. TSIA agar mengadung laktosa dan sukrosa dalam
konsentrasi 1%, glukosa 0,1% dan phenol red sebagai indicator yang
menyebabkan perubahan warna dari merah orange menjadi kuning
dalam suasana asam. TSIA juga mengandung natrium trisulfat, yaitu
suatu substrat untuk penghasil H2S, ferro sulfat menghasilkan FeS
(precipitat), berwarna hitam untuk membedakan bakteri H2S dengan
bakteri-bakterinya.
f. Uji gula-gula (Glukosa, Laktosa, Sukrosa dan Manitol)
Uji ini dilakukan untuk mengindetifikasi bakteri yang mampu
memfermentasikan karbohidrat. Pada uji gula-gula hanya terjadi
perubahan warna pada media glukosa yang berubah menjadi warna
kuning, artinya bakteri ini membentuk asam dari fermentasi glukosa.
Pada media glukosa juga terbentuk gelembung pada tabung durham
yang diletakan terbalik didalam tabung media, artinya hasil
fermentasi berbentuk gas.
Metabolisme pada bakteri pada dasarnya seperti yang terjadi pada
sel-sel organisme lain secara umum. Reaksi metabolisme terdiri atas dua
150 270 163

proses yang berlawanan. Metabolisme pertama adalah sintesis
protoplasma dan penggunaan energi disebut anabolisme. Metabolisme
kedua yaitu suatu proses oksidasi substrat yang diikuti perolehan energi
disebut katabolisme (Hadioetoma, 1993).
Keadaan yang mempengaruhi aktivitas enzim adalah (Fardiaz,
1992) :
1. Konsentrasi enzim
2. Konsentrasi substrat
3. pH
4. Suhu
Setiap enzim berfungsi optimal pada pH dan temperatur tertentu.
Suhu yang sangat rendah dapat menghentikan aktivitas enzim tetapi tidak
menghancurkannya. Aktivitas enzim diatur melalui 2 cara yaitu (Irianto,
2006) :
1. Pengendalian katalisis secara langsung dan
2. Pengendalian genetik.
Mekanisme enzim katalase memecah H2O2 yaitu saat melakukan
respirasi, bakteri menghasilkan berbagai macam komponen salah satunya
H2O2. Bakteri yang memiliki kemampuan memecah H2O2 dengan enzim
katalase maka segera membentuk suatu sistem pertahanan dari toksik
150 270 163

H2O2 yang dihasilkannya sendiri. Bakteri katalase positif akan memecah
H2O2 menjadi H2O dan O2 dimana parameter yang menunjukkan adanya
aktivitas katalase tersebut adalah adanya gelembung-gelembung oksigen
seperti pada percobaan yang telah dilakukan. Dengan enzim katalase,
H2O2 diurai dengan reaksi sebagai berikut (http://dunia-
mikro.blogspot.com/search/label/foodtechnology):
2H2O2 --> 2H2O + O2
B. Uraian Sampel/Bahan
1. Air suling (Ditjen POM, 1979)
Nama Resmi : Aqua Destillata
Sinonim : Aquades, air suling
RM / BM : H2O / 18,02
Pemerian : Cairan jernih, tidak berbau, tidak berasa
dan tidak mengandung bahan kimia yang
dapat membahayakan tubuh
Kegunaan : Sebagai pelarut
2. Alfa Naftol (Ditjen POM 1979)
Nama resmi : Alfa Naftol
150 270 163

Nama lain : Alfa naftol
Pemerian : Hablur; tidak berwarna atau putih, atau
serbuk habur putih atau khas.
Kelarutan : Larut dalam 5 bagian etanol (95%) P
Rumus molekul : C10H7OH
Penyimpanan : Dalam wadah tertutup rapat
Kegunaan : Sebagai pereaksi
3. Alkohol (Ditjen POM, 1979)
Nama Resmi : Aethanolum
Sinonim : Etanol, alkohol
RM / BM : C2H6O / 46,07
Rumus Bangun : CH3-CH2-OH
Pemerian : Cairan tak berwarna, jernih, mudah
menguap dan mudah bergerak, bau khas,
rasa panas, mudah terbakar dengan
memberikan nyala biru yang tidak berasap
150 270 163

Kelarutan : Sangat mudah larut dalam air, dalam
kloroform P dan dalam eter P
Kegunaan : Sebagai antiseptik
4. H2O2 (Ditjen POM 1979)
Nama resmi : Hydrogenperoxydum
Nama lain : Hidrogenperoksida
Pemerian : Tidak berwarna, hampir tidak berbau,
mudah terurai jika berhubungan dengan
zat organik.
Rumus kimia : H2O2
Berat molekul : 34,02
5. Iodium (Ditjen POM 1979)
Nama resmi : Iodidum
Nama lain : Iodum
150 270 163

Pemerian : Keping atau butir, berat, mengkilat, seperti
logam; hitam kelabu; bau khas
Kelarutan : Larut dalam lebih kurang 3500 bagian air,
dalam 13 bagian etanol (95%) P, dalam lebih
kurang 80 bagian gliserol P, dan dalam
lebih kurang 4 bagian karbondisulfida P;
larut dalam kloroform P dan dalam
karbontetraklorida P
Rumus kimia : I2
Berat molekul : 253,8
Kegunaan umum : Antiseptik; anti jamur
6. KOH (Ditjen POM 1979)
Nama resmi : Kalii Hydroxidum
Nama lain : Kalium hidroksida
Pemerian : Massa berbentuk batang, bongkahan, putih,
sangat mudah meleleh basa
Kelarutan : Larut dalam 1 bagian air dalam 3 bagian
etanol (95%) P
150 270 163

Rumus molekul : KOH
7. Metil Merah (Ditjen POM, 1979)
Nama resmi : Metil Red
Nama lain : Metil merah
Pemerian : Merah tua atau hablur lembayung
Kelarutan : Agak sukar larut dalam air, larut dalam
etanol (95%) P
Kegunaan : Sebagai indikator
BAB III
KAJIAN PRAKTIKUM
A. Alat yang Digunakan
Autoklaf, botol spray, cawan petri, erlenmeyer, enkas, inkubator,
labu Erlenmeyer, lampu spiritus, ose bulat, ose lurus, oven, rak tabung,
spoit 1 dan 10 ml, dan tabung reaksi.
B. Bahan yang Dipakai
150 270 163

Alkohol 70 %, aquadest steril, Galatin , H 2O2, 3%, iodium, kapas,
kertas label, Metil merah , Milk agar , MR-VP , SIM, Starch agar , dan TSIA.
C. Cara Kerja
1. Uji katalase
a. Diteteskan beberapa tetes larutan H2O2 3% di atas gelas objek
b. Diinokulasikan mikroba uji dengan ose, diletakkan di dalam
tetesan H2O2
c. Diamati adanya gelembung-gelembung O2 di dalam tetesan H2O2
2. Uji metil merah
a. MR-VP 10 ml
b. Dimasukkan dalam 2 tabung reaksi
c. Diambil sampel bakteri, diinokulasi
d. Diinkubasi 5 hari
e. Diteteskan 5 tetes indikator metil merah
f. Dimasukkan dalam 2 tabung tadi
g. Didiamkan selamac10 menit
h. Diamati perubahan yang terjadi
i. Bila berwarna berwarna merah (+) dan kuning (-).
3. Voges proskauer
a. 10 ml medium MR-VP
b. Diinkubasi 1 x 24 jam, satu hari
c. Ditambahkan 0,2 ml alfanaftol, 0,6 ml KOH indikator
d. Didiamkan selama10 menit
e. Diamati perubahan yang terjadi
f. Bila berwarna merah (+), kuning (-)
4. Hidrolisis glukosa, laktosa dan sukrosa
a. Disiapkan 3 tabung reaksi
b. Glukosa fenol red (tabung I) berisi tabung durham
c. Laktosa fenol red (tabung II) berisi tabung durham
d. Sukrosa fenol red (tabung III) berisi tabung durham
e. Diinokulasi biakan baktei ke ketiga tabung
f. Diinkubasi selama 1 x 24 jam
g. Diamati perubahan yang terjadi
150 270 163

h. Bila berwarna kurang merah (+), merah sekali (-)

5. Uji Pencarian gelatin
a. Dimasukkan medium gelatin 10 ml ke dalam 2 tabung reaksi
b. Diinokulasi dengan 1 ose bakteri
c. Diinkubasi selama 1 x 24 jam
d. Dimasukkan ke dalam lemari es selama 30 menit
e. Didiamkan 30 menit
f. Diamati perubahan yang terjadi
6. Uji TSIA
a. 10 ml TSIA
b. Dibiarkan memadat posisi miring
c. Diinokulasi secara goresan dan tusuk
d. Diinkubasi 1 x 24 jam pada suhu 37OC
e. Diamati
7. Uji Hidrolisis lemak dan karbohidrat
a. Disiapkan 10 ml Milk agar dan Starch agar dalam cawan petri
b. Dibiarkan memadat
c. Diinokulasi secara gores
d. Diinkubasi 2 x 24 jam di inkubator pada suhu 37oC
e. Diamati ada tidaknya daerah bening di sekeliling biakan pada
cawan petri yang berisi Milk Agar.

f. Untuk medium Starch Agar ditambahkan beberapa tetes iodium
dan diamati terjadinya bagian yang tidak berwarna di sekitar
biakan.
8. Uji Motilitas
a. Dimasukkan medium SIM ke dalam tabung reaksi
b. Dibiarkan sampai memadat
c. Diinokulasi 1 ose bakteri secara lurus
d. Diinkubasi selama 1 x 24 jam pada suhu 37OC.
e. Diamati.
150 270 163

BAB IV
KAJIAN HASIL PRAKTIKUM
A. Hasil Praktikum
1. Gambar Pengamatan
LABORATORIUM MIKROBIOLOGI FARMASI

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUSLIM INDONESIA
1
2 3 4 5 6

Mikroba: SPSE
150 270 163
Keterangan :
1. Uji TSIA (+)
2. Hidrolisis Glukosa (+)
3. Hidrolisis sukrosa (+ )
4. Voges Praskouer (-)
5. Hidrolisis Laktosa (+)
6. Uji Motilitas (-)
LABORATORIUM MIKROBIOLOGI FARMASI

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUSLIM INDONESIA
1 2 5
4
Mikroba: SPSE
Keterangan :
1. Metil red (+)
150 270 163

2. Gelatin (+)
3. Hidrolisis lemak (+)
4. Hidrolisis Karbohidrat (+)
5. Uji katalase (+)
2. Tabel hasil Pengamatan
No
Pengamatan Mikroba Uji
1 Uji TSIA +
2 Hidrolisis Glukosa +
3 Hidrolisis sukrosa +
4 Uji Voges Praskouer -
5 Hidrolisis Laktosa +
6 Uji Motilitas -
7 Metil red +
8 Gelatin +
9 Hidrolisis lemak +
10 Hidrolisis Karbohidrat +
11 Uji katalase +
150 270 163

B. Pembahasan
Metabolisme merupakan reaksi-reaksi kimia yang terjadi pada
makhluk hidup. Proses metabolisme dibedakan menjadi dua jenis yaitu
anabolisme dan katabolisme. Anabolisme (biosintesis) yaitu reaksi
150 270 163

biokimia yang merakit molekul-molekul sederhana menjadi molekul-
molekul yang lebih kompleks. Misalnya pembentukkan protein dari asam
amino. Secara umum proses anabolik membutuhkan energi. Sedangkan
katabolisme yaitu reaksi biokimia yang memecah atau menguraikan
molekul-molekul kompleks menjadi molekul-molekul yang lebih
sederhana. Proses katabolik melepaskan energi yang dibutuhkan oleh sel.
Tujuan dilakukannya percobaan ini adalah untuk melihat aktivitas
biokimia mikroorganisme yang dilakukan dengan beberapa uji yaitu Uji
TSIA, Hidrolisis Glukosa, Hidrolisis sukrosa , Uji Voges Praskouer,
Hidrolisis Laktosa, Uji Motilitas , Metil red , Gelatin , Hidrolisis lemak,
Hidrolisis Karbohidrat, dan Uji katalase dari sampel mikroba dengan kode
SPSE.
Uji katalase dilakukan untuk melihat adanya gelembung-
gelembung O2 yang terdapat pada sampel yang telah ditetesi pereaksi
H2O2.. Uji gelatin dilakukan untuk melihat organisme penghasil enzim
gelatinase yang mana memperlihatkan lingkaran di sekitar koloni.
Sedangkan uji motilitas dilakukan untuk meerlihat adanya penyebaran
yang berwarna putih seperti akar disekitar inokulasi. Serta Uji TSIA
dilakukan untuk melihat terbentuknya H2S pada daerah butt dan slant.
150 270 163

Pada uji Metil Red hasilnya positif, terjadi perubahan warna menjadi
merah setelah ditambahkan methyl red. Artinya, bakteri ini
mengahasilkan asam campuran (metilen glikon) dari proses fermentasi
glukosa yang terkandung dalam medium MR-VP. Terbentuknya asam
campuran pada media akan menurunkan pH sampai 5,0 atau kurang, oleh
karena itu bila indikator metil ditambahkan pada biakan tersebut dengan
pH seredndah itu maka indikator tersebut menjkadi merah. Hal ini
menandakan bahwa bakteri ini peragi asam campuran.
Pada uji hidrolisis lemak dan karbohidrat hasilnya positif, hal ini
karena adanya zona hambatan yang terdapat disekeliling biakan pada
cawan petri. Sedangkan Pada uji katalase hasilnya juga positif, karena
adanya gelembung gas O2 yang terdapat pada H2O2 setelah disuspensikan
dengan sampel mikroba.
Uji hidrolisis Glukosa, Laktosa, dan Sukrosa dilakukan untuk
mengindetifikasi bakteri yang mampu memfermentasikan karbohidrat.
Pada uji ini ketiganya uji tersebut hasilnya positif, artinya bakteri ini
membentuk asam dari fermentasi glukosa, laktosa dan sukrosa.
Pengujian dengan metil merah dilakukan untuk mengetahui
apakah bakteri dapat membentuk asam sedemikian banyaknya sehingga
150 270 163

dapat mengubah indikator metil merah menjadi merah. Menurut Voges
Proskauer pengujian yang dilakukan adalah untuk mengetahui apakah
dalam proses pertumbuhan organisme terbentuk asetil-metilkarbinol
sebagai produk antara (intermediate product) dan proses metabolisme
karbohidrat.
Dari hasil pengamatan, maka diperoleh pada uji Voges Praskouer
hasilnya negatif, karena tidak terbentuk warna merah pada medium
setelah ditambahkan -napthol dan KOH, artinya hasil akhir fermentasi
bakteri ini bukan asetil metil karbinol (asetolin).
Pada uji motilitas hasil yang diperoleh pada uji ini adalah negatif,
hal ini terlihat tidak adanya penyebaran yang berwarna putih seperti akar
disekitar inokulasi. Hal ini menunjukan tidak adanya pergerakan dari
bakteri yang diinokulasikan, yang berarti bahwa bakteri ini tidak memiliki
flagella.
Pada uji TSIA warna media slant berubah menjadi merah karena
bakteri bersifat basa ini menandakan bahwa bakteri ini tidak
memfermentasi laktosa dan sukrosa. Pembentukan gas positif ini hasil
dari fermentasi H2 dan Co2 dapat dilihat dari pecahnya dan terangkatnya
agar. Pembentukan H2S positif ditandai dengan adanya endapan
150 270 163

berwarna hitam, endapan ini terbentuk karena bakteri mampu
mendesulfurasi asam amino dan methion yang akan menghasilkan H2S,
dan H2S akan bereaksi dengan Fe++ yang terdapat pada media dan
menghasilkan endapan hitam.
Hasil yang diperoleh pada percobaan uji aktivitas biokimia ini
adalah uji TSIA (+), hidrolisis glukosa (+), hidrolisis sukrosa (+ ), uji voges
praskouer (-), hidrolisis laktosa (+), uji motilitas (-), metil red (+), gelatin
(+), hidrolisis lemak (+), hidrolisis karbohidrat (+), dan uji katalase (+).
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
150 270 163

A. Kesimpulan
Dari hasil pengamatan, maka dapat disimpulkan bahwa uji TSIA
(+), hidrolisis glukosa (+), hidrolisis sukrosa (+ ), uji voges praskouer (-),
hidrolisis laktosa (+), uji motilitas (-), metil red (+), gelatin (+), hidrolisis
lemak (+), hidrolisis karbohidrat (+), dan uji katalase (+)
B. Saran
Diharapkan praktikan teliti dan hati-hati dalam mengambil
spesimen sebab dikhawatirkan medium agarnya terambil sehingga
preparat bakteri dan kapangnya tidak terlihat.
DAFTAR PUSTAKA
150 270 163

Anonim. 2009. Tuntunan Praktikum Mikrobiologi Farmasi. Universitas

Muslim Indonesia. Makassar.
Ditjen POM. 1979. Farmakope Indonesia Edisi III. Depkes RI. Jakarta.
Fardiaz, Srikandi. 1992. Analisis Mikrobiologi Pangan. PT. Raja Grafindo

Persada. Jakarta.
Hadioetoma, R. S., 1985. Mikrobiologi Dasar dalam Praktek Teknik dan

Prosedur Dasar Laboratorium. PT. Gramedia. Jakarta.
Irianto, Koes. 2006. Mikrobiologi Menguak Dunia Mikroorganisme Jilid I.

Yrama Widia. Bandung.
Waluyo, L. 2004. Mikrobiologi Umum. Universitas Muhamadiyah Malang.

Malang.
http://dunia-mikro.blogspot.com/search/label/foodtechnology
http://hafizluengdaneun.multiply.com/journal/item/1/
LAMPIRAN
150 270 163

SKEMA KERJA
1. Uji katalase
Diteteskan bebrapa tetes larutan H2O2 3% di atas gelas objek
Diinokulasikan mikroba uji dengan ose, diletakkan di dalam tetesan H 2O2
Diamati adanya kelembung-gelembung O2 di dalam tetesan H2O2
2. Uji metil merah
MR-VP 10 ml
Dimasukkan dalam 2 tabung reaksi
Ambil sampel bakteri, diinokulasi
Diinkubasi 5 hari
Teteskan 5 tetes indikator metil merah
Dimasukkan dalam 2 tabung tadi
Diamkan 10 menit
Diamati perubahan terjadi
Positif (merah), negatif (kuning)
150 270 163

3. Voges proskauer
10 ml medium MR-VP
Diinkubasi 1 x 24 jam, satu hari
Tambahkan 0,2 ml alfanaftol, 0,6 ml KOH indikator
Diamkan 10 menit
Diamati
Merah (positif, kuning (negatif)
4. Hidrolisis glukosa, laktosa dan sukrosa
3 tabung
Glukosa fenol red (tabung I) berisi tabung durham
Laktosa fenol red (tabung II) berisi tabung durham
Sukrosa fenol red (tabung III) berisi tabung durham
Diinokulasi biakan baktei ketiga tabung
Diinkubasi 1 x 24 jam
Diamati
Kurang merah (+), merah sekali (-)
5. Uji Pencarian gelatin
Medium gelatin 10 ml dalam 2 tabung reaksi
150 270 163

Diinokulasi bakteri 1 ose
Diinkubasi 1 x 24 jam
Dimasukkan ke lemari es 30 menit
Didiamkan 30 menit
Diamati
6. Uji TSIA
10 ml medium TSIA
Dibiarkan memadat posisi miring
Diinokulasi secara goresan dan tusuk
Diinkubasi 1 x 24 jam pada suhu 37OC
Diamati
7. Uji Hidrolisis lemak dan karbohidrat
Disiapkan 10 ml Milk agar dan Starch agar dalam cawan petri
Dibiarkan memadat
Diinokulasi secara gores
Diinkubasi 2 x 24 jam di inkubator pada suhu 37oC
Diamati milk agar
Untuk medium Starch ditambahkan beberapa tetes iodium
150 270 163

Diamati
8. Uji Motilitas
Medium SIM dimasukkan ke dalam tabung reaksi
Dibiarkan sampai agak memadat
Diinokulasi 1 ose bakteri secara lurus
Diinkubasi selama 1 x 24 jam pada suhu 37OC.
Diamati.
150 270 163

Aktivts Biokimia Ulfah

Hochgeladen von

Dokumentinformationen

Originaltitel

Copyright

Verfügbare Formate

Dieses Dokument teilen

Dokument teilen oder einbetten

Freigabeoptionen

Stufen Sie dieses Dokument als nützlich ein?

Sind diese Inhalte unangemessen?

Copyright:

Verfügbare Formate

Aktivts Biokimia Ulfah

Hochgeladen von

Copyright:

Verfügbare Formate

AKTIVITAS BIOKIMIA MIKROORGANISME

Dalam kehidupan, mahluk hidup memerlukan energy yang

diperoleh dari proses metabolisme. Metabolisme terjadi pada semua

mahluk hidup termasuk kehidupan mikroba. Pada hewan atau tumbuhan

yang berderajat tinggi enzim yang di sediakan untuk keperluan

metabolisme reatif stabil, selama terjadi perkembangan individu memang

terjadi perubahan susunan enzim, akan tetapi pada pergantian

lingkungan perubahan itu sangat kecil. Metabolisme merupakan

serentetan reaksi kimia yang terjadi dalam sel hidup.

Dalam metabolisme ada dua fase yaitu katabolisme dan

anabolisme. Metabolime ini selalu terjadi dalam sel hidup karena di

dalam sel hidup terdapat enzim yang diperlukan untuk membantu

dapat menghasilkan energi dan dapat pula memerlukan energi untuk

membantu terjadinya reaksi tersebut.

ANDI ULFAH MAGEFIRAH RASYID JEHAN FADHILAH

150 270 163

Adapun rumusan masalah pada percobaan ini adalah bagaimana

melihat aktivitas biokimia mikroorganisme dari suatu sampel

Adapun maksud pada percobaan ini untuk mengetahui dan

memahami aktivitas biokimia mikroorganisme dari sampel dengan kode

Adapun tujuan dilakukan percobaan ini untuk melihat aktivitas

biokimia mikroorganisme yang dilakukan dengan beberapa uji yaitu Uji

TSIA, Hidrolisis Glukosa, Hidrolisis sukrosa , Uji Voges Praskouer,

Hidrolisis Laktosa, Uji Motilitas , Metil red , Gelatin , Hidrolisis lemak,

Adapun manfaat percobaan ini adalah mengetahui aktivitas

biokimia mikroorganisme berdasarkan Uji TSIA, Hidrolisis Glukosa,

Hidrolisis sukrosa , Uji Voges Praskouer, Hidrolisis Laktosa, Uji Motilitas ,

ANDI ULFAH MAGEFIRAH RASYID JEHAN FADHILAH

150 270 163

Metil red , Gelatin , Hidrolisis lemak, Hidrolisis Karbohidrat, dan Uji

katalase dari sampel mikroba dengan kode SPSE.

Uji Voges Praskouer

Sam Hidrolisis Laktosa Aktivitas

Uji Metil Red

ANDI ULFAH MAGEFIRAH RASYID JEHAN FADHILAH

150 270 163

Mikroorganisme seperti halnya juga makhluk hidup yang lainnya,

memerlukan energi untuk kelangsungan hidupnya. Energi ini diperoleh

dari lingkungan sekitarnya dalam bentuk senyawa kimia tertentu yang

dapat diurai. Kemampuan mikroorganisme untuk mengurai senyawa

masing mikroorganisme. Semua aktivitas metabolisme ini hamper

seluruhnya dapat diamati, bahkan dapat diukur kekuatannya. Reaksi

metabolisme ini berbeda untuk setiap mikroorganisme, sehingga hal ini

merupakan sifat yang sangat penting untuk mengidentifikasi

mikroorganisme (Anonim, 2009).

Metabolisme merupakan reaksi-reaksi kimia yang terjadi pada

makhluk hidup. Proses metabolisme dibedakan menjadi dua jenis yaitu

ANDI ULFAH MAGEFIRAH RASYID JEHAN FADHILAH

150 270 163

anabolisme dan katabolisme. Anabolisme (biosintesis) yaitu reaksi

biokimia yang merakit molekul-molekul sederhana menjadi molekul-

molekul yang lebih kompleks. Misalnya pembentukkan protein dari asam

amino. Secara umum proses anabolik membutuhkan energi. Sedangkan

katabolisme yaitu reaksi biokimia yang memecah atau menguraikan

molekul-molekul kompleks menjadi molekul-molekul yang lebih

sederhana. Proses katabolik melepaskan energi yang dibutuhkan oleh sel

Sifat metabolisme bakteri dalam uji biokimia biasanya dilihat dari

interaksi metabolit-metabolit yang dihasilkan dengan reagen-reagen

kimia. Selain itu dilihat kemampuannya menggunakan senyawa tertentu

sebagai sumber karbon dan sumber energi (Waluyo, 2004).

Aktivitas metabolisme tidak terlepas dari adanya enzim.

Berdasarkan tempat bekerjanya, bakteri memiliki juga jenis enzim yaitu

endoenzim dan eksoenzim. Endoenzim yaitu enzim yang bekerja dalam