Anexos do Mdulo II

95
 MORFOMETRIA do Trypanosoma cruzi

o procedimento tcnico onde so tiradas as medidas dos parasitos, em centmetros,

com o auxlio de rgua e curvmetro, das imagens dos parasitos que foram desenhadas
com auxlio de uma cmara clara acoplada ao microscpio.

Antes do incio dos desenhos necessrio fazer uma escala onde o trabalho ser realizado.
Para isso, desenha-se um trao equivalente a 10 m com base numa lmina micromtrica
(1 mm/ 0,1), observando a combinao ocular x objetiva em que os desenhos sero feitos.
O trao obtido medido com uma rgua para a deduo do fator de multiplicao, a partir
do qual se far a converso de cm em milmetros (cm > mm). Aps o desenho, no papel,
dever ser feita a mensurao com o curvmetro pela parte mediana do parasita de acordo
com o segmento que interesse.

10 m

A B C

Escala micromtrica (objetiva) onde cada trao

D
Fontes: http: www.rc.unesp.br/igce/petrologia/nardy/
mooculartipo.html e www.gisiberica.com/curvimetros/
cu008.6.jpg.
Figura 14: Desenho sugestivo de T.cruzi feito com a
utilizao de cmara clara (A), escala micromtrica (B),
curvmetro (C) e esquema com as diferentes medidas
morfomtricas (D).
maior corresponde a 10 m e que dever ser copiada
no papel atravs da cmara clara para o clculo do
fator de converso.
C .............. comprimento de corpo sem o agelo livre
FL ............ comprimento do agelo
PN............ distncia que vai da extremidade
................. posterior ao meio do ncleo
L .............. largura do corpo (sem membrana
................. ondulante)
NA ........... distncia do meio do ncleo a
................. extremidade anterior
T .............. comprimento do corpo incluindo o
................. agelo
PK ............ distncia que vai da extremidade
................. posterior ao meio do cinetoplasto
KN ........... distncia do meio do cinetoplasto ao
................. meio do ncleo
kDNA ... dimetro do cinetoplasto

96
 Parte posterior
do parasito
Ncleo

Cinetoplasto

Parte anterior
do parasito

Ncleo
Parte posterior
do parasito

Cinetoplasto

Parte anterior
do parasito
B

Fotos de Carlos Jos de Carvalho Moreira.

Desenhos adaptados do site http://webs.cb.uga.edu/~striepen/medpara/tryps3.ppt
por Carlos Jos de Carvalho Moreira e Angela C. V. Junqueira.

Figura 15: Morfologia de uma forma epimastigota (A) e de uma forma tripomastigota (B).

97
 ASPECTOS MORFOLGICOS do T.cruzi e do T.rangeli

Formas tripomastigotas de T.cruzi, em lminas de sangue de indivduos com suspeita

de malria.

Fotografias de Maria Celeste D. Spata e ngela C. V. Junqueira.

Figura 16: Morfologia de formas tripomastigotas sanguneas.

Formas de T.cruzi, em lminas de tubo digestivo de triatomneos infectados

experimentalmente.

A B C

Fotografias de Maria Celeste D. Spata.

Figura 17: Morfologia de formas tripomastigota (A) e epimastigotas (B, C).

98
 Formas de Trypanosoma rangeli, em lmina de sangue, glndula salivar e hemolinfa de
triatomneos infectados experimentalmente.

A B C

Fotografias de Maria Celeste D. Spata.

Figura 18: Morfologia de formas do T. rangeli no hemolinfa (A) e nas fezes (B, C).

ASPECTOS MORFOLGICOS DE FORMAS SANGNEAS

1A 1B

2A 2B

3A 3B

Fotografias de Angela C. V. Junqueira.

Figura 19: Formas trofozotas de Plasmodium falciparum (1A, 1B), trofozotas de Plasmodium vivax (2A, 2B) e
tripomastigotas de Trypanosoma cruzi (3A, 3B).

99
 AVALIAO DA PESQUISA DE DCA NOS MUNICPIOS QUE TIVERAM
MICROSCOPISTAS/LABORATORISTAS CAPACITADOS PARA A DETECO
DE T.cruzi NO EXAME DIRETO

Avaliao - 1 - AVALIAO ATRAVS DOS RESULTADOS DAS LEITURAS DAS

LMINAS DOS MICROSCOPISTAS DE MALRIA

Antes de ser implantada de forma ampla a vigilncia da doena de Chagas compartilhada

com a vigilncia da Malria na Amaznia Brasileira, como parte de um estudo piloto,
estamos estudando a possibilidade de que seja avaliada junto com os responsveis pelo
Programa de Malria do Ministrio da Sade, a possibilidade de que os dados da Ficha
de Noticao/SINAN/Malria sejam compartilhados com as seguintes informaes
adicionais na referida cha:
47. Realizada pesquisa de Trypanosoma sp. na lmina:
1.Sim 2.No
48. Caso sim, resultado do exame:
1. Negativo 2.T.cruzi (Tc) 3. T.rangeli (Tr) 4. Infeco mista (Tc+Tr)
5. Dvida na identicao da espcie do gnero Trypanosoma
49. Parasitemia em cruzes
1_ < +/2 (menor que meia cruz); 2_ +/2 (menor que meia cruz)
3_ + (uma cruz); 4_ ++ (duas cruzes); 5_ +++ (trs cruzes);
6_ ++++ (quatro cruzes)
50. No caso de infeco mista (Tc+Tr) a parasitemia em cruzes:
1_ T.cruzi
1_ < +/2 (menor que meia cruz); 2_ +/2 (menor que meia cruz)
3_ (uma cruz); 4_ ++ (duas cruzes); 5_ +++ (trs cruzes);
6_ ++++ (quatro cruzes)
----------------------------------------------------------------------------------------
2_ T.rangeli
1_ < +/2 (menor que meia cruz); 2_ +/2 (menor que meia cruz)
3_ + (uma cruz); 4_ ++ (duas cruzes); 5_ +++ (trs cruzes);
6_ ++++ (quatro cruzes)

100
 Atravs da anotao dos dados acima na Ficha de Noticao/SINAN/Malria, ser
possvel um aumento na noticao dos casos de doena de Chagas aguda (DCA). Essa
informao seria disponibilizada para a equipe do Programa Nacional de Controle da
Doena de Chagas (PNCDCh/SVS/MS) permitindo um estudo da busca passiva dos
casos de DCA na Amaznia Brasileira. Um caso ndice dever desencadear a busca ativa
de outros casos positivos, pois a ele podem estar associados outros tantos casos de Doena
de Chagas Aguda (DCA) como de Doena de Chagas Crnica (DCC). Essa investigao
dever se iniciada, imediatamente, atravs da pesquisa direta dos comunicantes do caso
ndice. Ressaltamos que para isso ocorra, a equipe do Programa de Malria dever ser
consultada e aprovar tal incluso.

Avaliao -2 - AVALIAO ATRAVS DOS LABORATORISTAS RESPONSVEIS

PELA LEITURA DA CONTAGEM ESPECFICA DE LEUCCITOS NAS PROVAS
HEMOGRAMA

1. Realizada pesquisa de Trypanosoma sp. na lmina para contagem especca de leuccitos:

1.Sim 2.No
2. Caso sim, resultado do exame:
1. Negativo 2. T.cruzi (Tc) 3. T.rangeli (Tr) 4. Infeco mista (Tc+Tr)
5. Dvida na identicao da espcie do gnero Trypanosoma
3. Parasitemia em cruzes
1_ < +/2 (menor que meia cruz); 2_ +/2 (menor que meia cruz)
3_ + (uma cruz); 4_ ++ (duas cruzes); 5_ +++ (trs cruzes);
6_ ++++ (quatro cruzes)
4. No caso de infeco mista (Tc+Tr) a parasitemia em cruzes:
1_ T.cruzi
1_ < +/2 (menor que meia cruz); 2_ +/2 (menor que meia cruz)
3_ + (uma cruz); 4_ ++ (duas cruzes); 5_ +++ (trs cruzes);
6_ ++++ (quatro cruzes)
----------------------------------------------------------------------------------------
2_ T.rangeli
1_ < +/2 (menor que meia cruz); 2_ +/2 (menor que meia cruz)
3_ (uma cruz); 4_ ++ (duas cruzes); 5_ +++ (trs cruzes);
6_ ++++ (quatro cruzes)

101
 Avaliao - 3 - AVALIAO ATRAVS DOS LABORATORISTAS QUE EFETUARAM
OUTRAS PROVAS PARASITOLGICAS DIRETAS DE CONCENTRAO: Mtodo de
Strout ( ) ou Microhematcrito ( ) ou QBC ( ).

1.Realizada pesquisa de Trypanosoma sp anteriormente na gota espessa

1.Sim 2.No
2.Caso sim, qual o resultado da gota espessa:
1. Negativo 2. T.cruzi (Tc) 3. T.rangeli (Tr) 4. Infeco mista (Tc+Tr)
5. Dvida na identicao da espcie do gnero Trypanosoma
3. Qual o resultado das provas parasitolgicas diretas de concentrao
1. Negativo 2. Positivo para Tripanosoma sp

Para conrmar a identicao dever ser efetuada uma distenso (esfregao)

do material para identicao da espcie

102
MONTAGEM PERMANENTE DE LMINAS CORADAS UTILIZANDO
ENTELLAN (*)

1) Aps nalizao de procedimento de colorao, pegar com um basto de vidro

aproximadamente uma gota de Entellan (ou mais, dependendo da quantidade de material
sobre a lmina) e depositar sobre o esfregao. Tomar o cuidado de colocar o entellan de
uma s vez, formando uma gota nica, homognea e sem bolhas;

2) Pegar uma lamnula limpa em lcool-ter 1:1 e coloc-la sobre a gota de Entellan.
Essa etapa tambm deve ser realizada com cuidado, procurando depositar a lamnula de
forma mais paralela possvel em relao lmina e de uma vez s, evitando ao mximo a
formao de bolhas;

3) Em seguida, a lmina dever ser colocada na horizontal em bancada ou suporte sem

inclinao, para que o Entellan se espalhe lentamente por capilaridade ao longo de toda
a lamnula. Deve-se aguardar a lmina estar completamente seca para ser analisada em
microscpio tico (aumento de 1000 vezes). Isso demora mais de 24 horas;

4) Se a amostra corada ocupar grande parte do comprimento da lmina empregar uma

lamnula retangular (tipo a usada na tcnica de uorescncia indireta). importante que
todo o espao ocupado pela amostra biolgica sobre a lmina que coberto com uma
lamnula;

5) Se o Entellan endurecer, colocar um pouco de xilol dentro do frasco e a seguir deixar

aquecer por algumas horas;

6) Vericar o tipo de corante usado na colorao, pois no caso do Entellan ele tende a
descorar alguns corantes, tipo eosina azul de metileno.

(*) = Caso no disponha de Entellan, empregar blsamo do Canad sinttico;

103
 CLCULO DE FATOR DE CORREO DE UM MICROSCPIO (Brener, 1961)

MATERIAL

- Microscpio objetiva de 40x

- Lamnula - tamanho 22x22

- Pipeta de Salhi ou pipeta automtica dividida em 5l

- Lmina tamanho comum

METODOLOGIA

Colocar 5l de sangue, com pipeta de Salhi (ou micropipeta automtica) na lmina e

sobre esta lamnula 22x22. Distribuir esse sangue por toda a lamnula. Contar quantos
campos existem de um lado ao outro da lamnula, no sentido horizontal e vertical, pelo
menos 3 vezes. Feito isto tiraremos a mdia.

Ex: Contagem horizontal = 49 campos microscpicos

Contagem vertical = 49 campos microscpicos

Aps achar a mdia, no caso 49, calcular o total de campos presentes por toda a
lamnula.

49 x 49 = 2401 (total de campos)

Como a contagem feita em 50 campos, dividir o nmero total de campos da lamnula

por 50, com a nalidade de achar quantos 50 campos existem na lamnula toda. Logo
2401 / 50 = 48,02

No exemplo acima o fator de correo 48.

CONTAGEM DO NMERO DE PARASITOS

Aps vericar o nmero de formas tripomastigotas em 50 campos microscpicos,

multiplicar este valor pelo fator de correo.

Ex: 1 forma tripomastigota em 50 campos = 1 x 48 = 48 formas

1 trao = 10 campos / 5 traos= 50 campos

104
CLCULO DA FORA CENTRFUGA RELATIVA (FCR/G) A PARTIR DO
NMERO DE ROTAES POR MINUTO (RPM) OU CLCULO DO NMERO
DE ROTAES POR MINUTO (RPM) A PARTIR DA FORA CENTRFUGA
RELATIVA (FCR/G)

1) Clculo do raio mximo:

Em primeiro lugar temos que conhecer com exatido o raio de rotao da centrfuga, que
depende do tipo de rotor utilizado. Nem todos os fabricantes de centrfuga informam esta
medida no manual do aparelho. Neste caso, devemos efetuar os procedimentos descritos
a seguir:

Como a gura ilustra, o raio deve ser medido desde o centro do rotor at o nal dos
tubos, quando em rotao. A seta indica o raio mximo (R max), que corresponde medida
do centro do eixo at a parte mais externa dos tubos.

Raio
mximo

Centro do rotor Parte externa dos tubos

(raio mximo)

Fonte: Princpios Bsicos da Centrifugao

(Modificada do site: www.coleparmer.com/techinfo/techinfo.asp?htmlfile=basiccentrifugation_PO.htm&ID=911).

Figura 20: A figura acima exemplifica diferentes tipos de rotores: mvel ou horizontal (caso 1),
em ngulo fixo (caso 2) e vertical (caso 3).

105
 2) Clculo de g ou rpm a partir de duas variveis conhecidas:

A seguir demonstraremos duas possibilidades de fazer as converses atravs do uso de

uma escala denominada nomograma de fora centrfuga ou atravs da utilizao de uma
frmula matemtica.

2.1) Utilizando o nomograma (*) de fora centrfuga:

Aps a mensurao do raio de rotao da centrfuga, podemos utilizar o nomograma de

fora centrfuga impresso abaixo, onde as escalas A, C e B representam respectivamente
raio, g (fora centrfuga relativa - gravidades) e rpm (velocidade - revolues por minuto).

A B C

Fonte: Campbell, J M; Campbell J B.

Matemtica de Laboratrio: aplicaes mdicas e biolgicas So Paulo: Ed. Roca, 1986, 348 p.

Figura 21: Nomograma.

106
 No exemplo do nomograma: para encontrar a fora centrfuga relativa (g) a uma
distncia radial de 10 cm do centro de rotao (10 cm de raio), ao se operar a centrfuga a
uma velocidade de 3000 rpm, temos que colocar uma rgua na tabela, conectando o ponto
de 10 cm na escala de rotao do raio com o ponto de 3000 rpm na escala de velocidade.
Veja o ponto de interseco na escala de fora centrfuga relativa. No nosso caso, ser igual
a 1000 g (vide pgina anterior).

(*) A nomograa um processo de clculo usado pela engenharia para a resoluo de problemas
matemticos utilizando grcos chamados de nomogramas. Estes so traados a partir de um
conjunto de eixos convenientemente dispostos, em forma ordenada, permitindo resolver grupos
de problemas semelhantes.

2.2) Utilizando a frmula matemtica:

FCR (fora centrfuga relativa ou g) = 0,00001118 x r x N2, onde:

FCR (fora centrfuga relativa) = g

r = raio de rotao (cm)

N = velocidade de rotao (rpm)

Fonte: Campbell, J M; Campbell J B. Matemtica de Laboratrio: aplicaes mdicas e biolgicas.

So Paulo: Ed. Roca, 1986, 348 p.

Exemplo 1: tendo o valor de rpm e querendo calcular o valor de g

No caso do exemplo acima, em que utilizamos o nomograma, onde temos o raio igual a
10 cm e o nmero de rotaes por minuto igual a 3.000, podemos calcular o valor de g pela
frmula. Ento:

g (FCR) = 0,00001118 x 10 x N2

g = 0,0001118x (3.000) 2

g = 0,0001118 x 9.000.000

g = 1.006,2, ou seja, g = ~ 1.000, que foi o valor encontrado no nomgrafo, no caso do

exemplo anterior.

107
 Exemplo 2: tendo o valor de g e querendo calcular o valor de rpm

O Manual Prtico de Subsdio Noticao Obrigatria no SINAN (anexo 2, pgina 20),

que explica a tcnica de micro hematcrito, recomenda centrifugar 75 l de sangue
incoagulvel em tubo capilar, entre 5 e 10 minutos a 160 g em microcentrfuga. Podemos
aplicar a frmula para achar o valor correspondente a rotaes por minuto (rpm), partindo
do princpio de que a centrfuga s apresente escala para rpm. Supondo que o raio da minha
centrfuga seja de 15 cm, teramos:

160 = 0,00001118 x 15 x N2

160 = 0,0001677 x N2

160 / 0,0001677 = N2

954.084,67 = N2 N2 = 954.084,67

N= 954.084,67, ento, N= 976,77 rpm (~ 980 rpm).

108
MTODO TRADICIONAL DE AVALIAO DE PARASITEMIA
SEMIQUANTITATIVA (EM CRUZES) PARA MALRIA QUE PODE SER
EMPREGADO NA CONTAGEM DO T.cruzi

Utilizar os mesmos critrios estabelecidos para a contagem de Plasmodium sp para as

lminas onde forem detectadas formas tripomastigotas sanguneas, enumerados abaixo:

1) Nmero de campos a examinar = 100.

2) Nmero inferior a 40 parasitos nos 100 campos examinados: anotar o nmero

encontrado. Por exemplo: 37 formas tripomastigotas sanguneas.

3) Quando o nmero total de parasitos contados situar-se entre 40 e 60 parasitos por

100 campos, registrar: 1/2 (meia cruz).

4) A partir de um parasito por campo, o resultado ser registrado como uma, duas, trs
ou quatro cruzes, conforme o quadro a seguir:

Parasitos Nmero de campos Cruzes

contados microscpicos
40 a 60 100 +

1 1 +

2-20 1 ++

21-200 1 +++

+ 200 1 ++++

Figura 21: Exemplo de Contador

manual de clulas.

Adaptado de MINISTRIO DA SADE. SECRETARIA DE VIGILNCIA EM SADE 2005. Manual de diagnstico

laboratorial da malria (Serie A. Normas e Manuais Tcnicos). Ministrio da Sade, Secretaria de Vigilncia em
Sade. Braslia: Ministrio da Sade, 116 p.

Observaes:

Para a contagem ter um valor semiquantitativo de suma importncia que a lmina contenha
uma distribuio uniforme do sangue.

109
 PROCEDIMENTO DE PUNO DIGITAL PARA COLETA DE SANGUE
VISANDO O PREPARO DE GOTA ESPESSA OU ESFREGAO

1) Calar luvas de ltex descartveis e limpar vigorosamente a pele do local de puno

(parte lateral do segundo ou terceiro dedo da mo, lbulo da orelha ou, em lactentes,
o dedo grande do p ou calcanhar) com gaze ou algodo embebido em lcool a 70%;
posteriormente, enxugar com gaze ou algodo secos;

2) Comprimir o dedo suavemente (como em ordenha) para obter outra gota de sangue
esfrica sobre a pele seca. Cuidar para no tocar o ponto de sada do sangue;

3) Segurar a lmina rmemente pelas bordas da extremidade onde se encontra a

etiqueta de identicao;

4) Aproximar a lmina ao dedo do paciente (pela face onde consta a identicao) at

tocar o alto da gota de sangue (evitando o contato com a pele). Se a quantidade de sangue
for insuciente, pode-se colocar outra gota ao lado da primeira;

5) Colocar a lmina, com a face para cima, na superfcie de trabalho;

6) Com o canto e os primeiros 5 mm da borda maior da segunda lmina, espalhar o

sangue formando um retngulo de tamanho e espessura adequado (aproximadamente 1,
2 cm2);

7) Limpar o local puncionado com gaze ou algodo embebido em lcool a 70% e, se

necessrio, pression-lo;

8) Secar a lmina (em temperatura ambiente, ar morno, caixa com lmpada ou estufa),
cuidando para que o sangue no se xe por calor excessivo;

9) Para iniciar a pr-colorao, esperar at que o sangue esteja totalmente seco. Caso
contrrio pode haver perda total de material.

Fonte: Adaptado de MINISTRIO DA SADE. SECRETARIA DE VIGILNCIA EM SADE

2005. Manual de diagnstico laboratorial da malria (Serie A. Normas e Manuais Tcnicos).
Ministrio da Sade, Secretaria de Vigilncia em Sade. Braslia: Ministrio da Sade, 116p.

110
Fonte: RPUBLIQUE DMOCRATIQUE DU CONGO/MINISTRE DE LA SANT/PROGRAMME NATIONAL DE
LUTTE CONTRE LE PALUDISME (apud MINISTRIO DA SADE. SECRETARIA DE VIGILNCIA EM SADE.
Manual de diagnstico laboratorial da malria (Srie A. Normas e Manuais Tcnicos). Ministrio da Sade,
Secretaria de Vigilncia em Sade. Braslia: Ministrio da Sade, 2005. 116 p.

Figura 23: Procedimento para coleta de sangue.

111
 PRINCIPAIS PROCEDIMENTOS DE BIOSSEGURANA EM LABORATRIOS
DE PARASITOLOGIA:

Devemos sempre ter em mente que o laboratrio um ambiente hostil, onde convivem
no mesmo espao equipamentos, microorganismos, pessoas, reagentes in amveis,
solues, papis, etc.

As boas prticas de biossegurana em laboratrios de Parasitologia so condutas que

tentam evitar os casos de Infeces Adquiridas no Laboratrio (IAL). As pessoas mais
expostas a riscos de IAL so as que trabalham nos laboratrios clnicos e de pesquisa, por
causa do manuseio de materiais potencialmente infectantes em larga escala.

Abaixo esto relacionadas algumas das principais normas para evitarmos acidentes
laboratorias e consequentemente nos contaminarmos:

1) REGRAS GERAIS:

Antes de entrar no laboratrio prenda o cabelo, coloque uma cala comprida de

tecido resistente; calce sapatos fechados anti-derrapantes (de preferncia sapatos de
couro) e vista uma camisa de algodo grosso (gura 26);
Antes de comear as atividades laboratoriais, coloque os Equipamentos de
Proteo Individual (EPI) adequados. Eles sero relacionados mais a frente;
Lave as mos antes e imediatamente aps o manuseio de materiais qumico e
biolgico independente do contato direto;
Nunca pipete com a boca. S use pipetadores automticos ou manuais (ex.: pras de
borracha);
Na tentativa de identicar um produto qumico, nunca inale o contedo de frascos
que tenham perdido o rtulo;
Nunca coma, beba, ou prepare alimentos dentro do laboratrio;
Nunca fume no laboratrio;
Nunca guarde alimentos em geladeiras e congeladores utilizados para
armazenamento de material biolgico e/ou qumico e vice-versa;
Se voc apresentar alguma ferida na mo, no pulso ou em qualquer outra parte do
corpo que venha a car exposta durante o trabalho no laboratrio no trabalhe com
material patognico ou qumico;
Evite transportar materiais qumicos e/ou biolgicos com agentes patognicos
vivos de um lugar para outro no laboratrio. Isso aumenta o risco de acidentes. Use
caixas apropriadas para esse m (gura 24).

112
 Fonte: Informe do IOC; Publicao do Instituto Oswaldo Cruz/Fiocruz - Ano XII - n0 44- 30/11/2006.

Figura 24: Tipo de caixa selecionada durante o curso de transporte de material biolgico,
desenvolvido pela CIBio/IOC.

OBS: O transporte de amostras biolgicas gera dois tipos de preocupaes: a primeira

relacionada manuteno da integridade das mesmas: a) temperatura de transporte e o tempo;
b) as condies de biossegurana de quem realiza o transporte e daqueles que possam vir a ter
contato eventual com o material transportado.

2) PRINCIPAIS EQUIPAMENTOS DE PROTEO INDIVIDUAL (EPIs)

Dispositivos ou equipamentos utilizados para proteo individual do prossional e na

preveno de acidente nas atividades de trabalhos executados em setores e unidades que
oferecem riscos de acidentes.

2.1) GORRO

O gorro a medida de proteo que evita a contaminao dos cabelos por aerossis,
micropartculas constitudas por microorganismos, matria orgnica e por fragmentos
expelidos pela boca.

Abaixo temos algumas observaes para o correto uso dos gorros:

Prender o cabelo;
Cobrir todo o cabelo com o gorro;
Deixar as orelhas protegidas pelo gorro;
Evitar brincos;
Ao retirar o gorro, puxe-o pela parte superior central e descarte-o no recipiente de
resduos.

113
 2.2) VISEIRA FACIAL ou CULOS DE PROTEO

Devem ter a melhor transparncia possvel no distorcendo as imagens. Protegem os

olhos e o rosto contra espirros decorrentes de procedimento que envolva material molhado,
radiao de fontes eletromagnticas (laser, microondas, ultravioleta, raios x e radiao
trmica), fadiga visual associado luz muito forte, fraca ou reexo (Figura 25).

Abaixo temos algumas observaes para o correto uso de viseiras ou culos de

proteo:

O visor facial deve ser lavado, aps o trabalho, com gua e sabo se houver sangue ou
secreo visvel, aps cada procedimento, enxaguando abundantemente com gua
corrente;

Alm da lavagem com gua e sabo, deve-se fazer uma desinfeco com produto
qumico adequado ao material que constitui o visor ou dos culos. Aos mais friveis,
que sofrem avaria com glutaraldedo ou lcool a 70%, utilizar gua oxigenada;

Esses procedimentos devem ser realizados protegendo as mos com luvas.

Fotografia de Carlos Jos de C. Moreira.

Figura 25: Uso do gorro, culos de proteo e mscara.

114
 2.3) LUVAS

As luvas servem como barreira de proteo, prevenindo contra a contaminao das

mos durante a manipulao de material contaminado.

O uso das luvas no substitui a necessidade da lavagem das mos porque elas podem
apresentar pequenos orifcios no aparentes ou danicar-se durante o uso, podendo
contaminar as mos quando removidas.

Abaixo temos algumas observaes para o correto uso das luvas:

Usar luvas de ltex sempre que houver chance de contato com sangue, udos do
corpo, trabalho com microrganismos e animais de laboratrio;

No usar luvas fora da rea de trabalho;

No abrir portas usando luvas;

No atender telefone usando luvas;

Nunca reutilizar as luvas, e sempre descart-las de forma segura.

2.4) MSCARA

Podem ter diferentes constituies. Oferecem proteo contra partculas, substncias

cidas, substncias alcalinas, aldedo e para outras substncias txicas.

Mscaras descartveis com paredes duplas ou triplas so fundamentais para a proteo

contra a inalao ou ingesto de aerossis pelos prossionais e na transmisso de
microorganismos.

2.5) JALECOS

So usados para formar uma barreira de proteo e reduzir o risco de transmisso de

microrganismos. Previnem a contaminao das roupas, protegendo a pele da exposio a
sangue e uidos corpreos, salpicos e derramamentos de material infectado.

Devem sempre ser de mangas longas, confeccionados em algodo ou bra sinttica (no
inamvel).

115
 Abaixo temos algumas observaes para o correto uso de jalecos:

Uso de jaleco permitido somente nas reas de trabalho;

Os jalecos nunca devem ser colocados no armrio onde so guardados objetos

pessoais;

Devem ser descontaminados antes de serem lavados.

Fotografia de Carlos Jos Carvalho Moreira.

Figura 17: Morfologia de formas tripomastigota (A) e epimastigotas (B, C).

OBS.: Devemos trabalhar seguindo todas as recomendaes citadas anteriormente, pois um

agente infeccioso pode estar presente em diversos uidos corporais como sangue, licor, urina,
smem, etc.

116
 3) CONCEITOS E NORMAS REFERENTES DESINFECO, ESTERILIZAO E
LIMPEZA;

3.1) DESINFECO:

Processo fsico ou qumico que inativa ou destri a maioria dos microrganismos

patognicos de objetos inanimados e superfcies, com exceo de esporos bacterianos;

3.2) ESTERILIZAO:

Processo fsico ou qumico que destri todas as formas de vida microbiana, ou seja,
bactrias nas formas vegetativas e esporuladas, fungos e vrus.

3.3) LIMPEZA:

Processo sistemtico e contnuo para a manuteno do asseio ou, quando necessrio,

para a retirada de sujidade de uma superfcie.

Obs: RDC 302/2005, da ANVISA.

Item 5.8 - Limpeza, Desinfeco e Esterilizao.

5.8.1 - O laboratrio clnico e o posto de coleta laboratorial devem possuir instrues de limpeza,
desinfeco e esterilizao, quando aplicvel, das superfcies, instalaes, equipamentos, artigos
e materiais.

5.8.2 - Os saneantes e os produtos usados nos processos de limpeza e desinfeco devem ser
utilizados segundo as especicaes do fabricante e estarem regularizados junto a ANVISA/MS,
de acordo com a legislao vigente.

Em caso de dvidas sobre algum tipo de procedimento recomendamos o site: http://www.

anvisa.gov.br

4) PRINCIPAIS COMPOSTOS DESINFETANTES

4.1) LCOOIS

So mais utilizados os lcoois etlico e isoproplico. So bactericidas, eliminando tambm

o bacilo da tuberculose, os fungos e os vrus. No tem efeito contra os esporos bacterianos.
Sua concentrao ideal est entre 60 e 90% por volume. Causam a desnaturao das
protenas quando na presena de gua.

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 4.2) COMPOSTOS BICLORADOS

Geralmente usam-se os hipocloritos de sdio ou clcio. Tem amplo espectro de

antimicrobiano e ao rpida. Alguns fatores levam sua decomposio, interferindo
em suas propriedades: temperatura, concentrao, presena de luz e pH. Acredita-se que
estes produtos agem por inibio de algumas reaes enzimticas dentro das clulas, por
desnaturao de protenas e por inativao do cido nuclico.

4.3) FORMALDEDO

usado como desinfetante ou esterilizante nas formas gasosa ou lquida. comumente

encontrado como formalina, sendo esta sua diluio aquosa a 37%. A formalina um
potente bactericida, fungicida, agindo tambm contra vrus, bacilos da tuberculose e
esporos bacterianos. Tem uso limitado por ser um composto cancergeno.

4.4) PERXIDO DE HIDROGNIO (gua oxigenada)

um composto bactericida, esporicida, fungicida, eliminando tambm os vrus.

Agem produzindo radical hidroxila livre que ataca a membrana lipdica, o DNA e outros
componentes essenciais vida da clula. usado como desinfetante em concentrao de
3%, para superfcies no orgnicas. No usado como esterilizador, pois tem atividade
inferior do glutaraldedo.

4.5) FENIS

Em altas concentraes, os fenis agem como veneno protoplasmtico, penetrando

e rompendo a parede celular por precipitao de protenas. Em baixas concentraes,
causa morte celular por inativao dos sistemas enzimticos essenciais manuteno
da integridade da parede celular. So usados para desinfeco do ambiente hospitalar,
incluindo superfcies de laboratrios e artigos mdico-cirrgicos.

4.6) COMPOSTOS IODADOS

Geralmente composto por iodo e um agente solubilizante. So exemplos de compostos

iodados a polivinilpirrolidona iodada, e o iodophor (Biocid ). Tem ao desinfetante,
bactericida, viricida, fungicida e esporicida. O composto iodado penetra a parede celular
dos microorganismos, rompendo a estrutura e a sntese das protenas e do cido nuclico.

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 4.7) GLUTARALDEDO

O dialdedo saturado largamente utilizado como desinfetante de alto nvel e

quimioesterilizador. Sua soluo aquosa necessita de pH alcalino para eliminar esporos
bacterianos. Age alterando os cidos desoxirribonuclico e ribonuclico, bem como a
sntese protica dos microorganismos. mais comumente usado como desinfetante de
alto nvel para equipamento mdico. txico, e, portanto, o pessoal que o manuseia deve
se proteger usando luvas e culos.

4.8) COMPOSTOS QUATERNRIOS DE AMNIA

So bons agentes de limpeza, porm podem ser inativados por material orgnico, no
sendo mais, por esta razo, utilizados como desinfetantes ou anti-spticos. Tem sua ao
antimicrobiana, atribuda inativao de enzimas produtoras de energia, desnaturando
protenas essenciais das clulas e rompendo a membrana celular. So recomendados para
sanitarizar superfcies como cho, mveis e paredes (meio hospitalar).

Observaes:

I - Quando iniciar um novo procedimento imagine os possveis casos de acidente, como evit-los
e o que fazer caso eles ocorram. Isso torna o socorro muito mais rpido e eciente, podendo salvar
vidas.

II- Ponderamos que todas as informaes acima devero ser complementadas com leitura dos
Manuais de Biossegurana e com um curso no referido tema.

III- O bom senso associado com o conhecimento tcnico tanto das medidas de biossegurana
quanto dos mecanismos de transmisso dos agentes infecciosos e parasitrios so extramente
importantes, tanto para saber praticar a proteo individual como a dos que nos rodeiam.

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