Bioensayos en Efluentes

Los bioensayos como herramienta de evaluacin de la
toxicidad de los efluentes industriales en Uruguay.
Informe final
Lic. Sandra Castro Scarone

Departamento de Normalizacin Tcnica - Direccin Nacional de Medio Ambiente (DINAMA)
Dr. Julio Csar Espnola Moltedo

Laboratorio de Higiene Ambiental - Intendencia Municipal de Montevideo (IMM)
Q.F. Diana Mguez Carams

Sector Anlisis Qumico rea Productos Qumicos, Aguas Minerales y Residuales
Laboratorio Tecnolgico del Uruguay (LATU)
M.Sc. Federico Viana Matturro

Seccin Oceanologa Facultad de Ciencias Universidad de la Repblica (UdeLAR)
2002
Coordinacin tcnica:
Lic. Sandra Castro Scarone Direccin Nacional de Medio Ambiente &
Q.F. Diana Mguez Laboratorio Tecnolgico del Uruguay
Asesoramiento tcnico:
Dra. Alicia Ronco - Centro de Investigaciones del Medio Ambiente (CIMA)
Universidad de la Plata (Argentina)
Financiacin:
Centro Internacional de Investigaciones para el Desarrollo Canad (CIID / IDRC)
Administracin del Proyecto:

Laboratorio Tecnolgico del Uruguay
Informacin Institucional
Direccin Nacional de Medio Ambiente (DINAMA)
Sector Ecotoxicologa Departamento de Normalizacin

Tcnica Divisin Evaluacin de la Calidad Ambiental
Rincn 575 EP Montevideo CP 11000

Telefax: (598 2) 915 14 80
sacas@hotmail.com
Intendencia Municipal de Montevideo (IMM)
Seccin Bioensayos Laboratorio de Higiene Ambiental
Camino al Faro s/n Montevideo

Tel: (598 2) 711 24 06
jespinola@pcarretas.imm.gub.uy
Laboratorio Tecnolgico del Uruguay (LATU)
rea Aguas Minerales y Residuales - Sector Anlisis

Qumico Gerencia de Anlisis y Ensayos
Avenida Italia 6201 Montevideo CP 11500

Tel: (598 2) 601 37 24 int. 318 Fax: (598 2) 601 85 54
dmiguez@latu.org.uy
Facultad de Ciencias (Universidad de la Repblica)
Seccin Oceanologa Depto. de Ecologa
Igu 4225 Montevideo CP 11400

Tel: (598 2) 525 86 18 int. 150 Fax: (598 2) 525 86 17
fviana@fcien.edu.uy
Equipo Tcnico
Direccin Nacional de Medio Ambiente
Tcnico de laboratorio: Lic. Gabriela Pistone
Tcnico de muestreo: Ayud.Tecn. Gerardo Balero
Intendencia Municipal de Montevideo
Tcnicos de laboratorio: Ing. Agr. Juan Carlos Tagliani

Tc.Lab. Mara Eugenia Echezarreta
Tcnicos de muestreo: Ing.Qum. Alicia Raffaele

Lic. Hernn Mndez
Bach.Ing.San. Rodrigo Gorriarn
Bach.Ing.San. Jos Scavone
Bach.Ing.San. Pablo Marset
Ing.Qum. Alejandra Bentez
Laboratorio Tecnolgico del Uruguay
Tcnicos de laboratorio: Q.F. Patricia Baklayan

Bach.Qum. Marcela Agero
Facultad de Ciencias
Tcnicos de laboratorio: Lic. Gustavo Saona

Bach. Agustn Carnikian
Centro de Investigaciones del Medio Ambiente (CIMA) Universidad de

la Plata.
Asesoramiento tcnico: Dra. Alicia Ronco

ndice
Pgina
1 Introduccin ................................................................................... 1
2 Objetivos ....................................................................................... 6
2.1 Objetivo general ............................................................................ 6
2.2 Objetivos especficos .................................................................... 6
3 Materiales y Mtodos .................................................................... 7
3.1 Efluentes industriales .................................................................... 7
3.2 Bioensayos .................................................................................... 10
3.2.1 Bacterias: sistema Microtox .......................................................... 11
3.2.2 Cnidarios: Hydra attenuata ........................................................... 12
3.2.3 Microcrustceos: Daphnia magna ................................................ 14
3.2.4 Peces: Cnesterodon decemmaculatus ......................................... 16
3.3 Anlisis de datos y expresin de resultados ................................. 18
4 Resultados y Discusin ................................................................. 21
4.1 Caracterizacin fisicoqumica de los efluentes ............................. 21
4.2 Sensibilidad de los bioensayos ..................................................... 22
4.3 Toxicidad y cumplimiento con la Normativa Nacional ................... 23
4.4 Tasa de Emisiones Txicas (TER) ............................................... 28
4.5 Toxicidad de los efluentes industriales segn el ndice PEEP...... 29
5 Conclusiones................................................................................. 32
6 Agradecimientos ........................................................................... 35
7 Bibliografa .................................................................................... 36
Anexo 1: Decreto 253/79 y modificativos ...................................... 38
Anexo 2: Programa del taller de transferencia tecnolgica ........... 42
Anexo 3: Procedimiento para la toma de muestras de efluentes

43
industriales ....................................................................................
Anexo 4:Medio de cultivo de Hydra attenuata .............................. 45

Los bioensayos como herramienta de evaluacin de la toxicidad de los efluentes industriales en Uruguay
1.- Introduccin
Los ensayos de toxicidad con organismos acuticos son mtodos

reconocidos por la comunidad cientfica internacional y empleados en muchos
pases, como herramienta para el monitoreo y control de la contaminacin hdrica.
Es usual encontrar trabajos donde se considere una batera de bioensayos que
involucre una serie de organismos correspondientes a diversos niveles trficos. En
algunos casos dichos ensayos han sido internacionalmente validados y el
protocolo se encuentra estandarizado; tal es el caso de la bacteria Photobacterium
phosphoreum (Sistema Microtox) y la pulga de agua, Daphnia magna
(Environment Canada, 2000).
Uruguay cuenta con una reglamentacin que constituye el marco legal que
tiene por objeto regular los vertidos de efluentes lquidos. Tal es el caso del
Decreto 253/79 y modificativos, reglamentario del Cdigo de Aguas, donde se
establecen los estndares fisicoqumicos y microbiolgicos de vertido, segn el
punto de disposicin final, a saber: infiltracin al terreno, colector del alcantarillado
pblico o cursos de agua (Anexo 1). Sin embargo, la normativa vigente no
comprende informacin ecotoxicolgica, es decir informacin del posible efecto
txico causado a la biota acutica por los efluentes lquidos descargados en los
ecosistemas. Adems, la situacin actual de los efluentes industriales en el pas
con respecto a este tema, se desconocen.
En Uruguay existen antecedentes de trabajos independientes donde

bioensayos individuales con organismos acuticos, han sido aplicados para la
determinacin de la toxicidad de efluentes industriales, as como para determinar
el grado de contaminacin de aguas naturales que constituyen cuerpos receptores
de dichos efluentes. En tal sentido la DINAMA trabaja en la temtica desde 1998 y
ha fortalecido esta lnea de trabajo mediante la asesora tcnica de expertos del
Environment Canada, a travs de IDRC/CIID (Richard Scroggins, Graham van
Aggelen). A partir de entonces el Sector de Ecotoxicologa ha llevado a cabo un
1
trabajo de investigacin titulado Evaluacin de la toxicidad aguda de efluentes

industriales vertidos a ambientes acuticos en el Uruguay utilizando el Sistema
Microtox . A su vez, la Municipalidad de Montevideo ha llevado a adelante el
proyecto titulado Evaluacin participativa de la calidad del agua de Montevideo
Rural, instancia en la cual se realiz la puesta a punto y desarrollo operativo de
tcnicas bioanalticas para la evaluacin de toxicidad en aguas de riego, lavado de
hortalizas y bebida, de Montevideo rural. Este proyecto fue elaborado en el marco
de la convocatoria que el Centro Internacional de Investigaciones para el
Desarrollo de Canad (CIID/IDRC), realiz a los Gobiernos Municipales de
Amrica Latina y el Caribe sobre Estrategias Comunitarias y Ecosistmicas de
Evaluacin de Calidad de Agua (Bioensayos y Evaluacin de Toxicidad en Agua).
Por su parte, el LATU ha puesto a punto el bioensayo con Daphnia magna segn
el protocolo de Environment Canada y desarrolla ensayos respiromtricos de
efluentes industriales con bacterias. Por ltimo, la Facultad de Ciencias ha
desarrollado desde el ao 2000 el Proyecto titulado: Evaluacin de la toxicidad de
diversos efluentes industriales, en base a bioensayos con Cnesterodon
decemmaculatus (Pisces: Poeciliidae), que cont con la financiacin de la
Comisin Sectorial de Investigacin Cientfica (CSIC). Otros antecedentes a nivel
institucional consisten en bioensayos empleando la planta vascular Lemna gibba
aplicados a herbicidas. Paradiso, (2000).
Recientemente y dentro del marco de revisin de la normativa nacional, se

ha implementado una Red Interinstitucional de Bioensayos donde participa un
equipo tcnico multidisciplinario. En el ao 2000 la Red surgi con la participacin
de la DINAMA, LATU y Facultad de Ciencias; en el 2002 se incorpor la IMM.
2
Actualmente la Red est conformada por cuatro Instituciones:
Ministerio de Vivienda Ordenamiento Territorial y Medio Ambiente

Direccin Nacional de Medio Ambiente (MVOTMA DINAMA).
Organismo estatal cuyas funciones entre otras son la de control de vertidos

industriales lquidos, evaluacin de la calidad de aguas naturales y balneabilidad,
evaluacin de la contaminacin del aire y desarrollo de tcnicas analticas como
organismo de referencia a nivel nacional.
Intendencia Municipal de Montevideo (IMM).
Organismo departamental que lleva a cabo a travs de su Laboratorio de Higiene

Ambiental, el control de aguas potables, calidad de aguas naturales y
balneabilidad, disposicin final de residuos slidos industriales y comerciales,
control de efluentes industriales, calidad de aire y suelo.
Laboratorio Tecnolgico del Uruguay (LATU).
Organismo paraestatal cuyas principales actividades consisten en el control de

calidad de los productos de exportacin y apoyo tcnico al sector industrial. Posee
ensayos acreditados de acuerdo a la Norma ISO 17025 incluyendo los de calidad
de aguas y efluentes y sus servicios tienen certificacin ISO 9001.
Facultad de Ciencias - Universidad de la Repblica (UdeLAR).
Centro acadmico estatal de investigacin y docencia que en los ltimos aos ha

desarrollado una serie de trabajos de investigacin relacionados con la temtica
ambiental del Ro de la Plata.
3
En estos dos aos de vida de la Red se ha cosechado una importante

experiencia. Resultados preliminares del trabajo original fueron presentados y
discutidos en el Simposio de AOAC Internacional, en noviembre del 2001, en
virtud de la participacin en una Mesa Redonda de Ecotoxicologa. En particular
se expusieron los avances de la Red Interinstitucional de Ecotoxicologa a nivel
nacional y de la Red Internacional Watertox, con participacin de la Universidad
Nacional de La Plata (Argentina). Este mismo trabajo ha sido recientemente
seleccionado para integrar el catlogo cientfico de la exposicin E(ur)eka,
Innovacin ciencia y tecnologa para crear el futuro, que est desarrollndose
actualmente en Montevideo (25 de agosto-2 de noviembre, Palacio Legislativo,
Montevideo).
En el ao 2002 se desarroll en las instalaciones del LATU, en el marco de

este Proyecto, un Taller de Transferencia Tcnica para integrar a la batera de
bioensayos desarrollada hasta el momento, el ensayo con algas unicelulares
(Selenastrum capricornutum). El mismo fue desarrollado por el equipo de
investigacin del Centro de Investigaciones del Medio Ambiente (CIMA) de la
Universidad Nacional de La Plata (Argentina), miembro de la Red Internacional
Watertox, y cont con la participacin de tcnicos de las cuatro instituciones
nacionales (Anexo 2). En la actualidad la Red nacional se encuentra trabajando en
la puesta a punto de dicho bioensayo a fin de lograr a corto plazo, su
incorporacin a la batera de bioensayos. Dicho ensayo no se pudo incluir en este
trabajo, debido a que la transferencia se realiz en el mes de agosto, ya muy
avanzada la instrumentacin analtica.
En el pasado mes de setiembre, la Red fue invitada a participar en un Taller

de Bioensayos aplicados a Sedimentos. El mismo estuvo enmarcado dentro del
Proyecto de cooperacin cientfica argentino-uruguayo (FREPLATA) Proteccin
ambiental del Ro de la Plata y su Frente Martimo: prevencin y control de la
contaminacin y restauracin de hbitats, financiado por el GEF (Global
Environmental Facility), el Fondo Francs para el Medio Ambiente y el BID.
4
El Proyecto tiene como uno de sus objetivos la elaboracin de un Plan de Accin

Estratgica a largo plazo para el manejo ambiental de las zonas costeras.
La participacin de los representantes de la Red Interinstitucional de

Bioensayos tuvo un resultado muy satisfactorio. La ponencia conjunta realizada
fue bienvenida tanto por los representantes jurdicos ambientales y de organismos
de control nacionales, como por la delegacin Argentina. Tan buena fue la acogida
de esta propuesta de trabajo conjunto, que se tomar como ejemplo para
comenzar a caminar por el mismo rumbo en el pas vecino. A su vez, con fines
operativos para este proyecto, se comenz a trabajar en busca de generar una red
binacional, aunando esfuerzos en la implementacin de los mejores bioensayos
para evaluar la toxicidad de los sedimentos de dragado (sedimentos completos,
columna de agua y agua de poro). Asimismo, se sentaron las bases para incluir
los bioensayos en una normativa futura. En breve, se ejecutar un proyecto que
tendr el fin de evaluar cules bioensayos son ms vlidos para predecir el
impacto ambiental de los sedimentos de dragado.
La Red InterInstitucional gener un espacio comn para las cuatro

Instituciones, a los efectos de evaluar la toxicidad de los efluentes de origen
industrial, en forma conjunta y simultnea, es decir, aplicando una batera de
bioensayos con organismos acuticos representativos de los principales niveles
trficos de los ecosistemas acuticos naturales. Este trabajo constituye el primer
antecedente en nuestro pas.
5
2.- OBJETIVOS
2.1.- Objetivo general
Consolidar la Red Interinstitucional de Bioensayos para generar una base de datos

cientficos que permita incorporar aspectos biolgicos, a la normativa ambiental
nacional.
2.2.- Objetivos especficos
Evaluar la sensibilidad de una batera de bioensayos con organismos de diferente

complejidad biolgica y pertenecientes a diferentes niveles de la trama trfica,
frente a muestras de efluentes industriales lquidos, vertidos principalmente a los
cursos de agua naturales y al colector del alcantarillado pblico.
Elaborar un diagnstico preliminar de la situacin actual de los efluentes

industriales respecto a la toxicidad aguda sobre la biota acutica.
Categorizar los ramos de las industrias segn su grado de toxicidad aguda.
Integrar a la batera de bioensayos el ensayo crnico con un alga unicelular:

Selenastrum capricornutum.
6
3.- MATERIALES Y MTODOS
3.1 Efluentes industriales
Se analizaron 30 muestras simples de efluentes industriales finales lquidos,

vertidos a cursos naturales, a colector de alcantarillado pblico e infiltracin al
terreno. Las mismas fueron extradas por tcnicos de la IMM y la DINAMA, con
una frecuencia aproximada de dos muestras por semana, durante un perodo de
cuatro meses.
La seleccin de las industrias para la extraccin de las muestras se bas en

un estudio previo realizado en el marco del Plan de Saneamiento Urbano (fase III),
para la IMM (Consorcio Multiservice Seinco Tahal, 2001). Asimismo, se cont
con el asesoramiento complementario de la Unidad de Efluentes Industriales de la
IMM, y de la Divisin Control de Emisiones de la DINAMA MVOTMA.
En el citado trabajo se definen establecimientos de control prioritario, que

aportan en su conjunto ms del 80% de la contaminacin total. Este aporte es
realizado por un grupo de 20 establecimientos cuyos vertidos caracterizan los
siguientes porcentajes del total de vertimientos industriales en el departamento de
Montevideo:
el 60% del caudal total vertido
cerca del 90% del vertido de grasas y DBO
ms del 80% del vertido de sulfuros
ms del 90% del vertido de metales pesados
7
Las 30 industrias consideradas en el estudio se encuentran ubicadas en la

zona sur del pas. En el Perfil Nacional de la Gestin de las Sustancias Qumicas
redactado en el ao 1998 se describen un total de 304 industrias registradas en
DINAMA con autorizacin de desage industrial. Cerca del 50% de ellas se
encuentran ubicadas en el Departamento de Montevideo y el 65% estn
localizadas en el rea de donde fueron seleccionadas las muestras para ser
analizadas en el presente trabajo. En particular, las industrias seleccionadas para
el estudio se distribuyen por Departamentos, como se muestra a continuacin: 21
en Montevideo, 4 en Canelones, 2 en San Jos, 2 en Treinta y Tres y 1 en
Lavalleja (Fig.1).
Fig. 1.- Mapa de la Repblica Oriental del Uruguay donde se visualiza coloreado
de verde, los departamentos donde se concentra el 65 % del parque industrial
nacional y donde fueron extradas las muestras de efluentes industriales para ser
empleadas en el estudio.
8
Se consider una variedad de ramos industriales a los efectos de tener

conocimiento de la situacin de los efluentes en nuestro pas. En tal sentido fueron
seleccionados diez ramos distintos que se detallan en la Tabla I.
Tabla I.- Ramos industriales considerados para la determinacin de la

toxicidad de efluentes industriales mediante el empleo de una batera
de bioensayos.
Ramo N de industrias Disposicin final del vertido
Qumicas * 7 Curso de agua y colector
Crnicas 6 Curso de agua
Curtiembres 4 Colector e infiltracin a terreno
Lcteas 3 Curso de agua e infiltracin a terreno
Laneras 2 Colector
Pesqueras 2 Curso de agua
Textiles 2 Curso de agua y colector
Oleaginosas 2 Curso de agua
Maltera 1 Curso de agua
Chacinados 1 Curso de agua
* Dentro del ramo qumica estn incluidas: dos pintureras, tres petroqumicas (dos refineras y una
de elaboracin de gas licuado), un laboratorio y una qumica.
Las muestras de efluentes para ser analizadas en los bioensayos fueron

siempre tomadas en recipientes de plstico de primer uso, sin cmara de aire. En
el caso de las muestras extradas por la DINAMA se manejaron diferentes
volmenes segn los requerimientos del ensayo a realizar. Por su parte la IMM
tom siempre una nica muestra de 10 litros que en el laboratorio fue
homogenizada por agitacin mecnica y fragmentada en recipientes de plstico de
menor volumen segn los requerimientos de cada bioensayo (Anexo 3). As, las
muestras fueron posteriormente almacenadas en heladera a una temperatura
9
aproximada de 4C, hasta la realizacin del ensayo (dentro de los tres a cinco das
posteriores a la toma de la muestra).
Una sub-muestra de cada efluente se conserv para realizar la

caracterizacin fisicoqumica. Los anlisis fueron realizados por los laboratorios de
la DINAMA y la IMM e incluyeron de acuerdo al caso, los siguientes parmetros:
oxgeno disuelto(mtodo electromtrico), conductividad, salinidad, pH (mtodo
electromtrico), DBO5 (tcnica de dilucin), DQO (mtodo colorimtrico con reflujo
cerrado), aceite y grasa (mtodo de extraccin Soxhlet), slidos suspendidos
totales (mtodo gravimtrico), slidos sedimentables (mtodo gravimtrico),
sulfuro (mtodo potenciomtrico), amonio (mtodo electromtrico), cromo (mtodo
espectrofotometra de absorcin atmica por llama: FLAAS), plomo (mtodo
FLAAS), nquel (mtodo FLAAS), cadmio (mtodo FLAAS), fsforo total (digestin
y colorimetra) y detergentes (extraccin con solvente y colorimetra) (MVOTMA
DINAMA, 1996).
3.2 Bioensayos
El medio acutico es quien frecuentemente recibe las consecuencias de las

actividades antrpicas, entre ellas la actividad industrial. En los efluentes se
encuentran una serie de sustancias contaminantes, tanto orgnicas como
inorgnicas, que ponen en riesgo la salud del ecosistema. Los bioensayos de
laboratorio posibilitan tener una primer acercamiento al posible impacto que produce
un txico aislado o una mezcla de ellos, mxime cuando se considera una batera de
bioensayos con organismos con un nicho ecolgico particular, en los ambientes
dulceacucolas.
El estudio se realiz empleando una batera de bioensayos compuesta por

una bacteria luminiscente (Photobacterium phosphoreum, sistema Microtox), un
10
cnidario (Hydra attenuata), un microcrustceo (Daphnia magna) y un pez

(Cnesterodon decemmaculatus).
3.2.1 Bacterias: sistema Microtox
El sistema Microtox es un bioensayo que se encuentra validado y

estandarizado a nivel internacional. En l se utiliza una cepa liofilizada de una
bacteria marina luminiscente seleccionada, Photobacterium phosphoreum NRRL-B
11177, con una densidad de bacterias viables de 106 cl/ml (Fig. 2). Los txicos
interfieren en el sistema enzimtico de la bacteria causando una reduccin en la
produccin de luz. Las variaciones en la emisin de la luz son medidas a travs de
un fotmetro modelo Analyzer 500. A 490 nm de longitud de onda. La toxicidad se
determina por la concentracin inhibitoria que produce una disminucin de la luz
de un 50% a un tiempo determinado (IC50, 15 min) y bajo condiciones controladas de
temperatura (15 0,3C en los pocillos de incubacin y 20 2C de temperatura

ambiente). Los anlisis se realizan siguiendo el procedimiento estandarizado de
Environment Canada, 1992 (EPS 1/RM/24) para fase lquida, emplendose para el
procesamiento de datos el software MicrotoxOmni versin 1,15.
Fig. 2.- Sistema Microtox donde la toxicidad de un efluente industrial se

determina mediante la disminucin en la emisin de luz por parte de la bacteria
luminiscente Photobacterium phosphoreum.
11
Una vez recibida la muestra en el laboratorio de DINAMA, se llevaron a

cabo las mediciones correspondientes de oxgeno disuelto, pH y salinidad, a fin de
evaluar si la muestra cumpla con las condiciones necesarias para la realizacin
del ensayo. En un solo caso se encontr que la muestra presentaba un pH por
fuera del rango adecuado para el bioensayo; por ello fue analizada con y sin
correccin de pH a fin de visualizar si el efecto txico de la misma era
consecuencia de dicho factor o no.
Como control de calidad analtico se realizaron los grficos de control

utilizando como txico de referencia una solucin de fenol de 100 mg/L.
3.2.2 Cnidarios: Hydra attenuata
Hydra attenuata es un pequeo Cnidario de agua dulce cuyo tamao vara

de 5 a 20 mm de longitud (Fig. 3). El bioensayo ha sido desarrollado en Canad
(Trottier et al., 1997); se trata de un test esttico de toxicidad aguda con un
mximo de exposicin de 96 hs. Adems de considerar la letalidad como punto
final, permite a travs de alteraciones morfolgicas claramente evidenciables,
establecer con gran sensibilidad criterios subletales de toxicidad.
Fig. 3.- Hydra, un Cnidario de agua dulce empleado en los bioensayos.
12
Durante el perodo de exposicin los organismos se mantuvieron inmersos

en la muestra problema y diariamente (cada 24 h) fueron observados para
registrar cambios morfolgicos. Cuando la hidra se expone a txicos puede
manifestar cambios graduales de su estructura corporal cuya expresin permite
determinar la dosis de efecto subletal y letal de un contaminante. Para los fines del
proyecto se consider la CL50, 48 hs (concentracin letal media a las 48 hs de
exposicin).
Los individuos procedieron de un cultivo de laboratorio desarrollado en

recipientes circulares de vidrio de 20 cm de dimetro. El medio de cultivo se
prepar segn los detalles del Anexo 4. Las hidras fueron mantenidas a una
temperatura ambiente de 20 2 C, con una intensidad lumnica de 800 lux y un
fotoperodo de 16 h luz / 8 h oscuridad. Los organismos fueron alimentados con
nauplios de Artemia.
Se determin la tasa de crecimiento del cultivo de hidra como forma de

evaluar el estado de salud de los organismos a utilizar en los ensayos.
Asimismo, durante el desarrollo del trabajo se realizaron dos cartas control,
utilizando una solucin con seis concentraciones de dicromato de potasio (en
peso de cromo), como sustancia de referencia. Los resultados obtenidos
expresados como CL 50 fueron de 0,17 y 0,18 mg/L.
El ensayo definitivo se realiz con siete diluciones secuenciales, aplicando

un factor de dilucin de 0,5 ms un control negativo. Como control negativo y
medio de dilucin para la preparacin de las soluciones se emple agua dura
(APHA, 1995).
13
El bioensayo se realiz en placas de cultivo celular de 12 pozos (p. ej.

Falcon #3043) y cada dilucin como el control negativo se ensay por triplicado.
En todos los casos se utiliz un volumen de 4 ml de solucin por pozo.
Mediante el uso de un microscopio estereoscpico se determin la

mortalidad de los organismos ensayados (formas tulipn y desintegracin) y la
CL50 de calcul a travs del mtodo Probit, medias mviles y Spearman &
Karber.
3.2.3.- Microcrustceos: Daphnia magna
La "pulga de agua" es un pequeo crustceo cladcero, de agua dulce (Fig.

4). Fue empleado como organismo de ensayo para llevar a cabo este mtodo de
referencia. Es un componente importante de las comunidades acuticas y es
sensible a un amplio rango de contaminantes. Su pequeo tamao, ciclo de vida
corto y facilidad de cultivo lo hacen un organismo de eleccin. Este test se puede
realizar con efluentes que contengan aguas con salinidades de hasta 10 %o,
conductividad menor a 1.550 S/cm. Los efluentes de salinidad superior pueden
analizarse con este procedimiento, cuando descarguen hacia cursos de agua
dulce.
Se trata de un ensayo esttico de 48 hs de duracin, cuyo punto final es la

letalidad. El cultivo se realiz en recipientes de acrlico de 2 litros. El agua de
dilucin consisti en agua mineral diluida hasta 500 S/cm. Se agregaron
nutrientes esenciales para la buena reproduccin de las dafnias (vitamina B12 y
selenio en trazas). El alimento provisto consisti en algas unicelulares (Spirulina) y
levadura fresca. Se los someti a un fotoperodo de 16 hs de luz y 8 hs de
oscuridad. La temperatura fue de 20 2 C.
14
El protocolo del bioensayo sigui la pautas establecidas en el protocolo

estandarizado de Environment Canada (2000). Para llevar a cabo el ensayo, se
usaron recipientes de plstico de primer uso. El volumen de muestra empleado fue
de 200 ml por vaso. El da antes de comenzar el ensayo se extrajeron 30
ejemplares adultos y se colocaron en recipientes de 2 litros, con nutrientes y agua
de dilucin. Al da siguiente, con los neonatos obtenidos, de menos de 24 horas
de vida, se comenzaron los ensayos. Para ello se colocaron diez neonatos por
cada dilucin ms el control negativo. Se hicieron cinco diluciones seriadas en
progresin logartmica. La dilucin bsica empleada fue de 100, 32, 10, 3.2 y 1.0
%. En algunos casos se emplearon diluciones intermedias o se ampli el rango
por debajo, hasta 0.1 %.
Los resultados se obtuvieron empleando unl paquete estadstico. Se aplic el

mismo obtenindose resultados por el mtodo de Probit, de promedio mvil o de
interpolacin no lineal, segn el caso. El control de calidad analtico consisti en,
en primer lugar, validar la tcnica con respecto al valor de bibliografa
(Environment Canada, 1999) obtenido para la CL50 del txico patrn (cloruro de
sodio). Se llevaron a cabo ensayos peridicos con este txico de referencia
obtenindose un valor promedio de 5.2 0.4 g/L de NaCl, que est en el entorno
del valor sugerido en la bibliografa.
Fig. 4.- Daphnia magna, un microcrustceo de agua dulce muy utilizado en

ensayos ecotoxicolgicos. El protocolo del bioensayo se encuentra estandarizado
a nivel internacional (Environment Canada, 2000).
15
3.2.4.- Peces: Cnesterodon decemmaculatus
Cnesterodon decemmaculatus es un pez poeclido vulgarmente conocido

como madrecita de agua que se encuentra ampliamente distribuido en los cursos
de agua continentales de la regin (Fig. 5). Los antecedentes de su empleo en
bioensayos se concentran en Argentina donde ha sido utilizado a los efectos de
determinar el grado de toxicidad de efluentes industriales, la toxicidad de ciertos
contaminantes orgnicos, as como tambin para evaluar la contaminacin en
cursos de agua naturales (Di Marzio y Tortorelli, 1994; De la Torre et al., 1997; Di
Marzio et al., 1998; Gmez et al., 1998. En Uruguay el empleo de C.
decemmaculatus en bioensayos es ms reciente.
La especie presenta una serie de caractersticas que la hacen propicia para

ser empleada en bioensayos de toxicidad, tanto aguda como crnica. Entre ellas
es se citan: su tamao es adecuado para el cultivo en laboratorio; se reproduce en
condiciones de laboratorio; es vivpara pudiendo poner cada hembra del orden de
40 alevines; presenta dimorfismo sexual que permite diferenciar individuos
machos de hembras, etc.
Fig. 5.- Cnesterodon decemmaculatus, pez poeclido vulgarmente conocido como

madrecita de agua. Presenta dimorfismo sexual: en la parte superior de la imagen
se observa una hembra, y en la inferior un macho.
16
Los peces empleados en los ensayos provinieron de una pileta artificial

exterior existente en el campus de la Facultad. El lote de peces a utilizar en los
bioensayos fue aclimatado a las condiciones de temperatura (20 1 C) y
fotoperodo (12hs de luz / 12 hs de oscuridad) del ensayo, en un acuario de
laboratorio con agua de canilla declorada mediante burbujeo, por al menos 48 hs.
Los individuos fueron alimentados diariamente con alimento comercial balanceado
y tres veces en la semana se le suministr alimento vivo consistente en nauplios
de Artemia o larvas de mosquito.
Los ensayos fueron de carcter agudo y esttico, es decir, con una

exposicin al txico de 96 hs y sin la renovacin de las diluciones del efluente.
Una vez llegadas las muestras al laboratorio se realiz un ensayo preliminar de 24
hs a los efectos de conocer grosso modo su nivel de toxicidad. El resto de la
muestra fue almacenada en heladera a aproximadamente 4 C.
Conocidos los resultados preliminares se realiz el ensayo definitivo; a

partir del efluente bruto se realizaron cinco diluciones secuenciales en duplicado,
empleando un factor de dilucin que vari segn el caso, ente 0,4 y 0,7.
Conjuntamente al ensayo de las diluciones se corri un blanco negativo, tambin
en duplicado.
Se trabaj con dos litros de solucin en acuarios rectangulares de vidrio,

donde fueron expuestos aproximadamente 15 individuos, sin discriminar su sexo.
Cada acuario se mantuvo a temperatura constante (20 1 C) en bao mara y se
le suministr aireacin permanente mediante burbujeo, para asegurar buenos
niveles de oxgeno disuelto. Se registr la mortalidad a las 24, 48, 72 y 96 hs y se
determin la concentracin letal 50 a las 96 hs de exposicin (CL50, 96 hs),
mediante el mtodo Probit y Logit, segn el caso.
17
Cada vez que se consider un nuevo lote de peces para ser aclimatados,
se realiz un ensayo de sensibilidad (blanco positivo) empleando al sulfato de cinc
como txico de referencia. Los resultados fueron validados siempre que la
mortalidad en el blanco negativo fuera inferior al 10 %. En caso contrario el ensayo
fue repetido.
3.3.- Anlisis de datos y expresin de resultados
En funcin de los valores de toxicidad obtenidos en cada bioensayo (EC50 y

LC50) se atribuye una categora toxicolgica a cada uno de los efluentes
industriales, siguiento los lineamientos de trabajo realizado por Bulich (1982) y
Coleman & Quershi (1985) (Tabla II).
Tabla II.- Categoras toxicolgicas de los efluentes industriales segn los

resultados obtenidos empleando una batera de bioensayos.
EC50 o LC50 (%) Toxicidad Categora
< 25 Muy txica 1
25 50 Txica 2
51 75 Moderadamente txica 3
76 100 Levemente txica 4
> 100 No txica 5
Se realizaron anlisis de varianza de uno y dos factores empleando siempre

un nivel de significacin alfa de 0,05. En particular se utiliz el ANOVA para
determinar si alguno de los bioensayos considerados en la batera result ser el
ms sensible. Asimismo, se emple el mismo test para determinar cual de las
industrias, con un nmero de muestras analizadas igual o superior a tres, present
18
las menores concentraciones letales. Por ltimo, dentro de cada uno de los ramos
se compar la respuesta de los diferentes bioensayos.
Los resultados de concentracin letal o de inhibicin cincuenta (LC50 e IC50),

fueron transformados en unidades de toxicidad (Environment Canada, 1999),
segn la frmula:
UT = 100%
CL50(%)
El impacto ambiental que tiene un efluente sobre el medio receptor depende

no solamente de los contaminantes que posee, sino tambin del volumen vertido.
Para que una descarga o efluente industrial sea aceptable es esencial que sea
ambientalmente seguro y que el uso establecido del cuerpo receptor no sea
afectado por la liberacin de txicos al ecosistema. Para considerar ambos
parmetros se calcul la Tasa de Emisin de Toxicidad (TER, Toxic Emission
Rate) como:
TER = UT x Q
donde Q corresponde al caudal expresado en m3/da.
Por otra parte, se determin el ndice PEEP (Prueba de Efectos

Ecotoxicolgicos Potenciales) que fue desarrollado en el marco del Plan de Accin
para el ro St. Lawrence Canad (Environmental Technology Centre, 1999). La
importancia de este ndice radica en que permite comparar la toxicidad de distintos
efluentes industriales, integrando los resultados de toxicidad obtenidos mediante
diferentes bioensayos y considerando tambin, el caudal del efluente vertido por la
industria, pero no el caudal del cuerpo receptor. Este ndice se expresa en una
escala logartmica de 0 a 10. Los resultados obtenidos a travs de l, constituyen
19
una excelente herramienta para la toma de decisiones sobre el impacto txico de

los vertidos sobre los cursos de agua.
El ndice PEEP se calcula como la suma de las unidades de toxicidad

obtenidas en cada uno de los ensayos aplicados, de acuerdo a la siguiente
frmula:
P = log 10 [ 1 + n ( Ti ) Q ]
N
donde:
P = valor PEEP
n = nmero de puntos finales que exhiben respuestas txicas
N = nmero mximo de puntos finales txicos posibles
Ti = unidades de toxicidad obtenidas en cada ensayo
Q = caudal del efluente expresado en m3/da.
En el presente trabajo se adapt el ndice PEEP original, calculndolo en

base a los cuatro bioensayos (inhibicin de la luminiscencia de Photobacterium
phosphoreum, ensayo letal con Hydra attenuata, ensayo letal con Daphnia magna
y ensayo letal con Cnesterodon decemmaculatus). El nmero mximo de puntos
finales (N) fue de cuatro en todos los casos. En el anlisis de la toxicidad segn el
ndice PEEP, se excluyeron dos industrias, una pesquera y otra petroqumica,
debido a que se carece de informacin sobre el caudal del efluente al momento de
la toma de la muestra.
20
4.- RESULTADOS Y DISCUSIN
4.1.- Caracterizacin fisicoqumica de los efleuntes
Las fuentes y tipos de contaminacin qumica a la cual un sistema de agua

dulce puede estar expuesto son muy variados. Los efluentes se pueden
caracterizar por su carga orgnica general, txicos orgnicos especficos, y txicos
inorgnicos. Los efluentes industriales son matrices complejas presentando en
algunos casos mayor proporcin de un componente txico en particular. Por
ejemplo, las industrias que elaboran productos crnicos (bovinos, porcinos,
pescado) aportan una carga orgnica general alta, pero pueden ser tambin una
fuente de txicos orgnicos e inorgnicos. El caso del efluente de chacinado
constituye un ejemplo: la salinidad tan alta (25%o), correspondiente al
procesamiento de los embutidos, jugara un papel importante.
La carga orgnica aportada por los efluentes industriales suele ser uno de
los problemas principales en nuestro pas. Tal es el caso de los efluentes
provenientes de lavaderos de lanas e industria oleaginosa. Los niveles de
oxgeno disuelto bajos, en ambos casos, pueden deberse a la presencia de altas
concentraciones de aceites y grasas. Conociendo el proceso de lavado de lanas,
se puede postular que existiran pesticidas, detergentes no-inicos (del tipo
nonilfenol polietoxilado, por ejemplo) que, luego de aplicados en el ovino, pasan a
la grasa de lana pudiendo ser causantes de toxicidad. En el proceso llevado a
cabo en la extraccin de aceite vegetal, o an en la elaboracin de lcteos, el tipo
de sustancias denominadas en conjunto grasas y aceites son probablemente de
mayor inocuidad.
21
La operacin de tincin de telas de algunas industrias textiles involucra el

uso de colorantes, que en general son resistentes o hasta refractarios a la
biodegradacin. Estas sustancias no degradables son las que permanecen en el
curso de agua y probablemente sean causantes de efectos txicos.
Es muy obvia la vinculacin de concentraciones elevadas de metales

pesados, tales como cromo, en el caso de las curtiembres. Sin embargo, no hay
que olvidar la posible participacin de otras sustancias usadas en el proceso, que
podran jugar un papel sinrgico o eventualmente antagnico. Tambin se
desconoce qu proporcin de ese cromo se encuentra en el estado de oxidacin
hexavalente, dado que las toxicidades relativas son muy diferentes entre las
especies para Cr (III) y Cr(IV).
4.2 Sensibilidad de los bioensayos
Los anlisis estadsticos mostraron que Hydra attenuata es significativamente

ms sensible que el resto de los organismos empleados en la batera; 83% del
total de los efluentes analizados son txicos. Luego le seguira Daphnia magna,
que contabiliz un 70% del total de los efluentes como txicos, seguida de
Cnesterodon decemmaculatus y Photobacterium phosphoreum cuyos resultados
indican respectivamente un 63 y 60% de efluentes txicos respecto del total
evaluados.
En el 37% del total de los efluentes analizados, se obtuvo la misma categora

toxicolgica en todos los bioensayos. La coincidencia entre los bioensayos se
obtiene cuando la muestra no es txica (categora 5) o por el contrario, cuando es
extremadamente txica (categora 1). En el resto de las situaciones, se comprueba
la existencia de gran variabilidad en la categora que asigna a los efluentes cada
ensayo toxicolgico. Es as que en la mayora de los efluentes analizados, uno o
dos bioensayos indican ausencia de toxicidad (categora 5), mientras que los
dems indican toxicidad en distintos grados. Se desprende de este anlisis la
22
necesidad de contar con una batera adecuada de bioensayos, que contemplen

distintos niveles de la trama trfica (Tabla III) (Fig 6).
Toxicidad por organismo Toxicidad por organismo

Rubro curtiembres Rubro industria oleaginosa
5 5
Toxicidad (del 1 al 5) (decreciente)

4 4
3 3
2 2
1 1
0 Ph. phosphoreum D. magna Cn. decemmaculatus Hy. attenuata

0 Ph. phosphoreum D. magna Hy. attenuata Cn. decemmaculatus
Organismo Organismo
3 CUR 4 CUR 23 CUR 26 CUR 13 OLEAG 22 OLEAG
Toxicidad por organismo Toxicidad por organismo

Rubro industrias crnicas Rubro qumico
5 5
4 4
3 3
2 2
1 1
0 Ph. phosphoreum D. magna Cn. decemmaculatus H. attenuata

0 Ph. phosphoreum D. magna Cn. decemmaculatus Hy. attenuata
Organismo Organismo
2 QUIM 11 LAB 16 QUIM 17 QUIM
1 CAR 8 CAR 9 CAR 19 CAR 20 CAR 24 CAR
18 PIN 27 GAS 28 QUIM
Fig. 6- Las grficas de la lnea superior muestran concordancia en las

respuestas en los extremos de las categoras toxicolgicas. En la inferior, se
evidencia diferencias de sensibilidad de acuerdo al bioensayo.
Por otra parte cuando se analiz la sensibilidad de cada bioensayo dentro de

los ramos: crnica, curtiembre, qumica y lctea, no se encontraron diferencias
significativas, es decir que se podra generalizar diciendo que en cada uno de los
ramos considerados la respuesta de los cuatro organismos ensayados fue la
misma. Para la totalidad de los efluentes de las curtiembres, los cuatro bioensayos
aplicados categorizan a los mismos como muy txicos. Los efluentes de las
industrias crnicas, por su parte, resultaron ser muy txicos para Cnesterodon
23
decemmaculatus e Hydra atenuatta, mientras que para Photobacterium

phosphoreum y Daphnia magna, se observ un comportamiento variable.
Las pintureras, una oleaginosa y una de las industrias lcteas evaluadas, no

resultaron ser txicas para ninguna de las especies ensayadas, resultado que
coincide con los ndices PEEP calculados, que en todos los casos fueron igual a
cero.
4.3.- Toxicidad y cumplimiento con la Normativa Nacional
Analizando los cuatro ramos de industrias con un nmero de muestras

superior o igual a tres, se observa que las curtiembres son significativamente las
ms txicas, es decir las que presentan para la batera de bioensayos, los
menores valores de LC50 o IC50. A ellas, le siguen las industrias crnicas,
seguidas en tercer lugar por las qumicas y las lcteas. Este hecho resulta
relevante, mxime considerando el importante nmero de curtiembres existentes
en nuestro pas. En el ao 1998 en Uruguay se encontraban registradas en
DINAMA un total de 35 curtiembres, que representan el 12% del total de
industrias. 23 de ellas estn localizadas en el Depto. de Montevideo. A su vez, 5
desaguan a cursos de agua naturales (Arroyo Pantanoso, Miguelete y al sistema
costero) y 18 al colector de alcantarillado pblico (MTSS y otros, 1998).
24
Tabla III.- Categora toxicolgica de cada efluente industrial para cada uno de los
bioensayos de la batera. 1: muy txico, 2: txico, 3: moderadamente txico, 4:
levemente txico, 5: no txico.
Categora toxicolgica
Ramo Microtox Hydra Daphnia Cnesterodon
Crnica 5 1 3 1
Crnica 1 1 3 1
Crnica 2 1 1 1
Crnica 1 1 4 1
Crnica 5 1 5 2
Crnica 5 1 2 1
Chacinados 1 1 1 1
Curtiembre 1 1 1 1
Curtiembre 1 1 1 1
Curtiembre 1 1 1 1
Curtiembre 1 1 1 1
Lctea 5 5 5 5
Lctea 5 1 5 3
Lctea 4 1 3 1
Lanera 1 1 1 1
Lanera 5 2 1 1
Maltera 1 2 1 5
Oleaginosa 5 5 5 5
Oleaginosa 3 4 4 5
Pesquera 1 1 5 3
Pesquera 5 2 5 5
Textil 2 1 1 5
Textil 5 3 5 5
Laboratorio 5 1 1 1
Licuado de gas 1 1 1 1
Petroqumica 1 3 1 5
Petroqumica 2 5 2 5
Pinturera 5 5 5 5
Pinturera 5 5 5 5
Qumica 3 1 1 1
El 90% de los efluentes analizados resultaron ser txicos para al menos una
de las cuatro especies de la batera de bioensayos. El 84% de los mismos
resultaron ser muy txicos (categora toxicolgica 1) en alguno de los bioensayos
utilizados, mientras que el 16% restante resultaron ser moderadamente txicos a
txicos (Fig. 7).
25
de las especie evaluadas

Cat.3
Cat.2 8%
8%
Cat.1
84%
Fig. 7.- Categorizacin toxicolgica del total de los efluentes industriales que
presentaron toxicidad para alguna de las especies ensayadas. Cat.1: muy txica;
Cat.2: txica; Cat.3: moderadamente txica (segnTabla II)
Si consideramos nicamente el conjunto de los efluentes que presentaron

toxicidad, encontramos que la mayora (el 65 %), no cumple con los estndares
fisicoqumicos de vertido, establecidos en el Decreto 253/79 y modificativos,
mientras que el 35 % restante, s lo hace (Fig. 8).
Cumple
35%
No cumple
65%
Fig. 8.- Efluentes industriales que presentaron toxicidad para algunos de los
organismos de la batera de bioensayos expuestos, y el cumplimiento con los
estndares fisicoqumicos del Decreto 253/79 y modificativos.
26
Si se discrimina segn el tipo de disposicin final, vemos que el 100 % de

los efluentes que vierten a colector presentan toxicidad y de stos, el 57 % cumple
con los estndares de vertido fisicoqumicos establecidos para colector (Fig. 9).
Con respecto a los efluentes que vierten a cursos de aguas, el 86 % de los
mismos resultaron ser txicos, y de stos, el 28 % cumple con la reglamentacin
vigente (Fig. 10).
Txicos y no
cumplen
43%
Txicos y
cumplen
57%
Fig. 9.- Efluentes industriales vertidos a colector y su cumplimiento con la

normativa nacional (Decreto 253/79 y modificativos).
Txicos y
cumplen
28%
Txicos y no
cumplen
72%
Fig. 10.- Efluentes industriales vertidos a cursos de agua naturales y su

cumplimiento con la normativa nacional (Decreto 253/79 y modificativos).
27
4.4.- Tasa de emisiones txicas (TER)
Una forma de expresin de resultados de gran utilidad para el caso de

emisiones, es aquella que adems de considerar la toxicidad de las muestras
simples obtenida para cada bioensayo, incluye en el clculo el caudal de la fuente
emisora, segn se describi en el item 3.3.
La importancia del ndice TER se visualiza en los datos ordenados en la

Tabla IV donde se muestra la toxicidad de los efluentes expresada en unidades de
toxicidad (UT) y las variaciones en la toxicidad de las muestras analizadas, cuando
se introduce el dato del caudal. A iguales unidades de toxicidad la tasa de emisin
txica al ambiente vara en forma proporcional al caudal vertido. Es as que
efluentes industriales muy txicos pero con escaso caudal no generan tanto
impacto sobre el cuerpo receptor, como s lo hacen efluentes poco txicos pero
con alto volumen de vertido.
En trminos generales, las emisiones ms txicas resultaron variables de

acuerdo al organismo considerado, pero se observa un patrn comn con relacin
a la emisin txica de las curtiembres y las industrias crnicas. Analizando en
particular el efecto sobre cada organismo considerado en la batera, para las
bacterias las emisiones de las curtiembres, crnicas y en particular una
petroqumica resultaron ser las ms txicas. En el caso de la hidra, fueron las
emisiones de las curtiembres y las crnicas. Para dafnia, las de una industria
petroqumica, junto a las de las laneras y las curtiembres. Por ltimo en el caso del
pez, las industrias crnicas y las curtiembres manifestaron la mayor emisin
txica.
28
Tabla IV.- Toxicidad de los efluentes industriales analizados mediante una batera
de bioensayos, expresada en unidades de toxicidad (UT) y como Tasa de Emisin
de Toxicidad (TER), donde se considera el caudal de vertido. Las ltimas cinco
fueron reunidas bajo el ramo qumico.
Microtox Hydra Daphnia Cnesterodon Suma

Ramo Q(m3/da) UT TER UT TER UT TER UT TER TER
crnica 233 40,0 9.320 20,1 4.679 1,3 302 9,2 2.138 16.439
crnica 300 1,0 300 9,9 2.970 1,8 530 4,5 1.345 5.146
crnica 672 19,6 13.176 21,7 14.609 1,8 1.187 5,6 3.775 32.748
crnica 990 1,0 990 16,2 16.019 1,0 990 3,5 3.474 21.473
crnica 2.200 2,3 4.955 37,0 81.481 5,6 12.291 4,6 10.092 108.819
crnica 2.200 1,0 2.200 45,5 100.000 2,7 5.946 9,7 21.359 129.505
curtiembre 35 26,3 921 43,5 1.522 312,5 10.938 32,3 1.129 14.509
curtiembre 330 62,5 20.625 22,6 7.466 43,1 14.224 25,0 8.250 50.565
curtiembre 452 10,5 4.758 23,8 10.762 46,9 21.221 32,3 14.581 51.321
curtiembre 720 47,6 34.286 370,4 266.667 12,8 9.195 11,5 8.276 318.424
lctea 20 1,0 20 4,3 85 1,0 20 1,6 31 156
lctea 50 1,0 50 1,0 50 1,0 50 1,0 50 200
lctea 1.410 1,1 1.602 22,7 32.045 1,8 2.491 4,7 6.589 42.728
lanera 145 17,5 2.544 322,6 46.774 1.000,0 145.000 37,0 5.370 199.688
lanera 300 1,0 300 3,6 1.069 20,9 6.276 4,5 1.364 9.009
oleaginosa 320 1,4 438 1,0 330 1,1 339 1,0 320 1.427
oleaginosa 3.192 1,0 3.192 1,0 3.192 1,0 3.192 1,0 3.192 12.768
pesquera 450 14,9 6.716 7,6 3.435 1,0 450 2,1 949 11.551
pinturera 40 1,0 40 1,0 40 1,0 40 1,0 40 160
pinturera 76 1,0 76 1,0 76 1,0 76 1,0 76 304
textil 130 2,7 350 27,0 3.514 4,3 560 1,0 130 4.554
textil 300 1,0 300 1,4 424 1,0 300 1,0 300 1.324
chacinados 140 25,0 3.500 96,2 13.462 6,8 946 14,5 2.029 19.936
laboratorio 55 1,0 55 149,3 8.209 17,7 972 43,5 2.391 11.627
licuado de gas 20 90,9 1.818 5,9 118 69,9 1.399 4,7 94 3.429
maltera 545 28,6 15.571 3,0 1.612 17,7 9.629 1,0 545 27.358
petroqumica 2.443 12,5 30.538 1,8 4.355 61,7 150.802 1,0 2.443 188.138
qumica 35 1,7 60 58,8 2.059 69,4 2.431 14,7 515 5.065
4.5.-Toxicidad de los efluentes industriales segn el ndice PEEP
Si bien la tasa de emisiones txicas (TER) nos da una idea del posible
impacto ecolgico que tiene la descarga de un efluente, ya que considera el
caudal vertido, presenta la desventaja de que los resultados se obtienen
considerando aisladamente la toxicidad sobre cada uno de los organismos
expuestos. Sin embargo, el ndice PEEP nos permite integrar los resultados de
toxicidad, a la vez que considera los caudales vertidos. De todas formas, si se
pretende tener una idea ms acabada del efecto ecotoxicolgico, es tambin
29
importante considerar el caudal del cuerpo hdrico receptor, que lamentablemente

a los efectos de este trabajo, no se pudo obtener.
El ndice PEEP mostr valores comprendidos entre el 0 y 5,5 siendo el

mnimo y mximo terico en una escala logartmica, 0 y 10, respectivamente (Fig.
11). El efluente de una curtiembre result ser el ms txico para el ambiente; en
general las curtiembres resultaron muy txicas ya que son los efluentes que
muestran los mayores valores PEEP. Las crnicas tambin resultaron txicas con
ndices PEEP superiores a 3,5. Las industrias qumicas, laneras y lcteas
mostraron toxicidad variable. Un caso claro del impacto que se visualiza a travs
del ndice PEEP es el de las industrias laneras, donde una de ellas mostr un
ndice PEEP de 3,8 y la otra de 5,3 a pesar de que esta ltima present un caudal
de vertido cercano a la mitad de la mencionada en primer lugar. Algo similar se
observa con las industrias lcteas, que presentaron gran variabilidad en la
toxicidad: mientras que una de ellas tiene un ndice PEEP elevado, ocupando el
octavo lugar de la lista, otras dos se sitan en los lugares 24 y 26, indicando poco
impacto sobre el cuerpo receptor. Sin embargo, en este caso la gran variabilidad
se explicara en parte por los caudales que presentan los efluentes, siendo el de la
primera industria mencionada de 1.410 m3/da, y el de las otras dos 20 y 50
m3/da, respectivamente.
30
5
ndice PEEP
0
petroquimica
oleaginosa
oleaginosa
carnica
carnica
carnica
carnica
carnica
carnica
quimica
laboratorio
pintureria
pintureria
malteria
lactea
lactea
lactea
textil
textil
lanera
lanera
pesquera
pesquera
curtiembre
curtiembre
curtiembre
curtiembre
licuado de gas
chacinados
Ramo industrial
Fig. 11- ndices PEEP para cada uno de los efluentes analizados, donde se
considera la toxicidad obtenida en la batera de bioensayos, pero tambin el
caudal de efluente vertido. Los colores de las barras se corresponden con el ramo
industrial al que pertenece el efluente. Referencias: curtiembres (rojo), lanera
(fucsia), qumicas (amarillo), crnicas (verde oscuro), lcteas (verde), textil (azul),
otras (blanco).
Se encontraron efluentes con un ndice PEEP de cero, es decir con un

impacto nulo sobre el cuerpo receptor (valores de LC50 e IC50 > 100 %). Los
mismos corresponden a una industria oleaginosa, un lctea, pesquera y
pintureras.
31
5. - CONCLUSIONES
- Los resultados aqu presentados constituyen el primer antecedente formal

para nuestro pas acerca de la evaluacin ecotoxicolgica de los efluentes de
origen industrial, a travs de una batera de bioensayos.
- Se destaca el carcter interinstitucional y multidisciplinario del trabajo en

conjunto, donde se consolid la Red Interinstitucional de Bioensayos formada
por cuatro instituciones nacionales: Direccin Nacional de Medio Ambiente,
Intendencia Municipal de Montevideo, Laboratorio Tecnolgico del Uruguay y la
Facultad de Ciencias, representadas por tcnicos especializados en diferentes
disciplinas.
- El inters por el desarrollo de esta rea en el Uruguay es creciente y

destacando en este contexto la invitacin que recibi la Red para participar en el
Proyecto binacional FREPLATA, particularmente en la elaboracin y ejecucin de
una propuesta para la incorporacin de los bioensayos en la evaluacin de la
toxicidad de los sedimentos de dragado del Ro de la Plata.
- En lo que respecta a la toxicidad de los efluentes, la gran mayora de ellos

resultaron ser muy txicos para alguna de las cuatro especies ensayadas. Este
hecho es indicativo de la existencia de una problemtica ambiental importante
respecto al sector industrial considerado en este estudio, que es representativo del
parque industrial total del pas.
- La caracterizacin fisicoqumica de los efluentes industriales no es

suficiente a los efectos de tener una real consideracin ecotoxicolgica. Se
demuestra que existe un elevado porcentaje de ellos que cumpliendo con la
normativa vigente, que considera exclusivamente informacin fisicoqumica y
32
microbiolgica, presentan alta toxicidad para las especies evaluadas en la batera

de bioensayos. Los anlisis qumicos por s solos, son rara vez adecuados para
evaluaciones ecolgicas, a causa de la complejidad cuali-cuantitativa de las
sustancias presentes. Los sistemas biolgicos, por el contrario, integran los
efectos de las mezclas complejas de contaminantes. Esto abre un campo de
discusin tcnica sobre la necesidad de incluir en la normativa informacin
ecotoxicolgica, como herramienta complementaria para la evaluacin de las
emisiones lquidas al ambiente.
- Como parte integrante del proceso de revisin de parmetros y estndares

de calidad de aguas, el grupo GESTA AGUA multi-institucional (Grupo de
Estudios Ambientales) ha considerado necesario proceder a la revisin del
Decreto 253/79 para intrtoducir las modificaciones que se crean necesarias. La
propuesta que surja de este grupo de trabajo es eleva a la COTAMA para su
discusin y aprobacin. El presente trabajo ser presentado en la reunin de
trabajo del GESTA AGUA a fin de evaluar con datos nacionales la necesidad
de indorporacin de los bioensayos en la Normativa.
- Los bioensayos presentan muchas ventajas ya que constituyen pruebas

directas del efecto de los vertidos txicos sobre los organismos, presentan un
protocolo relativamente sencillo y son en general de bajo costo operativo.
- La respuesta de cada una de los organismos expuestos en los bioensayos

mostr una alta variabilidad, lo que realza la necesidad de contar con una batera
de bioensayos que considere una serie de organismos acuticos con distintos
niveles de complejidad biolgica. Futuros estudios debern incorporar un
organismo productor primario; tal como el bioensayo con el alga Selenastrum
capricornutum transferido a la Red a travs del taller realizado en el marco de este
Proyecto.
33
- Los resultados obtenidos analizando en un principio los valores de

concentraciones letales o inhibitorias(CL50 y IC50), la tasa de emisiones txicas
(TER) como las Pruebas de Efectos Ecotoxicolgicos Potenciales (ndices PEEP)
muestran que en general, las curtiembres y las industrias crnicas son las
industrias con mayor impacto sobre la salud de los sistemas acuticos.
- El ndice PEEP resulta una herramienta muy til para determinar el efecto
ecotoxicolgico de un vertido, ya que integra las respuestas toxicolgicas de cada
organismo ensayado con el caudal del efluente. De todas formas, se hace
necesario contar con los caudales del cuerpo hdrico receptor, a los efectos de
tener una real aproximacin al impacto ecotoxicolgico.
- El trabajo no consider los posibles efectos a ms largo plazo, es decir la

toxicidad crnica del efluente. Por consiguiente, sera tambin conveniente
incorporar a trabajos futuros, ensayos crnicos con puntos finales subletales de
inters ecolgico, como por ejemplo los efectos sobre el crecimiento y la
reproduccin as como tambin estudios de genotoxicidad y disrruptores
endocrinolgicos.
- Los resultados obtenidos en este trabajo muestran la necesidad de

continuar los estudios para obtener mayor informacin ecotoxicolgica de base,
que permita la posterior consideracin e incorporacin en la normativa
nacional, como ya se hace a nivel internacional.
34
6.- AGRADECIMIENTOS
Gabriella Feola (IDRC Oficina Regional Amrica Latina)

Divisin Control Ambiental / Departamento de Emisiones al Ambiente
DINAMA/MVOTMA.
Sectores Fisicoqumico e Intrumental del Departamento de Normalizacin
Tcnica - DINAMA/MVOTMA.
Inspectores del Sector Productos Importados, LATU.
35
7.- BIBLIOGRAFA
APHA, AWWA & WEF (1995). Standard Methods for Examination of Water and
Wastewater. 9 ed. Washington, DC.
Consorcio Multiservice Seinco Tahal (2001). Evaluacin de la Contaminacin

Industrial. Informe final. Plan de Saneamiento Urbano (fase III). Prstamo BID
948/OC-UR.
Di Marzio WD y Tortorelli MC (1994) Effects of paraquat on survival and total

cholinesterase activity in fry of Cnesterodon decemmaculatus (Pisces, Poeciliidae).
Bull Environ Contam Toxicol 52:274-278.
Di Marzio WD, Alberdi JL, Senz ME y Tortorelli MC (1998) Effects of paraquat (Osaquat
formulation) on survival and total cholinesterase activity in male and female adults of
Cnesterodon decemmaculatus (Pisces, Poeciliidae). Environ Toxicol Water Qual
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De la Torre FR, Demichelis SO, Ferrari L & Salibin A (1997). Toxicity of Reconquista river
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Bacteria (Photobacterium phosphoreum). EPS 1/RM/24. Canada.
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Single species Tests in Environmental Toxicology. EPS 1/RM/34. Ottawa, Canada.
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36
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Interpretation of Single-species Test in Environmental Toxicology. Report EPS
1/RM/34. Ottawa, Ontario, Canada.
Gmez S, Villar C y Bonetto C (1998) Zinc toxicity in the fish Cnesterodon

decemmaculatus (Jenyns, 1842), (Pisces, Atheriniformes) in the Parana River and
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MTSS, MVOTMA, MGAP, MIEM & MSP (1998). Perfil Nacional de la Gestin de las
Sustancias Qumicas. Ministerio de Trabajo y Seguridad Social, Ministerio de
Vivienda Ordenamiento Territorial y Medio Ambiente, Ministerio de Ganadera,
Agricultura y Pesca, Ministerio de Industria, Energa y Minera, Ministerio de Salud
Pblica, Direccin Nacional de Bomberos, Direccin Nacional de Aduanas. 142 pp.
MVOTMA - DINAMA (1996). Manual de procedimientos analticos para aguas y efluentes.

Ministerio de Vivienda Ordenamiento Territorial y Medio Ambiente (MVOTMA)
Direccin Nacional de Medio Ambiente (DINAMA) Laboratorio.
Paradiso M, (2000). Variabilidad interclonal en Lemna gibba L. frente a dos herbicidas con
distinto modo de accin. Tesis de Maestra en Ciencias Biolgicas, opcin Ecologa.
PEDECIBA, Facultad de Ciencias, Montevideo, Uruguay. 75 p.
Trottier S, Blaise C, Kusui T & Jhonson EM (1997). Acute toxicity assessment of aqueous
samples using a microplate-based Hydra attenuata assay. Environm. Toxicol. Water. Qual.
12:265-271.
37
ANEXO 1: Decreto 253/79 y modificativos, reglamentario del Cdigo de Aguas.
DECRETO 253/79
(Con las modificaciones de los Decretos 232/88, 698/89 y 195/91 incluidas)
SE APRUEBAN NORMAS PARA PREVENIR LA CONTAMINACION AMBIENTAL MEDIANTE

EL CONTROL DE LAS AGUAS.
MINISTERIO DE TRANSPORTE Y OBRAS PUBLICAS.
MINISTERIO DEL INTERIOR.
MINISTERIO DE DEFENSA NACIONAL.

MINISTERIO DE INDUSTRIA Y ENERGIA.
MINISTERIO DE SALUD PUBLICA.
MINISTERIO DE AGRICULTURA Y PESCA.

MINISTERIO DE VIVIENDA ORDENAMIENTO TERRITORIAL Y MEDIO AMBIENTE.
Montevideo, 9 de mayo de 1979.
VISTO: La ley N 14.859 del 15 de diciembre de 1978 que aprob el Cdigo de Aguas y el
informe producido por la Comisin designada por el Decreto N? 324/978 de 8 de junio de
1978.
RESULTANDO: I) Que el Cdigo de Aguas establece en su Ttulo V - Captulo 1, "Normas

relativas a la defensa de las aguas, lveos y zonas aledaas", en las que se incluye
facultades al Ministerio Competente para dictar providencias y aplicar medidas que impidan
el deterioro de los recursos hdricos, as como para sancionar las infracciones de dichas
normas.
II) Que la citada Comisin indic en su informe las medidas a adoptar, para prevenir la
contaminacin de los cursos de agua, las que se refieren a clasificacin de cuerpos
receptores segn sus usos preponderantes, lmites de los parmetros de contaminacin,
normas para vertimiento de efluentes y sanciones derivadas de la aplicacin de dichas
medidas.
III) Que de acuerdo con lo dispuesto por la Ley N 16.112 del 30 de mayo de 1990 y los
artculos 456 y 457 de la Ley N 16.170 del 28 de diciembre de 1990 el Ministerio Competente
ser el Ministerio de Vivienda, Ordenamiento Territorial y Medio Ambiente.
CONSIDERANDO: I) Que constituye una especial preocupacin del Poder Ejecutivo facilitar
los medios para la estricta aplicacin del Cdigo de Aguas, en particular en lo que concierne
a los aspectos de conservacin y preservacin de los recursos hdricos, habida cuenta de
los peligros de deterioro, prdida o mengua de los mismos provocados por la accin del
hombre.
II) Que es necesario definir y poner en prctica las normas para prevenir la contaminacin
de los cursos de agua.
ATENTO: A lo establecido en los artculos 2, 3, 4, 6, 144 a 148, 201 y concordantes del
Cdigo de Aguas.EL PRESIDENTE DE LA REPUBLICA DECRETA....
38
ARTICULO 11- Ningn efluente podr ser vertido si no cumple como mnimo con los
siguientes estndares, sin perjuicio de otros requerimientos que surjan de estas normas:
1 - Desages a colector del alcantarillado pblico
PARAMETRO ESTANDAR
- MATERIAL FLOTANTE Ausente
- TEMPERATURA Mx. 35 C
- pH Entre 5,5 7 9,5

- DBO5 Mx 700 mg/L
- SOLIDOS SEDIMENTABLES Hasta 10 mL/L determinados en cono Imhoff en

una hora
- ACEITES Y GRASAS Mx 200 mg/L
- SULFUROS Mx 5 mg/L en S
- CAUDAL El caudal mximo en cualquier instante no podr

exceder 2,5 del caudal medio del perodo de
actividad.
- CIANUROS Mx 1 mg/L
- ARSENICO Mx 0,5 mg/L
- CADMIO Mx 0,05 mg/L
- COBRE Mx 1 mg/L
- CROMO TOTAL Mx 3 mg/L
- MERCURIO Mx 0,005 mg/L
- NIQUEL Mx 2 mg/L
- PLOMO Mx 0,3 mg/L
- ZINC Mx 0,3 mg/L
Las concentraciones de los txicos orgnicos no podrn exceder en 500 (quinientas) veces
los valores previstos por el artculo 5 para la CLASE 3.
2- Desages directos a cursos de agua
PARAMETRO ESTANDAR
- TEMPERATURA Mx 30C, pero no podr elevar la temperatura del

cuerpo receptor ms de 2C.
39
- pH Entre 6,0 y 9,0
- DBO5 Mx 60 mg/L
- SOLIDOS SUSPENDIDOS TOTALES Mx 150 mg/L
- SULFUROS Mx 1 mg/L
- DETERGENTES Mx 4 mg/L en LAS
- SUSTANCIAS FENOLICAS Mx 0,5 mg/L en C6H5OH
- CAUDAl El caudal mximo en cualquier instante no podr

exceder 1,5 al caudal medio del perodo de
actividad.
- AMONIACO Mx 5 mg/L en N
- FOSFORO TOTAL Mx 5 mg/L en P
- COLIFORMES FECALES Mx 5000 CF 100 mL
- CIANURO Mx 1 mg/L
- COBRE Mx 1 mg/L
- CROMO Mx 1 mg/L
- MERCCURIO Mx 0,005 mg/L
- NIQUEL Mx 2 mg/L
- PLOMO Mx 0,3 mg/L
- ZINC Mx 0,3 mg/L
Las concentraciones de los txicos orgnicos no podrn exceder en ms de 100 (cien) veces
los valores previstos por el artculo 5 para la CLASE 3
3 - Desages que se disponen por infiltracion al terreno
CONDICIONES
a- Slo podr permitirse en zonas rurales.

b- Distancia mnima a cursos de agua o pozos manantiales:50 m.
c- Distancia mnima a medianeras : 10 m.
Adems debern cumplir los siguientes estndares:
40
PARAMETRO ESTANDAR
- TEMPERATURA Mx 35C
- pH Entre 5,5 y 9,0

- SOLIDOS SEDIMENTABLES Hasta 10 mL/L determinados en cono Imhoff en una hora.
- SOLIDOS TOTALES Mx 700 mg/L

- CIANUROS Mx 1 mg/L

- COBRE Mx 1 mg/L
- CROMO TOTAL Mx 3 mg/L
- MERCURIO Mx 0,05 mg/L

- NIQUEL Mx 2 mg/L
- PLOMO Mx 0,3 mg/L
- ZINC Mx 0,3 mg/L
Las concentraciones de los txicos orgnicos no podrn exceder en ms de 100 (cien) veces
los valores previstos por el artculo 5 para la clase 3.-
Las determinaciones de los parmetros, exceptuando coliformes fecales, temperatura, pH y
sulfuros, se harn sobre muestras compuestas, en un perodo de 4 horas, por muestras
horarias en volmenes proporcionales al caudal efluente en ese momento.
En ningn caso ser permitida la dilucin de efluentes con aguas no contaminadas.-
41
ANEXO 2: Programa del Taller de transferencia tcnica .
Taller de transferencia del bioensayo de toxicidad con Selenastrum

capricornutum
Montevideo, 31 de Julio al 2 de Agosto de 2002
Miercoles 31-07
14-15 hs Inicio del taller
Introduccin al bioensayo de toxicidad con Selenastrum capricornutum
Produccin de biomasa y mantenimiento de cultivos. Condiciones de crecimiento para el desarrollo
del ensayo (terico)
15-15:30 hs Intervalo
15:30-18 hs Preparacin de soluciones nutritivas y medio slido para el mantenimiento de la cepa.

Inicio de cultivo para el ensayo de toxicidad
Inculo en medio slido (prctico)
Jueves 1 08
9-10 hs Ensayo de toxicidad con Selenastrum capricornutum (terico)
10-10:15 hs Intervalo
10:15- 12 hs Preparacin del inculo para la realizacin del ensayo de toxicidad (prctico)
12- 13 hs Intervalo almuerzo
13-15 hs Mtodo de dilucin de las muestras (prctico)

Desarrollo del ensayo de toxicidad con compuestos puros (prctico)
15- 15: 30 hs Intervalo
15:30-17 hs Desarrollo del ensayo de toxicidad con muestras ambientales (prctico)
Viernes 2-08
8-10 hs Lectura del ensayo de toxicidad (prctico)
10-10:15 Intervalo
10:15-12 Anlisis y expresin de resultados (prctico con PC)
12-13 hs Intervalo almuerzo
13- 14 hs Controles de ensayo. Elaboracin de cartas control.
14 hs Discusin final.
42
ANEXO 3: Resumen del procedimiento para la toma de muestras de efluentes

industriales, por parte de la Unidad de Efluentes Industriales de la
Intendencia Municipal de Montevideo.
1. Se prepara el material a llevar

Frascos para anlisis fisicoqumicos
Frascos para anlisis bacteriolgicos
Frascos para metales pesados
Envases para bioensayos
Bolsas, etiquetas, marcadores, etc.
Se acondiciona una conservadora de muestreo.
Al llegar a la empresa los funcionarios se presentan ante las personas de

portera como pertenecientes a la Unidad de Efluentes Industriales de la
Intendencia Municipal de Montevideo, mostrando la certificacin
correspondiente.
En el acta de inspeccin se anotan los datos de la industria y se completan

los mismos con el personal que atiende.
Se solicita visitar la planta de tratamiento de efluentes. Se observa que no

hayan anomalas en la industria, tanto en el local industrial como en su
planta de tratamiento. Se observa el funcionamiento de la planta de
tratamiento y junto a quien acompaa la inspeccin por la empresa, se va a
la cmara de aforo final o punto final de vertimiento, en donde se realiza la
toma de la muestra y el aforo correspondiente.
Las muestras se extraen de la siguiente manera:
o Una muestra en recipiente de vidrio para la determinacin de grasa y

aceite.
o Una muestra en recipiente de plstico de un litro para la

determinacin del resto de los parmetros fisicoqumicos, con la
precaucin de no dejar cmara de aire.
43
o Si la industria utiliza metales pesados en sus procesos hmedos

(p.ej. curtiembres, textiles, metalrgicas, etc.) se toma una muestra
para la determinacin de los mismos, en recipiente de plstico
tratado.
o Si el vertimiento es a un curso de agua, se toma una muestra para la

determinacin de coliformes fecales en frasco esterilizado, dejando
cmara de aire.
o Se toma adems, una muestra para bioensayos en los envases

correspondientes.
En el caso de que exista cmara de aforo en el vertimiento final, se toman

las medidas en ese instante. Los registros se dejan en el acta de
inspeccin. Si no existe cmara de aforo se realizan medidas estimativas.
Por ltimo, los inspectores actuantes solicitan al representante de la

industria que acompaa la visita, que lea el acta y que escriba las
observaciones y/o descargos pertinentes, firmando el acta de inspeccin.
Se entrega copia del acta al representante de la industria para constancia.
Las muestras deben estar acondicionadas adecuadamente hasta llegar al

laboratorio. El tiempo entre la extraccin y la entrega de la muestra no debe
superar las 8 hs.
En el Laboratorio de Higiene Ambiental, donde se realizan los anlisis, se

completa el acta de entrega de muestra, que contiene los parmetros
solicitados e informacin complementaria. Se entrega la copia en el
laboratorio.
Los resultados de laboratorio se evalan y se realizan los trmites que

correspondan.
Se adjuntan los resultados al acta de inspeccin y al acta de entrega de

muestra.
44
ANEXO 4: Medio de cultivo de Hydra attenuata
Cloruro de Calcio, CaCl.2H20 2.94 g
N-tris (hydroximetil) metil l-2 ammoetanosulfnico (Buffer TES) 2.2 g
cido Etilenediamiatetractico, EDTA 0.080 g
Agua destilada en vidrio o Millipore Sper Q-. 20.0 L
Notas:
Todos los reactivos deben ser calidad ACS o al menos de 99% de

pureza.
Para la preparacin del medio de cultivo sin EDTA seguir el mismo

procedimiento, evitando la adicin de dicho compuesto. Su funcin en la
preparacin del medio de cultivo de hidra, es complejar a los metales
pesados presentes en el agua de preparacin, eliminando posibilidades
de intoxicacin.
45

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Bioensayos en Efluentes

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Los bioensayos como herramienta de evaluacin de la

toxicidad de los efluentes industriales en Uruguay.

Lic. Sandra Castro Scarone

Dr. Julio Csar Espnola Moltedo

Q.F. Diana Mguez Carams

M.Sc. Federico Viana Matturro

Administracin del Proyecto:

Direccin Nacional de Medio Ambiente (DINAMA)

Sector Ecotoxicologa Departamento de Normalizacin

Rincn 575 EP Montevideo CP 11000

Intendencia Municipal de Montevideo (IMM)

Seccin Bioensayos Laboratorio de Higiene Ambiental

Camino al Faro s/n Montevideo

Laboratorio Tecnolgico del Uruguay (LATU)

rea Aguas Minerales y Residuales - Sector Anlisis

Avenida Italia 6201 Montevideo CP 11500

Facultad de Ciencias (Universidad de la Repblica)

Seccin Oceanologa Depto. de Ecologa

Igu 4225 Montevideo CP 11400

Direccin Nacional de Medio Ambiente

Tcnico de laboratorio: Lic. Gabriela Pistone

Tcnico de muestreo: Ayud.Tecn. Gerardo Balero

Intendencia Municipal de Montevideo

Tcnicos de laboratorio: Ing. Agr. Juan Carlos Tagliani

Tcnicos de muestreo: Ing.Qum. Alicia Raffaele

Laboratorio Tecnolgico del Uruguay

Tcnicos de laboratorio: Q.F. Patricia Baklayan

Tcnicos de laboratorio: Lic. Gustavo Saona

Centro de Investigaciones del Medio Ambiente (CIMA) Universidad de

Asesoramiento tcnico: Dra. Alicia Ronco

2.1 Objetivo general ............................................................................ 6

2.2 Objetivos especficos .................................................................... 6

3 Materiales y Mtodos .................................................................... 7

3.1 Efluentes industriales .................................................................... 7

3.2 Bioensayos .................................................................................... 10

3.2.1 Bacterias: sistema Microtox .......................................................... 11

3.2.2 Cnidarios: Hydra attenuata ........................................................... 12

3.2.3 Microcrustceos: Daphnia magna ................................................ 14

3.2.4 Peces: Cnesterodon decemmaculatus ......................................... 16

3.3 Anlisis de datos y expresin de resultados ................................. 18

4 Resultados y Discusin ................................................................. 21

4.1 Caracterizacin fisicoqumica de los efluentes ............................. 21

4.2 Sensibilidad de los bioensayos ..................................................... 22

4.3 Toxicidad y cumplimiento con la Normativa Nacional ................... 23

4.4 Tasa de Emisiones Txicas (TER) ............................................... 28

4.5 Toxicidad de los efluentes industriales segn el ndice PEEP...... 29

Anexo 2: Programa del taller de transferencia tecnolgica ........... 42

Anexo 3: Procedimiento para la toma de muestras de efluentes

Anexo 4:Medio de cultivo de Hydra attenuata .............................. 45

Los ensayos de toxicidad con organismos acuticos son mtodos

En Uruguay existen antecedentes de trabajos independientes donde

trabajo de investigacin titulado Evaluacin de la toxicidad aguda de efluentes

Recientemente y dentro del marco de revisin de la normativa nacional, se

Actualmente la Red est conformada por cuatro Instituciones:

Ministerio de Vivienda Ordenamiento Territorial y Medio Ambiente

Organismo estatal cuyas funciones entre otras son la de control de vertidos

Intendencia Municipal de Montevideo (IMM).

Organismo departamental que lleva a cabo a travs de su Laboratorio de Higiene

Laboratorio Tecnolgico del Uruguay (LATU).

Organismo paraestatal cuyas principales actividades consisten en el control de

Facultad de Ciencias - Universidad de la Repblica (UdeLAR).

Centro acadmico estatal de investigacin y docencia que en los ltimos aos ha

En estos dos aos de vida de la Red se ha cosechado una importante

En el ao 2002 se desarroll en las instalaciones del LATU, en el marco de