46 Captulo 4 Receptores: estructura y funcin

regin de unin Van

H-bond regin de
der Waals regin de unin inica
unin

MARIDO
O
grupos de unin O 2 do

H
HAMPSHIRE 2 Me OH Sitio de unin
NUEVA

Receptor
neurotransmisor

FIGURA 4.6 Un receptor hipottica y neurotransmisor.

forma del sitio de unin se altera y un inducido fi cio ha tenido lugar.

e ilustracin Th que se muestra aqu es un catin simplifi del proceso de t

D e hipottico sitio de unin contiene tres aglutinantes regiones en que
contienen grupos funcionales que son complementarios a los grupos de
unin de la ger mensajero. e mensajero fi cios Th en el sitio de unin de tal
manera que las interacciones intermoleculares tienen lugar entre grupos de
unin del mensajero y regiones de unin del receptor de la (Fig. 4.7). Sin
embargo, la fi cio no es perfecto. En el diagrama, hay buenas interacciones
de van der Waals e hidrgeno de bonos, pero la interaccin inica no es tan
fuerte como podra ser. regin de unin inica e Th es lo suficientemente
cerca para tener una interaccin dbil con el ger mensajero, pero no lo
suficientemente cerca para la interaccin ptima. por lo tanto, la protena del
receptor Th e altera la forma de llevar el grupo carboxilato ms cerca del
nitrgeno cargado positivamente y para obtener una interaccin ms fuerte.
Como resultado, la
fi inducida y, en realidad, tanto el mensajero y el sitio de unin ocupan
conformaciones o formas Erent diff para maximizar las fuerzas de unin entre
ellos. Como con la unin enzima-sustrato, hay una Ance fi ne BAL- implicados
en la unin receptor-mensajero. Th e Bond- Ing fuerzas deben ser lo
suficientemente grande como para cambiar la forma del sitio de unin, pero
no tan fuerte que el mensajero es incapaz de salir. La mayora de los
neurotransmisores se unen rpidamente a sus receptores a continuacin,
'sacudirse floja' una vez que su mensaje ha sido recibido.
Ahora hemos visto cmo un mensajero qumico puede causar un inducida
fi cio en el sitio de unin de una protena receptora. Sin embargo, esto
inducidos fi cio tiene una reaccin en cadena ef ect que altera la forma global
de la protena. Es este cambio de forma general que es crucial para la
activacin de un recep- tor y en su capacidad de desencadenar una increble
"domin ef ect ', que aff eja la qumica interna de la clula. Th es domin ef
ect implica varias protenas y enzimas Erent diff, y en ltima instancia
produce un observada ef ect biolgica. E l proceso por el cual esto ocurre se
llama transduccin de seales y est cubierto con ms detalle en el
captulo 5.

electrostticas. grupos funcionales Th ESE son el mensajero de grupos de unin .

pueden participar en interacciones de enlace de hidrgeno, y un centro de nitrgeno cargado que puede participar en interacciones
MARIDO O 2 doinicas o
O OH
O
O 2 do
NUEVA HAMPSHIRE 2 Yo NUEVA HAMPSHIRE 2 Yo

S.S S.S
la Fig. 4.6. D e neurotransmisor tiene un anillo aromtico que puede participar en interacciones de Van der Waals, un grupo OH del alcohol que
Inducido
ajuste
Sitio de unin Sitio de unin

interacciones de unin resultan en un inducida fi t, consideremos un neurotransmisor hipottica y un sitio de unin hipottica como se muestra en
receptor de O Receptor

FIGURA 4.7 La unin de un neurotransmisor hipottico a un sitio de unin que resulta en un inducida fi t. Para ilustrar cmo las

Th ERE tres tipos Erent diff (o familias) de los receptores de membrana
de ruedas:
receptores de canal inico;
G-receptores acoplados a la protena;
receptores quinasa ligada.
Consideraremos cada uno de estos a su vez en secciones
4,6-4,8.
PUNTOS CLAVE
La mayora de los receptores son protenas unidas a la membrana que contienen un sitio de
unin externa de las hormonas o neurotransmisores. La unin da como resultado un
inducida fi cio que cambia la conformacin del receptor. Esto desencadena una serie de
acontecimientos que finalmente resulta en un cambio en la qumica celular.
Neurotransmisores y hormonas no se someten a una reaccin cuando se unen
a los receptores. Ellos salen del sitio de unin sin cambios una vez que se han
transmitido su mensaje.
Las interacciones que se unen a un mensajero qumico para el sitio de unin deben ser lo
suficientemente fuerte para permitir que el mensaje qumico a recibir, pero lo suficientemente
dbil como para permitir que el mensajero a partir.
grupos de unin son los grupos funcionales presentes en una molcula
mensajera que se utilizan para la unin al sitio de unin del receptor.
proceso por el que se activan y desencadenar el proceso de transduccin de seales.
receptor, se produce un fi t inducida que hace que la protena de cambiar de
regiones de unin son las regiones del sitio de unin de receptor que contienen
grupos funcionales capaces de formar enlaces intermoleculares a los grupos de unin
de una molcula mensajera.
tener un dramtico eff ect en la qumica interna de la clula. En este captulo, nos centraremos en la estructura de los receptores Erent diff y el
es una caracterstica importante de este proceso, ya que significa que un nmero relativamente pequeo de molculas de neurotransmisor puede
Membrana
celular
FIGURA 4.8 estructura e Th de un canal inico. D e las lneas de trazo grueso indican las partes hidrfilas de la canal. amplifi seal catin
receptores de los canales de iones 47
4.6 receptores de los canales de iones
4.6.1 Principios generales
Algunos neurotransmisores operan mediante el control de los canales de
iones. Cules son estos canales inicos y por qu son necesarias? Veamos
de nuevo en la estructura de la membrana celular.
Como se describe en la seccin 1.2.1, la membrana se compone de una
bicapa de molculas de fosfolpido por lo que el medio de la membrana de la
clula es "graso" y hidrfoba. una barrera de este tipo permite culto diffi para las
molculas polares o iones se muevan dentro o fuera de la clula. Sin embargo, es
importante que estas especies deben cruzar. Por ejemplo, el movimiento de los
iones de sodio y potasio a travs de la membrana es crucial para la funcin de los
nervios (Apndice 4). Parece un problema insoluble, pero, una vez ms, las
protenas ubicuas proporcionan la respuesta mediante la formacin de canales
inicos.
Los canales inicos son complejos de compuestos de cinco subunidades
de protenas que atraviesan la membrana celular (Fig. 4.8). E l centro del
complejo es hueca y llena de aminocidos polares para dar un tnel
hidrfilo, o poro.
Los iones pueden atravesar la barrera grasos de la membrana celular
moviendo a travs de estos canales hidroflicos o tneles. Pero tiene que haber
algn tipo de control. En otras palabras, tiene que haber una "compuerta de
esclusa 'que se puede abrir o cerrar segn sea necesario. Tiene sentido que esta
puerta de bloqueo debe ser controlado por una protena receptor sensible a un
mensajero qumico externo, y esto es exactamente lo que sucede. De hecho, la
protena receptor es una parte integral del complejo de canales de iones y es uno
o ms de las subunidades de protenas constituyentes. En el estado de reposo, el
canal inico est cerrado (es decir, la puerta de bloqueo se cierra). Sin embargo,
cuando un mensajero qumico se une al sitio de unin externa de la protena del
forma. Th es, a su vez, hace que el complejo de protenas en general de cambiar
de forma, la apertura de
hidrfila
tnel
48 Captulo 4 Receptores: estructura y funcin

Mensajero

canal
unin al canal
inico
receptor inico
(cerrado)
sitio (abierta)
Mensajero
ajuste inducido y la
apertura del canal de
puerta de
iones
bloqueo

Membrana canal de canal de Membrana Membrana canal de canal de Membrana

celular iones iones celular celular iones iones celular

Celda Celda

FIGURA 4.9 mecanismo de bloqueo de puerta para la apertura de los canales inicos.

la puerta de bloqueo y permitiendo que los iones pasen a travs del canal de
iones (Fig. 4.9). Veremos esto con ms detalle en la seccin 4.6.3.
E l funcionamiento de un canal inico explica por qu el nmero
relativamente pequeo de molculas de neurotransmisor liberado por una
neurona es capaz de tener un peralte tales signifi biolgica ef ect en la clula
diana. Al abrir unos canales inicos, varios miles de iones se movilizan para
cada molcula de neurotransmisor implicado. Por otra parte, la unin de un
neurotransmisor a un canal inico da como resultado una respuesta rpida,
medida en cuestin de milisegundos. Th es la razn por la transmisin
sinptica de las seales entre las neuronas por lo general implica canales
misor acetilcolina. La mayor parte del sitio de unin est en el
- subunidad, pero hay cierta participacin de subunidades vecinas. En
este caso, el complejo canal inico como un todo podra considerarse
como el receptor.
Concentrmonos ahora en las unidades de la protena individual sub.
Aunque hay varios tipos de estos, todos ellos se pliegan de una manera
similar tal que la cadena de protena atraviesa la membrana celular cuatro
veces. Esto significa que
(un) canal de iones

inicos.

Los canales inicos son especfi ca para ciertos iones. Por ejemplo hay
canales inicos Erent catinico diff de sodio (Na +), potasio (K +) y calcio

(Ca 2+ ) iones. Th ERE son tambin canales inicos aninicos para el in

cloruro (Cl - ). selectividad e ion Th de los canales inicos Erent diff depende

de los aminocidos que alinean el canal de iones. Es interesante observar
que la mutacin de un solo aminocido en esta rea es sufi ciente para
cambiar un canal inico catinico selectivo a una que es selectiva para yo II

aniones.
(segundo)

TM4

TM1
4.6.2 Estructura TM3

TM3 TM2 TM1
D e cinco subunidades proteicas que forman un canal inico son en realidad (glicoprotenas
TM4 TM2 TM4
secciones 2.5 y 10.7.1), pero nos referiremos a ellos aqu como protenas. e
TM1 TM3
subunidades de la protena Th en un canal inico no son idnticos. Por ejemplo, TM2 TM2
el canal inico controlado por el receptor colinrgico nicotnico se compone de
TM3 TM2 TM1
cinco subunidades de cuatro tipos Erent diff [ ( 2)

TM4 TM1 TM3 TM4

, , ]; el canal inico controlado por el receptor de glicina se compone de
cinco subunidades de dos tipos Erent diff [ ( 3),

( 2)] (Fig. 4.10).
la protena del receptor e Th en el canal inico controlado por la glicina es FIGURA 4.10 ( un ) pentamrica estructura de los canales inicos (vista transversal).

el - subunidad. ree Th tales subunidades estn presentes, todos los cuales I, canal inico controlado por un receptor colinrgico nicotnico; II, canal inico

son capaces de interactuar con glicina. Sin embargo, la situacin es un poco controlado por un receptor de glicina. D e los crculos coloreados indican los sitios de

ms compleja en el canal inico nicotnico controlada por la neurotransmisin unin a ligando. ( segundo ) vista transversal de I, incluidas las regiones

transmembrana.
 receptores de los canales de iones 49

regin de unin del haciendo que el canal inico para abrir-un proceso llamado
neurotransmisor
gating ( Higo. 4,12).
Th unin de un neurotransmisor a su sitio de unin e provoca un cambio
H2N conformacional en el receptor, que con el tiempo se abre el poro central y
bucle extracelular
permite que los iones de flujo. Th es el cambio conformacional es bastante
CO2H
compleja, que afecta a varios knock-on ECTS eff del proceso de ING vinculante
inicial. Th es lo que debe ser, ya que el sitio de unin es bastante lejos de la
puerta de bloqueo. Los estudios han demostrado que el bloqueo de puerta se
compone de cinco doblada - hlices, donde una hlice (la regin 2-TM) es
aportado por cada una de las cinco subunidades proteicas. En el estado cerrado
TM1 TM2 TM3 TM4
las torceduras apuntan una hacia la otra. e cambio conformacional Th inducida
por causas de unin a ligando de cada uno de estas hlices para girar de
bucle intracelular
manera que el retorcimiento seala la otra manera, abriendo as el poro (Fig.
bucle intracelular
Variable 4.13).

FIGURA 4.11 Estructura de los cuatro transmembrana

(4-TM) subunidad del receptor.

4.6.4 canales inicos dependientes de voltaje por

cada subunidad tiene cuatro regiones transmembrana (TM) que son de
naturaleza hidrfoba. ESE Th estn etiquetados TM1-TM4. Th ERE es
tambin una larga norte - cadena extracelular terminal que (en el caso de la - canales inicos e Th que hemos discutido hasta ahora son llamados
subunidad) contiene el sitio de unin a ligando (Fig. 4.11).
e subunidades Th estn dispuestos de tal manera que la segunda regin
transmembrana de cada subunidad se enfrenta el poro central del canal de iones
(Fig. 4.10). Veremos el signifi - cado de esto cuando nos fijamos en la siguiente
seccin.
ligando y
canales inicos activados por ligando a medida que se controlan por medio
de mensajeros qumicos ( ligandos ). Th ERE son otros tipos de canales de iones
que no son controlados por ligandos, sino que son sensibles al potencial rencia
diff que existe a travs de una membrana celular del Potencial de membrana .
Th canales inicos ESE estn presentes en los axones de las clulas capaces excitantes

(es decir, neuronas) y se llaman canales inicos dependientes de voltaje. Th ey son

cruciales para la transmisin de una seal a lo largo de las neuronas individuales y son
4.6.3 gating
importantes dianas farmacolgicas para los anestsicos locales. Una descripcin de estos

Cuando el receptor se une un ligando, que cambie la forma que tiene una canales inicos se da en el Apndice 4.

reaccin en cadena ef ect en el complejo de protenas,

Receptor Sitio de unin Mensajero

Celda Membrana
membrana celular

Cinco subunidades de protenas

FIGURA 4.12 Apertura de un canal inico (gating).

50 Captulo 4 Receptores: estructura y funcin
TM2 TM2
Celda
membrana
TM2
TM2
TM2 TM2
vista transversal
TM2
Cerrado
FIGURA 4.13 Apertura de la "puerta de bloqueo 'en un canal inico.
PUNTOS CLAVE
Los receptores que controlan los canales de iones son una parte integral del canal
de iones. La unin de un mensajero induce un cambio en la forma, lo que resulta en
la rpida apertura del canal inico.
Los receptores que controlan los canales de iones se denominan receptores de los canales
inicos activados por ligando. Se componen de cinco subunidades de protenas con estar
presente en una o ms de las subunidades del sitio de unin al receptor.
La unin de un neurotransmisor a un receptor de canal de iones provoca un cambio
conformacional en las subunidades de la protena de tal manera que el segundo
dominio transmembrana de cada subunidad gira para abrir el canal.
4.7 receptores G acoplados a protenas
4.7.1 Principios generales
Los receptores G acoplados a protenas son algunos de los objetivos de
medicamentos ms importantes en la qumica mdica. De hecho, alrededor del 30% de
todos los medicamentos en el mercado actan mediante la unin a estos receptores.
En general, se activan por las hormonas y los neurotransmisores de accin lenta. Th ey
incluyen la
muscarnico receptor ( seccin 22.11), los receptores adrenrgicos ( seccin
23.2), y receptores opioides ( seccin 24.4). Th e respuesta de la protena G
acoplada receptores activados se mide en segundos. Th es es ms lenta que la
respuesta de los canales inicos, pero ms rpido que la respuesta de los
receptores de quinasa vinculada (seccin 4.8), que toma una cuestin de minutos.
Th ERE son un gran nmero de Erent diff receptores acoplados a la protena G
interactuar con los neurotransmisores importantes,
flujo de iones
TM2 TM2
vista transversal
TM2 TM2
TM2
Abierto
tales como la acetilcolina, la dopamina, la histamina, la serotonina, el
glutamato, y la noradrenalina. Otros receptores G acoplados a protenas se
activan mediante pptidos y protenas hormonas, tales como las encefalinas y
endorfinas.
G-receptores acoplados a protenas son protenas de membrana que son
responsables de la activacin de las protenas llamadas
Las protenas G ( Higo. 4,14). Th ltimas protenas actan como ESE el
indicador de protenas porque son capaces de activar o desac- tivating enzimas
unidas a la membrana (secciones 5.1-5.2). En consecuencia, la activacin del
receptor por un mensajero qumico infl uye las reacciones que tienen lugar
dentro de la clula.
la protena del receptor e Th est incrustado dentro de la membrana,
con el sitio de unin para el mensajero qumico expuesto en la superficie
exterior. En la superficie interna, hay otro sitio de unin que est
normalmente cerrada (Fig.
4.14, el cuadro 1). Cuando el mensajero qumico se une a su sitio de unin, la
protena del receptor cambia de forma, abertura hasta el sitio de unin en la
superficie interior. Th es nuevo sitio de unin es reconocida por la protena G,
que a su vez se une (Fig. 4.14, el bastidor 2). Th e la protena G se une a la
superficie interior de la membrana celular y se compone de tres subunidades de
la protena, pero una vez que se une al receptor del complejo se desestabiliza y
fragmentos para un monmero y un dmero (Fig. 4.14, marco 3 ). ESE Th luego
interactan con enzimas de membrana para continuar con la seal de
transmisin proceso de produccin (secciones 5.1 a 5.3).
Th ERE son varios diff Erent protenas G, que se reconocimos por tipos de
receptores Erent diff. Algunas de las subunidades vada dades de las protenas
G que tienen un inhibidor ef ect sobre una enzima unida a la membrana,
mientras que otros tienen un estimulador ef ect. Sin embargo, el mecanismo
por el cual la protena G se activa por la fragmentacin es el mismo.
 receptores G acoplados a protenas 51

1 2 3
Mensajero

mensajero mensajero

Membrana Receptor receptor de receptor de

celular

Celda Protenas G Celda

Sitio de unin Celda
Sitio de unin
(Cerrado) (abierto)

FIGURA 4.14 La activacin de un receptor acoplado a protena G y G-protena.

ERE Th es un amplifi cacin sustancial de la seal en este
proceso, como un receptor activado activa varias protenas G.
4.7.2 Estructura
receptores de Th e G acoplados a protenas se pliegan dentro de la membrana
celular de tal manera que los vientos de la cadena de protena de ida y vuelta a
travs de la membrana celular siete veces (Fig. 4.15). Cada una de las secciones
de siete transmembrana es hydropho- BIC y de forma helicoidal, y es habitual
para asignar estas hlices con nmeros romanos (I, II, etc.) a partir de la
hormona mensajero es en la porcin extracelular de la protena. Th e
posicin exacta del sitio de unin vara de receptor a receptor. Por ejemplo,
el sitio de unin para el receptor adrenrgico est en un bolsillo de unin
profunda entre las hlices transmembrana, mientras que el sitio de unin
para el receptor de glutamato implica la norte - cadena terminal y est situado
por encima de la superficie de la membrana celular.
4.7.3 La familia rodopsina-como de los receptores G
acoplados a protenas

norte - terminal de la protena. Debido al nmero de regiones
transmembrana, las protenas G tambin se denominan 7-TM
receptores . sitio de unin de Th e para la protena G se encuentra en el
lado intracelular de la protena y comprende parte de la do - cadena
terminal, as como parte del bucle intracelular variable (llaman as porque
la longitud de este bucle vara entre tipos Erent diff de receptor). Como
era de esperar, el sitio de unin para el neurotransmisor o
receptores d e G acoplados a protenas incluyen los receptores para algunos
de los mensajeros qumicos ms conocidos de la qumica medicinales (por
ejemplo, cido glutmico, el GABA, noradrenalina, dopamina, acetilcolina,
serotonina, prostaglandinas, adenosina, los opioides endgenos, angiotensina,
bradiquinina , y trombina). Teniendo en cuenta la variedad estructural de los
mensajeros qumicos que intervienen, es notable que las estructuras generales
de los receptores de la protena G acoplada

bucles
extracelulares NUEVA HAMPSHIRE 2

NORTE- terminal de la

cadena

Membrana =
VII V IV III II yo

Protenas G
regin de bucle intracelular
unin
HO 2 do
VI variable de
bucles
DO- terminal de la
intracelulares
cadena

FIGURA 4.15 Estructura de los receptores acoplados a la protena G.

52 Captulo 4 Receptores: estructura y funcin
son tan similares. Sin embargo, a pesar de su estructura general similar, las
secuencias de aminocidos de los receptores varan significativamente
bastante signifi. Th es implica que estos receptores han evolucionado durante
millones de aos a partir de una protena ancestral comn antigua. La
comparacin de las secuencias de aminocidos de los receptores nos permite
construir un rbol evolutivo y al grupo de los receptores de esta superfamilia en
varias sub-familias, que se defi ne en la categora A (receptores de Rho-dopsin
similares), clase B (secretin- como receptores), y la clase C (receptores de
glutamato-como feromona y metabotrpicos). Th e ms importante de stos,
en lo que se refiere a la qumica medicinal, es la rodopsina-como de la
familia-as llamada porque el receptor primero de esta familia que se estudi
en detalle fue el propio receptor de la rodopsina, un receptor implicado en el
proceso visual . Un estudio del rbol evolutivo de los receptores de rodopsina
como vomita algunas observaciones interesantes (Fig. 4.16).
En primer lugar, el rbol evolutivo ilustra la similitud entre tipos diff Erent
de receptores en base a sus posiciones relativas en el rbol. Th nosotros,
el muscarnico, - adrenrgico,
- adrenrgicos, histamina y los receptores de dopamina han evolucionado a
partir de una rama comn del rbol evolutivo y tienen mayor similitud entre s
que a ningn receptor de derivados de una rama evolutiva anterior (por
ejemplo la receptor de la angiotensina ). Tal similitud receptor puede ser un conocido como
problema en la qumica mdica. A pesar de que los receptores se distinguen
por diff Erent neurotransmisores u hormonas en el cuerpo, un medicamento
no puede llegar a hacer esa distincin. Th erefore, es importante asegurarse
de que cualquier nuevo frmaco dirigido a un tipo de receptor (por ejemplo,
el receptor de dopamina) no interacta con el mismo tipo de receptor (por
ejemplo, el receptor muscarnico).
Los receptores han evolucionado a continuacin para dar los receptores tipos
y subtipos que reconocen el mismo mensajero qumico, pero son
estructuralmente Erent diff. Por ejemplo, hay
Ancestro comn
muscarnico
La bradicinina,
endotelinas angiotensina, la taquiquininas
interleucina-8
2 4 3 15 H1
muscarnico La histamina
FIGURA 4.16 rbol de la evolucin de los receptores acoplados a la protena G.
son dos tipos de receptores adrenrgicos ( y ), cada uno de los cuales
tiene varios subtipos ( 1 , 2A , 2B , 2C , 1 , 2 , 3 ).
Th ERE dos tipos de receptor nicotnico colinrgico-(un receptor de canal
de iones) y muscarnicos (a tor recepcin 7-TM). Cinco subtipos de
receptores muscarnicos colinrgicos han sido identifi cado.
Th e existencia de subtipos de receptores permite la posi- bilidad de diseo de
frmacos que son selectivos para un subtipo de receptor sobre el otro. Th es es
importante, porque un subtipo de receptor puede ser frecuente en una parte del cuerpo
(por ejemplo el intestino), mientras que un subtipo de receptor Erent diff es equiva-
lencia en otra parte (por ejemplo, el corazn). erefore Th, un frmaco que est diseado
para interactuar selectivamente con el subtipo de receptor en el intestino es menos
probable que tenga ECTS eff secundarios sobre el corazn. Incluso si los subtipos de
receptores diff Erent estn presentes en la misma parte del cuerpo, todava es
importante para que los medicamentos tan selectiva como sea posible porque los
subtipos de receptores diff Erent frecuencia activan diff sistemas de sealizacin, lo que
lleva a los resultados biolgicos diff Erent Erent.
Un estudio ms detallado del rbol evolutivo revela algunos datos
curiosos sobre los orgenes de los subtipos de receptores. Como era de
esperar, varios subtipos de receptores han divergido de una rama evolutiva
comn (por ejemplo, los subtipos de dopamina D2, D3, D4). Th se es
evolucin divergente y debe existir una estrecha similitud estructural entre
estos subtipos. Sin embargo, los subtipos de los receptores de tambin se
encuentran en ramas separadas del rbol. Por ejemplo, los subtipos de
receptores de dopamina (D1 UN ,
D1 segundo , y D5) han desarrollado a partir de una Erent diff Evolucin- rama aria.
En otras palabras, la capacidad de un receptor para unirse a la dopamina se ha
desarrollado en Erent diff ramas-un ejemplo de la evolucin evolucin
convergente .
En consecuencia, puede ser a veces mayores similitudes entre los
receptores que se unen ligandos Erent diff, pero que han evolucionado a
partir de la misma rama del rbol
monoaminas
Opsinas, rhodopsins
tipos de
receptores
subtipos de
receptores
H2 1 2A 2B 2C D4 D3 D2 D1A D1B D5 321
- adrenrgico dopaminrgica - adrenrgico

que hay entre los diferentes subtipos de receptores que se unen el mismo
ligando. Por ejemplo, la histamina H 1 receptor se parece a un receptor
muscarnico ms estrechamente que lo hace la histamina H 2 receptor. De
nuevo, esto tiene consecuencias importantes en el diseo de frmacos porque
hay una mayor posibilidad de que un frmaco dirigido a un receptor muscarnico
tambin puede interactuar con un histamina H 1 receptor y el plomo a ECTS eff
secundarios no deseados.
Como estos receptores son unidos a la membrana, no es fcil para cristalizar
ellos para de rayos X estudios cristalogrficos. Sin embargo, las estructuras
cristalinas de rayos X de la 2 y 1
adrenoceptores ahora se han determinado.
4.7.4 La dimerizacin de los receptores G acoplados
Th ERE es una fuerte evidencia de que algunos receptores acoplados a G pueden
existir como estructuras dimricas que contienen tipos Erent idnticos o diff de los
receptores-homodmeros o meros heterodi- respectivamente. e Th presencia de
estos dmeros del receptor parece variar entre los tejidos Erent diff y esto tiene
consecuencias importantes para el diseo de frmacos. Un agente que es
selectivo para un tipo de receptor hara aff ect otros tipos no normalmente. Sin
embargo, si los heterodmeros de receptores estn presentes, una "comunicacin"
es posible entre los receptores de componente de manera que un agente de
interaccin con una media del dmero puede aff ect la actividad de la otra mitad.
Th se se discute ms adelante en la seccin 24.9 con respecto a los receptores
opioides.
PUNTOS CLAVE
G-receptores acoplados a protenas activan el indicador de protenas llamadas protenas
G. La unin de un mensajero da como resultado la apertura de un sitio de unin para la
protena de la seal. Este ltimo se une y fragmentos, con una de las subunidades que
salen para activar una enzima unida a la membrana.
Los receptores G acoplados a protenas son protenas de membrana con siete secciones
transmembrana. los do - cadena de terminal se encuentra dentro de la clula y el norte - cadena
terminal es extracelular.
1 2
Mensajero
Membrana
Membrana Receptor Membrana
celular
celular celular
Celda sitio activo Celda
(cerrado)
FIGURA 4.17 activacin de la enzima.
receptores quinasa vinculada 53
La ubicacin del sitio de unin difiere entre diferentes receptores acoplados a
la protena G.
La familia rodopsina-como de los receptores G acoplados a la protena incluye muchos
receptores que son objetivos para los frmacos actualmente importantes.
tipos de receptores y subtipos de reconocer el mismo mensajero qumico, pero
tienen diferencias estructurales, por lo que es posible el diseo de frmacos que
son selectivos para un tipo (o subtipo) de receptor sobre el otro.
subtipos de receptores pueden surgir de la evolucin divergente o convergente.
Es posible que algunos G-receptores acoplados a protenas a existir como estructuras
dimricas.
4.8 receptores quinasa vinculada
4.8.1 Principios generales
receptores quinasa vinculada son una superfamilia de receptores que activan
enzimas directamente y no requieren una protena G (Fig. 4.17). receptores
de tirosina quinasa son ejemplos importantes de la quinasa de receptores
ligados y estn demostrando ser muy importantes para los objetivos de
nuevos frmacos anticancerosos (seccin 21.6.2). En estas estructuras, la
protena en cuestin juega el doble papel de los receptores y enzimas. la
protena del receptor e Th est incrustado dentro de la membrana celular, con
parte de su estructura expuesta en la superficie exterior de la clula y parte
expuesta en la superficie interior. e superficie exterior Th contiene el sitio de
unin para el mensajero qumico y la superficie interna tiene un sitio activo
que est cerrado en el estado de reposo. Cuando un mensajero qumico se
une al receptor que hace que la protena de cambiar de forma. Th es
resultado en el sitio activo estn abriendo, permitiendo que la protena de
actuar como una enzima dentro de la clula. reaccin e Th que est
catalizada es una reaccin de fosforilacin en residuos de tirosina en
3
Mensajero Mensajero
Membrana Membrana Membrana
Receptor Receptor
celular celular celular
Sitio activo Celda
(abierto)
AB
54 Captulo 4 Receptores: estructura y funcin
un sustrato de protenas son fosforilados. Una enzima que cataliza reacciones
de fosforilacin se conoce como una enzima quinasa y por lo que la protena
se conoce como un receptor de tirosina quinasa. ATP se requiere como
cofactor para proporcionar el grupo fosfato es necesario. Th e sitio activo
permanece abierta durante el tiempo que la molcula mensajera est unido al
receptor, y por lo tanto puede ocurrir varias reacciones de fosforilacin, lo que
resulta en un amplifi cacin de la seal. Una curiosidad de esta reaccin
catalizada por enzimas es que el sustrato para la reaccin es el propio
receptor. Th se explica con ms detalle en la seccin 4.8.3.
receptores de Th e quinasa ligada se activan por un gran nmero de
hormonas polipeptdicas, factores de crecimiento y citoquinas. La prdida de
funcin de estos receptores puede dar lugar a defectos de desarrollo o
resistencia a la hormona. la sobreexpresin puede dar lugar a trastornos del
crecimiento maligno.
4.8.2 Estructura de los receptores de
tirosina quinasa
Th e estructura bsica de un receptor de tirosina quinasa se compone de una
sola regin extracelular (la norte - cadena terminal) que incluye el sitio de
unin para el mensajero qumico, una sola regin hidrfoba que atraviesa la
membrana como una - hlice de siete vueltas (solo sufi ciente para
atravesar la membrana), y una do - cadena terminal en el interior de la
membrana de la clula (Fig. 4.18). Los do - regin terminal contiene el sitio de de crecimiento ( GH) receptor es un ejemplo de este tipo de receptor y es
unin cataltica. Los ejemplos de receptores de tirosina quinasa incluyen el
receptor para insulina, y receptores para diversos citoquinas y factores de
crecimiento .
4.8.3 mecanismo de activacin de los receptores de tirosina
quinasa
Un ejemplo especfi de un receptor de tirosina quinasa es el receptor para una
hormona llamada factor de crecimiento epidrmico
(EGF). EGF es una ligando bivalente que pueden unirse a dos receptores al
mismo tiempo. Esto resulta en dimer- receptores
NUEVA HAMPSHIRE 2
de unin a ligando
la membrana de la clula regin
regin de unin cataltica
CO 2 MARIDO
FIGURA 4.18 Estructura de los receptores de tirosina quinasa.
zacin , as como la activacin de la actividad enzimtica. proceso e
dimerizacin Th es importante porque el sitio activo en cada mitad del
dmero receptor cataliza la fosforilacin de residuos de tirosina accesibles
en el otro medio (Fig. 4.19). Si no se produce la dimerizacin, sin la
fosforilacin se llevara a cabo. Tenga en cuenta que estas fosforilaciones
se producen en la porcin intracelular de la cadena de la protena del
receptor. D e importancia de estas reacciones de fosforilacin se explica en
la seccin 5.4.1. Th e punto importante a alcanzar en esta etapa es que un
mensajero qumico externo ha logrado transmitir el mensaje al interior de la
clula sin que ella misma sean alteradas o tener que entrar en la clula.
Dimerizacin y autofosforilacin se com- temas comunes para los
receptores de esta familia. Sin embargo, algunos de los receptores en
esta familia ya existen como dmeros o tetrmeros, y slo requieren la
unin del ligando. Por ejemplo, el insulina receptor es un complejo
heterotetrameric (Fig. 4.20).
4.8.4 receptores de tirosina quinasa ligada
Algunos receptores quinasa unirse a ligandos y dimerizar de forma similar a
las descritas anteriormente, pero no tienen actividad cataltica inherente a
su do - cadena terminal. Sin embargo, una vez que han dimerizado, que
pueden unirse y activar una enzima tirosina quinasa del citoplasma. Los hormona
ed clasifi como una tirosina quinasa vinculada receptor (Fig. 4.21).
PUNTOS CLAVE
quinasa de receptores ligados son receptores que estn directamente vinculados a
enzimas quinasa. Mensajero resultados de unin en la apertura del sitio quinasa
activa, lo que permite una reaccin cataltica tiene lugar.
receptores de tirosina quinasa tienen un sitio de unin extracelular para un
mensajero qumico y un enzimtica intracelular
representacin simplificada
 Los receptores intracelulares 55

EGF

ligando bivalente

La unin del ligando y La fosforilacin

dimerizacin
Celda

membrana
PAG PAG

ATP ADP
monmeros inactivos La activacin de la
PAG PPP
receptor de EGF tirosina quinasa
actividad

FIGURA 4.19 mecanismo de activacin para el receptor del factor de crecimiento epidrmico (EGF).

Insulina

La fosforilacin
Celda

membrana
PAG PAG PAG PAG

ATP ADP
PAG PAG

FIGURA 4.20 La unin del ligando y la activacin del receptor de la insulina.

GH

Unin La activacin y p hosphorylati

Dimerizatio norte de quinasa s en

ATP ADP
receptores de GH
PAG PAG
PPP
PAG
quinasas

FIGURA 4.21 La activacin del receptor de la hormona de crecimiento (GH).

sitio activo que cataliza la fosforilacin de residuos de tirosina en sustratos

4.9 Los receptores intracelulares
proteicos.

la unin a los resultados del receptor del factor de crecimiento epidrmico (EGF) No todos los receptores estn localizados en la membrana celular. Algunos receptores
en la dimerizacin y la apertura de los sitios activos del ligando. El sitio activo en se encuentran dentro de la clula y se defi ne como receptores intracelulares. Th ERE
un medio del dmero cataliza la fosforilacin de residuos de tirosina presente en el son cerca de 50 miembros de este grupo y que son particularmente importantes en la
do - cadena terminal de la otra mitad. regulacin de la transcripcin de genes directamente. Como resultado, ellos son a

menudo en llamada receptores de hormonas nucleares o factores de

El receptor de insulina es una estructura preformada heterotetrameric que acta como transcripcin nucleares. mensajeros qumicos e Th para estos los receptores

un receptor de la tirosina quinasa. incluyen las hormonas esteroides, hormonas tiroideas, y los retinoides. En todos estos

casos, el mensajero tiene que pasar a travs de la membrana celular con el fin de
El receptor de la hormona de crecimiento dimeriza sobre la unin a su ligando, a
llegar a su receptor por lo que tiene que ser de naturaleza hidrfoba. tiempo de
continuacin, se une y activa las enzimas de tirosina quinasa del citoplasma.
respuesta Th e
56 Captulo 4 Receptores: estructura y funcin
resultante de la activacin de los receptores intracelulares se mide en
horas o das, y es mucho ms lento que los tiempos de respuesta de los
receptores unidos a la membrana.
e receptores intracelulares Th tienen estructuras generales similares. Th ey
consisten de una sola protena que contiene un sitio de unin al ligando do - terminal
corta. Por ejemplo, el dmero de estrgeno ligando-receptor se une a una
y una regin de unin de ADN cerca del centro (Fig. 4.22). regin de unin a
DNA e Th contiene nueve residuos de cistena, ocho de los cuales estn
implicados en la unin de dos iones de zinc. iones zinc e Th juegan un papel
crucial en la estabilizacin y la determinacin de la conformacin de la regin
de unin a ADN. Como resultado, los tramos de la protena en cuestin se
denominan zinc dominios dedo. Th e regin de unin para cada receptor
puede identificar secuencias de nucletidos particulares en el ADN de ADN.
Por ejemplo, los dominios de zinc dedo de la estrgenos recep- tor reconocer
la secuencia 5 '- AGGTCA-3 ', en la que A, G,
C, y T son adenina, guanina, citosina y timina. E l mecanismo por el cual los
receptores intracelulares trabajo tambin es muy similar (Fig. 4.23). Una
vez que el mensajero qumico (ligando) ha cruzado la membrana celular,
que busca a su receptor y se une a ella en el sitio de unin del ligando. Un
inducida fi cio se lleva a cabo lo que hace que el receptor de cambiar de
forma. Th es, a su vez, conduce a una dimerizacin del complejo
ligando-receptor. D e dmero se une a una
CO 2 MARIDO
regin de
unin de
esteroides
ADN vinculante regin (
"dedos de zinc ')
MARIDO 2 norte
FIGURA 4.22 Estructura de los receptores intracelulares.
Receptor
Mensajero
complejo
receptor-ligando
Membrana
celular
FIGURA 4.23 De mensajero para el control de la transcripcin de genes.
protena llamada co-activador y, finalmente, todo el compleja se une a una
regin particular del ADN de la clula. Como hay dos receptores en el
complejo y dos regiones de unin al ADN, el complejo reconoce dos
secuencias idnticas de nucletidos en el ADN separados por una distancia
secuencia de nucletidos de 5 '- AGGTCANNNTGACCT-3 '
donde N puede ser cualquier base de cido nucleico. Dependiendo de la compleja
involucrada, la unin del complejo con el ADN, ya sea desencadena o inhibe el
inicio de la transcripcin, y ECTS aff la eventual sntesis de una protena.
4.10 La regulacin de la actividad del receptor
E l papel de los sitios de unin alostricos en la regulacin de la actividad
de las enzimas se trata en la seccin 3.6. sitios de unin alostricos
tambin juegan un papel en la regulacin o modulacin de la actividad de
diversos receptores. ESE Th incluyen canales inicos activados por
ligando, como la nicotnico y la - receptores aminobutrico, y varios
receptores G acoplados a protenas, tales como los receptores
muscarnicos, de adenosina, y la dopamina. Las estructuras que
interactan con estos sitios se llaman res moduladores alostricos y
puede aumentar o disminuir la ef ect del mensajero qumico en el
receptor (secciones 8.2.7 y 8.3.2).
4.11 polimorfismo gentico y
receptores
polimorfismo gentico se discute en la seccin 3.5.6 con respecto a las
enzimas. El polimorfismo tambin es responsable de los receptores que tienen
cias diff sutiles en la estructura y la actividad entre los individuos. En algunos
casos, esto puede conducir a enfermedades como el cncer (seccin 21.1.3).
Co-activador de la
protena
ADN
dmero
 Otras lecturas 57

Notas clave La unin de un ligando con un intracelulares receptor da como resultado la

dimerizacin y la formacin de un complejo de factor de transcripcin que se une
Los receptores intracelulares se encuentran dentro de la clula y son importantes en el
a una secuencia de nucletidos fi especfica en el ADN.
control de la transcripcin.

Los mensajeros qumicos para receptores intracelulares deben ser su fi cientemente

hidrfobo para pasar a travs de la membrana celular.

PREGUNTAS

1. Explicar la diferencia entre un sitio de unin y una para la - los receptores adrenrgicos. La adrenalina no muestra la selectividad y se

regin de unin. une igual de bien tanto a la - y - adrenrgicos. Sugerir una explicacin para estas

diferencias en la selectividad.
2. Tenga en cuenta las estructuras de los neurotransmisores que se muestran

en la Fig. 4.3 y sugerir qu tipo de interacciones de unin podran estar OH HN CH 3

MARIDOOH H
involucrados en ellos la unin a un sitio de unin al receptor. Identificar los HO 2
NUEVA HAMPSHIRE

posibles aminocidos en el sitio de unin que podra participar en cada una de

CH 3
estas interacciones de unin. HO HO

noradrenalina HO isoprenalina

3. Hay dos tipos principales de receptores adrenrgicos: la y

4. Sugerir por qu las regiones transmembrana de muchos
- adrenrgicos. Noradrenalina muestra una ligera selectividad para la - receptor,
protenas unidas a la membrana son - hlices.
mientras que la isoprenalina muestra selectividad

OTRAS LECTURAS

Alexander, SPH, Mathie, A., y Peters, JA (2006) Gua de los receptores y Kobilka, B. y Schertler, GFX (2008) Nueva G-proteincoupled estructuras cristalinas de

canales. British Journal of Pharmacology los receptores: perspectivas y limitaciones.

147 ( Suppl. 3), S1-S126. Trends in Pharmacological Sciences 29, 79-83. Maehle, AH. , Prull, CR., Y
Bikker, JA, Trumpp-Kallmeyer, S., y Humblet, C. (1998) los receptores acoplados a Halliwell, RF (2002) La aparicin de la teora del receptor de la droga. Nature
la protena G: modelos, mutagnesis, y el diseo de frmacos. Journal of Reviews Drug Discovery 1, 637-641.
Medicinal Chemistry 41 ,
2911-2927. Palczewski, K. (2010) formas oligomricas de los receptores acoplados a protenas G

Chalmers, DT y Behan, DP (2002) El uso de los GPCR constitutivamente (GCPRs) Trends in Biochemical Sciences 35,

activos en el descubrimiento de frmacos y la genmica funcional. Nature 595-600.

Reviews Drug Discovery 1,
599-608.
Christopoulis, A. (2002) en los sitios receptores de la superficie celular de unin alostrica: nuevos
objetivos para el descubrimiento de frmacos. Nature Reviews Drug Discovery 1, 198-210.
van Rijn, RM, Whistler, JL, y Waldhoer, M. (2010) receptores de
opioides-heteromer-especfico la trata y la farmacologa. Current Opinion in
Pharmacology 20, 73-79. Sansom, C. (2010), los receptores receptiva. Mundial
de la Qumica
Agosto de 52-55.

Cohen, P. (2002) - Las protenas quinasas los objetivos de medicamentos importantes Tai, HJ, Grossmann, M., y Ji, I. (1998) receptores acoplados a la protena G. Revista
del siglo xxi? Nature Reviews Drug Discovery 1, de Qumica Biolgica 273, 17299-
309-315. 17302, 17979-17982.
Kenakin, T. (2002) E fi cacia a los receptores acoplados a la protena G. Zhan-Guo, G. y Jacobson, KA (2006) alosterismo en los receptores de membrana. Drug Discovery

Nature Reviews Drug Discovery 1, 103-110. Today 11, 191-202.

 5
Receptores y transduccin de
seales
En el captulo 4, discutimos la estructura y funcin de los receptores. En este
captulo, se considera lo que sucede una vez que un receptor se ha activado. e
interaccin Th de un receptor con su mensajero qumico es slo el primer paso en
una cadena compleja de eventos que implican varias mensajeros secundarios,
protenas y enzimas que en ltima instancia conduce a un cambio en la qumica de
la clula. Th eventos ESE se denominan transduccin de seales . Por desgracia,
una cuenta completa y detallada de estos procesos podra llenar un libro de texto
en s mismo, por lo que el siguiente relato se centra principalmente en los procesos
de transduccin de seal que resultan de la activacin de los receptores acoplados
a la protena G y receptores quinasa. e vas de transduccin de seales Th despus
de la activacin de los receptores G acoplados a la protena son de particular
inters ya que el 30% de todos los medicamentos en el mercado de interactuar con
estos tipos de receptores. e vas de transduccin de Th para los receptores quinasa
son tambin de gran inters, ya que fuera er emocionantes nuevas dianas para
nuevos frmacos, en particular en el mbito de la terapia contra el cncer anti-
(seccin 21.6.2). La comprensin de las vas y los diversos componentes que
intervienen ayuda a identificar dianas farmacolgicas adecuadas.
5.1 las vas de transduccin de seales de los
receptores de la protena G acoplada
receptores G acoplados a protenas activan una protena de sealizacin de
llamada una protena G, que a continuacin inicia una cascada de sealizacin
que implica una variedad de enzimas. secuencia de Th e de eventos que
conducen a la combinacin de receptor y ligando (el mensajero qumico) para la
activacin final de un enzima diana es bastante largo, por lo que deber buscar en
cada etapa del proceso a su vez.
5.1.1 La interaccin del complejo receptor-ligando
con protenas G
primera etapa d e fi en el proceso es la unin del mensajero Chemical
o ligando al receptor, seguido de la
unin de una protena G al complejo receptor-ligando (Fig. 5.1).
Protenas G son protenas de membrana situados en la superficie
interna de la membrana celular y se componen de tres subunidades de
la protena ( , , y ). Los
- subunidad tiene un bolsillo de unin que puede unirse nucletidos guanilo (de
ah el nombre de la protena G) y los que se une
guanosina difosfato (GDP) cuando la protena G est en el estado de reposo. Th
ERE varios tipos de protena G (por ejemplo, Gs, Gi / Go, Gq / G 11 ) y varios
subtipos de estos. c protenas G Las especificaciones son reconocidos por los
receptores especfi cos. Por ejemplo, G s es reconocida por el - adrenoceptor, pero
no el - los receptores adrenrgicos. Sin embargo, en todos los casos, la protena
G acta como un "corredor rel 'molecular que lleva el mensaje recibido por el
receptor a la siguiente objetivo en la va de sealizacin ling.
Ahora vamos a examinar lo que ocurre en detalle. En primer lugar, el
receptor se une a su neurotransmisor o la hormona (Fig. 5.1, el cuadro 1). Como
resultado, el receptor cambia de forma y expone un nuevo sitio de unin en su
superficie interior (Fig. 5.1, trama 2). e recin expuesta sitio de unin Th ahora
reconoce y se une a c protena G especfi. Tenga en cuenta que la estructura de
membrana celular es una estructura de lquido y por lo que es posible para las
protenas diff Erent a 'fl avena' a travs de l. Th unin e proceso entre el
receptor y la protena G hace que el ltimo de cambiar de forma, que, a su vez,
cambia la forma del sitio de unin de nucletidos guanilo. Th es debilita las
fuerzas de enlace intermoleculares que sostienen el PIB y el PIB por lo que se
libera (Fig. 5.1, marco 3).
Sin embargo, el bolsillo de unin no se queda vaco por mucho tiempo, ya
que ahora es la forma correcta de unirse GTP
( trifosfato de guanosina ). Th erefore, GTP reemplaza PIB (Fig. 5.1, la
trama 4).
La unin de GTP resultados en otro cambio conformacional en la protena
G (Fig. 5.1, marco 5), que ens debilidad de los vnculos entre las subunidades
de la protena de manera que la
- subunidad (con su GTP unido) se separa del
y - subunidades (Fig. 5.1, bastidor 6). Ambos - subunidad y la - dmero
luego parten del receptor.
complejo receptor-ligando e Th es capaz de activar va- protenas G rias
de esta manera antes de que salga el ligando y
 las vas de transduccin de seales de los receptores de la protena G acoplada 59

1 2 3
neurotransmisor

la clula PIB
receptores Receptor receptores

Protena G

= Membrana de Sitio de unin PIB GTP

4 5 6

receptor de los Receptor receptor de los

- dmero - subunidad

FIGURA 5.1 La activacin de los receptores G acoplados a la protena y su interaccin con las protenas G.

7-TM receptores
- subunidad - subunidad
Las protenas G
- o- subunidad + yo- subunidad
+O-
s- subunidad
q- subunidad
yo- subunidad California 2+ los canales de
GMPc
Los canales inicos K + Ion
fosfodiesterasa +O- +O-

La adenilato fosfolipasa C
ciclasa

acampar IP 3 TROZO DE CUERO

PKA PKC
Ca ++

FIGURA 5.2 Sealizacin de vas que surgen de la divisin de Erent diff protenas G.

apaga el receptor. Th es conduce a un amplifi cacin de la seal.
Ambos - subunidad y la - dmero ahora estn listos para entrar en la
segunda etapa del mecanismo de sealizacin. Vamos a considerar primero lo
que ocurre con el - subunidad.
5.1.2 las vas de transduccin de seal que implican
la - subunidad
Sin embargo, las etapas posteriores dependen del tipo de G-protena est
implicada, y que especfi co - subunidad se forma (Fig. 5.2). Erent Dif - subunidades
hay por lo menos 20 de ellos-tienen objetivos Erent diff diff y Erent ECTS
Ef:
s estimula la adenilato ciclasa;
yo inhibe la adenilato ciclasa y tambin puede activar los canales inicos
de potasio;
o activa los receptores que inhiben los canales inicos de calcio neuronales;

Th e primera etapa de la transduccin de seales (es decir, la divisin de una

protena G) es comn a todos los receptores 7-TM. q activa la fosfolipasa C.
60 Captulo 5 Receptores y transduccin de seales

No tenemos el espacio para estudiar todas estas vas en detalle. recombina con el - dmero de reformar el G s - protenas, mientras que la
En su lugar, nos centraremos en dos la activacin de adenilato enzima vuelve a su conformacin inactiva.
ciclasa y la activacin de lipasa fosfo-C .

5.2.2 La activacin de la protena quinasa A

cAMP ahora procede a activar una enzima llamada pro- protena

quinasa A (PKA) (Fig. 5.5). PKA pertenece a un grupo de enzimas
5.2 La transduccin de seales que implica
llamadas la serina-treonina quinasas que catalizan la fosforilacin de
protenas G y adenilato ciclasa serina y treonina residuos en sustratos de protena (Fig. 5.6).

5.2.1 La activacin de la adenilato ciclasa por la s - subunidad
Los s - subunidad se une a una membrana determinada enzima
llamada adenilato ciclasa (o la adenilciclasa) y 'interruptores' it en (Fig.
5.3). Th es ahora enzima cataliza la sntesis de una molcula llamada
AMP cclico (cAMP) (Fig. 5.4). cAMP es un ejemplo de una ger
mensajero secundario que se mueve en el citoplasma de la clula y
lleva la seal de la membrana celular en la clula misma. enzima e Th
continuar siendo activo mientras el s -
subunidad se une, lo que resulta en la sntesis de varios cientos de
molculas que representan AMP cclico otro amplifi cacin sustancial
de la seal. sin embargo, el s -
subunidad tiene actividad GTP-asa intrnseca (es decir, puede catalizar la
hidrlisis de GTP unido a su PIB) y por lo que desac- tivates s er popa de un
cierto perodo de tiempo y vuelve al estado de reposo. Los s - subunidad
continuacin, se aparta la enzima y
La protena quinasa A cataliza la fosforilacin y la activacin de otras
enzimas con funciones especfi c a la clula u rgano particular en
cuestin, por ejemplo las enzimas de lipasa en las clulas grasas son
activados para catalizar la descomposicin de la grasa. e sitio activo Th de
una protena quinasa tiene que ser capaz de unirse a la regin de la
protena Strate sub- que ha de ser fosforilada, as como la ATP tor cofactor
que proporciona el grupo fosfato es necesario.
ERE Th puede ser de varios ms enzimas implicadas en la ruta de
sealizacin entre la activacin de la PKA y la activacin (o desactivacin) de
la enzima diana. Por ejemplo, las enzimas implicadas en la degradacin y la
sntesis de glucgeno en una clula del hgado estn regulados como se
muestra en la Fig. 5.7.
La adrenalina es la hormona inicial involucrados en el proceso Regla- mento
de y se libera cuando el cuerpo requiere energa inmediata en forma de glucosa
. la hormona del Th e inicia una seal en el - los receptores adrenrgicos que
conduce a la

= GTP = GTP = PIB = PIB

1 2 3 4

Membrana celular Membrana celular Membrana celular Membrana celular

La adenilato La adenilato La adenilato La adenilato

ciclasa ciclasa ciclasa

ciclasa

sitio activo sitio activo

(cerrado) Fosfato
ATP acampar ATP acampar (cerrado)

FIGURA 5.3 Interaccin de s - subunidad con la adenilato ciclasa y la activacin de la enzima.

NH 2 NH 2

norte norte

NN La adenilato ciclasa NN OPO

OPO norte norte +

O O OO OOPO
OO OOPO O

ATP El AMP cclico

OH HOPO
correosOHO
OH OH
O

FIGURA 5.4 Sntesis de AMP cclico.

 La transduccin de seales que implica protenas G y adenilato ciclasa 61

O O
HN H La protena HN

quinasa A
Membrana celular
La adenilato
ciclasa ATP

OH OH

ATP cAMP correos

serina
OH
OH
Activacin

O O
La protena HN
HN
quinasa A
protena quinasa A
PAG
(activo) de la ATP
Enzyme Enzyme
MARIDO 3 do OH H MARIDO 3 do OH
(inactivo)
treonina correos
OH
OH
Reaccin
qumica
FIGURA 5.6 La fosforilacin de serina y treonina
residuos en los sustratos de protena.
FIGURA 5.5 La activacin de la protena quinasa A por AMP cclico

( P = fosfato).

La adrenalina

s
s
La adenilato
- los receptores adrenrgicos
ciclasa

ATP acampar

La glucgeno La protena quinasa A

Inhibidor
sintasa (activo)
(inactivo)
subunidad
do
cataltica de
PKA

El glucgeno P Inhibidor Fosfatasa

synthase- P (activo) (inhibido)
(inactivo)

La fosforilasa quinasa Fosforilasa quinasa P

(inactivo) (activo)

fosforilasa segundo fosforilasa un

(inactivo) (activo)

El glucgeno La glucosa-1-fosfato

FIGURA 5.7 La regulacin de la sntesis de glucgeno y el metabolismo en una clula de hgado.

62 Captulo 5 Receptores y transduccin de seales
sntesis de cAMP y la activacin de PKA por el mecanismo ya
discutidos. Th e subunidad cataltica de PKA fosforila ahora tres
enzimas dentro de la clula, como sigue:
una enzima llamada fosforilasa quinasa se fosfo rylated y activado.
Th es la enzima a continuacin, cataliza la fosforilacin de una enzima
inactiva llamada phorylase fosfato segundo que se convierte en su
forma activa,
fosforilasa un . fosforilasa un Ahora cataliza la degradacin del
glucgeno escindiendo unidades Phate glucosa-1-fosfato;
la glucgeno sintasa es fosforilado a una forma inactiva, evitando
as la sntesis de glucgeno;
una molcula llamada inhibidor de la fosforilasa es fosforilado. Una vez
fosforilada, acta como un inhibidor para la fosfatasa la enzima
responsable de la conversin de fosforilasa un de nuevo a la fosforilasa segundo
ciclasa y las quinasas nunca son completamente activos o inactivos. En un
. Th e curso de la vida de la fosforilasa un es por lo tanto prolongado.
resultado global e Th de estas fosforilaciones Erent diff es una inhibicin de la
sntesis de glucgeno coordinada y mejora del metabolismo del glucgeno para
generar glucosa en las clulas hepticas. Tenga en cuenta que el eff ect de
adrenalina en otros tipos de clula puede ser bastante Erent diff. Por ejemplo, la
adrenalina activa - adrenoceptores en las clulas de grasa que conduce a la
activacin de las protenas quinasas, como antes. Th es el tiempo, sin embargo, la
fosforilacin activa lipasa enzimas que catalizan entonces la descomposicin de
la grasa para actuar como otra fuente de glucosa.
5.2.3 el G yo- protena
Hemos visto cmo la enzima adenilato ciclasa se activa con el s - subunidad
de la G s - protena. La adenilato ciclasa tambin puede ser inhibida por un
Erent diff protena G G yo- protena. N d e yo - protena interacta con los
receptores Erent diff de aquellos que interactan con el G s - protena,
pero el mecanismo que conduce a la inhibicin es la misma que conduce
a la activacin. D e rencia nica diff es que la
yo - lanzado subunidad se une a la adenilato ciclasa y bidores su la
enzima en lugar de la activa.
Los receptores que se unen G yo - protenas incluyen la mus- carinic M 2 receptorprotena G) y varias enzimas diferentes en la cascada de sealizacin.
del msculo cardaco, 2 - adrenoceptores
en el msculo liso, y receptores opioides en el sistema nervioso
central.
E l existencia de G yo- y G s - protenas significa que la generacin de
la cAMP mensajero secundario est bajo el control dual de un freno y
un acelerador, lo que explica el proceso por el cual dos
neurotransmisores Erent diff pueden tener opuestos ECTS eff en una
clula diana. Un neurotransmisor que estimula la produccin de cAMP
forma un complejo receptor-ligando que activa un G s -
protenas, mientras que un neurotransmisor que inhibe la produccin de
cAMP forma un complejo receptor-ligando
que activa un G yo - protena. Por ejemplo, noradrenalina interacta con el -
los receptores adrenrgicos para activar un G s - protena, mientras acetilcolina
interacta con el receptor muscarnico para activar un G yo - protena.
Como hay varios tipos Erent diff de receptor para un
neurotransmisor particular, es realmente posible para que
neurotransmisor para activar cAMP en un tipo de clula pero inhibe en
otro. Por ejemplo, noradrenalina interacta con el - adrenoceptor para
activar la adenilato ade- nylate porque el - adrenoceptor une el G s - protena.
Sin embargo, la noradrenalina interacta con el
2 - adrenoceptor para inhibir la adenilato ciclasa, porque este receptor
se une el G yo - protena. Th es ejemplo ilustra que es el receptor que
determina que la protena G se activa y no el neurotransmisor u
hormona,
Tambin vale la pena sealar que las enzimas tales como la adenilato
momento dado, una cierta proporcin de estas enzimas estn activas y el
papel de la G s- y G yo -
protenas es para aumentar o disminuir esa proporcin. En otras
palabras, el control se clasifica en lugar de todo o nada.
5.2.4 Generalidades de la cascada de sealizacin que
implica AMP cclico
Th cascada que implica la G de sealizacin e s - protenas, AMPc y PKA
parece muy complejo y puede que se pregunte si un proceso de
sealizacin ms simple sera ms efi - ciente. Th ERE varios puntos
dignos de mencin sobre el proceso tal y como est.
En primer lugar, la accin de la protena G y la generacin de un
mensajero secundario explica cmo un mensaje entregado a la parte
exterior de la superficie de la clula puede ser transmitida a las enzimas
dentro de la clula-enzimas que no tienen relacin directa con la clula
membrana o el receptor. Tal proceso de sealizacin evita las di fi cias
involucradas en una molcula mensajera (que es habitualmente hidrfilo)
que tienen que cruzar una membrana celular hidrofbica.
En segundo lugar, el proceso implica un "rel Run- ner 'molecular (la
En cada una de estas etapas, la accin de una protena o enzima
resultados en la activacin de un nmero mucho mayor de enzimas. Por
lo tanto, el efecto de un neurotransmisor interactuar con una molcula
de receptor resulta en un efecto final de varios factores ms grande que
uno podra esperar. Por ejemplo, cada molcula de adrenalina se
piensa para generar 100 molculas de AMPc y cada molcula cAMP
comienza a buscar un efecto de amplificacin de su propia dentro de la
clula.
Th irdly, hay una ventaja en tener el receptor, la protena G, y la
adenilato ciclasa como entidades separadas.
 La transduccin de seales que implica protenas G y adenilato ciclasa 63
D e la protena G puede unirse a varios tipos de diferencias Erent de
complejos ligando-receptor. Th es un medio que DIFF neurotransmisores y
hormonas ent ER- que interactan con los receptores Erent diff puede
cambiar en la misma protena G conduce a la activacin de la guanilato
ciclasa. Th erefore, hay una economa de organizacin involucrada en la
qumica de la sealizacin celular, como la va de sealizacin de la adenilato
ciclasa se puede utilizar en muchas clulas diff Erent y sin embargo,
responden a las seales Erent diff. Por otra parte, diff ER- ent ECTS eff
celulares se traducir en funcin del tipo de clula implicada (es decir, clulas
en los tejidos Erent diff tendr rentes tipos de receptores y subtipos ferente, y
el sistema de sealizacin se encender enzimas diana Erent diff). Por
ejemplo, glucagn G activa s - receptores unidos en el hgado que conduce a gluconeognesis
como fuente para el grupo fosfato y se produce en el grupo fenlico de los
, adrenalina G activa s - vinculado 2 - adrenoceptores en las clulas grasas que residuos de tirosina cuando catalizada por tirosina quinasas, y en los
conducen a lipol- analysis , y vasopresina interacta con G s - vinculada
vasopresina (V 2 ) receptores en el rin a aff ect sodio / reabsorcin de agua.
La adrenalina acta sobre G E / S - vinculado 2 -
adrenoceptores que conducen a la contraccin del msculo liso y CLE acetilcolina
acta sobre G E / S - vinculada M 2 receptores que conduce a la relajacin del
msculo del corazn. Todos estos ECTS eff estn mediados por la va de
sealizacin cAMP.
Por ltimo, el control dual de "freno / acelerador 'proporcionada por el G s - y G yo - protenas
de control permite definir la actividad de la adenilato ylate aden-.
5.2.5 El papel de la - dmero
Si usted ha logrado seguir la complejidad de la va de sealizacin de la
protena G hasta ahora, bien hecho. Por desgracia, hay ms! Usted puede
recordar que cuando la protena G se une a un complejo receptor-ligando, se
rompe para formar una
- subunidad y una - dmero. Hasta hace poco, la - dmero fue visto como un
mero ancla para la - subunidad para asegurarse de que se mantuvo unido a la
superficie interior de la membrana celular. Sin embargo, ahora se ha encontrado
que la - dmeros tanto de la G yo - y el G s - Las protenas pueden ellos mismos acti-
var o inhibir la adenilato ciclasa. Th ERE son en realidad seis tipos diff ER-tes (o
isoenzimas) de la adenilato ciclasa, y la activacin o inhibicin depende de la
isoenzima implicada. Por otra parte, la adenilato ciclasa no es la nica enzima que
puede ser controlada por el - dmero. Los - dmero es ms promiscuos que la - subunidades
y puede aff ect varios objetivos diff Erent, dando lugar a una variedad de diff Erent
ECTS FEP. Th es que suena como una receta para la anarqua. Sin embargo, hay
una cierta ventaja en el dmero que tiene un papel de sealizacin, ya que aade
una sutileza extra para el proceso de sealizacin. Por ejemplo, se ha encontrado
que se requieren concentraciones ms altas del dmero para dar lugar a cualquier
eff ect en comparacin con el - subunidad. Th erefore, la regulacin por los
dmeros se hace ms importante cuando se activan un mayor nmero de
receptores.
Por ahora debera estar claro que la activacin de un proceso lular
bracin es ms complicada que la interaccin de un tipo de
neurotransmisor interactuar con un tipo
de receptor. En realidad, la clula est recibiendo seales de una mirada de
mensajeros qumicos Erent diff a travs de varios los receptores y las
interacciones receptor-ligando. seal nal e fi Th depende del nmero y tipo de
protenas G activadas en cualquier momento, as como las diversas vas de
transduccin de seales que estas protenas inician.
5.2.6 La fosforilacin
Como hemos visto anteriormente, la fosforilacin es una reaccin clave en la
activacin o desactivacin de las enzimas. La fosforilacin requiere ATP
grupos de alcohol de los residuos de serina y treonina cuando catalizada por
serina-treonina quinasas . Th ESE grupos funcionales son capaces de
participar en ing Bond- hidrgeno, pero si se aade un grupo fosfato
voluminoso para el grupo OH, se interrumpe el enlace de hidrgeno.
Adems, el grupo fosfato es por lo general ionizado a pH fisiolgico y por lo
tanto la fosforilacin introduce dos oxgenos cargados negativamente. Th
grupos ESE cargadas ahora pueden formar fuertes enlaces inicos con un
grupo cargado positivamente adecuadamente posicionado en la protena que
causan la enzima para cambiar su estructura terciaria. Th es el cambio en
los resultados de forma en la exposicin o el cierre del sitio activo (Fig. 5.8).
La fosforilacin por las enzimas quinasa tambin es responsable de la desensibiliz
de los receptores de G-protena ligada. La fosforilacin de residuos de
serina y treonina se produce en el intracelular do - cadena terminal de popa
er ligando de unin prolongada. A medida que la do - cadena terminal est
implicado en G-protena de unin, la fosforilacin cambia la conformacin
de la protena en esa regin y evita que la protena G de unin. Th
nosotros, la compleja receptor-ligando ya no es capaz de activar la protena
G.
PUNTOS CLAVE
G-protenas se componen de tres subunidades de protenas, con el
- subunidad unida a GDP. Hay varios tipos de G-protena.
unin al receptor-ligando se abre un sitio de unin para la protena G. En la unin, el
PIB se intercambia por GTP, y los fragmentos de la protena G en una - subunidad
(GTP cojinete) y una - dmero.
Las protenas G se unen y se dividi por el tiempo que el mensajero qumico se une
al receptor, lo que resulta en una fi cacin de la seal amplificada.
Un s - subunidad se une a la adenilato ciclasa y lo activa de manera que cataliza la
formacin de AMPc a partir de ATP. La reaccin contina durante tanto tiempo
como la s - subunidad se une, lo que representa otra seal de ampli fi cacin. Un yo - subunida
inhibe la adenilato ciclasa.
los - subunidades finalmente hidrolizan GTP unido al PIB y salen de la
adenilato ciclasa. Se combinan con sus respectivos
- dmeros para reformar los originales G-protenas.
64 Captulo 5 Receptores y transduccin de seales

cAMP acta como un mensajero secundario dentro de la clula y activa PKA.

PKA cataliza la fosforilacin de serina y treonina residuos en otras enzimas 5.3 La transduccin de seales que implica
que conducen a un efecto biolgico determinado por el tipo de clula en protenas G y la fosfolipasa C
cuestin.

La cascada de sealizacin iniciada por resultados de unin receptor-ligando
en seal sustancial ampli fi cacin y no requiere que el mensajero qumico
original al entrar en la clula.
La actividad global de la adenilato ciclasa se determina por las proporciones
pertinentes de G s y G yo- protenas que se dividen, lo que, a su vez, depende de
los tipos de receptores que se hayan activado.
los - dmero de protenas G tiene un papel moderador en la actividad de la
adenilato ciclasa y otras enzimas cuando est presente en concentracin
relativamente alta.
5.3.1 efecto de la protena G de la fosfolipasa C
Ciertos receptores se unen G s - o G yo - protenas e iniciar una va de
sealizacin que implica la adenilato ciclasa (seccin
5.2). Otros receptores 7-TM se unen a la protena G diff Erent llama GRAMO
q- protena , que inicia una va de sealizacin Erent diff. Th es va implica la
activacin o la desactivacin de un enzima llamada fosfolipasa unida a la
membrana
C. Th e primera parte del mecanismo de sealizacin es la interaccin de la
protena G con un complejo receptor-ligando como se describe anteriormente
en la Fig. 5.1. Th es el tiempo, sin embargo, la protena G es un G q- protena en

Las tirosina quinasas son enzimas que fosforilan el grupo fenol de residuos de lugar de una G s o G yo - protenas, y por lo que una q - subunidad se libera.

tirosina en sustratos de enzimas. treonina quinasas serina fosforilan los Dependiendo de la naturaleza de la lanzado q - subunidad, la fosfolipasa C se

grupos alcohol de serina y treonina en sustratos de enzimas. En ambos casos, activa o desactiva. Si est activado, la fosfolipasa C cataliza la hidrlisis de difosfato

los resultados de fosforilacin en los cambios conformacionales que afectan a de fosfatidilinositol ( PEPITA 2 )

la actividad de la enzima sustrato.

(Una parte integral de la estructura de la membrana celular) para ge- eRate los
dos mensajeros secundarios diacilglicerol ( DG) y trifosfato de inositol ( IP 3
Las quinasas estn involucradas en la desensibilizacin de los receptores.
)( Figuras 5.9 y 5.10).

NUEVA HAMPSHIRE 3
NUEVA HAMPSHIRE 3 NUEVA HAMPSHIRE 3

O PAG OO

O MARIDO O correos O

O
O O

sitio activo sitio activo

(cerrado) (abierto)

FIGURA 5.8 cambios conformacionales en una protena, inducida por la fosforilacin.

= GTP = GTP = PIB

1 2 3

Membrana celular Membrana celular Membrana celular

DG

PEPITA 2
SOCIEDAD ANNIMA SOCIEDAD ANNIMA SOCIEDAD ANNIMA

sitio activo sitio activo

(cerrado) IP 3 (cerrado)

FIGURA 5.9 Activacin de la fosfolipasa C por una q - subunidad.

 La transduccin de seales que implica protenas G y la fosfolipasa C sesenta y cinco

OCOR
ROCO

O
OH PAG
OCOR
HO OHO
O SOCIEDAD ANNIMA
PAG OH +
HO OCOR
HO OHO

HHHP
OH
HO OH
O
HHHP PAG

O IP 3 DG
PAG

PEPITA 2

FIGURA 5.10 La hidrlisis de PIP 2 en inositol trifosfato (IP 3) y diacilglicerol (DG) ( P = fosfato).

5.3.2 Accin del segundo mensajero:
diacilglicerol
Diacilglicerol es una molcula hidrfoba y permanece en la membrana de la
clula una vez que se forma (Fig. 5.11). Th ERE, se activa una enzima
llamada protena quinasa C ( PKC) que se mueve desde el citoplasma a la
membrana celular y luego
cataliza la fosforilacin de serina y treonina idues resinas de enzimas dentro
de la clula. Una vez fosforilada, estas enzimas se activan y catalizan
especfi c reacciones dentro de la clula. Th ESE inducen ECTS eff como la
propagacin del tumor, infl respuestas inflamatorias, contraccin o relajacin
del msculo liso, el aumento o disminucin de la liberacin de
neurotransmisores, el aumento o disminucin de la excitabilidad neuronal, y
los receptores de desensitizations.

5.3.3 Accin del segundo mensajero: inositol

trifosfato
DG
Membrana celular
Inositol trifosfato es una molcula hidroflica y se mueve en el citoplasma (Fig.

(cerrado) PKC
5.12). Th es obra de mensajera mediante la movilizacin de los iones de calcio
desde los depsitos de calcio en el retculo endoplsmico. Lo hace mediante la
Citoplasma
sitio activo unin a un receptor y la apertura de un canal inico de calcio. Una vez que el
canal inico est abierto, los iones de calcio fl ood la clula y activar las
protenas quinasas dependientes de calcio que, a su vez, fosforilan y activan las
enzimas de clulas especfi c. e iones de calcio liberado Th tambin se unen a
una protena de unin de calcio llamada calmodulina , que a continuacin activa
las protenas quinasas dependientes de Dulin calmo- que fosforilan y activan
otras enzimas celulares. El calcio tiene ECTS eff sobre las protenas contrctiles
y canales inicos, pero no se puede cubrir estas ECTS eff en detalle en este
texto. ce Suffi con decir que la liberacin de calcio es crucial para una gran
variedad de funciones celulares incluyendo el msculo liso y car- contraccin
muscular diac, la secrecin de las glndulas exocrinas, la liberacin del
transmisor de los nervios, y la liberacin de hormonas.
DG
Membrana celular

PKC

Citoplasma

Enzyme Enzyme
(inactivo) (activo) 5.3.4 Re-sntesis de difosfato de fosfatidilinositol

Reaccin Una vez IP 3 y la DG de haber completado sus tareas, que se recombinan para
qumica
formar el difosfato de fosfatidilinositol (PIP 2 ). Por extrao que parezca, que no
FIGURA 5.11 La activacin de la protena quinasa C (PKC) por pueden ser vinculados directamente y ambas molculas tienen que someterse a
diacilglicerol (DG). varias metablica
66 Captulo 5 Receptores y transduccin de seales

Membrana celular

IP 3

Citoplasma

calmodulina

las reservas de
California 2+ calmodulina California 2+
calcio

Activacin Activacin

La protena La protena

quinasa quinasa

PAG
PAG PGINAS

Enzyme Enzyme Enzyme Enzyme

(inactivo) (activo) (inactivo) (activo)

Reaccin Reaccin
qumica qumica

FIGURA 5.12 La transduccin de seales iniciada por el trifosfato de inositol (IP 3 ). (P = fosfato)

pasos antes de volver a la sntesis pueden ocurrir. Por ejemplo, IP 3 se

5.4 La transduccin de seales que implica los
desfosforila en tres pasos a inositol que luego se utiliza como uno de los
bloques de construccin para la re-sntesis de PIP 2 ( Higo. 5,13). Se piensa receptores de quinasa vinculada
que sales de litio controlar los sntomas de la enfermedad manaco
depresiva, interfiriendo con la sntesis de este complejo. Th ey lo hacen 5.4.1 La activacin de protenas y enzimas de
mediante la inhibicin de la enzima responsable de la desfosforilacin final
sealizacin
que conduce a la inositol monofosfatasa.
Hemos visto en la seccin 4.8 que la unin de un mensajero qumico a un
receptor quinasa ligada activa quinasa activi- dad tal que una reaccin de

PUNTOS CLAVE
fosforilacin se lleva a cabo en el propio receptor. En el caso de una
tirosina quinasa, esto implica la fosforilacin de residuos de tirosina.
GRAMO q - las protenas se separaron en una manera similar a G s y G yo - protenas.
Continuamos ahora esa historia.
los q - subunidad afecta a la actividad de la fosfolipasa C que cataliza la hidrlisis de

PIP 2 para formar los mensajeros secundarios IP 3 y la DG.

Una vez que ha tenido lugar la fosforilacin, los grupos de tirosina fosfolpidos
y las regiones alrededor de ellos actan como sitios de unin para diversas
DG permanece en la membrana celular y activa la PKC, que es una protenas o enzimas de sealizacin. Cada regin de la tirosina fosforilada se
serina-treonina quinasa. puede unir un especfi co protena o enzima de sealizacin. Algunas de estas

IP 3 es una molcula polar que se mueve en el citoplasma y moviliza los iones de calcio. protenas de sealizacin o enzimas convierten fosforilada a s mismos una vez

Este ltimo activan las protenas quinasas, tanto directamente como a travs de la que se unen y actan como sitios de unin para las protenas ms an mas de

unin de calcio calmodulina protena. sealizacin (Fig. 5.14).

IP 3 y la DG se combinan en una serie de medidas para reformar PIP 2 .

No toda la puede ser ocupado por las protenas de sealizacin de una sola vez de
Las sales de litio se considera que interfieren con este proceso.
modo que el tipo de regiones de unin a fosfotirosina

PhosphataseIP 2 fosfatasa fosfatasa PI-4-quinasa PI-4-P 5-quinasa

IP 3 IP inositol synthasePI PEPITA PEPITA 2
CDP-DG PI

Las sales

de litio

Inhibicin

FIGURA 5.13 Re-sntesis de PIP 2 de la propiedad intelectual 3( CDP-DG = citidina difosfato-diacilglicerol).

 La transduccin de seales que implica los receptores de quinasa vinculada 67

ligando ligando ahora se activa y activa una serina-treonina quinasa llamada Raf , iniciando una
cascada de quinasa de serina-treonina que fi acabados con la activacin de protena
activada por mitgenos (MAP) quinasa . Th es fosforila protenas y Vates dades

PAG
llamada factores de transcripcin el que entra en el ncleo e iniciar la expresin
PAG

PAG PAG PAG PAG de genes que resulta en variabilidad respuestas rios, como la divisin celular.
PAG PAG PAG
PAG
Muchos cnceres pueden surgir de un mal funcionamiento de esta cascada de
PAG PGINAS PAG PGINAS
PGINAS PGINAS
sealizacin si las quinasas implicadas se activan de forma permanente, a pesar
de la ausencia de la seal inicial del receptor. Alternativamente, algunas clulas

FIGURA 5.14 La unin de protenas (indicados por crculos oscuros) a los receptores de cancerosas sobre-expresan quinasas y, como resultado, la clula se convierte en

quinasa vinculada activados sealizacin. ( P = fosfato) super-sensible a las seales que estimulan el crecimiento y la divisin. En
consecuencia, la inhibicin de los receptores quinasa o la orientacin de la va de
sealizacin est demostrando ser un mtodo importante para el diseo de
nuevos frmacos para el tratamiento del cncer (seccin 21.6).
1-TM receptores

Activacin

Las tirosina quinasa inherente o

guanilato ciclasa
asociado

Activacin 5.4.2 Las protenas G pequeas

Sealizacin de protenas GMPc

Th e protena seal Ras se describe en la seccin 5.4.1 es un ejemplo de una
clase de protenas de seal de llamada pequeas protenas G , as llamados
porque son alrededor de dos tercios del tamao de las protenas G que se
IP3
SOCIEDAD ANNIMA BRECHA Grb2 dems
quinasa describen en las secciones 5.1-5.3. Th ERE varias subfamilias de las pequeas
protenas G (Ras, Rho, Arf, Rab, y Ran) y que puedan ser vistos como algo

DG
similar a la - subunidad de las grandes protenas G. Como el
IP3
PIP 3

- subunidades, que son capaces de unirse ya sea PIB en el estado ING resto- o
Ca 2+ PKC GTP en el estado activado. A diferencia de sus primos ms grandes, las pequeas

FIGURA 5.15 Vas de sealizacin de los receptores 1-TM. protenas G no se activan mediante la interaccin directa con un receptor, pero se
activan aguas abajo de la activacin del receptor a travs de protenas
intermediarias, que se clasifican como de intercambio de nucletidos guanina
de la sealizacin que resulta depende de que las protenas de sealizacin hacer administrar
(factores GEF). Por ejemplo, la activacin de Ras (como se muestra en la Fig.
al unirse a los receptores quinasa disponibles. Th ERE hay espacio en un texto 5.16) requiere la previa intervencin de la protena Grb2 despus de la activacin
introductorio a considerar lo que hace cada protena de sealizacin, pero la del receptor. Como el - subunidades, pequeas protenas G pueden autocatalyse
mayora son el punto de partida para la fosforilacin (quinasa) CAS- dcadas a lo la hidrlisis del GTP unido para dar GDP unido, lo que resulta en un retorno al
largo de los mismos principios que las cascadas iniciadas por protenas G (Fig. 5.15) estado de reposo. Sin embargo, este proceso puede ser acelerado por protenas
de ayuda conocido como protenas GTPasa activacin
. Algunos factores de crecimiento activan un subtipo C del especfi fosfolipasa C ( SOCIEDAD

ANNIMA ), el cual catal- yses descomposicin de fosfolpidos que conduce a la

generacin de IP 3 y la posterior liberacin de calcio por el mismo mecanismo como

se describe en la seccin 5.3.3. Otras protenas de sealizacin son '' adaptadores
qumicos, que sirven para transferir una de seal desde el receptor a una amplia
variedad de otras protenas, incluyendo muchos que participan en la divisin celular
y la erentia- diff. Por ejemplo, la accin principal de factores de crecimiento
es para estimular la transcripcin de genes particulares a travs de una
sealizacin de la quinasa en cascada (Fig. 5.16). Una protena de sealizacin
llamada Grb2 se une a un sitio fosforilado c especfi del complejo receptor-ligando
y se convierte en s mismo phosphoryl- ciado. Una protena de membrana
llamada Ras ( con una molcula unida de PIB ) interacta con el complejo
receptor-ligando seal de protenas y funciones de una manera similar a una
protena G (es decir, el PIB se pierde y se gana GTP). Ras
(Brechas). Th es significa que el nivel de actividad de las pequeas protenas G
se encuentra bajo el control de freno y el acelerador simultnea implica GAP y
GEF, respectivamente.
D e las pequeas protenas G son responsables de estimular el crecimiento
celular y erentiation diff a travs de vas de transduccin de seales Erent diff.
Muchos cnceres estn asociados con defectos en las pequeas protenas G,
tales como la protena Ras.
Ras es el gen que codifica para la protena Ras y es uno de los genes ms
comnmente mutado en tumores humanos. Th ERE son tres protenas Ras en
clulas de mamfero: H-, K-, y N-Ras. Las mutaciones que dan como resultado la
incapacidad de estas protenas para autocatalyse puede producirse la hidrlisis del
GTP unido. Como resultado, ellos permanecen activados de forma permanente, lo
que lleva, a su vez, con el crecimiento celular y la divisin permanente (vase
tambin la seccin 21.6.1).
68 Captulo 5 Receptores y transduccin de seales

sitio de unin
Factor de
al receptor
crecimiento

(1) La unin de
el crecimiento de facto r Dimerizatio norte PAG hosphoryla cin

(2) Conformacin

La tirosina cambio

quinasa sitio
OH HOOH
HO OH HOOH
HO OH HOOH
HO OH HOOH
HO
activo
(inactivo)

OH

Grb2
Unin
Ras Ras
OP OP

La unin y la
correos Grb2 correos
Grb2
fosforilacin de Grb2
OPOP OP OPOP OP

correos correos
PIB
OPPOPO OPPOPO
GTP

PIB intercambiado
por GTP

Ras

Raf (inactivo) Raf (activo)

(inactivo) (activo)

MAP quinasa (inactivo) Mek Mapa quinasa (activo) Mek

Factor de transcripcin factor de transcripcin La transcripcin de genes

(inactivo) (activo)

FIGURA 5.16 Desde el factor de crecimiento para la transcripcin de genes. ( P = fosfato)

PUNTOS CLAVE
5.4.3 La activacin de la guanilato ciclasa por los receptores

quinasa
Algunos receptores quinasa tienen la capacidad de catalizar la formacin
de GMP cclico de GTP . Th erefore, ambos son receptores y enzimas
(guanilato ciclasa). unida a la membrana del receptor d e / enzima se
extiende por la membrana celular y tiene un solo segmento
transmembrana. Tiene un sitio de unin al receptor extracelular y un
guanilato ciclasa sitio activo intracelular. Sus ligandos son - Pptido
Natriurtico Atrial y pptido natriurtico cerebral .
Los residuos de tirosina fosforilados en los receptores quinasa activada actan
como sitios de unin para diversas protenas de sealizacin y enzimas que se
activan a su vez.
Las pequeas protenas G son de naturaleza similar a las protenas G, la ligacin de GDP
en el estado de reposo, y GTP en el estado activado. Son protenas individuales activadas
por factores de intercambio de nucletidos de guanina.
Algunos receptores de quinasas tienen un sitio activo intracelular capaz de
catalizar la formacin de GMP cclico de GTP.

El GMP cclico aparece para abrir los canales de iones de sodio en el rin, la
promocin de la excrecin de sodio.
 Otras lecturas 69

PREGUNTAS

HN

bolsillo O O

HN vaco
Thr766
MARIDO 2 NOC

Gln767 HN

OH
O
NH HN

O yo
MARIDO 3 do norte
Leu768 MARIDO MARIDO
MARIDO 3 do
O

norte norte 6
SH S.S 1
3 do
Met769 NNN OPO POO correosO
norte

O OO O O
O

S.S

MARIDO
OH OH H
interaccin enlace de H

bolsillo 'ribosa'

1. Un modelo para el sitio de unin de ATP fue creado para endotelial 6. Una enzima fue producido por ingeniera gentica, donde

factor de crecimiento (EGF) quinasa receptor, que muestra cmo se une ATP (vase varios de los residuos de serina se reemplazaron por residuos de glutamato. La

ms arriba). Estructura I es conocida para inhibir la unin de ATP. Sugiero cmo la enzima mutada era permanentemente activa, mientras que la enzima natural era slo

estructura que podra unirse. se activa en presencia de una protena quinasa de serina-treonina. Dar una

explicacin.
2. Las pequeas protenas G como Ras tienen una propiedad autocataltico.

Qu significa esto y qu consecuencias podra haber (si los hay) se debe perder 7. Sugerir por qu las tirosina quinasas fosforilan tirosina

esa propiedad? residuos en sustratos de protena, pero no residuos de serina o treonina.

3. farnesil transferasa es una enzima que cataliza la

unin de una cadena hidrfoba larga que la protena Ras. Qu le parece el 8. Los anticuerpos se han generado para reconocer el

propsito de esta cadena es y cul sera el efecto si la enzima se inhibi? regiones extracelulares de los receptores de factor de crecimiento. La unin del

anticuerpo al receptor debera bloquear el factor de crecimiento de alcanzar su sitio de

unin y bloquear su seal. Sin embargo, se ha observado que los anticuerpos a veces
4. Tenga en cuenta las vas de transduccin de seales que se muestran en
pueden desencadenar la misma seal que el factor de crecimiento. Por qu ocurre
Higo. 5.16 e identificar dnde seal ampli fi cacin se lleva a cabo.
esto? Consulte la seccin 10.7.2 para ver la estructura de un anticuerpo.

5. La fosfodiesterasa cAMP enzima hidroliza cAMP a

AMPERIO. Qu efecto tendra un inhibidor de esta enzima tener en la produccin

de glucosa-1-fosfato (Fig. 5.7)?

OTRAS LECTURAS

Alexander, S, Mead, A., y Peters, J. (eds) (1998) Flor, D. (2000) Tratando de aclarar los GPCR. Qumica en

receptor de consejos y nomenclatura de los canales inicos. Trends in Gran Bretaa Noviembre 25. Foreman, JC y Johansen, T. (eds) (1996) Libro de
Pharmacological Sciences 19 ( Suppl. 1), 1-98. Bikker, JA, Trumpp-Kallmeyer, S., y texto de
Humblet, C. (1998) Farmacologa del receptor . CRC Press, Boca Raton, FL. George, SR, O'Dowd, BF, y

receptores acoplados a protena G: modelos, mutagnesis, y el diseo de frmacos. Journal Lee, SP (2002) oligomerizacin del receptor de G-Proteincoupled y su potencial
of Medicinal Chemistry 41, 2911-2927. Cohen, P. (2002)-cinasas la protena principales para el descubrimiento de frmacos. Nature Reviews Drug Discovery 1, 808-820.
objetivos de medicamentos de Kenakin, T. (2002) E fi cacia a los receptores acoplados a la protena G.
el veinticinco del siglo primero? Nature Reviews Drug Discovery 1,

309-315. Nature Reviews Drug Discovery , 1, 103-110.

70 Captulo 5 Receptores y transduccin de seales

Neubig, RR y Siderovski, DP (2002) Los reguladores de la sealizacin de la protena Takai, Y., Sasaki, T., y Matozaki, T. (2001) Pequeo protenas GTPbinding. Physiological

G como nuevas dianas de medicamentos del sistema nervioso central. Nature Reviews 81, 153-208. Vlahos, CJ, McDowell, SA, y el Secretario, A. (2003) Las
Reviews Drug Discovery 1, 187-197. Schwarz, MK y Wells, TNC (2002) Nuevos quinasas como dianas teraputicas para la insuficiencia cardaca. Nature Reviews

productos teraputicos que modulan las redes de quimioquinas. Nature Reviews Drug Discovery 2, 99-113.
Drug Discovery 1, 347-358.

Ttulos para la lectura ms general, se enumeran en p.763.

Tai, HJ, Grossmann, M., y Ji, I. (1998) receptores acoplados a la protena G. Revista
de Qumica Biolgica 273 , 17299-
17302, 17979-17982.
 6 Los cidos nucleicos: estructura y

funcin

En este captulo se discute la estructura y funcin de los cidos nucleicos. La accin
del frmaco en los cidos nucleicos se discute en el captulo 9 y en otros captulos
en todo el texto. Aunque la mayora de los frmacos actan en las estructuras de
protenas, existen varios ejemplos de medicamentos importantes que actan
directamente sobre los cidos nucleicos. Th ERE dos tipos de cido nucleico
DNA ( cido desoxirribonucleico) y RNA ( cido ribonucleico). Primero se
considera la estructura del ADN.
6.1 Estructura del DNA
Al igual que las protenas, el ADN tiene una primaria, y ter- estructura terciaria
secundaria.
Erent diff. D e cuatro bases posibles son dos purinas (bicclicos adenina y guanina
) y dos estructuras de pirimidina ms pequeos ( citosina y timina ) ( Higo.
6.2).
D e bloques de construccin de nuclesidos se unen entre s a travs de
grupos fosfato que unen el 5 '- grupo hidroxilo de una unidad de nuclesido a la 3 '-
grupo hidroxilo de la siguiente (Fig. 6.3). Con slo cuatro tipos de bloque de
construccin disponibles, la estructura primaria del ADN es mucho menos
variada que la estructura primaria de las protenas. Como resultado, fue pensado
durante mucho tiempo que el ADN tena slo un papel menor que desempear
en la bioqumica celular, ya que era difcil ver cmo una molcula tan
aparentemente simple podra tener algo que ver con los misterios del cdigo
gentico. solucin de e Th a este misterio radica en la estructura secundaria del
ADN.

6.1.1 La estructura primaria de DNA 6.1.2 La estructura secundaria de ADN

Th estructura e primaria del ADN es la forma en la que los bloques de Watson y Crick resolvieron la estructura secundaria del ADN mediante la
construccin de ADN estn unidas entre s. Mientras que las protenas tienen construccin de un modelo que fi TTED todos los resultados experimentales
ms de 20 bloques de construccin para elegir, el ADN tiene solamente cuatro conocidos. estructura e Th consiste en dos cadenas de ADN dispuestos juntos
de la nuclesidos desoxiadenosina , desoxiguanosina , desoxicitidina , y desoxitimidina
en una doble hlice de dimetro constante (Fig. 6.4). Th e doble hlice tiene un
surco mayor y un surco menor, que son de cierta importancia para la accin de
(Fig. 6.1). Cada nuclesido se construye a partir de dos com- ponentes-a desoxirribosa
varios agentes contra el cncer que actan como intercaladores (seccin 9.1).
azcar y una base. e azcar Th es la misma en todos los cuatro nuclesidos
y slo la base es

O NUEVA HAMPSHIRE 2

CH 3
norte NH 2 HN HN

NN MARIDO 2 norte norte

NNO O N O NN
norte

O O
O O
HO HO HO HO

HH HH
HH HH
OH HH
MARIDO OH HH
MARIDO
OH HH
MARIDO OH HH
MARIDO

desoxiadenosina desoxiguanosina desoxitimidina desoxicitidina

FIGURA 6.1 -Nuclesidos los componentes bsicos del ADN.

72 Captulo 6 Los cidos nucleicos: estructura y funcin

NUEVA HAMPSHIRE 2 NUEVA HAMPSHIRE 2 O

7 7 4
1 CH 3
norte
1 norte HN NO norte 5 HN
5
56 8 8
56
23 6 234 6
2 NUEVA
9 HAMPSHIRE 2 NH 9
norte
4 MARIDO 2 norte norte
4 NH O O NUEVA HAMPSHIRE
1 1
3 3

adenina guanina citosina timina

Las purinas pirimidinas

FIGURA 6.2 e bases de cido nucleico Th para el ADN.

NUEVA HAMPSHIRE 2

5 'Fin
norte
adenina (A)
Base
5
NNN O
O
1
NUEVA
2 HAMPSHIRE

3
HHO
OO
OHH MARIDO norte
Citosina (C)
O
O Base
norte O O
O

O
S.S
O
OHH MARIDO NH
guanina (G)
Base
NNN NUEVA HAMPSHIRE 2 OPOO O
OPOO O

O
HHO
Yo OO
OHH MARIDO NH
Timina (T)
OPO
OPO Base
norte O O
OPO
OPO O

3 S.S
O
OHH MARIDO

3 Fin

FIGURA 6.3 La unin de los nuclesidos a travs de grupos fosfato.

E l estructura se basa fundamentalmente en el emparejamiento de bases de
cidos nucleicos entre las dos cadenas. pares de adenina con timina mediante
dos enlaces de hidrgeno, mientras que los pares de guanina con la citosina
mediante tres puentes de hidrgeno. Th nosotros, una base de purina bicclico
siempre est vinculada con una base de pirimidina monocclico ms pequeo
para permitir que el dimetro constante de la doble hlice. Th e doble hlice se
estabiliza an ms por el hecho de que los pares de bases se apilan una
encima de la otra, lo que permite interacciones hidrfobas entre las caras de los
anillos heterocclicos. D e polar esqueleto de azcar-fosfato se coloca a la
fuera de la estructura y puede formar interacciones polares favorables
con agua.
Th e hecho de que la adenina siempre se une a la timina y la citosina
siempre se une a la guanina significa que las cadenas son
complementarias entre s. Ahora es posible ver cmo replicacin ( la
copia de la informacin gentica) es factible. Si la doble hlice se
desenreda, una nueva cadena se puede construir en cada una de las
cadenas originales (Fig. 6.5). En otras palabras, cada una de las cadenas
originales acta como una plantilla para la construccin de una nueva e
idntica doble hlice. e Th mecanismo por el cual esto
 Estructura del DNA 73

o
10 A

GCT

UN

C GA TA T
GRAMOdo
surco
CG
T UN
mayor TA POO
H2N O
ejrcito de reserva
O me
ejrcito de reserva 3
correos NN
OO NH norte
Surco deejrcito
reserva 5
norte norte
menor OO O
TA GC en C o 5 O
34 A OP

3 O
TA
TAG O NNO OO
correos N NH 2 HN 3
OO
O NH
norte
norte
O 5
5 O 2N
O
do GRAMO OPOO
3
O
Emparejamiento de bases
GGCCG
TC TC AA correos
G OO

ejrcito de reserva

ejrcito de reserva

ADN de doble hlice

FIGURA 6.4 e estructura secundaria Th de ADN.

Modelo

Modelo

replicacin

ADN de

ADN de doble hlice Nueva cadenas de hlices de ADN hija

FIGURA 6.5 La replicacin de las cadenas de ADN.

se lleva a cabo se muestra en las figuras 6.6 y 6.7. cadena de plantilla de correo
Th tiene bases expuestas que pueden pares de bases por hidro unin con Gen
individuo nucletidos en forma de trifosfatos. Una vez que un nucletido tiene
bases apareadas, una reaccin catalizada por enzimas se lleva a cabo donde el
nuevo
de nucletidos se empalma a la creciente cadena complementaria con la
prdida de un grupo-difosfato actuando este ltimo como un buen grupo
saliente. Tenga en cuenta que el proceso implica cada nuevo nucletido
reaccionar con la 3 ' final de la cadena en crecimiento.
74 Captulo 6 Los cidos nucleicos: estructura y funcin

cadena de cadena de cadena de

5 x 5 5
plantilla plantilla plantilla
UN

ACTCG ACTCG ACTCG

x-
x
Trinucletidas UN
3
GC GC GCA
3 3

3 5 3 5 3 5 cadena

La creciente cadena de cadena en

en crecimiento

crecimiento

Enfoque de trinucletidos Emparejamiento de bases Catalizada por enzimas 'splicing'

FIGURA 6.6 apareamiento de bases de un trinucletido y la extensin de la creciente cadena de ADN.

OO OO

O OH OH
OPO correos OPO
2 norte 2 norte

NND NND
NH norte OO NH norte OO
N norte O N norte O
O O
O O
correos
correos

OH OPO O
NUEVA HAMPSHIRE 2 NUEVA HAMPSHIRE 2O O
norte

OOPOO OOPOO
NNO HN NNO HN
norte O norte O
O me O me
O MARIDO 2 norte OO MARIDO 2 norte
ONO ONN

POO POO
OPOOOPOO OPOOOPOO

cadena en crecimiento cadena en crecimiento

Modelo Modelo

Figura 6.7 Mecanismo por el que un nucletido est vinculada a la creciente cadena de ADN.

Ahora podemos ver cmo la informacin gentica se transmite de una
generacin a otra, pero es menos evidente cmo los cdigos de ADN para las
protenas. Cmo puede slo cuatro nuclesidos cdigo de tabla de cidos ms de
20 aminocidos? e Th respuesta radica en el cdigo de tripletes . En otras
palabras, un aminocido se codifica no por un nucletido, sino por un conjunto de
tres. Th ERE son 64 (4 3 ) formas en las que cuatro nucletidos se pueden organizar
en grupos de tres, ms que suficiente para la tarea requerida. Apndice 2 muestra
el cdigo gentico estndar para los trillizos sos variable. Veremos cmo se
interpreta el cdigo para producir una protena en la seccin 6.2.
6.1.3 La estructura terciaria de la DNA
Th e estructura terciaria de ADN es a menudo en descuidado o ignorado, pero es
agentes antibacterianos (seccin 9.2) y a varios agentes cer antican-
(secciones 9.1 y 9.2). El ADN es una molcula extremadamente larga: tanto
tiempo, de hecho, que no encajar en el ncleo de la clula si es que exista
como una molcula lineal. Tiene que ser enrollado en una forma
tridimensional ms compacto que poder fi t en el ncleo, un proceso conocido
como
superenrollamiento . Th es proceso requiere la accin de un ily fa- de enzimas
llamadas topoisomerasas , que puede tejer relaciones acto aparentemente
imposible de pasar un tramo de la hlice del ADN a travs de otro tramo. Th ey
hacer esto mediante temporariamente escindir uno, o ambos, hebras de la hlice
de ADN para crear un vaco temporal, a continuacin, volver a sellar la hebra (s)
una vez que el cruce ha tenido lugar. Superenrollamiento permite el
almacenamiento efi ciente de ADN, pero el ADN tiene que ser desenrollado de
nuevo si la replicacin y transcripcin (seccin

importante para la accin del grupo de las quinolonas de 6.2.2) van a tener lugar. Si desenrollar no tuvo lugar, el
 Estructura del DNA 75

proceso de devanado (catalizada por helicasa enzimas) que tiene lugar
durante la replicacin y la transcripcin dara lugar a aumento de la tensin
debido al aumento de superenrollamiento del ADN de doble hlice restante.
Se puede demostrar el principio de esta tirando de los extremos de la cuerda
o de sisal. D e mismas enzimas topoisomerasas son responsa- bles para
catalizar el proceso de desenrollado, por lo que la inhibicin de estas
enzimas podra ef caz bloquear la transcripcin y replicacin.
topoisomerasa II es una enzima de mamfero que es crucial para la
replicacin reflexivo eff de ADN. enzima e Th se une a las partes de ADN en el
que dos regiones de la doble hlice se encuentran en proximidad cercana (Fig.
6.8). enzima e Th se une a una de estas dobles hlices de ADN y los residuos
de tirosina se utilizan para nick ambas hebras del ADN (Fig. 6.9). Esta
resultado en un enlace covalente temporal entre la enzima y el 5 resultante ' final
de cada hebra, estabilizando as el ADN. e hilos Th estn tirados en
direcciones opuestas para formar un hueco a travs del cual se puede
pasar la regin de ADN intacto. E l enzima entonces se vuelve a sellar las
hebras y se va.
La topoisomerasa I es similar a la topoisomerasa II en que alivia la
tensin torsional del ADN superenrollado du- rante la replicacin,
transcripcin, y la reparacin del ADN. Th e rencia diff es que escinde
slo una hebra de ADN, mientras que la topoisomerasa II escinde ambas
cadenas. enzima e Th cataliza un catin transesterifi reversible reaccin
cin similar a la mostrada en la Fig. 6,9, pero en el que el residuo de
tirosina de la enzima est ligada a la 3 ' final de fosfato de la cadena de
ADN en lugar de los 5 ' fin. Esta

1 2
Topo II

Tyr Topo II

Tyr
ADN
5 3

3 5

Tyr

re N / A Topo II

3 4

Topo II
Topo II

Tyr
Tyr
5 3 5 3
3 5 3 5

Tyr

Topo II

FIGURA 6.8 Mtodo por el cual la topoisomerasa II cataliza la de cruce de las cadenas de ADN. Tenga en cuenta que los mismos enlaces de enzimas

covalentemente a cada hebra de ADN.

O
Base

O MARIDO MARIDO
Base HHH
OH
Topo II
Topo II
MARIDO MARIDO
HHH HO Tyr
O Tyr
O

O5 O O5 O
Base Base
S.S S.S

HOPO MARIDO HOPO MARIDO

HO HO

3 3

FIGURA 6.9 Mecanismo por el que la topoisomerasa II divide una cadena de ADN.
76 Captulo 6 Los cidos nucleicos: estructura y funcin
crea un "complejo escindible 'con una pausa de una sola hebra. La relajacin de la
tensin torsional se lleva a cabo ya sea por permitiendo ing la cadena intacta para
pasar a travs de la muesca o por la rotacin libre de la DNA alrededor de la
hebra no escindido. Una vez que la tensin torsional se ha aliviado, la enzima se
reincorpora a la hebra de ADN escindido y se va.
La topoisomerasa IV es una enzima bacteriana que lleva a cabo el
mismo proceso que la enzima de mamfero topo- isomerasa II y es un
objetivo importante para los agentes fl uoroqui- nolone antibacterianos
(seccin 9.2).
6.1.4 cromatinas
Hasta ahora, nos hemos centrado en la estructura del ADN. Sin embargo, el
ADN no es una macromolcula aislado dentro del ncleo de la clula. Se
asocia con una variedad de protenas, tales como histonas, en una estructura
llamada cromatina (Fig. 21.5). e histonas Th y el ADN asociado forman una
estructura llamada nucleosoma , que se produce regularmente a lo largo de
la longitud de la cromatina y juega un papel crucial en la regulacin de la
transcripcin del ADN (seccin 21.7.3).
6.1.5 polimorfismo gentico y la medicina
personalizada
Th proceso de correo de la replicacin no es 100% perfecto y, a ve- ces, se
puede producir una mutacin. Si la mutacin no ser fatal, que se llevar de
generacin en generacin. Th es conduce a los individuos Erent diff que
tienen secuencias de genes Erent sutilmente diff. En promedio, hay una
refe- diff de un par de bases en cada mil pares de bases entre los
individuos. Th se es conocido como gentico polimorfismo.
A medida que las bases de cidos nucleicos actan como el cdigo de aminocidos
de las protenas, un refe- diff de este nivel da lugar a un cido amino diff Erent que
se introduce en una protena, que puede o no puede tener un eff ect sobre la
actividad de esa protena o funcin cin (secciones 3.5.6 y 4.11). polimorfismo
gentico tiene consecuencias importantes con respecto a la la susceptibilidad de los
individuos a la enfermedad y tambin a los tipos de terapias con frmacos que son
ms adecuados para las personas. Un conocimiento detallado del genoma de un
paciente abre la posibilidad de predecir y la prevencin de enfermedades, as como
la eleccin de la terapia de droga ideal para que debe ocurrir una enfermedad del
paciente. Th se es conocido como Medicina personalizada ( ver tambin secciones
15.1.4.4 y 21.1.11).
PUNTOS CLAVE
La estructura primaria del ADN consiste en una cadena principal de fosfato de
azcar con bases de cidos nucleicos unidos a cada resto de azcar. El azcar
es desoxirribosa y las bases son adenina, timina, citosina y guanina.
La estructura secundaria de ADN es una doble hlice, donde las bases de los
cidos nucleicos se apilan en el centro y emparejados
tales que los pares de adenina con timina y guanina con citosina pares. El
enlace de hidrgeno es responsable de la basepairing y hay interacciones de
van der Waals entre las pilas de bases. polares se producen interacciones
entre el esqueleto de fosfato de azcar y el agua circundante.
La doble hlice de ADN est enroscada en una estructura terciaria. El bobinado
y desbobinado de la doble hlice requiere enzimas topoisomerasa.
La copia de ADN de una generacin a la siguiente es conocido como replicacin.
Cada hebra de una molcula de ADN matriz acta como plantilla para una nueva
molcula de ADN hija.
El cdigo gentico se compone de bases de cidos nucleicos, que se leen en grupos
de tres durante la sntesis de una protena. Cada triplete de bases cdigos para un
aminocido especfico.
Conocer el genoma de un paciente abre la posibilidad de prediccin de la enfermedad y
la identificacin de las mejores terapias para ese individuo. Esto se conoce como la
medicina personalizada.
6.2 El cido ribonucleico y la sntesis de protenas
6.2.1 Estructura del RNA
Th estructura e primario de RNA es la misma que la de ADN, con dos
excepciones: ribosa ( Higo. 6,10) es el componente de azcar en lugar
de desoxirribosa , y uracilo
(Fig. 6.10) sustituye a la timina como una de las bases.
Apareamiento de bases entre bases de cido nucleico puede ocurrir en RNA,
con emparejamiento adenina en uracilo y citosina en parejas ing a la guanina. Sin
embargo, la vinculacin se realiza entre las bases dentro de la misma cadena y que
no se produce en toda la longitud de la molcula (por ejemplo, la Fig. 6.11). Th
erefore, el ARN no es una doble hlice, pero tiene regiones de estructura
secundaria helicoidal.
Debido a que la estructura secundaria no es uniforme a lo largo de la longitud
de la cadena de ARN, ms variedad est permitido en la estructura terciaria del
ARN. Th ERE son tres tipos principales de molculas de ARN con funciones
celulares diff Erent: men- ARN Senger ( mRNA), ARN de transferencia ( tRNA), y
ARN Somal ribosoma ( rRNA). Th ESE tres molculas son cruciales para el
proceso por el cual la sntesis de protenas se lleva a cabo. Aunque el ADN
contiene el cdigo gentico para las protenas, no puede producir estas protenas
directamente. En lugar de ello, el ARN
NH
O OH HO
HN
S.S
S.S
O O
OH OH
ribosa uracilo
FIGURA 6.10 La ribosa y uracilo.
 El cido ribonucleico y la sntesis de protenas 77

3 fin

Aminocidos

California

5 final do

GGUGG Aminocidos

T UCC
T U
GRAMO CGC
do
UH 2 do GRAMO
do MGU
GRAMO
Georgia
CGG
T CG
California GG GC
GRAMO
do GRAMO
do do
AG TU ps
UH 2
UH
Georgia UH 2
m 2 GRAMO ACCA
GGAGGCCUC

CIG

representacin
simplificada
GRAMO

CU ps

T mi
CIG

anticodn

FIGURA 6.11 Levadura alanina ARN de transferencia. lneas onduladas Th e indican el apareamiento de bases (IF = methylinosine, UH 2 = dihidrouridina, T

= ribotimidina, Sal = pseudouridine, Mg = methylguanosine, m 2 G = dimethylguanosine).

asume ese papel, que acta como el "hombre medio" crucial entre el la sntesis de una protena-proceso conocido como traduccin. Th e ribosoma se

ADN y las protenas. Th se ha denominado une a un extremo de la molcula de ARNm, entonces se desplaza a lo largo de ella

dogma central de la biologa molecular. hasta el otro extremo, permitiendo que el cdigo triplete para ser ledo, y catalizar la

Th e bases adenina, citosina, guanina, uracilo y se encuentran en el construccin de la molcula de protena un aminocido a la vez (Fig. 6.13). Th ERE

ARNm y son predominantes en rRNA y tRNA. Sin embargo, tRNA tambin son dos segmentos a los ribosomas de mamferos, conocido como las subunidades

contiene un nmero de nucleicos menos comunes cidos vase, por 60S y 40S. ESE Th se combinan para formar un ribosoma 80S. En las clulas

ejemplo, Fig. 6.11. bacterianas, los ribosomas son ms pequeos y se componen de subunidades 50S y

30S se combinan para formar un ribosoma 70S. Th trminos e 50S, etc se refieren a

las propiedades de sedimentacin de las diferentes estructuras. ESE Th se

6.2.2 Transcripcin y traduccin
relacionan cualitativamente al tamao y masa, pero no cuantitativamente, es por eso

Una molcula de ARNm representa una copia de la informacin gentica que una subunidad 60S y 40S una pueden combinar para formar un ribosoma 80S.

requerida para sintetizar una nica protena. Su funcin es llevar el

cdigo requerido fuera del ncleo de un orgnulo celular llamado retculo
endoplsmico .
Th es donde est la produccin de protenas tiene lugar en los cuerpos
llamados ribosomas . E l segmento de ADN que es cobre IED se llama un
gen y el proceso en cuestin se llama
transcripcin . e DNA Th dobles desenreda hlice y el tramo que est
expuesta acta como una plantilla en la que el ARNm puede ser construido
(Fig. 6.12). Una vez completado, el ARNm sale del ncleo que buscar a un
ribosoma, mientras que el ADN vuelve a su forma de doble hlice.
Ribosomal RNA es el ms abundante de los tres tipos de RNA y es
el componente principal de los ribosomas. Th ESE puede ser visto
como los lugares de produccin de
rRNA es el componente principal de cada subunidad, Making hasta dos
terceras partes de la masa del ribosoma. e 40S Th subu- nit contiene una gran
molcula de ARNr junto con varias protenas, mientras que la subunidad 60S
contiene tres diff ER- ent ARNr de tamao; de nuevo, con las protenas que
acompaan. D e la estructura secundaria del rRNA incluye amplias extensiones de
apareamiento de bases ( dplex regiones ), lo que resulta en una estructura
terciaria Ned defi bien. Se pens en un momento que ARNr slo jug un papel
estructural y que las protenas estaban actuando como enzimas para catalizar la
traduccin. molculas de ARNr e Th tienen ciertamente un papel estructural
fundamental, pero
78 Captulo 6 Los cidos nucleicos: estructura y funcin

ARNm

ARNm

ADN de doble hlice ADN descifrado para Transcripcin

revelar gen

FIGURA 6.12 Formacin de mRNA.

Su

protena en

crecimiento

Su OH Su
GUA

ribosoma transferencia de

60S pptidos

Un sitio
GCU GCUGUA GCUGUA
ARNm CGACAUGUC ARNm CGACAUGUC ARNm CGACAUGUC

40S

OH

val

ARNt

Su Su

CAG

translocacin

Un sitio
P-sitio
GUA GUA

ARNm CGACAUGUC GCU ARNm CGACAUGUC

FIGURA 6.13 La sntesis en la traduccin de protenas.

 enfermedades genticas 79

Ahora se sabe que, en lugar de las protenas ribosomales, tienen la leer. Th nueva protena E se libera entonces del ribosoma, que ya est
importante funcin catalizadora. De hecho, los sitios clave en el ribosoma, disponible para iniciar el proceso de nuevo. proceso general e Th de la
donde tiene lugar la traduccin se componen casi en su totalidad de ARNr. transcripcin y la traduccin se resume en la Fig. 6.15.
e Th protenas son estructuras alargadas, que serpentean a travs tura del
ribosoma estructura y se cree que tienen un fi ne-tuning ef ect en el proceso
de traduccin.
6.2.3 ARN nuclear pequeo

ARN de transferencia es la unidad fundamental adaptador que une el cdigo
de tripletes de ARNm de un cido amino c especfi. Th se significa que tiene
que ser un tRNA diff Erent para cada aminocido. Todos los tRNAs son de hoja
de trbol en forma, con dos regiones de unin diferentes en los extremos
opuestos de la molcula (ver Fig. 6.11). Una regin de unin es para el
aminocido, en donde un cido c amino especfi est unido covalentemente a
Popa er transcripcin, molculas de ARNm son con frecuencia ed modifi
antes de la traduccin se lleva a cabo. Th se trata de una operacin de
empalme, donde la seccin media del mRNA (el intrn ) Se extraen y los
extremos de la molcula de ARNm (el exones ) se empalman juntos (Fig.
6.16).
Splicing requiere la ayuda de un complejo de ARN-protena llamada spliceosoma

un residuo adenosil terminal. E l otro es un conjunto de tres bases de los cidos . Las molculas de ARN e Th participan en este complejo se denominan pequeos

nucleicos ( anticodn ) que aparearse con un triplete complementario en la ARN nucleares ( snARNs). Como su nombre indica, estos son pequeas molculas

molcula de ARNm. A tRNA que tiene un anticodn particular, siempre tendr el de ARN con menos de 300 nucletidos que se producen en el ncleo de la clula. Th

mismo aminocido unido a l. funcin de correo de los snARNs en el spliceosome es aparearse con segmentos

particulares de ARNm de tal manera que el ARNm puede ser manipulado y se alinea

correctamente para el proceso de empalme. Los sitios de empalme son reconocidos

Veamos ahora la forma en que la traduccin tiene lugar en ms detalle. por sus secuencias de nucletidos, pero, en ocasiones, una mutacin en el ADN

Como rRNA viaja a lo largo de ARNm, que revela los cdigos de triplete en puede introducir un nuevo sitio de empalme en otro lugar de ARNm. Th es resultados

mRNA uno por uno. Por ejemplo, en la Fig. 6.13 el cdigo CAU triplete se en el empalme defectuoso, un ARNm alterado y una protena defectuosa. Alrededor

revela junto con un sitio de unin asociado llamado un sitio. Th e A representa del 15% de las enfermedades genticas se piensa que es debido a mutaciones que

aminoacilo y se refiere al aminocido unido en el tRNA entrante. Cualquier resultan en el empalme defectuoso.

molcula de ARNt puede entrar en este sitio, pero se acepta slo si tiene el
anticodn necesaria capaz de apareamiento de bases con el triplete expuesta
en el ARNm. En este caso, tRNA que tiene el anticodn GUA es aceptada y
trae consigo el aminocido histidina. cadena de correo pptido Th que se ha
creado hasta ahora se une a una molcula de ARNt que se une al sitio de
unin P (que abarcan la peptidil). Un proceso de ING injerto tiene lugar 6.3 enfermedades genticas
entonces, catlogos lisadas por ARNr, donde la cadena peptdica se
transfiere a histidina (Fig. 6.14). e ARNt Th que ocupan el sitio de unin P Un nmero de enfermedades genticas se deben a anormalidades
ahora se aparta y el desplazamiento a lo largo de ARNm al ribosoma s para genticas que dan lugar a la no expresin de las protenas particular o la
revelar la siguiente triplete (un proceso llamado translocacin ), expresin de protenas defectuosas. Por ejemplo, albinismo es una
condicin en la piel, cabello y ojos carecen de pigmento; se asocia con una
defi ciencia de una enzima llamada tirosinasa . Th es una enzima que
contiene cobre que cataliza las dos primeras etapas en la sntesis
y por lo que el proceso contina hasta que toda la hebra se

protena
NH

R
HORA 2N HORA HN HROH
protena HN

La OH O
HO HO OH HO HO
MARIDO HO MARIDO HO MARIDO H MARIDO HO
+

OO OO OO OO
adenina adenina adenina adenina
correos correos correos correos

O ARNt O ARNt O ARNt O ARNt

FIGURA 6.14 Mecanismo por el cual una protena de crecimiento, se transfiere a la siguiente aminocido.
80 Captulo 6 Los cidos nucleicos: estructura y funcin
ADN
ARNm
Transcripcin
Ncleo
Protena
FIGURA 6.15 La transcripcin y la traduccin.
exn Intrn exn
empalme
ARNm
Transcripcin
FIGURA 6.16 Empalme de ARN mensajero (ARNm).
del pigmento melanina . Ms de 90 mutaciones del gen de la tirosinasa se han
identifi cado que conducen a la expresin de la enzima inactiva. Las
mutaciones en el resultado cdigo de tripletes en uno o ms aminocidos
estn alterados en la protena resultante, y si estos aminocidos son
importantes para la actividad de la enzima, se pierden actividad. Las
mutaciones que alteran los aminocidos en el sitio activo son los ms
propensos a resultar en la prdida de actividad.
fenilcetonuria es una enfermedad gentica causada por la ausencia o defi
ciencia de una enzima llamada fenilalanina hidroxilasa . Th es la enzima que
normalmente convierte la fenilalanina en tirosina. En su ausencia los niveles
en sangre de alanina fenil- elevan sustancialmente, junto con los productos
metablicos alternativos, tales como fenilpiruvato. Si no se trata, esta
enfermedad da lugar a un retraso mental grave.
ARNm
ribosoma
Aminocidos
ARNt
Traduccin
segmento extirpado
+
ARNm procesado
Traduccin
hemofilias se heredan las enfermedades genticas en las que uno de los
factores de coagulacin de la sangre es defi ciente. Th es resultado en una
hemorragia incontrolada er popa lesin. En el pasado, las personas con esta
enfermedad eran propensos a morir en su juventud. Hoy en da, con el
tratamiento adecuado, aff eja los individuos deben tener una expectativa de vida
Tancy normal. El tratamiento en casos severos implica la infusin intravenosa
regular con el factor de coagulacin relevante. En los casos menos graves, las
transfusiones se pueden utilizar cuando una lesin ha tenido lugar. los factores de
coagulacin e Th solan ser tpicamente derivan de plasma de la sangre, pero
esto significa que las personas con hemofilia eran susceptibles a la infeccin a
partir de muestras de sangre infectadas. Por ejemplo, durante el perodo
1979-1985 ms de 1200 personas en el Reino Unido se infectaron con el VIH
como resultado de recibir sangre infectada

productos. Por la misma razn, tambin eran propensos a las infecciones virales
causadas por la hepatitis B y C. Durante la dcada de 1990, la tecnologa de
ADN recombinante (seccin 6.4) xito los factores de coagulacin de la sangre
producidas cessfully y estos ahora son los agentes de eleccin, ya que eliminan
el riesgo de la infeccin. Desafortunadamente, algunos pacientes producen una
respuesta inmune al factor de infusin, que puede pre- cluir su uso. En la
actualidad, los ensayos clnicos en marcha para probar si la terapia gnica
puede utilizarse como un tratamiento. Th se supone la introduccin de un gen
que codifique para el factor de coagulacin normal, de modo que puede ser
producido naturalmente en el cuerpo (seccin 6.4).
Distrofia muscular es otra enfermedad gentica que aff eja 1 de cada 3500
varones y que se caracteriza por la ausencia de una protena llamada distrofina .
Th se tiene un importante papel estructural en las clulas y sus resultados de
ausencia en el deterioro muscular. La terapia gnica tambin se est con-
considerarse para esta enfermedad.
Muchos cnceres estn asociados con defectos genticos que dan lugar a
defectos de sealizacin moleculares en la clula. Th se est cubierto con ms
detalle en el captulo 21.
6.4 La biologa molecular y la ingeniera
gentica
En los ltimos aos, los rpidos avances en biologa molecular e ingeniera
gentica han tenido repercusiones importantes para la qumica mdica.
Ahora se que sea posible clonar genes especfi cos e incluir estos genes
en el ADN de las clulas de crecimiento rpido tales que las protenas
codificadas por estos genes se expresan en la clula modifi cado. Como
las clulas son de crecimiento rpido esto conduce a una cantidad no
puede NIFI seal de la protena deseada, lo que permite su aislamiento,
purifi cacin, y de determinacin estructural. Antes de disponer de estas
tcnicas, que era muy culto cultad para aislar y purificar muchas protenas
'Extremos pegajosos
Enzima
restrictiva GRAMO
CAATAC G
T TAAG do T TAA
ADN
Enzima
restrictiva GRAMO
CAATAC G
T TAAG do T TAA
ADN
FIGURA 6.17 la tecnologa del ADN recombinante.
La biologa molecular y la ingeniera gentica 81
a partir de sus clulas madre debido a las pequeas cantidades pre- sentes.
Incluso si se ha realizado correctamente, los bajos rendimientos inherentes en el
proceso hicieron un anlisis de tura y el mecanismo de accin de culto muy dif
estructura de la protena. Los avances en biologa molecular y tcnicas de ADN
recombinante han cambiado todo eso.
tecnologa de ADN recombinante permite a los cientficos manipular
secuencias de ADN para producir ADN modifi carse o completamente nuevo
ADN. tecnologa e Th hace uso de enzimas naturales llamados enzimas de
restriccin y ligasas
(Fig. 6.17). enzimas de restriccin e Th reconocer una secuencia particular de
bases en cada molcula de ADN y se separaron un enlace fosfato c azcar
especfi en cada hebra de la doble hlice. Con algunas enzimas de restriccin,
la ruptura no es una limpia; hay una superposicin entre las dos cadenas
resultantes en una cola de bases no apareadas en cada lado de la ruptura. e Th
bases de cada cola son complementarios y todava pueden reconocerse entre
s, por lo que se describen como "pegajoso" termina. proceso e mismo Th se
lleva a cabo sobre una molcula diferente de ADN y las molculas de ambos
procesos se mezclan juntos. A medida que estas molculas Erent diff tienen los
mismos extremos pegajosos, que se reconocen entre s de tal manera que el
apareamiento de bases se lleva a cabo en un proceso llamado recocido . se
forma el tratamiento con la enzima ligasa entonces repara el esqueleto de
fosfato de azcar y una nueva molcula de ADN.
Si la molcula de ADN de inters no tiene la secuencia requerida
reconocido por la enzima de restriccin, un ADN sinttico enlazador ese hace
contener la secuencia se puede aadir a cualquiera de los extremos de la
molcula usando una enzima ligasa. Th se se trata luego con la enzima de
restriccin como antes (Fig. 6.18).
Th ERE muchas aplicaciones para esta tecnologa, una de las cuales es la
capacidad de amplificar y expresar el gen para una protena de humano en
particular en clulas bacterianas. Con el fin de hacer esto, es necesario
introducir el gen de la clula bacteriana. Th se se realiza mediante el uso de un
adecuado vector que llevar el gen en la clula. Th ERE son dos adecuados
AATAC AATAC
GRAMO T TAA G
Recocido
+
AATAC AATAC G
CG
GRAMO T TAA GC
enzima ADN
ligasa
AATAC
T TAA G
AATAC G
CG
T TAA GC
82 Captulo 6 Los cidos nucleicos: estructura y funcin
fragmento de ADN ligasa
o vector
CCGAAT TCGGC
CGAATTCCG
enlazador sinttico
FIGURA 6.18 Colocacin de secuencias reconocidas por enzimas de restriccin.
Enzima Humano
ligasa
restrictiva
ADN
El ADN del vector
FIGURA 6.19 La insercin de un gen humano en un plsmido por
la tecnologa del ADN recombinante.
vectors- plsmidos y bacterifagos . Los plsmidos son segmentos de ADN
circular que se transfieren de forma natural entre las clulas bacterianas y
permitir el intercambio de informacin gentica. Debido a que el ADN es
circular, el ADN repre- resentir un gen humano puede ser insertado en el ADN
del vector por los mismos mtodos descritos anteriormente (Fig. 6.19). Los
bacterifagos (fagos para abreviar) son virus que infectan a las clulas
bacterianas. Th ere una variedad de estos, pero las mismas tcnicas de ADN
recombinante se pueden utilizar para insertar ADN humano en el ADN viral.
Sea cual sea el vector se utiliza, el ADN se modifi cada introdu- cido en la
clula bacteriana en el que se clon y amplificacin fi cado (Fig. 6.20). Por
ejemplo, una vez que un fago que contiene modifi cido nucleico ed infecta una
clula bacteriana, el fago se hace cargo de la maquinaria bioqumica de la clula
para producir mltiples copias de s mismo y su cido nucleico.
Los genes humanos se pueden introducir en clulas bacterianas tales
que el gen se incorpora en el ADN bacteriano y se expres como si fuera
propia las bacterias 's. Th se permite la produccin de protenas humanas
en mucho mayor canti- dad de lo que sera posible por cualquier otro
medio. Tal
fago
E coli
FIGURA 6.20 infectar Escherichia coli con un fago.
fragmento de ADN
CCGAAT TCGGC CCGAAT TCGGC
CGAATTCCG o vector CGAATTCCG
Enzima
restrictiva
AAT TCGGC fragmento de ADN CCG
CG o vector AATTCCG
protenas podran utilizarse con fines medicinales, como se describe en las
siguientes secciones. modifi cada genes tambin pueden ser introducidos y
expresados para producir protenas modifi carse para ver qu ef ect una
mutacin tendra sobre la estructura y la funcin de una protena.
e Th siguientes son algunas de las aplicaciones de la ingeniera gentica
en el campo mdico.
La recoleccin de las protenas importantes e genes Th para hormonas
importantes o factores de crecimiento, tales como insulina y
factor de crecimiento humano , se han incluido en los organismos unicelulares
Ing-rpidas creciente. Th se permite la recoleccin de estas protenas en
cantidades sufi ciente de que puedan ser comercializados y se administran a los
pacientes que son defi ciente en estas hormonas importantes. La ingeniera
gentica tambin ha sido crucial en la produccin de anticuerpos monoclonales
(seccin 14.8.3).
La genmica y la identificacin de dianas teraputicas nuevas
protenas Hoy en da, es relativamente fcil de aislar e identificar una gama
de protenas, enzimas, y los receptores de sealizacin por clonacin tcnicas.
Esto ha llevado a la identificacin de un nmero creciente de isoenzimas y
subtipos de receptores que ofrecen posibles dianas de medicamentos para
el futuro. los Proyecto Genoma Humano
involucrado el mapeo de ADN humano (terminado en
2000) y ha llevado al descubrimiento de nuevas protenas previamente unsus-
esperadas. Estos tambin pueden ofrecer los posibles objetivos farmacolgicos.
El estudio de la estructura y funcin de nuevas protenas descubiertas a partir de
la genmica se llama
(protemica la seccin 2.6).
Estudio del mecanismo molecular de protenas diana La
ingeniera gentica permite que el controlado
E coli E coli
 preguntas 83

mutacin de las protenas tales que especfi c aminocidos son alteradas. Th se PUNTOS CLAVE

permite a los investigadores a identificar los aminocidos que son importantes para La estructura primaria de ARN es similar a la de ADN, pero que contiene ribosa en
la actividad enzimtica o al receptor de ING vinculante. A su vez, esto conduce a vez de desoxirribosa. El uracilo se utiliza como una base en lugar de timina, y otras
una mayor comprensin de cmo las enzimas y receptores funcionan a nivel bases puede estar presente en cantidades ms pequeas.
molecular.

terapia gnica somtica implica el uso de un virus portador para el

el apareamiento de bases y las secciones de estructura secundaria helicoidal son posibles
contrabando de un gen sano en las clulas en el cuerpo en el que el gen
dentro de la estructura del ARN.
correspondiente est defectuoso. Una vez que el virus ha infectado a la clula, el
Hay tres tipos principales de ARN ARN mensajero, ARN de transferencia y
gen sano es insertado en el ADN del husped donde se somete a transcripcin y
ARN ribosomal.
traduccin. Th es el enfoque tiene un gran potencial teraputico para el cncer, el
SIDA y las anomalas genticas, como la fibrosis qustica. Sin embargo, el La transcripcin es el proceso por el cual un segmento de ADN se copia
enfoque todava est confi nida a los laboratorios de investigacin y todava hay como mRNA. mRNA lleva la informacin gentica requerida para la sntesis
un largo camino por recorrer antes de que se utiliza clnicamente. Th ERE son de una protena del ncleo al retculo endoplsmico.
varios los problemas que an deben abordarse, como la forma de dirigirse a los
virus especfi camente a las clulas defectuosas, cmo insertar el gen en el ADN rRNA es el principal constituyente de los ribosomas, donde la sntesis de protenas se lleva
de una manera controlada, la forma de regular la expresin de genes una vez que a cabo. Un ribosoma se mueve a lo largo de mRNA revelando cada triplete del cdigo
est en el ADN, y la forma de evitar la respuesta inmune contra el virus portador. gentico a su vez.
Los avances en este campo se retras signifi cativamente en 1999 como
ARNt interpreta el mensaje codificado en el ARNm. Contiene un anticodn de tres
resultado de la muerte de un voluntario adolescente durante un ensayo clnico en
bases de cido nucleico que se une a un triplete complementario sobre mRNA.
los EE.UU.. Th se fue atribuido a una respuesta inmune ms reactivo al virus
Cada tRNA lleva un cido amino fi especfico, la naturaleza de la que se determina
portador utilizado en el ensayo. En consecuencia, en la actualidad hay estudios
por el anticodn.
que investigaban el uso de artifi cial virus que sera menos probable que cause
El proceso de la sntesis de protena se llama la traduccin. La cadena de
una respuesta inmune. sistemas de liberacin no virales tambin se estn
protena en crecimiento es transferido de un ARNt con el aminocido en la
estudiando involv- ing molculas enjaulados llamada ciclodextrinas . Adems,
siguiente tRNA y slo se libera una vez que la molcula de la protena completa
lpidos, polyaminoesters, polmeros de glicina, y los fullerenos de carbono estn
se ha sintetizado.
siendo investigados como portadores.
La ingeniera gentica ha sido utilizado en la produccin de hormonas importantes
para fines medicinales, la identificacin de nuevas dianas farmacolgicas, el

estudio de la estructura y funcin de protenas, y la terapia gnica.

PREGUNTAS

1. Pro avine fl es un agente antibacteriano tpico que se intercala 3. La adenina es un componente importante de varias
ADN bacteriano y se utiliza para tratar a los soldados heridos en el Lejano Oriente bioqumicos importantes. Se ha propuesto que la adenina se sintetiz desde el

durante la Segunda Guerra Mundial. Qu papel (si lo hay) es interpretado por el anillo principio en la evolucin de la vida cuando la atmsfera de la Tierra consista en

tricclico y los grupos amino primarios? El frmaco no se puede utilizar sistmicamente. gases, tales como cianuro de hidrgeno y metano. Tambin ha sido posible

Sugerir por qu este es el caso. sintetizar adenina de cianuro de hidrgeno. Tenga en cuenta la estructura de la

adenina e identificar cmo las molculas de cianuro podran actuar como los

bloques de construccin para esta molcula.

proflavina
MARIDO 2 norte norte NUEVA HAMPSHIRE 2

4. El cdigo gentico implica tres bases de cido nucleico que codifican

2. Los siguientes compuestos son frmacos antivirales que imitan
por un nico aminocido (el cdigo triplete). Por lo tanto, una mutacin de un triplete
nuclesidos naturales. Lo que no nuclesidos que imitan?
particular, debe resultar en un aminocido diferente. Sin embargo, este no es siempre

el caso. Para cualquier triplete representado por XYZ, que la mutacin es menos
NUEVA HAMPSHIRE 2
CH 3 probable que resulte en un cambio en amino cido-X, Y, o Z?
HN
HN NO

NN O NO
NO
MARIDO 2 norte norte

HO 5. El aminocidos serina, glutamato, y fenilalanina

HO O
O O se encontr que eran grupos de unin importantes de un sitio de unin al
HO
receptor (vase el Apndice 1 para estructuras). Los cdigos de triplete para

norte 3 estos aminocidos en la

84 Captulo 6 Los cidos nucleicos: estructura y funcin

mRNA para este receptor eran AGU, GAA, y UUU respectivamente. AGU a ACU; AGU a GGU; AGU a AGC GAAto GAU;
Explicar qu efecto tienen las siguientes mutaciones podran tener, en su GAA a AAA; GAA a GUA UUU a UUC; UUU a UAU;
caso: UUU a AUU

OTRAS LECTURAS

Aldridge, S. La historia de ADN (2003). Qumica en Gran Bretaa Abril 28-30. Lewcock, A. (2010) Medicina hecha a medida. Mundial de la Qumica Julio de

56-61.

Breaker, RR (2004) naturales y artificiales cidos nucleicos como herramientas para Lindpaintner, K. (2002) El impacto de la farmacogentica y la farmacogenmica en el

explorar la biologa. Naturaleza 432, 838-845. Amplio, p. fbrica molcula Nobel (2009) descubrimiento de frmacos. Nature Reviews Drug Discovery 1, 463-469. Nicholl, el

horario de verano (2008) Una Introduccin a la Ingeniera Gentica,

de Biologa. Mundial de la Qumica Noviembre 42-44. Burke, M. (2003) A la entrega. Qumica

en Gran Bretaa Febrero de 36-38.

3 ed. Cambridge University Press, Cambridge. Opalinska, JB y
Gewirtz, AM (2002) teraputicos de cidos nucleicos: principios

Dorsett, Y. y Tuschl, T. (2004). siRNAs: Aplicaciones de la genmica funcional y bsicos y aplicaciones recientes.

su potencial como agentes teraputicos. Nature Reviews Drug Discovery 3, 318-329. Nature Reviews Drug Discovery 1, 503-514. Petricoin, EF, Zoon, KC, Kohn, CE,
Barrett, JC, y Liotta, LA (2002) La protemica clnica. Nature Reviews Drug

Johnson, ES (2003) Las pruebas y tribulaciones de la produccin de la primera Discovery 1 , 683-695. Stark, H., Dube, P., Lhrmann, R., y Kastner, B. (2001)

ingeniera gentica de drogas. Nature Reviews Drug Discovery 2, 747-751. Disposicin de ARN y protenas en el spliceosomal U1 pequea partcula de

Judson, HF (1979) El octavo da de la Creacin . Simon y Schuster, Nueva ribonucleoprotena nuclear. Naturaleza 409, 539-542. Invierno, PC, Hickey, GI, y

York. Fletcher, HL (1998) Instantnea Notas Gentica. Bios Scientific Publishers, Oxford.

Langer, R. (2003) Cuando una pastilla no alcanzar. Scientific Americana De

abril de 32-39.
 PARTE
Farmacodinmica y
segundo
farmacocintica

El papel de la qumica mdica es disear y sintetizar nuevos frmacos. Con el fin de involucrado no puede alcanzar su objetivo en el cuerpo una vez que se han

llevar a cabo esta funcin, es importante identificar el objetivo particular de un administrado. Hay varias formas en que se pueden administrar medicamentos,

medicamento especfico y para establecer cmo la droga interacta con ese objetivo de pero, en general, el objetivo es obtener el medicamento en el torrente sanguneo

producir un efecto biolgico. En los captulos 2-6 de la Parte A nos fijamos en la de tal manera que se puede llevar a su diana particular. Despus de la

estructura y funcin de los diversos objetivos de medicamentos que estn presentes en administracin de un frmaco, hay una amplia variedad de obstculos y problemas

los sistemas vivos. En la parte B vamos a examinar los mecanismos generales por los que tienen que ser superados. Estos incluyen la e fi ciencia con la que un frmaco

que los frmacos pueden producir un efecto farmacolgico o biolgico. Esta es un rea se absorbe en el torrente sanguneo, la rapidez con que se metaboliza y excreta, y

de estudio conocido como farmacodinmica. en qu medida se distribuye alrededor del cuerpo. Esta es un rea de estudio

conocido como farmacocintica y vamos a considerar esto en el captulo 11.

Las drogas son normalmente pequeas molculas con un peso molecular de

menos de 500 unidades de masa atmica, y lo que son mucho ms pequeos que

sus objetivos macromoleculares. Como resultado, que interactan directamente con Como se trata de un libro de texto de qumica mdica, la atencin se centra

slo una pequea parte de la macromolcula. Esto se llama un sitio de unin. El sitio en gran medida en el diseo de frmacos para optimizar su propiedades

de unin por lo general tiene una forma de fi nido en el que un frmaco debe encajar farmacocinticas y farmacodinmicas. Sin embargo, es importante apreciar que

si que es tener un efecto; Por lo tanto, es importante que el frmaco tiene el tamao la formulacin y la administracin de frmacos es un rea extremadamente

y la forma correcta. Sin embargo, hay ms a la accin de los frmacos que una importante de la investigacin en el desarrollo de nuevos y mejores

buena 'fi'. Una vez que un frmaco activo entra en un sitio de unin, una variedad de medicamentos (una breve descripcin se da en las secciones 11.7.1, 11.9 y

interacciones de enlaces intermoleculares que se ocupen, mantenerlo all y dar lugar 11.10). En efecto, la accin del frmaco se ha clasificado en tres fases, que se

a nuevos efectos, que culmin, con el tiempo, en un efecto biolgico. Para que esto presentan en el siguiente orden: farmacutica, farmacocintica,

ocurra, el frmaco debe tener los grupos funcionales correctos y el esqueleto farmacodinmica y. La fase farmacutica incluye la desintegracin de una

molecular capaces de participar en estas interacciones. pldora o cpsula en el tracto gastrointestinal, la liberacin del frmaco contenido

dentro de, y su disolucin. Esto es seguido por las fases farmacocinticas y

farmacodinmicas como se describe anteriormente.

La optimizacin de las interacciones que tiene con una estructura su objetivo

es claramente importante si vamos a disear un frmaco eficaz. Una vez dicho Parte B incluye Estudio de caso 1, que es un estudio sobre las estatinas clnicamente

esto, hay ejemplos de compuestos que interaccionan muy bien con su objetivo, importantes que se utilizan a niveles ms bajos de colesterol. Se ilustra algunos de los

pero no sirven para nada en un sentido clnico. Esto se debe a los compuestos principios de inhibidores de la enzima mencionados en el Captulo 7.
Esta pgina se ha dejado intencionadamente en blanco
 7 Enzimas como dianas de medicamentos
Muchos frmacos importantes actan como inhibidores de la enzima. En otras
palabras, que dificultan o impiden que las enzimas que actan como catalizadores para
una reaccin particular. Hemos cubierto la estructura y funcin de las enzimas en el
captulo 3. En este captulo, nos concentramos en cmo las drogas se dirigen a las
enzimas e inhiben su accin.
7.1 Inhibidores que actan en el sitio activo de
una enzima
7.1.1 inhibidores reversibles
En el captulo 3 hemos subrayado la importancia de las interacciones de unin
entre una enzima y su sustrato. Si no hay interacciones que sostienen un
sustrato al sitio activo, entonces el sustrato se deriva de y volver de nuevo
antes de que haya una oportunidad para que reaccione. Th erefore, las
interacciones ING ms aglutinantes hay, ms fuerte ser el sustrato se unen, y
mayor ser la probabilidad de reaccin. Sin embargo, hay una trampa! Qu
ocurre si un sustrato fuertemente ligado da un producto que tambin se une
fuertemente al sitio activo (Fig. 7.1)?
e respuesta Th es que la enzima se obstruye y es incapaz de
aceptar cualquier sustrato ms. Th erefore, las interacciones de unin
que sostiene el sustrato o la
sustrato
sustrato
Unin Reaccin
Enzima Enzima
FIGURA 7.1 Ejemplo de una enzima que se 'atascado' si el producto permanece unida.
producto a la enzima debe hacerse de manera armoniosa. ey Th debe ser de
manera suficiente fuerte como para mantener el sustrato en el sitio activo el
tiempo suficiente para que ocurra la reaccin, pero lo suficientemente dbil como
para permitir que el producto que se vaya. Th es Bond- acto de equilibrio ing se
puede dar vuelta a la gran ventaja si el qumico farmacutico desea para inhibir
una enzima particular o desactivarla completamente. Una molcula puede
disearse que es similar al sustrato natural o producto, y puede encajar el sitio
activo, pero que se une con ms fuerza. Puede que no experimentan ninguna
reaccin cuando est en el sitio activo, pero siempre y cuando se mantenga all
se bloquea el acceso al sustrato natural y previene la reaccin enzimtica (Fig
7.2). Th se es conocido como inhibicin competitiva , como el medicamento est
compitiendo con el sustrato natural por el sitio activo. Th e ms largo es el
inhibidor est presente en el sitio activo, mayor es la inhibicin. Th erefore, si un
medicamento no est en Chem conoce la posicin y la naturaleza de Erent diff
regiones de unin dentro de un sitio activo, es posible disear molculas que
quepan ese sitio activo, se unen fuertemente y actan como inhibidores.
Los inhibidores competitivos se unen al sitio activo a travs de enlaces
intermoleculares y por lo que la unin es reversibles de, lo que permite un
equilibrio que se produzca entre el frmaco unido y sin unir un frmaco tipo de
'yoyo' ef ect donde la droga se une al sitio activo, se libera , a continuacin, se
une de nuevo. Th se significa que la inhibicin causada por el frmaco
Obstruido
sustrato
Producto Producto
Enzima Enzima
88 Captulo 7 Enzimas como dianas de medicamentos
sustrato
Droga Sin reaccin
Droga
Enzima
ENZIMA Enzima
FIGURA 7.2 Inhibicin competitiva.
es reversible. Si la concentracin de sustrato aumenta, compite ms ef caz
con el medicamento para el sitio activo, y por lo tanto la inhibicin por el
frmaco ser menos reflexivo eff (recuadro 7.1).
Th ERE muchos ejemplos de frmacos tiles que actan como
inhibidores competitivos . Por ejemplo, el amidas sulphon
actuar como agentes antibacterianos mediante la inhibicin de una enzima bacteriana de
esta manera (seccin 19.4.1.5). Muchos diurticos utilizados para controlar la presin
arterial son inhibidores competitivos, al igual que algunos antidepresivos (seccin
23.12.5). Otros ejemplos incluyen las estatinas (Estudio de caso 1), la angiotensina
convertidores ing inhibidores de la enzima (ACE) (Estudio de caso 2), y inhibidores de la
proteasa (seccin 20.7.4). De hecho, la mayora de los inhibidores de la enzima tiles
clnicamente son de esta naturaleza.
Como se indic anteriormente, los inhibidores competitivos con frecuencia
tienen cierta semejanza con el sustrato natural, lo que les permite ser
reconocidos por el sitio activo. Algunos de estos inhibidores pueden tener
caractersticas adicionales que les permiten formar interacciones de unin
adicional a las regiones del sitio activo que no estn ocupadas por el substrato.
Esta
CAJA 7.1 Una cura para el envenenamiento del anticongelante
Los inhibidores competitivos generalmente pueden ser desplazados por el aumento del
nivel de sustrato natural. Esta caracterstica ha sido til en el tratamiento de la
intoxicacin accidental por parte de anticongelante. El componente principal de
anticongelante es etilenglicol , que se oxida en una serie de reacciones enzimticas
para cido oxlico ,
que es txico. El bloqueo de la sntesis de cido oxlico conduce a la recuperacin.
El primer paso en este proceso enzimtico es la oxidacin de etilenglicol
por alcohol deshidrogenasa (ADH) . Etileno
HO
ADH
OH
Etilenglicol
les permite unen con ms fuerza y ser inhibidores ms eff CE- tiva. estatinas
e Th descritas en el Estudio de caso 1 son un buen ejemplo de esto.
Aunque los inhibidores competitivos oft bao tienen cierta semejanza con el
sustrato, esto no siempre es el caso. Mientras el medicamento tiene la forma
adecuada para encajar el sitio activo y tiene grupos funcionales que pueden
interactuar con las regiones de unin disponible, todava puede unirse al sitio
activo e inhibir la enzima. Th erefore, es posible que los frmacos con un
esqueleto Erent totalmente diff al sustrato para actuar como inhibidores
competitivos. Dichos frmacos se pueden unir a una combinacin de regiones
de unin dentro del sitio activo, algunos de los cuales son utilizados por el
sustrato y algunos de los cuales no lo son.
Tambin hay que recordar que el producto de una reaccin catalizada
por enzimas se une al sitio activo antes de que sea finalmente liberado, y por
lo que es posible tener inhibidores de la enzima que se asemejan a la
estructura del producto ms estrechamente que el sustrato. Otros frmacos
estn diseados para imitar el estado de transicin de la reaccin catalizada
por enzimas (seccin 7.4).
Por ltimo, algunos inhibidores competitivos se unen al sitio activo, pero
no compiten con el sustrato. Cmo puede ocurrir esto? e respuesta Th
radica en el hecho de que los sitios activos de varias enzimas se unen un
sustrato y una enzima tor cofactor. Th erefore, es posible tener los
inhibidores competitivos que ocupan la regin de unin normalmente
ocupado por el cofactor, y as la competicin es con el cofactor en lugar de
sustrato. e inhibidores de la quinasa Th descritas en el apartado 21.6.2 son
un buen ejemplo de esto. Muchos de estos agentes compiten con el ATP
cofactor para el sitio activo de las enzimas quinasa, y no el sustrato de
protena. D e la naturaleza competitiva de la inhibicin se ilustra en el
resistentes
glicol est actuando aqu como sustrato, pero podemos verlo como un
inhibidor competitivo, ya que est compitiendo con el sustrato natural de la
enzima. Si se incrementan los niveles de sustrato natural, que competir
mucho mejor con etilenglicol y evitar que reaccionar. ya no se forma cido
oxlico txico y el glicol de etileno que no ha reaccionado finalmente se
excreta del cuerpo. La cura, entonces, es la administracin de dosis elevadas
de sustrato de alcohol natural!
HO
Las enzimas COOH
COOH
OH
cido oxlico

las clulas tumorales, donde una enzima mutada muestra una mayor afi nidad para el ATP
durante los inhibidores (Recuadro 21.11).
7.1.2 Los inhibidores irreversibles
inhibidores de la enzima irreversibles pueden formar un enlace covalente a un
aminocido clave en el sitio activo y bloquear permanentemente la enzima
reflejada aff (Fig. 7.3). El mas efectivo
inhibidores irreversibles son aquellos que contienen un grupo funcional
trophilic elec- (X) capaz de reaccionar con un grupo nuclefilo presente en
una cadena lateral de aminocido. Invariablemente, el aminocido aff eja es
o bien serina o
cistena , debido a que estos aminocidos son a menudo en presente en los
sitios activos y contienen grupos nuclefilos (OH y SH respectivamente) que
estn involucrados en el mecanismo de muchas reacciones catalizadas por
enzimas (seccin 3.5.3). grupos funcionales electrfilos utilizados en inhibidores
irreversibles incluyen haluros de alquilo, epxidos, , - cetonas insaturados, o
lactonas y lactamas tensas (Fig. 7.4). E l altamente txico
(agentes nerviosos seccin 22.13.2.1) contiene grupos electroflicos y fl
uorophosphonate son inhibidores irreversibles de las enzimas de mamferos.
No todos los inhibidores irreversibles son altamente txicos, sin embargo, y
varios se utilizan clnicamente. Por ejemplo, penicilinas
(Seccin 19.5.1) contener una - lactmicos grupo que irreversiblemente inhibe
una enzima que es crucial para la sntesis de la pared celular bacteriana. ram
Disulfi ( Antabuse) (Recuadro 12.6) es un inhibidor irreversible de la enzima
alcohol deshidrogenasa y se utiliza para tratar el alcoholismo. Los inhibidores de
la bomba de protones se describe en la seccin 25.3 son inhibidores irreversibles
diseados para imitar este control natural de la enzima. Si el frmaco se une a
y se utilizan como agentes anti-ulcerosos. D e medicamento contra la obesidad orlistat
tambin es un inhibidor irreversible tor (recuadro 7.2). Una vez dicho esto, es
generalmente mejor
x inhibicin irreversible
Droga
OH
sitio activo OH
FIGURA 7.3 inhibicin irreversible de una enzima con un agente alquilante. (X = halgeno grupo saliente).
O
O
R-X
R R R
Los haluros de alquilo epxidos , - cetonas insaturadas Fluorophosphonates
(X = Cl, Br, l)
FIGURA 7.4 Ejemplos de grupos funcionales electrfilos.
Los inhibidores que actan en sitios de unin alostricos 89
inhibir una enzima con un inhibidor reversible en lugar de un inhibidor
irreversible. Como inhibidores irreversibles tienen grupos funcionales reactivos,
hay un riesgo de que puedan reaccionar con otras protenas o cidos nucleicos
y causar ECTS eff secundarios txicos.
inhibidores de la enzima irreversibles no son inhibidores competitivos. El
aumento de la concentracin de sustrato no revierta su inhibicin como los
inhibidores no se pueden desplazar del sitio activo. Th se puede causar
problemas si la acumulacin de un sustrato particular conduce a ECTS eff
secundarios txicos. Por ejemplo, el inhibidores de la monoaminooxidasa
(res Moais) bloquean el metabolismo de noradrenalina y tienen actividad
antidepresiva (seccin 23.12.5). Desafortunadamente, tambin se inhibe el
metabolismo de sustratos distintos de noradrenalina, lo que lleva a una
acumulacin de estos compuestos y ECTS graves eff lado. Ms IMAO
modernos han sido diseados para ser inhibidores reversibles con el fin de
evitar este problema.
7.2 Los inhibidores que actan en sitios de unin
alostricos
Sitios de unin alostrica fueron discutidos en la seccin 3.6 y son un medio
por el cual la actividad enzimtica puede ser controlada por los inhibidores
naturales. Cuando un tor inhibidor alostrico se une a su sitio de unin, la
resultante fi inducida t tambin deforma la forma del sitio activo de tal manera
que se hace irreconocible para el sustrato. Los medicamentos pueden ser
travs de interacciones intermoleculares, la inhibicin es reversible. Si el
frmaco contiene un grupo reactivo
x-
Droga Enlace Droga
covalente
Sitio activo sitio activo O
R R RR
PF
RO RO O
O RN OO
- lactmicos lactonas
90 Captulo 7 Enzimas como dianas de medicamentos

CAJA 7.2 inhibicin irreversible para el tratamiento de la obesidad

La grasa en la dieta se compone principalmente de triglicridos, que son digeridos intestino. En consecuencia, menos grasa se sintetiza en el cuerpo.

en el intestino delgado a los cidos grasos y 2-monoglicridos. Los productos de
la digestin son absorbidos y actan como bloques de construccin para la
biosntesis de grasa en el cuerpo. La enzima lipasa pancretica es responsable
de catalizar la digestin de las grasas, por lo que la inhibicin de esta enzima se
reduce la absorcin de glicridos y cidos grasos de la
orlistat es un frmaco anti-obesidad que acta como un inhibidor irreversible de
la lipasa pancretica, como resultado de la presencia de un grupo lactona
electroflica 4 eslabones. Este acila un residuo de serina en el sitio activo, que es
parte de una trada cataltica de serina, histidina y cido asprtico (comparar
seccin
3.5.3).

orlistat
CH 3 ( CH 2) 5
(CH 2) 10 CH 3
(CH 2) 10 CH 3

O OH NHCHO
O O
O
MARIDO O
Yo
+H+
NHCHO CH 3 ( CH 2) 5
Yo OH me me

OH O O

Ser Ser
La lipasa pancretica La lipasa pancretica

complejo. Th erefore, inhibidores no competitivos son menos reflexivo ef a bajas

concentraciones de sustrato. Los inhibidores no competitivos no son muy
norte SH
comunes.
En teora, un inhibidor no competitivo se une a un sitio de unin
NN
norte
alostrico e inhibe la reaccin catalizada por enzimas sin aff in de la
MARIDO
fuerza de sustrato vinculante ing. Th es ocurrira si el inducido fi t resultante
FIGURA 7.5 6-mercaptopurina.
de la unin del inhibidor alostrico distorsiona la cientemente sitio sufi
activo para evitar que el mecanismo cataltico, pero no tiene eff ect en el
lo que le permite formar un enlace covalente al sitio de unin alostrico, proceso de unin al sustrato. En la prctica, esta situacin ideal es
la inhibicin es irreversible. extremadamente raro, si es que se produce en absoluto. Es casi inevitable
La droga 6-mercaptopurina ( Higo. 7.5), que se utiliza en el tratamiento que cualquier distorsin sitio activo aff eja el proceso cataltico tambin la
de la leucemia, es un ejemplo de un inhibidor alostrico. Inhibe la enzima unin de sustrato aff ect. Th erefore, aquellos inhibidores que inhiben el
primer implicado en la sntesis de las purinas (seccin 6.1.1) y bloques de proceso cataltico, al tiempo que permite a los sustratos se unen,
purina sntesis. A su vez, esto bloquea la sntesis de ADN. normalmente causan algo de inhibicin de la unin del sustrato. Th se es
conocido como inhibicin mixta ya que no es ni la inhibicin competitiva
pura ni la inhibicin no competitiva pura.

7.3 Los inhibidores no competitivos y

no competitivos

7.4 anlogos del estado de transicin:

inhibidores no competitivos son inhibidores que se unen hacer marcha
atrs, ibly a una enzima, cuando el sustrato est ya vinculado al sitio activo.
En otras palabras, el inhibidor se une al complejo enzima-sustrato. En esta
situacin, el aumento de la concentracin de sustrato no va a superar la
inhibicin. De hecho, el nivel de inhibicin es dependiente de sustrato sufi
ciente estar presente para formar la enzima-sustrato
inhibidores de la renina
La comprensin de un mecanismo enzima puede ayudar a disear
medicamentos qumicos inhibidores ms potentes. Por ejemplo, es posible
disear inhibidores que se unen tan fuertemente al sitio activo (mediante
fuerzas no covalentes)
 anlogos del estado de transicin: inhibidores de la renina 91

que estn FEP caz irreversibles inhibidores-un poco como invitar a alguien
a cenar y hallazgo que se han movido en forma permanente. Una forma de
hacer esto es el diseo de un frmaco que se parece al estado de
transicin para la reaccin catalizada. un frmaco tal debe unirse ms
fuertemente que ya sea el sustrato o el producto y ser un fuerte inhibidor
como resultado. Tales compuestos se conocen como anlogos del
estado de transicin o inhibidores .
E l uso de anlogos de estado de transicin ha sido par- caz ef
especial- en el desarrollo de inhibidores de la renina
(Fig. 7.6). La renina es una enzima proteasa que es responsa- ble de hidrlisis
de un enlace peptdico especfi en la protena
angiotensingeno formar angiotensina I . La angiotensina I se convierte despus estable a la hidrlisis. Th se puede hacer mediante la introduccin de una
en angiotensina II ( vase el estudio de caso 2), que acta para constreir los
vasos sanguneos y retener lquido en los riones, los cuales conducen a un
aumento de la presin arterial. Th erefore, un inhibidor de la renina debe actuar
como un agente antihipertensivo (es decir, presin arterial baja) por pre- ventilar la
primera etapa en este proceso.
La renina contiene dos residuos de aspartilo y una molcula de agua
puente en el sitio activo que son cruciales para el mecanismo por el que un
enlace amida en el sustrato es hidrolizado (Fig. 7.7). En la primera etapa
de este mecanismo, se forma un intermedio tetradrico. Para formar este
intermedio, el mecanismo de reaccin tiene que pro- ceder a travs de un
estado de transicin de alta energa, y es este estado de transicin que se
desea imitar con un anlogo de estado de Transicin. Sin embargo, no es
posible aislar tales
una especie de alta energa con el fin de estudiar su estructura; as que cmo
se puede disear un medicamento para imitar ella? e respuesta Th es basar el
diseo del frmaco sobre la reaccin inter- medio. Th e razn de esto es como
sigue. A medida que el inter- medio es menos estable que el sustrato, se
presume que es ms estrecha en el carcter al estado de transicin. Th es, a
su vez, implica que el estado de transicin es ms tetradrica en carcter que
planar. erefore Th, frmacos basados en la estructura del intermedio
tetradrico son ms propensos a imitar el estado de transicin.
D e intermedia en s es reactivo y fcilmente escindido. Th erefore, un
anlogo tiene que ser diseado que se une con la misma fuerza, pero es
caracterstica que imita la estructura DraI tetrahe- del intermedio, pero no
tiene grupo saliente, por la segunda parte del mecanismo de reaccin.
Una variedad de imitadores han intentado y un resto lene hydroxyethy- ha
demostrado caz eff (por ejemplo, aliskiren; Higo. 7.8). Th e grupo hidroxi
de etileno tiene la geometra tetradrica requerida y uno de los dos grupos
hidroxilo necesarios para una buena unin. Tambin es estable a la
hidrlisis, porque no hay presente grupo saliente. Aliskiren fue aprobado
por el Food and Drug Administration
( FDA ) en 2007 para el tratamiento de la hipertensin.
Estrategias similares se han utilizado con xito para disear agentes
antivirales que actan como transicin de estado analgica inhibidores para la
enzima proteasa del VIH ( seccin
20.7.4). Los estatinas tambin se puede ver como la transicin de estado

inhibidor

Enzima convertidora
de angiotensina
La renina (ACE)
angiotensingeno La angiotensina I La angiotensina II

FIGURA 7.6 La inhibicin de la renina para bloquear la sntesis de la angiotensina I y angiotensina II.

intermediario
tetradrico

HN 1

HN sustrato R +

CO 2 S.S 2 NR 1
OOHH
O1 R2 R2 R2

HOH
MARIDO

O O OO O O HO O O O
O OH

spid spid spid spid

spid spid

FIGURA 7.7 Mecanismo de hidrlisis renina-catalizada.

92 Captulo 7 Enzimas como dianas de medicamentos

MeO
CHMe 2

OH
MeO O NH O hidroxietileno
transicin de
HN imitador del estado de
MARIDO 2 norte O NUEVA HAMPSHIRE 2 Intermedio de reaccin
me me
OH CHMe 2 HO
OH
Hidroxietileno estado de
transicin mimtico

FIGURA 7.8 Aliskiren.

anlogos (Estudio de caso 1), al igual que algunos inhibidores de la ECA
(Estudio de caso 2).
7.5 sustratos suicidas
anlogos del estado de transicin se pueden ver como De buena fe
visitantes al sitio activo de una enzima que se convierten en invasores obstinadas
una vez que han llegado. Otros, aparentemente inofensivos, los visitantes pueden
convertirse en asesinos letales una vez que se han unido a la enzima diana. Tales
agentes estn diseados para someterse a una transformacin catalizada por
enzimas que los convierte en una especie altamente reactiva que forma un enlace
covalente con el sitio activo.
Un ejemplo de un sustrato suicida es cido clavulanico ,
que se utiliza clnicamente en medicamentos antibacterianos (por ejemplo, Augmentin
selectivos para la enzima diana. Si el grupo de alquilacin no se haba
) para inhibir la bacteriana - lactamasa
enzima (seccin 19.5.4.1). Th es enzima es responsable de la
resistencia a la penicilina observado en varias cepas bacterianas, ya
que cataliza la hidrlisis de la penicilina
- anillo de lactama. mecanismo e Th implica un residuo de serina en el sitio
activo acta como un nuclefilo para formar un intermedio donde la serina
est ligada covalentemente a travs de un grupo ster a la penicilina de anillo
El cido clavulnico tambin fi ts el sitio activo de - lactamasa, y la - anillo
de lactama es abierto por el residuo de serina de la misma manera. Sin
embargo, la acil-enzima inter- medio reacciona entonces con otro grupo ms
philic nuclesido enzimtica (posiblemente NH 2 ) para unir el frmaco de forma
irreversible a la enzima (Fig. 7.10). mecanismo e Th requiere la prdida o
ganancia de protones en diversas etapas, y un cido amino, tales como
histidina, en el sitio activo sera capaz de actuar como un donador de protones
/ receptor (comparar secciones
3.5.2 y 22.12.3.2).
Los frmacos que actan de esta manera son a menudo llamados en nismos
inhibidores basados en la me- o sustratos suicidas debido a que la enzima
est cometiendo suicidio por reaccin con ellos (vase tambin el recuadro 7.3).
Th e gran ventaja de este enfoque es que el agente de alquilacin se genera
en el sitio en el que est destinado a actuar y es, por lo tanto, altamente
disfrazado de esta manera, el frmaco tendra alquilada grupo nuclefilo primera
fi la que se reuni en el cuerpo y se habra mostrado poca, o ninguna, la
selectividad. D e utiliza de agentes alquilantes y los problemas asociados con
ellos se discuten en las secciones 9.3 y 21.2.3.
uso principal e Th para sustratos suicidas ha estado en enzimas c ling

abierto. grupo ster e Th es luego hidrolizado para liberar la penicilina especificaciones etiquetadoras. e sustratos Th pueden marcarse con istopos

inactivado y liberar el sitio activo, de manera que el proceso cataltico se radiactivos y se hacen reaccionar con su enzima diana con el fin de localizar la

puede repetir (Fig. 7.9). enzima en las preparaciones de tejido. Sin embargo, algunos agentes clnicamente

tiles actan como

O la penicilina Intermedio producto hidrolizado

O
HHHN RC O
RC HHHS
norte S Me
RC HHH
norte
S Me
me
- lactamasa - lactamasa O
O
NO me +H+ + H2 O Yo
HN Yo OH HN
O
CO 2 MARIDO CO 2 MARIDO
Ser CO 2 MARIDO Ser HO
Ser HO

FIGURA 7.9 Reaccin catalizada por bacteriana - enzimas lactamasa.

 usos medicinales de inhibidores de la enzima 93

1 2 3

NH2 NH2
NUEVA HAMPSHIRE

O
CH2OH
O
CH2OH O CH2OH
norte

O HN HN
Base H O
MARIDO
CO2H
OO O
OH CO2H CO2H

4 5 6
O
CH2OH

H2N

NUEVA HAMPSHIRE NUEVA HAMPSHIRE NUEVA HAMPSHIRE

CO2H

MARIDO CH
O CH2OH
HC

HN
O O O

MARIDO
O CO2H O O

irreversiblemente bloqueado

FIGURA 7.10 El cido clavulnico que acta como un sustrato suicida.

sustratos suicidas, tales como el cido clavulnico (como se describi
anteriormente). Algunos inhibidores de la monoamino oxidasa tambin se cree
que son sustratos suicidas (recuadro 7.4). Otro ejemplo interesante de un
sustrato suicida es 5-fl uorodeoxy- monofosfato uracilo ( 5-FdUMP). agente
contra el cncer d e 5-fluorouracilo se utiliza para tratar el cncer de mama,
el hgado y la piel, y se convierte en 5-FdUMP en el cuerpo. Th es entonces
acta como un sustrato suicida para la enzima sintasa thym- idylate (seccin
21.3.2). En este caso, se forma el enlace prestado cova- entre el sustrato
suicida y el cofactor de la enzima, pero la eff general ect es el mismo.
7.6 Isoenzimas selectividad de los inhibidores
llevar a cabo las mismas reacciones, pero la COX-1 es la isoenzima que
est activo en condiciones normales y sanos. En la artritis reumatoide, la
normalmente inactiva de la COX-2 se activa y produce el exceso de infl
amatoria prostaglandinas. erefore Th, drogas tales como valdecoxib ,
rofecoxib ,
y celecoxib se han desarrollado para ser selectivos para la COX-2 de isoenzimas,
de modo que se reduce slo la produccin de prostaglandinas infl am- infla-. La
selectividad es posible, aprovechando el hecho de que un grupo de isoleucina
est presente en el sitio de unin de la COX-1, mientras que el grupo
correspondiente en la COX-2 es valina. El rofecoxib fue autorizada en 1999, pero
tuvo que ser retirado en 2004, ya que se relaciona con un mayor riesgo de ataque
cardaco y accidente cerebrovascular cuando se toman durante un perodo de 18
meses o menos.

identifi cacin de las isoenzimas que predominan en algunos teji- dos, pero no a
otros, permite la posibilidad de disear inhibidores de la enzima selectivos de
7.7 usos medicinales de inhibidores de la
tejidos (Recuadro 7.4).
enzima
Por ejemplo, el frmaco anti-inflamatorio no esteroideo infl (NSAID) indometacina
( Higo. 7.11) se usa para tratar enfermedades infla- infl am, tales como la
7.7.1 Los inhibidores enzimticos utilizados contra los
artritis reumatoide, y funciona mediante la inhibicin de la enzima ciclooxigenasa
. Th se enzima est implicada en la biosntesis de prostaglandinas -agents
microorganismos
que son responsables por el dolor y la infl amacin de la artritis reumatoide.
La inhibicin de la enzima disminuye los niveles de prostaglandina y alivia Los inhibidores de enzimas han tenido un gran xito en la guerra contra la
los sntomas de la enfermedad. Sin embargo, el frmaco tambin inhibe la infeccin. Si una enzima es crucial para un microorganismo, a continuacin,
sntesis de prostaglandinas benefi ciales en el tracto gastrointestinal y el apagndolo matar claramente la clula o evitar que crezcan. Idealmente,
rin. Se ha descubierto que la ciclooxigenasa tiene dos isoenzimas: la enzima elegido debe ser uno que no est presente en nuestros propios
COX-1 y COX-2. ambas isoenzimas cuerpos. Afortunadamente, existen tales enzimas debido a los signifi
cativas cias diff bioqumicas entre clulas bacterianas
94 Captulo 7 Enzimas como dianas de medicamentos

CAJA 7.3 sustratos suicidas

sustratos suicidas son agentes que se convierten en especies altamente reactivas
cuando se someten a una reaccin catalizada por enzimas. Ellos forman enlaces
covalentes con la enzima y la inhiben de forma irreversible. En algunos casos, esto
puede causar toxicidad. Por ejemplo, el agente diurtico cido tienilic tuvo que ser
retirado del mercado debido a que se ha encontrado para actuar como un sustrato
suicida para las enzimas del citocromo P450 involucradas en el metabolismo de
frmacos (seccin 11.5.2). Desafortunadamente, el metablica
reaccin llevada a cabo por estas enzimas convierten el cido tienilic a un
sulfxido tiofeno, que resultaron altamente electroflico. Esto anim a una
reaccin de Michael que conduce a la alquilacin de un grupo tiol en el sitio
activo de la enzima. La prdida de agua del sulfxido tiofeno restaur el anillo de
tiofeno y dio como resultado la formacin de un enlace covalente a la enzima, lo
que inhibe la enzima irreversiblemente.

cyt P450 cyt P450

cl O
cl O
cl O
OH cl O
OH
Oxidacin
S
ASI

SH O S QUE O
MARIDO sustrato suicida
cido Tienilic

cyt P450 cyt P450 cyt P450

NADPH O 2

La alquilacin MARIDO
+H
MARIDO MARIDO

Arkansas Arkansas Arkansas

P450
OSOS OSOS OSOS
MARIDO

cyt P450 Cit Cit P450

Enzima alquilada e
- H2 O
MARIDO inhibido

Arkansas
Arkansas
S S

OS
OS

inhibicin irreversible del citocromo P450 por el cido tienilic.

y la nuestra. Naturaleza, por supuesto, est muy por delante en este juego. Por
ejemplo, muchas cepas de hongos producir metabolitos que actan como
inhibidores de enzimas bacterianas, pero no tienen eff ect sobre enzimas
fngicas. Th es hongos da una ventaja sobre sus competidores microbiolgicos
cuando compiten por los nutrientes. Tambin ha proporcionado la medicina con
antibiticos importantes tales como penicilina y cefalosporina C .
Aunque es preferible dirigirse a las enzimas que son nicas para el
invasor extranjero, an es posible orientar
enzimas que estn presentes tanto en las clulas de Mali bacterianas y
mamferos, siempre y cuando no son signifi cias no puede diff entre ellos. Tales
cias diff son perfectamente viables. Aunque las enzimas en ambas especies
pueden haber derivado de una protena ancestral comn, han evolucionado y
mutado por separado lo largo de varios millones de aos. La identificacin de
estos cias diff permite al qumico farmacutico para disear frmacos que se
unirn y actuar selectivamente contra la enzima bacteriana. Captulo 19 trata de
agentes antibacterianos tales
 usos medicinales de inhibidores de la enzima 95

como el sulfonamidas , penicilinas, y cefalosporinas , y medicamentos tales como zidovudina y saquinavir para el VIH (vase el Captulo

todos los cuales actan mediante la inhibicin de las enzimas. inhibidores de la enzima 20).

sintticas, tales como la fluoroquinolonas, Tambin se abarcaron en este captulo.

7.7.3 inhibidores de la enzima utilizada contra las enzimas

propias del organismo

7.7.2 Los inhibidores enzimticos utilizados contra los
Los frmacos que actan sobre las enzimas propias del cuerpo son importantes en
virus
la medicina. Th ERE son muchos ejemplos discutidos en otra parte de este texto y

Los inhibidores enzimticos son tambin extremadamente importante en la lucha contra las en la Tabla 7.1 indica varias de ellas, con una referencia cruzada a la seccin

infecciones virales (por ejemplo, virus del herpes y VIH). El xito de los frmacos antivirales correspondiente en este libro de texto.

incluyen aciclovir para el herpes,

MeO MARIDO 2 NO 2 S MeO 2 S MARIDO 2 NO 2 S

me CO 2 MARIDO
me
norte

NN
O O O CF 3
norte

cl Yo

indometacina valdecoxib rofecoxib celecoxib

FIGURA 7.11 inhibidores de la ciclooxigenasa.

CAJA 7.4 El diseo de frmacos que sea selectivo de isoenzimas

El diseo de frmacos para ser medios de isoenzimas selectivos que pueden ser como selegilina , se administran con levodopa para el tratamiento de la enfermedad

diseadas para actuar sobre diferentes enfermedades, a pesar de que acta sobre la de Parkinson (Fig. 2). inhibicin de la MAO-B protege levodopa de metabolismo. Se

misma enzima. Esto se debe a isozimas difieren en sustrato especificidad y se cree que clorgilina y selegilina para actuar como sustratos suicidas donde son

distribuyen de forma diferente en el cuerpo. Monoamino oxidasa (MAO) es una de convertidos por la enzima a especies reactivas que reaccionan con la enzima y

las enzimas responsables del metabolismo de los neurotransmisores importantes, formar enlaces covalentes. Los grupos funcionales de amina y alquino presentes en

tales como dopamina, noradrenalina , y serotonina ( seccin ambos frmacos son cruciales para este proceso.

4.2), y existe en dos formas isoenzimticos (MAO-A y MAO-B). Estas isozimas difieren

en sustrato ciudad especfica, distribucin de tejido, y la estructura primaria, pero llevan

a cabo la misma reaccin por el mismo mecanismo (Fig. 1). MAO-A es selectivo para la monoaminooxidasa
coenzima (MAO)
noradrenalina y la serotonina, mientras que MAO-B es selectivo para la dopamina. Los R CH 2 NUEVA HAMPSHIRE 2 R CHO
inhibidores de la MAO-A, como clorgilina , se utilizan clnicamente como Flavin

antidepresivos, mientras que los inhibidores de la MAO-B, tales

FIGURA 1 La reaccin catalizada por la MAO.

cl MARIDO CH 3
MARIDO
O N CH 3 CC HO NUEVA HAMPSHIRE 2 norte CCH

CO 2 S.S CH 3
cl HO

clorgilina La levodopa La selegilina (deprenilo)

FIGURA 2 Clorgilina, levodopa y selegilina.