DESCRIPCIN COMPLETA DE CLOSTRIDIUM PUTREFACIENS (McBRYDE)

W. S. STURGES AND E. T. DRAKE

Laboratory of the Cudahy Packing Company
Received for publication January 21, 1927

Hace ms de quince aos, McBryde (1911) aisl una interesante anaerobio que
difieren en varios caracteres de cualquier anterior Descrito. Sugiri el nombre
B. putrefaciens para este nuevo especies. Aunque una descripcin considerable
de este organismo, Basado presumiblemente en una cultura nica, se dio en
este boletn, Parece que no ha recibido ningn reconocimiento en la literatura
de Los quince aos siguientes. Recientemente, Boyer (1926) Hallazgo
frecuente de este organismo, y tambin de otros anaerobios, En el tejido
muscular animal poco despus del sacrificio.

En este Laboratorio durante los ltimos aos, 27 cepas han sido aisladas de
fuentes animales que se ajustan a los anaerobios Ya descrito. Son anaerobios
estrictos del Clostridium Tipo y son marcadamente proteolticos. Las culturas
jvenes en Los medios de la carne se caracterizan por filamentos y cadenas.
Despus dos o tres das de cultivo las clulas se convierten en forma de club,
Esta hinchazn terminal de tincin profunda se describe mejor como bulbo a
partir de esta etapa inicial la esporulacin avanza rpidamente y las esporas
maduras se encuentran un da o dos ms tarde. Son plectridiales, Siendo
terminal, esfrico, y aproximadamente 2,2 veces el dimetro De la varilla. Los
tpicos esporangios del muslo permanecen intactos varias semanas, perodo
durante el cual las esporas libres son extremadamente raras. Cuando se
encuentran estos estn ligeramente manchados (mtodo de Gram) y son
aparentemente de paredes delgadas. Las culturas muy antiguas muestran
desintegracin de las clulas con la liberacin de muchas de estas esporas
libres. Si bien este es el comportamiento tpico de C. putrefaciens cuando los
primeros cultivos en el laboratorio, hay que admitir que los escritores En
comn con Boyer (1926) han notado una disminucin considerable de
esporulacin despus del cultivo prolongado de cultivos puros. No Se han
observado otros cambios en el comportamiento. Un estudio detallado de estas
27 cepas basado en la ltima S. A. B. se ha elaborado un cuadro descriptivo
que se ofrece ahora en de la obra original de mcbryde.
Los diversos refinamientos de Mtodos que se han desarrollado en los ltimos
quince aos han sido empleados en nuestro intento de establecer este
organismo nico entre el Clostridium anaerbico donde sin duda pertenece.

Morfologa. Varillas 0.5-0.7 por 3-15M con los extremos redondeados,

ocurriendo Solos y en cadenas. Esporangios del palillo con terminal esfrico
Esporas 1,1-1,61A de dimetro. No mvil. Gram positivas. Grueso Predominan
los filamentos en medios de bajo pH. Colonias de agar. Pequeo, filamentoso.
Agar inclinado. Escasa, blanca, rebordeada, reluciente.

Caldo. Turbidez moderada, transitoria; Crecimiento abundante como un

sedimento fecundante en el fondo. Carne de cerdo picada. Una ligera
desintegracin de las partculas de carne con un fuerte, caracterstico, agrio,
olor putrefactivo. Hay poca evidencia visual de digestin de la carne hasta que
el tubo se agita vigorosamente cuando el contenido se desintegra en una pulpa
ms o menos homognea. Pualada de gelatina crecimiento y licuefaccin
comenzando en el fondo en dos tres das. Licuefaccin completa en tres a cinco
das. Leche de Litmus. Litmus reducido en cuatro a siete das. Requesn
aparece en quince das a un pH de 6,5. La peptonizacin sigue lentamente.
Indol no formado.
Sulfuro de hidrgeno. Poca produccin. Nitratos no reducidos.
Fermentacin. cido y gas ligero en la glucosa. Ningn cido o gas en lactosa,
sacarosa o maltosa. Almidn no hidrolizado.
Anaerbico. No hay crecimiento superficial en ningn medio sin estricto
Anaerobiosis.
Relaciones de temperatura. Optimizado de 200 a 25 C. Crecimiento lento a 0
C. e incluso a temperaturas ms bajas. No hay crecimiento visible a 37 C.
PH. El crecimiento se produce en medio de carne entre pH 6,0 y pH 9,0 con un
ptimo a pH 8,0.
Hbitat. Se encuentra en los tejidos musculares de los cerdos al sacrificio.

En comn con McBryde hemos encontrado extracto de cerdo para ser favorable
para el crecimiento, y se ha utilizado como base del Agar, gelatina y medio de
caldo empleado. Condiciones anaerobias se obtuvieron evacuando dos veces a
la presin de vapor del agua y rellenando con hidrgeno.
Se observar que nuestros resultados negativos para indol estn en variacin
con McBryde. Cultivo en extracto de carne de cerdo peptona caldo de cultivo y
caldo de triptfano (Bacto) han sido probados en edades de uno, tres y siete
das por la prueba de Ehrlich. Un ligero Positivo se obtuvo cuando los cultivos
se ensayaron directamente. Se encontr, sin embargo, que el color no poda
extraerse con cloroformo. Los cultivos en duplicado se sometieron a una
destilacin a vapor segn la tcnica de Fellers y Clough (1925). No se pudo
obtener ninguna prueba positiva mediante este mtodo.
Del estudio anterior es evidente que C. putrefaciens es un interesante
anaerobio, - en la medida en que los escritores son conscientes en sus
requisitos de temperatura. esta protena fuertemente proteoltica organismo
crece bien a 0 c. y poco o nada a 37 C. Morfolgicamente los tpicos
esporangios del muslo son sugestivos de C. putrificum (Bienstock) y C. tetani.
Las varillas de C. Putrefaciens, sin embargo, tienen un dimetro ligeramente
mayor que los de C. putrificum ya menudo exceden los de C. tetani de longitud.
Adems, la falta de motilidad y los requisitos de baja temperatura de la
primera especie lo diferencian de los dos ltimos.

El olor producido en la carne es muy caracterstico. Uno acostumbrado a estos

olores no tiene dificultad para diferenciar los Cultivos de este anaerobio de
otros organismos putrefactores
Esto significa que los viejos cultivos crnicos de C. putrefaciens presentan un
marcado contraste con cultivos similares de otros anaerobios putrefactivos en
los que La licuefaccin extensa es perfectamente evidente. Un marcado
ablandamiento de la carne sin una reduccin evidente del volumen es
caracterstico de C. putrefaciens.
Las veintisiete cepas estudiadas, aunque aisladas de diferentes fuentes,
muestran un acuerdo perfecto sobre todas las caractersticas. Est en los
detalles fisiolgicos del cultivo, la caracterstica y distintiva imagen
microscpica, y nuestra repetida Fracaso para obtener crecimiento de
cualquiera de las cepas a 37 bajo condiciones anaerbicas, o a cualquier
temperatura bajo condiciones aerbicas, constituyen una parte de nuestros
criterios para considerar que estos cultivos sean puros.
Los autores consideran este organismo nico merecedor de reconocimiento
como una especie distinta y sugieren su inclusin en el gnero Clostridium,
como C. Putrefaciens.

REFERENCIAS
BOYER, E. A. 1926 Jour. Agri. Res., 33, 761.
FELLERS, C. R., AND CLOUGH, R. W. 1925 Jour. Bacteriol., 10, 105-133.
McBRYDE, C. N. 1911 B. A. I. Bull. 132 U. S. Dept. Agric.