I.

- OBJETIVO: Efectuar el recuento de indicadores de contaminacin fecal en

diferentes tipos de agua.
II.- INTRODUCCION.
Se utilizan varias pruebas para determinar coliformes y E. coli en muestras de
aguas. Todas se basan en el crecimiento de los organismos presentes en las
muestras. Los mtodos ms comunes de recuento son el procedimiento del nmero
ms probable (MPN, del ingls Most probable Number) y el de la filtracin por
membrana (MF, del ingls membrane filter). (Brock, 2009).
La tcnica de filtracin de membrana consiste en pasar al menos 100 mL del agua
a analizar a travs de un filtro de membrana estril, que tiene la funcin de atrapar
las bacterias sobre la superficie de la membrana. Este filtro ha de colocarse sobre
una placa que contiene que contiene medio de cultivo eosina-azul de metileno
(EMB). Este medio de cultivo es selectivo para coliformes fecales.
Hay pruebas diseadas con sustratos
especficos que son en general ms rpidas y
exactas que las pruebas clsicas con agar
EMB. Estas pruebas se basan en la capacidad
de los coliformes y de E. coli para metabolizar
determinadas sustancias. Por ejemplo, todos
los coliformes, incluyendo a E. coli,
metabolizan el 4-metilumbeliferil-P-D-
galactopiransido (MUGal) mediante la
enzima p-galactosidasa. Si en una muestra
hay coliformes el MUGal se metaboliza
originando un producto fluorescente que es
visible con luz ultravioleta (UV) (Brock, 2009).
III.- RESULTADOS.
La muestra analizada fue agua de ro () y se hicieron diluciones de esta muestra del
orden 103 , 104 105 . Obtenindose los siguientes resultados en cada medio de
cultivo.
MEDIO m- Endo LES.
DILUCION COLONIAS FORMADAS UFC
(Brillo metlico)
103 Incontable Incontable.
104 20 2.0 105 UFC/mL
105 4 0.4 106 UFC/mL

MEDIO m-FC.
DILUCION COLONIAS FORMADAS ( UFC
Colonias Azules)
103 Incontable Incontable
104 10 1.0 105 UFC/mL
105 1 0.1 106 UFC/mL

Medio KF Streptococcus.
DILUCION COLONIAS FORMADAS UFC
(Colonias Rojas)
103 38 3.8 104 UFC/mL
104 5 0.5 105 UFC/mL
105 2 0.2 106 UFC/mL

Medio SPS (Sulfito-polimixina-sulfadiazina)

DILUCION COLONIAS FORMADAS UFC

3
10 0 No hubo desarrollo de
colonias.
104 0 No hubo desarrollo de
colonias.
105 0 No hubo desarrollo de
colonias.
Figura No.1: Desarrollo de colonias con brillo metlico en el medio m-Endo
LES. En el medio SPS no hubo desarrollo de colonias.

Figura No.2: Desarrollo de colonias azules en el medio m-FC. En el medio KF

hubo desarrollo de colonias color rojo.
PRUEBAS CONFIRMATORIAS.
MEDIO DE CULTIVO: m-Endo-LES.
Despus de sembrar las colonias a confirmar en una placa TSA se realiz la prueba
de la oxidasa.
PRUEBA A LA OXIDASA: Positiva oxidasa.
MEDIO DE CULTIVO: KF-Streptococcus.
Despus de resembrar las colonias a confirmar en una placa de BHIA se realiz la
prueba de la catalasa.
PRUEBA A LA CATALASA: Negativa catalasa.