ANLISIS CUANTITATIVOS

ANLISIS
CUALITATIVO vs. CUANTITATIVO
1. CUALITATIVO - qu est presente?
Cromatografa - compare tR 's
Espectroscopa - MS, IR, UV

2. CUANTITATIVO - Cunto est presente?

Altura de pico
rea de pico
 ANLISIS CUALITATIVO
Teobromina
Teofilina

Cafena
1. Estndar

"X"

2. Desconocido

tR(teofilina) = tR(X), entonces, se sugiere que X es teofilina.

Para confirmacin positiva, se debe emplear LC-MS
 EXACTITUD-META ANALTICA
Error absoluto:
Diferencia entre valor medido y el valor verdadero.

Error relativo (%) :

(Error / Valor Verdadero) x 100 = % Error

Ejemplo:
Peso verdadero 50.0 g
Peso medido 48.0 g
Error absoluto 2.0 g
% Error ( 2 / 50 ) x 100 = 4 %
 PRECISIN
1. Mide reproducibilidad

2. Depende de la tcnica y el tcnico

 MEDIDA DE LA PRECISIN:
DESVIACIN ESTNDAR
(x x )2
S.D.= =
n1
S.D.
Desviacin estndar relativa =RSD = 100
x

Analista X Analista Y
10.0 10.2
12.0 Estadstica 10.6 Estadstica
9.0 n=5 9.8 n=5
11.0 X = 10 10.1 X = 10
8.0 s = 1.58 9.3 s = 0.48
RSD = 15.8% RSD = 4.8%
COMPONENTES DE EXACTITUD

CALIBRACIN + PRECISIN = EXACTITUD

1. Esencial calibracin con estndares

2. Precisin (reproducibilidad) necesaria para
un procedimiento analtico exacto
 PROCESO CUANTITATIVO
1. Muestreo 4. Integracin

2. Preparacin
de la
muestra 5. Clculos

3. Cromatografa
 moler disolver filtrar concentrar

extraer

diluir
derivatizar
 MUESTREO

1. Objetivo tomar una pequea muestra

representativa de una poblacin grande
2. Problemas
Contaminacin
La muestra no es representativa
HGR/1997 13
HGR/1997 14
 PREPARACIN DE MUESTRA
1. Se parte de la definicin de un problema
analtico
2. Establecimiento de un protocolo de trabajo
3. Muestreo
4. Se lleva a cabo el protocolo con muestras
reales (interferencias)
5. Problemas
Prdida de muestra
Contaminacin
CONVERSIN DIGITALALTURA DE PICO

D
C

h
A

h
h
INTEGRACIN REA DE PICO

Area

Ms difcil que medir altura de pico, pero est

menos influenciado por cambios en la
temperatura de la columna o el flujo.
INTEGRADOR DIGITAL ELECTRNICO
A/D
DETECTOR
CONVERTIDOR

MICROPROCESADOR IMPRESORA

sjhd kahd kjhd kjhd

kjhd kjhsd kjhsd kjhs
kjhs dkjhs dkjhs
dkjhs dkjhs dkjhs
dkjhs dkjhs dkjhs
aljd lkjsd lkjsd lkjsd
lkjs dljad ljadlj sljd
aljd lkjsd iou fijgf
oujfjd iuzdshda,
adh fiehkjhd
audddehfjsiu
dSj.jfldu oejalkjd lkjs
dlkj djs 2163216
321 6312

REGISTRADOR
CINTA
 SISTEMAS DE DATOS

1.235

1.235
1.235

1.235

1.235

INTEGRADOR COMPUTADORA
. Fcil de usar . Flexible/poderosa
. Precio moderado . Ms caras
 CLCULOS:
NORMALIZACIN DE REA SIMPLE
C
600
B
A 300

rea = 150

1. Clculos
Area A 150
wgt %A = 100 = 100 = 14. 3%
Total Area 150 + 300 + 600

2. Procedimiento usualmente no vlido

Asume que todos los picos responden igual
Asume que la suma de reas es el 100% de la muestra
 CLCULOS: FACTOR DE
RESPUESTA

Peso = 10 g 10 g 10 g
rea = 150 300 600

Los factores de respuesta difieren

CLCULOS DEL FACTOR DE
RESPUESTA
CLCULOS: NORMALIZACIN CON
CORRECCIN DE REA

Area RF Corrected Area

A 150 15 10
B 300 30 10
C 600 60 10

wgt %A = (10/30) x 100 = 33.3%

 CLCULOS:
ESTNDAR EXTERNO

rea

Desconocido

Peso (g)

1. Desarrolla una curva de calibracin con

estndares, y compara con el desconocido
2. Requiere de una inyeccin reproducible
3. Es ms empleado en LC que en GC
SELECCIN DEL ESTNDAR INTERNO
Muestra sola

Requisitos:
1. Estndar puro
Muestra + ISTD 2 Picos bien resueltos
3. Nunca presente en la
muestra
4. En el mismo nivel de
concentracin
 CLCULOS:
ESTNDAR INTERNO (1)
EI = EST. INTERNO
A = ANALITO

Muestra 3
rea A / rea IS
Muestra 2
Muestra 1

Peso A / Peso IS
1. Prepare e inyecte muestras de estndar interno y del analito de
inters.
2. Prepare una curva de calibracin de los datos cromatogrficos,
graficando la relacin de reas contra la relacin de pesos de
analito y estndar interno.
 CLCULOS:
ESTNDAR INTERNO (2)

rea A / rea IS

Desconocido X

Peso A / Peso IS

1. Aada con precisin el IS a la muestra desconocida

2. Cromatografe la mezcla
3. Calcule la relacin de reas
4. Determine la relacin de pesos de la curva de
calibracin
5. Encuentre el peso del analito
EJEMPLO
 Limites de deteccin y cuantificacin
Instrumental.
Pesticidas Organoclorados.

3.4 Endosulfan 4.48,...,33.6ppm

3.2 3.2 BHC 1.6,...,12ppm
3.0 3.0 Mirex 2.28,...,17.1ppm
2.8 2.8 Metoxicloro 1.16,...,8.7ppm
2.6 2.6 p,p-DDT 1.08,...,8.1ppm
2.4 2.4 Endrin 2.64,...,19.8ppm

A Organoclorado/ A EI
2.2 2.2 Dieldrin 3.24,...,24.3ppm
A Organoclorado/ A EI

2.0 2.0 Aldrin 2.08,...,15.6ppm

1.8 1.8 Heptacloro 2.08,...,15.6ppm
1.6
1.6
BHC 1.6,...,12ppm 1.4
1.4
p,p-DDT 1.08,...,8.1ppm 1.2
1.2 1.0
1.0 Mirex 2.28,...,17.1ppm
Metoxicloro 1.16,...,8ppm 0.8
0.8 0.6
Endrin 2.64,...,19.8ppm
0.6 0.4
Aldrin 2.08,...,15.6ppm
0.4 Endosulfan 4.48,...,33.6ppm 0.2
0.2 0.0
Dieldrin 3.24,..., 24.3ppm 0.00 0.25 0.50 0.75 1.00 1.25 1.50 1.75 2.00 2.25 2.50 2.75 3.00 3.25 3.50 3.75
0.0
Organoclorado/ EI
0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 1.8 2.0 2.2 2.4 2.6 2.8 3.0 3.2 3.4
Organoclorado/ EI

SIM
SCAN
 Limites de deteccin y cuantificacin
Instrumental.
Pesticidas Organofosforados

Malation 2.24-16.8ppm
2.4 3.4 DDVP 2.64-19.8ppm
2.2 Etion 2.08,...,15.6ppm 3.2 Disulfoton 2.08-15.6ppm
Malation2.24,...,16.8ppm 3.0 Metil paration 1.28-9..6ppm
2.0 2.8 Paration 2.24-16.8ppm
Co-Ral 3.3,...,9.9ppm
1.8 Paration 2.24,...,16.8ppm 2.6 Etion 2.08-15.6ppm

Area Organofosforado/ A EI
Disulfoton 2.08,...,15.6ppm 2.4 Zolone 1.64-12.3ppm
A organofosforado/ A EI

1.6 DDVP2.6,...,19.8ppm 2.2 Co-Ral 1.32-9.9ppm

1.4 Zolone 1.64,...,12.3ppm 2.0
1.8
1.2
1.6
1.0 1.4
0.8 1.2
1.0
0.6 0.8
0.4 0.6
0.4
0.2 0.2
0.0 0.0
0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 1.8 2.0 2.2 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 1.8 2.0 2.2 2.4
Organofosforado/ EI Organofosforado/EI

SCAN SIM
 Pesticida SCAN SIM
DDVP NR 96.74
Metomilo 92.64 93.74
Carbofuran 130.7 114.89
BHC 123.17 120.62
Porcentaje Disulfoton 109.52 84.8
Mparation NR 124.21
de recobro Heptacloro
Carbarilo
NR
126.43
86.73
123.47
Aldrin 141.18 115.15
(%) de los Malation 110.61 117.80
Paration 118.57 121.12
pesticidas. Endosulfan
Dieldrin
124.18
118.42
132.19
117.70
Endrin 113.10 114.14
Etion 136.20 125.76
DDT 107.41 93.10
Metoxicloro 72.31 37.19
Zolone NR 131.44
Mirex NR 91.28
Co-Ral. 198.57 135.69
Determinacin e identificacin de pesticidas en fresas.

Procedencia de la Pesticidas identificados Concentracin Concentracin

muestras SCAN(ppm) SIM (ppm)

Lote 1; Mercado - o,p-Diclorobenzofenona (D)

Xochimilco, origen: (dicofol). (D)
desconocido - Captan. (D)
- Triclosan (D)
- Endosulfan (D)
- Etion (D)
- DDT 0.381 0.449
-Metoxicloro 0.267 0.243
Lote 2; Mercado -Captan D
Xochimilco
Origen, desconocido
Lote 3; Mercado - Malation 0.459 NC
Xochimilco, origen: -Zolone 0.265 NC
desconocido
Lote 4; Mercado -Malation 0.133 NC
Xochimilco, origen: -DDT 0.077 0.065
desconocido. -Zolone 0.468 0.104
-Metoxicloro 0.086 0.030
-Etion 0.083 0.052
 Procedencia de las muestras Pesticidas Concentracin Concentracin
identificados SCAN(ppb) SIM (ppb)

Lote 5; Mercado Xochimilco, origen: - Dimetoato (D)

Desconocido.
Lote 6; Central de Abastos, origen: -Etion (D) 0.066
Irapuato Gto.
Lote 7; Central de abastos, origen, -Etion (D) 0.064
Edo. De Mxico
Lote 8; Central de abastos, origen, - Etion 0.106 0.101
Zitacuaro Michoacn - DDD (DDT) (D) 0.049
Lote 9; Central de abastos, -Etion 0.165 0.065
origen, Baja California
Lote 10; Central de abastos, - Etion 0.165 0.064
origen, Baja California - DDD (DDT) (D) 0.031
Lote 11; Central de abastos, -Carbofuran (D) 0.096
origen, Zamora, Michoacn -Metil Paration (D) 0.126
-Malation 0.148 0.159
-Paration (D) 0.169
-p,p- (D)
Diclorobenzofenona
(Dicofol). NC 0.157
-Dieldrin NC 0.093
-Endrin 0.466 0.312
-Endosulfan y
Endosulfan sulfato 0.155 0.057
-DDD (DDT) NC 0.122
-Etion (D)
- Rospan
Lote 12; Central de abastos, origen, -Etion (D) 0.102
Camal Baja California -DDD (DDT) (D) 0.050
Lote 13; Central de abastos, -Etion (D) 0.088
origen, Irapuato -DDD (DDT) (D) 0.044
Lote 14; Central de abastos, -Etion (D) 0.070