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TEMA:
EVALUACIN DE UN INOCULANTE MICROBIANO NATIVO, EN
EL PROCESO DE COMPOSTAJE DE RESIDUOS AGROPECUARIOS
FIBROSOS
AUTORAS:
MARA AUXILIADORA CONFORME LAVA
BEATRIZ ROCO VERA VERA
TUTORA
ING. CUMAND PHILCO V., MgSc.
DERECHOS DE AUTORA
Mara Auxiliadora Conforme lava y Beatriz Roco Vera Vera, declaran bajo
juramento que el trabajo aqu descrito es de nuestra autora, que no ha sido
previamente presentado para ningn grado o calificacin profesional, y que hemos
consultado las referencias bibliogrficas que se incluyen en este documento.
A travs de la presente declaracin cedemos los derechos de propiedad
intelectual a la Escuela Superior Politcnica Agropecuaria de Manab Manuel Flix
Lpez, segn lo establecido por la Ley de Propiedad Intelectual y su reglamento.
............................................................ ..........................................................
MARIA A. CONFOME LAVA BEATRIZ R. VERA VERA
iii
CERTIFICACIN DE TUTORA
................................................................
ING. CUMAND PHILCO V, Mg.Sc
iv
............................................................ .............................................................
Ing. Jorge Cevallos Bravo MgSc. Ing. Ricardo Delgado Villafuerte MgSc.
MIEMBRO MIEMBRO
...............................................................................
Ing. Carlos Villafuerte Vlez MgSc.
PRESIDENTE
v
AGRADECIMIENTO
A Dios, por bendecirnos da a da, por darnos el valor para superar cada obstculo
e iluminarnos con su sabidura para terminar con xito esta carrera.
A la Ing. Cumand Philco, tutora del trabajo, por su constante apoyo y dedicacin
personalizada, en la ejecucin de este trabajo de investigacin.
Al Ing. ngel Guzmn (Director del proyecto) por su apoyo incondicional durante el
trabajo de investigacin.
............................................................ ..........................................................
MARIA A. CONFOME LAVA BEATRIZ R. VERA VERA
vi
DEDICATORIA
A nuestros padres Ramn Conforme, Celia lava, Pedro Vera y Maribel Vera, por
ser ejemplo de superacin, responsabilidad y sacrificio lo cual nos motiv para que
nuestro sueo de ser profesional se haga realidad.
............................................................ ..........................................................
MARIA A. CONFOME LAVA BEATRIZ R. VERA VERA
vii
CONTENIDO GENERAL
CUADROS
3.1. Composicin de cada compostera..... 26
3.2. Niveles (concentracin dosis).. 26
3.3. Tratamientos.. 27
3.3.1. Descripcin de los tratamientos................................... 27
3.3.2. Anlisis de varianza... 27
4.1. Anlisis de la composicin qumica de los materiales
a compostar........ 32
GRFICOS
RESUMEN
ABSTRACT
CAPTULO I. ANTECEDENTES
En otros casos, para fertilizacin del suelo, se usa los residuos de cosechas en
forma de abono orgnico acompaado de estircoles de animales (bovinaza,
porquinaza, gallinaza, etc.) como vertido incontrolado produciendo malos olores
y al ser el ncleo de vectores de enfermedades (bacterias, virus, helmintos,
amebas), inciden en la calidad de vida del ser humano y afectan el buen vivir
(Olalde y Aguilera, 1998). El riesgo ambiental incontrolado producto de esta
prctica normalmente se subestima y en otras partes del mundo se han
encontrado bacterias coliformes y estreptococos fecales en todos los residuos de
porcinos con concentraciones bacterianas de ms de un milln por 100 ml
(Pacheco et al., 2002).
Barrena (2006) indica que una estrategia para evitar el amontonamiento de los
residuos slidos orgnicos presentes en la vida diaria, es el compostaje proceso
que consisten en la transformacin de stos, en otras sustancias aprovechables y
que aporten al suelo nutrientes (abonos de alta calidad) tiles para la agricultura
en todas sus formas, utilizando biopreparados microbianos adecuados.
Trichoderma sp. y Bacillus sp. se han considerado como especies ideales para
inculos microbianos que degraden sustancias lignocelulsicas segn Melek
(2001) ya que producen enzimas adecuadas para hidrolizar compuestos fibrosos,
constituyentes principales de muchos residuos agropecuarios. Estos microbios se
han aislado del suelo y se encuentran en conservacin en el banco de cepas del
Laboratorio de Biologa Molecular de la ESPAM MFL. No aprovechar las
oportunidades biotecnolgicas desarrolladas en esta unidad acadmica, impedira
en breve tiempo contar con un protocolo de biorremediacin tendiente a minimizar
estos residuos y al mismo tiempo aportar con materia orgnica estabilizada, para
enriquecer el suelo agrcola.
3
1.2 JUSTIFICACIN
1.3 OBJETIVOS
1.1. HIPTESIS
Pacheco (2009) expresa que la aplicacin de inculos puede ser til en los
procesos de compostaje siempre que la capacidad de los microorganismos sea la
adecuada a las caractersticas de los residuos que se vayan a tratar. La
importancia de los inculos microbianos se basa en la capacidad de acelerar
degradacin de la materia orgnica.
Para obtener una mezcla adecuada es necesario que la relacin C/N se encuentre
en el rango optimo establecida por diversos autores (25:1 - 30:1). La relacin C/N
es importante debido a que estos elementos (C/N) son utilizados por los
microorganismos para su desarrollo, y una mejor degradacin de los materiales a
compostar. La mayora de microorganismos emplean 30 partes en peso de carbn
por una de nitrgeno por, lo que la relacin 30 a 1 es lo ideal para un buen
composteo (Morn, 2012).
Soliva y Lpez (2004) expresan que la calidad el producto final se la determina por
distintas propiedades y caractersticas que debe de tener un compost estable y
maduro, por ejemplo:
Para Daz et al. (2008) unas de las propiedades fsicas ms importantes del abono
es el color (oscuro) porque absorbe ms las radiaciones solares y al momento de
ser aplicada un cultivo, la planta asimila mayor cantidad de nutrientes.
2.2.7.1. HUMEDAD
Soliva y Lpez (2004) mencionan que estos parmetros son de gran importancia
durante el proceso debido a que sufren variaciones. pH`s cidos indican
condiciones anaerobias y pH muy altos estn relacionados con el contenido de
nitrgeno amoniacal y carbonatos solubles. Sin embargo la CE tiende a elevarse
durante el proceso de compostaje, pero valores excesivamente elevados pueden
relacionarse con un mal control del proceso con materiales contaminados o con
riegos excesivos con lixiviados o con aguas salinas.
2.2.7.3. TEMPERATURA
proteica. Se considera como optima una relacin C/N entre 20:1 30:1 unidades
de carbono por una de nitrgeno (Gordillo, 2010).
2.2.9.1. ESTIRCOL
Huerto (2012) indica, que un estircol est formado por las heces de animales,
que presentan diferentes contenido de nutrientes dependiendo del origen
(equinaza, pollinaza, porquinaza, entre otros.) que aporta nutrientes, para el
desarrollo de microorganismos que favorecen la fertilidad de la tierra.
2.2.9.2. GALLINAZA
2.2.9.3. TURBA
2.2.9.6. VERMICOMPOST
2.2.9.7. EL BOCASHI
Glvez (2014) menciona, que los purines de hierbas son lquidos que se obtienen
al mezclar extractos de ciertas plantas con propiedades aleopaticas, las cuales
tienen la capacidad de prevenir la aparicion de plagas y enfermedades. Siguiendo
el mismo autor los purines son utilizados en la agricultura organica por la
necesidad de disminuir el uso de agroquimicos y preservar el ambiente.
2.2.9.10. PORQUINAZA
Para Snchez (2011), la porquinaza est compuesto por estircol y la orina del
ganado porcino, a la que se suma el material empleado como cama en la crianza
de los cerdos y el agua que se pierde de los bebederos. Este compuesto aporta
elementos como nitrgeno, fsforo, potasio y otros elementos menores; su pH es
casi neutro, idneo para mejorar la calidad de los suelos cidos, contribuyendo a
la fertilidad el mismo.
2.2.9.11. BOVINAZA
Stency (2011) describe que la bovinaza son las heces de los bovinos en estado
slido, lquido o pastoso, ya sean puras o mezcladas con la cama de aserrn,
viruta o cascarilla de arroz o con materiales higienizantes (cal agrcola y otros),
estabilizadas y manejadas de manera ambientalmente.
ser una fuente rica en slice, le otorga a los vegetales mayor resistencia al ataque
de plagas insecticidas y enfermedades.
El Ecuador no cuenta con una norma que establezca requisitos para clasificar o
categorizar un compostaje, por tal razn se ha considerado la normativa Chilena
en esta investigacin.
2.2.10.1. CLASIFICACIN
a) Compost Clase A: producto de alto nivel de calidad que cumple con las
exigencias establecidas en esta norma para el compost Clase A. Este
producto no presenta restricciones de uso, debido a que ha sido sometido a
un proceso de humificacin. Puede ser aplicado a macetas directamente y
sin necesidad que sea previamente mezclado con otros materiales.
2.2.10.2.2. HUMEDAD
Las distintas clases de compost deben cumplir con los requisitos de conductividad
electrica siguientes:
Las distintas clases de compost deben cumplir con los requisitos de relacin (C/N)
siguientes:
Las distintas clases de compost deben cumplir con los requisitos de materia
orgnica siguientes:
2.2.10.2.7. FITOTOXICIDAD
Para todas las clases de compost debe prosperar al menos el 90% de las semillas
sembradas en el compost respecto al cultivo de referencia.
21
3.1. UBICACIN
3.2. MTODO
Esta investigacin tuvo una duracin de 9 meses, desde noviembre 2014 hasta
agosto 2015.
Bromatolgicas
Microbiolgicas
Prueba de Duncan
ANOVA
Gravimetra
Termometra
Potencial de hidrogeno
Mtodo KJELDAHL (1883)
Mtodo VOLUMTRICO
Mtodo de JACKSON (1982)
3.10. PROCEDIMIENTO
La bacteria que se emple fue bacillus sp. (AO-19) la cual corresponde al banco
de cepas que dispone la Escuela Superior Politcnica Agropecuaria de Manab;
para su activacin se procedi a realizar resiembras en medio de cultivo agar
TM
nutriente (Difco ). Luego se incub por 24 horas a 37C y finalmente se verific
su viabilidad y que estuvieran puras (Santambrosio et al., 2009).
24
FACTOR EN ESTUDIO
FACTOR A
NIVEL CONCENTRACIN
CONCENTRACIN HONGOS DOSIS DE INCULO
DOSIFICACIN BACERIAS
A1 1 109 UFC/ml 1 106 UFC/ml 200ml /1m3
A2 1 109 UFC/ml 1 106 UFC/ml 300ml /1m3
A3 1 109 UFC/ml 1 106 UFC/ml 400ml /1m3
A4 (Testigo) Sin inculo Sin inculo Sin inculo
Fuente: Conforme y Vera.
TRATAMIENTOS
No CODIGO DESCRIPCIN
Total 11
Repeticiones 2
Tratamientos 3
Error experimental 6
Fuente: Conforme y Vera.
[ ]
3.10.2.10.ANLISIS MICROBIOLGICO
[ ]
[ ]
[ ]
31
16
Trchoderma longibrachatium Trchoderma harzianum Bacillus sp. UFC/ml
14 UFC/ml UFC/ml
12
10
UFC/ml
0
1
30 2
60 3
90 4
120 5 6
30 7
60 8
90 9
120 10 11
30 12
60 13
90 14
120
Tiempo (das)
Grfico 4.1. Seguimiento de los microorganismos inoculados en el proceso de compostaje con diferentes diluciones.
Al inicio del proceso (0 das) se evidenci que la cantidad de hongos que actan
en la fase inicial del compostaje fueron: Aspergillus, Rhizopus y Penicillium en
bacterias se encontr Bacillus sp. Gramnegativos (ver anexo 3) coincidiendo con
Zapata (2014) quien manifiesta que este tipo de microorganismos aparecen en
etapas iniciales de descomposicin de la materia orgnica por tener a disposicin
materiales lbiles (monosacridos, polisacridos de cadenas cortas).
4.3.1. TEMPERATURA
50
48
46
44
A1 (200ml/m)
Temperatura (C)
42
40 A2 (300ml/m)
38 A3 (400ml/m)
36 A4 (testigo)
34
32
30
28
0 1 2 3 4 5 6 7 8 15 30 45 60 75 90 105 120
Das iniciales Das finales
Tiempo (das)
Grfico 4.2. Cambios de temperatura durante el compostaje de porquinaza y cscara de man,
mostrados en dos escalas de tiempo.
4.3.2. HUMEDAD
La variacin de la humedad del compostaje durante los 120 das para los 4
tratamientos se muestra en el grfico 4.3.
36
55
53
51
49
47
45
% Humedad
43 A1 (200ml/m)
41
A2 (300ml/m)
39
37 A3 (400ml/m)
35
A4 (testigo)
33
31
29
0 1 2 3 4 5 6 7 8 15 30 45 60 75 90 105 120
Das iniciales Das finales
Tiempo (das)
El grfico 4.4 evidencia la variacin del pH del compostaje durante los 120 das
para los 4 tratamientos.
7,50
7,30
7,10
6,90
A1 (200ml/m)
pH
6,70
A2 (300ml/m)
6,50 A3 (400ml/m)
A4 (testigo)
6,30
6,10
5,90
0 1 2 3 4 5 6 7 8 15 30 45 60 75 90 105 120
Das iniciales Das finales
Tiempo (das)
(A) al compost que finalice con un pH de 7-8, y en categora B los que tengan un
pH final comprendido entre 6,5 y 8,5.
22
20
18
Fibra (%)
A1 (200ml/m)
16
A2 (300ml/m)
A3 (400ml/m)
14
A4 (testigo)
12
10
1 2
120
30 Tiempo (das)
Grfico 4.5. Anlisis del contenido de fibra en los 4 tratamientos a los 30 y 120 das
58
57
56
55
Ceniza (%)
A1 200ml/m
54
A2 300ml/m
53 A3 400ml/m
52 A4 (testigo)
51
50
1 2
30 120
Tiempo (das )
Cuadro 4.6. Anlisis del contenido de ceniza en los 4 tratamientos a los 30 y 120 das
70
d
65
60
Materia orgnica (%)
55 c
50 b
45 c Da 30
bc
Da 120
40 a
35 ab
a
30
25
A11 A22 A33 A
44
Tratamientos
Grfico 4.7. Dinmica de la materia orgnica en el proceso de compostaje en los
cuatro tratamientos.
4.3.5.2. NITRGENO
1,40
a a
1,30
1,20
b b
Nitrgeno (%)
1,10
Da 30
1,00
Da 120
0,90
a
a a
a
0,80
0,70
A11 A22 A33 A44
Tratamientos
Grfico 4.8. Contenido de nitrgeno en los cuatro tratamientos en el proceso de compostaje
en los cuatro tratamientos.
Al inicio del experimento se empez con una relacin carbono nitrgeno (C/N)
30:1 sugerida como ptima por Morn (2012). A los 120 das del compostaje se
evidenci una disminucin en la relacin C/N en todos los tratamientos (A 1, A2, A3
y A4) siendo A2 y A3 los que presentaron diferencia significativas, mostrando mayor
reduccin de esta variable con relaciones de C/N de 25:1 y 16:1 respectivamente,
como se observa en el grfico 4.6 Moreno y Moral (2011) establecen que al
finalizar el proceso de compostaje el valor ptimo de la relacin C/N debe ser 20:1,
sin embargo este valor depender de las condiciones qumicas del material,
debido a que cuando el carbono est presente en formas resistentes a la
degradacin (lignina, celulosas y hemicelulosa) esta relacin puede superar el
valor de 20:1. La norma chilena, tantas veces nombrada, categoriza en clase A al
compost que presente una relacin C/N entre 10:1 y 25:1 al finalizar el proceso de
biotransformacin, por lo que de acuerdo a este criterio sera un compost de
ptima calidad.
43
32
b b
30
d
28 c
26 b
Relacin C/N
24 ab
a
22 Da 30
Da 120
20
18
a
16
14
1 2 3 4
A1 A2 A3 A4
Tratamientos
1600
1400
1200
1000
800
600
400
200
0
A1 200ml/m A2 300ml/m A3 400ml/m A4 (testigo)
Da 30 Da 60 Da 90 Da 120
5
UFC/ml
0
A1 (200ml/m) A2 (300ml/m) A3 (400ml/m) A4 (testigo)
Tratamientos
Grfico.4.11. Anlisis microbiolgico de los cuatro tratamientos a los 120 das en dos diluciones.
46
250
225
200
175
150
125
100
75
50
25
0
A1 (200ml/m) A2 (300ml/m) A3 (400ml/m) A4 (testigo)
El grfico 4.13 muestra los ndices de germinacin (IG) para las semillas de
rbano (Raphanus sativus) sobre extractos de muestras de cuatro distintas etapas
del compostaje (30, 60, 90 y 120 das).
100
90
80
70
60
50
Fitotoxicidad (% IG)
40
30
20
10
0
Tiempo das
Grfico 4.13. ndice de germinacin de semillas de rbano a los 30, 60, 90,120 das de compostaje.
48
CONCLUSIONES
La actividad del inculo de los tratamientos con mayor dosis (A 2 y A3) fue
mejor y la materia orgnica disponible as lo demuestra. Esto indica que la
dosis adecuada para una biodegradacin efectiva, puede ser ms alta que
la considerada para este ensayo.
RECOMENDACIONES
Procurar mezclas con una adecuada relacin C/N en los materiales para
proveer a los microorganismos cantidades apropiadas de carbono y
nitrgeno para favorecer su desarrollo durante el proceso de compostaje
BIBLIOGRAFA
Bernal, M. P., Cegarra, J., Roig, A., Snchez-Monedero, M. A., & Paredes, C.
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mayo 2015. Formato PDF Disponible en: http://www.
repositorio.educacionsuperior.gob.ec/bitstream/.../t-senescyt-0148.p
59
ANEXOS
61
Materiales a utilizar:
Cscara de man:
8,75 100
4,80 x = 54,86 %
8,75 100
3,95 x = 45,14 %
TRICHODERMA TRICHODERMA
DAS TRATAMIENTOS BACILLLUS NATIVOS
LONGIBRATIUM HARZIANUM
6-A Porcentaje de Materia Orgnica - Carbono Orgnico Total - Nitrgeno y Relacin C/N a los 30 y 120
das del compostaje
TEMPERATURA
DAS A1 A2 A3 A4
0 29,00 29,00 29,00 29,00
1 48,31 48,66 47,40 48,36
2 44,61 45,62 42,26 42,03
3 38,49 44,40 39,10 37,56
4 33,99 39,69 36,21 34,33
5 34,27 38,42 35,41 34,87
6 34,39 41,53 38,02 34,30
7 36,24 37,88 38,28 37,09
8 33,41 35,14 35,64 33,70
15 33,27 34,43 34,24 33,54
30 31,09 31,47 30,83 30,82
45 32,19 32,64 31,13 31,75
60 32,77 32,80 32,22 31,84
75 32,42 32,33 32,52 32,35
90 32,71 32,52 33,22 33,35
105 32,67 32,89 33,21 32,72
120 33,17 33,04 33,06 33,03
HUMEDAD
DAS A1 A2 A3 A4
0 40 40 40 40
1 36 30 31 36
2 34 34 38 39
3 42 44 44 47
4 44 43 47 46
5 42 47 44 42
6 45 44 45 43
7 44 41 46 40
8 43 47 47 43
15 47 48 47 42
30 48 49 48 44
45 52 53 53 40
60 52 52 53 49
75 53 54 53 51
90 54 48 50 47
105 53 52 53 48
120 52 52 52 49
pH
Das A1 A2 A3 A4
0 6,44 6,44 6,44 6,44
1 6,99 7,30 6,99 7,23
2 6,89 7,13 6,93 7,07
3 6,78 7,02 6,66 6,95
4 6,58 6,52 6,59 6,51
5 6,53 6,58 6,30 6,29
6 7,21 7,24 7,23 6,51
7 6,84 7,29 6,92 6,60
8 6,44 6,96 6,83 6,24
15 6,26 6,97 6,51 5,97
30 6,00 6,14 6,11 5,95
45 6,30 6,15 6,10 5,99
60 6,72 6,45 6,35 6,25
75 7,12 6,85 6,77 6,68
90 6,90 6,76 7,07 6,81
105 7,06 6,85 7,19 6,87
120 6,94 7,00 7,12 6,98
9-A Variacin del pH en los cuatro tratamientos durante los 120 das del
compostaje
70
LONGITUD
TRATAMIENTOS DAS N DE N DE LONGITUD MEDIA DE LAS PORCENTAJE DE CRECIMIENTO INDICE DE
SEMILLAS SEMILLAS MEDIA DE LAS RAICES EN EL GERMINACIN RADICULAR GERMINACIN
EXTRACTO TESTIGO RAICES (cm) TESTIGO(cm) RELATIVO (PGR) RELATIVO(CRR) (%) (IG)
30 14 15 4,11 11,00 93 37 34
60 13 15 4,05 7,38 87 55 48
A1
90 12 15 8,00 110,00 80 80 64
120 13 15 10,95 12,34 87 89 77
30 13 15 3,81 10,32 87 37 32
60 15 15 7,00 14,14 100 50 50
A2
90 15 15 6,00 11,00 100 55 55
120 14 15 5,75 10,03 93 67 62
30 13 15 5,39 10,34 87 58 45
60 15 15 6,90 10,45 100 66 66
A3
90 15 15 8,40 11,00 100 76 76
120 15 15 10,97 13,80 100 79 79
30 14 15 4,38 9,36 93 46 42
60 14 15 6,95 8,25 93 84 72
A4
90 14 15 8,80 10,00 93 82 76
120 14 15 8,19 10,44 93 78 79
11-A Evaluacin de la sensibilidad del rbano a los compuestos fitotoxicos del compostaje.
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