Estabilidad de Medicamientos

VILLAFUERTE ROBLES L.
ESTABILIDAD DE MEDICAMENTOS
LEOPOLDO VILLAFUERTE ROBLES
Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas
INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL
MXICO
1
I. INTRODUCCIN A LA ESTABILIDAD DE LOS MEDICAMENTOS
CONTENIDO
I. INTRODUCCIN A LA ESTABILIDAD DE LOS
MEDICAMENTOS 3
II. CONCEPTOS CINTICOS 36
III. ESTABILIDAD QUMICA DE FRMACOS
103
IV. ESTABILIDAD FSICA DE FORMAS FARMACUTICAS 142
V. ESTABILIDAD MICROBIOLGICA DE MEDICAMENTOS 212
VI. MTODOS ANLITICOS PARA ESTABILIDAD
251
VII. PROGRAMAS DE ESTABILIDAD 289
APENDICE I: NORMA MEXICANA PARA LA ESTABILIDAD
DE LOS MEDICAMENTOS. I
APENDICE II. ESTADSTICA XIII
2
VILLAFUERTE ROBLES L. ESTABILIDAD DE MEDICAMENTOS
INTRODUCCIN A LA ESTABILIDAD DE LOS
MEDICAMENTOS
I. 1. Consideraciones generales 4
1. 2. Alteracin o envejecimiento de los productos
I. 3. Estudios de estabilidad 10
I. 4. El material de empaque y la estabilidad 13
I. 5. Estabilidad de otros preparados farmacuticos
19
I I. 5. 1. Estabilidad de productos fitofarmacuticos 19
I. 5. 2. Estabilidad de productos biofarmacuticos 22
I. 6. Desarrollo internacional de las pruebas de estabilidad
27
I. 6. Referencias bibliogrficas 31
3
INTRODUCCIN A LA ESTABILIDAD DE LOS MEDICAMENTOS
I. 1. Consideraciones generales
La estabilidad de las substancias farmacuticas, en las formas de
dosificacin, es muy importante desde el punto de vista industrial y legal
sanitario. Aunque los estudios de estabilidad puedan confundirse como
equivalentes con los estudios qumicos cinticos, los estudios de
estabilidad se caracterizan por desarrollarse sobre substancias menos
puras, ms complejas y ms heterogneas que las que se usaran para
estudiar la cintica de las reacciones qumicas. La variabilidad generada
por las circunstancias mencionadas implica adems la necesidad de
incluir un componente estadstico en los estudios de estabilidad, ya que
los resultados del estudio son predicciones que nos sirven para tomar
ciertas decisiones acerca del tiempo de vida til del producto, el cual
deber garantizarse para la seguridad de los consumidores, al menos
con un nivel de seguridad del 95%. La produccin industrial de
medicamentos, dados sus tiempos relativamente largos para hacer
llegar el medicamento a los consumidores, presupone el diseo y
fabricacin de formas farmacuticas que puedan conservarse tiles por
periodos de tiempo ms o menos largos. Los estudios de estabilidad
tienen como fin el comprobar esta capacidad de los medicamentos, para
almacenarse por tiempos relativamente largos, determinando tiempos o
fechas limite para un uso conveniente de ellos. Por otro lado, las pruebas
de estabilidad sirven tambin para el reconocimiento, entre diferentes
frmulas o procesos de fabricacin, de las condiciones optimas de
preparacin.
El concepto de la estabilidad de los medicamentos significa la

constancia en el contenido de principio activo y ausencia de cambios
en la presentacin de las formas farmacuticas, durante su
almacenamiento y transporte, en un empaque y condiciones de
almacenamiento determinadas, as como durante un periodo de
tiempo establecido.
Generalmente se considera que un medicamento ha caducado o que

no es adecuado para su consumo cuando una determinada fraccin de
la cantidad original de las molculas ha desaparecido. Sin embargo y de
4
manera ms amplia, la estabilidad de un medicamento significa el

mantenimiento de su calidad, definida por las especificaciones del
producto terminado, hasta el fin del periodo de vida til establecido por
el fabricante. Entendiendo por calidad su contenido en principio activo,
su pureza y sus propiedades organolpticas, fisicoqumicas y
microbiolgicas. De esta manera, los requisitos o exigencias de
estabilidad se derivaran de las especificaciones del mismo producto,
debiendo cumplirse durante y hasta el trmino de su vida til.
El desarrollo del concepto de estabilidad ha incluido tradicionalmente
la constancia de las caractersticas organolpticas de los medicamentos
(apariencia, olor, sabor) y el contenido del o de los principios activos, el
cual juega un papel de gran importancia. Sin embargo, actualmente
debe incluir tambin el examen de parmetros fisicoqumicos, en
algunos casos bioqumicos y microbiolgicos. En el caso de formas de
dosificacin o medicamentos como los de liberacin prolongada o aun
ms en los sistemas autorregulables de liberacin de frmacos, la
comprobacin o ensayo del concepto o perfil de liberacin del frmaco,
con el cual se dise el producto, podra ser ms importante que la
simple determinacin del contenido de principio activo.
En lo que se refiere al contenido del principio activo, cuando
particularmente no se ha definido de otra manera en las farmacopeas,
se refiere a que su concentracin no ha disminuido por debajo del 90%
del valor declarado en el marbete, durante y hasta el fin de su fecha de
caducidad. Este lmite en el contenido del principio activo en los
productos que se han distribuido y almacenado, hasta ser adquiridos por
los consumidores, debe ser confirmado por mtodos analticos
apropiados a estudios de estabilidad. Sin embargo, cuando el producto
esta recin preparado, esto es, al final del ciclo de fabricacin, se
considera que los limites de desviacin permitidos no deben exceder 5
%.
Desde un punto de vista prctico, el concepto de Estabilidad de
Medicamentos se entiende como el tiempo en el cual el contenido
declarado para una forma farmacutica disminuye en un 10%,
considerando este porcentaje sobre la base del principio activo ms lbil
o sensible a la degradacin. Cuando este tiempo de estabilidad se
encuentra dentro de 3 aos, deber describirse sobre el empaque la
fecha de caducidad, la cual corresponde con el tiempo al cual todava se
encuentra sin alteracin el 90% del principio activo. Para sustancias con
una actividad no muy fuerte, como para las vitaminas, se permite una
adicin extra de principio activo para compensar la falta de estabilidad
del preparado. La sobredosificacin debida a problemas de estabilidad
es la cantidad del ingrediente activo que se agrega en exceso a la
cantidad declarada, con el fin de compensar su prdida durante el
almacenamiento. Generalmente, la sobredosificacin por estabilidad no
debe exceder el 10% de la cantidad declarada. Sin embargo, en ciertos
5
casos se permiten excepciones, cuando el periodo de estabilidad es

menor de 3 aos. De esta manera se permiten sobredosis hasta de 20%
sobre el valor declarado para preparaciones slidas de Vitamina A.
Inclusive para sustancias ms activas, por ejemplo preparaciones de
Adrenalina, se permite en libros oficiales como la USP 23 una
concentracin entre 90 y 115%. La posibilidad de una sobredosis
permitir una fecha de caducidad mayor de estos productos. Sobre este
tpico, cabe decir que frecuentemente no se sabe mucho sobre la
posible toxicidad o actividad propia de los productos de degradacin, de
los productos sobredosificados, lo cual no es muy satisfactorio desde el
punto de vista de la garanta de la calidad.
Acerca de los productos de degradacin, estos debieran identificarse y
limitar su concentracin hasta donde sea posible, asegurando
particularmente que estos no contribuyan a un incremento en la
toxicidad del preparado farmacutico.
Con respecto a las propiedades organolpticas, fisicoqumicas y
microbiolgicas, se considera que la calidad del producto se mantiene s
los resultados de los estudios de estabilidad cumplen con las
especificaciones, si el producto farmacutico puede ser usado como se
encuentra indicado y si los cambios que ocurren en el producto no son
tan pronunciados que se vea afectada la aceptacin por los
consumidores.
Cuando hablamos de asegurar la calidad de un producto hasta su
fecha de caducidad, de expiracin o de vida de anaquel, conviene hacer
algunas precisiones al respecto. La fecha de caducidad final siempre
debe referirse a una zona climtica o a ciertas condiciones de
almacenamiento, particularmente de humedad y temperatura, bajo las
cuales el producto ser distribuido y almacenado. Esta fecha de
caducidad corresponde con un periodo de almacenamiento determinado,
para la forma de dosificacin seleccionada y en su presentacin o
material de empaque final. La fecha de caducidad es diferente cuando
se refiere a la fecha de caducidad de muestras para ensayos clnicos, la
cual generalmente se refiere tan solo a un lote del producto en particular
y no al producto en general. Existe adems lo que se denomina fecha de
caducidad tentativa, la cual esta basada en una prediccin obtenida bajo
condiciones exageradas de almacenamiento y no ha sido comprobada
todava por un periodo completo de almacenamiento bajo condiciones
climticas determinadas.
Se ha mencionado antes que la fecha de caducidad siempre se
encuentra asociada a una cierta condicin de clima o de
almacenamiento, de la observancia de estas condiciones de
almacenamiento depende la validez de la fecha de caducidad. Para
cierto tipo de productos, la fecha de caducidad solo puede ser
6
garantizada cuando se cumplen estas instrucciones especficas de

almacenamiento.
Una vez que un producto es abierto por el consumidor se podra
alterar la fecha de caducidad. Para ciertos productos, una vez que su
empaque primario ha sido abierto, es necesario especificar un periodo
de tiempo dentro del cual se debe hacer uso total del producto. Este se
denomina vida til o estabilidad en recipiente abierto.
Como resultado de estas circunstancias y de un nfasis hacia criterios
fisicoqumicos y bioqumicos, el desarrollo de los estudios de estabilidad
se realiza de tal manera que se pueda contestar a ciertas preguntas.
Estas preguntas debern responderse a travs de la metodologa que se
emplea en los estudios de estabilidad. (1).
Que tan precisos son los mtodos de experimentacin usados?

Que tan grandes son los cambios que ocurren en la forma farmacutica?
Que es lo que causa estos cambios?
Hasta que limite se pueden tolerar estos cambios?
En que medida se pueden predecir los cambios?
Hasta que tiempo se puede garantizar la estabilidad de los medicamentos?
I. 2. Alteracin o envejecimiento de los productos

A partir del conocimiento de que el movimiento de las partculas
debido al calor ser inexistente o cero, nicamente al alcanzar el cero
absoluto, se desprende que en cualquier sistema fisicoqumico, a
temperatura ambiente, siempre habr, en mayor o menor proporcin,
cambios rpidos que provoquen continuas alteraciones de nuestro
sistema. Bajo esta circunstancia, no se puede encontrar en la naturaleza
ningn ejemplo de estabilidad, todo se transforma, esto es, vivimos en
un estado permanente de inestabilidad en el cual el principal factor es el
tiempo. Los cambios pueden ser tan lentos como los que ocurren en las
piedras o tan rpidos como la evaporacin del ter. Por esta razn, es
importante recordar siempre el concepto de velocidad de las
transformaciones
Nuestro medio ambiente y lo que en el se encuentra, incluyendo los
medicamentos, esta influido continuamente por parmetros como la
7
temperatura, la humedad, la luz y la atmsfera (el oxigeno atmosfrico),

adems de estar influido tambin por seres vivientes capaces de inducir
transformaciones (microorganismos). Estas condiciones provocan
cambios en los medicamentos que comnmente denominamos
envejecimiento (figura I. 1). La conservacin de los medicamentos bajo
condiciones favorables para su uso, requiere del reconocimiento de este
envejecimiento y de su restriccin dentro de niveles tolerables. Lo que,
algunas veces, nos lleva al uso de medidas de proteccin o aislamiento
de este medio ambiente, a travs del uso de bajas temperaturas,
obscuridad y atmsferas inertes (2).
LUZ
TEMPERATURA
FORMA
FARMACUTICA
HUMEDAD
MICROORGANISMOS
OXIGENO
ATMOSFRICO
Figura I. 1. Factores del medio ambiente que promueven la

transformacin o envejecimiento de los productos farmacuticos.
Adems del medio ambiente existen otros factores que podran

promover el envejecimiento de los productos farmacuticos, los cuales
derivan de las interacciones entre los diferentes componentes del mismo
producto. Estas interacciones se dan entre componentes particulares o
entre el conjunto de ellos. Las interacciones se presentan entre el
principio activo y los excipientes o los materiales de empaque, entre los
excipientes mismos o entre los excipientes y los materiales de empaque
(figura I. 2).
PRINCIPIOS ACTIVOS
ENVEJECIMIENTO
8
MATERIAL DE
EMPAQUE EXCIPIENTES
ENVEJECIMIENTO
Figura I. 2. Representacin esquemtica de las interacciones entre

los componentes de un producto farmacutico terminado, que
podran inducir el envejecimiento.
Todas las reacciones y cambios mencionados pueden, a su vez, ser

influenciados por los factores de la fabricacin particular de los
diferentes lotes del mismo producto. Entre ellos tenemos el tamao del
lote, el tipo y condiciones de operacin del equipo, la secuencia de
adicin de los componentes de la frmula y los cambios en la calidad,
entre un lote y otro, de los principios activos, de los excipientes y de los
materiales de empaque, todo esto a pesar de que cada componente
halla sido analizado y aprobado por control de calidad.
Durante la vida de un medicamento este sufre manipulaciones que
tambin contribuyen a su deterioro, ya sea por paso del mismo tiempo o
por cambios en las condiciones de almacenamiento derivadas de la
fabricacin del producto, del almacenamiento en la planta farmacutica,
del transporte, del almacenamiento con el distribuidor, del
almacenamiento en el hospital o en la farmacia y finalmente por el
almacenamiento en la casa del usuario.
Durante su almacenamiento, las formas farmacuticas sufren cambios
fisicoqumicos a travs de los cuales disminuye la entalpa, esto es, la
diferencia de las entalpas libres entre los estados final e inicial (G despus y
Gantes) toma valores negativos. Tan pronto como se alcanza el equilibrio
termodinmico, esto es, cuando G = 0, el proceso se detiene,
ocurriendo entonces exclusivamente procesos reversibles (figura I. 3).
Bajo este concepto, la estabilidad de un sistema
INICIO
G
FIN
G 0 9 G 0
G = 0
Reaccin espontneaEquilibrio Reaccin inducida
Figura I. 3. Conceptos fundamentales termodinmicos para la

estabilidad e inestabilidad de los frmacos (2).
esta determinada por la posibilidad de reducir la entalpa libre. La fuerza

que impulsa los procesos espontneos es la energa libre de Gibbs. De
esta manera, estabilizar significa aproximarse a este equilibrio (2).
Para que tenga lugar una reaccin o alteracin en un sistema
determinado, la cantidad de calor emitido durante la transformacin
debe ser positiva, esto es, la reaccin debe ser exotrmica, de acuerdo a
la ecuacin de Berthelot. Si la reaccin es endotrmica es imposible o
muy raro que sta ocurra espontneamente (3).
Las alteraciones que se dan en las formas farmacuticas pueden
agruparse en tres conceptos:
1) Las alteraciones qumicas, ataen tanto a los frmacos como a

los excipientes, a pesar de que los estudios de estabilidad se
dirijan exclusivamente al contenido en principios activos. Las
alteraciones qumicas son provocadas por hidrlisis, oxidacin,
reduccin, descarboxilacin, des- y esterificacin, polimerizacin,
despolimerizacin, etc.
2) Las alteraciones fsicas, tratan sobre la resistencia mecnica de
las tabletas, el tiempo de desintegracin o disgregacin de las
tabletas, cpsulas, supositorios; polimorfismo y
seudopolimorfismo (formacin de hidratos y solvatos) y de los
correspondientes cambios de solubilidad; cambios en el estado
de agregacin por ejemplo, en mezclas eutcticas entre otros, en
la evaporacin o sublimacin de frmacos y excipientes, por
ejemplo aceites voltiles, nitroglicerina y yodoformo; cambios en
la distribucin del tamao de partculas en tabletas, ungentos,
supositorios y suspensiones; alteraciones coloidales en
soluciones, cambios de coloracin, etc.
3) Las alteraciones microbiolgicas, aqu se cuenta con las
contaminaciones microbianas, tanto de principios activos, como
de excipientes, as como tambin con alteraciones provocadas
por procesos microbiolgicos.
10
I. 3. Estudios de estabilidad
Desde un punto de vista del desarrollo de productos farmacuticos,
los estudios de estabilidad no se circunscriben exclusivamente a la
determinacin de una fecha de caducidad. Estos estudios tienen
diferentes objetivos en diferentes circunstancias, cambiando en funcin
de la etapa del desarrollo del producto mismo, evolucionando junto con
l (figura I. 4) (4, 5, 6).
PRODUCTO EN REVISIN
PRODUCTO ESTABLECIDO
PRODUCTO NUEVO
PRODUCTO PROPUESTO
FORMULACIN
PREFORMULACIN
Figura I. 4. Algunas de las etapas en que se desarrollan pruebas de

estabilidad.
Las pruebas de estabilidad en la preformulacin y sobre el principio

activo son aquellas que tienen como objetivo el proveer de evidencia
acerca de la influencia de ciertos factores sobre la estabilidad. Factores
como: temperatura, humedad, luz, oxigeno y pH. En algunos casos se
incluye adems la compatibilidad del principio activo con ciertos
excipientes. Estas pruebas incluyen el desarrollo de los mtodos de
control especficos para las mismas as como la identificacin de los
productos de degradacin que se generen. Este estudio de estabilidad
tiene tambin entre sus objetivos la determinacin de las condiciones
recomendadas para el almacenamiento de los principios activos as
como la definicin de los tiempos de re-anlisis. Aunque no
PREFORMULACIN
11
necesariamente se consideran parte del estudio de estabilidad, se

considera conveniente investigar tambin la solubilidad y el pH de una
solucin del principio activo, as como la posibilidad de la existencia de
polimorfismo.
Las pruebas de estabilidad que se llevan a cabo en la fase de
formulacin o tamizado forman parte del desarrollo farmacutico o
galnico del producto, abarcan desde los estudios preliminares y hasta
la formulacin final. Tienen como propsito fundamental apoyar la
seleccin de una formulacin ptima y determinar los factores que
afectan la estabilidad. Adems, en esta etapa se busca seleccionar el
empaque primario ms conveniente, optimizar los mtodos analticos
empleados para asegurar la calidad del producto y obtener la
informacin bsica necesaria para asegurar que las muestras empleadas
en estudios clnicos conservan su calidad durante el tiempo necesario
para llevarlos a cabo.
Los estudios de estabilidad sobre un producto propuesto (escala de
laboratorio) corresponden con estudios de estabilidad acelerados o en
condiciones exageradas. Tienen el propsito de identificar los puntos
dbiles de la formulacin, la identificacin de los parmetros que limitan
la estabilidad del producto, la identificacin de posibles problemas
durante el almacenamiento y el transporte y la definicin de una fecha
de caducidad tentativa.
Los estudios de estabilidad sobre un producto nuevo (long term) o
estudios a largo plazo se llevan a cabo usando lotes a escala piloto o
escala de produccin, se realizan con propsitos de registro. Se inician
solo despus de haber determinado un procedimiento de manufactura,
una frmula definitiva, el material de empaque primario as como los
criterios para los ensayos de control del producto. Estos estudios son
importantes porque forman el ncleo principal de todos los estudios de
estabilidad, especialmente para aquellas formas de dosificacin que no
se pueden someter rigurosamente a condiciones exageradas o
aceleradas. Estos estudios se realizan en condiciones de
almacenamiento de temperatura ambiente, la cual se determina de
acuerdo al pas donde se distribuir el producto. Para climas templados y
subtropicales se recomienda usar una temperatura de 25 C y una
humedad relativa de 60%.
Los estudios con un producto establecido en el mercado (follow up) o
estudios de seguimiento son los que tienen como fin el vigilar la
produccin regular, para determinar si la fecha de caducidad
determinada en la fase de desarrollo continua siendo valida.
Las pruebas para un producto en revisin o para examinar el efecto
de la alteracin de la produccin regular, son necesarias cuando se ha
cambiado el procedimiento de manufactura, la composicin de la
frmula o los materiales de empaque.
12
Visto de esta manera, los estudios de estabilidad de cada fase seran

complementarios, de tal manera que los estudios de una fase previa
enriqueceran las subsiguientes. A travs de este proceso los objetivos
de los estudios cambiaran, reflejndose este cambio en el diseo
experimental de las pruebas. Cabe aclarar que las fases descritas no
necesariamente se dividen en los trminos descritos sino que ms bien
se sealan como actividades a desarrollar y podrn estar en una u otra
definicin de las fases. Dependiendo esto, entre otros, de s la
informacin debe generarse experimentalmente o si esta puede
encontrarse en la literatura existente.
El desarrollo de un programa de estabilidad puede hacerse desde dos
puntos de vista, el de un programa de estabilidad formal y el de un
programa de estabilidad fundamentado en principios y orientado a los
problemas particulares de un producto (5).
Para el caso de un estudio de estabilidad formal, las investigaciones
se definen por adelantado, para cada caso en particular. La ventaja de
este procedimiento es que durante su desarrollo solo hay que trabajar
sobre la lista de actividades por desarrollar, previamente definidas, por
ejemplo a travs de una norma de estabilidad. De esta manera, los
resultados puedan ser enviados sin contratiempos a las autoridades
sanitarias, esto es, son estudios para cumplir con lo necesario para un
registro. Cuando las autoridades sanitarias establecen un programa de
estabilidad formal, estn asumiendo automticamente la
responsabilidad sobre el mismo, el farmacutico solo debe cumplir con
los requisitos establecidos. Sin embargo, tiene regularmente ciertas
desventajas, son estudios muy extensos, bajo concepciones
burocrticas. Estos programas deben ajustarse a los cambios de
actualizacin que las autoridades sanitarias determinen, a pesar de que
los estudios se hayan iniciado aos antes. La concepcin formalista
permite con cierta facilidad el ignorar los problemas de estabilidad
particulares de un producto determinado. La experiencia del
farmacutico no se usa ya que solo hay que seguir las indicaciones sin
aplicar su propio criterio.
Un programa de estabilidad basado en principios y orientado a
problemas particulares se fundamenta en principios que son decisivos
para las pruebas de estabilidad. Una vez que este tipo de programa se
ha definido, descrito y aceptado, de la misma manera se aceptan los
resultados que de l deriven. Como el programa se disea
particularmente a cierto tiempo, siempre es posible disearlo de acuerdo
al desarrollo cientfico alcanzado en ese momento. Este tipo de
programas se orienta a problemas que deben resolverse, por lo que
requiere de una participacin activa del farmacutico.
13
I. 4. El material de empaque y la estabilidad

Durante el desarrollo farmacutico se habla de los materiales de
empaque desde la fase de preformulacin, donde como resultado de los
estudios de estabilidad se hacen recomendaciones acerca de las
caractersticas de los recipientes o empaques para conservar las
materias primas o frmacos puros. Sin embargo, no es sino hasta la
fase de formulacin donde los aspectos del empaque empiezan a jugar
un papel importante en la estabilidad de las formas farmacuticas. Los
aspectos a considerar seran:
a) tipo de unidad de empaque
b) tipo de materiales del empaque
c) posibles problemas de interaccin con el contenido
En trminos generales, el empaque para productos farmacuticos
debe cumplir ciertos criterios que podran resumirse en una buena
proteccin, poca interaccin y una calidad elevada y consistente (tabla I.
1).
Tabla I. 1. Caractersticas de los materiales de empaque que

contribuyen a una mejor estabilidad de los medicamentos (8).
Caracterstica Ejemplos
a) Baja permeacin Al vapor de agua, al oxigeno y para

evitar la prdida de solventes.
b) Baja penetracin de la luz Luz ultravioleta.
c) Baja adsorcin y absorcin De frmacos, de conservadores y
de sabores.
d) Baja migracin Desde materiales de plstico, de
hule y de vidrio.
e) Mxima resistencia al ataque
f) Empaques de alta calidad Juntas que sellen bien, empaques
sin fracturas u otros defectos.
En trminos generales, se considera que las mezclas de frmacos y

excipientes, que dan lugar a las formas farmacuticas, son fsica y
qumicamente reactivas. Generalmente son afectadas negativamente
por las condiciones ambientales externas como resultado de fenmenos
14
de absorcin de vapor de agua desde una atmsfera hmeda, o por la

oxidacin causada por el oxigeno del aire y aun, por la luz que puede
conducir a reacciones fotoqumicas de descomposicin (figura I. 1). Otra
fuente de inestabilidad en estas mezclas reactivas podra ser la prdida
de solventes por desecacin, por ejemplo de soluciones, tinturas o
soluciones alcohlicas, aunque otras formulaciones como las cremas
pudieran tambin desecarse. La nica manera de lograr productos
estables, en muchos de estos casos y con estas mezclas reactivas, es
con la seleccin de un empaque primario adecuado. Un empaque que
sea capaz de proporcionar a la forma farmacutica, dentro de l mismo,
un microclima adecuado a la estabilidad.
En la seleccin de un empaque debe considerarse tambin que l
mismo es sujeto de cambios causados por las condiciones externas o
climticas, por lo que, en cualquier circunstancia, siempre debe ser
mucho ms estable que su contenido, adems de ser inerte para evitar
las interacciones con las formas farmacuticas.
Las caractersticas de los empaques obviamente no son de proteccin
absoluta, sino relativas a estndares que debemos establecer para
definirlos como inocuos y seguros. El conocimiento adquirido durante las
investigaciones bibliogrficas y de las diferentes fases del desarrollo
farmacutico, adems de la experiencia, nos permiten seleccionar un
empaque que posiblemente sea el adecuado. Sin embargo, esto debe
comprobarse. Regularmente esta comprobacin se realiza entre las
etapas de la seleccin de la frmula ms aconsejable y las pruebas a
largo plazo. En el caso de alguna inestabilidad se debern identificar las
causas y hacer los ajustes convenientes.
Entre los ejemplos de la influencia de los empaques en la estabilidad
de los medicamentos podra considerarse el efecto de la humedad. El
agua influye la estabilidad de las formas de dosificacin slida no solo
por causar reacciones de degradacin hidrolticas sino que adems
podra crear condiciones favorables para otro tipo de reacciones de
degradacin, regularmente generando un medio mas reactivo, al poner
al frmaco en solucin. En el caso del uso de empaques de burbuja o
blisters, en comparacin con frascos de vidrio, para empacar una
protena, se observa que se genera una reaccin de oxidacin al paso
del tiempo, formacin de un N-xido de amina terciaria. El efecto de
oxidacin es mucho ms pronunciado en el producto en empaque de
burbuja, en comparacin con el frasco de vidrio (figura I. 5). Esta
diferencia en la velocidad de degradacin se atribuye a una mayor
velocidad de penetracin de la humedad en los empaques de burbuja, lo
que nos demuestra como un criterio para la seleccin de un empaque
podra ser
15
2
VIDRIO
N-OXIDO FORMADO (%)
BLISTER
1.5
0.5
0
0 10 20
TIEMPO (meses)
Figura I. 5. Efecto del tipo de empaque sobre la oxidacin en una

protena, para la formacin de un N-xido, en tabletas (9).
su permeabilidad a la humedad (9). La proteccin contra la humedad

que puede ofrecer un empaque de burbuja depende del material usado
para formar la pelcula as como de su grosor.
Cuando se usan frascos de plstico para proteger un producto de la
prdida por evaporacin, de manera contraria a la proteccin contra la
absorcin de humedad, a veces es difcil distinguir s la hermeticidad
falla por defectos en las juntas de las tapas o por permeacin a travs
de las paredes del frasco. Particularmente cuando los defectos en las
juntas son microscpicos y slo pueden notarse sus efectos despus de
varios meses de almacenamiento. La prdida por evaporacin en una
solucin alcohlica en frascos de plstico, polietileno de alta densidad,
presenta una cierta variacin estadstica entre un frasco y otro, adems
de mostrar desviaciones marcadamente mayores para frascos con
defectos. La figura I. 6 muestra los valores promedio de la prdida por
evaporacin de la solucin alcohlica, cuando se almacen en
condiciones ambientales normales (10).
16
40
0
PERDIDA POR EVAPORACIN (mg)
200
0 0 40 80
0
TIEMPO (das) 0
Figura I. 6. Prdida por evaporacin de una solucin alcohlica en
frascos de polietileno de alta densidad (10).
A diferencia de los ensayos de estabilidad qumica, la evaluacin y

prediccin de la estabilidad fsica de una forma farmacutica slida no
cuenta con modelos cinticos apropiados. Particularmente importante,
dentro de las propiedades fsicas, es el perfil de disolucin de los
productos de liberacin prolongada, ya que de l depende en gran
medida el efecto teraputico de la forma de dosificacin.
En un estudio realizado con tabletas comerciales de liberacin
prolongada de teofilina (11), Theo-Dur entre otras, se encontr que la
80 300
TEOFILINA LIBERADA (mg)
60 225
40 150
20 75
0 0
0 3-56% HR 3-90% HR 3-90% HR-SIN
EMPAQUE
17
TIEMPO (aos)
Theo-Dur 100 mg Theo-Dur 300 mg

cantidad liberada de teofilina a las 8 horas disminuye apreciablemente

despus de 3 aos de almacenamiento, tanto a 56% as como a 90% de
humedad relativa (figura I. 7). Lo cual altera el efecto teraputico, al
disminuir la cantidad disponible de teofilina conforme pasa el tiempo de
almacenamiento. El efecto es ms pronunciado sin la proteccin que
otorga el empaque, por lo que se puede presumir una cierta permeacin
de la humedad a travs del empaque mismo, como fuente de esta
inestabilidad fsica.
Figura I. 7. Cantidad liberada de teofilina despus de 8 horas,
cuando se almacen a diferentes humedades relativas, despus de
3 aos.
Los polvos empacados para uso parenteral regularmente se envasan

en viales con tapones de hule. Durante su almacenamiento se ha
demostrado que ocurren inestabilidades fsicas en el preparado
farmacutico, debidas al desprendimiento de productos voltiles de los
tapones, los cuales se adsorben sobre los slidos almacenados en los
viales y son visibles cuando el polvo es reconstituido para su aplicacin.
El resultado de la adsorcin de los productos voltiles es la formacin de
soluciones turbias, las cuales podran causar la no-aceptacin por parte
del consumidor o problemas de inestabilidad qumica y aun de toxicidad.
Se ha encontrado que la adsorcin de tales componentes voltiles es
funcin de la superficie especifica de los polvos con los que
interaccionan, como se puede apreciar en la tabla I. 2, tomando como
referencia diferentes antibiticos (12). El desprendimiento de los
compuestos voltiles desde los tapones puede ser prevenido con un
recubrimiento de Teflon sobre el lado del tapn que queda hacia el
producto. El mecanismo de formacin de la turbidez en los inyectables
sera: Desprendimiento desde los tapones de productos voltiles
hidrfobos, formacin de una fina capa sobre los polvos contenidos en el
vial y finalmente, despus de la reconstitucin de los polvos, la
formacin de turbidez por la dispersin de la capa depositada, la cual se
dispersa formando gotas de tamao coloidal
Tabla I. 2. Correlacin entre la superficie especfica de polvos y su

tendencia hacia la formacin de turbidez, despus de su exposicin
a tapones de hule de clorobutilo (12).
Antibitico Preparacin Superficie esp. Turbidez

(m2/g) (FTU)
Apalcilina sdica liofilizada 0.16 62
18
Mezlocilina sdica polvo 5.6 49 6

Cefotaxima sdica polvo 9.0 58 10
Cefodixima sdica polvo >100 96 12
I. 5. Estabilidad de otros preparados farmacuticos
I. 5. 1. Estabilidad de productos fitofarmacuticos

El establecimiento de la estabilidad de un producto farmacutico, de
acuerdo a los lineamientos de la Comunidad Europea, debe incluir
estudios de estabilidad descritos de tal manera que permitan deducir la
fecha de caducidad. En el caso de la presencia de productos de
degradacin que pudieran ser peligrosos, debe establecerse un mtodo
para su evaluacin, adems de establecer lmites aceptables para la
presencia de tales productos de degradacin. En todos los casos en que
exista un posible riesgo de interaccin entre el envase y el
medicamento, particularmente en el caso de inyectables y aerosoles, se
debe hacer una descripcin de tales interacciones. Del total de los
resultados del estudio, debe ser posible establecer una conclusin
acerca de la duracin del periodo de estabilidad y de la necesidad de
medidas de proteccin aplicables durante el almacenamiento. La
duracin del estudio de estabilidad depender de la fecha de caducidad
que se solicite a las autoridades sanitarias, Regularmente se hace uso
de la regla de la mitad del tiempo, esto es, si se solicita una fecha de
caducidad de por ejemplo 3 aos, esta podra otorgarse si se presentan
estudios a largo plazo de unos 18 meses, siempre y cuando los
resultados obtenidos permitan justificar la fecha de caducidad
mencionada.
Las condiciones exigidas para la estabilidad de un producto
farmacutico, antes mencionadas, nos permiten observar lo difcil que
sera para un producto fitofarmacutico l poder cumplirlas, por lo que
se hace necesario algn ajuste en las exigencias hasta en tanto el
desarrollo cientfico y tecnolgico no permitan otra cosa. Esta
circunstancia se deriva tambin del hecho de que no se puede esperar
una identidad absoluta de las substancias entre una planta y otra, o aun
entre un lote y otro. Las pruebas para asegurar la calidad y su
reproducibilidad deben tomar en cuenta estas realidades. Sin embargo,
esto no evita que se deban tomar todas las medidas necesarias para
asegurar, en la medida de lo posible, la homogeneidad del material, aun
dentro del intervalo de las variaciones naturales. Esta sera la nica
manera en que un producto fitofarmacutico podra tener una calidad
reproducible que garantice un efecto teraputico consistente.
19
El equivalente de un frmaco, como materia prima, en productos

fitofarmacuticos sera el de una droga cruda. sta se considera, en su
conjunto, como un constituyente activo en un preparado farmacutico,
de tal manera que la separacin de una droga cruda en componentes
activos, coefectores y substancias indiferentes no sera de gran
importancia para este tipo de productos. Esta definicin permite
considerar como drogas crudas no solo aquellos productos en los que se
conoce las substancias que le dan actividad, sino tambin aquellas en
que stas no estn bien definidas pero en las cuales se ha demostrado
su efectividad.
Para la discusin acerca de las drogas crudas, cabe hacer la
aclaracin de que no porque una droga cruda posea baja potencia esto
signifique ensayos o controles limitados. Si se considera que un
preparado farmacutico debe ser siempre confiable, un nmero inferior
de ensayos o controles de calidad no es aceptable.
Los estudios de estabilidad de una droga cruda parten del supuesto
que el principio que determina la actividad comprende una mezcla de
componentes, de tal manera que las investigaciones de estabilidad
deben establecer que la cantidad total de los componentes de ese grupo
vara siempre dentro de las especificaciones, por ejemplo, la
concentracin no es menor del 90% del valor terico o menor de un
mnimo que establezca, por ejemplo, una farmacopea. De igual manera,
se debe demostrar que los componentes de la mezcla que conforman el
grupo activo no se alteran de manera importante. La importancia de
esta alteracin depende del producto, por ejemplo, no se considera de
igual importancia la degradacin de un componente menor de un aceite
etreo, que la ruptura de un glicsido en un aglicon y su azcar. La
documentacin de las pruebas deber acompaarse regularmente de
cromatogramas, espectros u otros documentos que permitan establecer
el desarrollo de cualquier inestabilidad, tomando como referencia los
resultados iniciales del lote en cuestin. Los cambios ocurridos deben
considerarse qumicamente y adems en trminos del efecto
teraputico. Los cambios ocurridos podran dar por resultado relaciones
farmacocinticas diferentes, adems de que una degradacin qumica
dara propiedades muy diferentes, por ejemplo entre un aglicon y su
correspondiente glicsido.
En los productos fitofarmcuticos no solo debe darse seguimiento a
las substancias reconocidas como activas sino que tambin debe
vigilarse la constancia de los otros componentes de la droga cruda o sus
preparaciones. Aunque esto no se puede hacer de manera absoluta, es
posible hacer observaciones, por ejemplo sobre cromatogramas, de las
diferentes fracciones polares. La relevancia de los cambios ocurridos
deber valorarse y observarse tambin en trminos del cambio de
caractersticas fisicoqumicas como la solubilidad, la apariencia, el pH,
etc. Cuando no se conocen las substancias activas, quiz se podran usar
20
como referencia para la evaluacin, la composicin global de la droga,

considerndola como una huella dactilar (13).
Los estudios de estabilidad de mezclas de drogas crudas o algn otro
tipo de preparado son similares a los descritos, aunque su complejidad
es mayor y por lo tanto las predicciones de estabilidad que se hagan son
mas limitadas. Para estos estudios, dada su complejidad, juegan un
papel importante las caractersticas organolpticas, particularmente
cuando no se conocen las substancias activas. Aunque debe reconocerse
que para tener validez deben tenerse criterios objetivos, quiz tomando
algunos de ellos del rea de los alimentos.
Cuando no se puedan llevar a cabo controles cualitativos y
cuantitativos, se podra establecer una fecha de caducidad mxima de
un ao, con controles fsicos y sensoriales, si se garantiza una seleccin
adecuada de las materias primas y si se cuenta con mtodos de
fabricacin validados
Cuando se examina un producto fitofarmacutico, en realidad
estamos tratando con un producto que consiste de varios componentes
activos y una multitud de excipientes, de los cuales al menos algunos
estn involucrados en la eficacia del producto. Solo con mayor
investigacin podr determinarse en que medida estn involucrados.
Un ejemplo de los estudios de estabilidad de productos
fitofarmacuticos es el de las formulaciones del extracto de Centella
asitica (14). Se reconocen como principios activos el cido asitico, el
asiaticsido, el cido madecsico y el madecassido, los cuales son
conocidos por sus efectos teraputicos en casos de varices y para sanar
heridas. Las formas farmacuticas estudiadas fueron grageas y cremas,
las cuales se almacenaron durante 12 meses, bajo diferentes
condiciones de humedad y temperatura. Las evaluaciones se llevaron a
cabo por cromatografa de lquidos de alta resolucin con gradiente en
fase reversa.
Como se puede observar en la figura I. 8, el contenido del conjunto de

substancias activas de la crema de centella Asitica disminuye
fuertemente despus de un ao de almacenamiento a 40 C. El
contenido final en los 3 lotes, referido al contenido inicial, fue de 81.4%,
68.0% y 56.5% respectivamente. Los porcentajes del contenido a
temperatura ambiente en la India (30 C) fueron de 84.5%, 75.2% y
70.9%. Unicamente a 25 C se obtuvieron concentraciones superiores al
90% del contenido original, en uno solo de los 3 lotes de la crema
(85.5%, 100% y sin registro), despus de un ao de almacenamiento.
Aunque el lmite inferior de la concentracin de substancias activas no
necesariamente deba ser 90%, ya que eso dependera del efecto
teraputico, es clara la baja estabilidad de este tipo de preparados
21
fitofarmacuticos. Por otro lado, es de observarse la gran disparidad que

presentan estos lotes en el contenido inicial de substancias activas,
referido al total de la crema, 0.97%, 1.53% y 1.31%, lo que hara ms
difcil aun l poder garantizar un efecto teraputico consistente.
Lote 1
1.5
lote 2
Lote 3
CONTENIDO TOTAL (%)
1.1
0.7
0 3 6 9 12
TIEMPO (meses)
Figura I. 8. Perfil de degradacin del total de substancias activas de

3 lotes de crema de Centella Asitica a 40 C.
En el caso de las grageas la situacin no fue diferente, los contenidos

finales despus de un ao de almacenamiento a una temperatura de 30
C, referidos al contenido inicial, fueron de 74.36%, 55.5% y 56.7%, para
3 diferentes lotes. Los contenidos iniciales en las grageas tambin
fueron muy dispares, 4.21%, 5.06% y 4.80%.
I. 5. 2. Estabilidad de productos biofarmacuticos

Con el advenimiento de la biotecnologa, se espera que en el futuro
las protenas y pptidos sern la mayor fuente de obtencin de
frmacos. Actualmente se usan en medicina protenas derivadas del
DNA-recombinante y anticuerpos monoclonales. Se usan contra
desordenes endocrinos, enfermedades cardiovasculares, cncer,
enfermedades vrales, para transplantes de rganos, desordenes
inmunolgicos, como antdotos, entre otros usos. Adems de usarse
como agentes teraputicos, las protenas se usan como vacunas,
transportadores de frmacos y elementos para el diagnostico. Este
22
desarrollo ha sido posible gracias a que el progreso de la tecnologa ha

permitido la fabricacin de cantidades muy grandes de protenas
complejas que se usan como frmacos. Obtenindose productos de gran
pureza y calidad, lo cual no era posible hace algunos aos o
definitivamente demasiado costoso y difcil de producir, o que solo se
poda aislar desde productos naturales, lo que involucraba muchos
riesgos para la seguridad del producto.
La estructura y funcin de las protenas se determina a travs de su
secuencia de aminocidos o estructura peptdica (estructura primaria).
El doblez o forma de esta estructura peptdica en un alfahelice, una hoja
o una espiral al azar, depende de la secuencia e interaccin de los
residuos aminocidos, de sus enlaces disulfuro y puentes de hidrogeno,
entre otros, y se denomina estructura secundaria. La estructura
tridimensional o estructura terciaria de una protena depende de la
orientacin de los aminocidos y de su relacin en las regiones
helicoidales. En algunas ocasiones subunidades de protena, que no se
unen covalentemente, se agrupan para formar complejos proteicos o
estructuras cuaternarias.
La estabilidad de las protenas se considera que sea inferior a la de
otros frmacos qumicamente bien definidos. Existen mltiples vas de
degradacin para las protenas. La tabla I. 3 muestra algunas de las vas
a travs de las cuales se podra afectar a un compuesto formado por una
cadena de diferentes aminocidos.
Los enlaces amida que unen a los aminocidos podran sufrir una
hidrlisis, lo cual cortara la protena en fragmentos. Varios aminocidos
en la cadena proteica tambin son susceptibles de modificaciones
qumicas. La asparagina y la glutamina pueden perder sus grupos -
amino, dando por resultado residuos de cido asprtico y cido
glutmico respectivamente. La metionina puede oxidarse a su derivado
sulfxido. La cistena puede sufrir un rearreglo intramolecular
(transposicin de enlaces disulfuro) o un rearreglo intermolecular
(formacin de oligmeros). Interacciones hidrfobas entre molculas de
protenas pueden conducir a enlazamientos no covalentes (agregacin)
y a enlaces covalentes (enlazamiento transversal). La perturbacin de la
estructura tridimensional de las protenas conduce a una
desnaturalizacin, la cual puede ser reversible o no (15).
Tabla I. 3. Posibles vas de degradacin de protenas y polipptidos

usados como frmacos (15).
Fragmentacin H2N..Lis Ala..COOH H2N..Lis + Ala..COOH
23
Deaminacin H2N..Asn..COOH H2N..Asn..COOH + NH3

O
Oxidacin H2N..Met..COOH H2N..Met..COOH
Transposicin de enlaces disulfuro
H2N..Cys..Cys..Cys..COOH H2N..Cys..Cys..Cys..COOH
H2N..Cys..Cys..Cys..COOH
Oligomerizacin
n (H2N..Cys..Cys..COOH) H2N..Cys..Cys..COOH
H2N..Cys..Cys..COOH
Agregacin
n (H2N....COOH) (H2N....COOH) n
Enlazamiento transversal
n (H2N....COOH) H2N....COOH
H2N....COOH
Desnaturalizacin
NH2 H2N
COOH COOH
La complejidad y la estructura de las protenas tambin pueden

influenciarse por procesos de glicosilacin y alquilacin. La glicosilacin
puede influir sobre la solubilidad de las protenas, su actividad biolgica
o su farmacocintica.
Las especificaciones de control de calidad as como las pruebas de
estabilidad deben cubrir varias caractersticas de las protenas, tales
como su tamao, identidad, estructura, secuencia, concentracin,
pureza, carga superficial, forma y actividad. Esto implica una gran
variedad de mtodos analticos que, en suma, den informacin acerca
de su integridad estructural y consistencia, de su eficacia, pureza y
seguridad desde el punto de vista biolgico-farmacutico.
24
La complejidad y tamao de los frmacos proteicos implica que se

deban usar mtodos analticos muy diferentes, para poder
caracterizarlos y para describir las propiedades que indiquen su
estabilidad, lo cual solo puede lograrse con programas de estabilidad
muy extensos. Algunos de los mtodos que podran usarse se enlistan
en la tabla I. 4.
Tabla I. 4. Algunos mtodos de ensayo indicativos de la estabilidad

de protenas recombinantes (15).
Mtodo Cambio detectable
* Electroforesis en gel dodecilsulfato Fragmentacin, enlazamiento transversal,

de sodio-poliacrilamida. oligomerizacin.
* Cromatografa de lquidos de alta Deaminacin, enlazamiento transversal,
resolucin en fase reversa. oxidacin de metionina, transposicin de
disulfuros.
* Cromatografa de alta resolucin Fragmentacin y agregacin.
de exclusin por tamao.
* Enfocamiento isoelctrico. Deaminacin, determinacin de potencia y
transposicin de enlaces disulfuro.
Otros mtodos incluyen el bioensayo in vitro e in vivo y la

determinacin de sitios especficos de enlazamiento, para determinar
actividad. Los rayos X podran usarse para la determinacin de la forma
de las protenas. Adems son utilizados mtodos como el mapeo y
secuenciacin de aminocidos, el anlisis de carbohidratos y otros varios
mas (16).
Un ejemplo de la determinacin de la estabilidad de una protena
recombinante es el del factor de necrosis de tumores (TNF), el cual fue
estudiado en una formulacin lquida que se conserv en refrigeracin,
entre 2 C y 8 C (15). Cuando se determin el TNF por electroforesis en
gel de dodecilsulfato de sodio-poliacrilamida (SDS-PAGE), corrido bajo
condiciones de reduccin y no-reduccin, el producto pareca ser estable
por un ao (figura I. 9). Sin embargo, utilizando el mtodo para
determinar su potencia, determinada con bioensayo de citotoxicidad, se
observ una prdida de la mitad de la potencia original en ese mismo
ao. Por el mtodo de enfocamiento isolectrico se pudo determinar que
25
el producto sufra deaminacin durante el almacenamiento, lo cual no

pudo ser detectado por el mtodo de electroforesis en gel (SDS-PAGE).
Es de notarse que para cada protena se requiere usar una combinacin
de mtodos de ensayo particular, para poder evaluar con mayor
certidumbre su estabilidad.
POTENCIA (%) PUREZA DE LA PROTEINA (SDS-PAGE)(% de monmero)
100
PORCENTAJE
80
60
40
0 4 8 12
TIEMPO (meses)
Figura I. 9. Estabilidad del factor de necrosis de tumor

recombinante, en una formulacin lquida, almacenada entre
2 C y 8 C.
La estabilidad de los factores de crecimiento de fibroblastos como el

bFGF, como otro ejemplo, es susceptible a la desnaturalizacin. Se ha
buscado estabilizarles con ligandos sulfatados y con ajustes del pH,
utilizando el anlisis calorimtrico diferencial de barrido y la
espectrocopa de fluorescencia como verificacin (17).
El efecto del pH sobre la desnaturalizacin trmica de bFGF se llev a
cabo en un sistema amortiguador de fosfato-citrato-borato, tomando
como referencia de la desnaturalizacin de la protena recombinante el
pico de una endoterma en el termograma o temperatura de transicin.
Los resultados muestran un incremento en la temperatura de
desnaturalizacin o estabilizacin del producto, conforme se increment
el pH, alcanzando un mximo a un pH entre 7 y 9, despus de lo cual la
temperatura vuelve a decaer (figura I. 10). La desnaturalizacin de la
protena fue observada como un corrimiento en la emisin de
fluorescencia de 307 nm a 342 nm.
26
Figura I. 10. Efecto del pH sobre la temperatura de transicin de la
70
TEMPT. TRANSICIN ( o C)
60
50
40
4 6 8 10 12
pH
protena recombinante bFGF, en amortiguador de fosfatos-citratos-

boratos (17).
Una caracterizacin adecuada de las protenas es la base para los

estudios de estabilidad, adems del nfasis necesario en la
homogeneidad de la preparacin y la consistencia entre lote y lote. Esta
consistencia se asegura con la validacin y adecuado control de los
procesos de produccin biotecnolgicos. Debido a la complejidad de la
manufactura, la calidad de los productos biofarmacuticos estar
siempre ligada a los procesos de produccin. Procedimientos de
operacin bien definidos, gran cantidad de controles en proceso y el
establecimiento de lmites de control a los procesos crticos as como
una buena documentacin, permitirn productos ms estables y de
mejor calidad.
Despus de la etapa de escalamiento de la forma farmacutica de
estos productos de origen biolgico, se recomienda hacer 3 lotes a
escala de produccin para examinar la consistencia de los procesos, los
cuales se debern mostrar como confiables y reproducibles. El producto
final de estos 3 lotes de prueba, a escala de produccin, deber
someterse a pruebas de estabilidad para definir la fecha de caducidad
del producto.
I. 6. Desarrollo internacional de las pruebas de estabilidad

En los estudios de estabilidad cabe diferenciar los estudios que tienen
como fin el conocimiento del comportamiento de las substancias y
27
sistemas farmacuticos y aquellos con fines de registro ante las

autoridades sanitarias. En el primer caso, el fin es la prediccin de una
fecha de caducidad bajo diferentes condiciones de almacenamiento as
como la exploracin de las causas de las inestabilidades y las posibles
maneras de estabilizacin. El segundo tipo de estudios tiene como fin el
registro de un producto el cual satisface las exigencias sanitarias
mnimas establecidas por la legislacin de cada pas.
Las exigencias sanitarias tradicionalmente han sido muy particulares
en cada pas, regularmente diferentes a las de otros pases. Sin
embargo, en los ltimos aos se ha desarrollado un concepto de
armonizacin de las exigencias legales para el registro de los
medicamentos, con el fin de que los estudios que se hagan tengan
validez internacional. Un ejemplo de este tipo es el acuerdo logrado por
la Comunidad Europea, los Estados Unidos y Japn acerca de las pruebas
de estabilidad de los medicamentos. El acuerdo se realiz en 1993,
considerndose en vigor desde el primero de enero de 1998. A pesar de
que el acuerdo inicial sea entre los pases mencionados, parece haber
voluntad de otros pases para unirse al mismo.
Este acuerdo se encuentra plasmado en lineamientos muy generales
(18, 19), de los cuales haremos mencin. Estos lineamientos cubren en
principio lo que se conoce como las zonas climticas I y II, las cuales
prevalecen en los pases que les acordaron. La definicin de las zonas
climticas del planeta incluye tambin las zonas III y IV. Estas zonas se
describen en la tabla I. 5.
En estos lineamientos se trata de cubrir las caractersticas
fundamentales o el ncleo de los estudios de estabilidad tanto de
frmacos como de formas farmacuticas. Se puede decir, en trminos
generales, que el objetivo de los estudios de estabilidad es el de proveer
evidencia acerca de como cambia la calidad de los frmacos y los
medicamentos conforme transcurre el tiempo, bajo la influencia de
factores ambientales como la temperatura, la humedad y la luz. Se
espera obtener de ellos las condiciones recomendadas para el
almacenamiento, los periodos de re-anlisis y las fechas de caducidad.
Estos lineamientos se refieren a los requisitos para el registro de
frmacos nuevos y las formas farmacuticas de los mismos. No cubren
los requisitos abreviados para la solicitud de registro de variaciones en la
formulacin o procesos ni los de la solicitud para muestras de ensayos
clnicos, entre otros.
Tabla I. 5. Definicin de zonas climticas en que se puede dividir la

tierra, como condiciones de almacenamiento para los medicamentos
(19).
28
Zona climtica Definicin condiciones de almacenamiento
I Clima templado 21 C y 45% HR

II Clima subtropical y 25 C y 60% HR
mediterrneo
III Clima clido y seco 30 C y 35% HR
IV Clima clido y hmedo 30 C y 70% HR
En el caso de los estudios aplicables a frmacos, se iniciara con un

solo lote de fabricacin, para determinar la estabilidad intrnseca de la
molcula. Las condiciones de almacenamiento sern tales que incluyan
el efecto de la temperatura en condiciones de incrementos de 10 C
sobre las condiciones de almacenamiento consideradas como aceleradas
(40 C), esto es 50 C y 60 C.
La informacin de estabilidad requerida posteriormente incluye
estudios acelerados y a largo plazo (long-term) en cuando menos 3
diferentes lotes de fabricacin del frmaco, fabricados cuando menos a
escala piloto.
Los 3 primeros lotes que se fabriquen a escala de produccin,
despus de haber sido aprobado el producto, debern someterse a
estudios de estabilidad a largo plazo.
Debern sealarse los criterios de prueba establecidos para el estudio
de estabilidad. Los mtodos analticos debern ser especficos para
estabilidad y estarn validados. Las repeticiones que se hagan de los
ensayos sern dependientes de la desviacin estndar relativa (RSD) del
mtodo.
La duracin de los estudios y las condiciones de almacenamiento
debern ser suficientes para cubrir el almacenamiento, el transporte y el
uso que se haga del producto. Estas condiciones seran, para la zona II:
Pruebas a largo plazo: 25 C 2 C y 60% HR 5%

Pruebas aceleradas: 40 C 2 C y 75% HR 5%
El protocolo del estudio a largo plazo (tabla I. 6) cubrir al menos 12

meses al momento de la peticin de registro. Los recipientes usados en
el estudio debern corresponder o ser similares a los que se usen
actualmente para su distribucin y almacenamiento. A partir de los
29
datos obtenidos en el estudio se determinar la fecha de re-anlisis o de

reconsideracin de la aprobacin de la materia prima.
Tabla I. 6. Programa de estabilidad para un frmaco, de acuerdo a

las exigencias de la Comunidad Europea (19).
Temp. H. Rel. Duracin del almacenamiento e intervalos de

ensayo
( C ) (%) ( Meses )
0 3 6 9 12 18 24 36 48 60
25 60 X X X X X X X X X X
40 75 X X
Una manera apropiada para cuantificar la transformacin de ciertas

caractersticas del frmaco, al paso del tiempo, es la determinacin del
punto en el tiempo al cual la curva del limite inferior del intervalo de
confianza al 95%, de la curva de degradacin promedio o curva de
regresin del frmaco, intercepta o cruza el limite inferior de la
especificacin del parmetro del que se trate, por ejemplo, el contenido
de principio activo.
En algunos casos, los resultados muestran una degradacin tan
pequea y con una variabilidad muy pequea tambin, que podra
considerarse innecesaria una justificacin estadstica del perodo o fecha
de re-anlisis establecido, sin embargo, deber explicarse claramente
esta situacin a las autoridades correspondientes. El periodo de re-
anlisis es el espacio de tiempo dentro del cual se considera que el
frmaco esta dentro de las especificaciones establecidas para controlar
su calidad, esto es, las especificaciones que usa control de calidad para
liberarlo como aprobado.
Los estudios para medicamentos o formas farmacuticas,
tambin conocidos como producto terminado, consideran un diseo del
programa de estabilidad basado en los conocimientos ganados acerca
30
del comportamiento y propiedades del frmaco, adems de la

experiencia ganada en los estudios de formulacin de las muestras para
estudios clnicos.
La informacin generada por estos estudios (acelerados y a largo
plazo) deber corresponder cuando menos a 3 diferentes lotes, de los
cuales al menos 2 debern ser obtenidos de una escala de planta piloto.
El tercero podra ser un lote ms pequeo, por ejemplo, 25 000 a 50 000
tabletas o cpsulas, en el caso de un producto slido.
Los primeros 3 lotes fabricados despus de que el producto fue
aprobado debern ser sujetos de estudios de estabilidad acelerados y a
largo plazo.
Los estudios de estabilidad debern incluir todos los criterios o
parmetros que podran cambiar durante el almacenamiento y que de
esta manera influiran la calidad, la seguridad y la eficacia del
medicamento. Los mtodos de anlisis debern ser indicativos de la
estabilidad y estar validados. La cantidad de replicas o repeticiones que
deban hacerse depender de la desviacin estndar relativa (RSD) de
los mtodos de anlisis.
Los requisitos a cumplir por una forma farmacutica, en las
condiciones de almacenamiento, son los mismos que para un frmaco.
En el caso en que se produjera un cambio significativo durante el estudio
en condiciones de aceleracin, por ejemplo resultados por debajo del
mnimo aceptable para la fecha de caducidad, se debern hacer
estudios adicionales, por ejemplo a 30 C 2 C y 60% HR 5% (tabla I.
7).
El protocolo del estudio seala que las pruebas debern hacerse en el
empaque final que se propone para la comercializacin del producto. La
fecha de caducidad y las instrucciones de almacenamiento que se
establezcan en las etiquetas y empaques debern ser aplicables a todos
y cada uno de los lotes que se fabriquen y empaquen en circunstancias
similares. Todos los datos debern permanecer validos durante el
intervalo especificado para la fecha de caducidad. La naturaleza de la
relacin o forma en que se degrade el producto determinar la
necesidad de la transformacin de los datos, antes de llevar a cabo un
anlisis por regresin lineal.
Algunas definiciones que ya se han mencionado y otras mas se
enlistan enseguida con fines de aclaracin de los trminos usados en los
prrafos anteriores (18).
Pruebas aceleradas. Son los estudios designados para aumentar la
degradacin qumica o el cambio fsico en un frmaco o forma
farmacutica, usando condiciones de almacenamiento exageradas.
Tienen como fin el visualizar los posibles efectos qumicos a largo plazo
31
y los efectos de tiempos de exposicin cortos a condiciones climticas

extremas (transporte).
Tabla I. 7. Programa de estabilidad para un frmaco, de acuerdo a

las exigencias de la Comunidad Europea (19).
Temp. H. Rel. Duracin del almacenamiento e intervalos de

ensayo
( C ) (%) ( Meses )
0 3 6 9 12 18 24 36 48 60
30* 60* X X X X
40 75 X X
* Solo cuando se presenten cambios significativos a 40C.
Bracketing (simplificacin o reduccin del nmero de

ensayos). Significa que a cualquier tiempo, dentro de los programas de
estabilidad de un producto determinado, se reduzca el anlisis a solo las
muestras de caractersticas extremas de tamao de los envases y/o de
concentracin o potencia. Se parte del supuesto que la estabilidad de las
muestras de condiciones intermedias ser similar a aquellas de los
extremos.
Zonas climticas. Es la divisin del mundo en zonas, basados en la
definicin de las condiciones del clima que prevalecen durante el ao.
Forma de dosificacin, preparado, producto o forma
farmacutica y medicamento. Es un producto farmacutico (tabletas,
cpsulas, solucin, crema, etc.) que contiene un frmaco y
generalmente pero no necesariamente, excipientes.
Producto terminado. La forma de dosificacin dentro del envase o
empaque primario en que se comercializara.
32
Excipiente. Cualquier cosa diferente del frmaco en una forma

farmacutica.
Fecha de caducidad o de expiracin. La fecha colocada en el
recipiente o etiqueta de un producto farmacutico que designa el tiempo
durante el cual se espera que un lote de un producto se conserve dentro
de las especificaciones que le fueron autorizadas, cuando se almacena
bajo condiciones definidas. Despus de esta fecha el producto no deber
ser usado.
Estudios formales o sistemticos. Son aquellos que se emprenden
antes del registro de un producto y que cumplen con los principios de
estos lineamientos.
Pruebas a largo plazo o en condiciones reales. Evaluacin de
estabilidad qumica, fsica, biolgica y microbiolgica de un producto
farmacutico o sustancia farmacutica, que cubre el tiempo esperado
por una fecha de caducidad o periodo de re-anlisis.
Balance de masa o de materiales. Es el proceso de sumar el
resultado del ensayo del frmaco con el de los productos de
degradacin, para ver que tan cerca se encuentran del 100% del
contenido inicial, con la debida consideracin de los mrgenes de
precisin analtica.
Matrixing (Formacin de matrices). Diseo estadstico de los
programas de estabilidad que permite que solo una fraccin de total de
muestras sea analizada a cualquier tiempo o fecha de muestreo. A
cualquier otro tiempo de muestreo se podr usar una seleccin diferente
del total de las muestras por analizar. El diseo supone que la
estabilidad de las muestras analizadas representa la estabilidad del total
de las muestras. Las diferencias en las muestras para un mismo
producto farmacutico debern estar identificadas como para cubrir
diferentes lotes, diferentes concentraciones de frmaco, diferentes
tamaos de un mismo sistema recipiente/tapa. Para hacer esto se
deber consultar primero con las autoridades correspondientes.
Temperatura cintica media. Es la temperatura media del
ambiente calculada con la ecuacin de J. D. Haynes (J. Pharm. Sci. 60,
927-929, 1971). Es mayor que la temperatura media aritmtica y
considera la ecuacin de Arrhenius, de la cual Heynes deriv la suya.
Sustancia activa nueva o entidad molecular nueva. Sustancia
que no ha sido aun registrada como un nuevo frmaco, ante las
autoridades correspondientes.
Escala de planta piloto. Fabricacin de frmacos o formas
farmacuticas por un proceso totalmente representativo y que simule al
aplicado en la escala o produccin industrial. Para slidos debe ser de un
dcimo del lote de produccin o 100 000 tabletas o cpsulas (18).
33
Datos de estabilidad primarios. Datos sobre un frmaco

almacenado en un envase propuesto y bajo condiciones de
almacenamiento que permitan apoyar una fecha de re-anlisis. Datos
sobre un producto farmacutico almacenado en un sistema envase/tapa
en que se comercializar y bajo condiciones de almacenamiento que
permitan apoyar una fecha de caducidad.
Fecha de re-anlisis. Fecha a la cual las muestras de un frmaco
debern ser examinadas nuevamente, para asegurar que el material se
encuentra adecuado para su uso.
Perodo de re-anlisis. Perodo de tiempo durante el cual se
considera que el frmaco permanece dentro de especificaciones y por
ello en condiciones aceptables para usarse en la manufactura de un
producto farmacutico, siempre y cuando se haya almacenado bajo las
condiciones definidas. Despus de ese perodo el lote de frmaco deber
ser analizado para ver si cumple con las especificaciones para poder ser
usado inmediatamente.
Periodo de expiracin o caducidad. Intervalo de tiempo en el que
se espera que un producto farmacutico se mantenga dentro de las
especificaciones, considerando que ha sido almacenado bajo las
condiciones definidas en la etiqueta y en el sistema de envase/tapa
propuesto.
Especificaciones de liberacin. Combinacin de las pruebas
fsicas, qumicas, biolgicas y microbiolgicas requeridas para
determinar si un producto farmacutico es adecuado para ser liberado,
al trmino de su manufactura.
Especificaciones de caducidad. Combinacin de las pruebas
fsicas, qumicas, biolgicas y microbiolgicas que debe cumplir un
frmaco, hasta el lmite de su fecha de re-anlisis o que un producto
farmacutico debe cumplir hasta su caducidad.
Tolerancias en las condiciones de almacenamiento. Es la
variacin aceptable en las condiciones de temperatura y humedad,
durante el almacenamiento. El equipo debe ser capaz de controlar la
temperatura en 2 C y la humedad en 5%. Se considera que las
variaciones debidas a la apertura de las puertas son aceptadas como
inevitables. Descomposturas del equipo o desviaciones fuera de los
limites por mas de 24 horas debern ser reportadas y el efecto sobre la
estabilidad del producto discutidas y juzgadas en cada caso.
Estudios en condiciones exageradas (stress testing) para
frmacos. Son estudios que se llevan a cabo para determinar la
estabilidad intrnseca de un frmaco, bajo condiciones ms severas que
aquellas usadas en los estudios acelerados. Estos estudios proveen
datos acerca de los productos de la descomposicin forzada, as como
de los mecanismos de descomposicin de un frmaco. Las condiciones
34
extremas que pudieran encontrarse durante el transporte pueden ser

cubiertas o examinadas por este tipo de estudios, sobre lotes definitivos
del frmaco. Estos estudios sirven para establecer las caractersticas de
estabilidad intrnseca de la molcula en cuestin as como sus vas de
degradacin, adems de la identificacin de los productos de
degradacin, lo cual sirve a su vez de apoyo para los procedimientos
analticos. Las particularidades dependen del frmaco y del producto
farmacutico del que se trate. Este estudio se lleva a cabo en un solo
lote e incluye el efecto de la temperatura, a valores de temperatura de
mltiplos de 10 C por encima de la temperatura de los estudios
acelerados (50 C, 60 C, etc.) y humedades convenientes, por ejemplo,
75% o mayores. Incluye tambin la fotlisis y oxidacin del frmaco,
adems de la susceptibilidad a la hidrlisis en un intervalo de pH, en
solucin o suspensin.
Estudios en condiciones exageradas (stress testing) para
productos o formas farmacuticas. Son estudios que incluyen
ensayos con luz, como parte integral de las condiciones exageradas. En
el caso de productos como aerosoles con vlvulas dosificadoras y
cremas y emulsiones se pueden requerir otros estudios bajo condiciones
exageradas.
Datos de apoyo de la estabilidad. Son otros datos de estabilidad
diferentes a los datos primarios y pueden ser aquellos llevados a cabo
con lotes fabricados a una escala pequea, en formulaciones tentativas
no propuestas para ser comercializadas, en empaques diferentes al de
comercializacin, adems de otros estudios que puedan servir de apoyo.
I. 7. Referencias bibliogrficas
1. Grimm, W. Stability testing of drug products. Wissenschaftliche

Verlagsgesellschaft, Stuttgart, pp. 13-15 (1987).
2. Httenrauch, R. Physico-chemical changes from molecular-galenical
viewpoint. En: Grimm, W. Stability testing of drug products.
Wissenschaftliche Verlagsgesellschaft, Stuttgart, pp. 17-39 (1987).
3. Verain, A. Changes in medicinal products and the consequences for
their therapeutic application. En: Grimm, W. Stability testing of drug
products. Wissenschaftliche Verlagsgesellschaft, Stuttgart, pp. 64-76
(1987).
4. PMAs joint QC-PDS Committee. Stability concepts. Pharm. Technol.
8 (6), 42-48 (1984).
5. Moeller, H. Stability testing in relation to guidelines in the EC, Japan
and USA. En: Grimm, W. y Krummen, K. Stability testing in the EC,
Japan and the USA. . Wissenschaftliche Verlagsgesellschaft, Stuttgart,
pp. 167-176 (1993).
35
6. Grimm, W. Stability testing in industry. En: Grimm, W. Stability testing

of drug products. Wissenschaftliche Verlagsgesellschaft, Stuttgart, pp.
157-169 (1987).
7. Grimm, W. Basic principles of stability testing. En: Grimm, W. y
Krummen, K. Stability testing in the EC, Japan and the USA. .
8. Krummen, K. Influence of packaging material on the stability of drug
products. En: Grimm, W. y Krummen, K. Stability testing in the EC,
Japan and the USA. . Wissenschaftliche Verlagsgesellschaft, Stuttgart,
pp. 107-121 (1993).
9. Liu, W. R., Langer, P. y Klibanov, A. M. Biotech. And Bioeng. 37, 177
(1991). A travs de (8).
10. Herrman, D. Packaging materials and shelf-life. En: Grimm, W.
Stability testing of drug products. Wissenschaftliche
11. Sanchez, E., Evora, C.M. y Llabrs, M. Effect of humidity and
packaging on the long-term aging of commercial sustained release
theophylline tablets. Int. J. Pharm. 83 (1992) 59-63.
12. Franke, H., Hencken, p., Ross, g. y Kreuter, J. Influence of volatile
rubber stopper components on the clearness of parenteral antibiotics
stored in multiple or single dose containers after reconstitution with
water. Eur. J. Pharm. Biopharm. 40 (6) 379-387 (1994).
13. Hefendehl, F.W. Requirements of the licensing authority of the
Federal Republic of Germany concerning the stability testing of drug
products, with special reference to phytopharmaceuticals. En: Grimm,
W. Stability testing of drug products. Wissenschaftliche
14. Inamdar, P.K., Yeole, R.D. Srivastava, M.M. y de Souza, N.J. Stability
study of the active constituents in the Centella asiatica extract
formulations. Drug Dev. Ind. Pharm., 22 (3), 211-216 (1996).
15. Geigert, J. Overview of the stability and handling of recombinant
protein drugs. J. Parent. Sci. Tech. 43 (5), 220-224 (1989).
16. Hoffman, H., Bassarab, S., Schlter, M., Werz, W. y Werner, R. G.
Stability and stability testing of biopharmaceuticals. En: Grimm, W. y
Krummen, K. Stability testing in the EC, Japan and the USA. .
17. Vemuri, S., Beylin, I., Sluzky, V., Stratton, P., Eberlein, G. y Wang, J.
The stability of bFGF against thermal denaturation. J. Pharm.
Pharmacol. 46, 481-486 (1994).
18. The stability testing of new drug products - The tripartite guideline.
USP 23-NF 18. United States Pharmacopeial Convention, Inc.
Rockville, MD-USA. pp. 1959-1963 (1995).
19. Grimm, W. International harmonization of stability test for
pharmaceuticals. The ICH tripartite guideline for stability testing of
new drug substances and products. Eur. J. Pharm. Biopharm. 41 (3)
194-195 (1995).
36
II
CONCEPTOS CINTICOS
II. 1. Bases cinticas qumicas de la estabilidad
37
II. 2. Efecto de la temperatura sobre la velocidad de reaccin
55
II. 3. Efectos de catlisis y del pH sobre la velocidad de reaccin
66
II. 4. Efecto de la asociacin o inclusin a otras substancias
sobre
la estabilidad 73
II. 4. 1. Efecto de los tensoactivos sobre la estabilidad
74
II. 4. 2. Efecto de las ciclodextrinas sobre la estabilidad
77
II. 4. 3. Efecto de la complejacin con cafena sobre la estabilidad
82
II. 5. Efecto de la humedad en sistemas slidos sobre la velocidad de

reaccin 83
37
II. 6. Efecto de la constante dielctrica sobre la velocidad de
reaccin 84
II. 7. Efecto de la luz sobre la velocidad de reaccin
90
II. 8. Referencias bibliogrficas
93
II
CONCEPTOS CINTICOS EN LA ESTABILIDAD
II. 1. Bases cinticas qumicas de la estabilidad

Cuando hablamos de estabilidad qumica estamos considerando con
qu rapidez una sustancia farmacutica se degrada bajo distintas
condiciones de pH, fuerza inica, temperatura, luz, etc. Los resultados
que se obtienen de las pruebas de estabilidad, aceleradas o a largo
plazo, nos permiten hacer predicciones acerca de la estabilidad qumica
de los frmacos y de las formas de dosificacin, a travs de ecuaciones
matemticas desarrolladas en estudios de la cintica de las reacciones.
La cintica estudia la velocidad de las reacciones qumicas y los
factores que tienen influencia sobre ella. La palabra clave es rapidez,
que implica velocidad y un proceso donde interviene la velocidad de
transformacin es un proceso cintico. As, la cintica qumica podra
considerarse como el estudio cuantitativo de la estabilidad qumica. De
una manera ms general,
la cintica qumica es el estudio de la velocidad, del mecanismo de las

reacciones qumicas y de los factores que las afectan.
La velocidad de una reaccin se estima a travs de la medicin, a

diferentes intervalos de tiempo, de los cambios que ocurren en las
substancias originales o a travs de la medicin de los productos de
38
degradacin que a partir de ellas se forman. Visto de esta manera solo

se consideran las condiciones iniciales y finales del sistema, sin
embargo, es claro que entre estos dos estados pueden existir, muy
frecuentemente, reacciones intermedias que toman parte en la
formacin de los productos finales de las reacciones. Por esta razn,
debe diferenciarse entre el mecanismo de una reaccin y la
estequiometra de la misma que se expresa en una ecuacin.
El concepto de velocidad se define, en general, como una relacin de
la distancia que recorre un cuerpo (s) y el tiempo que le toma hacerlo
(t). Se expresa de una manera diferencial como: v = ds/dt.
Para el caso de una reaccin qumica, donde los reactivos A y B
interactan para formar el producto C, se puede expresar la velocidad
de diferentes maneras:
- d[A]/dt; - d[B]/dt; + d[C]/dt
Los parntesis cuadrados significan concentraciones, expresadas en

moles/litro o en otras unidades equivalentes de concentracin. El signo
que antecede a las expresiones anteriores significa, en el caso del signo
positivo, que la concentracin aumenta al paso del tiempo, en este caso
la concentracin del producto de la reaccin (C). Cuando el signo es
negativo, se aplica a las concentraciones de las substancias que
originalmente reaccionan (A) (B) y significa que la concentracin de
tales substancias disminuye al paso del tiempo.
Velocidad de reaccin es la velocidad con que desaparecen los

reactivos o aparecen los productos, esto es, es una relacin de
concentracin de reaccionantes contra el tiempo transcurrido.
El estudio de las velocidades de descomposicin dar una idea

razonada de cmo y cunto tiempo los productos farmacuticos pueden
ser almacenados, antes de usarlos y durante su uso.
La velocidad de reaccin depende regularmente de la concentracin
de las substancias iniciales, reactivos o reaccionantes. Un ejemplo sera
la reaccin:
2 HI H2 + I2
H2 + I2 2 HI
39
En ambos casos las reacciones seran proporcionales a la

concentracin de las substancias de inicio o reaccionantes. En ambos
casos se trata de procesos que derivan del choque de dos molculas,
por esta razn, la velocidad de reaccin depende de la concentracin de
estas dos molculas. En el primer caso dos molculas semejantes, por lo
que la reaccin dependera del cuadrado de una sola sustancia. En el
segundo caso dos molculas diferentes, por lo que la reaccin
dependera de la concentracin de estas dos molculas. Este tipo de
reacciones se denominan bimoleculares. Si se necesita para la reaccin
del choque de mas de dos molculas, entonces la molecularidad de la
reaccin sera mayor. Si el caso fuese de una autodegradacin, en la que
no se necesitase de ningn choque previo, entonces hablaramos de
reacciones monomoleculares (1).
La molecularidad de las reacciones es un concepto diferente al del
orden de reaccin, mientras que la molecularidad describe los cambios
que ocurren en las molculas durante el transcurso de una reaccin, el
orden de reaccin se refiere exclusivamente a una descripcin emprica
de la misma.
En el ejemplo de la formacin y ruptura de HI, como gas, la
molecularidad y el orden de reaccin coincidiran, ambas reacciones
seran de segundo orden y bimoleculares. En la mayora de los casos
esto no ocurre as, esto es, la molecularidad y el orden de reaccin son
regularmente diferentes y no deben confundirse.
El orden de una reaccin es una manera cuantitativa de expresar

como vara la velocidad de una reaccin con relacin a la
concentracin del reactivo.
En el trabajo experimental por lo general no se miden velocidades en

forma directa sino la concentracin de un reaccionante o de un producto
en funcin del tiempo, a temperatura constante. A partir de esta
informacin puede ser calculada la velocidad y la constante de velocidad
de la reaccin, usando un mtodo matemtico apropiado.
La velocidad de degradacin de un frmaco puede ser considerada
como proporcional a la concentracin de los reaccionantes en el paso
determinante de la velocidad, o proporcional a las concentraciones de
los reaccionantes en el equilibrio que precede al paso determinante de
la velocidad. En el caso de una reaccin general del tipo C + B P, la
velocidad de transformacin, por ejemplo de un frmaco, estara dada
por:
dC/dt = - k(n+m) [C] n [B] m

(II. 1)
40
Donde C es la concentracin de la especie que se estudia, por ejemplo

el frmaco, C y B, entre parntesis cuadrados, son las concentraciones
de los reaccionantes y k(n+m) la constante de velocidad de orden n+m (2).
Visto de esta manera el orden de la reaccin sera n+m. En trminos
generales los nicos rdenes de reaccin de inters en las ciencias
farmacuticas son el cero, el uno y el dos. Ordenes mayores de dos son
muy raros. Si la reaccin dependiera de la concentracin de una sola
sustancia, por ejemplo la concentracin del frmaco, entonces la
ecuacin sera:
dC/dt = - k(n) [C] n (II. 2)
Esta consideracin es de carcter general, siendo el exponente de la

concentracin lo que nos dar el orden de la reaccin, esto es, la
relacin de dependencia de la velocidad con respecto a la
concentracin.
En estas notas el trmino orden, como antes se ha explicado, se usa
en el sentido de un orden aparente. El orden de las reacciones qumicas
determina la forma del perfil de la concentracin de un frmaco o una
forma farmacutica, mientras que la constante de velocidad determina
su pendiente, por lo tanto no se hace mencin de los detalles del
mecanismo de la reaccin qumica o de la manera en que estos trminos
son afectados por la formulacin de la forma de dosificacin.
Cuando la velocidad es considerada como orden uno, cuando n=1,
entonces la ecuacin II. 2 se transforma en:
dC/dt = - k1 C (II. 3)
integrando:
ln [C/C0] = - k1t (II. 4)

log C = -k1t / 2.303 + log Co
(II. 5)
La determinacin ms comn a partir de esta ecuacin es la de la

fecha de caducidad o t90%, la cual se puede despejar a partir de:
k1 t90% = - 0.105 (II. 6)
41
Ntese que en las ecuaciones anteriores no se ha puesto en el

denominador una diferencia de tiempos (t2 -t 1), lo cual sera la norma
despus de integrar, pero dado que como se aprecia en la sustitucin,
casi siempre el primer valor del tiempo es cero, ste se puede omitir y
usar nicamente el valor de t2 como equivalente de t. En rigor esto no es
cierto siempre, por lo que cuando t1 0, se deber usar la frmula
completa; como denominador t2 - t 1 en lugar de la t sola.
Las ecuaciones que hemos mencionado son las que representan al
orden 1 en cintica, por lo que podemos decir que cuando al graficar ln
C contra el tiempo nos d una lnea recta, estaremos frente a un proceso
de primer orden (figura II. 1).
Las reacciones de primer orden son aquellas en las que, al paso del
tiempo, se pierde una proporcin constante de nuestra concentracin
remanente en el proceso, esto es, que no se perder una cantidad
constante, sino ms bien un porcentaje constante por unidad de tiempo.
As por ejemplo si la concentracin al tiempo cero es de 100 mg/ml y

al cabo de un mes, a temperatura constante, es de 90 mg/ml, la prdida
ser de un 10%, y as durante el segundo mes se degradarn o perdern
9 mg/ml, es decir el 10% de 90 mg/ml (concentracin al comenzar el
segundo mes) y tendremos por consiguiente, 81 mg/ml como
concentracin final y as sucesivamente.
El orden 1 del proceso, al igual que otros ordenes de reaccin dentro
de los estudios de estabilidad qumica, nos plantean ciertas preguntas
que es necesario responder para entender que le caracteriza o
diferenca de los otros rdenes. Tales preguntas seran:
Qu ocurre a la concentracin del frmaco en el orden 1?

Cmo se calcula la constante de velocidad del proceso (k 1)?
Cmo se predice cunto durar nuestro producto para llegar a 90% de
su principio activo (T90%)?
Cmo ajustar al ptimo de concentracin nuestro principio activo para
estar dentro de lmites adecuados a su actividad teraputica o
farmacopica (C0)?
Para contestar a las preguntas b, c y d, nos detendremos a analizar un

estudio de estabilidad de vitaminas en tabletas (3), formulacin c, datos
de estabilidad a 60C de Vitamina A. La tabla II. 1 nos muestra los datos
estimados de las grficas originales.
42
ln Co
Pendiente = - k1
ln C
Figura II.1. RepresentacinTiempo

esquemtica del orden de reaccin uno.
K1 = Constante de velocidad y C = concentracin.
Tabla II. 1. Degradacin de Vitamina A en tabletas, a 60C. Valores

experimentales.
T (das) C (U.I/tab) ln C
3 69040 11.142
6 67707 11.118
9 65841 11.095
15 63831 11.064
22 60597 11.012
25 59575 10.995
28 58396 10.975
31 58104 10.970
35 55715 10.928
38 55826 10.930
42 53584 10.889
43
Estos datos cuando se representan en una escala simple muestran

una grfica como la de la figura II. 2. Aplicando el modelo matemtico
del orden de reaccin uno muestran la grfica de la figura II. 3.
A partir de la ecuacin de regresin de la figura II. 3 se pueden
calcular los valores corregidos que corresponden con los puntos de la
lnea de regresin trazada. Inicialmente se obtienen con la ecuacin los
logaritmos de las concentraciones y a partir de estos, sacando
antilogaritmo, los valores corregidos de las concentraciones.
Como se puede observar en las grficas de las figuras II. 2 y II. 3,
aunque de una manera no muy marcada, es claro que la grfica en
coordenadas normales no representa una recta, y que en papel
semilogartmico o usando los logaritmos de las concentraciones s
representa una recta, la cual una vez estandarizada por mnimos
cuadrados nos podr dar la informacin que deseamos, como es k 1 y la
concentracin inicial del producto (Co). La k 1 nos dice la constante a la
cual se encuentra asociado nuestro proceso de orden 1.
k1 = 0.0062658 das-1
70,000
CONCENTRACIN (U. I. /tab.)
60,000
50,000
0 10 20 30 40
TIEMPO (das)
Figura II. 2. Degradacin de la vitamina A, a 60C, cuando se

presentan sus datos cinticos en una escala simple.
44
11.2 y = -0.0062658x + 11.155

R2 = 0.9938
ln C
11
10.8
0 15 30 45
TIEMPO (das)
Figura II. 3. Degradacin de la vitamina A, a 60 C, cuando se

presentan sus datos cinticos de acuerdo al modelo del orden de
reaccin uno.
ln Co = 11.155 Co = 69 941 U. I./tab.
Los pasos llevados hasta ahora para el uso de los datos

experimentales han sido: primero, determinar el orden y segundo,
determinar el valor de k1 para una recta estandarizada. El tercer paso
sera determinar el tiempo de vida de nuestro producto, lo cual se
designa como el tiempo necesario para que la concentracin de principio
activo llegue a los lmites oficialmente establecidos por la empresa o por
organismos oficiales (USP, FEUM), bajo ciertas condiciones de luz,
temperatura, humedad, etc. El tiempo de vida del producto, como ya
hemos dicho, depender del lmite inferior que fije el Laboratorio o la
Secretara de Salubridad y Asistencia, el cual puede variar y por esto hay
t95%, t90%, t85%, dependiendo de si el lmite inferior permitido, sea 95%, 90%
u 85%, y se calcula despejando t de la ecuacin correspondiente, dando
valores de Co = 100% o la concentracin equivalente y de C = 90% (en
el caso de diferente lmite inferior, ste valor cambia) o la concentracin
equivalente al 90%. Cabe hacer notar que para fines de la fecha de
caducidad, en realidad debe usarse como concentracin inicial siempre
la concentracin declarada en la etiqueta del producto, ya que la
45
concentracin en cada lote puede variar. Para la concentracin final o

lmite de caducidad, tambin debe hacerse referencia al 90%, si ese es
el caso, del valor declarado en la etiqueta del producto.
t = (ln Co - ln C) / k1 t = (log Co - log C) 2.303 / k1
Para nuestro ejemplo k1 = 0.0062658 das-1, por lo tanto:
t90% = (ln 69 941 - ln 62497)/0.0062496 = 0.10536/0.0062658

(C90% = 62497 U.I./tab.)
t90% = 16.81 das.
Por lo que nuestro producto, bajo las condiciones del experimento,

tardar en promedio 16.81 das en llegar al 90% de su concentracin
original y por lo tanto a su caducidad.
De una manera ms general se puede obtener una ecuacin para
cualquier caso, sin emplear concentraciones/tableta como en el caso
anterior, empleando los porcentajes en su lugar:
t90% = (ln 100 - ln 90) / k1 t90% = 0.10536 / k1
Sin embargo, la fecha de caducidad no debe determinarse utilizando

el punto en el cual la lnea de regresin intercepta el lmite de la
especificacin. Si as lo hicisemos, podramos sobrestimar o subestimar
la fecha de caducidad. El clculo, como fue hecho anteriormente, nos
dara como resultado el tiempo al cual el promedio de las muestras de
este lote permaneceran todava dentro de las especificaciones, esto es,
una determinacin con tan solo con una confianza del 50% de
probabilidad (4).
Un procedimiento aceptable para el examen de un atributo de una
forma farmacutica que se espera disminuya con el tiempo, como el
contenido del frmaco, sera el determinar el tiempo al cual la curva
descrita por el limite inferior del intervalo de confianza al 95% intercepta
el limite inferior de la especificacin, el cual podra ser en este caso el
90% del contenido del frmaco.
46
Por ejemplo, si la lnea de la curva del intervalo de confianza inferior

cruza la lnea del lmite del contenido del frmaco (90%) a los 24 meses,
entonces la fecha de caducidad sera de 24 meses (figura II. 4).
Lnea de regresin
Lmite de la especificacin (90%)
Lmite inferior del intervalo de confianza al 95%
105
VALOR DECLARADO (%)
95
Caducidad
85
0 6 12 18 24
TIEMPO (meses)
Figura II. 4. Anlisis estadstico de la estabilidad a largo plazo,

tomando como referencia el contenido en principio activo.
Cuando al analizar un atributo de alguna forma farmacutica se

esperase que ste aumentara, por ejemplo el incremento en la
coloracin u oscurecimiento del producto, entonces se tomara como
referencia la curva descrita por el lmite superior del intervalo de
confianza al 95%.
Tomando Como ejemplo el caso del estudio de estabilidad de las
tabletas de vitamina A, a 60 C, el intervalo de confianza al 95% se
mostrara como se observa en la figura II. 5. Si tomamos la curva del
lmite inferior del intervalo de confianza al 95% como referencia,
entonces el tiempo necesario para alcanzar el 90% de la concentracin
de vitamina A en las tabletas ser de 15.44 das, lo cual significa una
reduccin de la fecha de caducidad de 1.37 das, equivalente a una
reduccin del 8.8% con respecto al originalmente calculado. El clculo
del intervalo de confianza se describe en el apndice II y en cualquier
libro de estadstica, por ejemplo (5).
47
11.2
Intervalo de confianza al 95%
11.1
C=90%
ln C
11
10.9
Caducidad
10.8
0 10 20 30 40 50
TIEMPO (das)
Figura II. 5. Degradacin de la vitamina A, a 60 C. Regresin con

intervalo de confianza al 95%.
De esta manera el periodo de la fecha de expiracin para cada lote se

fundamenta en el patrn de cambio de sus atributos cuantitativos, por
ejemplo el anlisis del contenido en principio activo o el contenido en
productos de degradacin, adems de la precisin con que estos
atributos son estimados.
La variabilidad de un lote a otro, cuando es pequea, permite que la
relacin de parmetros de inters como el contenido en principio activo
pueda ser combinado en un estimado general. La similitud de las curvas
estimadas entre los diferentes lotes deber ser comprobada a travs de
pruebas estadsticas, para demostrar la igualdad de las pendientes y de
los interceptos al tiempo cero (4).
El nivel de significacin de las pruebas, expresado en valores de p,
debe seleccionarse de tal manera que la combinacin de los datos se
haga solo que exista una fuerte evidencia a favor de la combinacin. Se
recomienda un valor para p de 0.25 para las pruebas estadsticas
preliminares. Valores de p menores a 0.25 seran sujetos de otras
consideraciones (4).
Siguiendo el desarrollo del estudio nos podra interesar que nuestro
producto durase hasta su fecha de caducidad 18 das en lugar de los
48
15.44 que obtuvimos, sin modificar ni los excipientes de la formulacin

ni el proceso, para tal fin podemos calcular cul deber ser nuestra C o,
para que al cabo de 18 das tenga el 90% de la concentracin declarada
(100%), suponiendo que la concentracin declarada sea igual a la
concentracin inicial encontrada a partir de los resultados de la
regresin, para esto despejamos ln Co de la ecuacin de orden 1.
Ln Co = ln C90% + k1t
Sustituyendo en nuestro ejemplo:
ln Co = ln 62947 + (0.0062658 x 18) = 11.1628

Co = 70462 U.I. de Vitamina/tab.
Tomando en cuenta el retraso de 1.37 das, por considerar la curva

del lmite inferior del intervalo de confianza al 95%, entonces:
ln Co = ln 62947 + (0.0062658 x (18+1.37)) = 11.1714

Co = 71070 U.I. de Vitamina/tab.
La concentracin inicial necesaria para alargar la fecha de caducidad

de 16.81 a 18 das, considerando la lnea de regresin original, para una
determinacin con una confianza del 50%, es de 70 462 U.I. de Vitamina
A, equivalente a 521 U.I. extra por cada tableta. sta concentracin
equivale a 0.74% de sobredosificacin. Si consideramos el tiempo de
retraso de 1.37 das, tomando como referencia la curva del lmite inferior
del intervalo de confianza al 95%, entonces la sobredosificacin
corresponde a 1129 U.I. de Vitamina A, o lo que es lo mismo, a una
sobredosificacin del 1.61%. De esta manera se puede alargar el tiempo
de vida de nuestro producto sin alterar su formulacin, para lo cual
debemos tomar en cuenta los lmites permitidos, en este caso el lmite
superior, para saber hasta donde es posible aumentar nuestra
concentracin inicial para alargar la vida del producto o su fecha de
caducidad.
En general, hemos observado la utilidad de nuestros datos
experimentales para saber a travs de ellos las caractersticas de
nuestro producto, siguiendo el orden 1.
Debido a que la velocidad es generalmente una funcin de la
concentracin del sustrato o reaccionantes, una reaccin que
49
aparentemente es de primer orden ser de orden cero cuando no

dependa de la concentracin del sustrato o reaccionantes. En el campo
farmacutico no hay realmente muchas posibilidades de reacciones que
verdaderamente sean de orden cero. Varias de las reacciones que
parecen ser de orden cero, realmente son de seudo-orden cero. Cuando
las cantidades de los productos de descomposicin de un frmaco son
muy pequeas podra ser difcil distinguir entre una reaccin de orden
cero y una de orden uno, debido a la pequeez de los valores.
Cuando una reaccin de primer orden parece comportarse como

una de orden cero, se dice que es una reaccin de seudo-orden cero.
Por ejemplo, cuando se tiene una suspensin, la cantidad que se

degrada en solucin se recupera disolviendo parte de la fase slida y no
cambia la concentracin en solucin, por lo que se degrada una cantidad
constante, que depende de la concentracin del frmaco en solucin, la
cual dijimos permanece constante. Otro caso sera cuando hay una
degradacin catalizada por la luz, la reaccin depende de la cantidad de
luz y no de la concentracin del frmaco. Integrando la ecuacin II. 2
para n=0, nos da:
C = Co - k0 t (II. 7)
Cuando la cantidad de frmaco (C) se grafica contra el tiempo nos da

una lnea recta con una pendiente igual a k0 (figura II. 6).
Como resultado de lo anterior, resulta obvio que el conocimiento de la
constante de velocidad especfica k 0 permite una estimacin de la
cantidad de frmaco que se degradar en un tiempo dado. Como ya
hemos visto en el estudio del orden 1 del proceso, ahora analizaremos lo
mismo para el orden cero.
Como ya antes se ha mencionado,
Co
Pendient
e = - k0
C
50
T
e
m
p
VILLAFUERTE ROBLES L. o ESTABILIDAD DE MEDICAMENTOS
Figura II. 6. Representacin esquemtica del orden de reaccin

cero. k0 = Constante de velocidad y C = concentracin.
en las reacciones de orden cero la velocidad no es afectada por la

concentracin del frmaco, la cantidad de frmaco que se degrada por
unidad de tiempo es constante
y esta determinada por algn otro factor lmite, como puede ser la luz en
reacciones fotoqumicas, el rgimen de difusin en ciertas reacciones de
superficie la cantidad del catalizador en una reaccin cataltica.
Si la velocidad no es funcin de la concentracin del frmaco
veremos, si analizamos la grfica ya mostrada para el orden cero, que si
tenemos una concentracin inicial de 100 mg/ml y despus de un mes
encontramos 90 mg/ml, deberemos esperar a los dos meses una
concentracin de 80 mg/ml, a los tres meses una concentracin de 70
mg/ml y as sucesivamente.
Para calcular nuestra constante, t 90%, y hacer algn ajuste,
analizaremos los datos cinticos de la degradacin de cido ascrbico en
solucin, a pH = 3.15 y temperatura de 70C, de seudo-orden cero,
tomados de (6) y registrados en la tabla II. 2.
Como ya hemos observado en el anlisis del proceso de orden uno, en
sus grficas y tablas, se habl de datos y rectas o curvas
estandarizadas, las cuales se calculan para corregir los defectos de la
dispersin de los datos analticos y del procedimiento usado (para
clculos estadsticos ver 5 u otro libro similar). A partir de ellas
obtendremos la pendiente de nuestra recta ya estandarizada o
corregida, luego nuestra constante y t 90%. De los datos obtenidos en la
tabla II. 2, para la degradacin de cido ascrbico a pH 3.15 y 70 C, se
obtiene la grfica de la figura II. 6.
51
Tabla II. 2. Degradacin de cido ascrbico en solucin, a 70C,

pH=3.15. Datos experimentales estimados (6).
t (das) C (mg/0.6 ml)
0 79.3
2 75.2
4 68.8
6 64.6
8 58.3
10 52.3
12 48.2
13.5 44.0
Como puede observarse, los datos de regresin nos indican que con
un coeficiente de determinacin de r2 =0.9979, la ecuacin de nuestro
proceso es:
C = 79.808 2.6624 * t
k0 = 2.6624 (mg/0.6 ml)/da
Co = 79.808 mg/0.6 ml
Es de notarse que las unidades para k0 son diferentes que para k1. En
el orden uno, solo importaba considerar el tiempo (sus unidades) para
usar la constante de la ecuacin. En el orden cero adems del tiempo
debe considerarse a las unidades de concentracin, para poder hacer
uso de la constante en la ecuacin correspondiente.
52
85
y = -2.6624x + 79.808
R2 = 0.9979
CONCENTRACIN (mg/0.6 ml)
70
55
40
0 4 8 12
TIEMPO (das)
Figura II. 6. Degradacin de cido ascrbico a 70 C y pH de 3.15,

aplicando el modelo cero del orden de reaccin.
Una vez obtenida la k0 podemos calcular el t90%, partiendo del

supuesto que la concentracin declarada del producto sea igual a la
cantidad obtenida por la regresin, aunque esto sea verdad slo en
casos muy raros.
C = Co - k0 t t = (C - Co)/ - k0 = (Co - C)/ k0

t 90% = (79.808 mg/0.6 ml - 71.827 mg/0.6 ml) / 2.6624 (mg/0.6
ml)/da
t 90% = 2.998 das
Si la concentracin declarada del producto o concentracin que

aparece en la etiqueta no fuese 79.808 mg/0.6 ml sino 80 mg/0.6 ml,
entonces la concentracin equivalente al 90% de ella sera 72.00 mg/0.6
ml y la fecha de caducidad:
t 90% = (79.808 mg/0.6 ml 72.00 mg/0.6 ml) / 2.6624 (mg/0.6

ml)/da
t 90% = 2.933 das
53
La cual es una fecha de caducidad mas corta que compensara la

concentracin inferior del producto en su valor inicial (99.76% del valor
declarado).
De la misma manera que se ha hecho antes, tambin se pueden
calcular las curvas correspondientes al intervalo de confianza al 95%
(ver apndice II). Los resultados de estos clculos se pueden ver en la
figura II. 7.
Si tomamos la curva del lmite inferior del intervalo de confianza al
95% como referencia, en lugar de la lnea de regresin, entonces el
tiempo necesario para alcanzar el 90% de la concentracin inicial de
vitamina C en la solucin ser de 2.712 das, lo cual significa una
reduccin de la fecha de caducidad de 0.286 das, equivalente a una
reduccin del 9.53% con respecto al originalmente calculado.
Siguiendo el desarrollo del estudio nos podra interesar que nuestro
producto durase hasta su fecha de caducidad 3.5 das en lugar de los
2.933 das que obtuvimos, calculados con respecto a la concentracin
declarada (80 mg/0.6 ml). De esta manera podemos calcular ahora cul
deber ser nuestra Co, para que al cabo de 3.5 das tenga el 90% de la
concentracin declarada (72.00 mg/0.6 ml). Para este fin despejamos C o
de la ecuacin de orden 0.
Co = C90% + k0 t
Lmites de confianza 95%
C = 90%
70
CONCENTRACIN (mg/ ml)
50
30
Caducidad
10
0 5 10 15 20
TIEMPO (das)
54
Figura II. 7. Degradacin de cido ascrbico en solucin, a 70 C y

pH de 3.15. lnea de regresin e intervalo de confianza al 95%.
Sustituyendo en nuestro ejemplo y tomando en cuenta la lnea de

regresin, para una prediccin con una probabilidad del 50%:
Co = 72.00 + (2.6624 x 3.5)

Co = 81.318 mg/0.6 ml
Considerando el retraso de 0.286 das, por considerar la curva del

lmite inferior del intervalo de confianza al 95%, entonces:
Caducidad
Co = 72.00 + (2.6624 * (3.5 + 0.286)) = 82.080

Co = 82.080 mg/0.6 ml
La determinacin de fechas de expiracin mas all del rea

experimental, requiere de certidumbre acerca de la correcta seleccin
del orden de la reaccin conque ocurra la degradacin del frmaco.
Cuando se estiman valores dentro del rea de experimentacin, los
mismos datos estimados, cuando se comparan con los realmente
obtenidos, nos dan una medida de s el modelo escogido es correcto o
no. Tambin pueden aplicarse mtodos de evaluacin estadstica para
determinar el grado de bondad del modelo escogido, para describir
correctamente los datos experimentales. Sin embargo, cuando se
extrapola mas all del rea experimental no hay manera de saber si la
estimacin es correcta o no lo es.
Cuando se hacen extrapolaciones se parte del supuesto que la
cintica de degradacin continua siendo la misma, por lo que fechas de
caducidad obtenidas de esa manera debern ser comprobadas con los
datos de estabilidad reales, tan pronto como estn disponibles. Por otro
lado, se observa en la figura II. 7 que conforme se extrapola mas all del
rea de experimentacin, los intervalos de confianza son ms amplios,
por lo que las fechas de caducidad as determinadas sern siempre
menores que las fechas de caducidad determinadas dentro del rea de
experimentacin.
En las reacciones de segundo orden la velocidad de reaccin depende
de la concentracin de dos substancias o reaccionantes, por ejemplo A y
B, de tal manera que la velocidad de descomposicin de A es igual a la
de B y ambas son proporcionales a la concentracin del producto, esto
es:
55
- d [A]/dt = - d [B]/dt = k2 [A] [B] (II. 8)
Una reaccin de segundo orden es aquella en la que la velocidad de

reaccin es proporcional a la segunda potencia de uno de los
reaccionantes.
S designamos a y b como las concentraciones iniciales de los

reaccionantes A y B, al tiempo cero, y a x como la cantidad formada del
producto AB al paso del tiempo, entonces la velocidad de formacin del
producto AB corresponde con:
dx/dt = k2 (a-x) (b-x) (II. 9)
La k2 es la constante de velocidad y tiene unidades del inverso del

tiempo multiplicado por el inverso de la concentracin (1). Despus de la
integracin,
ln (a-x)/(b-x) = ln a/b + (a-b) k2 t (II. 10)
La velocidad de una reaccin de segundo orden se puede describir

con una lnea recta graficando ln (a-x)/(b-x) contra el tiempo. La
pendiente de la misma es (a-b) * k 2. Despejando las diferentes variables
tenemos:
k2 = [1/t * (a-b)] * ln (b (a-x)/a (b-x)

t = [1/k2 (a-b)] * ln [b (a-x)/a (b-x)]
e (a-b) k2 t + ln (a/b) * (b-

x=
a)e (a-b) k t + ln (a/b) -1
2
S las concentraciones iniciales de A y B fuesen iguales la ecuacin II.

10 se simplificara a:
56
dx/dt = k2 (a-x)2 = k (b-x)2 (II. 11)

1/(a-x) 1/a = k2 t (II. 12)
De esta forma se obtendra una lnea recta al graficar el inverso de la

concentracin remanente del frmaco (a-x) contra el tiempo (1). La
constante de esta reaccin de segundo orden sera la pendiente de
dicha lnea recta y el intercepto al tiempo cero el inverso de la
concentracin inicial.
Tabla II. 3. Resumen de los rdenes de reaccin y sus ecuaciones.
ORD Ecuacin integrada Unidades t 90% Observa-

EN de k ciones
0 Co - Ct = k0 t Conc. * t-1 Co / 10k0
ln Co - ln Ct = k1 t
1 Ct = Co * e- k1 t t-1 0.105/k1
2 1/ A t - 1/A = k2 t Conc.-1 * t -1 0.11/ A k2 A = B
II. 2. Efecto de la temperatura sobre la velocidad de reaccin

Experimentalmente se ha observado que la velocidad de una reaccin
se ve afectada fuertemente por la temperatura. Segn la regla de Vant
Hoff, un aumento de 10 C en una reaccin que ocurre a temperatura
ambiente incrementara su velocidad de reaccin entre 2 y 4 veces,
dependiendo de su energa de activacin. Este aumento en la velocidad
de reaccin se atribuye a que las molculas necesitan alcanzar un
estado activado para poder reaccionar. En el conjunto de molculas que
llamamos reaccionante solo una fraccin de ellas tiene la energa
suficiente para alcanzar este estado de activacin. Esta fraccin de
molculas se describe de acuerdo a la distribucin de Boltzman, la cual
nos dice que la energa se distribuye normalmente, esto es, en forma de
campana de Gauss, de tal manera que solo una fraccin pequea de
57
ellas tendr mucha mayor energa que el promedio. Esta pequea

fraccin es la que puede reaccionar inmediatamente. Cualquier aumento
en la temperatura tendra como efecto un corrimiento de la distribucin
hacia niveles de energas mayores, provocando que un mayor nmero
de molculas alcanzara este estado activado, cada vez que se
aumentara ms la temperatura.
Adems de la energa de activacin la velocidad de una reaccin
depende tambin de un factor de frecuencia. Las molculas tienen que
chocar antes de reaccionar. El factor de frecuencia depende en gran
parte de la velocidad con que los choques moleculares ocurren y de la
fraccin de estos que es adecuada estereoqumicamente para producir
una reaccin. Debido a que el nmero de choques o colisiones de las
molculas aumenta cuando se incrementa la temperatura, es de
esperarse que aumente la velocidad de reaccin conforme aumente la
temperatura.
En una reaccin que ocurre a una velocidad que se puede medir,
solamente una pequea fraccin de todas las molculas posee la
energa necesaria para participar en una reaccin qumica.
La diferencia entra la energa necesaria para reaccionar y la energa

promedio de las molculas se llama energa de activacin (EA). La
energa de activacin es la energa necesaria para convertir un mol de
reaccionante en producto.
La energa de activacin comnmente tiene valores entre 10 y 50

kcal/mol (41.8-209.3 kJ/mol). Aunque entre las substancias
farmacuticas ms comunes se han observado valores entre 10 y 25
kcal/mol (41.8-104.6 kJ/mol) (tabla II. 4). Las molculas a temperatura
ambiente tienen energas de alrededor de 900 cal/mol (3.77 kJ/mol), sin
embargo, la energa de una cantidad de materia conteniendo muchos
millones de molculas, se calcula como la energa promedio y siempre
hay una distribucin estadstica de dicha energa entre las molculas.
Por lo dicho y como lo hemos mencionado antes, podemos imaginar que
si la energa promedio es de 900 cal/mol (3.77 kJ/mol) siempre habr
algunas molculas con una energa muy alta, as como otras con una
energa muy baja.
En la grfica II. 8 se puede observar, de manera objetiva, lo que pasa
para que una reaccin se lleve a cabo. Las molculas de baja energa
(reaccionantes) necesitan activarse para hacer posible que se produzca
la reaccin, de acuerdo al factor de frecuencia de choque. Esto es,
aumentar su energa, lo cual puede ser por aumento de temperatura.
Las reacciones se llevan a cabo con una disminucin total de energa
(H) y con una disminucin notoriamente mayor si la consideramos
58
desde el estado activado, aunque lo que en el proceso realmente se ve,

es el cambio total de energa del sistema, o sea H.
En la formulacin de productos farmacuticos es conveniente evaluar
la dependencia de las reacciones con respecto a la temperatura, esto
permite la prediccin de la estabilidad del producto a temperaturas
ordinarias de almacenamiento o en la farmacia, a partir de datos
obtenidos bajo condiciones exageradas de anlisis.
Tabla II. 4. Energa de activacin para reacciones de

descomposicin de algunos productos farmacuticos (7).
Compuesto Reaccin Ea (kcal/mol) Ea (kJ/mol)
cido ascrbico Oxidacin 23 96.3

Aspirina Hidrlisis 14 58.6
Atropina Hidrlisis 14 58.6
Benzocana Hidrlisis 19 79.5
Cloramfenicol Hidrlisis 20 83.7
Epinefrina Oxidacin 23 96.3
Procana Hidrlisis 14 58.6
Tiamina Hidrlisis 20 83.7
Molculas activadas
Ea
Reaccionantes
ENERGA
Productos
59
Figura II. 8. Representacin esquemtica de los cambios

energticos ocurridos durante una reaccin.
El mtodo ms satisfactorio para expresar la influencia de la

temperatura sobre la velocidad de reaccin, es la relacin cuantitativa
emprica propuesta por Arrhenius en 1889.
En la ecuacin de Arrhenius se observa una relacin exponencial

entre la velocidad de reaccin y la temperatura:
k = Se Ea/RT (II. 13)
Donde k es la constante de velocidad de la reaccin, S (a veces

llamada A) es una constante de integracin que se designa tambin
como el factor de frecuencia o factor de choque, Ea es la energa de
activacin expresada en kJ/mol (anteriormente como kcal/mol), R la
constante molar de los gases (1.987 cal/mol*K; 8.317 J/mol*K) y T la
temperatura absoluta (K = 273 +C).
La anterior expresin exponencial se puede expresar tambin,
tomando logaritmos, como:
Ln k = - Ea/RT + ln S (II. 14)

Log k = - Ea/2.303 R 1/T + log S (II. 15)
Si se observa la ecuacin (II. 15), podremos ver que la ecuacin de

Arrhenius describe una recta, con log k y (1/T) como variables y (E A/
2.303R) como pendiente, con lo cual podemos calcular
experimentalmente a elevadas temperaturas y extrapolar a las
condiciones que deseemos, para obtener la k correspondiente a cierta
temperatura baja o inferior a las experimentales.
La utilidad de la relacin de dependencia de temperatura es funcin
del control del mecanismo de degradacin. As, si el mecanismo cambia
al elevar la temperatura, no podremos hacer ninguna extrapolacin (por
ejemplo, cambio en el orden de la reaccin a mayor temperatura).
A partir de algunos puntos o determinaciones de k a temperaturas
elevadas, por ejemplo para el acetato de fluprednizolona en solucin (8)
(tabla II. 5), se pueden obtener los valores de las constantes a
temperaturas normales y de refrigeracin (figura II. 9).
Despus de hacer regresin lineal de los puntos, se encontr:
60
ln k = -7185.9 * 1/T 19.268 Ea = 7185.9*1.987= 14.3

kcal/mol
r2 = 1 Ea = 7185.9*8.317= 59.8
kJ/mol
De donde se calculan dos puntos de extrapolacin que corresponden

con las temperaturas de 6 C y 25 C, para los cuales:
Tabla II. 4. Estabilidad del acetato de fluprednizolona en solucin

acuosa.
Temperatura T 1/T k ln k
(C) (K) (1/K) (das1)
70 343 0.002915 0.186 -1.682

62 335 0.002985 0.113 -2.180
54.3 327.3 0.003055 0.0678 -
2.691
40 313 0.003195 0.025 -3.689
Temperaturas experimentales
-1
-3
Temperaturas extrapoladas
ln k
-5
-7
2.9 3.1 3.3 3.5
1000 * 1/TEMPERATURA (1/K)
61
Figura II. 9. Relacin entre la temperatura y la constante de

velocidad de reaccin, de acuerdo con Arrhenius, para la
degradacin de fluprednizolona en solucin acuosa (8).
Ln k25 C = -4.846 k25 C = 0.007862

Ln k6 C = -6.488 k6 C = 0.001522
La estabilidad de un frmaco experimental denominado Abbott-79175,

cuya degradacin ocurre con un seudo-orden uno, nos muestra tambin
el uso de la ecuacin de Arrhenius para examinar sus caractersticas de
degradacin (9). En este caso se estudi la velocidad de degradacin a
diferentes pHs y diferentes temperaturas, encontrndose valores como
los que se registran en las curvas de la figura II. 10.
4 pH=2 pH=4 pH=6
0
ln k
-2
-4
-6
2.9 3 3.1 3.2
1/t (1/K)
Figura II. 10. Efecto de la temperatura y pH sobre la estabilidad de

Abbott 79175.
Los parmetros de regresin de las curvas nos muestran que con el

cambio de pH tambin cambia el mecanismo de la reaccin de
degradacin (9). Esto se observa por un cambio en la pendiente de las
curvas, la cual es menor conforme disminuye el pH (pH=2-13.3 kcal/mol;
pH=4-17.8 kcal/mol; pH=6-21.5 kcal/mol). Estos valores de la energa de
activacin nos muestran que conforme el pH aumenta la barrera
energtica que las molculas tienen que vencer para reaccionar es
62
mayor, por lo tanto el producto es ms estable. Esto se observa tambin

en la figura II. 10 al comparar la magnitud menor de las constantes de
velocidad para la reaccin a pH de 6, en comparacin con los otros dos
valores de pH.
La determinacin de los parmetros de regresin de la ecuacin de
Arrhenius nos permite estimar situaciones con una confianza del 50% o
promedio, por lo que se deben tomar en cuenta tambin los intervalos
de confianza al 95% para determinar constantes de velocidad de
reaccin en el intervalo de experimentacin y en condiciones de
extrapolacin. A diferencia de los casos antes vistos, donde se calculaba
con el lmite inferior del intervalo de confianza al 95%, para determinar
el t90% o fecha de caducidad, en este caso se calcula tomando como
referencia el lmite superior, para determinar la velocidad ms alta o
peor circunstancia de la estabilidad; con el fin de garantizar que, al
menos 95 de cada 100 muestras del medicamento, tendrn una
concentracin del frmaco mayor al 90% al concluir su fecha de
caducidad.
Tomando como ejemplo el caso del Abbott 79175, a pH de 6, en la
figura II. 11 se muestran los puntos experimentales de la constante de
velocidad, as como la lnea de regresin y el punto de extrapolacin de
la constante de velocidad a 25 C o temperatura ambiente, a partir de la
determinacin a las temperaturas de 70 C (k=0.076 h -1), 60 C
(k=0.030 h-1) y 40 C (0.006 h-1).
Extrapolacin a 25 C
-1 lmites de confianza
al 95%
-4
ln k
-7
-10
2.8 3 3.2 3.4
1/T (1/K)
Figura II. 11. Efecto de la temperatura sobre la velocidad de

degradacin de Abbott 79175.
63
Los parmetros de regresin obtenidos son:
Ea/R = -8972 Ea = 17.83 kcal/mol

ln S = 23.522; R2 = 0.9965
A partir de estos parmetros se calcul la constante a 25 C as como

su intervalo de confianza:
k25C = 0.0013804 h-1;

(lmite inferior = Ho.0001417 h-1- lmite superior = Ho.01344 h-1)
t 90% = 0.105/0.01344 = 7.84 horas
Como se podr observar, el intervalo de confianza es demasiado

amplio. El valor calculado de la constante de velocidad a 25 C, tomado
del lmite superior del intervalo de confianza al 95%, es aun mayor que
la constante a 40 C (0.006 h -1). Esto deriva de la circunstancia de que
tan solo son 3 puntos experimentales, lo cual redunda en valores de
tablas para t/2 (n-2) demasiado grandes (t0.05/2 (3-2) =12.7062).
Debido a esta circunstancia, se ha recomendado el uso de un modelo
matemtico que nos proporcione valores de prediccin que consideren
no solo los 3 puntos de la constante de velocidad, sino todos los puntos
usados para calcular cada una de esas constantes, esto es, el uso de
todos los valores de concentracin de los perfiles de degradacin a las
diferentes temperaturas. Partiendo de las ecuaciones de cintica de
primer orden y la ecuacin de Arrhenius, se sustituye y se obtiene una
nueva ecuacin para la concentracin con respecto al tiempo y a la
temperatura:
K = A exp (-Ea/RT)
C = Co exp (k t)
C(t, T) = Co exp [A exp(-Ea/RT) t ] (II. 16)
La ecuacin II. 16 describe la dependencia bidimensional de la

concentracin [C (t, T)], de los tres parmetros primarios, la
concentracin inicial (Co), el factor de frecuencia (A) y la energa de
activacin (Ea). La determinacin de estos tres parmetros primarios,
64
como coeficientes de regresin del total de los datos a travs de una

regresin no lineal, sera una solucin al problema (10). Otro modelo
matemtico similar se describe en (11).
Un caso especial del efecto de la temperatura sobre la velocidad de
reaccin es el caso de las suspensiones. Es comn encontrar
dificultades en los estudios acelerados debidas a cambios en la
solubilidad del frmaco, al elevar la temperatura.
En las suspensiones farmacuticas es necesario considerar que al

aumentar la temperatura para acelerar las reacciones, se incurre
tambin en un aumento en la solubilidad de los componentes de la
frmula, incluido el frmaco, lo que crea desviaciones en la ecuacin de
Arrhenius, si no se toma en cuenta este segundo factor.
Tingstad y col. (12) reportaron un mtodo para simplificar los clculos

de los estudios en este tipo de preparaciones y as poder considerar al
mismo tiempo el cambio en la solubilidad y su relacin con el cambio en
la velocidad de degradacin. Esta simplificacin se fundamenta y es slo
aplicable bajo las siguientes consideraciones:
Que la degradacin del frmaco tome lugar solamente en

solucin y de acuerdo a una cintica de primer orden.
Que el sistema frmaco-solvente obedezca las relaciones
clsicas de solubilidad-temperatura y de velocidad de
reaccin.
Que la solubilidad y velocidad de degradacin se limiten por
la velocidad de disolucin.
Ahora bien, si adems consideramos que la representacin

matemtica del orden uno de reaccin es:
- dC/dt = k1
y que cuando un frmaco est en suspensin la concentracin en

solucin se mantiene constante, debido a que al proceder la reaccin de
degradacin y bajar la concentracin en solucin se rompe el equilibrio
de saturacin del material disuelto, recuperndose este equilibrio por la
transferencia del material en suspensin a la solucin. De esta manera
65
la solucin se mantendr saturada con respecto al frmaco, mientras

exista parte del frmaco suspendido. Por esta razn podemos decir que
la reaccin sera independiente de la concentracin,
-dC/dt = k0
esto es, sera de seudo-orden cero (k 0) o de orden uno en dependencia

de la concentracin, a travs de la solubilidad a una temperatura dada.
- dC/dt = ks
Cuando la reaccin se estudia a temperaturas elevadas se observa

que la constante de seudo-orden cero cambia, debido al efecto de la
temperatura sobre la constante de primer orden y sobre la solubilidad
del frmaco en el sistema.
La manera de proceder sera la separacin inicial del efecto de la
temperatura (k) y de la solubilidad (s), que se encuentran contenidos en
la constante de orden aparente cero y que es la que experimentalmente
se observa. Con esto se calcula la estabilidad a temperatura ambiente a
partir de la energa de activacin y la solubilidad a temperatura
ambiente.
Sin olvidar las consideraciones hechas, podemos decir que:
kobs = ks * k0 ln kobs = ln ks + ln k0 (II. 17)
De una manera similar a la ecuacin de Arrhenius la relacin entre

solubilidad y temperatura es:
ln s = - Hf/ RT + constante (II. 18)
Si esta ecuacin la sumamos a la ecuacin de Arrhenius (II. 14),

entonces:
ln kobs = (Ea/RT + constante) + (Hf/RT + constante)

ln kobs = - Ea * Hf / RT + constante (II. 19)
66
De esta manera podemos calcular la constante de seudo-orden cero a

cualquier temperatura, a partir de estudios acelerados y del
conocimiento de la energa de activacin y la energa de fusin (H f) o de
disolucin.
Cuando el sistema en estudio no se adapte a las consideraciones
especificadas, se debern determinar las solubilidades a todas las
diferentes temperaturas para lograr obtener la misma informacin. De
igual manera se proceder cuando no se conozca el H f, esto es, se
deber determinar experimentalmente.
Aunque el uso ms importante de la ecuacin de Arrhenius es la
determinacin de la fecha de caducidad a temperatura ambiente,
tambin se puede usar para determinar la fecha de caducidad a otras
condiciones, por ejemplo a la temperatura de un refrigerador. Otras
condiciones de almacenamiento que podran ser calculadas son:
Si la fecha de caducidad fue calculada para refrigeracin (6 C)

cual sera el efecto sobre ella por almacenar un cierto tiempo a
temperatura ambiente? Cul sera la nueva fecha de
caducidad?
Si la fecha de caducidad fue calculada para temperatura
ambiente cul sera el efecto sobre ella si el producto se
calentara durante un cierto tiempo? Por ejemplo para esterilizar
o durante un transporte sin proteccin, Qu porcentaje de
descomposicin podra haber?
Nuestras metas para la evaluacin de los datos de estabilidad qumica

en una forma farmacutica pueden ser establecidas como la
determinacin de la fecha de caducidad y la determinacin de fechas
tentativas de estabilidad durante la formulacin, para:
a) Tomar una decisin del tiempo hasta el cual la estabilidad se

puede garantizar durante la aplicacin clnica.
b) Para tomar una decisin de qu temperaturas pueden ser
recomendadas para almacenaje en estudios clnicos o de
toxicologa.
c) Para detectar deficiencias en la estabilidad de la formulacin.
d) Para establecer o ajustar tablas de desarrollo del producto
e) Relacionar la probabilidad de que sean necesarios mayores
gastos para la formulacin.
67
Se ha establecido en numerosas ocasiones que los estudios cinticos

a temperaturas elevadas, particularmente donde la degradacin es
pequea, tienen dos objeciones bsicas, las cuales evitan su aplicacin
universal a las formulaciones y son: La incertidumbre causada por los
errores analticos y las complicaciones mecansticas, que no permiten
descripciones precisas de muchos sistemas, en particular slidos y
sistemas heterogneos. Estas objeciones son obviamente vlidas, pero
la aceptacin de ellas no debe desalentar al formulador en el
planteamiento cintico acelerado y sus sistemas de evaluacin. Ms
bien, desde el punto de vista de los formuladores, la meta puede
cambiarse, de predecir la verdadera vida en el anaquel, a predecir una
vida mnima en el anaquel. Una vida mnima en el anaquel que puede
ser obtenida en los primeros estudios y la vida en el anaquel tentativa,
despus que ms datos nos lo permitan. Con esta meta en mente es
posible Aceptar y trabajar con la incertidumbre causada por los errores
analticos. La cual puede ser minimizada ejerciendo un control sobre la
situacin por repeticin de los ensayos, para sacar promedios en lugar
de valores individuales. Esto nos permitir mantener el coeficiente de
variacin analtica bajo.
El mtodo cintico para predecir la estabilidad podra tener otros
inconvenientes. Si el mecanismo de la reaccin de descomposicin es
diferente a temperaturas altas en comparacin con temperaturas bajas,
el mtodo de la grfica de Arrhenius puede no ser vlido. Por eso hay
que usar datos de estabilidad acelerada con cuidado y con prudencia y
siempre tener al mismo tiempo experimentos a temperatura ambiente
como verificacin, ya que estos son los nicos que se permiten
actualmente para establecer una fecha de caducidad oficial o definitiva.
Tambin hay que tener en cuenta que el mtodo cintico tiene valor slo
para casos de descomposicin trmica, es decir, debido al calor, y no
para casos de deterioro debido a:
a. Congelacin
b. Bacterias u hongos
c. Donde el calor cambia la naturaleza del producto como:
1. Desnaturalizacin de enzimas o protenas en general
2. Fusin de supositorios y pomadas
3. Coalescencia de emulsiones
4. Agentes suspensores que coagulan o cambian de
viscosidad cuando se calientan
d. Agitacin
e. Reaccin fotoqumica
f. Reaccin donde el factor lmite es la difusin de oxgeno
68
II. 3. Efectos de catlisis y del pH sobre la velocidad de reaccin

La velocidad de una reaccin qumica es frecuentemente acelerada
por la presencia de sustancias que se llaman catalizadores. Un
catalizador es una sustancia que influye en la velocidad de una reaccin
sin ser cambiado qumicamente por ella. Como un catalizador
permanece inalterable al fin de una reaccin, no cambia G0 de la
reaccin. G0 puede expresarse como:
G0 = - RT ln k (II. 19)
Como no cambia G0 (el cambio de energa libre de Gibbs), tampoco

cambia la constante de equilibrio k. Por consiguiente aunque la
velocidad a la cual se establece el equilibrio aumente, la posicin de
equilibrio, la cual est indicada por la constante de equilibrio, no cambia.
Ahora bien, como:
k = kprogresiva /kregresiva (II. 20)
y k no cambia, esto quiere decir que el catalizador aumenta la velocidad

de las reacciones regresivas y progresivas en el mismo grado.
Un catalizador aumenta la velocidad de reaccin si cambia el
mecanismo o curso de la reaccin, de manera tal que la reaccin de
descomposicin del complejo activado formado con el catalizador, tiene
una energa de activacin menor que la de la descomposicin de la
molcula reaccionante misma (figura II. 12).
Un ejemplo de catlisis es la reaccin de transformacin de la
vitamina A en anhidro-vitamina A, con la participacin de protones como
catalizador. El mecanismo de reaccin en medio cido debe tener una
energa de activacin menor que en medio neutro, puesto que la
reaccin es ms rpida en medio cido.
Reacciones en cadena, tales como autoxidaciones, pueden llevarse a
cabo mediante un catalizador que proporcione radicales libres, los
cuales inician reacciones en cadena. Los radicales libres pueden
considerarse como especies intermedias inestables que contienen un
electrn no compartido.
Los fenmenos de catlisis pueden denominarse como catlisis
homognea cuando los catalizadores y los reaccionantes estn en una
69
sola fase, por ejemplo catlisis cido-base. Se llaman de catlisis

heterognea cuando el catalizador est en una fase aparte, como por
ejemplo, cuando los catalizadores son slidos como el platino y nquel.
La adsorcin del compuesto reaccionante sobre el catalizador debilita los
enlaces qumicos del compuesto dando una energa de activacin
menor.
Muchas reacciones en solucin son catalizadas por iones hidrgeno u
oxidrilo, y muchos principios activos no son estables fuera de un margen
estrecho de pH. La relacin entre el pH y la estabilidad tiene que ser
estudiada para cada sistema. La catlisis de una reaccin qumica por
iones hidrgeno y oxidrilo es conocida como catlisis cido-base
especfica.
Si tomamos como ejemplo la hidrlisis de un ster a un pH definido en
la regin en donde la catlisis se realiza principalmente por iones
hidrgeno, entonces:
Velocidad = KH+ [H+] [ster] (II. 21)

kob = KH+ [H+] (II. 22)
en donde KH es la constante de velocidad de la catlisis cida.

A un pH definido, KH+[H+] tambin es constante y la constante total de
la reaccin es Kob.
Aplicando logaritmos a la ecuacin II. 22:
Log Kob = log [H+] + log KH+ (II. 23)
y puesto que log [H+] = - pH, entonces:
Log Kob = - pH + log KH+ (II. 24)
70
Reaccin no catalizada
Gsin cat.
ENERGA
Reaccin
Gcon cat. catalizada
Reaccionantes G0
Productos
Figura II. 12. Representacin esquemtica mostrando como una

reaccin catalizada tiene una menor energa libre de activacin que
la no catalizada.
La ecuacin II. 24 es la de una lnea recta si graficamos log K en

funcin de pH, la pendiente es igual a -1. De la misma manera la
pendiente de la lnea en la regin alcalina es +1. En la regin neutra de
nuestro ejemplo la reaccin de catlisis es despreciable y no
observamos ninguna variacin de la constante de velocidad con el pH.
La velocidad en esta regin intermedia es:
Velocidad = ko [ster] (II. 25)
En donde ko es la constante de velocidad de la reaccin espontnea, y

la cual se determina directamente de la grfica. La mutarrotacin de la
glucosa muestra las variaciones del tipo mencionado.
Se sabe actualmente que una Catlisis cido-base general involucra

no solo H+ y OH -, sino a toda clase de cidos o bases en el sentido de
la teora de Bronsted-Lowry, los cuales pueden actuar como
catalizadores.
71
Tenemos por ejemplo la molcula entera de cido actico [Hac] como

cido y el in acetato [Ac -] como base. (Este concepto ms amplio de
cidos y bases tambin se usa con las titulaciones no acuosas).
Los amortiguadores actan a veces como catalizadores cido-base
generales y por eso hay que tomar en cuenta esto, en un estudio de
catlisis cido-base, donde se usa un amortiguador para mantener
constante el pH de la solucin.
Un ejemplo de catlisis por protones, es el reportado por Schlecht y
Frank (13). Se trata de la deshidratacin de tetraciclina en funcin del
pH y de la temperatura. En este estudio se observa que la reaccin es
de primer orden con respecto a la concentracin de la tetraciclina, as
como tambin con respecto a la concentracin de protones. En este
estudio se muestra que la constante de velocidad observada o
experimental corresponde con la velocidad de la reaccin, siempre y
cuando no cambie la concentracin de protones, o sea que el pH se
mantenga constante. Por otro lado se observa que el efecto del pH
corresponde a la ley general antes aplicada, esto es:
Velocidad = Kobs -a pH constante

Velocidad = K [H+] -a pH variable
En las figuras II. 13 y II. 14 se puede observar la relacin entre la

constante observada (Kobs) y la temperatura, as como entre la K obs y la
concentracin de protones.
72
1.6
1.2
log ko * 100 000
0.8
0.4
0
3.12 3.16 3.2 3.24 3.28 3.32
1000/T (1000/K)
Figura II. 13. Relacin de la constante de velocidad observada para

la deshidratacin de tetraciclina con respecto al inverso de la
temperatura.
Un ejemplo de la catlisis general cido-base es la degradacin de

Abbott79175 (9), la cual se ve afectada por la concentracin del
amortiguador usado para controlar el pH. En este caso los
amortiguadores empleados fueron fosfato, acetato y carbonato de sodio.
Para el sistema con pH de 2 y 3 se considera que el H 3PO4 es el de
mayor actividad cataltica, mientras que a pH de 6-7, los datos sugieren
que la mayor actividad cataltica se asocia con las mayores proporciones
de H2PO4 -. La figura II. 15 nos muestra el efecto de la concentracin del
amortiguador sobre la constante de velocidad de la reaccin observada.
Independientemente del efecto de la concentracin del amortiguador,
el efecto del pH o catlisis cido-base especfica se observa en la figura
II. 16, como la relacin del logaritmo de la constante de degradacin
contra el pH, a 40 C. Los puntos de sta grfica representan las
constantes de velocidad a una concentracin de amortiguador de cero,
obtenidas de las grficas de la constante observada (k obs) contra la
concentracin del amortiguador (figura II.15). Se considera que en
principio la sustancia Abbott 79175 podra sufrir reacciones de
degradacin por solvlisis de diferentes tipos, como los registrados en la
tabla II. 5.
73
0.8
0.6
ko (1/s) * 10 000
0.4
0.2
0
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1
CONCENTRACIN [H+]
Figura II. 14. Efecto de la concentracin de protones [H+] sobre la

constante de velocidad de degradacin de tetraciclina (12).
pH=2 pH=3
4
3
kobs (1/horas)
0
0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25
AMORTIGUADOR (moles)
Figura II. 15. Efecto de la concentracin de amortiguador de fosfatos

sobre la constante de degradacin observada de Abbott-79175, a
40 C y = 0.5.
74
Tabla II. 5. Posibles vas de degradacin de una sustancia que sufre

hidrlisis en solucin acuosa.
Va de degradacin Tipo de reaccin
A + H2O Productos Hidrlisis no catalizada

A + H+ + H2O Productos Catlisis especfica cida
A + OH- Productos Catlisis especifica bsica
A + HQ Productos Catlisis por amortiguador
A+ Q Productos (HQ/Q- del amortiguador)
100
1
ko (1/horas)
0.01
0.0001
1 2 5 10 12
pH
Figura II. 16. Relacin de la constante de velocidad, a cero de

concentracin de amortiguador, con respecto al pH, para Abbott
79175 a 40 C y = 0.5.
La forma general del perfil de la constante de degradacin contra el pH

nos indica que Abbott-79175 es muy lbil a la catlisis cida (figura
II.16) y que prcticamente es insensible a las bases. El efecto que se
observa de incremento de la velocidad de degradacin despus de pH =
8 se atribuira a la ionizacin de la molcula, la cual reacciona
directamente con el solvente. Cuando la molcula de Abbott-79175 se
ha ionizado completamente, la velocidad deja de aumentar. La
explicacin en trminos electrostticos sera que la molcula cargada
75
negativamente no sera susceptible de ser atacada nucleoflicamente

por OH-. Esta circunstancia permite deducir que el escenario ms
probable sea el ataque del agua para provocar la hidrlisis.
El trmino se refiere a la fuerza inica y se define como:
= 0.5 mi Zi2 (II. 26)
Donde mi es la molalidad del esimo ion y Z i es la carga del esimo ion.

Tomando como ejemplo el cloruro de calcio y suponiendo que se
encuentra totalmente disociado en solucin. Entonces, la disociacin nos
proporcionara dos iones de cloruro y uno de calcio con dos cargas, esto
significa una relacin 2:1, por lo que la fuerza inica de esa solucin
sera:
= 0.5 [(m*22) + (2m*12)] = 3M
Para un electrolito fuerte con una relacin 1:1, = m. En el caso de

electrolitos dbiles como el cido actico o acetatos, se debe tomar en
cuenta el grado de disociacin para estimar la fuerza inica:
=m (II. 27)
II. 4. Efecto de la asociacin o inclusin a otras substancias

sobre la estabilidad
Es obvio que en muchos casos los frmacos podran complejarse con
uno o ms de los ingredientes de la formulacin. En algunos casos esta
asociacin es intencional, con el fin de mejorar alguna caracterstica
como la biodisponibilidad o para mejorar la estabilidad, aunque se ha
observado tambin que en muchos casos ocurre lo contrario. Sera
casualidad el que tanto el complejo como la forma pura de un frmaco
presentasen la misma velocidad de degradacin, por lo que
regularmente se presentaran dos velocidades de degradacin, una para
la forma pura y otra para la forma complejada, la cual esperamos
siempre sea menor. Por muchos aos la cafena y la polivinilpirrolidona
fueron los complejantes mas usados, sin embargo, actualmente se usan
tambin las ciclodextrinas y en la misma circunstancia quisiera
considerar a los tensoactivos.
76
II. 4. 1. Efecto de los tensoactivos sobre la estabilidad
La adicin de substancias tensoactivas ocasiona comnmente una

mejora en la estabilidad de los preparados farmacuticos que sufren
hidrlisis.
Se puede imaginar que los frmacos envueltos en las micelas

formadas por los tensoactivos se vean protegidos estricamente de su
degradacin. Frmacos que se degradan por catlisis alcalina se ven
mejor protegidos por tensoactivos aninicos. Parece ser que las micelas
cargadas negativamente constituyen una barrera para los iones OH-,
aunque la proteccin del frmaco pudiera tambin explicarse por la
formacin de un complejo entre el frmaco y la fase micelar. Mientras
mayor sea la concentracin del tensoactivo, mayor ser la estabilidad
del frmaco, aunque cabe hacer notar que existe un lmite despus del
cual ya no hay mayor efecto.
Cuando los frmacos penetran las micelas su medio ambiente
molecular cambia, alterando la proximidad y la orientacin de las
molculas. El solo hecho de que las micelas aslen o protejan al frmaco
de especies atacantes como los protones e hidroxilos aumentara la
estabilidad del frmaco. Aunque debe considerarse que la velocidad de
aproximacin de los iones y especies cargadas a las micelas podra ser
disminuida o aumentada, dependiendo de la naturaleza de la superficie
micelar. El medio ambiente micelar es suficientemente diferente de un
medio acuoso simple, por lo que las reacciones pueden cambiar
dramticamente de un medio a otro. En general, se considera que el
efecto de los tensoactivos sobre la estabilidad es un efecto secundario al
que regularmente se persigue, que regularmente es la solubilizacin,
aunque los tensoactivos podran usarse tambin para estabilizar
frmacos lbiles (13).
En los casos en que se ha reportado un efecto desestabilizante como
la catlisis de un proceso de degradacin debida a micelas, en
soluciones acuosas, como la catlisis de steres de p-nitrofenilo, se
menciona como causa la posible estabilizacin electrosttica de un
intermediario. Sin embargo, en el efecto de los tensoactivos no inicos
que afectan negativamente la estabilidad, la causa sera el medio
ambiente micelar, su grado de hidratacin relativo y la posibilidad de
ordenar espacialmente a las molculas que reaccionan. Las micelas no-
inicas son generalmente protectoras. Por ejemplo, los steres del cido
nicotnico que se localizan en el interior hidrfobo de las micelas as
77
como en el exterior hidroflico se estabilizan a travs de su interaccin

con las micelas (13).
La estabilidad de la homatropina a diferentes temperaturas es un
caso de estabilizacin con tensoactivos no-inicos, el ter lurico de
polioxietileno (figura II. 17) y el polisorbato 80. La capacidad de los
tensoactivos no-inicos para proteger al frmaco es menor a
temperaturas altas (70 C), requirindose hasta 10% de polisorbato 80
para mostrar un efecto significativo sobre la constante de velocidad de
degradacin.
En un estudio acerca de la catlisis bsica de la hidrlisis de la
benzocana se propone que la velocidad de hidrlisis pueda expresarse
con la ecuacin:
- (Va + Vm) dc/dt = ka Vm Ca + km Vm Cm (II. 26)
Donde Vm es el volumen de las micelas, V a es el volumen de la fase

acuosa alcalina, Ca es la concentracin del ster en la fase acuosa y C m
la concentracin en la fase micelar, k a y km son las correspondientes
constantes de velocidad de degradacin de seudo-orden uno; c es la
concentracin promedio del ster {(Va Ca + Vm Cm)/(Vm Cm)}. El
coeficiente de particin del ster (P m) estara dado por Cm/ Ca.
Sustituyendo Pm nos lleva a la constante medida en la reaccin:
k = -(d ln c/dt) = { (ka - km )/1 + Pm (Vm / Va )} + km (II. 27)
0.4 70 C 30 C 50 C
0.12
0.3
0.09 Para:
30 C
k (1/hora)
50 C
0.2
0.06
0.1 0.03
0 0
0 5 10 15
ter Lurico de Polioxietileno (%-peso/volumen)
78
Figura II. 17. Efecto de la concentracin de tensoactivo sobre las

constantes de velocidad de degradacin de Homatropina a pH de 8,
a diferentes temperaturas (14).
La indometacina, un frmaco poco soluble en agua y que sufre de

hidrlisis en medio alcalino, adems de sufrir de degradacin fotoltica,
fue estabilizado por la presencia de diferentes pluronics (F-68, F-88 y F-
108) (15). La degradacin de indometacina en solucin alcalina fue de
primer orden, obtenindose una lnea recta al graficar el logaritmo de la
concentracin a un tiempo dado, menos la concentracin final o de
equilibrio en la solucin, contra el tiempo. La presencia de pluronic en la
solucin disminuy el valor de la constante de velocidad observada para
la degradacin, de acuerdo a su concentracin y al tipo de pluronic
empleado (figura II. 18).
Si bien todos los pluronic disminuyen la velocidad de degradacin de
la indometacina, el F-108 fue el mejor, seguido del F-88 y finalmente el
que ofreci menos proteccin para evitar la degradacin fue el F-68.
Debido a que el pluronic es un tensoactivo no-inico, se presume que la
solubilizacin micelar de la indometacina sera la responsable de la
inhibicin del proceso de degradacin.
F-108 F-88 F-68

10
k obs (1/min) * 100
0
0 6 12
PLURONIC (mol/1000)
Figura II. 18. Efecto de la concentracin de pluronic sobre la k

observada de degradacin de indometacina en solucin alcalina, a
45 C.
79
La degradacin fotoqumica de la indometacina se observ como de

orden cero y solo el pluronic F-68 esta reportado como protector contra
la degradacin provocada por la luz. La presencia del pluronic F-68
(5.98*10-3 M) aument la vida media de la indometacina de 112 horas a
168 horas, cuando se expuso a 40 000 lux y 40 C durante
aproximadamente un mes. Esto nos muestra que los tensoactivos
tambin podran usarse para la proteccin de frmacos contra los
efectos de degradacin provocados por la luz.
En otro caso, la benzocana fue protegida del efecto negativo causado
por la radiacin usada para esterilizacin ( 60Co) por los tensoactivos
cetrimida y polisorbato 80. Sin embargo, la presencia de cosolventes
como el etanol, la glicerina y el polioxietilenglicol 200, usados en
concentraciones de hasta 40%, fueron ms efectivos para dar la misma
proteccin contra la degradacin causada por radiaciones de hasta 0.3
Mrad.
El ditranol, un frmaco usado en el tratamiento de la soriasis, vio
afectada de manera importante su estabilidad, dependiendo de la
seleccin del tensoactivo usado en la formulacin. El uso de cetrimida
(0.05M) mostr una degradacin muy rpida del ditranol, 100% en 3
horas, mientras que con el uso de laurilsulfato de sodio o de Tween 80 se
degrad en el mismo tiempo menos de 10% del frmaco. Con
laurilsulfato de sodio fueron necesarias 30 horas para degradar el 100%
del frmaco, mientras que se requirieron 40 horas cuando se us Tween
80 (16).
II. 4. 2. Efecto de las ciclodextrinas sobre la estabilidad

Durante los ltimos 15 o 20 aos las ciclodextrinas han sido objeto de
muchas investigaciones, debido a su estructura que es capaz de impartir
diferentes propiedades fisicoqumicas a los frmacos. Las ciclodextrinas
ms conocidas son la, la y la, las cuales corresponden con la
ciclohexaamilosa, la cicloheptaamilosa y la ciclooctaamilosa. Estos
compuestos tienen una estructura en forma de dona, con una cavidad
central no-polar y con una parte externa hidroflica. La -ciclodextrina es
la ms comn debido a su menor costo, comparado con el de las otras.
Las ciclodextrinas, como carbohidratos cclicos, son capaces de
formar complejos de inclusin con varios compuestos poco solubles en
agua, incrementando su solubilidad y/o estabilidad. Sin embargo,
substancias como la -ciclodextrina con caractersticas de baja
solubilidad, actividad hemoltica y potencialmente txica para el rin
han disminuido la posibilidad de su utilizacin. Por otro lado, se han
generado otros derivados como la 2-hidroxipropil--ciclodextrina (HPCD),
la cual siendo muy soluble en agua, retiene aun sus propiedades para
formar complejos de inclusin, adems de presentar una baja toxicidad.
80
La encapsulacin de frmacos con ciclodextrinas, de manera similar

al mecanismo mencionado para el efecto protector de los tensoactivos,
representa un medio muy til para incrementar la estabilidad de las
formulaciones farmacuticas. Adems, se sugiere como un mecanismo
para aumentar la eficiencia de los sistemas de liberacin de frmacos,
sin alterar la composicin qumica del principio activo (17).
Entre las posibilidades de utilizacin farmacutica de las ciclodextrinas

se mencionan:
Modificacin de las propiedades fisicoqumicas de los frmacos

Aumento de la estabilidad fsica y qumica
Facilitacin de la biodisponibilidad de frmacos poco solubles y poco
absorbibles
Aseguramiento de la uniformidad del contenido de formas
farmacuticas slidas de extremadamente baja dosificacin
Posible reduccin de algunos efectos indeseables de los frmacos
En el uso de sus propiedades de estabilizacin, la encapsulacin con

ciclodextrinas tiene como objetivo el aumentar la estabilidad de
frmacos sensibles, protegindolos del medio circundante. La
complejacin con ciclodextrinas es un proceso en el mbito molecular
que permite atrapar molculas individuales del frmaco dentro de la
ciclodextrina, limitando su interaccin con el resto de los componentes
de la formulacin. Este efecto estabilizador se presenta tanto en el
estado slido as como en las soluciones, sin embargo, el efecto es mas
pronunciado en los slidos. Esto se debe a que en solucin el complejo
se disocia gradualmente debido a la presencia de agua. La complejacin
es un proceso reversible.
Otra propiedad de estabilizacin de productos farmacuticos de las
ciclodextrinas es su proteccin contra la posible evaporacin de
substancias que muestran presiones de vapor elevadas. La complejacin
de aceites esenciales permite su estabilizacin, por ejemplo, se dice que
el mentol se desprendera de su complejo solo hasta los 100 C. La
formacin de los complejos de inclusin aumenta el punto de ebullicin
y la temperatura de evaporacin de los productos originales. Tambin
puede aumentar el punto de fusin y la temperatura de sublimacin. Por
ejemplo, Uekama ha demostrado la disminucin de la formacin de
81
cristales sobre la superficie de tabletas de mononitrato de isosorbide

cuando se uso el complejo en lugar del compuesto original (18)
La encapsulacin molecular de substancias fcilmente oxidables
como el cido linoleico tambin condujo a una proteccin del mismo,
debido a la dificultad que el complejo ofreca a la penetracin del
oxigeno dentro de la cavidad de la ciclodextrina donde se encontraba el
cido linoleico (17).
El mtodo ms comn de obtencin de los complejos es a travs de
su aislamiento desde sus soluciones acuosas saturadas, aunque tambin
es posible obtenerlos por amasado, por molienda y por fusin (18).
En productos como las emulsiones, en donde se presenta un contacto
muy ntimo entre los excipientes y los frmacos, la inclusin de los
frmacos en ciclodextrinas tambin puede mejorar su estabilidad. En el
caso del frmaco TPB, el cual se incorpor a una emulsin aceite/agua,
se estudio su estabilidad durante un mes, a 40 C (18). Los resultados
muestran una mayor estabilidad del producto en forma de inclusin
(prdida del 5%), en comparacin con el TPN original (prdida de
aproximadamente 40%) (Figura II. 19).
Los resultados presentados parecen demostrar que la formacin de
complejos de inclusin en ciclodextrinas generalmente da buena
estabilidad a los frmacos. Sin embargo, este no es siempre el caso,
particularmente para la estabilidad en medio acuoso. En este caso, los
resultados dependen de la naturaleza de la sustancia incluida, del tipo
de ciclo dextrina y del pH del medio, por lo que no se puede generalizar
el resultado.
100
75
82
Complejo de inclusin TPN puro
TPN (%)
50
0 10 20 30 40
TIEMPO (das)
Figura II. 19. Estabilidad de TPN puro y como complejo de inclusin

en una emulsin aceite/agua a 40 C.
El uso de la 2-hidroxipropil--ciclodextrina (HPCD) para la formacin

de un complejo de inclusin con famotidina disminuy la velocidad de su
degradacin hidroltica en medio cido (19). La degradacin de primer
orden de la famotidina disminuy su velocidad en funcin del aumento
de la cantidad usada de HPCD para formar el complejo de inclusin.
Presentando una relacin no lineal de la kobs contra la concentracin de
HPCD (figura II. 20).
Para la cintica de reaccin se postul el siguiente esquema:
kst
Frmaco + HPCD Frmaco:HPCD
ko
kc
Productos + HPCD
Donde ko es la constante de velocidad de degradacin observada del

frmaco puro, kc es la constante de velocidad observada para la
degradacin del complejo y kst es la constante aparente de estabilidad
para la formacin del complejo, suponiendo una relacin de
complejacin 1:1. Bajo estas condiciones la ecuacin para la velocidad
del cambio de la concentracin total del frmaco [frmaco] T es:
83
-d [frmaco]T/dt = ko [frmaco] + kc [frmaco:HPCD] (II. 28)
0.05
0.04
kobs (1/hora)
0.03
0.02
0.01
0 5 10 15 20 25
2-hidroxipropil-beta-ciclodextrina (% p/v)
Figura II. 20. Efecto de la concentracin de HPCD sobre la k obs de

degradacin de famotidina a pH de 2 y temperatura de 37 C
Si consideramos la ecuacin que describe a kst (II. 29), la cual resulta

de una grfica del aumento en la concentracin de famotidina en
solucin (moles) conforme se aumenta la concentracin de HPCD
(moles), y la integramos a la ecuacin II. 28, entonces el resultado sera:
kst = pendiente/intercepto (1/pendiente) (II. 29)

ko/(ko kobs) = ko/ kst (ko -ko ) [HPCD] + ko / (ko - kc) (II. 30)
La ecuacin II. 30 nos representa una lnea recta que se conoce como
grfica de Lineweaver-Burk, como se observa en la figura II. 21.
El valor obtenido para kc fue de 1.97 * 10-3 hora-1, mientras que para
kst se calcul un valor de 12.98 mol -1, el cual se obtuvo de dividir el
intercepto entre la pendiente de la curva de la figura II. 21. Estos
resultados muestran que la famotidina se degrada ms rpido que su
complejo con HPCD, esto es, que la formacin del complejo aumenta la
estabilidad de la famotidina 22 veces, a pH de 2 y a 37 C. Cuando el pH
fue de 7.4 se observ que la famotidina, ya en forma ionizada, no forma
un complejo de inclusin estable con la HPCD (19).
84
8
y = 0.0805x + 1.0113
R2 = 0.9979
6
ko/(ko-kobs)
0
0 20 40 60 80
1/HPCD (1/moles)
Figura II. 21. Grfica de Lineweaver-Burk para los datos de la figura

II. 18, de acuerdo a la ecuacin II. 30.
II. 4. 3. Efecto de la complejacin con cafena sobre la estabilidad

Las fenotiazinas son molculas que tienen capacidad para formar
estructuras micelares cuando sobrepasan su concentracin micelar
crtica. El impacto de la complejacin con cafena sobre la estabilidad de
algunas fenotiazinas fue estudiado a concentraciones de cafena
correspondientes a la estequiometra de los complejos frmaco-cafena y
con muestras expuestas a la luz solar directa (20). En este estudio se
encontr que las soluciones de fenotiazinas por encima de la
concentracin micelar crtica (CMC) fueron ms estables que aquellas
soluciones en que las fenotiazinas no formaron micelas. La complejacin
con cafena disminuy la estabilidad fotoqumica de promazina, y de
clorpromazina. Sin embargo, la complejacin con cafena de la
triflupromazina mejor su estabilidad fotoqumica.
Como puede observarse en la figura II. 22, la formacin de micelas
por parte de las molculas de la triflupromazina le protege de la
degradacin, con o sin la formacin de complejos con la cafena. La
formacin del complejo con cafena sin embargo disminuye tambin su
degradacin tanto en la presencia de micelas as como en ausencia de
estas.
85
Bajo
CMC sin
TRIFLUPROMAZINA.HCl (%)
95
Caf.
Bajo
CMC con
Caf.
85
Sobre
CMC sin
Caf.
Sobre
CMC con
75
Caf.
0 2 4 6 8
TIEMPO (horas)
Figura II. 22. Efecto de la complejacin con cafena y de la presencia

de micelas sobre la degradacin fotoqumica del clorhidrato de
triflupromazina en solucin.
Al igual que en algunos casos como los mencionados en prrafos

anteriores, el efecto de la asociacin de los frmacos a otras molculas
puede tener efectos para mejorar la estabilidad, para empeorarla o
ningn efecto. El aumento de la estabilidad de las otras fenotiazinas, se
debe probablemente a la presencia de una carga negativa muy fuerte
sobre el tomo de azufre, como consecuencia de la presencia de flor en
la molcula de la triflupromazina. De esta manera, la cafena se puede
complejar muy fuertemente con la triflupromazina, protegiendo de la
oxidacin al tomo de azufre. En las otras fenotiazinas la
electronegatividad del tomo de azufre es muy dbil y por eso las
fenotiazinas estaran mucho ms expuestas a la oxidacin.
II. 5. Efecto de la humedad en sistemas slidos sobre la

velocidad de reaccin
Existen otros factores que influyen la velocidad de degradacin de los
frmacos y que con el tiempo han venido cobrando mayor importancia
por su efecto sobre la velocidad de reaccin. Despus de haber
analizado el efecto de la temperatura, de la catlisis y de substancias
como los tensoactivos y las ciclodextrinas sobre la velocidad de
reaccin, vemos que estos no son los nicos que puede alterar la
velocidad, sino que pueden presentarse otros que en su momento
86
limitan o al menos hacen ms compleja la estabilidad de los productos

farmacuticos.
Los mayores problemas de estabilidad en formas de dosificacin
slidas son causados por procesos solvolticos que tienen como
consecuencia una degradacin. La ruptura de un enlace primario es un
proceso energticamente costoso y una molcula en un cristal intacto
puede descomponerse mejor si es removida de su posicin en el cristal y
llevada a un ntimo contacto con las especies atacantes.
La presencia de un solvente, como residuo de una granulacin, como
una inclusin y aun aquel adquirido desde el medio ambiente, puede
remover molculas de los cristales y contribuir a su degradacin
solvoltica. En este caso los aspectos limitantes pueden ser la
transferencia de humedad sobre o dentro del cristal. (21, 22, 23). El
modelo ms simple del efecto de la humedad sobre la estabilidad de un
frmaco slido se visualiza como el efecto de una capa de agua que se
encuentra adsorbida sobre el slido. El agua adsorbida disolvera al
frmaco parcialmente, formando una solucin saturada y as facilitara
su degradacin. Bajo este modelo, la descomposicin de un frmaco, en
funcin del tiempo, presentara una relacin sigmoidea, en la cual un
periodo inicial de induccin se atribuira al tiempo necesario para la
adsorcin de humedad sobre la superficie del frmaco cristalino, en
funcin de la presin de vapor. La descomposicin del frmaco ocurrira
entonces en solucin. Tan pronto como una molcula del frmaco se
hidroliza, es remplazada desde el cristal, para mantener la solucin
saturada.
En algunas situaciones como en la descomposicin de los cidos p-
aminosaliclicos, en funcin del contenido de humedad, se ha intentado
extrapolar las constantes de degradacin de seudo-orden cero hasta el
estado anhidro, esto es, hasta una humedad de cero. Sin embargo, el
valor extrapolado no corresponde con cero de humedad sino con un
valor de humedad que no esta disponible para el proceso de
degradacin (agua enlazada) y solo hasta que se sobrepasa este limite
es que el agua esta disponible para el proceso de degradacin (agua
libre). El agua no disponible se ha denominado tambin agua inmvil.
Se puede considerar a la humedad quiz como el factor ms
importante en la estabilidad de las formas farmacuticas. La adsorcin
directa de molculas de agua sobre la superficie del frmaco puede
inducir fcilmente la hidrlisis. Cuando las molculas de agua se
adsorben en la interfase frmaco-excipiente, el agua puede permitir la
ionizacin de estos componentes, permitiendo una interaccin que de
otro modo no se presentara. El efecto que la humedad ejerce sobre la
estabilidad depende de su asociacin con los frmacos y excipientes. En
trminos generales, en esta asociacin se define como agua libre a
aquella que puede ser extrada por continuos enjuagues de los slidos,
87
con un determinado solvente en el cual el slido sea insoluble. El agua

total es aquella que pude titularse despus de la disolucin de los
slidos e incluye el agua de cristalizacin. El agua enlazada es la
diferencia entre el agua total y el agua libre. Regularmente la
degradacin causada por la humedad depende de la cantidad de agua
libre. Algunos casos se desvan de este comportamiento debido a la
degradacin concomitante por otros mecanismos como podra ser la
oxidacin.
El efecto de la humedad sobre la estabilidad de formas farmacuticas
slidas es ampliamente discutido por Carstensen (24). Desde un punto
de vista prctico, se observ en un estudio sobre tabletas de las
vitaminas A, B y C, el efecto que tenan diferentes excipientes con
relacin a su contenido de humedad inicial. Se not que a mayor
contenido de humedad en el excipiente, corresponda una mayor
degradacin del frmaco.
Se considera en general que los excipientes sean en muchos casos
inertes por si mismos y que la capa de agua adsorbida por ellos sea en
realidad el factor de inestabilidad. La hidrlisis en el estado slido de un
frmaco requiere de su solubilizacin en la capa de agua adsorbida. Un
frmaco se disolver parcialmente en una cantidad acorde al volumen
de agua libre disponible y su velocidad de degradacin ocurrir con una
cintica de orden cero mientras exista frmaco slido que permita
mantener una solucin saturada del mismo. Cuando no haya mas
frmaco disponible para lograr la saturacin, entonces se observar una
cintica de primer orden
Uno de los mecanismos que contribuyen para el efecto de la
humedad sobre la estabilidad sera su capacidad para alterar el pH del
microambiente en la interfase frmaco-excipiente. El ajuste de este pH,
a travs de una seleccin adecuada de excipientes, los cuales podran
modificar el pH por su presencia misma o formando, con otras
substancias presentes en la frmula, un amortiguador con un pH que
dara por resultado una mnima velocidad de degradacin.
En un trabajo mencionado por Lachman (21), Yamamoto y
colaboradores, investigaron la influencia, no directamente de la
humedad sino de la higroscopicidad, que es una medida de la afinidad
de las sustancias por el agua. Este estudio se realiz sobre el cido
ascrbico, observndose que sustancias no-higroscpicas, no tenan
prcticamente ningn efecto sobre la estabilidad del cido ascrbico,
debido a que la humedad era absorbida directamente por el cido
ascrbico y no a travs de los excipientes.
Con excipientes como la lactosa y el carbonato de calcio, los cuales
son poco solubles en agua, se observa nuevamente muy poca influencia
sobre la degradacin del cido ascrbico. Sin embargo, con excipientes
muy solubles en agua como el azcar comn, la glucosa y el cloruro de
88
sodio, el principio activo se disuelve en una solucin saturada del

excipiente, dando por resultado una disminucin de la estabilidad.
Cuando se utiliz en las tabletas excipientes insolubles, pero que son
capaces de adsorber grandes cantidades de humedad, se observ que
despus de cierta concentracin de humedad se reduca notablemente
la estabilidad. Esto quiere decir que a contenidos bajos de humedad,
sustancias como el Aerosil, enlazan el agua que absorben protegiendo al
cido ascrbico de la degradacin. Conforme se sobrepasa la capacidad
de enlazamiento de agua por este tipo de excipientes, ya no solo no
actan como protectores, sino que por el contrario catalizan la reaccin,
por lo que la estabilidad se ve disminuida.
Se ha mencionado cual es la influencia del contenido de la humedad
de los excipientes as como de la capacidad de los mismos para
absorber agua, en relacin con la estabilidad. Lo anterior se observ
examinando el efecto de los excipientes individuales, sin embargo, hay
otras posibilidades de influencia de los mismos en conjunto, en relacin
con las caractersticas de una tableta, ya como una forma farmacutica
terminada.
Para una tableta la velocidad de ganancia de humedad a partir del
aire, se relaciona con las caractersticas fsicas de la misma, tales como
su rea superficial, su porosidad (21) y su dureza. Al aumentar la dureza
de una tableta, se disminuye la velocidad de transferencia de humedad
a travs de la misma, por lo cual la velocidad de ganancia de humedad
tambin se ve disminuida. Este aumento de dureza de las tabletas
mejora su estabilidad, al ganar ms lentamente la humedad que podra
generar o facilitar una reaccin de degradacin.
La comprobacin se dio en tabletas de sulfato ferroso, las cuales se
obtuvieron con una dureza de 6, 8 y 10 unidades Strong-Cobb. Estas
tabletas se sometieron durante 3 das a una humedad relativa de 93%,
obtenindose una ganancia de humedad de 8.5%, 7.2% y 6.8%
respectivamente. La degradacin de sulfato ferroso se encontr acorde
con la ganancia de humedad, siendo de 31.7%, 28.3% y 24.1%
respectivamente, lo que demuestra lo dicho en el prrafo anterior.
Un ejemplo del efecto la adsorcin de humedad y la dureza de las
tabletas sobre la estabilidad es el de las tabletas de cido ascrbico
(25). El orden en que se observa la degradacin del cido ascrbico en
la figura II. 23 nos permite ver que adems de las tabletas con manitol-
almidn-PVP, las que tienen lactosa son las que presentan el mayor
deterioro del cido ascrbico, esto sera debido a que son las que
adquirieron la mayor cantidad de humedad, debido a que sus
componentes atraen mayor proporcin de humedad y/o a que sus
tabletas mostraron las menores durezas. En el caso del sulfato de calcio
y de la celulosa el resultado es aparente ya que el sulfato de calcio es
mucho menos higroscpico que la celulosa y sin embargo muestra
89
menor estabilidad en su contenido que las tabletas de celulosa. Esto es

debido a que la celulosa da tabletas mucho mas duras (20.7 unidades)
que el sulfato de calcio (6.0 unidades). Sin embargo, cuando estos dos
excipientes se compararon en tabletas de igual dureza, de aspirina, el
sulfato de calcio produjo tabletas ms estables a cualquier condicin de
humedad.
Figura II. 23. Efecto de la humedad relativa de
Sulfato de
Calcio
90
C. ASCRBICO (%)
Celulosa
60 Lactosa
Manitol-
30 almidn-
PVP
0
0 25 50 75 100
HUMEDAD RELATIVA (%)
almacenamiento sobre la estabilidad de cido ascrbico a

50 C, despus de 2 meses de almacenamiento. Datos
obtenidos de (25).
En el caso de las tabletas con manitol-almidn-PVP, en las cuales el

deterioro del cido ascrbico fue considerable, aun cuando su dureza fue
de 7, el efecto se atribuye a la gran higroscopicidad del PVP, el cual
atraera mas la humedad y con ello un mayor deterioro de las tabletas.
Se puede decir que los excipientes que son capaces de adsorber poca
humedad y que dan tabletas no porosas (duras), aparentemente
produciran las mejores matrices para tabletas de frmacos sensibles a
la humedad.
En algunos casos se ha observado que la mxima velocidad de
degradacin promovida por la humedad, no ocurre a la mxima
humedad relativa del medio ambiente, como sera de esperarse, ya que
esto permitira la mxima adquisicin de humedad por el producto. En
un estudio con el clorhidrato de ranitidina, aunque se observ que a
humedades mayores a la humedad relativa crtica (67%) la cantidad de
agua adsorbida sobre la muestra fue proporcional a la humedad relativa,
90
la degradacin del producto fue mayor a humedades relativas entre 60%

y 70%, en comparacin con aquellas humedades tanto mayores (mas
del 70%) as como menores (menos del 50%). La explicacin que se da,
aunque no bien argumentada, es que la mxima inestabilidad del
producto se dara cuando el producto estuviera en soluciones de mxima
concentracin, la degradacin sera menor tanto en estado slido,
humedad relativa menor al 50%, as como a humedades relativas
mayores al 70%, donde se encontrara en solucin cada mas diluida,
conforme se incrementara la humedad relativa (26).
Estudios de estabilidad con tabletas de lornoxicam (27) mostraron
que su degradacin fue determinada por el contenido de humedad y por
la temperatura. Para este fin se utiliz, en lugar de la determinacin del
orden de reaccin, el parmetro que aqu se denomina como k w, de la
ecuacin de probabilidad de Weibull, el cual es proporcional a la
constante de velocidad de reaccin. La figura II. 24 nos muestra la
relacin del logaritmo de kw contra el logaritmo del contenido de agua,
para tabletas de 4 mg y 6 mg, observndose una relacin lineal, esto es,
a mayor contenido de humedad corresponde mayor velocidad de
degradacin. En este estudio, cuando se usaron en conjunto las
relaciones entre el contenido de humedad y la ecuacin de Arrhenius,
fue posible predecir un lmite en el contenido de agua, para mantener
una cierta estabilidad, para ciertos tiempos y bajo determinadas
temperaturas de almacenamiento.
La liofilizacin se aplica, entre otras razones, para estabilizar
soluciones de frmacos, a travs de la remocin de su contenido en
agua. En este sentido, la seleccin que se haga de los excipientes y su
estado fsico es de gran importancia para la estabilidad de los frmacos,
en lo respecta a la humedad.
Cuando la ciclofosfamida se liofiliz con diferentes excipientes (urea,
PVP-40 o dextrano) se observ una degradacin muy rpida (t 90% en
menos de 30 das). Tratando de examinar si el efecto era debido a la
presencia de humedad, se les agrego 5 L de agua. En el caso del uso de
urea como excipiente del producto liofilizado se observ que la adicin
de humedad permiti que la ciclofosfamida pasara del estado amorfo al
de cristal, como monohidrato, mejorando con esto su estabilidad (figura
II. 25). En el caso del PVP-40, la adicin de agua produjo un semislido
de poca estabilidad. Mientras que en el caso del dextrano, no se observ
la cristalizacin de la ciclofosfamida ni se produjo mejora en la
estabilidad, por el contrario se gener una mayor degradacin (28).
Los datos presentados nos muestran que una cierta humedad residual
en los productos liofilizados sera deseable para mejorar la estabilidad,
tal como se ve en caso de la ciclofosfamida, donde la introduccin de
humedad en el producto con urea, produjo un incremento en su
estabilidad debido a la cristalizacin del frmaco.
91
0.5
Ln kw
0
Tabletas de 4 mg
-0.5
0 0.2 0.4 0.6 0.8
ln contenido de humedad (%)
Figura II. 24. Valores de kw como una funcin del contenido de

humedad en tabletas de lornoxicam a 80 C (27).
95 Con urea
CICLOFOSFAMIDA (%)
+ 5 mcL
agua
80
Con urea
65
50
0 20 40 60 80
TIEMPO (das)
Figura II. 25. Perfil de degradacin de ciclofosfamida liofilizada con

urea y con y sin adicin de 5 L de agua (28).
Como se ha observado para el caso de la ciclofosfamida, no en todos
los casos una cierta cantidad de humedad conduce a la cristalizacin del
frmaco. Cuando no se produce cristalizacin del frmaco, ste se vera
afectado negativamente por la presencia de humedad, esto es, se
92
degradar ms rpido en presencia de agua cuando el estado fsico del

frmaco sea amorfo, como en el caso del bromuro de vecuronium (29)
(figura II. 26). Como se ha mostrado, solo con ciertos excipientes se da
este proceso de cristalizacin y con otros no se da.
100
30 C y 75%
H.R.
VECURONIUM (%)
96
40 C y H.
Amb.
92
40 C y 95%
H.R.
88
0 4 8 12
TIEMPO (meses)
Figura II. 26. Relacin entre la degradacin y las condiciones de

temperatura y humedad de almacenamiento del bromuro de
vecuronium (formula B) (29).
Por otro lado, tambin las caractersticas del excipiente podran

llevarnos a diferentes resultados. El mismo bromuro de vecuronium, en
su frmula A present perfiles de mucha mayor degradacin que la
frmula B. La diferencia fundamental es que la frmula B tiene lactosa y
manitol, mientras que la frmula A solo tiene manitol. Esta diferencia
hace que la frmula B tenga mayor capacidad para absorber y adsorber
humedad, mientras que la frmula A solo puede adsorber humedad. Esto
permite que la frmula A tenga mas agua disponible para el proceso de
degradacin. Estos resultados nos llevan a la inferencia de que nos es
tanto la cantidad de agua presente sino la cantidad de agua disponible
(la actividad del agua) lo que determina la estabilidad de un producto
(29).
La oxidacin tambin es un proceso que puede ser mediado por la
humedad al igual que la hidrlisis. Por esta razn, los productos que son
sensibles a la oxidacin se almacenan en frascos de vidrio y no de
plstico. Si el envase es hermtico, como comnmente lo es el de vidrio,
el oxigeno que queda en el espacio vaco del frasco se consumir y
posteriormente disminuir la velocidad de degradacin (30).
93
II. 6. Efecto de la constante dielctrica sobre la velocidad de

reaccin.
Un elemento importante para discutir el efecto de los solventes sobre
la estabilidad es la polaridad. No hay una medida absoluta de la
polaridad sino ms bien varias escalas independientes de polaridad.
Los trminos polar y no-polar se usan frecuentemente para describir
ciertas propiedades de los solventes y de los solutos. En la prctica
farmacutica los trminos mas comnmente empleados de la polaridad
son la constante dielctrica , el parmetro de solubilidad y la tensin
superficial . Los valores de estos trminos se obtienen a travs de la
medicin de ciertas propiedades macroscpicas de los solutos y los
solventes puros. De esta manera, la seleccin de una escala de
polaridad es mas bien una cuestin de conveniencia.
Ha sido reportado que la estabilidad de pentobarbital en solucin, es
mejorada o facilitada, por el uso de un sistema solvente con
polietilenglicol. Un razonamiento semejante se ha hecho con xito en las
monografas oficiales sobre solucin de tribrometanol, solucin de
isofluorato, solucin de nitrofurazona y otras preparaciones (22).
Es probable, como resultado de estos hechos y otros similares, que
haya una opinin general de que el uso de solventes no acuosos, para
reemplazar el agua en una solucin total o parcialmente, sea algo as
como una panacea para mejorar la estabilidad. Tal suposicin no es
siempre cierta, aunque el cambio de agua por otro solvente orgnico
ayuda en la mayora casos. La substitucin de agua por un solvente
orgnico miscible con el agua resulta en una disminucin de la
constante dielctrica, conforme se aumenta la concentracin del
solvente orgnico. El aumento en el valor de la constante dielctrica
regularmente produce resultados como los mostrados por la figura II. 27,
donde se observa una disminucin de la constante de velocidad de
reaccin del benzoato de 2-tetrahidropiranilo (el valor de kobs) conforme
la constante dielctrica disminuye (el inverso [100/] aumenta) (31).
Sin embargo, sera una falta de apreciacin el no considerar la
habilidad de los solventes no acuosos, especialmente aquellos que son
hidroxlicos, para participar o de algn modo influenciar las reacciones
solvolticas.
94
-2
ln kobs
-4
-6
1.2 1.4 1.6 1.8
100/
Figura II. 27. Efecto de la constante dielctrica sobre la velocidad de

hidrlisis del benzoato de 2-tetrahidropiranilo (31).
En la substitucin de agua por propilenglicol en un preparado de

cloramfenicol, se observ una solvlisis:
NO2 NO2
H+
CHOH-CH-CH2OH CHOH-CH-CH2OH
NH-C-CHCl2 NH3
O +
+ CH3-CHOH-CH2OH CH3-CHOH-CH2-O-C-CHCl2
O
Al contrario de un aumento en la estabilidad, se observ que la

estabilidad del cloramfenicol disminuye al aumentar la concentracin de
propilenglicol.
Por los datos presentados, se puede observar que el formulador debe
estar consciente del o de los mecanismos, los cuales son operativos as
como de los que son aparentes, antes de intentar el aumento de
estabilidad por medio de una disminucin en la constante dielctrica, a
travs de un solvente miscible con agua (22).
95
II. 7. Efecto de la luz sobre la velocidad de reaccin.

La absorcin de energa luminosa por una molcula puede
proporcionar suficiente energa para que suceda una reaccin qumica.
Frecuentemente es sta energa la que desencadena procesos de
oxidacin. La energa que se absorbe o transfiere a una molcula esta
asociada a la frecuencia de la radiacin, energa = h * , donde h es la
constante de Plank (6.626*10-27 erg*s) y es la frecuencia de la
radiacin en 1/ segundo. Entre mayor sea la frecuencia, la energa de la
luz ser mayor.
La absorcin de radiacin electromagntica puede desencadenar

alguno de los siguientes eventos (7):
1. La molcula que absorbe la luz se descompone.

2. La energa se retiene hasta que se use qumicamente o sea
transferida a otra molcula, la cual se puede o no descomponer.
3. La energa absorbida se convierte en calor y no genera ninguna
reaccin.
4. La molcula que absorbe la luz la emite de vuelta a diferente
longitud de onda (fluorescencia o fosforescencia) y no ocurre
ninguna descomposicin.
Cuando las molculas absorben un quantum de energa de luz, se

transforman a un estado excitado A* con una velocidad k 1. Entonces, la
molcula activada podra regresar a su estado normal (k 2) o reaccionar
con una segunda molcula y descomponerse en ciertos productos (k 3). El
paso determinante para la reaccin, en un cristal por ejemplo, es
entonces el que la molcula activada reaccione o ceda su energa a una
molcula adyacente en la estructura del cristal. Cuando, en este
mecanismo propuesto, la constante para la formacin de los productos
(k3) es mucho menor que la constante de velocidad para la
desactivacin de la molcula (k2), el mecanismo de degradacin sera de
orden uno. Por otro lado, cuando la constante de desactivacin (k 2) fuera
mucho menor que la de formacin de los productos (k 3), entonces la
cintica resultante sera de orden cero (32).
Una reaccin fotoqumica puede producir tambin un catalizador que
luego causa una reaccin trmica (una reaccin debida al calor), la cual
contina por s misma a una velocidad medible.
96
Las reacciones fotoqumicas son relativamente independientes de la

temperatura, porque la activacin de las molculas no depende
directamente de la energa trmica, sino de fotoenerga. En este tipo de
reacciones, con molculas muy susceptibles a la oxidacin, el paso
limitante es la activacin fotoltica. A travs de ella se producen
reacciones en cadena, con radicales libres, que solo pueden ser
detenidas cuando estos radicales libres son desactivados o
estabilizados. En el caso particular de substancias slidas, la reaccin se
inicia sobre la superficie de los cristales y contina solo hasta donde la
luz pueda penetrar. Debido a esta circunstancia la extensin de la
degradacin fotoltica estara limitada y no causara mayores problemas.
Las caractersticas de la luz, tanto en su intensidad como en su
longitud de onda determinan el efecto que tendr sobre la estabilidad.
Generalmente es la luz en la regin visible y ultravioleta la que origina
las reacciones qumicas, esto es, radiacin de longitud de onda menor
de 400 m. Como el vidrio mbar permite pasar solo una pequea
fraccin de la luz ultravioleta incidente, protege los principios activos
sensibles a la luz, de una descomposicin rpida.
Existe una gran cantidad de productos farmacuticos como las
vitaminas A, B, C, D y E, la morfina, los derivados de las fenotiazinas, las
sulfamidas, los antibiticos, los anestsicos locales y los esteroides,
entre otros, que son sujetos de deterioro por fotlisis. Este tipo de
degradacin regularmente se presenta como una autooxidacin y
generalmente es catalizada por metales, mediada por radicales libres y
fcilmente afectada por las condiciones de humedad y pH del medio en
que ocurren (32).
Un ejemplo de fotlisis es la degradacin del cido ascrbico en
solucin (33). Esta reaccin ocurre con un orden de reaccin de uno, tal
como se puede observar en la figura II. 28. El mtodo usado para
determinar el orden de reaccin fue el de la determinacin de la recta
que mejor describe los valores experimentales, de Patel y Sudgen. En
esta figura se observa como cambia la concentracin remanente de
cido ascrbico con el tiempo, en este caso debido a la irradiacin con
luz solar simulada. En esta situacin particular, la estabilidad del cido
ascrbico fue mejorada por la adicin de 5% de agentes edulcorantes
como manitol, sorbitol y azcar comn. Se sugiere que los edulcorantes
tienen algn efecto sobre la fotlisis mediada por radicales libres de
hidroxilo e hidrogeno.
En otro ejemplo de fotodegradacin, Matsuda y col. (34) reportan la
degradacin de diferentes polimorfos de la carbamazepina, con luz
fluorescente de diferentes intensidades de radiacin en el cercano
ultravioleta (figura II. 29). Como sabemos, la presencia de formas
polimrficas y amorfas de los frmacos puede afectar la estabilidad en
su presentacin en estado slido. Como se puede observar en la figura
97
II. 29, la forma cristalina ms estable de la carbamazepina es la I y la

menos estable es la II. La reaccin de degradacin sobre la superficie del
frmaco ocurre con una cintica de orden uno, despus de un periodo de
induccin de aproximadamente un da. Por esta razn, la grfica de la
figura II. 29 inicia o se traza desde el da 1. La higroscopicidad de
carbamazepina se observ en el mismo orden que la estabilidad de las
diferentes formas cristalinas, esto es, la forma II fue la ms higroscpica
y la menos estable, despus seguira la forma III y finalmente, la forma I
sera la ms estable y la menos higroscpica. Por esta razn, se
considera que el agua adsorbida sobre la superficie de los cristales acte
como catalizador de la reaccin (34). Como se ha observado en los
ejemplos presentados, la mayora de las reacciones fotolticas son de
primer orden.
2.1
y = -0.0099x + 2.0115
R2 = 0.9913
log CIDO L-ASCRBICO (%)
1.9
1.7
1.5
0 15 30 45
TIEMPO (horas)
Figura II. 28. Fotodegradacin de una solucin acuosa de cido l-

ascrbico irradiada con luz solar simulada (33).
La ciprofloxacina es una fluoroquinona, la primera generacin de los

inhibidores de DNA girasa, cuya estructura corresponde con el cido 1-
ciclopropil-6-fluoro-1,4-dihidro-4-oxo-7-(piperazin-1-il)quinolona-3-
carboxlico. Es un antibitico sinttico derivado del cido nalidxico que
sufre fotlisis. Su estabilidad fue estudiada bajo radiacin con luz de una
longitud de onda de 313 nm, la cual fue escogida por ser uno de sus
mximos de absorcin en la regin ultravioleta. La fuente de luz fue una
lmpara de mercurio con un filtro Corning CS-7-54. Esta lmpara mostr
una radiacin de 0.95 0.05 * 1016 fotones * s-1, cuando el paso de luz
98
fue de 1 cm, siempre y cuando la lmpara se limpiara diariamente con

cido actico, para mantener la intensidad estable (35).
2 Forma
log (carbamazepina-%)
cristalina
1.8 II
III
1.6
1 3 5 7
TIEMPO (das)
Figura II. 29. Fotodegradacin de carbamazepina en diferentes

formas cristalinas, con una radiacin de 12.0 J/cm 2 * s, a 45 C y
31% H. R. (34).
Bajo las condiciones mencionadas, se observ que la ciprofloxacina se

degrada claramente en funcin del pH del medio, mostrando su mxima
velocidad de degradacin a un pH de 8.6 (figura II. 30). Este
comportamiento se explica en funcin de que la ciprofloxacina es un
compuesto anfoltico, con valores de pKa de 6.09 para el grupo
carboxlico y de 8.74 para el nitrgeno sobre el anillo piperazinlico y con
un punto isoelctrico de la forma zwiterinica a un pH de 7.4, lo cual
parece mostrar que la forma switerinica a pHs ligeramente bsicos
sera la forma ms sensible a la fotlisis. Por otro lado, la mxima
estabilidad se alcanza en soluciones con pHs entre 3 y 4, donde el grupo
COOH no se encuentra ionizado y el nitrgeno bsico se encuentra
completamente protonado.
La estabilidad de la ciprofloxacina se mostr tambin dependiente de
la concentracin inicial (figura II. 31). Manteniendo la fuente de radiacin
constante, las soluciones con mayor concentracin de ciprofloxacina
mostraron un efecto menor en su degradacin, referida como el
porcentaje de ciprofloxacina perdido. Esto es, la velocidad de
degradacin fue inversamente proporcional a la concentracin inicial del
frmaco. El tiempo necesario para degradar el 50% de la ciprofloxacina
original fue mayor conforme su concentracin inicial fue mayor tambin.
99
sta dependencia, de la degradacin con respecto a la concentracin

inicial de ciprofloxacina en solucin, fue observada tambin cuando la
fuente de radiacin fue la luz del da ( > 300 nm).
90
80
70
CIPROFLOXACINA (%)
60
50
40
30
20
10
0
3 6 9 12
pH
Figura II. 30. Efecto del pH sobre la concentracin de ciprofloxacina,

cuando fue irradiada con una lmpara de mercurio (35).
100
100
CIPROFLOXACINA (%)
85 Luz del da
Lampara de
mercurio
70
0 0.0002 0.0004 0.0006
CONCENTRACIN (M)
Figura II. 30. Efecto de la concentracin inicial de ciprofloxacina, en

solucin a pH de 5.0, sobre la proporcin que se degrada cuando se
irradia 1 hora con lmpara de mercurio y 15 das con luz solar (35).
Una adecuacin al proceso de fabricacin, como medida de proteccin

contra los efectos de la luz, es el recubrimiento de comprimidos. Para
este fin, son de importancia las caractersticas de opacidad que las
pelculas de recubrimiento posean. En un estudio sobre la posible
proteccin que tales pelculas de recubrimiento daran al frmaco
nifedipina, se encontr que las pelculas con ndices de contraste
mayores a 98% proporcionaron una buena proteccin contra la luz (36).
El ndice de contraste se define como la proporcin de la reflexin de
la luz incidente, cuando una pelcula se coloca sobre un fondo negro,
comparada con la reflexin obtenida cuando se coloca sobre un fondo
blanco. Las pelculas que producen un efecto de ocultar completamente
lo que hay detrs de la pelcula se dice que tienen un valor del ndice de
contraste mnimo de 98%. En la figura II. 31, se observa los diferentes
efectos de proteccin de la nifedipina obtenidos con diferentes grosores
de pelcula. La opacidad dada por pelculas de recubrimiento con valores
del ndice de contraste inferiores al 98% no fue adecuada para proteger
de la luz a la nifedipina.
101
105
Nucleos
90
NIFEDIPINA (%)
10% peso
recubrimiento
75
15% peso
recubrimiento
60
0 5 10 15 20 25
TIEMPO (das)
Figura II. 31. Degradacin de nifedipina en tabletas recubiertas, en

funcin del peso de la capa de recubrimiento, con pelculas de
HPMC (6 cP) conteniendo 29.5% de dixido de titanio, expuestas a
4.4 klux (6.6 J/s*m2) durante 21 das (36).
Concentraciones de dixido de titanio de hasta 29.5%, en pelculas de

grosor entre 24 y 68 m, grosor tpico en recubrimientos con pelcula, no
fueron suficientes para proteger al frmaco de la degradacin. El uso de
concentraciones mayores de dixido de titanio tiene poco inters, dado
que podran interferir la formacin de las pelculas, durante el
recubrimiento. Por esta razn, son de recomendarse pelculas de
recubrimiento con concentraciones de dixido de titanio de 29.5%, pero
con grosores desde 145 m, las cuales si muestran una buena
proteccin del frmaco. Cabe hacer la observacin que tales pelculas
debern ser evaluadas en sus efectos sobre la disolucin antes de
establecerlas como una medida de proteccin contra la fotlisis.
Un caso similar al de la proteccin de la nifedipina, a travs de una
capa de recubrimiento que sea capaz de detener el paso de la luz, es el
caso de la mejora en la fotoestabilidad del ubidecarenon, en una
emulsin seca redispersable (37).
El ubidecarenon es un agente cardiovascular usado en formas de
dosificacin slidas, sus principales problemas son fotoinestabilidad y
mala absorcin debida a su baja solubilidad. Una manera de mejorar la
biodisponibilidad es usar como vehculo un aceite o una emulsin aceite
en agua, sin embargo, la solucin oleosa fue poco estable. En una
102
primera aproximacin a medidas para proteger de la luz al frmaco, se

usaron colorantes que absorben luz ultravioleta, observndose que las
muestras irradiadas, con una lmpara con una intensidad de 0.34 mW
cm-2, presentaban una degradacin de 34.3% cuando la frmula era
nicamente la base oleosa. Cuando se agreg un a colorante rojo a la
base oleosa, se redujo la cantidad degradada del frmaco a 9.7% y
cuando se agreg un colorante amarillo se redujo todava mas, hasta
7.7%.
Sin embargo, una emulsin seca para reconstituir sera ms fcil de
procesar y manipular durante la manufactura, si es que se puede
estabilizar. As que una segunda aproximacin fue obtener, por secado
por aspersin, grnulos que al mezclarse con agua reconstituyeran una
emulsin, los cuales se estabilizaran recubrindolos con Aerosil. En la
figura II. 32 se observan los porcentajes retenidos del frmaco en las
emulsiones secas. La fotoestabilidad del frmaco mejor en la medida
que se aument la cantidad de Aerosil en la formulacin. El perfil de
descomposicin del frmaco se describi con la ecuacin de Jander:
(1-R1/3) 2 = k1 t (II.)
Donde: R es la cantidad remanente del frmaco, k 1 es la constante de

velocidad de fotodescomposicin y t es el tiempo que se irradio con luz
UV.
A pesar de que las formas farmacuticas de productos fotolbiles
puede mejorase con una seleccin adecuada de los materiales de
empaque, tambin pueden ser protegidas por otros medios, como la
adicin de colorantes que absorban la luz UV y con capas de
recubrimiento que impidan el paso de la luz. La slica coloidal representa
un buen excipiente para formar estas capas de recubrimiento,
permitiendo al mismo tiempo una buena liberacin del frmaco.
103
100 15 g Aerosil
10 g Aerosil
UBIDECARENON (%)
80
5 g Aerosil
60
40
0 2 4 6 8 10 12 14
TIEMPO DE IRRADIACIN (horas)
Figura II. 32. Perfil de fotodescomposicin de una emulsin seca de

ubidecarenon, con diferentes cantidades de Aerosil para su
recubrimiento (37).
Algunos otros parmetros que influyen sobre las reacciones de los

frmacos como la forma cristalina, el tratamiento mecnico sobre
slidos, la presencia de oxigeno, la forma y tamao de las partculas,
sern tratados en otra parte del texto.
II. 8. Referencias bibliogrficas
1. Grimm, W. y Schepky, G. Stabilitts prfung in der pharmazie.

Editio Cantor, D-7960 Aulendorf, pp. 68-69 (1980).
2. Carstensen, J. T. Drug stability. Principles and practice. Segunda
edicin, Marcel Dekker, New York-USA, pp. 20 (1995).
3. Tardif, R. Reliability of accelerated storage tests to predict stability
of vitamins (A, B, C) in tablets. J. Pharm. Sci. 54, 281-284 (1965)
4. Stability testing of drug substances and drug products (draft
guidance). FDA, CDER y CBER, Rockville MD-USA, pp. 41-44 (Junio-
1998).
5. Infante Gil, S. y Zrate de Lara G. P. Mtodos estadsticos. Editorial
Trillas, Mxico, pp. 463-532 (1984).
6. Tingstad, J., Mc Donald, L. H. y Meister, P. D. Stability of ascorbic
acid in a liquid multivitamin emulsion containing sodium fluoride.
J. Pharm. Sci., 52, 343-350 (1963).
7. Connors, K. A., Amidon, G. L. y Kennon L. Chemical stability of
pharmaceuticals. Editorial J. Wiley & Sons, New York, pp. 20
(1979).
104
8. Jensen, E. H. y Lamb, D. J. Kinetic study on stability of

fluprednisolone acetate in aqueous solution. J. Pharm. Sci., 53,
402-404 (1964).
9. Trivedi, J. S. y Fort, J. J. Kinetics of degradation in aqueous solution
of Abbott-79175, a potent second generation 5-liupoxygenase
inhibitor. I. J. Pharm. 123, 217-227 (1995).
10. Carstensen, J. T. Drug stability. Principles and practice.
Segunda edicin, Marcel Dekker, New York-USA, pp. 355-357
(1995).
11. Tingstad, J., Dudzinski, J., Lachman, L. y Shami, E. Simplified
method of determining chemical stability of drug substances in
pharmaceutical suspensions. J. Pharm. Sci., 62, 1361-1363 (1973).
12. Schlecht, K. D. y Frank, C. W. Tetracycline epimerization
kinetiks utilizing NMR spectrometry. J. Pharm. Sci., 62, 258-261
(1973).
13. Florence, A. T. Drug solubilization in surfactant systems. En
Yalkowsky, S. H. Techniques of solubilization of drugs. Marcel
Dekker Inc., New York-USA, pp. 52-59 (1981).
14. Lo. Y., Florence, A. T., Treguier, J. P., Seiller, M. y Puisieux, F. J.
Colloid Interface Sci., 59, 319 (1977). A travs de 13.
15. Lin, S. Y. y Kawashima, Y. Kinetic studies on the stability of
indomethacin in alkaline aqueous solution containing
poly(oxyethylene) poly(oxypropylene) surface active block
copolymers. Pharm. Acta Helv. 60, (12), 345350 (1985).
16. Moody, R. R. y Luwbica, P. The effect of surfactants on the
solubility and stability of aqueous solutions of dithranol. J. Pharm.
Pharmacol. 44, suplemento de diciembre, pp. 1051 (1992).
17. Szente, L. Cyclodextrins: Structure, application, stability and
their influence on the stability of active substances. En: Grimm, W.
y Krummen, K. Stability testing in the EC, Japan and the USA. .
Wissenschaftliche Verlagsgesellschaft , Stuttgart, pp. 225-244
(1993).
18. Duchne, D. y Wouessidjewe, D. The current state of
ciclodextrin in pharmaceutics. Acta Pharm. Technol. 36 (1), 1-6
(1990).
19. Islam, M. S. y Narurkar, M. The effect of 2-hydroxypropyl--
cyclodextrin on the solubility, stability and dissolution rate of
famotidine. Drug Dev. Ind. Pharm. 17 (9), 1229-1239 (1991).
20. Samie, M. A., Ammar, H. O., Matha, A. G., El Nahhas, S. A. y
Kassem, M. A. Interaction of phenotiazines with caffeine. Part II:
Effect of complexation with caffeine on the stability and in-vitro
transport of phenothiazines. Pharm. Acta Helv. 58 (1), 28-32
(1983).
21. Lachman, L. Physical and chemical stability testing of tablet
dosage forms. J. Pharm. Sci. 54, 1519-1526 (1965).
105
22. Scott, M. W., Lieberman, H. A. y Chow, F. Pharmaceutical

applications of the concept of equilibrium moisture contents. J.
Pharm. Sci. 52, 994-998 (1963).
23. Lachman, L., Zwartz, Cooper. A comprehensive
pharmaceutical stability testing laboratory III. A light stability
cabinet for evaluating photosensitivity of pharmaceuticals. J. Am.
Pharm. Assoc. Sci. Ed. 49, 213- (1960).
24. Carstensen, J. T. J. Stability of solids and solid dosage forms.
Pharm. Sci. 63, 1-14 (1974).
25. Lee, S., DeKay, H. G. y Banker, G. S. Effect of water vapor
pressure on moisture sorption and the stability of aspirin and
ascorbic acid in tablet matrices. J. Pharm. Sci. 54 (8), 1153-1158
(1965).
26. Teraoka, R., Otzuka, M. y Matsuda, Y. Effects of temperature
and relative humidity on the solid state stability of ranitidine
hydrochloride. J. Pharm. Sci. 82 (6), 601-604 (1993).
27. Koizumi, N., Adachi, T., Kouji, M. y Itai, S. Effect of water
content and temperature on stability of lornoxicam tablets. Drug
Stab. 1 (4), 202-208 (1997).
28. Kovalcik, T. R. y Guillory, J. K. Stability of cyclophosphamide
in lyophilized cakes. II. Urea, polyvinylpyrrolidone, and dextran as
excipients. J. Parenter. Sci. Technol. 42 (5), 165-173 (1988).
29. Vromans, H. y Schalks, E. J. M. Comparative and predictive
evaluation of the stability of different freeze dried formulations
containing an amorphous moisture-sensitive ingredient. Drug Dev.
Ind. Pharm. 20 (5), 757-768 (1994).
30. Carstensen, J. T. Drug stability. Principles and practice.
(1995).
31. Hussain, A. y Truelove, J. J. Pharm. Sci. 63, 235 (1979). A
travs de: Carstensen, J. T. Drug stability. Principles and practice.
(1995).
32. Monkhouse, D. C. Stability aspects of preformulation and
formulation of solid pharmaceuticals. Drug Dev. Ind. Pharm. 10 (8
y 9), 1373-1412 (1984).
33. Ho, A. H. L., Puri, A. y Sugden, J. K. Effect of sweetening
agents on the light stability of aqueous solutions of l-ascorbic acid.
I. J. Pharm.107, 199-203 (1994).
34. Matsuda, Y., Akazawa, R., Teraoka, R. y Otsuka M.
Pharmaceutical evaluation of carbamazepine modifications:
Comparative study for photostability of carbamazepine
polymorphs by using Fourier-transformed reflection-absorption
infrared spectroscopy and colorimetric measurement. J. Pharm.
Pharmacol. 46, 162-167 (1994).
106
35. Torniainen, K., Tammilehto, S. y Ulvi, V. The effect of pH,

buffer type and drug concentration on the photodegradation of
ciprofloxacin. Int. J. Pharm. 132, 53-61 (1996).
36. Bchard, S. R., Quraishi, O. y Kwong, E. Film coating: Effect of
titanium dioxide concentration and film thickness on the
photostability of nifedipine. Int. J. Pharm. 87, 133-139 (1992).
37. Takeuchi, H., Sasaki, H., Niwa, t., Hino, T., Kawashima, Y.,
Uesugi, K. y Ozawa, H. Improvement of photostability of
ubidecarenone in the formulation of a novel powdered dosage
form termed dry emulsion. Int. J. Pharm., 86, 25-33 (1992).
107
III
ESTABILIDAD QUMICA DE FRMACOS
(Vas de degradacin y estabilizacin qumicas)
III. 1. Consideraciones generales
104
III. 2. Hidrlisis 107
III. 2. 1. Proteccin contra la hidrlisis
103
III. 3. Oxidacin 117
III. 3. 1. Proteccin contra la oxidacin
118
III. 4. Otros factores que modifican la estabilidad qumica
128
III. 4. 1. Efectos del polimorfismo sobre la estabilidad qumica
130
III. 3. 1. Efecto del grado de cristalinidad sobre la estabilidad
Qumica 133
III. 4. 3. Efecto del rea superficial de los slidos sobre la
108
estabilidad qumica
136
III. 5. Bibliografa
138
III
ESTABILIDAD QUMICA DE FARMACOS

(Vas de degradacin y estabilizacin qumicas)
III. 1. Consideraciones generales

La transformacin qumica de los frmacos produce en la mayora de
los casos substancias menos activas y tambin menos txicas, lo cual
conducira a un efecto teraputico ineficiente o inclusive nulo. Aunque
tambin podran ocurrir transformaciones en las que la toxicidad se vea
incrementada o en las que la potencia farmacolgica sea exacerbada.
Un caso muy conocido de incremento en la toxicidad, debida a
transformaciones qumicas, es el del frmaco diyododietilenetano o
Stalinon, el cual fue introducido en Francia en 1953. La transformacin
de este producto en triyodoetilenetano y sobre todo en
monoyodoetilenetano provoc la muerte a 101 personas. Otro caso
similar es el de la nefrotoxicidad generada por dihidrotetraciclina, como
producto de degradacin de la tetraciclina (1).
La potencia teraputica de los frmacos podra desaparecer cuando
estos sufren reacciones de degradacin como la hidrlisis o la oxidacin.
Ejemplos de esto son la penicilina, la adrenalina y de la atropina entre
otros. En otros casos la degradacin, por ejemplo de rifampicina, podra
generar productos de degradacin que no son txicos y que conservan
la misma potencia que la rifampicina misma (1).
Existen varias posibilidades a travs de las cuales un frmaco
inestable se puede descomponer (2):
Hidrlisis
109
Oxidacin
Reacciones con radicales
Reacciones de rearreglo
Isomerizacin
Racemizacin
Epimerizacin
Polimerizacin
Descarboxilacin
Substancias con una estabilidad crtica requieren mas atencin acerca

de las condiciones que causan la degradacin, en particular el pH y la
temperatura.
El anlisis de la estabilidad qumica de los frmacos incluye las
interacciones que estos pudieran tener con los excipientes y con otros
materiales tales como los materiales de envase y los materiales del
equipo de procesamiento.
Para la evaluacin de la interaccin con los excipientes regularmente
se hacen mezclas binarias frmaco-excipiente, aunque tambin se
recomendaran mezclas complejas como por ejemplo una mezcla para
granulacin hmeda y una mezcla para compresin directa. La
evaluacin de la estabilidad de estas mezclas nos permite hacer una
discriminacin gruesa de posibles incompatibilidades del frmaco con
ciertos excipientes.
La interaccin de los frmacos con el equipo de procesamiento es otra
posibilidad para su degradacin qumica. Esta interaccin podra hacerse
presente como corrosin sobre las superficies metlicas de los equipos
as como por la catlisis de la degradacin qumica por los metales
desprendidos. Esta interaccin podra hacerse manifiesta colocando
polvo del frmaco o de la mezcla a procesar sobre la superficie de un
metal semejante al del equipo, con acabo espejo. Al exponer este
material a una humedad relativa alta, por ejemplo 75%, y despus de
algn tiempo, se podra cepillar o soplar el polvo para examinar la
superficie metlica. Si despus de enjuagar y secar la superficie
metlica se observan huellas de corrosin, pudiese ser aconsejable usar
otra forma o derivado del frmaco o una mayor dilucin del mismo,
aumentando la concentracin o proporcin de los otros componentes de
la frmula.
Los medios de estabilizacin o disminucin de los efectos negativos
de la degradacin qumica son tan variados como las mismas fuentes y
110
mecanismos de inestabilidad de los frmacos. La estabilizacin de los

frmacos podra lograrse a travs de (2):
Exclusin de agentes desestabilizantes

Adicin de agentes estabilizantes
Adecuaciones de procesamiento
a) Modulacin de procesos existentes

b) Adicin de procesos
estabilizantes
Estos principios son generales y, particularmente para su aplicacin a

la estabilidad qumica, se podra considerar dentro del concepto de la
exclusin de agentes desestabilizantes una seleccin adecuada de la
forma qumica o tipo de derivado del frmaco, la seleccin de los
solventes adecuados, la exclusin de trazas de iones de metales
pesados as como de otras impurezas. Esta eliminacin de agentes
desestabilizantes incluye el aislamiento del producto del medio
ambiente, esto es, del calor, de la humedad, del oxgeno y del dixido de
carbono as como de los microorganismos que pudiesen generar una
descomposicin del producto.
La adicin de agentes estabilizantes incluira la adicin de substancias
que forman complejos con los metales pesados, la adicin de
antioxidantes as como la adicin de substancias que modifican la
cristalizacin.
La adecuacin de los mtodos de fabricacin, en las diferentes formas
farmacuticas, contribuye a la estabilizacin a travs de la modulacin
de procesos ya existentes, evitando condiciones con efectos
desestabilizantes. De esta manera, una reduccin de la superficie
especfica de los frmacos contribuira a su estabilizacin. De la misma
forma contribuira tambin a la estabilizacin un aumento en el tamao
de las partculas, la disminucin o eliminacin de estructuras amorfas o
metaestables as como un aumento en la pureza del frmaco.
La adicin de procesos estabilizantes contribuye a mejorar la
estabilidad a travs de la inclusin de operaciones de recubrimiento,
microencapsulacin y complejacin, entre otras, para evitar el efecto o
interaccin con agentes desestabilizantes.
Un proceso que se usa comnmente para estabilizar frmacos es la
granulacin, la cual podra ser considerada como una especie de
111
recubrimiento. Cuando el caso es el de la interaccin entre los

componentes de una misma formulacin, esto es, interaccin frmaco-
frmaco o frmaco-excipiente, la granulacin podra ser doble, esto es,
un componente se coloca en una granulacin y el segundo componente
de la interaccin se coloca en una segunda granulacin. Este
procedimiento minimiza la interaccin entre los componentes
incompatibles. Entre mas gruesa sea la granulacin (mayor tamao de
partcula) se observar una menor interaccin, dado que habr menor
numero de puntos de contacto. Esta tcnica se usa comnmente en la
manufactura de multivitamnicos. Como alternativa a la granulacin y
para mayor seguridad, uno de los componentes podra realmente
recubrirse para evitar la interaccin con los otros componentes o con el
medio ambiente.
Otra alternativa a las mencionadas para separar componentes
incompatibles o para aislar del medio ambiente sera el recubrimiento
por compresin, haciendo una primera compresin, para la obtencin de
un ncleo, con uno de los componentes o el componente lbil, y
posteriormente una segunda compresin para recubrir el ncleo con otra
parte de la formulacin
Una de las principales funciones de una forma farmacutica es la
proteccin del principio activo y debe ejercerse durante el desarrollo de
la misma, esto es, a travs de la seleccin de los componentes de la
frmula y de los procedimientos de manufactura. La estabilizacin de las
formas farmacuticas considera todas las propiedades de las mismas, la
estabilizacin qumica, la fsica, la microbiolgica y la biolgica. Aunque
aqu se discuta particularmente la estabilizacin qumica, es obvio que
todos estos tipos de estabilidades se encuentran interrelacionados y no
se pueden separar completamente.
III. 2. Hidrlisis
La mayor parte de las alteraciones de los principios activos se pueden
clasificar en dos grandes grupos: la hidrlisis y la oxidacin. Otro grupo
que tiene importancia es la isomerizacin especialmente la
racemizacin. La ltima comnmente puede tratarse como cualquier
reaccin trmica de primer orden, mientras que otros tipos de
isomerizacin son ms difciles de tratar. La descarboxilacin hay que
tomarla en consideracin debido sobre todo a que esa reaccin de
descomposicin es el tipo de descomposicin de los cidos p-
aminosaliclico y p-aminobenzico.
Las leyes cinticas se han aplicado con frecuencia a soluciones de
frmacos. En algunos casos se ha tenido xito en su aplicacin a formas
farmacuticas slidas y otros sistemas farmacuticos, a pesar de las
112
dificultades que dicha aplicacin presenta, debido a que no se tiene un

sistema homogneo y bien definido.
La hidrlisis es un caso especial de las reacciones solvolticas, donde
el solvente es agua. Es probablemente la reaccin de descomposicin
ms comn en preparaciones farmacuticas. Sin embargo, hay que
tener en cuenta que otros solventes oxhidrlicos, como el alcohol y la
glicerina, tambin pueden solvolizar los mismos compuestos, esto
explica, por ejemplo, el hecho de que la penicilina es inestable en
presencia de alcohol o glicerina.
Los grupos qumicos que sufren hidrlisis incluyen:
1. Los steres y las lactonas.

A) Alcaloides como pilocarpina, fisostigmina, cocana; los de
belladona y los de reserpina.
B) Anestsicos locales, como procana, tetracana, benzocana
(todos son steres del cido p-aminobenzico)
2. Las amidas y las lactamas.

A) Alcaloides como ergometrina.
B) Anestsicos locales como dibucana.
C) Barbituratos.
D) Antibiticos, como cloramfenicol y penicilina (la ltima es
una lactama, es decir una amida cclica).
En trminos generales, como se habr observado, la hidrlisis ocurre

en compuestos que tienen un grupo acilo:
R-C-X
O
El comportamiento qumico de los compuestos de acilo depende del
resto de los tomos o grupos funcionales asociados a l. Entre los
compuestos de acilo encontramos grupos funcionales como los cidos
carboxlicos, steres de tiol, cloruros de cido, anhdridos de cido e
imidas, adems de los mencionados steres, lactamas, amidas y
lactonas. Es comn la designacin de estas substancias como derivados
de cidos carboxlicos, diferencindolos de los compuestos de carbonilo,
los cuales incluyen aldehdos y cetonas, aunque estos ltimos tambin
sean compuestos de acilo. La degradacin caracterstica de los
derivados de acilo mencionados es la ruptura de la unin C-X . Estas
113
reacciones se denominan como de transferencia de acilo ya que un

derivado de los cidos carboxlicos se transforma en otro, designndose
a su vez al grupo X como el grupo que se va o que se deja (3).
Todos los steres y amidas se hidrolizan en sus respectivos cidos y
alcoholes o aminas y en general su hidrlisis es catalizada por el in
hidrgeno y el in oxidrilo. Entonces, para cada sustancia habr un pH
de mxima estabilidad, es decir, donde la constante de velocidad es
ms pequea.
El mecanismo por el cual ocurren estas reacciones de degradacin,
por ejemplo en el caso de un ster en solucin alcalina, sera el ataque
de un ion de hidrxido sobre el carbono del grupo acilo, lo cual polariza
al grupo acilo. Si el intermediario formado se rompe, entonces la
reaccin se revertira, pero si el enlace C-OR se rompe, entonces la
reaccin no sera reversible, obtenindose como resultado los productos
de la hidrlisis. Este mismo mecanismo podra aplicarse a la mayora de
las reacciones de transferencia de acilo. La reactividad del sistema
estara dada entonces, por la probabilidad de formacin de un enlace
entre el derivado de acilo y la especie atacante as como por la
probabilidad de ruptura del enlace C-X (3).
Como ejemplo de la degradacin de frmacos por hidrlisis podemos
citar la hidrlisis con reaccin de primer orden de aspirina (4) (5). Esta
reaccin es catalizada tanto por iones de hidrgeno como por iones de
hidrxido, logrando, con el ajuste de pH entre 2 y 3, una reduccin de la
constante de degradacin a la mitad, en comparacin con el valor a pH
6.
O O
C-OH C-OH
OH
O-C-CH3 + H2O OH +
O=C-CH3
O
ASPIRINA AC. SALICLICO
En otros ejemplos podemos mencionar la hidrlisis de procana (6), y

la hidrlisis de cloramfenicol (7, 8).
O C2H5 O
C-O-CH2-CH2-N-C2H5 C-OH
C2H5
114
+ H2 O + HO-
CH2-CH2-N-C2H5
NH2 NH2
PROCANA AC. p-AMINOBENZICO
OH OH
CH-CH-CH2-OH CH-CH-CH2-OH
NH + H2O NH2
C O
NO2 CHCl2 NO2
CLORAMFENICOL
En otro estudio sobre degradacin hidroltica de vitamina B 1 se

encontr un valor de pH de 2 como el de mxima estabilidad (9).
III. 2. 1. Proteccin contra la hidrlisis

Los principios de estabilizacin contra la degradacin hidroltica de
frmacos incluye algunas medidas como:
Exclusin o ajuste del contenido de humedad

Ajuste del valor del pH
Disminucin de la solubilidad
Cosolventes
Recubrimiento, encapsulacin
Inclusin en micelas
Inclusin molecular (ciclodextrinas)
Complejacin
115
Condiciones de almacenamiento
(disminucin de la temperatura)
Cuando la descomposicin de un frmaco es la hidrlisis, es obvio que

la primera medida de estabilizacin y la ms efectiva que se podra
tomar sera la disminucin o la exclusin del agua en el sistema
farmacutico. Esto se lograra diseando para ese frmaco una forma
farmacutica slida, como podra ser una tableta o una cpsula y por
supuesto, tomando en consideracin lo mencionado en el capitulo II para
el efecto de la humedad sobre la estabilidad de frmacos y formas
farmacuticas slidas.
Como un ejemplo mas del efecto de la humedad sobre la velocidad de
degradacin hidroltica de los frmacos, tenemos que los derivados
cidos de la procana, particularmente los clorhidratos, son sujetos de
hidrlisis en diferentes formas farmacuticas y se degradan en funcin
de los vehculos o excipientes usados en la formulacin. En la figura III. 1
se observa el efecto de la humedad sobre la estabilidad qumica de
grageas de clorhidrato de procana. Como se observa, a mayor humedad
relativa de almacenaje se presenta un mayor deterioro del frmaco (10).
Los principios activos pueden tambin estabilizarse, para evitar su
hidrlisis, ajustando el pH de la solucin, con amortiguadores, al pH
donde se encuentra experimentalmente el valor menor de la constante
de velocidad para su descomposicin, tal como se ha mencionado en
ejemplos anteriores.
La descomposicin de cefotetan disdico (cefalosporina semisinttica)
en solucin, como otro ejemplo de proteccin contra la hidrlisis, se
encontr como una de primer orden, a muy diferentes valores de pH
(11). El mecanismo de degradacin se supone sea, a valores de pH
bajos, la hidrlisis de la porcin -lactama, mientras que a valores de pH
altos (por arriba de 6.5) la cadena lateral sera la que sufrira la
hidrlisis.
116
100
HUMEDAD
80 RELATIVA
PROCANA.HCl (%)
60 47%
58%
40
89%
20
0 50 100 150 200
TIEMPO (das)
Figura III. 1. Efecto de la humedad relativa sobre la estabilidad del

clorhidrato de procana en grageas, a temperatura ambiente (10).
El anlisis de la relacin de la constante de velocidad de degradacin

contra el pH (figura III. 2) muestra que el cefotetan es ms estable a
valores de pH entre 3.6 y 6.4, lo mismo que para otras cefalosporinas. La
velocidad de descomposicin del cefotetan fue aproximadamente el
doble a valores de pH menores, por ejemplo a pH de 2 y mayores, por
ejemplo a pH de 8, comparada con la velocidad de degradacin al pH de
mxima estabilidad (3.6-6.4). El efecto aqu observado, de aumento de
la velocidad de degradacin tanto a valores de pH ms altos como ms
bajos, es mas pronunciado para el caso de la cefotaxima, la cual cambia
en una proporcin de 10 veces y no de 2 como en el ejemplo de la figura
III. 2.
El control del pH ofrece un medio para la estabilizacin de los
frmacos, sin embargo, la solubilidad del mismo frmaco es tambin
usualmente dependiente del pH, lo que podra limitar el intervalo de pH
que sera utilizable para este fin. Otro factor limitante, para el uso del pH
con fines de estabilizacin, es si el pH seleccionado cae dentro del
intervalo de pH fisiolgicamente aceptable o no, como en algunos de los
casos antes mencionados de hidrlisis, donde el pH de mxima
estabilidad es de 2, lo cual sera demasiado bajo desde el punto de vista
fisiolgico. Generalmente, cuando los valores de pH no coinciden, se
hace un compromiso entre los diferentes factores para seleccionar el
valor del pH que sea ms conveniente para todas las variables.
117
0.9
log k + 2
0.7
0.5
1 3 5 7 9
pH
Figura III. 2. Perfil de pH para la velocidad de degradacin de

cefotetan disdico en solucin (11).
Cuando hablamos de formas farmacuticas slidas el trmino pH

pierde significacin, debe haber agua para hablar propiamente de este
concepto. Sin embargo, en el caso de algunos productos slidos como el
acetato de tocoferol y el pantotenato de calcio, el pH del producto puede
otorgar mayor o menor estabilidad al mismo. El pantotenato de calcio
cuando se granula con oxido de magnesio adquiere en su
microambiente, en la solucin lograda en la humedad adsorbida, el pH
alcalino adecuado a su estabilidad. En el caso del acetato de tocoferol su
hidrlisis es acelerada por iones hidroxilo, involucrando esta reaccin
nuevamente algn paso de disolucin en pequeas cantidades de agua,
el resultado de la hidrlisis, el tocoferol, es menos estable. Por esta
razn, el acetato de tocoferol no puede granularse junto con excipientes
alcalinos y por ello se granula el pantotenato de calcio por separado,
cuando en la formula deba mezclarse con el acetato de tocoferol.
Cuando se desea controlar el pH del microambiente, en condiciones
cidas, se podran usar los cidos ctrico, fumrico y tartrico, los cuales
deben manejarse con cuidado por ser corrosivos. En el caso de un
control del pH en medio alcalino, entonces se recomienda usar
bicarbonato de sodio, carbonato de sodio y los xidos de calcio y
magnesio, los cuales si bien no son corrosivos, tambin deben
manejarse con cuidado por ser muy abrasivos (12).
118
Otra manera de reducir la velocidad de hidrlisis es disminuyendo la

solubilidad de un principio activo, por la formacin de sales o derivados
orgnicos poco solubles. Generalmente un compuesto que no est en
solucin sufre menos reacciones qumicas. Ejemplos de esto son:
penicilina G benzotnica (sal), diterramicina de calcio (quelato),
laurilsulfato de Ilosona (sal y ster). La identificacin de la forma qumica
ms conveniente depende de la posibilidad de obtener estas diferentes
formas qumicas. Cuando estas se encuentran disponibles, se busca una
seleccin adecuada entre diferentes sales, formas cidas o bsicas,
complejos con resinas, diferentes derivados como cidos, steres,
amidas, alcoholes, profrmacos y metabolitos del mismo frmaco.
En un estudio acerca de la estabilidad de la codena (13) se encontr
que soluciones de sulfato de codena fueron intrnsecamente ms
estables que las correspondientes soluciones del fosfato de codena,
debido a una catlisis de la reaccin de degradacin por el ion fosfato.
Algunas substancias farmacuticas han mostrado problemas, en
trminos generales, en su absorcin o en su cintica dentro del
organismo. Dada esta circunstancia, se ha intentado la formacin de
diferentes estructuras qumicas las cuales, despus de un proceso
degradativo simple, en el organismo, darn por resultado el frmaco
originalmente deseado. Estas estructuras qumicas se conocen como
profrmacos. Este mismo procedimiento tambin se ha usado para
estabilizar ciertos principios activos in Vitro, para una posterior
recuperacin in vivo del frmaco deseado. Los profrmacos de la
pilocarpina son un ejemplo de dicho principio de estabilizacin (14). En
este caso particular, se espera de los profrmacos que presenten una
penetracin eficiente de la cornea, que puedan convertirse fcilmente,
dentro de la cornea, en el frmaco original y que adems tengan
suficiente estabilidad para formularse como gotas oftlmicas. Las formas
qumicas estudiadas fueron un total de 12 diferentes steres del cido
pilocrpico, los cuales se transforman cuantitativamente en pilocarpina,
despus de una ciclizacin en medio acuoso.
El efecto del pH sobre la estabilidad de dos de los steres usados
como profrmacos, un derivado alqulico denominado 3h y un derivado
aromtico denominado 3c, se observa en la figura III. 3. La forma de
estos perfiles de pH muestra que los steres son sujetos de hidrlisis
especfica tanto cida como bsica, as como de hidrlisis catalizada por
el agua, especialmente el compuesto 3c. Estos perfiles muestran una
curvatura a valores de pH alrededor del valor del pKa de estos
compuestos, lo cual indica que la forma protonada de las molculas
sufre una hidrlisis catalizada por el ion hidrxido, a una velocidad que
es mayor que aquella que ocurre con la base libre. El valor del pKa para
estos dos steres es de 6.3, cuando se determinaron a 70 C. A 20 C los
valores de pKa fueron de 7.0.
119
El ster alqulico, 3h, alcanza su mxima estabilidad en solucin

acuosa a un pH entre 4.2 y 5.0, mientras que el ster aromtico, 3c, la
alcanza a un valor de pH entre 3.5 y 4.5. Aunque en la grfica no se nota
fcilmente, el ster alqulico, 3h, tiene una velocidad de degradacin
entre 3 y 4 veces menor que la del derivado aromtico, a un valor de pH
de mxima estabilidad para ambos.
0
Log kobs
(das -1) 3c
-1
3h
-2
-3
0 2 4 6 8 10
pH
Figura III. 3. Perfiles de pH contra velocidad de degradacin de los

steres derivados de la pilocarpina, aromtico ( 3c) y alqulico (3h),
en solucin acuosa ( = 0.5) a 70 C (14).
La indometacina, en tres diferentes formas qumicas, indometacina,

indometacina sdica e indometacina meglumina, preparadas en forma
de tabletas, mostraron diferentes patrones de estabilidad cuando se
almacenaron 11 meses en bolsas de nylon. Al cabo de ese tiempo, la
indometacina base present una concentracin de 96.6%, mientras que
la forma sdica se degrad hasta llegar a una concentracin de 75.6%.
Ms estable que las anteriores result la indometacina meglumina, la
cual permaneci en 100% de su concentracin original (15).
Los compuestos poco solubles sirven tambin para disminuir el sabor
amargo del principio activo, porque disminuye la concentracin de su
solucin.
La concentracin de agua se puede reducir en los sistemas
farmacuticos mediante otros solventes como sorbitol, alcohol, glicerina
y propilenglicol, para reducir la velocidad de degradacin de algunos
frmacos. La adicin de sales tales como gluconatos y tartratos, los
120
cuales se hidratan bastante, reducen la concentracin efectiva de agua

en la solucin, puesto que la parte del agua que ha hidratado las sales,
est menos disponible para tomar parte en una reaccin de hidrlisis.
Como un ejemplo de la proteccin contra la hidrlisis, a travs de la
sustitucin de agua por un solvente miscible como el alcohol, se observa
en la figura III. 4. Un compuesto antirrinovirus, el WIN 63843, el cual
sufre una reaccin hidroltica catalizada por cidos y bases. Este
compuesto disminuy su velocidad de degradacin conforme aument la
concentracin de alcohol en el medio de disolucin (16).
60
Concentracin
50 de etanol
WIN 63843 (mcg/ml)
40 40%
60%
30
80%
20
100%
0 4 8 12 16
TIEMPO (DAS)
Figura III. 4. Perfil de degradacin de WIN 63843 en solucin

acuosa, con diferentes concentraciones de etanol (16).
Durante la manufactura de productos liofilizados se requiere formar

una solucin, como paso previo al llenado asptico de los viales, para la
liofilizacin propiamente dicha. Es una prctica comn el pedir un
anlisis de control, para determinar los ajustes necesarios en la potencia
del frmaco con el volumen de llenado de los viales. Por esta razn, es
posible que la solucin permanezca sin llenarse desde unas horas hasta
algunos das. En el caso de frmacos que son muy inestables, este
periodo de tiempo puede ser suficiente para deteriorar de manera
importante la solucin del frmaco, lo cual conducira a una disminucin
de la fecha de caducidad que se calcule para ese lote en particular. Una
manera de adecuar el proceso, para mejorar la estabilidad, podra ser
agregando agentes estabilizantes, solo como modulacin del proceso y
121
no para pasar a formar parte de la formulacin, esto es, para participar

solo temporalmente.
En el caso del piperazilfenilbenzofurano (S-22844) una sustancia con
posible actividad antiviral (17), se logr una disminucin importante de
la velocidad de degradacin observada (kobs), con la inclusin de alcohol
isoproplico en la solucin del frmaco, previa al proceso de llenado y
liofilizacin. En un intervalo de concentracin del alcohol isoproplico de
hasta el 30%, se obtuvo una relacin lineal entre su concentracin y una
disminucin continua del logaritmo de la constante de velocidad de
degradacin (figura III. 5). Sin embargo, conviene considerar que
adiciones de este tipo pueden requerir de un ciclo de liofilizacin ms
prolongado y de condensadores especiales, adems de considerar las
posibilidades de toxicidad del cosolvente orgnico utilizado. Es necesario
lograr niveles del residuo de solventes suficientemente bajos para
considerarlos aceptables, lo cual podra no ser tan fcil.
40
kobs
(min1) 20
* 104
10
5
4
0 10 20 30
ALCOHOL ISOPROPLICO (%)
Figura III. 5. Efecto de la concentracin de alcohol isoproplico sobre

la constante de degradacin de S-22844, en solucin amortiguadora
de pH 6.5, a 50 C (17).
La formacin de complejos es otro mecanismo utilizado para disminuir

la velocidad de hidrlisis. Esto se ha demostrado para la benzocana
complejada con cafena (18). Para riboflavina se encontr tambin una
degradacin hidroltica la cual pudo ser disminuida a travs de la
formacin de un complejo con cafena (19). Sin embargo, para su
aplicacin es necesario considerar lo mencionado en el capitulo anterior
122
de estas notas acerca de los complejos con cafena y de los compuestos

de inclusin con ciclodextrinas.
La hidrlisis, como para cualquier otra reaccin, disminuir su velocidad
al reducir la temperatura de almacenamiento. Sin embargo, la
formulacin no deber congelarse a menos que se haya demostrado
experimentalmente que la congelacin no causa deterioro de la misma,
por ejemplo los posibles cambios en las propiedades fsicas causados
por la congelacin en algunas suspensiones.
III. 3. Oxidacin
La oxidacin es un proceso de gran importancia para la
descomposicin de los principios activos. El problema se presenta sobre
todo con frmacos que son fenoles, aldehdos, olefinas y steres. La
oxidacin ocurre en 3 fases, la induccin, la propagacin y la
terminacin. Durante la induccin se generan radicales libres, a partir de
la prdida de hidrgeno. En la propagacin los radicales libres
reaccionan con oxgeno, para formar radicales de perxido. En la
terminacin, los perxidos se degradan para generar nuevos radicales,
formando una reaccin en cadena. La oxidacin se puede considerar
como la interaccin entre un frmaco y oxgeno, la reaccin puede
escribirse como:
Frmaco + Oxgeno Productos
Las reacciones de oxidacin son generalmente la suma de una serie

de reacciones que inician con una reaccin en particular, la cual
generalmente no involucra al oxgeno molecular. Las oxidaciones son
catalizadas frecuentemente por iones de metales pesados. Tomando
como ejemplo el caso del captopril (21), el cual tiene en su estructura un
grupo tiol y podramos simbolizar como Frmaco-SH, la oxidacin
cataltica podra ocurrir como:
2 Frmaco-SH + 2 M++ 2 (Frmaco-S *) + 2 H+ + 2 M+

2 (Frmaco-S *) Frmaco-S-S-Frmaco
2 M+ + O2 2 M++ + O22-
O22- + 2 H+ H2O + 0.5 O2
En estas ecuaciones el asterisco despus de los smbolos significa

radical libre. La reaccin en su conjunto sera:
123
2 Frmaco-SH + 0.5 O2 Frmaco-S-S-Frmaco + H2O
Como se observa, existe consumo de oxgeno en la reaccin, por ello

se denomina reaccin de oxidacin. Esto quiere decir que si eliminamos
el oxgeno del medio, la reaccin se detendr. Por otro lado, si el
oxgeno estuviera presente en abundancia, la reaccin dependera solo
de la concentracin del frmaco, por lo tanto sera de orden uno. Esto
ocurre considerando que dada la abundancia del oxgeno, su
concentracin prcticamente permanecera constante, durante el
transcurso de la reaccin. El metal pesado fue sealado como bivalente
aunque podra tener otra valencia, dependiendo del metal que se trate.
Sin la presencia de un catalizador como los metales pesados, la
reaccin del captopril sera de autoxidacin y podra describirse como:
2 Frmaco-SH 2 (Frmaco-S-) + 2 H+
2 (Frmaco-S-) + 2 O2 2 (Frmaco-S *) + 2 (O2 *) -
2 (Frmaco-S-) + 2 (O2 *) 2 (Frmaco-S *) + 2 O22-
2 (Frmaco-S *) Frmaco-S-S-Frmaco
2- +
2 O2 + 2 H H2O + 0.5 O2
Como reaccin completa:
2 Frmaco-SH + 0.5 O2 Frmaco-S-S-Frmaco + H2O
La oxidacin en sistemas inorgnicos simples, quiere decir prdida de

electrones. Para sistemas orgnicos, est asociada con la prdida de
hidrgeno o la adicin de oxgeno. La reaccin con oxgeno molecular se
llama autoxidacin. Por ejemplo, compuestos con dobles enlaces
generalmente captan oxgeno, como grasas no saturadas y vitamina A.
La Vitamina A tiene 5 dobles enlaces conjugados y es, por consiguiente,
muy sensible a la oxidacin.
La descomposicin oxidativa tiene lugar, como ya se ha visto,
mediante radicales libres (especies intermedias inestables con un
electrn no compartido) y son comnmente reacciones en cadena. Los
antioxidantes que terminan la reaccin en cadena, porque liberan
hidrgeno, se llaman inhibidores.
Los antioxidantes propiamente dichos retardan o atrasan la oxidacin
pero no la evitan. Los iones metlicos tales como Cu +2 y Fe+3 catalizan la
reaccin, aumentando la oxidacin.
124
III. 3. 1. Proteccin contra la oxidacin.

Las reacciones de oxidacin pueden ser detenidas frecuentemente a
travs de:
Ajustar el pH de la solucin Antioxidantes y sinergistas
Inclusin micelar
Complejacin de iones metlicos
Inclusin molecular
Excluyendo el oxgeno
Complejacin
Excluyendo la luz
Microencapsulacin/recubrimiento
Evitando la presencia de perxidos
Almacenando a temperaturas bajas
Minimizando la superficie
Usando antioxidantes y sinergistas. Los antioxidantes son substancias

que se usan en bajas concentraciones y que de alguna manera estorban
o inhiben la oxidacin. Los antioxidantes funcionan como tales en la
proteccin de los frmacos sensibles a la oxidacin, consumiendo ellos
mismos el oxgeno, antes de que lo haga el frmaco, por lo que
protegern al frmaco de la oxidacin hasta un lmite que sea el
consumo total del antioxidante. Esto significa que la presencia de un
antioxidante crea un tiempo de retraso o lag time, antes de iniciar la
oxidacin del frmaco.
Algunos antioxidantes funcionan interfiriendo con el transcurso de las
reacciones de oxidacin descritas con anterioridad, de tal manera que
las reacciones de oxidacin se vean interrumpidas. En estos casos, los
antioxidantes se autorregeneran, funcionando continuamente, ya que no
se consumen durante el proceso.
Algunos ejemplos de antioxidantes que se emplean en productos
farmacuticos son:
Antioxidantes acuosolubles
Bisulfito de sodio o metabisulfito de sodio *

Sulfoxilato formaldehdo de sodio
125
cido ascrbico *
cido tiopropinico
Hidroquinona (no se permite en E.U. por toxicidad)
* Aceptados por la Farmacopea Suiza (22).
Antioxidantes liposolubles
Hidroxianisol butilado (BHA) *

Galato de propilo *
cido nordihidroguaiartico (NDGA)
Alfa-tocoferol *
steres de cidos grasos del cido ascrbico *
steres dilauril y diestearlicos del cido tiodipropinico
Algunos productos comerciales antioxidantes son en realidad mezclas

de varios antioxidantes individuales, como el AMIFTenox, el cual es una
mezcla de BHA 20%, galato de propilo 6% y cido ctrico 4%, en
propilenglicol.
Dentro de los antioxidantes encontramos aquellos denominados
sinergistas. Bajo el trmino sinergia se entiende la circunstancia de
incrementar la accin de componentes individuales, al usarlos en
conjunto. Esto es, que la accin de, por ejemplo dos componentes
antioxidantes, ser mayor que la suma de las actividades individuales de
los componentes.
Sinergistas
(usados slo en combinacin).
cido ctrico *
cido fosfrico *
Fenilamina.
Lecitina *
126
Triptofano
Glicerina, Sorbitol
Los sinergistas de los antioxidantes no poseen por s mismos una

actividad antioxidante, sin embargo, refuerzan la actividad de otros
antioxidantes. Este sinergismo se logra frecuentemente agregando un
sistema formado por diferentes antioxidantes (22), adems de la mezcla
ya antes mencionada, otro ejemplo es el Ronoxan A:
Un aceptor de radicales libres como -tocoferol

Un aceptor de oxgeno como
Palmitato de ascorbilo Un sinergista o
Lecitina o formador de complejos como
cido ctrico
Las mezclas se preparan de acuerdo a las exigencias de las

autoridades sanitarias o para cumplir una determinada funcin,
encontrndose en el mercado diversas marcas comerciales.
La eficiencia de un antioxidante en aceites puede estimarse por
medio del ensayo de color de la reaccin cido 2-tiobarbitrico-
malonaldehdo tal como han descrito Brownley y Lachman (23).
La seleccin de un antioxidante o una combinacin de antioxidantes
todava se hace sin reglas tericas.
Respecto a los inhibidores de la oxidacin, donde se incluye la
acetanilida y la difenilalanina, estos actan al ceder electrones y tomos
de hidrgeno, los cuales pueden ser tomados por radicales libres,
impidiendo o rompiendo la reaccin en cadena. A este grupo de
antioxidantes pertenecen sustancias con grupos OH y NH, como
pirogalol y otras aminas. En lo que se refiere a los compuestos
polihidroxifenlicos, se sabe que slo funcionan como antioxidantes los
compuestos que tienen los grupos OH en posicin "ortho" y "para" y no
los que estn en posicin "meta". Debido a que estos no pueden adquirir
127
la estructura quinoide, que en un mecanismo muy simplificado aqu se

muestra (24).
OH OH
+ R * +
RH
OH O *
Como ejemplos de oxidacin encontramos que el cido flico puede

ser oxidado a cido para-aminobenzoil glutmico y 2-amino-4-hidroxi-6-
pteridin-carboxaldehdo. En el curso de esta oxidacin, la riboflavina,
funcionando como oxidante del cido flico, se transforma en
leucoriboflavina (en presencia de luz), la cual en presencia de oxgeno
atmosfrico se reoxida a riboflavina, dando por resultado neto la
oxidacin del cido flico con oxgeno atmosfrico. La proteccin de
cido flico con antioxidantes, demostr que antioxidantes como el
cido nor-hidroxiguayartico y para-hidroxianisol butilado son capaces
de reducir las prdidas del cido flico de 83% a slo 34% despus de 6
meses a temperatura ambiente, (25).
El antipirtico, antirreumtico y analgsico, dipirona se encontr
tambin con un mecanismo de degradacin oxidativa, el cual puede ser
esquematizado de la siguiente manera (en atencin nicamente del
grupo sulfito).
HSO3 + O2 + OH 2H+ + SO4-2 + 2 O
El oxgeno para esta reaccin se obtiene del agua en que se

encuentre disuelta la dipirona o de la atmsfera, considerndose como
sitio ms sensible para la oxidacin el grupo sulfito, al igual que otros
compuestos que presentan este mismo grupo funcional. En este caso, la
degradacin por oxidacin se ve ms favorecida en solucin alcalina
que en solucin cida. La reaccin de degradacin oxidativa se ver
acelerada tambin por el calor, debido a un incremento en la disociacin
del grupo HSO3, (26).
Para algunas vitaminas los antioxidantes son por dems importantes.
En un estudio sobre la estabilidad de vitamina A (27), se encontr que
una concentracin del 3% de tocoferol, como antioxidante, protega
128
suficientemente de la oxidacin a una solucin de vitamina A, mientras

que concentraciones de 0.025% fueron insuficientes (figura III. 6).
Algunas ocasiones, como en el caso de vitamina A sin diluir,
antioxidantes que normalmente son muy efectivos como el
butilhidroxitoluol (BHT), no presentan ningn efecto protector contra la
oxidacin cuando se excluye del sistema el O 2, esta sera una razn por
la que la vitamina A pura se vende sin estabilizadores (28).
Un ejemplo de la utilidad de los sinergistas se observa en la figura III.
7. En esta figura se puede apreciar que la suma del efecto unitario de
cada uno de los componentes es inferior a la mitad del efecto total
obtenido de la mezcla, ya antes mencionada como Ronoxan A (22). En
este caso, el aumento en el tiempo de duracin de la fase de induccin
es equivalente a grado de proteccin, particularmente significa que
durante esta fase no hay oxidacin del producto que se desea proteger.
105
Antioxidant
3e
VITAMINA A (%)
90 (%)
0.025
75
60
0 3 6 9 12
TIEMPO (meses)
Figura III. 6, Efecto del DL- alfa-tocoferol como antioxidante de una

solucin acuosa de vitamina A, almacenada a 22 C (27).
129
Figura III. 7. Actividad antioxidante y sinergista de los componentes
12
Palmitato de
10 ascorbilo
FASE DE INDUCCIN (horas)
Lecitina
8
6 Tocoferol
4
Efecto
sinergista
2
Efecto total
0
I II III IV
MEZCLA
de Ronoxan A, sobre la estabilidad de manteca de cerdo (22).
Los antioxidantes usados en productos farmacuticos poseen una

gran variedad de estructuras, las cuales pueden influir de manera
diferente el mecanismo de la oxidacin. El metabisulfito de sodio
funciona principalmente oxidndose el mismo antes que el frmaco al
cual protege, aunque tambin podra funcionar como un inhibidor de
radicales libres. El bisulfito de sodio reacciona con el oxgeno en una
relacin 1:1. La concentracin que usualmente se utiliza es entre
0.025% y 0.1% (29).
Ajustando el pH de la solucin. Captopril, un frmaco utilizado para el
control de la hipertensin se degrada por oxidacin para dar el disulfuro
de captopril, como ya antes se ha observado (pp. 106-107). La
degradacin de captopril es catalizada por iones hidroxilo bajo el
siguiente esquema:
Frmaco-SH + OH- Frmaco-S- + H2O

Frmaco-S- + O2 Frmaco-S * + O2 -
Frmaco-S- + O2 - Frmaco-S * + O22-
2 Frmaco-S * Frmaco-S-S-Frmaco
O22- + H2O 2 OH- + 0.5 O2
130
En esta circunstancia, la probabilidad de degradacin ser mayor

conforme la probabilidad de la presencia de grupos OH - sea mayor, lo
cual significa que a mayor pH la velocidad de degradacin ser mayor
tambin. Esto se observa en la figura III. 8. Esta reaccin tambin es
catalizada por los mismos amortiguadores, los cuales funcionaran
tambin como bases, por lo que se observan relaciones lineales entre su
concentracin y la constante de degradacin observada (figura III. 9).
Como se observa en la figura III. 9, el amortiguador de citratos es el que
menos promueve la reaccin de oxidacin. Se cree que el amortiguador
de citratos catalice menos la reaccin por tener al mismo tiempo un
efecto quelante sobre los iones metlicos presentes en la solucin.
Excluyendo iones metlicos. Utilizando aparatos de vidrio o de acero
inoxidable, o complejando los metales en forma de "quelatos" con cido
ctrico o AEDTA (EDTA).
Agentes que complejan metales:

cido etilendiamino tetractico (AEDTA) *
Fosfatos, pirofosfatos BAL
131
pH = 6.0, Fosfatos
pH = 6.5, Fosfatos
1.9
log CAPTOPRIL (%)
1.7
1.5
0 10 20 30
TIEMPO (horas)
Figura III, 8. Degradacin de orden aparente uno para captopril (0.1

mg/mL) en solucin de amortiguador de fosfatos 0.25 M, a 80 C
(30).
150
100 Citratos
Kobs
/2.303 Fosfatos
(1/hora)
50
Acetatos
0
0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5
AMORTIGUADOR (M)
Figura III. 9. Efecto de la concentracin del amortiguador

sobre la velocidad de degradacin de captopril (0.1 mg/mL)
a pH de 6.0 y temperatura de 80 C (30).
Evitando la presencia de perxidos usando materias frescas y por

control estricto de materias primas. El efecto de los perxidos sobre las
132
reacciones de oxidacin sera debido a la generacin de oxgeno y

radicales libres a partir de ellos.
h
H2O2 2 HO *
HO * + H2O2 H2O + HO2 *

HO2 * + H2O2 H2O + O2 + HO *
2HO2 * H2O2 + O2
Como se observa en la figura III. 10, la adicin de 1 mL de una

solucin al 0.3% de perxido de hidrgeno, a una solucin acuosa de
cido ascrbico, provoca un aumento al doble en la velocidad de
oxidacin, de k = 2.34 10-2 a k = 4.92 * 10-2 (31).
c. Ascrbico
2
c. Ascrbico +
perxido de
LOG C. ASCRBICO (%)
hidrgeno
1.6
1.2
0.8
0 10 20 30 40 50 60
Figura III. 10. Fotodegradacin oxidativa de cido ascrbico

en solucin acuosa (0.8 mg/mL) (31).
Excluyendo oxgeno por vaco o reemplazndolo con atmsfera de

nitrgeno. La mayora de los procesos oxidativos en los productos
farmacuticos ocurren en sistemas slidos o lquidos en contacto con
una fase gaseosa conteniendo oxgeno. En sistemas lquidos la oxidacin
es funcin del oxgeno disuelto. Para evitar o reducir este problema, es
una prctica comn la eliminacin del oxgeno de tales sistemas a travs
de la sustitucin por una atmsfera de nitrgeno. La ebullicin del agua
133
en sistemas lquidos podra no ser suficiente para eliminar todo el

oxgeno presente, debido a esto se recomienda, adems de la ebullicin,
el burbujear nitrgeno dentro del sistema solvente que se use.
Como ya antes se ha mencionado, es posible tambin hacer ajustes
en los procesos de manufactura y en las formulaciones, para prevenir o
evitar reacciones de degradacin de los frmacos. Una posibilidad de
proteccin es la microencapsulacin de los frmacos, por ejemplo el
acetato de vitamina A (32).
Una de las aplicaciones de la microencapsulacin es la proteccin de
los frmacos tanto de su interaccin con otros componentes de la
frmula as como de su interaccin con el medio ambiente. La
microencapsulacin del acetato de vitamina A le protegera, de esta
manera, de la influencia del oxgeno del aire, de la luz y de la humedad
del ambiente as como de otros componentes de la frmula (figura III.
11).
4.7
Microcsulas-
oxgeno
ln Vitamina A (%)
4.5 Microcpsulas-
nitrogeno
Solucin-oxgeno
Solucin-nitrogeno
0 200 400 600

4.0
TIEMPO (horas)
Figura III. 11. Efecto de la microencpsulacin y atmsfera

de almacenamiento, sobre la estabilidad de acetato de
vitamina A, a 50 C (32).
Tanto en atmsfera de aire as como en atmsfera de nitrgeno, las

microcpsulas presentan una mayor estabilidad de la vitamina A. En
atmsfera de aire, las microcpsulas se degradan hasta 6 veces menos
que una solucin oleosa de referencia (figura III. 11). A estas
134
microcpsulas se les puede asignar una estabilidad o fecha de

caducidad de 185 y 217, a 20 C, para atmsferas de aire y nitrgeno
respectivamente, en comparacin con una caducidad de 31 y 72 das
para la solucin oleosa de referencia. Como se puede ver, la eliminacin
del oxgeno de la atmsfera, a la que estn expuestos los productos, es
un buen mtodo para reducir la oxidacin.
Excluyendo la luz por medio de diferentes empaques como el vidrio
mbar o una envoltura transparente conteniendo sustancias que
absorben la luz ultravioleta, se podra proteger de la oxidacin a muchos
productos farmacuticos, no solo a los que sufren oxidacin sino
tambin a los que se degradan por otro tipo de reacciones. El efecto
degradativo de la luz se denomina, en trminos generales, fotlisis. La
adicin de componentes que son capaces de absorber la luz, de manera
preferente, les permite funcionar tambin como agentes protectores de
este tipo de efectos.
Otras vas de degradacin. Muchas transformaciones de otros tipos
toman lugar bajo la accin del calor o de la luz. Entre ellas, la
isomerizacin trae consigo cambios en la actividad farmacolgica de las
substancias qumicas. Casos conocidos de isomerizacin son el manitol,
la vitamina D2 y la hiosciamina L. La epimerizacin de los antibiticos
lactmicos conduce a varios compuestos y por ello, a diferentes
actividades. Dichos cambios, por ejemplo en el caso de las
prostaglandinas, son menores en sistemas lquidos que en estado slido
(1).
La inversin ptica es otra fuente de inestabilidad. Los aminocidos
naturales son levorrotatorios, lo mismo que compuestos activos como la
adrenalina, cuya forma racmica es 20 veces menos activa que la
levorrotatoria. Pasteur separ la forma activa a travs de su tartrato. En
la misma circunstancia se encuentra el etambutol, el cual es 14 veces
menos activo en su forma racmica, comparado con su forma
levorrotatoria. En algunos casos en que se da una prdida de potencia
inexplicada la inversin podra ser la causa. La presencia de la forma
ms activa se podra verificar por medio de la prueba de disolucin, la
cual pondra en evidencia cualquier cambio en la solubilidad del
producto (1).
135
III. 4. Otros factores que modifican la estabilidad qumica

Existen otros factores que si bien son fsicos, tienen una gran
repercusin sobre la estabilidad qumica, entre estos se encuentra el
estado de presentacin de los slidos farmacuticos. Entre estos
factores encontramos el polimorfismo, el seudopolimorfismo, el grado de
cristalinidad o grado de activacin de los slidos y las caractersticas y
extensin de las superficies de los mismos.
Cuando se unen molculas o tomos de un mismo elemento, se
obtiene entre ellos, en el equilibrio, distancias de separacin bien
definidas, las cuales se caracterizan por mantener en un mnimo el
contenido energtico total del sistema. Cuando un slido se construye
de molculas iguales, se dice que alcanza este mnimo en su energa, si
visto desde el interior de una de sus molculas, los alrededores de esta
molcula, en todas direcciones, son iguales. Esto nos conduce a un
sistema ordenado en 3 dimensiones que llamamos estado cristalino de
la materia. Cuando los elementos de un cristal son molculas, estas se
ordenan espacialmente por grupos o celdas elementales, los cuales se
repiten peridicamente y conforman la unidad de construccin del
cristal. Esta celda elemental o cristalito representa la mnima cantidad
del slido con las caractersticas dadas por la interaccin de esas
molculas en ese orden espacial.
Cuando este arreglo espacial elemental es diferente, para un slido
cristalino, entonces se dice que tenemos una forma cristalina diferente,
esto es, tenemos dos diferentes tipos de periodicidad, los cuales se
denominan, en trminos generales, como polimorfos de la misma
sustancia, pudiendo ser al menos dos o ms de dos. El polimorfismo es
la propiedad de un elemento o molcula de cristalizar en ms de una
forma o estructura cristalina diferente. Dicho de otra manera,
polimorfismo es la presentacin de la fase slida de un material en por
lo menos dos diferentes maneras del ordenamiento de las molculas en
el espacio.
En oposicin al estado cristalino se encuentra el estado amorfo, en el
cual la periodicidad u ordenamiento del sistema, de una manera regular,
no existe, aunque las interacciones fundamentales entre las molculas
se mantengan constantes. La idea de amorfo se fundamenta en el
concepto de periodicidad o no-periodicidad.
La presencia de solventes dentro de los slidos cristalinos, como
solvente de cristalizacin, para productos farmacuticos bsicamente el
agua, nos conduce a lo que denominamos solvatos. En el caso particular
del agua seran hidratos. Los solvatos son complejos moleculares que
tienen incorporado un solvente en la red cristalina en una proporcin
estequiomtrica. Estos compuestos moleculares pueden contener dos o
ms constituyentes que han cristalizado juntos, formando una nueva
entidad cristalina. Para distinguir entre los solvatos y los polimorfos,
136
estos ltimos no son complejos moleculares, se utiliza comnmente la

designacin de seudopolimorfo para los solvatos.
Desde un punto de vista prctico, en la naturaleza y en los materiales
farmacuticos, difcilmente encontramos slidos totalmente cristalinos o
totalmente amorfos. Mas bien encontramos productos que ms o menos
son cristalinos (cristales reales) y substancias que son mas o menos
amorfas. Entre estos dos extremos tambin encontramos materiales con
diversos grados de ordenamiento o grados de cristalinidad, los cuales
tendrn propiedades intermedias entre las caractersticas de los dos
estados extremos.
Los cristales en general y la superficie de los slidos farmacuticos en
particular, regularmente presentan imperfecciones o defectos, los cuales
disminuyen la cristalinidad de los materiales. En estos defectos la
reactividad es mayor que en el resto del cristal. Se supone que la
descomposicin de una sustancia cristalina se iniciara preferentemente
en estos lugares que se consideran activados. Una vez que una molcula
se descompone, rompiendo enlaces existentes en estos lugares que se
consideran activados, la geometra de la superficie cambia, permitiendo
que las molculas vecinas tengan preferencia para descomponerse. Se
considera que se formara una cadena o plano de molculas activadas,
que permitira continuar la reaccin de descomposicin. Por esta razn,
el grado de cristalinidad y el tipo o forma de las superficies tendran un
fuerte impacto sobre la estabilidad.
Empricamente se considera que la descomposicin de un slido inicia
en la superficie y de ah se propaga hacia el interior, de tal forma que el
frente de descomposicin progresara de manera lineal y proporcional a
la superficie expuesta por el slido. Predeciblemente, las reacciones de
degradacin topoqumicas procedern ms rpido si la superficie
expuesta aumenta, por ejemplo, conforme las partculas de un frmaco
son ms pequeas.
III. 4. 1. Efectos del polimorfismo sobre la estabilidad qumica

Las interacciones intermoleculares cambian en funcin del tipo de
polimorfo o, en general, del grado de orden de los materiales. Esto se
refleja en las diferencias que se observan en los espectros infrarrojos de
los diferentes polimorfos. Estas diferencias en los espectros de absorcin
indican diferencias en el contenido energtico. Los diferentes niveles
energticos tienen repercusin sobre caractersticas como la presin de
vapor. El diagrama de fases de diferentes polimorfos es la sobreposicin
de las diferentes caractersticas de los polimorfos o formas cristalinas
individuales, como se muestra en la figura III. 12.
Las dos modificaciones cristalinas mostradas en la figura III. 12 se
comportan enantiotrpicamente, esto es, ambas formas poseen un
137
determinado intervalo de temperatura en el cual una de las dos formas

presenta una presin de vapor inferior a la otra (33).
Adems del comportamiento enantiotrpico, tambin podra
presentarse un comportamiento monotrpico, esto significa que una de
las dos estructuras ser menos estable a todas las temperaturas, como
se muestra en el diagrama de la figura III. 13.
La forma cristalina ms estable, a una temperatura determinada, es
la que a esa temperatura tenga la menor presin de vapor. El diagrama
de la figura III. 12 nos muestra que, para este ejemplo, a temperaturas
bajas, la forma II sera la ms estable. A mayores temperaturas, despus
de P, la forma ms estable sera I. A esas temperaturas la forma o
modificacin cristalina II sera la que tendra mayor energa y por lo
tanto la menos estable. El diagrama de la figura III. 13 nos muestra que
la modificacin I es la que posee menor presin de vapor y por eso, es la
ms estable en todo el intervalo de temperaturas mostradas.
II
LQUIDO
I
PRESIN
SLIDO
O
II
O
I I
O
P GAS
II
TEMPERATURA
Figura III. 12, Diagrama de fases de una sustancia

enantiotrpica (33).
SLIDO
LQUIDO
O
II
II O
I
GAS
I 138
Figura III. 13. Diagrama de fases de una sustancia monotrpica (33).
PRESIN
TEMPERATURA
Una modificacin cristalina (polimorfo) con alto contenido energtico

es considerada como metaestable (medio estable o menos estable),
cuando su transformacin a otra modificacin cristalina ms estable,
requiere de alcanzar una cierta energa de activacin.
La importancia de la metaestabilidad o del polimorfismo de los slidos
farmacuticos, radica en la importancia de los cambios que se generan
en las propiedades fisicoqumicas de los materiales que poseen estas
estructuras. En pginas anteriores (89-91) se ha mencionado una
importante diferencia en la estabilidad fotoqumica de la carbamazepina,
como un ejemplo de la diferencia en reactividad que presentan
diferentes polimorfos.
Los productos de degradacin tambin pueden ser diferentes,
adems de la reactividad, de acuerdo al polimorfo que sufra tal
descomposicin. El cido o-etoxi-trans-cinmico, en sus polimorfos , y
sufren una reaccin de fotocicloadicin (34). La estereoqumica de los
productos fue determinada por la orientacin espacial y la distancia
entre las molculas de las fases cristalinas de los tres diferentes
polimorfos:
Forma
O-ET
Obtenida de acetato
de etilo, ter o CO2H
HO2C
acetona
ET-O
139
CO2H
O-ET
CO2H
O-ET
Forma
Obtenida de benceno o
ter de petrleo CO2H
O-ET
Forma NO HAY REACCIN
Obtenida de etanol-
agua
Se debe buscar siempre la forma ms estable para el desarrollo del

producto, siempre y cuando no se desee hacer uso de esa inestabilidad
para otros fines del diseo, por ejemplo, para aumentar la solubilidad y
velocidad de disolucin.
140
El cianidanol es otra sustancia que presenta diferentes polimorfos, los

cuales muestran diferente estabilidad frente a la luz, como se observa
en la figura III. 14. La forma cristalina denominada como monohidrato I
presenta mucho menor estabilidad, esto es, se degrada mas que la
forma denominada monohidrato II, cuando fueron irradiadas con una
lmpara de mercurio, a 20 C y 55% de humedad relativa. Un anlisis
posterior, de rayos X, mostr que los polimorfos no cambiaron su
estructura durante la exposicin a la luz. En el caso de la estabilidad de
un seudopolimorfo, el monohidrato, comparada contra la estabilidad del
producto anhidro, se puede observar en la figura III. 14 que el producto
anhidro es menos estable que el monohidrato. Existen diferentes
circunstancias en lo que se refiere a la estabilidad de diferentes formas
cristalinas, por lo que se debe verificar cual forma nos es ms
conveniente para cada caso en particular. Los autores suponen una
menor permeabilidad al oxgeno, en el monohidrato II, como la causa de
su mayor estabilidad (35).
100
CIANIDANOL (%)
Monohidrato I
Monohidrato II
85
Anhidro II
70
0 2 4 6 8 10 12 14
Figura III. 14. Fotoestabilidad de tres diferentes formas

cristalinas del monohidrato de cianidanol a 20 C y 55% de
humedad relativa (35).
III. 4. 2. Efectos del grado de cristalinidad sobre la estabilidad qumica
141
La molienda o fragmentacin es un medio para reducir el tamao de

las partculas de los polvos y para mezclar frmacos. El rea superficial
as como el grado de cristalinidad resultante podran afectar la
estabilidad qumica de los frmacos en su estado slido. Por esta razn,
las operaciones unitarias farmacuticas que produzcan cambios de este
tipo tambin afectaran la estabilidad de los frmacos slidos.
En los ltimos 15 aos se han reportado cambios en las propiedades
fisicoqumicas de varios compuestos, provocados por energa adquirida
durante el procesamiento de esos materiales, a travs de molienda o
compresin. Substancias como la cefalexina, el palmitato de
cloramfenicol, la indometacina y la fenilbutazona estaran en esa
circunstancia. Tambin se ha reportado que existe una relacin entre la
cristalinidad de la cefalotina, obtenida por liofilizacin o recristalizacin,
y la velocidad de su descomposicin en estado slido, concluyndose,
en ese caso, que la estabilidad qumica de la cefalotina sdica cambiara
en funcin de su mtodo de preparacin (36).
El secado de seudopolimorfos o solvatos es otra operacin
farmacutica que podra alterar la cristalinidad de los slidos y por lo
tanto su estabilidad. En el caso de los frmacos que poseen agua de
cristalizacin, los procesos antes mencionados podran afectar la
resistencia de los enlaces de las molculas de agua dentro de la red
formada por el cristal hidratado y as su permanencia. La perdida de
agua de cristalizacin usualmente deja huecos en el cristal que se
consideran defectos y que contribuyen a incrementar su contenido
energtico. Por estas razones es importante entender que factores
pueden alterar la estabilidad.
Los procesos farmacuticos antes mencionados, como causantes de
perdida de la estabilidad de los slidos, molienda y compresin, se dice
que provocan una activacin de los materiales, adems de una
reduccin en el tamao de sus partculas. Por activacin se entiende la
transmisin de energa a un material a travs de un proceso mecnico,
el cual resultar en estructuras cristalinas con un cierto grado de
destruccin en su orden interno, por lo que esa estructura tendr ms
energa interna, energa para reaccionar, y ser menos estable. Este
mismo fenmeno de destruccin parcial de la red cristalina y activacin
ocurre durante el secado de solvatos.
El mximo grado de deterioro de la red cristalina de un slido tendra
como limite el estado amorfo. El grado de orden que regularmente
existe en un cristal no existe en el estado amorfo y la posicin de las
molculas unas con respecto a otras es mas al azar, quiz como en el
estado lquido. El carcter amorfo es comn en los polmeros usados
como excipientes farmacuticos as como en pptidos grandes y en
protenas usadas como agentes teraputicos. Sin embargo, tambin se
puede presentar en molculas orgnicas pequeas, como los frmacos.
142
Por las circunstancias mencionadas, es de esperarse que el estado

amorfo presente propiedades termodinmicas que faciliten ciertos
procesos, comparado con el estado cristalino, por ejemplo la solubilidad
y la presin de vapor seran mayores para el estado amorfo que para el
cristalino, as como tambin una mayor movilidad molecular. Por estas
razones tambin podramos esperar que el estado amorfo tenga una
mayor reactividad qumica, adems de una tendencia a cristalizar
espontneamente (37).
Los patrones de difraccin de rayos X del dihidrato del sulfato de
sodio y prasterona disminuyeron gradualmente conforme ste se
deshidrato, aunque no cambi la posicin de los picos en el patrn de
difraccin (38). Esto se traduce como perdida de la cristalinidad original
o destruccin parcial del orden interno de la red cristalina (figura III. 15).
100
GRADO DE CRISTALINIDAD (%)
90
80
70
60
50
0 2 4 6 8 10
CONTENIDO DE AGUA (%)
Figura III. 15. Prdida del orden interno o grado de

cristalinidad del dihidrato del sulfato de sodio y prasterona,
cuando se deshidrat gradualmente (38).
La descomposicin en estado slido del dihidrato de sodio y

prasterona parcialmente deshidratada, estudiada a 40 C, se muestra en
la figura III. 16. Como se observa, la muestra del dihidrato cristalino fue
la ms estable, mientras que las muestras de los materiales
parcialmente deshidratados, con menor grado de cristalinidad, fueron
menos estables.
Cuando el grado de deshidratacin fue extremo, contenido de
humedad de 0.12%, el producto, contrario a lo esperado, fue ms
estable, aunque tuviera un grado de desorden mayor. Esto se considera
143
debido a la falta de agua en el medio, para llevar a cabo la reaccin de

hidrlisis, que es la va de degradacin de este producto.
En algunas ocasiones, la cristalizacin de un principio activo en un
producto liofilizado es deseable, debido a que esta cristalizacin le
confiere al producto mayor estabilidad, comparado contra el producto
tradicionalmente amorfo que se obtiene en los liofilizados. En la etapa
del congelamiento, durante el ciclo de liofilizacin, si el soluto forma un
verdadero eutctico con el agua, se formaran cristales de este eutctico
y de agua (hielo). Si el soluto no forma un verdadero eutctico, durante
la etapa de congelamiento, se alcanzar un punto en el que el agua
empieza a formar hielo. Cuando la solucin formada por el soluto
alcanza su mxima concentracin, debido a la separacin gradual del
hielo, entonces precipita el soluto formando un amorfo, cristales o una
mezcla de ambos.
99
PRASTERONA (Mol %)
8.71% agua
96
7.53% agua
93
2.55% agua
90
0 5 10 15 20 25 30
TIEMPO (semanas)
Figura III. 16. Efecto de la deshidratacin, equivalente a una

disminucin del grado de cristalinidad, sobre la estabilidad
del dihidrato de sulfato de sodio y prasterona, a 40 C (38).
En algunos casos, cuando se desea que el liofilizado sea cristalino,

esto se puede lograr a travs de un tratamiento trmico de la solucin
congelada o por humidificacin del producto liofilizado.
En estudios de estabilidad de la ciclofosfamida se encontr que era
inestable como producto liofilizado, cuando se formul con manitol,
lactosa o bicarbonato de sodio, debido a su estado amorfo. Cuando se
humedeci el producto conteniendo lactosa, para tratar de cristalizar la
ciclofosfamida, solo se obtuvieron cristales de lactosa, permaneciendo la
144
ciclofosfamida amorfa, por lo que su estabilidad no mejoro. Sin embargo,

cuando se us como excipiente la urea y se humedeci con 5 L de agua
el producto liofilizado, la estabilidad aument (ver figura II. 25, pgina
84). El anlisis de rayos X y anlisis trmico diferencial mostr que la
adicin de humedad sobre el liofilizado de ciclofosfamida-urea produjo la
cristalizacin de la ciclofosfamida, la cual es ms estable que la forma
amorfa obtenida sin la adicin de humedad (39).
III. 4. 3. Efectos de la superficie de los slidos sobre la estabilidad

qumica
Como ya se ha mencionado, la descomposicin de un slido inicia
sobre su superficie y prosigue hacia el interior del slido. Bajo este
modelo y haciendo consideraciones de una degradacin acorde a la
superficie de las partculas, suponindolas geomtricamente como
cubos, se llega a la ecuacin III. 1.
X = Na3 / [Nao] 3 = [a/ao] 3 = [1- (k/ao) t] 3 (II. 1)
Donde ao es la medida de un lado del cubo original, a es el mismo

lado despus de un tiempo de reaccin, N el nmero de partculas en la
muestra, con una densidad , X es la fraccin remanente del slido sin
reaccionar. Los trminos k y t son la constante y el tiempo
respectivamente.
A partir de esta ecuacin, se puede observar que la degradacin del
slido ser relativa a la constante intrnseca de reaccin dividida por el
tamao de la partcula, representado por ao. Aunque en el concepto
terico esta ecuacin describe una reaccin sobre la superficie de un
slido, una ecuacin de primer orden tambin describe apropiadamente
la misma reaccin de descomposicin (12).
Como una extensin del concepto de reaccin sobre el total de la
superficie de un slido tenemos las reacciones que ocurren a travs de
la difusin de molculas entre dos superficies en contacto. En estas
reacciones, la descomposicin tambin es relativa al tamao de las
partculas. Entre ms pequeas sean las partculas mayor ser la
velocidad de descomposicin, ya que entre ms pequeas sean las
partculas, tendrn mas superficie de contacto entre s.
Tabletas de cido acetilsaliclico (aspirina) preparadas usando cuatro
diferentes fracciones de tamao de partcula de fostato de calcio
dihidratado, almacenadas a 35 C y con una humedad relativa de 82.9%,
mostraron mayor degradacin conforme disminuy el tamao de
partcula, o lo que es lo mismo, cuando se increment la superficie
especfica del excipiente (40). Como se puede observar en la figura III.
145
17, la cantidad de cido acetilsaliclico en las tabletas fue menor

conforme el tamao de las partculas del excipiente fue disminuyendo o
su superficie aumentando. Este efecto puede ser atribuido a un aumento
en el rea de contacto entre las superficies del frmaco y del excipiente,
provocando mayores velocidades de degradacin.
100
80
ASPIRINA (%)
60
40
8 18 28 38 48
TAMAO DE PARTCULA DEL FOSFATO DE CALCIO (mcm)
Figura III. 17. Perfil de degradacin de tabletas de aspirina en

funcin del tamao de partcula del fosfato de calcio dihidratado,
almacenadas 6 meses a 35 C y 82.9% de humedad relativa (40).
III. 5. Bibliografa
1. Verain, A. y Chulia, D. Changes in medicinal products and the

consequences for their therapeutic application. En: Grimm, W.
Stability testing of drug products, Wissenschaftliche
Verlagsgesellschaft, Stuttgart-D, pp. 64-76 (1987).
2. Stahl, P. H. Characterization and improvement of the stability
behavior of drug substances. En: Grimm, W. y Krummen, K. Stability
testing in the EC, Japan and the USA. Wissenschaftliche
146
3. Connors, K., Amidon, G. L. y Kennon, L. Chemical stability of

pharmaceuticals. A handbook for pharmacists. John Wiley & Sons,
New York-USA, pp. 63-79 (1979).
4. Edwards, L. J. Trans. Faraday Soc. 46, 723 (1950).
5. Edwards, L. J. Trans. Faraday Soc. 48, 696 (1952).
6. Higuchi, T., Harvinga, A. y Busse, L. W. J. Am. Pharm. Assoc. Sci. Ed.,
39, 405- (1950).
7. Higuchi, T. y Bias, C. D. The kinetics of degradation of
chloramphenicol in solution I. J. Am. Pharm. Assoc. Sci. Ed., 42, 707-
714 (1953).
8. Higuchi, T., Marcus, A. D. y Bias, C. D. The kinetics of degradation of
chloramphenicol in solution II. J. Am. Pharm. Assoc. Sci. Ed., 43, 129-
134 (1954).
9. Windheuser, Higuchi, T. J. Pharm. Sci.51, 534 (1962).
10. Seferin, J. L. y Magalhaes, J. F. Determinaco da estabilidade dos
clorhidratos de procaina, procainamida e metoclopramida en
medicamentos. Rev. Farm. Bioqum. Univ. S. Paulo. 15 (1/2), 35-51
(1977).
11. Pramar, Y. y Das Gupta, V. Effect of pH, phosphate buffer
concentration and the ionic strength on the stability of cefotetan
disodium. Drug Dev. Ind. Pharm. 17 (8), 1059-1066 (1991).
12. Carstensen, J. T. Drug stability. Principles and practices, 2 edicin,
Marcel Dekker Inc. New York-USA, pp. 230-280 (1995).
13. Powell, M. F. Enhanced stability of codeine sulfate: Effect of pH,
buffer, and temperature on the degradation of codeine in aqueous
solution. J. Pharm. Sci., 75 (9), 901-903 (1986).
14. Bundgaard, H., Falch, E., Larsen, C. Mosher, G. L. y Mikkelson, T. J.
Pilocarpine prodrugs II. Synthesis, stability, bioconversion, and
physicochemical properties of sequentially labile pilocarpine acid
diesters. J. Pharm. Sci., 75 (8), 775-783 (1986).
15. El-Shattawy, H., Kassem, A., Omar, S., Sami, A. y Yassin, A.
Preparation and evaluation of directly-compressed indomethacin,
indomethacin sodium and indomethacin meglumine tablets. Drug.
Dev. Ind. Pharm., 20 (5), 901-909 (1994).
16. Yu, A. B. C., Portmann, G. y Simmons, D. Kinetic and stability study
of an investigative antirhinovirus compound. Drug Dev. Ind. Pharm.
21 (16), 1827-1840 (1995).
17. Mendenhall, D. W. Stability of parenterals. Drug Dev. Ind. Pharm.,
10 (8 y 9) 1297-1342 (1984).
147
18. Higuchi, T. y Lachman, L., Inhibition of hydrolysis of esters in

solution by formation of complexes I. Stabilization of benzocaine with
caffeine. J. Am. Pharm. Assoc. 74, 521- (1955).
19. Guttman, D. E. Complex formation influence on reaction rate I.
Effect of caffeine on riboflavin base catalized degradation rate. J.
Pharm. Sci. 51, 1162-1166 (1962).
20. Patel, C., Stanford, J. B. y Sugden, J. K. Effect of light on the
stability of aqueous solutions of pyridostigmine bromide. Pharm. Acta
Hev. 55 (5), 138-140 (1980).
21. Carstensen, J. T. Drug stability. Principles and practices, 2 edicin,
Marcel Dekker Inc. New York-USA, pp. 122-143 (1995).
22. Schuler, P. Stabilisierung duch antioxidantien. En: Essig, D., Hofer,
J., Schmidt, P. C. y Stumpf, H. Stabilisierung technologie wege zur
haltbaren arzneiform. Wissenschaftliche Verlagsgesellschat, Stuttgart-
D, pp. 65-78 (1986).
23. Brownley, y Lachman, L. J. Pharm. Sci. 54, 1480 (1965).
24. Boozer, C. E., Hammond, G. S., Hamilton, C. E. y Sen, J. N., J. Am.
Chem. Soc., 77, 3238- (1955).
25. Tansey, R. P. y Schneller, G. H. Studies in the stabilization of folic
acid in liquid pharmaceutical preparations. J. Am Pharm. Assoc. Sci.
De. 44, 34-37 (1955).
26. Dubash, D. D. y Moore, W. E. J. Pharm. Sci. 61, 386- (1972).
27. Klotz, L., Httenrauch, R. y Mller, W., Pharmazie 20, 606-608
(1965). A travs de: Bhler, V. Formulierung stabilisierter
vitaminlsungen. En: Essig, D., Hofer, J., Schmidt, P. C. y Stumpf, H.
Stabilisierung technologie, wege zur haltbaren arzneiform.
Wissenschaftliche Verlagsgesellschat, Stuttgart-D, pp. 79-91 (1986).
28. Bhler, V. Formulierung stabilisierter vitaminlsungen. En: Essig,
D., Hofer, J., Schmidt, P. C. y Stumpf, H. Stabilisierung technologie,
wege zur haltbaren arzneiform. Wissenschaftliche Verlagsgesellschat,
Stuttgart-D, pp. 79-91 (1986).
29. Angberg, M., Nystrm, C. y Castensson, S. Evaluation of heat-
conduction microcalorimetry in pharmaceutical stability studies VII.
Oxidation of ascorbic acid in aqueous solution. Int. J. Pharm. 90, 19-33
(1993).
30. Chen, D., Chen, H. y Ku, H. Degradation rates of captopril in
aqueous medium through buffer catalysis oxidation. Drug Dev. Ind.
Pharm. 21 (3), 781-792 (1995).
148
31. Ho, A. H. L., Puri, A. y Sugden, J. K. Effect of sweetening agents on

the light stability of aqueous solutions of ascorbic acid. Int. J. Pharm.
107, 199-203 (1994).
32. Cadorniga, R., Lastres, J. L. y Frutos, P. Estabilidad del acetato de
vitamina A en microcpsulas. Boll. Chim. Farm., 118, 380-390 (1979).
33. Fhrer, C. Stabilisierung metastabilen formen von arzneistoffen.
En: Essig, D., Hofer, J., Schmidt, P. C. y Stumpf, H. Stabilisierung
technologie, wege zur haltbaren arzneiform. Wissenschaftliche
Verlagsgesellschat, Stuttgart-D, pp. 33-43 (1986).
34. Cohen, M. D., Schmidt, G. M. J. y Flavian, S. Topochemistry. Part IV.
Experiments on photochromy of crystalline anils of salicylaldehydes. J.
Chem. Soc., a travs de: Monkhouse, D. C. Stability aspects of
preformulation and formulation of solid pharmaceuticals. Drug Dev.
Ind. Pharm., 10 (8 y 9), 1373-1412 (1984).
35. Akimoto, K., Inoue, K. y Sugimoto, I. Photo-stability of several
crystal forms of cianidanol. Chem. Pharm. Bull. 33, 40504053 (1985).
36. Otsuka, M. y Kaneniwa, N. Effect of grinding on the crystallinity
and chemical stability in the solid state of cephalothin sodium. Int. J.
Pharm. 62, 65-73 (1990).
37. Hancock, B. C. Y Zografi, G. Characteristics and significance of the
amorphous state in pharmaceutical systems. J. Pharm. Sci. 86 (1), 1-
12 (1997).
38. Nakawaga, H., Takahashi, Y. Y Sugimoto, I. The effect of grinding
and drying on the solid state stability of sodium prasterone sulfate.
Chem. Pharm. Bull. 30, 242-248 (1982).
39. Kovalcik, T. R. y Guillory, J. K. Stability of ciclofosfamide in
lyophilized cakes. I. Urea, polyvinylpyrrolidone, and dextran as
excipients. J. Parenter. Sci. Technol. 42 (5), 165-173 (1988).
40. Landn, M., Casalderrey, M., Martnez-Pacheco, R., Gmez-Amoza, J.
L., Souto, C., Concheiro, A. y Rowe, R. C. Chemical stability of
acetylsalicylic acid in tablets prepared with different particle size
fractions of a commercial brand of dicalcium phosphate dihydrate.
Int. J. Pharm. 123, 143-144 (1995).
149
IV
ESTABILIDAD FSICA DE FORMAS FARMACUTICAS
IV. 1. Consideraciones generales
143
IV. 2. Estabilidad fsica de formas farmacuticas slidas
145
IV. 2. 1. Efecto de la humedad sobre la estabilidad fsica de
productos slidos 162
IV. 3. Estabilidad fsica de sistemas semislidos
167
IV. 4. Estabilidad fsica de formas farmacuticas en solucin
195
IV. 5. Bibliografa
208
150
151
IV
ESTABILIDAD FSICA DE FORMAS FARMACUTICAS
IV. 1. Consideraciones generales

Una de las obligaciones ms importantes de la tica farmacutica, es
la de vender productos que mantengan su apariencia durante el periodo
que pueden ser vendidos y consumidos. Para garantizar lo anterior, se
han desarrollado tcnicas y mtodos de evaluacin de las caractersticas
fsicas de los medicamentos, las cuales no son tcnicamente tan
sofisticadas, como lo son los mtodos de ensayo qumico, quiz debido a
que actualmente los estudios de estabilidad fsica no se encuentran
reglamentados de una manera tan completa como los de estabilidad
qumica. Esta diferencia entre los estudios de estabilidad fsica y qumica
resulta de la poca importancia que se le ha dado tradicionalmente a las
caractersticas fsicas de los medicamentos, sobre el efecto teraputico
de los mismos. Se ha pensado ms bien en el efecto de la desconfianza
que causar en el paciente, la presentacin de una suspensin
sedimentada, una tableta decolorada o coloreada (por degradacin), etc.
La estabilidad fsica tiene desde luego gran importancia sobre la
apariencia externa de los medicamentos. Sin embargo, de igual manera
se puede afectar la biodisponibilidad y la uniformidad de la dosificacin
por cambios fsicos en las formas farmacuticas, pudiendo presentarse
este efecto con la misma magnitud que aquella de los cambios qumicos.
De una manera general, podramos argumentar a favor de los
estudios de estabilidad fsica por medio de los siguientes conceptos o
consideraciones (1):
La presentacin al consumidor. Es natural el pensar que en un

clima de competencia ms o manos grande como el que existe en
el mercado nacional e internacional, exista la necesidad de lanzar
al mercado productos de mejor apariencia, a la vista del
consumidor. En general, de mayor calidad, calidad la cual
disminuir si presentamos productos como suspensiones
separadas, por ejemplo, porque causaran desconfianza por parte
de los pacientes o consumidores.
La uniformidad de contenido. Independientemente del proceso de
manufactura y del producto obtenido, es necesario mantener la
uniformidad del contenido de los medicamentos al paso del
tiempo. Se pueden encontrar casos como el de la nitroglicerina, la
cual sublima, alterando de esa manera la distribucin de la misma
152
en las tabletas. Otro caso sera la formacin de grumos en

suspensiones, lo que impedira una dosificacin uniforme. Estos
procesos no cambian el contenido global de una frasco o del
conjunto de tabletas, pero s cambian el contenido de la dosis
unitaria, con el peligro de sobredosificacin o de administrar dosis
que resulten en niveles subteraputicos.
La disponibilidad biolgica. Finalmente, veremos que cambios
fsicos pueden dar lugar a variaciones en la absorcin de los
frmacos. As por ejemplo, el tiempo de desintegracin y
disolucin de formas slidas puede variar con el tiempo, dndonos
productos ms consistentes y as una disminucin en la
biodisponibilidad. Otro caso similar se presentara al haber un
cambio en la cristalinidad o forma cristalina de los frmacos al
paso del tiempo.
Despus de esta argumentacin podemos decir que:
La estabilidad fsica significa la retencin de las propiedades

fsicas originales como la apariencia, sabor y consistencia,
uniformidad y patrn o perfil de liberacin de los frmacos.
De una manera ms amplia, podemos decir que se refiere a cambios

fsicos como (2):
Cambio del estado de agregacin (evaporacin, liquefaccin).

Cambio de la consistencia (endurecimiento y ablandamiento).
Cambio del grado de dispersin de soluciones coloidales y de
sistemas dispersos (sedimentacin, floculacin, flotacin o
formacin de nata).
Cambio en la resistencia a la ruptura de tabletas.
Cambio del tiempo de desintegracin de slidos
Cambios en el perfil de liberacin.
Algunas de estas caractersticas, as como otras que no han sido

mencionadas, pueden depender o ser generadas por la ocurrencia de
fenmenos o propiedades fsicas de los materiales o sistemas como son:
153
Adsorcin.
Solubilidad insuficiente.
Distribucin irregular.
Inmiscibildad.
La presentacin de una falta de estabilidad fsica, puede ser tambin

el resultado de cambios qumicos o microbiolgicos, con lo cual la
solucin del problema qumico o microbiolgico, traer consigo la
solucin del problema fsico. Sin embargo, en muchos casos esta falta de
estabilidad fsica se solucionar al cambiar las propiedades fsicas de las
formas farmacuticas.
Un anlisis ms especfico de la estabilidad fsica, nos lleva al estudio
de las diferentes formas farmacuticas, as como de los fenmenos
fsicos que en general tienen lugar en las mismas.
IV. 2. Estabilidad fsica de formas farmacuticas slidas

Mas que la estabilidad fsica, la estabilidad fisicoqumica de las formas
de dosificacin slidas requiere de un conocimiento fundamental de las
propiedades fsicas y qumicas de los materiales, para entender las
posibles vas de descomposicin. Entre las propiedades ms importantes
se encontraran la solubilidad, el polimorfismo, la interaccin con la
humedad y los efectos combinados de calor y humedad as como el
efecto de la luz.
Los cambios ms importantes que se pueden generar en las formas
farmacuticas slidas as como las posibles causas de ellos, incluyen
puntos como los que en los siguientes prrafos se mencionan.
En nuestro pas existen pocos productos en forma de polvos o
grnulos. Los que hay regularmente son productos para reconstituir, ya
sea como solucin o como suspensin, tanto oral como inyectable. Uno
de los problemas ms notorios para el consumidor y que podra afectar
la disponibilidad biolgica sera el cambio en la velocidad de disolucin,
el cual hara difcil la reconstitucin de una solucin o provocara
crecimiento en el tamao de partcula en una suspensin. Las
principales razones para este problema se refieren a cambios en las
fuerzas de cohesin de los polvos, debidas a formacin de puentes entre
las partculas y las transformaciones del estado slido como
cristalizacin de amorfos o cambio de polimorfismo.
Estos cambios regularmente se aceleran en de la presencia de
humedad as que evitndola se podra reducir o eliminar este problema.
154
La presencia de humedad y cambios cclicos en la temperatura, como los

del da y la noche, seran una fuente de cambios en el tamao de las
partculas, adems de hacer posible la transformacin de slidos
anhidros a sus formas cristalinas hidratadas.
Problemas tpicos de estabilidad fsica de Polvos/granulados:
Cambio Causa probable

Pegajosidad Humedad, calor
Disminucin del flujo Humedad
Olores extraos Humedad, incompatibilidades,
pH
Manchas, coloraciones Humedad, incompatibilidades,
pH, luz
Densidad aparente Humedad
Tamao de partcula Humedad, calor
De polimorfo Humedad, calor, inestabilidad
y grado de cristalinidad de la forma cristalina utilizada
Capacidad de absorcin Humedad
Velocidad de disolucin Pegajosidad, crecimiento de los
cristales, cambio de la forma
cristalina
En algunas ocasiones podra parecer que existen problemas en la

reconstitucin de soluciones o suspensiones, los cuales solo son
aparentes y generalmente debidos a instrucciones de reconstitucin no
bien definidas. Se debern establecer indicaciones de reconstitucin que
permitan garantizar tal reconstitucin, aun bajo condiciones de
desviacin pequeas, por parte del usuario, validndolas
experimentalmente.
En el caso de polvos o granulados que reducen de manera importante
su velocidad de flujo, cuando la humedad relativa es alta (p. e. sobre
60%), se pueden usar desecantes o el cambio de excipientes
relativamente higroscpicos por otros que adsorben menos humedad,
155
adems de la posibilidad de usar empaques impermeables al vapor de

agua.
En cpsulas es necesario comprobar que durante el almacenaje, las
cpsulas ni se humedecen lo suficiente para pegarse, ni se secan lo
suficiente para resquebrajarse, que resisten las manipulaciones del
empaque, transporte y almacenamiento, que el color no cambia con el
tiempo, que el contenido ni se pierde ni escapa de la cpsula y que el
perfil de liberacin no cambia con el tiempo.
Problemas tpicos de estabilidad fsica de Cpsulas:

Color, colorantes Luz, incompatibilidad, pH
Olores Incompatibilidades, pH
Pegajosidad Humedad
Desintegracin Cambio en la desintegracin,
crecimiento de cristales,
cambio de polimorfo
Para las cpsulas no solo es importante la humedad relativa del aire

sino que es tambin de igual importancia la humedad del contenido de
las mismas. La humedad del contenido de las cpsulas se podra
desorber y pasar a humedecer la cpsula, provocando que sta se
volviera pegajosa. Particularmente, esto ocurre cuando adems de una
humedad elevada del contenido de las cpsulas, stas se almacenan en
empaques que son impermeables al vapor de agua, obligando as al
agua a permanecer en el interior del empaque. Por otro lado, las
cpsulas se volveran quebradizas s el contenido de las mismas fuera
muy higroscpico y tuviera bajo contenido en humedad, ya que las
cpsulas perderan su humedad, a favor del contenido. Para evitar estos
problemas se podra hacer uso de (3):
Empaques permeables al vapor de agua, cuando las condiciones

de almacenamiento as lo permitan.
Cambio de excipientes higroscpicos por otros menos
adsorbentes.
156
Hidrofobizacin del contenido, siempre y cuando no se

perjudique la biodisponibilidad.
Humedecimiento de las cpsulas, para desplazar el punto de
transferencia de humedad desde el contenido, solo cuando la
estabilidad del producto as lo permita.
Problemas tpicos de estabilidad fsica de Tabletas:

Manchas, coloraciones Humedad, incompatibilidades,
calor, luz, pH
Olores Humedad, incompatibilidades,
calor, pH
Fracturas, laminacin Humedad, recuperacin
elstica y separacin de capas
Velocidad de disolucin Cambios en la desintegracin,
crecimiento de cristales,
cambio de polimorfo o
grado de cristalinidad
Pegajosidad de pastillas Humedad, calor/fusin
Efervescentes inflados Humedad, calor
Para estabilizar las tabletas, entre otros casos que se discutirn aqu,
existe un nmero grande de posibilidades. Entre ellas podemos
mencionar la proteccin contra la humedad en las tabletas
efervescentes, la cual se logra introduciendo en el empaque un material
secante o empacando el producto en hojas de aluminio selladas
hermticamente.
En algunos medicamentos que tienen una presin de vapor elevada,
por ejemplo la nitroglicerina, se pueden tener problemas debido a la
sublimacin o evaporacin, otra vez el empaque en hojas de aluminio
recubiertas, ofrece una mejora en la estabilidad de estos productos.
Un caso especial de la estabilidad de las tabletas, es el caso de las
grageas, sobre las cuales se pueden hacer las mismas consideraciones,
siendo adems necesario investigar tambin la estabilidad fsica de la
157
cubierta. Cuando se lleva a cabo un recubrimiento, se generan tensiones

en las pelculas de recubrimiento debidas a diferencias en la expansin
trmica de la pelcula y del ncleo. Si estas tensiones exceden la fuerza
de cohesin de la pelcula, la pelcula se fracturar y perder su
integridad. Otras posibilidades de generar inestabilidad o de
contribucin a la prdida de la integridad de las pelculas de
recubrimiento (4) son las tensiones generadas por el encogimiento de
las pelculas, cuando el solvente con que se aplican se evapora, las
tensiones generadas por cambios en el volumen de los ncleos, por una
recuperacin elstica o como resultado de absorcin de humedad. Esta
ltima sera funcin de la higroscopicidad de la frmula as como de la
permeabilidad de la pelcula. S la suma de todas estas tensiones excede
las fuerzas de cohesin de las pelculas, no solo se generaran fracturas
sino que las pelculas mismas tambin se podran despegar del ncleo.
La prdida de integridad se manifiesta con perfiles de disolucin ms
rpidos, los cuales pueden causar toxicidad o una biodisponibilidad
variable.
Problemas tpicos de estabilidad fsica de grageas:

Capa fina o pelcula
Fisuras, fracturas Humedad, recuperacin
elstica
Manchas coloraciones Humedad, incompatibilidades,
luz, pH
Manchas en el ncleo Humedad, calor
Pegajosidad Humedad, incompatibilidades,
calor/fusin
Entricas
Resistencia a jugos gstricos Incompatibilidades, prdida de
plastificante, pH
Desintegracin/jugo intest. Difusin de jugo gstrico,
humedad
Recubrimiento de azcar
Fisuras, fracturas Humedad, recuperacin
elstica
Prdida de brillo Humedad
158
Pegajosidad Humedad
Manchas/coloraciones Luz, humedad
En el caso de una tableta fsicamente estable, sta deber retener su

tamao original, su forma, su peso y color bajo manipulaciones y
condiciones de almacenamiento normales y durante su periodo de vida
en el mercado. Adems, deber conservar sin un cambio apreciable su
disponibilidad biolgica en los ingredientes activos, esto es, el inicio, la
duracin y la cantidad de frmaco liberada en funcin del tiempo y del
lugar del organismo donde se encuentre la forma farmacutica.
Las formas de dosificacin farmacuticas, en muchas ocasiones,
hacen uso del color, tamao y forma, para la identificacin y para fines
sicolgicos del efecto teraputico. Sin embargo, el uso de colorantes no
se encuentra libre de problemas. Su uso puede traer consigo problemas
de cambios o inestabilidad, tanto de firmeza o permanencia as como de
cromaticidad o cambio de color. Estos cambios pueden deberse a
efectos de la luz o a incompatibilidades con los frmacos o excipientes
de la frmula.
Existen dos tipos de colorantes usados en los productos
farmacuticos, los certificados por la FDA y los no certificados. Los
certificados se producen sintticamente y se identifican por un color y
un numero, por ejemplo, FDC amarillo No. 6, adems de la designacin
de laca (color adsorbido, sobre almina en muchos casos) o material
insoluble y de colorantes solubles en agua. Los colorantes que estn
exentos de certificacin son de origen natural o reproducciones
sintticas de ellos.
Las pruebas que se llevan a cabo para medir la estabilidad incluyen
las pruebas organolpticas. Estas pruebas son las que nos muestran
cambios de color, olor y sabor, entre otros y son las mas subjetivas y
difciles de trasladar a un sistema numrico de apreciacin. La
estabilidad del color se puede medir con un colormetro o un
reflectmetro, comparndose contra el color original, a veces a travs
de fotografas. Aunque no es comn, se ha mostrado que la ganancia o
prdida de color podra extrapolarse, cuando se tiene un modelo cintico
(orden de reaccin) apropiado. Existen mtodos que miden fielmente el
color de una forma farmacutica, sin embargo, aun se sigue usando
tambin la observacin visual simple, para dar seguimiento a cambios
de la apariencia. Obviamente, los cambios en color, olor y sabor, por
medio de una sola persona, solo pueden detectarse cuando son cambios
grandes. Para la deteccin de cambios pequeos se requiere de un
grupo de personas y tcnicas estadsticas, en las mediciones.
159
La firmeza de los colores se define como la resistencia a decolorarse,

cuando el producto se expone a los efectos de la iluminacin. La
iluminacin utilizada para este fin puede ser de lmparas fluorescentes,
incandescentes o de luz ultravioleta, midiendo los resultados
espectrofotometricamente por reflectancia. El barrido
espectrofotomtrico es un mtodo que permite una cuantificacin
precisa de los colores, aunque no muy simple. Por otro lado, la tcnica
de tristimulus podra utilizarse comparando colores para denotar los
cambios ocurridos.
Las medidas de reflexin con el tristimulus consideran los valores en
tres regiones del espectro de reflexin, registrndose como X, Y, y Z,
definiendo ndices de color como el de blancura o luminosidad, L, el del
color amarillo, b, y el del color rojo, a (5).
L = 100 (Y/100)1/2 (IV. 1)

1/2
a = 175 [(X/98.041) + (Y/100)] /(Y/100) (IV. 2)
1/2
b = 70 [(Y/100) - (Z/118.103)] /(Y/100) (IV. 3)
La reproducibilidad de las medidas de reflexin no es muy buena por

lo que regularmente se hacen promedios de aproximadamente 10
lecturas. La interpretacin de los resultados, para denotar los cambios
organolpticos del color, no es fcil. Un mtodo utilizado para su
evaluacin calcula los cambios en el color a travs de la ecuacin:
E = (L2 + a2 + b2) 1/2 (IV. 4)
Donde L es el factor de luminosidad y a y b son los factores de

cromaticidad para el color rojo y el amarillo respectivamente (6).
160
Utilizando esta metodologa se estudio la estabilidad de los colorantes

naturales rojo carmn, color arndano y color frambuesa (6). Esta vez,
tomando lecturas de reflexin sobre un conjunto de tabletas y no sobre
una sola. Los efectos de las condiciones de almacenamiento como el
tiempo, la temperatura, humedad y empaque, sobre la estabilidad del
carmn en tabletas, se observan en la figura IV. 1 y en la tabla IV. 1, en
trminos de valores de E.
11
Tabletas
cubiertas
8
E
Tabletas
5 descubiertas
2
0 4 8 12 16
TIEMPO (das)
Figura IV. 1. Inestabilidad relativa del color (E) en tabletas

conteniendo la laca de almina carmn 40 (0.1%), almacenadas en
condiciones exageradas de luz, a corto plazo (6).
Tabla IV. 1. Inestabilidad relativa del color (E) en tabletas

conteniendo la laca de almina carmn 40 (0.1%),
almacenadas en diferentes condiciones de humedad,
temperatura y empaque (6).
Tiempo Empaque Humedad Temperatura

(meses) relativa 50 C 40 C 30 C 5 C
1 Polietileno A. D. Ambiente 1.24

75% 0.9
Vidrio Ambiente 1.17
75% 1.49
75% 2.83
161

75% 1.01
75% 2.20
75% 0.61
12 Polietileno A. D. Ambiente 1.42 1.36 0.92
75% 3.00
Vidrio Ambiente 1.80 1.09 0.47
75% 1.36
Los resultados mostrados fueron obtenidos con aplicacin de luz

intensa, condicin descubiertas, y con la proteccin de una hoja de
acetato mbar, condicin cubierta. Cuando el valor de E se aproxima a
6, significa que la diferencia de color de la muestra, comparada contra el
original, es detectable a simple vista.
Las condiciones de almacenamiento que menos cambios muestran,
seran condiciones que podran establecerse como de proteccin para el
color carmn en tabletas. Los cambios de color se atribuyen a una
distorsin cromtica producto de las condiciones de almacenamiento. El
color carmn en las tabletas parece ser menos afectado, aunque algunos
resultados son contradictorios, cuando las tabletas se empacan en
frascos de vidrio, a temperaturas bajas (temperaturas de 30 C y 5 C).
La humedad fue, aparentemente, la que tuvo el efecto ms adverso
sobre la estabilidad del colorante. Como en ocasiones anteriores se ha
mencionado, aqu tambin se puede observar que la disminucin de la
temperatura de almacenamiento siempre disminuye las posibilidades de
deterioro de los productos, en este caso del color.
La friabilidad o fragilidad puede ser una prueba cualitativa y
cuantitativa, pero no absoluta, se debe correlacionar con otras tabletas
que ya han pasado por las manipulaciones, transporte y
almacenamiento normales.
La dureza es una propiedad de las tabletas que se determina a travs
de su resistencia transversal a la tensin. Esta tensin se ejerce a cierta
velocidad, en los equipos automticos, o manualmente, hasta que la
tableta se rompe. La fuerza utilizada para romper la tableta se conoce
como su dureza y se expresa regularmente en Newtons o kiloponds o
kilogramos fuerza, aunque otros equipos usen medidas de presin como
megapascales o aun, unidades relativas solo al aparato como las
unidades Strong Cobb (SCU). La dureza de las tabletas es una funcin de
la fuerza o resistencia de los enlaces entre las particulares as como de
su nmero o rea ocupada por los mismos. De estos enlaces
162
interparticulares es importante su densidad a travs del cuerpo de la

tableta as como la desviacin estndar de dicha densidad de
enlazamiento. La presencia de estos enlaces y su densidad en el cuerpo
de la tableta es una funcin estadstica que vara, de acuerdo a cierta
probabilidad, de un lugar a otro de la tableta.
Para la prueba de la dureza se recomienda cualquier instrumento, con
la salvedad de mantenerlo constante durante todo el proceso,
seleccionando el que presente un mecanismo o funcionamiento ms
regular. Comnmente, los cambios en la dureza de las tabletas significan
un cambio en la estructura de la matriz de la misma, cambio que podra
repercutir sobre la desintegracin y disolucin. Como en muchos
ensayos, en la determinacin de la dureza, es quiz la facilidad con que
se lleva a cabo lo que le ha conferido su gran popularidad. A veces
conviene tambin observar la forma en como se rompen las tabletas, ya
que nos indican sus puntos dbiles, por ejemplo su tendencia a la
laminacin o descabezamiento.
Las tabletas sufren frecuentemente cambios de consistencia, ms
duros o ms suaves, posteriores a su fabricacin. El cambio en la
resistencia mecnica de las tabletas podra ocurrir a travs de diferentes
mecanismos:
Posibilidades de aumento de la dureza

Relajacin de las tensiones que indujeron el flujo plstico de las
partculas durante la compactacin, generando una mayor
superficie de contacto interparticular
Formacin de puentes slidos a travs de la disolucin generada
por el agua adsorbida sobre las partculas
Facilitacin de la interaccin de las partculas a travs de las
capas adsorbidas de agua, aumentando la atraccin entre las
partculas
Posibilidades de disminucin de la dureza

Recuperacin elstica de las partculas comprimidas,
aumentando la distancia entre partculas y reduciendo la
superficie de contacto entre ellas
Formacin de capas mltiples de agua sobre las partculas,
reduciendo la atraccin intermolecular y quiz disolviendo
puentes slidos (solo con humedades relativas muy altas)
163
De hecho no es posible predecir cual ser la direccin del efecto sobre

la dureza de las tabletas, solo podr medirse despus de ocurrido el
suceso.
En un estudio sobre la estabilidad de tabletas de clorhidrato de
ranitidina (7) se observ que la dureza de las tabletas disminuy cuando
se almacenaron a 75% de humedad relativa, de mas de 100 N bajaron
hasta menos de 40 N despus de 120 das. De las tres diferentes formas
en que se prepararon las tabletas, una compresin directa, una
granulacin con PVP y otra granulacin con etilcelulosa, las que se
granularon por va hmeda presentaron un ligero mayor deterioro de la
dureza de las tabletas. Cuando las tabletas se almacenaron a 50% de
humedad relativa, la cual se podra considerar una humedad que
comnmente se alcanza en nuestro medio, se observ una inversin del
efecto de la humedad, una apreciable reduccin de la dureza de las
tabletas obtenidas por compresin directa, mientras que aquellas
obtenidas por granulacin hmeda, con etilcelulosa solo mostraron una
ligera disminucin y con PVP prcticamente permanecieron sin cambio
(figura IV. 2).
Cuando las tabletas se almacenaron a 30% de humedad relativa, se
observ algo similar a lo visto cuando se almacenaron a 50%, solo que
en una proporcin mucho menor de deterioro de la dureza. En trminos
generales, se observ que las tabletas obtenidas por compresin directa
fueron ms susceptibles al deterioro de su dureza.
La disminucin de la dureza de las tabletas almacenadas a 75% de
humedad relativa se explica por la presencia de agua en estado capilar,
dentro de las tabletas, la cual fue adquirida desde el aire. El agua as
depositada en las tabletas, se supone que disolviera algunos enlaces
interparticulares, provocando la disminucin de la dureza de las
tabletas. Esta disminucin de la dureza fue mayor conforme las tabletas
ganaron mas humedad (figura IV. 3). Otro mecanismo posible para
explicar la reduccin de la dureza de las tabletas, es que la adsorcin de
la humedad sobre la superficie de las partculas deshizo los enlaces
interparticulares previamente existentes, lo cual conduce tambin a la
relacin anterior. Se puede concluir que tanto el tipo de aglutinante as
como la tcnica de preparacin son importantes para la estabilidad fsica
de las tabletas, en este caso particular, las del clorhidrato de ranitidina.
164
160
120 Compresin
directa
DUREZA (N)
Granulacin
con PVP
80
Gran. Con
etilcelulosa
40
0 30 60 90 120
TIEMPO (das)
Figura IV. 2. Cambios observados en la dureza de tabletas de

ranitidina.HCl almacenadas a 50% de humedad relativa (7).
100
85
DUREZA (N)
70
55
0.1 0.12 0.14 0.16 0.18 0.2
CONTENIDO DE HUMEDAD (%)
Figura IV. 3. Efecto del contenido de humedad sobre la dureza de

tabletas de compresin directa de ranitidina.HCl (7).
En otras circunstancias se ha encontrado que adems de la tcnica de

fabricacin, el uso de diferentes excipientes y la humedad relativa, son
tambin de importancia los empaques y la relacin de temperaturas y
165
humedad relativa, durante las condiciones de almacenamiento, para la

estabilidad fsica de los comprimidos (8, 9). El estudio del efecto de otros
excipientes sobre la estabilidad fsica nos muestra, por ejemplo, que en
tabletas que usan almidn de maz como desintegrante, entre ms altas
sean las concentraciones del almidn en las tabletas, el deterioro
causado por la humedad sobre la dureza de las tabletas, ser mayor (8).
El efecto de otros componentes de la frmula tambin ser importante.
Se ha encontrado, por ejemplo, que para climas hmedos, el uso de
lactosa sera aconsejable, mientras que el fosfato diclcico no lo sera,
por ser fuertemente afectado por las condiciones de almacenamiento
(9).
Adems de la humedad relativa, para acelerar el efecto del
envejecimiento de las tabletas, tambin se ha usado un tratamiento
mecnico, esto es, el someter las tabletas al efecto de un friabilador o
fragilizador, con el fin de predecir los efectos a largo plazo, los cuales
seran equivalentes a los obtenidos despus de fragilizar las tabletas.
Por ejemplo, se ha encontrado que la dureza de las tabletas alcanza
valores semejantes, a largo plazo, que aquellos obtenidos despus de
fragilizar las tabletas (20 tabletas), durante 100 revoluciones del
fragilizador (10).
La medicin de la desintegracin de las tabletas, recubiertas o no
recubiertas, fue el primer parmetro usado por la farmacopea. La
desintegracin de las tabletas fue un parmetro de estabilidad fsica
importante. Sin embargo, en la actualidad es desplazado por las pruebas
de disolucin, de las cuales anteriormente fue un indicativo. A pesar de
ello, cuando se ha encontrado que la desintegracin es el paso
determinante de la disolucin, nos sigue proporcionando un mtodo fcil
y rpido para medir la estabilidad de los comprimidos. Quiz el nico
punto dbil de la desintegracin es la determinacin de su punto final, el
cual es una fuente de variacin importante. Este punto final se define
como el tiempo al cual solo queda sobre la malla del desintegrador una
masa suave sin ningn trozo o grnulo palpable, a excepcin de
fragmentos insolubles de recubrimientos o cpsulas. Aunque existen
equipos que determinan el punto final electrnicamente, regularmente
eliminan el uso de los discos, lo cual sale de la especificacin de las
farmacopeas.
Para la evaluacin de las tabletas entricas, la desintegracin
continua siendo un mtodo adecuado para valorar su resistencia a los
jugos gstricos. Esto es debido a que las condiciones del proceso de
desintegracin son ms severas que en el proceso de disolucin. La
desintegracin permite un ensayo rpido para determinar la integridad
de la capa entrica. Cuando se coloca una tableta en cido clorhdrico
0.1N, son suficientes unos minutos para observar si es que presenta
imperfecciones en su recubrimiento. En esta prueba no se deben usar
discos (11).
166
De acuerdo a la explicacin de los posibles mecanismos para

aumentar o disminuir la dureza de las tabletas, tales mecanismos
tambin se podran aplicar a la desintegracin y a la disolucin. De esta
manera, la desintegracin podra aumentar o disminuir, en funcin de un
aumento o disminucin en la consistencia de las tabletas.
Siguiendo el mismo ejemplo citado para la dureza de las tabletas (7),
en la figura IV. 4 se observa una disminucin gradual del tiempo de
desintegracin conforme aumenta el tiempo de almacenamiento, a 75%
de humedad relativa, de tabletas de clorhidrato de ranitidina preparadas
por compresin directa. Bajo las mismas condiciones de
almacenamiento, no se observaron cambios apreciables en la
desintegracin de las tabletas obtenidas por granulacin hmeda con
etilcelulosa, lo cual pone de manifiesto, otra vez, la importancia de la
seleccin de los excipientes, sobre la estabilidad fsica de los
comprimidos.
Una explicacin de los parmetros que influyen sobre el tiempo de
desintegracin e indirectamente sobre la disolucin, nos permitir
observar que factores favorecen y cuales retrasan esta desintegracin,
De la misma manera, un anlisis de este tipo nos permitir entender los
cambios fsicos de la tableta y su repercusin sobre el tiempo de
desintegracin.
El efecto de la penetracin o captacin de agua por la tableta, sobre el
tiempo necesario para desintegrarla, puede diferenciarse en trminos de
penetracin de sta agua a travs de los poros de la tableta. Al penetrar
el agua encuentra un cierto nmero de partculas (q) de desintegrante,
por unidad de longitud (L). Suponiendo que se requiere que se mojen un
nmero de partculas (N) para que la tableta se desintegre, entonces, de
acuerdo a la ecuacin de Washburn, la penetracin del agua a un tiempo
dado estara dada por (5):
L2 = (r * f * cos / [2]) * t = * dt (IV. 5)
Donde f es la tensin interfacial, d es el dimetro promedio de los

poros, r es el radio de los poros, es al ngulo de contacto y es la
viscosidad del lquido que penetra.
Considerando la ecuacin anterior, entre otros, el tiempo de
desintegracin (tN) de las tabletas estara dado por:
tN = (N/q)2 / ( * d) (IV. 6)
167
Por lo tanto, se pueden hacer las siguientes inferencias:
Entre mayor sea el numero de partculas que deban mojarse

para que la tableta desintegre, mayor ser el tiempo de
desintegracin.
Entre mas finos sean los poros de las tabletas (con valores
pequeos de d), mayor ser el tiempo de desintegracin.
Entre ms grande sea la concentracin del desintegrante (q),
menor ser el tiempo de desintegracin.
Entre ms grande sea el valor de (entre ms pequeos sean la
tensin interfacial y el ngulo de contacto) menor ser el tiempo
de desintegracin.
5
TIEMPO DE DESINT. (min)
0
0 20 40 60 80 100
TIEMPO (das)
Figura IV. 4. Efecto del tiempo de almacenamiento, 75% de

humedad relativa, sobre el tiempo de desintegracin de tabletas de
ranitidina.HCl (7).
Como se puede observar uno de los factores que tendrn mayor

repercusin sobre la estabilidad o permanencia del tiempo de
desintegracin ser la oclusin o la ampliacin de los poros de la tableta
y la eficiencia de los desintegrantes, la cual podra cambiar con la
humedad y con la resistencia ofrecida por la tableta, ya que otros
parmetros son mas efecto de la formulacin que de la estabilidad.
168
Como un ejemplo de estabilidad de comprimidos recubiertos, puede

sealarse el estudio de Barret y Fell (12), quines midieron la influencia
del tiempo y temperatura de almacenamiento sobre las caractersticas
fsicas de tabletas de fenilbutazona. Mientras que los ncleos o tabletas
simples no sufrieron cambio alguno, cuando se almacenaron a 20 y
50C, las tabletas recubiertas mostraron un incremento en el tiempo de
desintegracin.
Las caractersticas antes mencionadas seran la razn para una
disminucin de la biodisponibilidad en las grageas y no en las tabletas,
aparentemente relacionada con la capa de recubrimiento, lo que bien
podra ocurrir en otras grageas. En este caso, las temperaturas elevadas
se utilizaron como un medio para acelerar el envejecimiento, como una
simulacin cualitativa del efecto del tiempo, a largo plazo, en un periodo
de tiempo corto.
Las pruebas de disolucin se han popularizado cada vez mas en los
aos recientes y es uno de los estndares de calidad de las formas de
dosificacin slidas mas aceptado. La prueba de disolucin mide la
velocidad y la extensin del frmaco liberado desde la forma
farmacutica. La significacin que esta prueba pueda tener se
fundamenta en la correlacin que presente, con los resultados obtenidos
in vivo. Una buena correlacin valida la prueba de disolucin y nos
permite establecer los correspondientes intervalos de aceptabilidad.
Los mtodos mas usados para determinar la disolucin son los
mtodos de la USP de paletas y de canastilla. El mtodo de la canastilla
adolece de ciertos riesgos entre los que se cuentan la dificultad para
mantener homogneo el medio de disolucin, ya que no existe,
propiamente, un medio de agitacin efectivo. Otra posible fuente de
error es la obstruccin de la malla de la canastilla ya sea por burbujas de
aire o por restos de una cpsula, por ejemplo, o por pelculas de
recubrimiento en las grageas y ms aun, por polmeros aplicados a
productos de liberacin prolongada. En ocasiones tambin podra ocurrir
que parte del slido no disuelto pudiera escapar de la canastilla. El
mtodo de las paletas tambin tiene algunas posibles fuentes de error,
por ejemplo que algunos productos puedan flotar, haciendo no muy
uniforme su disolucin. En otras ocasiones tambin algunas tabletas se
pueden pegar al fondo del vaso, aunque de cualquier manera el mtodo
de las paletas es siempre superior al de la canastilla (11).
Los resultados de la disolucin pueden expresarse como la mxima
cantidad disuelta, regularmente en porcentaje, aun tiempo definido. Las
monografas especifican usualmente que porcentaje del valor declarado
del contenido del frmaco deber disolverse en un tiempo definido, por
ejemplo a los 30 minutos (Q30). Para propsitos de la estabilidad
regularmente se determina no solo un punto, por ejemplo el Q 30, sino
ms bien una curva completa, la cual nos permitir determinar las
169
constantes de velocidad de disolucin. Para sistemas de liberacin

controlada es importante determinar la mxima cantidad que puede
liberarse desde la forma farmacutica o al tiempo infinito. Este valor se
determina prolongando el periodo de disolucin, por ejemplo por 2 horas
mas y agitando a mayores velocidades que las usuales, por ejemplo 150
RPM. Despus de este tiempo podramos considerar que se disolvi todo
lo que era posible.
La costumbre de recubrir polvos, grnulos y tabletas con una pelcula
delgada o capa fina, con diversos fines, es cada vez ms amplia. Sin
embargo, el efecto del tiempo, temperatura y humedad podran causar
ciertos trastornos en el comportamiento de estos slidos recubiertos. Un
ejemplo de ello son las tabletas de aspirina con capa entrica, las cuales
incrementaron significativamente su tiempo de disolucin despus de
almacenarse a diferentes temperaturas.
En un estudio similar con minitabletas de teofilina (13), con cubierta
de capa fina, las cuales fueron expuestas a condiciones exageradas de
almacenamiento, se encontr que su disolucin se redujo, esto es, su
tiempo de disolucin aumento, en una proporcin relacionada con el
tiempo y la temperatura a la cual se almacenaron (figura IV. 5),
independientemente de la composicin de la pelcula.
5
TIEMPO DE DISOLUCIN 50%
Etilcelulosa
4
2%+Eudragit L
1% (28 C)
3 Eudragit RL
1.5%
2
Etilcelulosa
2%+Eudragit L
1 1% (45 C)
0
0 50 100 150 200
TIEMPO (das)
Figura IV. 5. Efecto de la temperatura (28 C y 45 C) de

almacenamiento, a 55% de humedad relativa, sobre el tiempo
necesario para disolver el 50% de teofilina desde tabletas con capa
fina (13).
170
La reduccin en la velocidad de disolucin se atribuye a una

disminucin de la difusin molecular a travs de la pelcula polimrica. El
principal factor en la alteracin de la permeabilidad de la pelcula de
recubrimiento parece ser la temperatura, la humedad aqu juega un
papel insignificante. La manera de evitar este problema tendr que ser
una frmula ms conveniente.
La disolucin es el parmetro clave para el diseo y estabilidad de los
productos de liberacin controlada. Para tabletas, fabricadas con
grnulos recubiertos, las propiedades de disolucin estaran dadas por
las caractersticas de los grnulos y por las habilidades de los
desintegrantes usados en la formulacin. Por lo tanto, la inestabilidad de
estas tabletas estara controlada por los mismos parmetros. Tabletas
con capa fina de cristales de aspirina (14), como ejemplo de este tipo de
tabletas, mostraron diferencias significativas en su perfil de liberacin,
cuando fueron sometidas a diferentes condiciones de estrs (figura IV.
6).
100
ASPIRINA LIBERADA (%)
75
Disolucin
inicial
50 40 C y 75%
H. R
40 C y H.
25 Amb.
50 C y H.
Amb.
0
0 10 20 30
TIEMPO (horas)
Figura IV. 6. Perfiles de disolucin de tabletas de liberacin

prolongada de aspirina almacenadas 12 meses en recipientes
cerrados (40 C/H. Amb.) y en recipientes abiertos (40 C/75%) y 21
das en recipiente abierto (50 C/H. Amb.) (14).
Como se puede observar, las tabletas de liberacin prolongada de

aspirina muestran una importante inestabilidad cuando se almacenaron
a 40 C, con humedad ambiente y con una humedad relativa de 75%,
aunque aun fue mayor la inestabilidad mostrada a 50 C y humedad
ambiente. Se considera que el principal factor para la inestabilidad de la
171
disolucin sea la desintegracin de las tabletas. Particularmente para la

condicin de 50 C y humedad ambiente, donde la desintegracin fue
lenta e incompleta. Aunque no se identificaron claramente los efectos de
un cambio en la permeabilidad de la membrana o cubierta de los
grnulos, se considera que la reduccin en la velocidad de liberacin sea
debida, en parte, a una disminucin en la permeabilidad de la
membrana.
Desde el punto de vista de la estabilidad de la disolucin, un problema
que se podra presentar es el que habiendo cambiado la disolucin in
Vitro, despus de un tiempo de almacenamiento, la biodisponibilidad
permaneciera sin cambio. Esta circunstancia ha ocurrido y se ha
encontrado que este fenmeno es debido a la presencia de enzimas en
el tracto gastrointestinal. Cuando la prueba de disolucin se realiz con
las enzimas correspondientes, los resultados no mostraron diferencia
con los de cpsulas recin fabricadas (5).
Se considera, en trminos generales, que los cambios que ocurren en
las formas de dosificacin slidas ocurren en lapsos de tiempo cortos,
por lo que es de recomendarse que las pruebas de disolucin se hagan a
tiempos de 4, 8 y 12 semanas, cuando se almacenan a temperatura
ambiente y no esperar los tiempos de evaluacin estndar, de 6 meses,
para muestras almacenadas a temperatura ambiente. De esta manera
podramos saber el posible futuro de la estabilidad de la disolucin, en
un lapso de tiempo corto.
IV. 2. 1. Efecto de la humedad sobre la estabilidad fsica de productos

slidos
En sistemas farmacuticos heterogneos como una formulacin de
comprimidos o grnulos, el anlisis de la adsorcin de humedad es ms
o menos complejo. Los excipientes amorfos como las celulosas y los
almidones son capaces de absorber cantidades importantes de humedad
en sus estructuras, causando cambios en hinchamiento y gelacin de los
materiales, que podran afectar el comportamiento de la frmula en
general. Los materiales cristalinos, en los cuales los puentes de
hidrgeno son relativamente dbiles, las molculas de agua podran
colocarse en los espacios vacos para formar hidratos, los cuales
tambin tendran efectos sobre las propiedades fisicoqumicas de los
materiales, alterando su biodisponibilidad.
La inestabilidad fsica de los materiales, ante la presencia de la
humedad, podra provocar disminuciones importantes en la velocidad de
liberacin de los frmacos. En el caso particular de la teofilina granulada
por va hmeda, con celulosa microcristalina como excipiente, esta
disminucin de la velocidad de liberacin se atribuy a un aumento en la
fuerza de enlazamiento entre el excipiente y el frmaco. Sin embargo,
172
en otra ocasin, en donde adems de la celulosa microcristalina haba

tambin presente hidroxipropil metilcelulosa, un excipiente amorfo, la
disminucin de la velocidad de liberacin se atribuy a la formacin del
monohidrato de teofilina, el cual es menos soluble que la teofilina
anhidra (15).
La formulacin de tabletas de teofilina anhidra conteniendo
hidroxipropil metilcelulosa, celulosa microcristalina y estearato de
magnesio anhidro, cuando se sometieron a estabilidad a temperatura
ambiente (23 C) y humedades relativas mayores a 52%, mostr
velocidades de disolucin irregulares, a un mes menores y a 3 meses
mayores que las de las tabletas originales. Esta irregularidad fue
atribuida a los cambios antes mencionados, provocados por la
hidratacin de las celulosas y la transformacin de la teofilina anhidra al
monohidrato, adems de, en este caso, la formacin tambin de
seudopolimorfos del estearato de magnesio, esto es, de sus hidratos, lo
cual en conjunto alter las caractersticas y mecanismos de liberacin de
las tabletas. Las tabletas almacenadas a humedades menores a 52%
mostraron perfiles de liberacin sostenida con un t50% entre 2 y 4 horas y
no se observaron alteraciones significativas despus de 3 meses de
almacenamiento. Las caractersticas cristalogrficas de los materiales
tambin permanecieron constantes, siendo esta la justificacin de la
permanencia de los perfiles de liberacin. De esta manera, la proteccin
de las tabletas, de humedades relativas excesivas, sera suficiente para
estabilizarlas (15).
Como se ha mencionado antes, la humedad es quiz la razn mas
frecuente de los cambios que ocurren en las formas farmacuticas
slidas. Por esta razn, es fundamental el conocimiento de las isotermas
de adsorcin de los diferentes materiales o de frmulas completas. La
relacin entre la humedad del ambiente y la humedad en los productos,
as como su correlacin con la permanencia de las propiedades fsicas
ms importantes de las formas de dosificacin, permite a su vez la
correlacin con los resultados de estabilidad a largo plazo.
Cada forma farmacutica se encuentra en equilibrio con su medio
ambiente o trata de alcanzar este equilibrio. Las isotermas de adsorcin
describen este estado de equilibrio, a una temperatura determinada y
en un intervalo amplio de condiciones de humedad relativa. Las
isotermas de adsorcin difcilmente se pueden determinar en una sola
muestra de un slido, ya que las propiedades del slido podran cambiar
irreversiblemente entre una determinacin y otra. Es ms fcil y tambin
ms seguro, el equilibrar diferentes muestras contra diferentes
humedades relativas, registrando sus cambios en peso, debidos a la
adsorcin o desorcin de humedad.
Existe un valor de la humedad relativa del aire, en estas curvas de
adsorcin de humedad, en el cual inicia realmente la adsorcin, antes de
173
ese punto no hay adsorcin. Este valor de humedad relativa crtica es de

gran importancia. Si bien este valor de humedad relativa crtica es
caracterstico de cada material, no menos cierto es que puede cambiar
en funcin tambin del polimorfismo (ver ejemplo de carmabazepina,
pp. 89-91) y del grado de cristalinidad. Un ejemplo de ello es el cambio
en higroscopicidad ocurrido en la cefalotina sdica, despus de ser
molida durante algunas horas (16). El valor de equilibrio alcanzado en la
cristalinidad fue de aproximadamente 60%. Esta disminucin de la
cristalinidad produjo una disminucin del valor de la humedad relativa
crtica de 93% a 88%, lo cual significa que la cefalotina cristalina inicia
su adsorcin de humedad despus del 93% de humedad relativa,
mientras que la forma parcialmente cristalina lo hace desde 88%. ste
cambio en la higroscopicidad se puede apreciar en las curvas de
adsorcin de ambos materiales (figura IV. 7).
La significacin ms importante de las isotermas de adsorcin de
humedad, en lo que se refiere a la estabilidad, lo es sin duda su relacin
con las caractersticas fsicas de las formas farmacuticas, esto es, su
relacin, por ejemplo, con la dureza de los comprimidos, con su
desintegracin y con su disolucin. Cuando esta relacin es conocida, a
travs de la experimentacin, se puede buscar el establecimiento de
condiciones que permitan lograr una determinada humedad en el
producto y con esto, un determinado valor, deseado, en las
caractersticas fsicas de los slidos, que permita validar su estabilidad.
Es conocido el uso tanto de diferentes polimorfos as como de
diferentes grados de cristalinidad para aumentar la dispersabilidad, la
solubilidad, velocidad de disolucin y la biodisponibilidad de los
frmacos. La presencia de tales formas de presentacin de los slidos
puede tener algunas implicaciones importantes en la manufactura,
almacenamiento y uso de las formas farmacuticas, debido a posibles
cambios tanto en la estabilidad qumica as como la fsica. El uso de
estos materiales sera muy difcil si no podemos garantizar que no
ocurrirn cambios en los slidos, por ejemplo, la reversin de un amorfo
a su fase cristalina, durante su manipulacin y almacenamiento.
40
CONTENIDO DE HUMEDAD (%)
30
20 Cristalina 60%
Cristalina 100%
10
0
174
0 5 10 15
TIEMPO (das)
Figura IV. 7. Aumento del contenido de humedad en funcin del

tiempo, en cefalotina sdica de diferentes grados de cristalinidad,
almacenada a 35 C y 93% de humedad relativa (16).
Los estudios de cristalizacin de materiales desde su estado amorfo,

nos muestran que regularmente se da este proceso a temperaturas por
arriba de la temperatura de transicin vtrea, donde la movilidad
molecular es suficiente para permitir la nucleacin y crecimiento de los
cristales. Aunque, sin embargo, tambin se han observado
cristalizaciones a temperaturas inferiores a la de transicin vtrea.
Por otro lado, se ha establecido que el agua absorbida por los slidos
amorfos disminuye la temperatura de transicin vtrea (T g) de los
materiales, actuando como plastificante, aumentando la movilidad
molecular y as facilitando la velocidad y extensin de la cristalizacin.
En un estudio acerca del efecto del agua sobre la cristalizacin de
indometacina amorfa (17), se encontr que la T g de ste frmaco fue
funcin de su contenido de agua, en una proporcin tal que un 1% de
humedad disminuy en aproximadamente 10 C la T g.
Consecuentemente, se observ tambin que la indometacina amorfa,
almacenada a 0% de humedad relativa tardo 100 das en cristalizar. La
indometacina amorfa con contenidos de humedad mayores cristaliz
cada vez ms rpido, esto es, se volvi menos estable su estructura
amorfa conforme se aument su contenido de humedad.
Como se ha mencionado, el estado amorfo es metaestable en
comparacin con el estado cristalino, por lo que es de esperarse su
inestabilidad, tendiendo a cristalizar espontneamente, bajo ciertas
condiciones de humedad y temperatura. La estabilizacin de tales
estructuras amorfas como la indometacina podra lograrse por periodos
de hasta 6 meses reduciendo la temperatura hasta 4 C. Esto nos
permite inferir que para estabilizar este frmaco se requiere almacenarlo
a 40-50 C por debajo de su T g y aun, a temperaturas por de 75-80 C
por debajo de la Tg, s participa tambin el agua como plastificante (18).
En algunos estudios con coprecipitados de indometacina con
polivinilpirrolidona (PVP), se ha visto que el PVP podra actuar como
inhibidor de la cristalizacin y de esta manera, como agente
estabilizante de las estructuras amorfas. Un ejemplo de este tipo de
estabilizacin se observa en la figura IV. 8.
175
El uso del PVP en coprecipitados secos y amorfos de la indometacina,

como se ha observado, inhibe significativamente la cristalizacin de la
indometacina, a niveles de concentracin desde 5% de PVP y a
temperaturas tan altas como 70 C. Mostrando el PVP, de esta manera,
un efecto antiplastificante, adems de participar, quiz tambin con
alguna interaccin qumica y estrica especfica que inhibe la
cristalizacin.
Existen varios mtodos para preparar slidos amorfos, enfriamiento
rpido de frmacos fundidos, liofilizacin, secado por aspersin y
molienda. Sin embargo, siempre se ha credo que las fases amorfas son
independientes del mtodo de obtencin. En un estudio acerca de la
estabilidad fisicoqumica de la frusemida amorfa, obtenida por secado
por aspersin, se hace mencin de que la estabilidad de ste amorfo
sera mayor cuando se obtuvo a 150 C, forma B, que cuando se obtuvo
a 50 C, forma A, cuando se almacen a 0% de humedad relativa. Sin
embargo, cuando se almacen a una humedad relativa de 75%, la
estabilidad de las estructuras amorfas obtenidas a las dos diferentes
temperaturas, formas A y B, fue similar (19).
Como se puede ver, el contenido de humedad del aire no es de
importancia exclusiva para la estabilidad qumica, sino que lo es
tambin para los cambios en las propiedades fsicas de los productos
farmacuticos. Cambios de la dureza de las tabletas, de la liberacin de
principios activos, del peso de las tabletas y aun de la estructura o forma
cristalina de los slidos, se relacionan frecuentemente con la humedad
del aire presente durante el almacenamiento de dichos productos.
120
100
AMORFO REMANENTE (%)
0%-PVP
80
60
5%-PVP
40
20 20%-PVP
0
0 5 10 15 20 25
TIEMPO (das)
176
Figura IV. 8. Efecto del tiempo y concentracin de PVP sobre la

transformacin del amorfo de indometacina, a cristal, cuando se
almacen a 70 C (18).
La sensibilidad contra la humedad, en trminos generales, se puede

reducir a travs de diferentes alternativas de manufactura (3):
Fabricacin en condiciones secas, acompaadas de un empaque

hermtico.
Fabricacin en condiciones normales, con un secado final,
adems de un empaque hermtico.
Fabricacin en condiciones normales, con almacenamiento del
producto a granel acompaado de un agente secante, por
ejemplo slica gel activada, adems de un empaque hermtico,
con o sin aire seco.
El uso de la slica gel como desecante, 16.9 g, almacenados a

temperatura ambiente junto con 14.8 g de tabletas de 5 mm,
conteniendo originalmente 8.6% de humedad, provoc una disminucin
de la humedad de las tabletas del 1%, despus de 3 horas.
IV. 3. Estabilidad fsica de sistemas semislidos

Los sistemas semislidos son considerados por algunos autores como
aquellos productos que no son soluciones verdaderas ni slidos secos,
incluyendo entre ellos productos como los ungentos, las cremas, los
geles, los supositorios, las emulsiones y las suspensiones.
Los cambios fsicos en estos sistemas se refieren bsicamente a los
vehculos, los cuales pueden sufrir alteraciones, similares a las referidas
en otros productos farmacuticos, que tendran como consecuencia:
Alteraciones en la apariencia, textura y olor

Alteraciones en la uniformidad de las dosis
Alteraciones en la biodisponibilidad
Los semislidos, tambin conocidos como sistemas dispersos, tienen

caractersticas tales, que sus problemas de estabilidad fsica hacen que
se les dirija ms atencin que quiz a aquellos derivados de la
estabilidad qumica.
177
Para el caso particular de las suspensiones, las cuales son sistemas

heterogneos termodinmicamente inestables, las alteraciones fsicas
pueden manifestarse como:
Problemas tpicos de estabilidad fsica de suspensiones:
Sedimentacin de las partculas individuales

Agregacin o formacin de grumos
Formacin de sedimentos difciles de redispersar
Cambios en polimorfismo
Cambios en el grado de solvatacin
Crecimiento del tamao de las partculas
Una buena suspensin ser aquella que no sedimente, aunque en

general suelen sedimentar, y si lo hacen, debern poder resuspenderse
fcilmente, adems de permitir una dosificacin adecuada, en cualquier
momento de su vida en el mercado o durante su consumo. De esta
manera, su estabilidad se podra vigilar a travs de su velocidad y
volumen de sedimentacin. Cuando una suspensin ha sedimentado es
tambin importante el determinar si el sedimento ha formado partculas
grandes o grumos, lo que comnmente se conoce como entortamiento o
formacin de sedimentos difciles de redispersar. En el sedimento
formado se examinar si es posible resuspenderlo sin mucho esfuerzo.
Las suspensiones se debern mantener con la misma distribucin del
tamao de partcula, aunque es sabido que la energa libre de la
superficie de las partculas pequeas, las usuales en suspensiones, es
mayor que la energa de la superficie de las partculas grandes, por lo
que termodinmicamente se ve favorecido su crecimiento. La forma
cristalina de las partculas suspendidas deber conservarse igual,
evitando la transformacin de las formas polimorfas metaestables a
otras ms estables que regularmente son menos solubles, manteniendo,
a travs de todo esto, la disponibilidad fisiolgica sin alteracin.
En los sistemas de ms de una fase, como en las suspensiones, se
pueden generar una diversidad de situaciones que pueden afectar la
estabilidad fsica del sistema. Algunos de los problemas que ya se han
mencionado y que se presentan ms seguido en las suspensiones, no
son exclusivos de stas, pudiendo presentarse tambin en otras formas
farmacuticas, por ejemplo en las emulsiones.
178
La separacin de fases se puede considerar como un proceso de

desmezclado, el cual se presenta como sedimentacin, formacin de
grumos o conglomerados y como flotacin o formacin de nata. Estos
fenmenos se pueden atribuir a diferentes caractersticas fsicas de las
fases, por ejemplo diferencias en la densidad y a circunstancias de
desequilibrio generadas por la tensin superficial y/o interfacial.
Los proceso cinticos que generan la separacin de fases son muy
complejos, pero algunas de las causas se pueden describir con la
ecuacin de Stokes (IV. 7), la cual describe la velocidad de
sedimentacin (Vsed) y los factores que le pueden influenciar. De esta
ecuacin se pueden deducir algunas de las posibilidades de reducir la
sedimentacin, por efecto de la gravedad (g), como: la disminucin del
tamao de las partculas, expresado en la ecuacin a travs del
dimetro de las mismas (d). La igualacin de las densidades de las fases
lquida (2) y slida (1), y la elevacin de la viscosidad de la fase fluida
(), recordando que un aumento en la viscosidad podra tambin
retardar la absorcin de un medicamento. Otra manera de ver el
problema nos llevar a la conclusin de que no es suficiente con retardar
la sedimentacin, sino que ser necesario facilitar la resuspensin
cuando exista ya material sedimentado, con la ayuda de tensoactivos,
que disminuyen la tensin entre las fases.
Vsed = d2 *g (1 - 2) / 18 (IV. 7)
Al alcanzar las partculas un tamao entre 2 m y 3 m se impedir la

sedimentacin a travs del movimiento Browniano de las partculas. Sin
embargo, no se debe olvidar que tales tamaos de partcula podran
facilitar la formacin de aglomerados que limitaran la estabilidad.
Cuando se quiere lograr una mayor estabilidad, se busca siempre
lograr un sistema tixotrpico, esto es, un sistema que en reposo alcance
una viscosidad elevada, mientras que bajo agitacin, por ejemplo
manualmente, disminuya su viscosidad lo suficiente para verterlo sin
problemas.
Una manera de evitar la formacin de aglomerados en una
suspensin, es la aplicacin de agentes peptisantes, los cuales forman
una capa de cargas elctricas sobre las partculas y al mismo tiempo
una capa de agua atrapada sobre los iones con las cargas, formando un
escudo que impide la aglomeracin.
Suspensiones de clorhidrato de loperamida fueron estudiadas en sus
volmenes de sedimentacin, utilizando formulaciones con sorbitol,
sacarina y diferentes concentraciones de un agente que imparte
179
viscosidad, la goma tragacanto (20). En la figura IV. 9 se puede observar

como sedimentaron estas suspensiones.
1.2
2.50%
1
NDICE DE SEDIMENTACIN
2.00%
0.8
1.50%
0.6
1.00%
0.4 0.50%
0.2
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8
TIEMPO (das)
Figura IV. 9. Curvas de volumen de sedimentacin de suspensiones

de loperamida.HCl (0.08%) con diferentes proporciones de goma
tragacanto (p/v) (20).
El parmetro de referencia de la figura IV. 9, el ndice de

sedimentacin, fue calculado dividiendo el volumen del sedimento a un
tiempo dado entre el volumen inicial de la suspensin. La suspensin
preparada con 2.5% de goma tragacanto present el volumen de
sedimentacin ms alto, como se observa en la figura IV. 9.
Concentraciones menores de la goma presentaron volmenes de
sedimentacin proporcionalmente menores.
La redispersabilidad del sedimento de las suspensiones se ha
reportado poco, como un parmetro de evaluacin de la estabilidad
fsica. Para algunas suspensiones, por ejemplo de loperamida, esta
determinacin se llev a cabo centrifugando cada muestra y
resuspendindola con una agitacin de 250 oscilaciones por minuto. Los
Resultados muestran que la suspensin con 2.5% de tragacanto,
necesit 15 minutos para redispersarse, mientras que las que usaron
como viscosante carboximetilcelulosa sdica necesitaron entre 2 min. Y
10 min. y las que usaron Veegum tan solo de 2.5 min. a 4.5 min.
En la figura IV. 10 se puede observar el efecto de 30 das de
almacenamiento sobre la estabilidad de las propiedades reolgicas de la
frmula con 2.5% de tragacanto.
180
70
VELOCIDAD DE CORTE (rpm)

60 Inicial
despus de 30 das
50
40
30
20
10
0
0 20 40 60 80 100 120
TENSIN DE CORTE (lectura del aparato)
Figura IV. 10. Curvas de flujo de la suspensin de loperamida.HCl

(0.08%), con tragacanto (2.5%) como viscosante, inicial y despus
de 30 das (20).
En trminos generales, los resultados de las pruebas reolgicas, con

las formulas con los diferentes agentes viscosantes, mostraron que las
propiedades de flujo de todas las suspensiones tiene un comportamiento
seudoplstico y tixotrpico. Se encontr una relacin entre el grado de
tixotropa y la velocidad de sedimentacin, esto es, entre ms grande
fue la tixotropa, menor fue la velocidad de sedimentacin. El rea entre
la curva de ida y la curva de regreso del reograma se denomina
histresis y es una medida de la ruptura tixotrpica de las suspensiones.
Las frmulas preparadas con los diferentes agentes viscosantes no
mostraron diferencias significativas en sus reogramas despus del
almacenamiento, excepto la mostrada en la figura IV. 10. En esta
frmula aument la viscosidad despus de 30 das de almacenamiento.
El aumento en la viscosidad se explica por el hecho de que la goma
tragacanto continua su hinchamiento aun despus de preparada la
suspensin, estableciendo su valor final de viscosidad solo hasta
despus de algn tiempo.
Las dispersiones de slidos en un medio lquido, como las
suspensiones, permiten que las partculas dispersas tengan choques
unas con otras, debido al movimiento browniano, al movimiento
convectivo y al movimiento generado por la fuerza gravitacional. S
despus de estos choques las partculas permanecen juntas o vuelven a
separarse, depende de las fuerzas que actan entre ellas.
181
Cuando dos partculas, originalmente separadas, permanecen juntas

despus de chocar, disminuye la interfase slido-lquido y con esto la
energa libre del sistema. Por esta razn, las partculas suspendidas
tienen una tendencia termodinmicamente favorecida, para aumentar
su tamao, para agregarse o para coagular. Sin embargo, si las
interacciones entre las partculas son tales que se manifiesten como una
barrera que haga poco probable la agregacin, despus de un choque, la
suspensin puede considerarse, para fines prcticos, estable.
En los casos en que las partculas suspendidas sean suficientemente
grandes para evitar el movimiento browniano, stas tendern a
sedimentar por efectos de la gravedad, formando una acumulacin de
partculas en el fondo del recipiente que les contiene. En este
conglomerado de partculas, stas podran estar suficientemente cerca
para permitir que las fuerzas de atraccin de London y de Van der Walls
predominen sobre las fuerzas repulsivas de una doble capa elctrica, la
cual originalmente les mantiene separadas. Esta circunstancia
conducira a la agregacin de las partculas en lo que hemos
denominado un entortamiento, que impedira el uso adecuado de la
suspensin, hacindola inservible.
Por otro lado, si el sistema es inestable desde el principio, las
partculas sedimentarn de igual manera, por floculacin, solo que de
una manera menos densa, esto es, con mayor separacin entre una y
otra, ocupando un volumen de sedimentacin relativamente grande, con
mayor proporcin de lquido entre una partcula y otra. Las suspensiones
de este tipo, como consecuencia del tipo de sedimentacin de las
partculas, son fciles de redispersar, hacindolas aceptables desde el
punto de vista farmacutico. Esta tendencia de las suspensiones se
estima a travs del denominado grado de floculacin (), el cual es la
relacin del ndice de sedimentacin de la suspensin (R sed o F), entre el
ndice de sedimentacin de una suspensin estable o no floculada (F )
(ver pgina 164).
F = V / Vo (IV. 8)
= F / F (IV. 9)
Donde: V es el volumen del sedimento a un tiempo dado (por ejemplo

24 horas) y Vo el volumen inicial de la suspensin.
El valor de F puede definirse como un valor de referencia del
coeficiente de floculacin, frecuentemente mencionado como el valor de
F para un sistema estable o no floculado. En otros casos, se ha tomado
como referencia el valor de F de una determinada suspensin, por
ejemplo, del principio activo solo, en agua, sin la adicin de ninguna otra
sustancia qumica (21).
182
Existen varios factores que determinan la estabilidad fsica de una

suspensin, la figura IV. 11 nos muestra el efecto del pH sobre el grado
de floculacin de una suspensin de nitrofurantona (21).
GRADO DE FLOCULACIN
2.3
1.8
1.3
0.8
0.3
2 4 6 8 10
pH
Figura IV. 11, Grado de floculacin () de una suspensin de

nitrofurantona (1%-p/v) como funcin del pH (21).
La suspensin de nitrofurantona muestra grados de floculacin

superiores a 1 porque se tom como referencia una suspensin al 1%
del frmaco en agua, la cual sedimenta muy fcilmente. A valores bajos
de pH la suspensin se comporta de manera semejante a la suspensin
de referencia. A valores de pH entre 6 y 7 se observa un mximo en los
valores del grado de floculacin. Cuando se compararon estos resultados
con los de redispersin, se observ que entre mayores fueron los valores
de, la redispersin del sedimento fue ms fcil. A valores de pH bajos,
la redispersin fue ms difcil, debido probablemente a una
sedimentacin ms compacta de las partculas, la cual permiti el
predominio de las fuerzas de atraccin de London y de Van der Walls,
sobre las electrostticas de repulsin.
El efecto de electrolitos como el cloruro de sodio y el cloruro de calcio,
los cuales se usan para provocar la floculacin, mostraron un efecto
semejante al del pH, esto es, grados de floculacin altos correspondieron
con redispersiones fciles y grados de floculacin bajos, con
resuspensiones difciles. Con la adicin de estos electrolitos se obtuvo un
183
-5 -4 -3 -2
mnimo en el grado de floculacin, el cual fue dependiente del valor del

pH de las suspensiones.
2
GRADO DE FLOCULACIN
1.6
pH = 4
pH = 7
1.2
0.8
log [(CONCENTRACIN (M)]
Figura IV. 12. Efecto de la concentracin de cloruro de sodio

sobre el grado de floculacin () de suspensiones de
nitrofurantona (1%), a diferentes valores de pH (21).
El perfil del efecto de la concentracin del electrolito floculante sobre

el grado de floculacin () fue diferente para los diferentes electrolitos
utilizados. La adicin de un agente que imparte viscosidad, el carbopol
934, cambi tambin el perfil del efecto de la concentracin de
electrolito sobre el grado de floculacin.
El tamao de las partculas es una propiedad fsica de los frmacos
que puede afectar ya sea la biodisponibilidad o la duracin del efecto
farmacolgico de los mismos. Los cambios del tamao de las partculas
de una suspensin se llevan a cabo en suspensiones, emulsiones y en
supositorios. La magnitud de este fenmeno depende de la solubilidad
del frmaco en el vehculo en que se encuentra suspendido, por lo que
al reducir esta solubilidad se podra disminuir tambin esta inestabilidad.
Cuando se presenta un aumento del tamao de las partculas, se debe
examinar si este fenmeno no es consecuencia de un cambio en la
estructura cristalina. Este cambio en el tamao podra ser una
manifestacin de las diferencias en solubilidad de las diferentes formas
cristalinas o polimorfas. Un cambio en el polimorfismo de los materiales
184
suspendidos, en especial con frmacos que son poco solubles, por

ejemplo el cloramfenicol, podra ser consecuencia de la utilizacin de
formas metaestables de los cristales, buscando una mayor solubilidad.
Como se puede deducir, el uso de un polimorfo metaestable, el cual en
realidad es ms soluble, traera consigo un cambio polimrfico hacia otra
estructura que es menos soluble, pero ms estable, lo cual equivaldra a
una disminucin en la biodisponibilidad.
Para estudiar los posibles incrementos en el tamao de partcula y la
formacin de aglomerados se acostumbra ciclar la temperatura de
almacenamiento entre 4 C y 40C, para exagerar las condiciones del
da y la noche y as, a travs de un proceso de disolucin a 40C y
despus recristalizacin a 4C, se pueda observar la facilidad o dificultad
que la suspensin, la emulsin u otra forma farmacutica, presente para
que este fenmeno ocurra, en un tiempo ms corto.
Esta prueba se ha realizado a diferentes temperaturas y lapsos de
duracin de los ciclos. Con el fin de estandarizar la prueba, se ha
sugerido que las temperaturas sean las antes mencionadas, 4-40 C,
cuando las zonas climticas de distribucin y consumo de los productos
sean las denominadas como I y II, reservndose una ampliacin de la
temperatura superior hasta los 45 C, para cuando el producto se
distribuya en las zonas climticas III y IV (ver captulo I de estas notas).
En nuestro pas quiz sera recomendable la temperatura de 4-45 C por
la variabilidad amplia del clima, en diferentes lugares de nuestro pas. La
duracin del ciclo se ha considerado sea semejante al del ciclo del da y
la noche, esto es, 24 horas, adems de ocurrir el cambio de temperatura
de manera sinusoidal (gradualmente), aunque tambin se han usado
ciclos cuadrados, esto es, que cambian bruscamente la temperatura
entre 4 C y 45 C. El numero de ciclos que debe durar la observacin se
ha recomendado de sea 20, aunque en muchos productos con 10 ciclos
sea suficiente para observar posibles inestabilidades (22).
Otro fenmeno que se puede presentar en las suspensiones, es la
prdida o disminucin de la concentracin en solucin de una
determinada sustancia, por adsorcin sobre la fase slida suspendida o
sobre el material de empaque. Esto es causado por fuerzas de adhesin,
de Van der Walls o de Coulomb, o por verdadero enlace qumico de
adsorcin. Este fenmeno afecta en especial a los conservadores, pero
tambin puede afectar a los frmacos, afectando as tambin su
biodisponibilidad.
Las emulsiones son tambin estructuras termodinmicamente
inestables, las cuales consisten de dos fases inmiscibles que se
mantienen juntas por la adicin de una seleccin apropiada de
molculas que posean tanto propiedades hidroflicas as como lipoflicas,
los tensoactivos. Regularmente se usaran mezclas de tensoactivos y
otros aditivos para estabilizarles. Las propiedades y la estabilidad de las
185
emulsiones se ven afectadas tanto por los componentes de la frmula

as como tambin por los procedimientos de manufactura.
Problemas tpicos de estabilidad fsica de

suspensiones:
Evaporacin de los constituyentes

Cremado o formacin de nata
Floculacin y agregacin
Coalescencia y separacin de fases
Cambios en la reologa
Cambios de polimorfismo
Materiales que se encuentran suspendidos en una emulsin podran

ser sujetos de cambios polimrficos, incluyendo los cambios de un
polimorfo a un seudopolimorfo o solvato. Estos cambios pueden ser
medidos a travs la difraccin de rayos X y el anlisis trmico
diferencial. Este tipo de cambios en la estructura cristalina puede
conducir a cambios dramticos en las caractersticas o perfil de
liberacin de los frmacos desde un ungento. Adems de los frmacos,
las bases para supositorios tambin podran sufrir modificaciones en su
estructura cristalina, por ejemplo la transformacin de las estructuras
y en la ms estable estructura , la cual tiene un punto de fusin
mayor (23).
Un ejemplo de alteracin de una estructura CRISTAL cristalina es la
transformacin de la prednisolona anhidra ANHIDRO en su correspondiente
hidrato, en una formulacin de una emulsin aceite en agua. La figura
IV. 13 muestra el cambio de la estructura cristalina, seguido por rayos X,
Inicial
mientras que la figura IV. 14 muestra las consecuencias de tal
transformacin, sobre el perfil de liberacin de la prednisolona desde la
INTENSIDAD
emulsin de aceite en agua (24).

8 das
18 das
CRISTAL
HIDRATADO
186
10 13 16 19
NGULO
2 ()
Figura IV. 13. Representacin esquemtica del patrn de difraccin

de rayos X de prednisolona, en una emulsin aceite en agua, a
diferentes tiempos de almacenamiento (24).
Como puede observarse, al cabo de 18 das prcticamente ya no

existe la forma anhidra de la prednisolona, casi no se observa su seal.
Por otro lado, ya a los 8 das se observa la presencia de la forma
hidratada, la cual permanece como nica a los 18 das.
Observando los resultados de la figura IV. 14, parece ser que la forma
hidratada es menos soluble que la forma anhidra. Esto se manifiesta con
perfiles de disolucin con una menor velocidad, en el caso del producto
con la estructura cristalina hidratada (a los 18 das), mientras que el
perfil de disolucin donde la estructura cristalina es anhidra (forma
inicial), presenta una velocidad de disolucin ms rpida. El perfil de
disolucin de la muestra almacenada durante 8 das presenta, como es
de esperarse, una velocidad de disolucin intermedia, la cual es debida
a una mezcla de las dos estructuras cristalinas de diferentes solubilidad
aparente, tal como se observa en la representacin esquemtica de los
difractogramas de rayos X (figura IV. 13).
187
PREDNISOLONA LIBERADA (mg/ml). 0.4
0.3 INICIAL
0.2 8 DAS
0.1 18 DAS
0
0 2 4 6 8 10
TIEMPO (horas)
Figura IV. 14. Perfil de liberacin de prednisolona desde una

emulsin aceite en agua, almacenada a 37 C, en funcin del tiempo
de almacenamiento (24).
Los problemas de las emulsiones son similares a los de las

suspensiones. El crecimiento de las partculas se puede dar por choque
entre dos de ellas, formando un aglomerado ms grande. Si las gotas
son ms densas que la fase continua, estas podran flocular o
sedimentar, con una posible agregacin y en el caso extremo una
separacin de fases. A diferencia de las suspensiones, en las emulsiones
es ms frecuente el cremado o formacin de nata, particularmente
cuando la fase dispersa es menos densa que la fase continua, lo cual
regularmente es el caso cuando la fase interna o dispersa es la fase
oleosa.
Un mtodo empleado para medir el perfil de cremado o formacin de
nata de las emulsiones ha sido la medicin de la conductividad, la cual
se convierte en valores de fraccin de volumen de la fase dispersa, de
acuerdo a la teora de la dispersin dielctrica. Esta medicin permite
conocer el volumen de la fase dispersa, distribuida a una determinada
altura del recipiente, parte superior del recipiente para determinar el
cremado, conteniendo la emulsin y su aumento conforme transcurre el
tiempo de almacenamiento.
El mtodo de la conductividad es sensible a cambios pequeos de la
fraccin de volumen de la fase dispersa que se localiza a una
determinada altura del recipiente, a temperatura ambiente. Bajo ciertas
restricciones se puede usar este mtodo tambin para hacer
predicciones a largo plazo, a partir de mediciones a temperaturas
188
elevadas, empleando una adaptacin de la ecuacin de Arrhenius a la

constante de velocidad de cremado obtenida con este mtodo (25).
La fraccin inicial del volumen de la fase dispersa y aquella durante el
cremado se calcula con las ecuaciones:
0 = w (t / d) (IV. 10)
(t) = 0 exp (Kt) (IV. 11)
Donde 0 es la fraccin inicial de la fase dispersa, w es la fraccin en

peso de la fase dispersa y t y d son respectivamente las densidades del
total de la dispersin y de la fase dispersa. (t) es la fraccin del volumen
de la fase dispersa a un tiempo dado, K es la constante de velocidad de
cremado y t es el tiempo.
La ecuacin IV. 11 se aplica durante las primeras fases del
cremado, cuando la fraccin de la fase dispersa crece, en la parte
superior del recipiente, sin un lmite aparente. Generalmente, cuando se
crea una falta de homogeneidad por cremado, el movimiento trmico de
las gotas dispersas tiende ha recuperar la homogeneidad original a
travs de la difusin generada por este movimiento. Lo cual hace ms
compleja la situacin. Cuando el proceso de cremado progresa,
tendiendo a llegar a su lmite, la ecuacin que mejor describe el proceso
sera:
(t) = [0 * max exp (Kt)] / [max + 0 * ( exp (Kt) 1)]

(IV. 12)
En esta ecuacin max es el valor mximo que se puede alcanzar de la
fraccin del volumen de la fase dispersa, el cual suponiendo diferentes
tipos de empacamiento ordenados alcanza entre 0.60 y 0.64, con
algunas desviaciones para sistemas polidispersos.
Haciendo uso de este mtodo se calcul con la ecuacin IV. 12 la
estabilidad al cremado en una emulsin aceite/agua, formulada con
polisorbato 60, monoestearato de sorbitan, triglicridos de los cidos
cprico y caprlico, propilenglicol, alcohol benzlico y agua
desmineralizada, a partir de los datos publicados en (25). La figura IV. 15
muestra el efecto de la temperatura y el tiempo sobre la fraccin de la
fase dispersa en la parte superior del recipiente que le contiene,
tomndose como una medida del grado de inestabilidad o cremado de la
emulsin. En esta ocasin se grafica el ndice de la fraccin del volumen,
el cual es la divisin de la fraccin del volumen de la fase dispersa a un
tiempo dado entre su valor inicial ((t) /0). Este ndice nos indica que
189
tanto se va enriqueciendo, en fase dispersa, la parte superior del

recipiente, con respecto a la situacin inicial, el doble, el triple, etc. Por
esta razn el valor inicial de la grfica es de 1.
3.5
NDICE FRACCIN DE VOLUMEN
2.5 5C
25 C
1.5
45 C
0.5
0 40 80 120 160
TIEMPO (das)
Figura IV. 15. ndice de la fraccin del volumen de la fase dispersa

acumulada en la parte superior del recipiente, a diferentes
temperaturas de almacenamiento. Emulsin F 20 (25).
Se puede ver que a 5 C la velocidad de cremado es muy baja,

0.002585, subiendo con la temperatura hasta un valor de 0.250, a 45 C.
La relacin de la constante de cremado K, con la temperatura, se
describe con una ecuacin similar a la de Arrhenius (ver pgina 54):
Ln (K) = ln (A) (Ec / R) (1/T) (IV. 13)
En la ecuacin IV. 13, el valor de E c se considera la energa de

activacin del cremado de la emulsin. Una condicin para la aplicacin
de esta ecuacin en la prediccin de la estabilidad de una emulsin es
que no se altere el mecanismo del proceso de cremado, esto significa
que la relacin del cambio de viscosidad de la emulsin, el principal
factor de retraso del cremado, deber ser lineal con respecto a la
temperatura.
La figura IV. 16 nos muestra la relacin tipo Arrhenius para el ejemplo
de la figura IV. 15, con una estimacin de la energa de cremado E c =
190
20.76 Kcal/mol y un coeficiente de determinacin de 0.99. Quiz podra

ser de utilidad tambin calcular el factor denominado Q 10, el cual nos
indica que tanto cambia la constante de velocidad de cremado K, en
funcin de un aumento de 10 Kelvin en la temperatura. Para este caso
Q10 = 3.12 y fue calculado con la ecuacin:
Q10 = exp (Ec/r (1/T1 1/T2)) (IV. 14)
-1
y = -10.45x + 31.637
R2 = 0.9899
-3
ln K
-5
-7
3.1 3.3 3.5 3.7
1000/TEMPERATURA (1/Kelvin)
Figura IV. 15. Grfica tipo Arrhenius para la constante de cremado K,

con respecto al inverso de la temperatura absoluta 1/Kelvin, de la
emulsin F 20 (25).
A travs del uso de este modelo cintico para el cremado de una

emulsin se pueden calcular las velocidades de cremado a temperaturas
elevadas y predecir el comportamiento a temperaturas inferiores,
temperatura ambiente o refrigeracin. Sin embargo, deben tenerse en
cuenta las restricciones del mismo modelo.
Otros mtodos predictivos de la estabilidad de emulsiones, basados
en determinaciones experimentales, incluyen las pruebas de
congelamiento-descongelamiento, mediciones de la coalescencia y
mediciones de las temperaturas de inversin de fases. Este ltimo
mtodo se fundamenta en la buena correlacin que existe entre las
velocidades de coalescencia, y con esto de la estabilidad, y la
temperatura de inversin de fases de loas emulsiones. La relacin lineal
se da entre el logaritmo de la velocidad de coalescencia y la
temperatura de inversin de fases, en centgrados (5).
191
Las mediciones para la estabilidad de emulsiones se pueden hacer a

temperaturas elevadas o muy bajas para acelerar su ruptura, ciclando
las temperaturas (ver pginas 167-168), lo cual se observa, entre otros,
ocularmente o turbidimtricamente, aunque no siempre se puede hacer
una extrapolacin exacta a temperatura ambiente. Otra manera de
probar la posible estabilidad de una emulsin en la etapa de
formulacin, es inyectando una gota de una de las fases en la otra y
midiendo el tiempo que tardan en separarse. Entre ms tiempo tarden
en separarse, la emulsin de estas dos fases ser ms estable.
Los derivados de celulosa se han utilizado en la preparacin de
emulsiones, con el fin de formar complejos con algunos tensoactivos,
mostrando de esta manera un efecto sinergista sobre la estabilidad. El
efecto que estos complejos tienen sobre el tamao de las gotas
dispersas es dependiente de la concentracin, mostrando un lmite
sobre el cual ya no muestran un mayor efecto. Con algunos polmeros
como HPMC-E4M, los cuales tienen mayor viscosidad, podran causar no
una disminucin del tamao de las gotas, sino al contrario, un aumento,
debido a la resistencia ofrecida al proceso de dispersin, durante la
preparacin (26).
Las emulsiones de parafina lquida con soluciones de HPMC de baja
viscosidad (tipos E15 y E50), almacenadas a 25 C, mostraron una gran
inestabilidad, aumentos en su viscosidad, de tal manera que emulsiones
fluidas se volvieron semislidas despus de 12 semanas (figura IV. 16).
Este aumento en la viscosidad se considera debido a un desdoblamiento
del polmero y a un aumento en su adsorcin sobre la superficie de las
gotas o glbulos, durante el almacenaje. Sin embargo, los polmeros de
viscosidad mayor, tipo E4M, solo aumentaron su viscosidad
temporalmente, para despus caer por debajo del valor inicial. Esto se
considero debido a una deshidratacin del polmero, al paso del tiempo.
Las emulsiones fabricadas con los polmeros de bajo peso molecular y
correspondientemente menor viscosidad, se separaron parcialmente
despus de centrifugar por 2 horas a 5 000 r.p.m., mientras que la
emulsin con HPMC tipo E4M, a pesar de la disminucin mostrada en su
viscosidad, no sufri separacin de fases. La emulsin con 3%-E15 fue
ms estable a la centrifugacin que aquella con 2%-E50. De cualquier
manera, se considera que concentraciones iguales o superiores a las
mencionadas, de los polmeros usados, producen emulsiones estables,
no mostrando ninguna separacin de fases durante 4 meses de
almacenamiento. Sin embargo, es de recomendarse el uso de una
mezcla de polmeros de baja y alta viscosidad, para equilibrar los
cambios en la viscosidad y as generar mejores emulsiones, que sirvan
como base para ungentos farmacuticos.
El uso de HPMC y otros agentes para aumentar la viscosidad y con
esto la estabilidad de las emulsiones, es importante. Sin embargo, quiz
192
el factor de mayor importancia sea la estabilidad del sistema

tensoactivo/coloide protector, en la interfase de la emulsin.
VISCOSIDAD APARENTE (Pas) 20
15
3%- E15
10
2%-E50
5 1%-E4M
0
0 25 50 75 100
TIEMPO (das)
Figura IV. 16. Cambios de viscosidad durante el almacenamiento a

25 C, de emulsiones fabricadas con diferentes concentraciones de
HPMC, de diferentes pesos moleculares (26).
Se ha mencionado que existe una buena correlacin entre la

viscosidad y el tamao de los glbulos de una emulsin, sin embargo,
las caractersticas reolgicas de una emulsin dependen tambin de
otros factores (5), factores tales como:
Viscosidad de la fase interna

Viscosidad de la fase externa
Proporcin en volumen de las fases
Tipo y cantidad de emulsificantes
Distribucin del tamao de partcula
Los mtodos de preparacin de emulsiones aceite/agua se considera

que tienen un fuerte impacto sobre su estabilidad a largo plazo (27). Por
ejemplo, el aumento en la temperatura de emulsificacin disminuye el
tamao de los glbulos dispersos. La adicin de la fase oleosa sobre la
fase acuosa, a travs de un homogeneizador genera un gran nmero de
193
glbulos grandes. Sin embargo, la velocidad del homogeneizador se

consider el factor ms importante para la estabilidad de la emulsin,
seguido en importancia por el tiempo de homogeneizacin.
Las razones ms importantes que contribuyen a la ruptura de las
emulsiones incluyen (5):
Incompatibilidad qumica entre los emulsionantes y otros

excipientes
Seleccin de tensoactivos con HLB equivocado
Elevadas concentraciones de electrolitos
Inestabilidad del emulsionante
Viscosidad demasiado baja
La temperatura
En las emulsiones como en otro tipo de ungentos se puede presentar

el problema de la prdida de agua u otro solvente, por evaporacin del
mismo. Este caso se presenta realmente cuando los materiales no se
han manejado de una manera adecuada o cuando los empaques no son
los convenientes. A menudo las prdidas de agua en medicamentos de
aplicacin cutnea pueden provocar hasta una sequedad completa en
los hidrogeles y en las emulsiones de aceite en agua. Por otro lado la
prdida de componentes de soluciones, como pudiera ser el alcohol,
provocara un cambio en las relaciones de solubilidad de los
componentes slidos, lo que dara lugar a precipitaciones. Otro tipo de
componentes que pueden perderse por evaporacin seran los aceites
esenciales voltiles, por lo que su contenido tambin debe ser
considerado en la estabilidad fsica de los medicamentos.
Un ungento fsicamente estable retiene su homogeneidad y
consistencia durante su tiempo de vida. Para esto se controlan
tradicionalmente la separacin de fases, (dado que en estos preparados
puede haber una mezcla de hasta 3 fases), la consistencia o capacidad
de ser untado y la homogeneidad o uniformidad del contenido entre
dosis.
Para examinar la separacin de fases, adems de los mtodos ya
sealados, pueden hacerse un anlisis organolptico macroscpico o un
examen microscpico, por ejemplo, para observar la separacin de
pequeas gotas de fluido a partir de la mezcla slida. Este fenmeno se
llama comnmente sudoracin o sangrado.
La consistencia de un ungento debe ser tal que sea lo
suficientemente blando, que permita untarlo y lo suficientemente slido
194
para que no escape entre los dedos. Es importante recordar que las
grasas y petrolatos sufren cambios en su cristalinidad o polimorfismo al
paso del tiempo, que alteran la consistencia de estos preparados,
normalmente la tendencia es hacia estructuras ms ordenadas, que
tienen una consistencia mayor. En la mayora de los casos estas
estructuras requieren, despus de la fabricacin, entre 48 horas y 15
das para tomar una estructura ms o menos estable y a partir de ella,
medir su estabilidad.
La homogeneidad de ungentos en suspensin, as como de los
supositorios, puede verse alterada al elevar la temperatura,
aumentando su fluidez y provocando sedimentaciones de los
componentes en suspensin, creando con ello un desmezclado que les
hace perder su homogeneidad.
Uno de los problemas ms comunes en la estabilidad fsica de los
semislidos, es el cambio de su viscosidad durante el almacenamiento.
La estructura de los semislidos se presenta como un gel ms o menos
complejo, el cual puede ser alterado por cambios en la temperatura y el
tratamiento mecnico.
Los geles, como forma farmacutica, son sistemas con estructuras en
forma de red, formadas por partculas suspendidas o por
macromolculas o polmeros tanto de origen natural as como sinttico,
disueltas en agua. Los geles pueden sufrir cambios en su estructura que
conducen a la alteracin de sus propiedades reolgicas.
Cuando algunos factores deterioran los enlaces del gel, durante su
fabricacin, provocan una disminucin de la viscosidad, la cual tiende ha
ser recuperada con el tiempo, al reconstruirse los enlaces deteriorados.
Otro factor que modifica la viscosidad de los geles, es la cantidad y
tipo de materiales (frmacos, excipientes) que se le agreguen.
Es muy raro que un semislido presente una prdida de viscosidad al
paso del tiempo. Si la hubiere, sta podra ser a causa de un ataque
microbiano, principalmente en hidrogeles. Los microorganismos
degradaran materiales de alto peso molecular a otros de uno ms bajo.
Una manera de evitar este problema es disminuyendo el agua del
preparado y conservando apropiadamente.
De cualquier manera, la consistencia es una propiedad de los geles, y
de los semislidos en general, que puede sufrir deterioro al paso del
tiempo. La consistencia es un trmino no especfico para los parmetros
de viscosidad y elasticidad de un material. Algunas determinaciones
sofisticadas como los experimentos oscilantes o la capacidad para ceder
bajo una determinada tensin, permiten su evaluacin, aunque sta
tambin es posible por otros mtodos como las determinaciones de
corte continuo. La aplicabilidad de estas pruebas a un determinado
195
sistema depende de manera importante de la estructura que se examina

y sus caractersticas de elasticidad (23).
Los cambios en la consistencia que fueran notados por el consumidor
son difciles de valorar en trminos cuantitativos, parmetros de textura,
por ejemplo usados en cosmticos, como suave, grasoso, pegajoso,
arenoso o flexible, se pueden entender fcilmente en trminos
subjetivos, pero no es fcil valorarlos en trminos cuantitativos. Un
semislido se considera estable cuando el consumidor no percibe
cambios al tocarlo.
Un mtodo para medir la consistencia o fluidizacin de un semislido
es la determinacin de su capacidad de dispersin o extensin. La
determinacin se lleva a cabo colocando, por ejemplo, un gramo de un
gel sobre un vidrio plano, cubrindolo con otro igual (20 cm de lado y un
peso de 125 g). Despus de un minuto se mide el dimetro de la gota
del gel entre las placas de vidrio. Partiendo de un dimetro inicial de 57
mm, un cambio perceptible en la consistencia fue manifiesto cuando el
dimetro alcanz un valor de 65 mm. Por esta razn se estableci como
limite de estabilidad un dimetro de 63 mm, el cual es equivalente a una
viscosidad de 1750 m*Pa*s, cuando se midi a una velocidad de 10
r.p.m. Los valores del dimetro de extensin se han encontrado
proporcionales a la viscosidad determinada con un viscosmetro
Brookfield, como se observa en la figura IV. 17 (28).
9
Gel de Hamamelis
VISCOSIDAD (m * Pa *s * 1000).
Gel de Procianidina
6
y = -0.6637x + 43.656
R2 = 0.9921
0
52 56 60 64
DIMETRO DE EXTENSIN (mm)
Figura IV. 17. Relacin del dimetro de extensin, despus

de un minuto, con la su viscosidad de geles basados en
celulosa. La ecuacin de regresin corresponde con el gel de
procianidina (28).
196
Utilizando este mtodo se evalu la estabilidad del gel de hamamelis

(Hamamelis virginiana-angioprotector), encontrndose que sta
depende del polmero derivado de celulosa que se utilice. Los geles
basados en metilcelulosa, carboximetilcelulosa y
metilhidroxipropilcelulosa afectaron rpidamente su viscosidad. Los
mejores resultados de conservacin de la consistencia, estable por ms
de 250 das, se obtuvieron con el gel basado en hidroxipropilcelulosa
(Klucel M).
Los cambios en las propiedades viscoelsticas podran quiz ser ms
sensibles que las mediciones de corte continuo, como la medicin de la
viscosidad aparente. Otras determinaciones de la consistencia,
empricas, que tambin podran ser tiles seran el uso de
penetrometros y tcnicas para medir la extrusin de los productos a
travs de un orificio o la dispersin de un producto sobre la piel (5).
Los supositorios que contienen fases slidas o lquidas dispersas
manifiestan los problemas de estabilidad ya mencionados para las
emulsiones y suspensiones. Adems de ello, es de considerarse, para su
estabilidad fsica, que las bases grasas utilizadas para su preparacin
consisten de mezclas complejas de triglicridos. Su mayor desventaja es
que son inmiscibles con el agua de los fluidos rectales, de tal manera
que la liberacin del principio activo depende en gran medida de la
fusin de la base a la temperatura del cuerpo. Esto podra crear
problemas de estabilidad durante el almacenamiento, ya que algunos
triglicridos podran sufrir transformaciones polimrficas. Existen 3
formas polimrficas conocidas de estos triglicridos, la , la y la , lo
cual hace posible varias transiciones, con los correspondientes cambios
en las temperaturas de fusin de las bases.
Una alternativa a las bases grasas son las bases de polietilenglicol, las
cuales son miscibles con el agua. Sin embargo, es posible que la historia
trmica de estos polmeros pueda afectar la velocidad de liberacin de
los frmacos y la disolucin del mismo polietilenglicol.
Una ventaja del polietilenglicol es que se puede regular su punto de
fusin haciendo mezclas del polmero con diferentes pesos moleculares
o con otras substancias afines, como el monoestearato de glicerol. La
figura IV. 18 nos muestra los cambios en el punto de fusin relativo a la
proporcin de los componentes de mezcla (29).
Como se observa en la figura IV. 18, el almacenamiento de estas
bases para supositorios a 4 C durante 6 meses provoca una alteracin
del punto de fusin, medido con un analizador trmico de barrido, de 4
C para la mezcla polietilenglicol 1000 (PEG 1000) y polietilenglicol 4000
(PEG 4000), mientras que la mezcla con el monoestearato de glicerol
(MG) y el PEG 4000 solo aument su punto de fusin en 2 C, indicando
197
con esto menores problemas de estabilidad. El aumento del punto de

fusin de las bases se supone sea debido a un incremento en la
cristalinidad.
La seleccin adecuada de la base para supositorios tambin podra
hacerse tomando en cuenta el estado de agregacin del frmaco.
Cuando las bases mencionadas fueron utilizadas para preparar
supositorios de teofilina al 4% (p/p), se observa en los termogramas que
no existe ningn pico diferente de aquellos de la base y en su caso, del
frmaco, por lo que no supone la formacin de ningn complejo entre los
componentes de la frmula. Sin embargo, se puede observar
63
+PEG 1000
P. DE FUSIN (C).
58
+Monoestarato
de glicerol
53
+PEG 1000+6
Meses
48 +MG+6 Meses
43
0 30 60 90
POLIETILENGLICOL 4000
Figura IV. 18. Efecto de la composicin de la base sobre el punto de

fusin de supositorios de teofilina recin preparados y despus de 6
meses a 4 C (29).
PEG 4000+MG
+6Meses
PEG 4000+ MG
PEG 4000+
ENDOTERMA
PEG 1000 +6Meses
PEG 4000+PEG 1000
198
40 140 240
TEMPERATURA (C)
Figura IV. 19. Representacin esquemtica de termogramas de

supositorios de teofilina al 4% (p/p), con diferentes bases y tiempos
de almacenamiento, a 4 C (29).
que utilizando la base de PEG 1000 + PEG 4000 el frmaco forma una
solucin slida, ya que no se observa ninguna endoterma de fusin de la
teofilina. En el caso de la base formada por PEG 4000 y MG, por el
contrario, se observa claramente una endoterma que se atribuye a la
fusin de los cristales de la teofilina (figura IV. 19). Este hallazgo
seguramente que tendr repercusin sobre la liberacin del frmaco.

La inestabilidad de la disolucin es quiz la principal inestabilidad
fsica que se observa en los supositorios y sta es diferente, para un
mismo frmaco, dependiendo de la base utilizada para los supositorios.
Usando amoxicilina como frmaco, se ha observado que la masa Novata
BD y la manteca de cacao aumentan su liberacin despus de un mes
de almacenamiento a 21 C, en la oscuridad, mientras que, como caso
extremo, Suppocire A32 disminuy drsticamente su liberacin despus
del mismo tiempo de almacenamiento (figura IV. 20). Aunque otras
masas como la Novata 299 y el Witepsol W35 tambin lo hicieron. stos
efectos se consideran relativos al ndice de hidroxilo de las bases, ya que
las masas Novata, las cuales tienen los ndices de hidroxilo menores,
mostraron perfiles de una ms rpida y completa disolucin, mientras
que las masas como Witepsol W35 y Suppocire A32, con ndices de
hidroxilo altos, parecen favorecer la permanencia del frmaco en la base
y por lo tanto disminuir su liberacin, tanto en velocidad as como en la
cantidad total liberada.
100 Novata BD
NovataBD+1
75
AMOXICILINA (%)
mes
Suppocire A32
50
Suppocire
A32+1 mes
25
0
0 60 120 180 240
TIEMPO (min)
199
Figura IV. 20. Liberacin de amoxicilina desde diferentes bases para

supositorios, inicial y despus de 1 mes a 21 C (30).
En trminos generales, un ndice de hidroxilo elevado significa un

aumento en los posibles candidatos a reaccionar con el principio activo.
Sin embargo, masas para supositorios con bajos ndices de hidroxilo
poseen propiedades quiz no muy convenientes en lo que se refiere a su
dispersabilidad, viscosidad y en particular, poseen una tendencia a
formar supositorios frgiles y quebradizos.
Otros factores que contribuyen seran el punto de solidificacin, el
cual es algo menor para la Novata BD (30-32 C) que para la Novata 299
(31.5-33.3 C). Otro factor sera el endurecimiento de los supositorios
durante el almacenamiento y la prolongacin del tiempo necesario para
su fusin.
La forma en que un supositorio funde es un parmetro importante
para la disponibilidad biolgica, debiendo fundir siempre a temperaturas
muy por debajo de la temperatura corporal (37 C).
La lecitina es una sustancia que se ha utilizado como estabilizador
fsico y qumico en los supositorios, adems de mejorar la disolucin.
Para evitar problemas de endurecimiento posterior de los supositorios se
han usado concentraciones entre 2% y 5%. stas concentraciones
aceleran la transformacin de la estructura cristalina de las bases hacia
la , la cual es estable. Sin embargo, la lecitina podra tambin acelerar
procesos degradativos de algunos frmacos como la aspirina (31).
Si bien antes se mostr el efecto de diferentes masas sobre la
liberacin de la amoxicilina, tambin es cierto que se observan
diferentes efectos de estabilidad de la liberacin para diferentes
frmacos con una misma masa (figura IV. 21).
60 Fenacetina
FRMACO (%)
Fenacetina+12
40 meses
Aspirina
Aspirina+12
20
meses
0
0 10 20
200
TIEMPO (min)
Figura IV. 21. Efecto de 12 meses de almacenamiento sobre

la liberacin de diferentes frmacos desde un mismo
supositorio (31).
Como puede observarse, en los casos de la disolucin tanto de
aspirina as como de fenacetina, hay un aumento en la velocidad de
liberacin, despus de almacenar durante 12 meses los supositorios, sin
embargo, el efecto es mucho ms pronunciado para la aspirina que para
la fenacetina. Adems de que la fenacetina se libera en mucha menor
proporcin que la aspirina. stas circunstancias hacen difcil el uso de la
experiencia ganada en un producto, en el desarrollo de otro, ya sea
usando la misma masa o el mismo frmaco.
El antimictico anfotericina B encapsulado en liposomas, para
administracin parenteral, fue el primer frmaco en liposomas aprobado
para su venta, hace aproximadamente 5 aos. Las razones por las
cuales los liposomas se prefieren, como vehculos de frmacos o
antgenos son su posibilidad de cierta capacidad de manipulacin de su
comportamiento in vivo, su relativa seguridad y las caractersticas de su
ncleo acuoso que es apropiado para encapsular protenas.
Los liposomas denominados multilaminares se preparan por
hidratacin de pelculas delgadas de lpidos, seguida de agitacin. La
distribucin del tamao de los glbulos y la cantidad de la fase acuosa
atrapada depende del tiempo de hidratacin, del mtodo de dispersin,
del grosor de la pelcula lipdica y de la composicin y concentracin de
la fase lipdica. La sonicacin de los liposomas multilaminares (MLVs)
produce una poblacin ms homognea de liposomas unilaminares
(SUVs). Los liposomas de tamao intermedio y que atrapan una gran
proporcin de fase acuosa se producen por otras tcnicas como la
infusin de ter o la evaporacin en fase reversa (32).
201
Los liposomas pueden ser usados para varios propsitos (33):
Como agentes solubilizantes de frmacos lipoflicos (rpida

desintegracin en sangre despus de su inyeccin)
Como vehculos de agentes inmunomoduladores (orientacin
pasiva hacia macrfagos)
Como vehculos de agentes citostticos y antimicticos (sistemas
de liberacin lenta)
Como vehculos orientados hacia tejidos o clulas patgenas
(trombos, tumores, infecciones): orientacin activa
Como vehculos de antgenos, de preferencia con un adyuvante
La encapsulacin de frmacos en liposomas puede cambiar

dramticamente su distribucin en el cuerpo as como su velocidad de
eliminacin. stas y otras propiedades menos claras dan por resultado la
posibilidad de orientar o dirigir los frmacos hacia rganos o lugares de
enfermedad, de prolongar los niveles de los frmacos en los tejidos o en
la sangre, de reducir su toxicidad y/o de aumentar la eficacia de los
frmacos encapsulados.
202
Sin embargo, los liposomas tienen ciertas limitaciones farmacuticas

ya que sufren inestabilidad qumica, hidrlisis y oxidacin, adems de
inestabilidad fsica, agregacin, separacin de fases, fusin y prdida o
fuga del contenido de frmacos.
Los liposomas pueden cambiar sus caractersticas fsicas de varias
maneras. Cuando los liposomas se almacenan en una dispersin acuosa,
el tamao de los glbulos cambia con el tiempo. Sin embargo, esto
puede minimizarse con una seleccin adecuada de los agentes que
inducen cargas elctricas, por ejemplo, los fosfolpidos cargados
negativamente se han usado para estabilizar los liposomas.
Bajo condiciones de suspensin acuosa, los liposomas pueden sufrir
separacin de fases debido a degradacin de la bicapa o a cambios
cclicos de temperatura. ste problema se reduce seleccionando los
componentes adecuados, usando substancias que den rigidez a la
bicapa.
La permeabilidad de los liposomas es dependiente de las
interacciones y propiedades fisicoqumicas de la bicapa y del frmaco
as como de la temperatura. Las interacciones sern funcin de la
lipofilicidad del frmaco, entre mas lipfilo, mayor interaccin. Los
frmacos hidroflicos se puede estabilizar suficientemente, mientras que
las posibilidades de estabilizacin disminuyen con los frmacos
parcialmente lipoflicos. Los frmacos fuertemente lipoflicos, con
elevada afinidad hacia la bicapa, permanecen en los liposomas por
largos periodos de tiempo.
Cuando los liposomas se liofilizan, su estabilidad aumenta. Sin
embargo, para mantener el tamao de partcula despus de la
rehidratacin, es necesario adicionar a la frmula agentes
crioproptectores. Substancias como los azucares se han usado como
crioprotectores.
Los mecanismos de la crioproteccin incluyen:
Formacin de estructuras amorfas, tipo vidrio, durante la fase

de congelacin, lo que puede evitar daos mecnicos
causados por los cristales de hielo.
Los azucares pueden interaccionar con los grupos polares de los

fosfolpidos, estabilizando la membrana, cuando sta pierde el
agua que originalmente le hidrataba (seudo-hidratacin), por
203
sublimacin.
En algunas ocasione se puede perder parte del contenido en frmaco

de los liposomas, despus del ciclo de deshidratacin - rehidratacin.
Esta prdida depende del frmaco encapsulado, de la muestra y de las
condiciones experimentales (33).
Los liposomas, al igual que las emulsiones, se consideran estables
cuando sus glbulos permanecen separados. Sistemas inestables se
caracterizan por una aglomeracin gradual. Cuando la carga de las
partculas es alta, estas se repelen y son estables a los choques. Si las
partculas tienden a una carga cero, el movimiento browniano les lleva a
chocar y a agregarse unas con otras. Se ha sugerido que potenciales
zeta de ms de 61 mV regularmente corresponden con una excelente
estabilidad, mientras que valores del potencial zeta entre 10 y 30 mV se
consideran asociados a cierta inestabilidad (34).
La estabilidad fsica de los liposomas podra incluir el efecto del
tamao de los liposomas, el pH de las suspensiones de los liposomas y
el potencial zeta. Estos parmetros seran funcin de la composicin o
frmula. Otras posibles variables seran la temperatura de
almacenamiento, el numero de capas de los liposomas y si estos son
liposomas que fueron deshidratados y luego rehidratados.
El tamao de los liposomas de 4 diferentes formulaciones se encontr
que aumenta despus de 6 meses de almacenamiento tanto a 4 C as
como a 25 C. En la figura IV. 22 se observa el efecto de la laminaridad
de los liposomas sobre su estabilidad, cuando se almacenaron durante 6
meses a 4 C y 25 C. Estos liposomas incluyen en su frmula Colesterol,
estearilamina y lecitina de huevo. Como se observa, los liposomas
unilaminares y multilaminares tienen el mismo comportamiento,
mientras que aquellos obtenidos por deshidratacin y luego
rehidratacin presentan tamaos inferiores, aunque tambin muestran
la misma tendencia a aumentar su tamao al paso del tiempo. En
trminos generales, los sistemas probados mostraron inestabilidad, la
cual fue mayor a 25 C, por lo que es de recomendarse que se
almacenen a bajas temperaturas para mejorar su estabilidad.
Los resultados de la medicin del potencial zeta mostraron resultados
semejantes a los obtenidos con la medicin del tamao de partcula,
aunque hubo algunas discrepancias. El potencial zeta, para medir la
estabilidad de liposomas, solo se recomienda en conjunto con la
medicin del tamao de las partculas.
Aunque se observaron algunos cambios en el pH de las suspensiones,
ninguno fue menor de 6.4, ni siquiera aun despus de 6 meses de
almacenamiento a 25 C.
De las 4 frmulas de este ejemplo, la constituida por colesterol-
lecitina de huevo-sulfato de colesterol (C-L-SC) fue la ms estable,
204
mostrando una estabilidad menor aquellas conformadas por colesterol-

lecitina de huevo-estearilamina (C-L-E), colesterol-lecitina de huevo-
fosfatidilsrina (C-L-F) y colesterol-ceramidas de cerebro de vaca-cido
palmtico-sulfato de colesterol (C-CV-AP-SC) (figura IV. 23).
18
16 Multilaminares-25 C
DIMETRO MEDIO (mcm)
14
12 Unilaminares-25 C
10
8 Des-, Re-hidratados-
25 C
6
4 Miltilaminares a 4 C
2
0
0 2 4 6 8
TIEMPO (meses)
Figura IV. 22. Efecto de la laminaridad sobre la estabilidad del

tamao de liposomas fabricados con colesterol, estearilamina y
lecitina de huevo, almacenados a 4 C y 25 C (34).
Aunque en la figura IV. 23 se observan de semejante estabilidad las

frmulas L-C-SC y L-C-F, la primera mostr mejor estabilidad para los
otros dos tipos de liposomas, los unilaminares y los des-, re-hidratados,
por eso se considera, en trminos generales, la ms estable de las
cuatro.
La estabilidad de los liposomas, con respecto a la fuga o prdida de su
contenido, es uno de los problemas ms importantes de estabilidad
fsica de estas estructuras farmacuticas. Regularmente la fuga del
contenido atrapado dentro de los liposomas se atribuye a la fluidez de
sus membranas. La estructura de bicapa de los liposomas es fluida y
mvil, de tal manera que los solutos atrapados pueden pasar a travs de
la membrana, especialmente bajo condiciones de un medio ambiente
biolgico. La fuga del contenido de los liposomas puede ser prevenida,
cuando as se desea, incorporando colesterol en la bicapa o por
polimerizacin de las molculas de fosfolpidos (35).
205
16
L-C-E
DIMETRO MEDIO (mcm)
12 L-C-SC
8 L-C-F
4 CV-C-AP-SC
0
0 1 2 3 4 5 6 7
TIEMPO (meses)
Figura IV. 23. Estabilidad de liposomas multilaminares de diferente

composicin, almacenados a 25 C (34).
Los efectos del colesterol incorporado en los liposomas incluyen:
Aumento de la microviscosidad de la bicapa

Reduccin de la permeabilidad de las molculas solubles en agua
Estabilizacin de la membrana frente a fluidos biolgicos
Por otro lado, se ha observado que la incorporacin de albmina del

suero provoca un aumento en la permeabilidad de las membranas de los
liposomas. Se ha encontrado que las molculas de albmina se
adsorben, recubriendo la superficie de los liposomas. Esta adsorcin se
atribuye a efectos hidrofbicos entre la albmina y los fosfolpidos. Se ha
sugerido que las molculas de albmina pueden penetrar y anclarse en
las bicapas de fosfolpidos. El principio de adsorcin de las molculas de
albmina se ha utilizado para evitar la prdida del material atrapado, a
travs del enlazamiento transversal de las molculas de albmina con
glutaraldehido, reduciendo la flexibilidad y movilidad de las bicapas.
El efecto del enlazamiento transversal sobre la fuga del material
atrapado en el interior de los liposomas se observa en la figura IV. 24,
206
para el caso particular del frmaco adriamicina. 65% de la adriamicina

atrapada en el liposoma se liber despus de 48 horas de incubacin,
cuando la albmina no se enlazo transversalmente, mientras que los
liposomas tratados para enlazarse transversalmente solo permitieron la
fuga de 5% de la adriamicina.
El mismo fenmeno se observ con otros frmacos atrapados, aunque
los resultados fueron menos drsticos. La fuga de metotrexato
disminuy de 13% a 6% y la de carboxifluoresceina de 60% a 39%.
Es claro que la albmina enlazada transversalmente disminuye la fuga
de los frmacos, estabilizndoles. Esto, cuando se compara con la fuga
obtenida de liposomas adicionados con albmina pero sin el tratamiento
con glutaraldehido o agente entrecruzante. En el caso del frmaco
mitoxantrona no se observ ninguna disminucin de la fuga del frmaco.
Esto se atribuye a que las molculas de mitoxantrona se adhieren
firmemente a las bicapas de fosfolpidos (35).
80
60
ADRIAMICINA (%)
Enlazada
transversalmente
40
Sin enlazamiento
transversal
20
0
0 20 40 60
TIEMPO (horas)
Figura IV. 24. Prdida o fuga de adriamicina desde liposomas

recubiertos con albmina, con y sin tratamiento con glutaraldehido,
despus diferentes tiempos de incubacin (35).
IV. 4. Estabilidad fsica de formas farmacuticas en solucin

Las formas farmacuticas en solucin y, en trminos generales, las
fluidas, tienen particular importancia para muchas aplicaciones, aunque
no son tan ampliamente usadas como las formas farmacuticas slidas
(36).
207
Las formas farmacuticas fluidas para uso oral tendran ventajas

como:
Posibilidad de dosificacin individual

Fciles de administrar
Tcnicamente simples en su preparacin
Distribucin ptima del principio activo en solucin
Biofarmacuticamente hablando ms convenientes
Por otro lado, tambin tienen ciertas desventajas. Para las soluciones
usadas oralmente y para uso externo, se les podran hacer las siguientes
observaciones:
Estado energtico no conveniente (mayor reactividad)

Fciles de contaminar con microorganismos
Con sabores desagradables, hay la necesidad de enmascararlos
Dosificacin inexacta si no se usan los medios adecuados
(goteros, pipetas, etc.)
Debido al empaque, almacenamiento y transporte ms caros
Con los productos en solucin, se deben tomar en cuenta, para su

estabilidad, todas las posibles interacciones. Las soluciones son sistemas
con desventaja sobre otros, en la relacin principio activo excipientes,
ya que casi el 100% del total de la formula lo ocupa el medio disolvente.
Fsicamente hablando, las soluciones son sistemas homogneos en los
cuales se distribuyen molecularmente varios componentes. La
reactividad de tales sistemas es especialmente elevada y dependiente
de las fuerzas de unin intermoleculares. Debido a su multiplicidad en
componentes y a la libre interaccin de los mismos, es difcil hacer
predicciones de las posibles interacciones, adems de ser ms fcil la
interaccin de las soluciones con los empaques, en comparacin de
otras formas de dosificacin (36).
Una solucin fsicamente estable mantiene su claridad, color y olor a
travs de su vida en el mercado.
Para medir cada una de estas caractersticas, se usan ensayos
organolpticos para fijar estndares, en cuanto a color y olor, indicando
aqu que la variacin de estas caractersticas es notada por un promedio
208
de los individuos y estableciendo as los lmites mnimo y mximo para

la estabilidad. Cuando es posible estos controles se relacionarn a
concentraciones de componentes que puedan ser determinados por un
mtodo fsico o qumico, como la determinacin de los colores por
espectroscopia o la tcnica de tristimulus ya antes mencionadas (ver
pginas 144-147).
Para medir la claridad de las soluciones, se observa al microscopio o
con una lupa y contra un fondo blanco para impurezas oscuras y contra
un fondo negro para identificar cristales muy brillantes.
Es comn el uso de colorantes en el diseo farmacutico de

soluciones con fines de mejorar:
la apariencia visual
Para enmascarar un color desagradable a la vista
Para identificacin del producto
Para asociar el color con el sabor del preparado
En un estudio publicado por Garret y Carper (37), se observ la

cintica de degradacin de un colorante en solucin, en una suspensin
de sulfas. En este caso, a pesar de considerarse el color como una
propiedad fsica del medicamento, su estabilidad se relaciona con la
degradacin qumica del mismo, utilizando de esta manera el mtodo
acelerado de estabilidad qumica para predecir la caracterstica fsica del
color.
En este estudio se utilizaron los colorantes FD & C amarillo No. 6 y el
rojo DC No. 33, los cuales presentan una banda de absorcin de 480-520
nm, dando el color rosa caracterstico del producto. La figura IV. 25 nos
muestra el perfil de degradacin de estos colorantes, medido a travs
de la absorcin a 500 nm, a diferentes temperaturas.
Con los datos de la cintica de prdida de absorbancia a diferentes
temperaturas se obtuvo una ecuacin de primer orden para la reaccin y
la correspondiente ecuacin de Arrhenius:
Log At = -k1 * t / 2.303 + log A0 (IV. 15)

Log k = -4.46 * 103 / T + 10.3 (IV. 16)
209
Donde A es la absorbancia y k es la constante de prdida de la

coloracin, medida a 500 nm, t es el tiempo y T es la temperatura
absoluta del sistema.
0.5
0.4
ABSORBANCIA
0.3 40 C
60 C
0.2
0.1
0 50 100 150 200 250 300 350 400
TIEMPO (horas)
Figura IV. 25. Perfil de prdida de absorbancia de la coloracin,

medida a 500 nm, de una suspensin de sulfas almacenada a
diferentes temperaturas (37).
El valor de la energa de activacin de la reaccin se calcul en 20.4

Kcal/mol, el cual es comparable con el de muchas reacciones trmicas
(ver pgina 53). Utilizando sta ecuacin para calcular los valores de las
constantes a bajas temperaturas y haciendo uso de la ecuacin de
primer orden para la degradacin del color, se puede calcular la posible
fecha de caducidad, debida a la estabilidad del color del preparado. Para
este fin, haciendo estudios con varias personas, para determinar en que
punto de la degradacin se percibe un cambio, se encontr que una
absorbancia de 0.225 era el lmite de aceptacin del color. Tomando este
valor como limite de aceptacin o rechazo, se estim que el producto
sera estable en su coloracin, en promedio, por 488 das a 25 C y 887
das a 20 C.
El uso de colorantes naturales, o semisintticos derivados de estos, en
lugar de los sintticos, ha sido una tendencia importante en los ltimos
20 aos. Aunque su empleo tiene inconvenientes, como otros productos
de origen natural, de la reproducibilidad de sus caractersticas y de su
inestabilidad.
210
Colorantes como la clorofila cprica, carmn y la curcumina se

evaluaron en su estabilidad en preparaciones de jarabes. Se examin su
permanencia con un colormetro de filtros para luz visible. Usando un
filtro rojo para medir el color verde de la clorofila, mientras que para
medir los jarabes rojos, con carmn y los amarillos, curcumina, se utiliz
un filtro azul. Los resultados de la estabilidad de los colorantes se
calcularon dando un valor de 100% de absorbancia al color inicial y la
parte proporcional a las lecturas posteriores (38).
El jarabe de neomicina al 0.75% (p/v) usado como referencia, mostr
los resultados observados en la figura IV. 26, cuando se almacen a 20
C durante 28 semanas.
100
80
Clorofila
COLORACIN (%)
60 cprica
Carmn
40
Curcumina
20
0
0 10 20 30
TIEMPO (sem anas)
Figura IV. 25. Perfil de permanencia de diferentes colorantes en

jarabes (65% de azcar) de neomicina al 0.75% (p/v), almacenados
a 20 C (38).
En trminos generales, se observa, a esta temperatura y bajo otras

diferentes condiciones, que el colorante de clorofila sufre una rpida
disminucin en su intensidad estabilizndose a una concentracin de
50% del valor inicial. sta reduccin es relativa a la aparicin de un
precipitado verde, presumiblemente un complejo formado con la
neomicina, despus de lo cual hay poco cambio en la coloracin. Por otro
lado el colorante de curcumina fue el que mostr mayor sensibilidad a la
luz, estabilizndose solo hasta despus de reducir su coloracin a
aproximadamente30% de su valor inicial. En este caso al igual que en el
anterior, se observa la presencia de un precipitado amarillo que se
piensa sea debido a la interaccin con el antibitico. El carmn se
211
muestra como el ms resistente a la degradacin, a cualquier condicin

de temperatura elevada y luz (38).
Se considera que es posible encontrar colorantes naturales
suficientemente estables, si se establecen las condiciones apropiadas
para ellos, sin olvidar que algunos tendrn interacciones especficas con
los principios activos, lo que les har incompatibles.
Los dos mecanismos fundamentales que contribuyen a la perdida de
utilidad de un producto en forma de solucin, debidas a inestabilidad
fsica, son quiz las alteraciones de solubilidad y fenmenos de
adsorcin y absorcin de los frmacos y excipientes a los empaques.
Particularmente para los productos parenterales, por razones de
seguridad, se ha dado gran importancia a la precipitacin de slidos,
teniendo como origen, entre otros, los amortiguadores usados como
adyuvantes en la formulacin de tales productos, lo cual ha llevado a
que cada vez se usen menos substancias para su preparacin. Aunque
quiz su estabilizacin no sea muy complicada si se conocen las
propiedades fisicoqumicas de los sistemas, por ejemplo, el uso de
agentes complejantes podra prevenir la precipitacin de sales como los
fosfatos, ampliamente usados en los productos farmacuticos.
Para el caso particular de la precipitacin de fosfatos en preparados
farmacuticos, se ha encontrado que la causa de la precipitacin es la
presencia de impurezas como iones de calcio y de aluminio, los cuales
forman fosfatos insolubles, fosfato de calcio y fosfato de aluminio. De tal
manera que para evitar esta precipitacin sera necesario eliminar o
secuestrar estos iones, conservndolos en solucin.
Cuando se usa EDTA como agente complejante, la cantidad de calcio
secuestrado es funcin lineal de la concentracin de EDTA adicionado,
hasta la total disolucin del calcio presente, independientemente del pH
de la solucin. Por esta razn el EDTA se recomienda como un agente
efectivo en la prevencin de la precipitacin de fosfato. Cuando se ha
usado cido ctrico, con el mismo fin, se encontr que ste evita la
precipitacin slo a pHs cidos. Por el contrario, el uso de fosfatos
condensados como el hexametafosfato, el tripolifosfato y el
trimetafosfato complejan fuertemente los iones de calcio solo a valores
de pH por arriba de 8, dando un punto de disolucin completa del calcio.
Por estas razones, el uso de cido ctrico y los fosfatos condensados
estara restringido a una seleccin adecuada del pH (39).
La precipitacin o cristalizacin es un problema de estabilidad fsica
de las soluciones, que se encuentra estrechamente ligado con la
solubilidad y a travs de sta con un nmero ms o menos grande de
factores, entre los cuales se cuentan, la temperatura, la polaridad del
disolvente y del soluto, as como el tipo y cantidad de otros materiales
que haya en el medio disolvente.
212
Cuando los frmacos originales no sean suficientemente solubles,

sera recomendable el buscar derivados que fueran ms solubles, por
ejemplo el fosfato de riboflavina y sodio para sustituir a la riboflavina.
Para evitar problemas de inestabilidad fsica, en trminos generales,
sera conveniente trabajar con soluciones cuya concentracin se
encuentre por lo menos entre 10 y 20% por debajo de su concentracin
de saturacin. Lo anterior puede ajustarse con sustancias solubilizantes
en caso de ser necesario.
Aunque la precipitacin o cristalizacin puede ocurrir tambin en
supositorios y tabletas, donde crean un gran riesgo es en las soluciones
de aplicacin intravenosa.
Un frmaco se mantiene en solucin mientras se encuentre a
concentraciones por debajo de su solubilidad o concentracin de
saturacin. Cuando existen condiciones metaestables, de soluciones
sobresaturadas, stas podran permanecer as por algn tiempo, pero
siempre alcanzaran un punto en el que precipitaran.
Los frmacos que son poco solubles podran mantenerse en solucin
usando cosolventes miscibles con el agua, por ejemplo etanol,
propilenglicol y polietilenglicol y sus mezclas. Cuando las soluciones
contienen alcohol benzlico, como conservador, ste podra tambin
mostrar propiedades de cosolvente. La solubilidad de los frmacos en
mezclas de agua cosolventes no son lineales en sus propiedades
disolventes, en proporcin al cosolvente, como se muestra para el caso
del diazepam, en la figura IV. 26.
6
SOLUBILIDAD (mg/ml)
0
0 25 50 75 100
SOLVENTE ORIGINAL (%)
213
Figura IV. 26. Solubilidad de diazepam en varias diluciones desde su

sistema de solventes original, con agua (40).
Esta circunstancia nos lleva a que, cuando por alguna razn se diluye
una solucin farmacutica, por ejemplo para administrarla en una
infusin, se puedan presentar precipitaciones. Si una solucin original de
diazepam, en agua con 40% de propilenglicol, 10% de etanol y 1.5% de
alcohol benzlico (5 mg/ml), se diluyera 1:10 con agua, la concentracin
final sera de 0.5 mg/ml, concentracin que es 10 veces mayor que la
solubilidad que se puede leer en la figura IV. 26, por lo que
necesariamente se observaran precipitaciones. La relacin entre la
solubilidad de un frmaco y la concentracin de cosolvente rara vez es
lineal, mostrndose lineal slo en determinados intervalos de
concentracin del cosolvente, cuando se grafica el logaritmo de la
solubilidad contra el porcentaje del cosolvente (40).
La solubilidad acuosa de frmacos que tienen grupos ionizables en su
molcula puede aumentarse si son usados en sus formas de sales. Sin
embargo, su solubilidad tendr una fuerte dependencia del pH de la
solucin, del su pKa o constante de disociacin y de la solubilidad
intrnseca de la forma menos soluble del frmaco. Cuando se ajusta la
solubilidad de un frmaco a un pH determinado, esta solubilidad puede
alterarse si la solucin se diluye. Por ejemplo, si el pH baja, la solubilidad
del frmaco podra ser menor que su concentracin actual, provocando
tambin precipitaciones.
Para un frmaco en forma de base dbil, como el amobarbital (HA) y
su base conjugada (A-), la cantidad total disuelta (HAT) estar dada por:
[HAT] = [HA] + [A-] (IV. 17)
La cantidad del frmaco en solucin ser producto de la cantidad

disuelta de [HA] mas la cantidad disuelta de [A -], teniendo como limite
las solubilidades de estas dos entidades. Si la solubilidad de [HA] es
menor, como es el caso de los frmacos cidos dbiles, su presencia
ser una limitante para la solubilidad total. Las cantidades relativas de
[HA] y de [A-] estarn dadas por:
Ka = [A-] [H+] / [HA] (IV. 18)
Donde Ka es la constante de disociacin para el cido dbil HA y es

igual al antilogaritmo de pKa. Para el amobarbital es de 6.3 * 10-8.
214
Para el caso del amobarbital sdico (40), la precipitacin del

amobarbital cido ocurrira cuando el pH de la solucin sea tal que [HA]s
(saturacin o solubilidad) sea igual a 0.77 mg/ml. El pH de precipitacin,
[H+]p, puede calcularse determinando la [H +] a la cual la precipitacin
ocurra.
[H+]p = Ka [HA]s / [A-] (IV. 19)
En este caso [A-] es igual al total de [HA] menos [HA]s. Para 200 mg
de amobarbital disueltos,
[H+]p = (6.3 * 10-8) (0.77) / (182.3-0.77) = 2.67 * 10-10
El cual corresponde a un pH de precipitacin de 9.57. Esto significa

que si el pH de la solucin de 200 mg de amobarbital es menor de ste
valor, iniciar la precipitacin del amobarbital cido. El valor del pH de
precipitacin se recorrer a valores menores, por ejemplo 8.23 para una
solucin de 10 mg, en funcin del desplazamiento en el equilibrio de las
formas ionizadas y no ionizadas.
Otra posibilidad de precipitaciones o de cambio en la solubilidad de
los frmacos es la formacin de complejos de menor solubilidad que la
de los compuestos originales. Tal es el caso de la mezcla de trimetoprim
con sulfametoxazol (Bactrim inyectable), el cual puede precipitar cuando
se diluye. La interaccin de estas dos sulfas forma un compuesto
molecular 1:1, de baja solubilidad en agua, el cual es responsable de las
precipitaciones. A largo plazo de almacenamiento, las soluciones
diluidas tambin podran presentar precipitaciones de monohidrato de
trimetoprim y hemidrato de sulfametoxazol, dependiendo del pH del
medio y del lquido usado para diluir (41).
La adsorcin de frmacos y excipientes a los materiales de empaque
es comn, debido a la interaccin fsica de ciertos grupos funcionales
dentro de las molculas, con lugares de una posible interaccin sobre la
superficie de los recipientes o envases. Por ejemplo, las protenas y los
pptidos son particularmente susceptibles de adsorberse sobre la
superficie del vidrio. La silanizacin del vidrio, la cual significa el bloqueo
de los grupos silanol libres, podra disminuir este fenmeno.
Los materiales polimricos usados para almacenar o administrar
soluciones orales o parenterales, debido a sus caractersticas
hidrofbicas pueden interaccionar con cierta facilidad con los
componentes de las soluciones.
215
El medio ms comn para evitar estas interacciones es la adicin, a

las frmulas, de agentes que compitan o alteren los sitios de interaccin
y las superficies de los envases.
Las interacciones de los medicamentos con los empaques se

clasifican como:
Fuga de los componentes del empaque hacia el medicamento
Adsorcin de frmacos o excipientes sobre la superficie del

empaque
Absorcin de los frmacos o excipientes dentro de una matriz
polimrica
Permeacin de gases a travs del empaque
Reaccin qumica entre el empaque y el medicamento
Alteraciones fsicas del empaque
Algunos de los factores que intervienen en estas interacciones son los

mecanismos, cintica y termodinmica de la adsorcin, la difusin por
conveccin, los efectos de la temperatura de transicin vtrea, los
espacios vacos, adems de la solubilidad y velocidad de difusin de los
componentes del medicamento en polmeros vtreos o en forma de ltex
(42)
Para las pruebas de estabilidad regularmente se llenan diferentes
envases con el producto farmacutico, incluyendo empaques de vidrio y
de materiales plsticos. Estos empaques se someten a diferentes
condiciones de almacenamiento y se toman muestras para analizarlas
en intervalos que van hasta un tiempo que oscila entre 3 meses y 5
aos, dependiendo de las condiciones de almacenamiento. Tambin
existen pruebas que se realizan a corto plazo y que pretenden una
correlacin con los mtodos a largo plazo, para tomar decisiones acerca
del empaque ms conveniente para cada producto.
Una de estas tcnicas a corto plazo es el tamizado
cronoamperomtrico, utilizado para medir y predecir las interacciones
de adsorcin de solutos sobre superficies. Este mtodo fue utilizado para
216
medir la interaccin de clorpromazina en solucin con diferentes

materiales de empaque. Estos estudios demostraron que la
clorpromazina interacta mas rpidamente con el cloruro de polivinilo
(PVC) y con el polietileno de alta densidad (HDPE), mientras que con los
materiales que interacta menos fue con el vidrio y el polipropileno (PP)
(42).
Los mejores resultados para medir la interaccin de la clorpromazina
con los materiales de empaque se obtuvieron con concentraciones de
clorpromazina de 28 M, sobre pequeos discos del material de
diferentes materiales de empaque (figura IV. 27). A esta concentracin,
el vidrio fue el nico material que no retuvo clorpromazina, lo cual es
consistente con otros estudios llevados a cabo sellando envases de
vidrio llenos con soluciones del frmaco. Con el polipropileno (PP) se
perdi aproximadamente 10% del frmaco durante el primer da de
prueba, estabilizndose posteriormente, mientras que con polietileno de
alta densidad (HDPE) se perdi hasta 50-60% en 14 das. El cloruro de
polivinilo (PVC) absorbi hasta el 80% de la clorpromazina.
100
CLORPROMAZINA REM. (%)
80
VIDRIO
60 PP
HDPE
40 PVC
20
0
0 5 10 15
TIEMPO (das)
Figura IV. 27. Isotermas de absorcin de clorpromazina sobre discos

de material de empaque, desde una solucin (28 M) (42).
Los resultados anteriores se pueden comparar con aquellos obtenidos

durante 8 semanas por el procedimiento estndar, con los envases
completos (figura IV. 28). Donde el cloruro de polivinilo sigue mostrando
los peores resultados, esto es, una gran interaccin con la
clorpromazina. Sin embargo, con el polietileno de alta densidad la
217
interaccin es mucho menor en los estudios con el empaque completo,

en comparacin con los resultados con los discos de material de
empaque. Aunque los estudios de cronoamperometra muestran
posibilidad para ver a corto plazo cuales empaques no seran
convenientes, aun falta mejorar su desarrollo, quedando siempre los
estudios estndar con los envases completos como la metodologa ms
confiable.
El PVC es un polmero originalmente rgido, que se hace flexible
adicionando plastificantes como el DOP (ftalato de dioctilo) y el DEHP
(ftalato del di-2-etilhexilo). Las caractersticas de gran capacidad de
absorcin de frmacos quiz podran atribuirse a la presencia de DEHP,
ya que ste es muy buen solvente de sustancia solubles en lpidos, como
los frmacos. Esto hara que la difusin a travs de l, de los frmacos y
substancias poco solubles en agua, fuera muy favorable, llevando stas
sustancia hasta el ncleo del PVC. Algunos autores (40) sugieren la
determinacin del coeficiente de reparto heptano-agua como un
indicador de la interaccin con el PVC. Esto es, substancias con gran
afinidad hacia el heptano tendrn gran afinidad por el PVC plastificado.
100
CLORPROMAZINA REM. (%)
80
VIDRIO
60 PP
HDPE
40 PVC
20
0
0 10 20 30 40 50 60
TIEMPO (das)
Figura IV. 28. Isotermas de absorcin de clorhidrato de

clorpromazina sobre empaques completos, desde una solucin (2.9
mM) (42).
Por otro lado, la extraccin de componentes de los plsticos, como el

DEHP, hacia el medicamento, tambin es un problema. Soluciones
farmacuticas conteniendo tensoactivos y proporciones importantes de
cosolventes pueden extraer los plastificantes del PVC y de otros
218
materiales como tuberas. ste tipo de extractos se ha observado que

podran generar un incremento en las partculas suspendidas en
soluciones en bolsas de infusin, bajo agitacin.
Como se ha observado anteriormente, otros plsticos como el
polietileno y el polipropileno absorben los frmacos mucho ms
lentamente que el PVC, probablemente debido a que casi no contienen
plastificantes. Por esta razn, los frmacos tienen mucho menos afinidad
o solubilidad en el ncleo de estos polmeros. Tambin se ha observado
que tuberas hechas o recubiertas con stos mismos materiales
absorben menos los frmacos que las tuberas hechas de PVC.
En algunas ocasiones se puede llegar a observar turbidez en algunas
soluciones, la cual podra deberse a la transformacin qumica de alguno
de los excipientes. Un ejemplo de ello es la degradacin del polisorbato
80 en presencia de cido malico. El polisorbato 80 (A) es un ster de un
cido graso (B). cido el cual es menos soluble que el polisorbato 80.
Suponiendo una reaccin de primer orden para su degradacin, sta se
describira con la ecuacin (5):
[B] = A0 [1-exp(-k t)] (IV. 21)
Cuando la concentracin de B exceda su solubilidad, a un tiempo

dado, entonces el producto empezara a enturbiarse gradualmente. El
tiempo necesario para ello se denomina tiempo de turbidez (t*) y se
relaciona con la solubilidad a travs de las siguientes ecuaciones:
S = A0 [1-exp(-k t*)] (IV. 22)

ln [1-(S/A0) ] = -k t (IV. 21)
Suponiendo que la concentracin inicial de la sustancia que se

descompone (A0), en este caso el polisorbato 80, sea mucho mayor que
la solubilidad del producto de degradacin (B), se puede demostrar que
el tiempo de turbidez (t*) tendr una relacin lineal con el inverso la
temperatura absoluta (T) del sistema, esto es una relacin tipo
Arrhenius, tal como se observa en la figura IV. 29 (5).
219
5
ln (t*)
1
2.9 3 3.1 3.2 3.3 3.4
1000/T
Figura IV. 29. Tiempos de turbidez de soluciones parenterales con

polisorbato 80 y cido malico, en funcin de la temperatura
absoluta (5).
Los estudios de estabilidad fsica presentan esquemas muy variados,

por lo que solamente se puede mencionar que cualquier estudio
especfico tiene sus propias caractersticas individuales, siendo en todos
los casos de gran ayuda el tener productos del mercado que hayan
demostrado ser fsicamente estables, para tomarlos como referencia. Es
indispensable adems tener los conocimientos generales de la fsica y
fisicoqumica de los sistemas en estudio, sin olvidar que las pruebas de
estabilidad acelerada no siempre se reflejan en los procesos en
condiciones normales y que los mtodos analticos deben ser
tcnicamente y estadsticamente los adecuados.
IV. 5. Bibliografa
41. Wahlgren, S. Definition-Haltbarkeit und klimata. Acta Pharm. Tech.,
21 (1), 3-12 (1975).
42. Ehlert, W. Die bedeutung und durchfhrung der
haltbarkeitskontrolle. APV-Informationdienst. 16 (1), 1-13 (1970).
43. Schepky, G. Stabilisierung von physicalischen eigenschaften fester
arzneiformen. En: Essig, D., Hofer, J., Schmidt, P. C. y Stumpf, H.
Stabilisierung technologie, wege zur haltbaren arzneiform.
220
44. Okutgen, E., Hogan, J. E. y Aulton, M. E. Effects of tablet core

dimensional instability on the generation of internal stresses within
film coats. Drug Dev. Ind. Pharm. 17 (14), 2005-2016 (1991).
45. Carstensen, J. T. Drug stability. Principles and practices. Segunda
edicin. De. Marcel Dekker, New York-USA, pp. 408-485 (1995).
46. Dehner, E. J. y Shiromani, P. K. Color stability: An evaluation of
three natural-source colorants as components in compressed tablets.
Drug. Dev. Ind. Pharm. 19 (14), 1659-1672 (1993).
47. Uzunarslan, K. y Akbuga, J. The effect of moisture on the physical
characteristics of ranitidine hydrochloride tablets prepared by
different binders and techniques. Drug Dev. Ind. Pharm., 17 (8), 1067-
1081 (1991).
48. Bos, C. E., Bolhuis, G. K., Lerk, C. F. de Boer, J. H. Duineveld, C. A.
A., Smilde, A. K y Doornbos, D. A. The use of factorial design to
evaluate the physical stability of tablets prepared by direct
compression I. A new approach based on the relative change in tablet
parameters. Eur. J. Pharm. Biopharm., 37 (4), 204-209 (1991).
49. Bos, C. E., Bolhuis, G. K., Lerk, C. F. de Boer, J. H. Duineveld, C. A.
A., Smilde, A. K y Doornbos, D. A. The use of factorial design to
evaluate the physical stability of tablets prepared by direct
compression II. Selection of excipients suitable for use under tropical
storage conditions.. Eur. J. Pharm. Biopharm., 37 (4), 210-215 (1991).
50. Follonier, M. y Doelker, E. Accelerated ageing test for predicting
the short term change of mechanical strength of compressed tablets.
Eur. J. Pharm. Biopharm. 39 (6), 267-268 (1993).
51. Baltezor, M. Physico-chemical criteria for stability and stability
forecast of solid dosage forms. En: Grimm, W. Stability testing of drug
products, Wissenschaftliche Verlagsgesellschaft, Stuttgart-D, pp. 57-
63 (1987).
52. Barret, D. y Fell, T. J. J. Pharm. Sci. 335 (1975).
53. Munday, D. L. y Fassihi, A. R. Changes in drug release rate: Effect
of stress storage conditions on film coated mini-tablets. Drug Dev.
Ind. Pharm. 17 (15(, 2135-2143 (1991).
54. Jorgensen, K., Christensen, F. N. y Jacobsen, L. Dissolution stability
of multiparticulate controlled release tablets. Int. J. Pharm. 153, 1-11
(1997).
55. Adeyeye, C. M., Rowley, J., Madu, D., Javadi, M. y Sabnis S. S.
Evaluation of crystallinity and drug release stability of directly
compressed theophylline hydrophilic matrix tablets stored under
varied moisture conditions. Int. J. Pharm. 116, 65-75 (1995).
221
56. Otsuka, M. y Kaneniwa, N. Effect of grinding on the crystallinity

and chemical stability in the solid state of cephalothin sodium. Int. J.
Pharm. 62, 65-73 (1990).
57. Adronis, V., Yoshioka, M. y Zografi, G. Effects of sorbed water on
the crystallization of indomethacin from the amorphous state. J.
Pharm. Sci. 86 (3), 346-351 (1997).
58. Yoshioka, M., Hancock, B. C. y Zografi, G. Inhibition of
indomethacin crystallization in poly (vinylpyrrolidone) coprecipitates.
J. Pharm. Sci. 84 (8), 983-986 (1995).
59. Matsuda, Y., Otsuka, M., Onoe, M. y Tatsumi, E. Amorphism and
physicochemical stability of spray dried frusemida. J. Pharm.
Pharmacol. 44, 627-633 (1991).
60. Tuncel, T. y Grek, F. Studies on formulation of loperamide
hydrochloride suspensions. Eur. J. Pharm. Biopharm. 38 (2) 82-88
(1992).
61. Delgado, A., Gallardo, V., Parera, A. y Gonzalez-Caballero, F. A
study of the electrokinetic and stability properties of nitrofurantoin
suspensions. II. Floculation and redispersion properties as compared
with theoretical interaction energy curves. J. Pharm. Sci., 79 (8), 709-
715 (1990).
62. Carstensen, J. T. y Rhodes, C. T. Cyclic temperature stress testing
of pharmaceuticals. Drug Dev. Ind. Pharm. 19 (3), 401-403 (1993).
63. Davis, S. S. Physicochemical criteria for semisolid dosage forms.
En: Grimm, W. Stability testing of drug products, Wissenschaftliche
64. Kaiho, F., Goto, Y. y Cato, Y. Chem. Pharm. Bull. 28, 2240 (1980), a
travs de 23.
65. Bury, M., Gerhards, J., Erni, W. y Stamm, A. Application of anew
method based on conductivity measurements to determine the
creaming stability of o/w emulsions. Int. J. Pharm. 124, 183-194
(1995).
66. Ferdous, A. J. Viscosity and stability studies of liquid paraffin
emulsions prepared by hydroxypropyl methylcellulose. Drug Dev. Ind.
Pharm. 19 (9), 1083-1088 (1993).
67. Lashmar, U. T., Richardson, J. P. y Erbod, A. Correlation of physical
parameters of an oil in water emulsion with manufacturing
procedures and stability. Int. J. Pharm. 25 (2), 315-325 (1995).
68. Vennat, B. Gross, D. Pouget, M. P., Pourrat, A. y Pourrat, H.
Comparison of the physical stability of astringent hydrogels based on
cellulose derivatives. Drug Dev. Ind. Pharm. 21 (5), 559-570 (1995).
222
69. Ferdous, A. J., Jalil, R., Islam, M. S., Begum, B. y Farooque, K. N.

Differential thermal analysis of polyethylene glycol and glycerol
monostearate suppository bases containing theophilline. Drug Dev.
Ind. Pharm. 19 (9), 1097-1102 (1993).
70. Webster, J. A., Dowse, R. y Walker, R. B. In vitro release of
amoxycillin from lipophilic suppositories. Drug Dev. Ind. Pharm. 24
(4), 395-399 (1998).
71. Hofer, J. Formulierung stabilisierter suppositorien. En: Essig, D.,
Hofer, J., Schmidt, P. C. y Stumpf, H. Stabilisierung technologie, wege
zur haltbaren arzneiform. Wissenschaftliche Verlagsgesellschat,
Stuttgart-D, pp. 106-129 (1986).
72. Betageri, G. V. Liposomal encapsulation and stability of
dideoxyinosine triphosphate. Drug Dev. Ind. Pharm. 19 (5), 531-539
(1993).
73. Crommelin, D. J. A., Grit, M. Talsma, H. y jan Suidam, N. Liposomes
as carriers for drugs and antigens: approaches to preserve their long
term stability. Drug Dev. Ind. Pharm. 20 (4), 547-556 (1994).
74. Du Plessis, J., Ramachandran, C., Weiner, N. y Mller, D. G. The
influence of lipid composition and lamellarity of liposomes on the
physical stability of liposomes upon storage. Drug Dev. Ind. Pharm.
127, 273-278 (1996).
75. Law, S. L., Lo, W. Y. y Lin, M. Increase of liposome stability by
incorporation of bovine serum albumin. Drug Dev. Ind. Pharm. 20 (8),
1411-1423 (1994).
76. Lahr, W. Formulierung von lsungsmittel systemen zur
stabilisierung von wirkstoffen. En: Essig, D., Hofer, J., Schmidt, P. C. y
Stumpf, H. Stabilisierung technologie, wege zur haltbaren arzneiform.
77. Garret, E. R. y Carper, F. C. Prediction of stability in pharmaceutical
preparations I. Color stability in a liquid multisulfa preparation. J. Am.
Pharm. Assoc. XLIV (8), 515-518 (1955).
78. Bader, S., Carinelli, L. y Stefani, C. Stabilita di coloranti naturali in
sciroppi farmaceutici. Il Farmaco. XXXV (11), 257-535 (1980).
79. Hasegawa, K., Hashi, K. y Okada, R. Physicochemical stability of
pharmaceutical phosphate buffer solutions. I. Complexation behavior
of Ca (II) with additives in phosphate buffer solutions. J. Parent. Sci.
Tech. 36 (3), 128133 (1982).
80. Stella, V. J. Chemical and physical bases determining the instability
and incompatibility of formulated injectable drugs. J. Parent. Sci. Tech.
40 (4), 142-163 (1986).
223
81. Giordano, F., Bettinetti, G., Cursano, R., Rillosi, M. y Gazzaniga, A. A

physicochemical approach to the investigation of the stability of
trimethoprim-sulfamethoxazole (co-trimoxazole) mixtures for
injectables. J. Pharm. Sci. 84 (10), 1254-1258 (1995).
82. Sarsfiel, B. A. y Maloy, J. T. Short-term chronoamperometric
screening of chlorpromazine-package interactions. J. Pharm. Sci. 87
(9), 1130-1137 (1998).
224
ESTABILIDAD MICROBIOLGICA DE
MEDICAMENTOS
V. 1. Consideraciones generales
213
V. 2. Conservadores 214
V. 3. Otros medios para la conservacin 225
V. 4. Conservacin microbiolgica de formas farmacuticas
229
V. 5. Estabilidad de los agentes conservadores 236
V. 6. Ensayos de estabilidad microbiolgica
245
V. 7. Bibliografa 248
225
226
ESTABILIDAD MICROBIOLGICA DE MEDICAMENTOS
V. 1. Consideraciones generales
Debido a la presencia constante de microorganismos (bacterias,
hongos y virus) los preparados farmacuticos pueden contaminarse a
travs del aire, de los frmacos y excipientes as como a travs de los
equipos que en su preparacin se utilicen.
Dependiendo de la composicin y del estado fsico de los preparados
farmacuticos, la contaminacin microbiana ser ms o menos probable.
As, encontramos que las formas farmacuticas lquidas y semislidas
son ms propensas al ataque microbiano, sobre todo por su contenido
en agua, as como por la presencia de excipientes que a menudo son
buenos medios de cultivo. Como ejemplo encontramos los jarabes,
emulsiones, cremas, geles, gotas orales, nasales y oftlmicas, as como
las formas farmacuticas de aplicacin parenteral.
Es ampliamente conocido que la contaminacin de los productos
farmacuticos con microorganismos no solo representa un peligro
potencial para la salud de los pacientes sino que tambin puede generar
alteraciones en la estabilidad fsica y qumica de los medicamentos.
Cambios provocados por contaminacin microbiolgica :
Turbidez de las soluciones

Malos olores
Posibilidad de una infeccin directa por microorganismos
patgenos
Elevada toxicidad por la generacin de los desechos
metablicos de los microorganismos
Prdida de actividad farmacolgica por la degradacin
microbiana de los frmacos
Inestabilidad de las formas farmacuticas por la degradacin
microbiana de los excipientes, etc.
227
Los microorganismos provocan varias alteraciones no deseadas de las

formas farmacuticas. Como ejemplos encontramos que la penicilina
puede ser inactivada con la penicilinaza generada por un
microorganismo, que los alcaloides pueden ser destruidos por hongos, el
clorato de potasio se ve reducido a cloruro por las bacterias, mientras
que la bruzina se ve oxidada hasta bruzoquinona.
De una manera similar, la estabilidad fsica de los medicamentos se
ver alterada por la ruptura enzimtica de agentes espesantes y
tensoactivos, por ejemplo los del tipo del polietilenglicol esterificado con
cidos grasos.
Los factores que influyen sobre la estabilidad as como sobre la pureza
microbiana son los siguientes:
Origen y tipo de las materias primas

Mtodos de fabricacin e higiene en la produccin
Las formas farmacuticas y su composicin
Las medidas tomadas para la conservacin
Aun en el caso en que la cuenta microbiana sea baja, por debajo de

los limites establecidos para ste fin, es necesario estabilizar sta
cuenta microbiana. Para este fin existen diversos mtodos, los cuales
pueden ser fsicos como el almacenamiento a bajas temperaturas o
qumicos como la adicin de agentes conservadores. Adems, existe la
posibilidad de crear condiciones adversas a la vida de los
microorganismos, alterando el pH, la actividad del agua y la adicin de
sustancias con cierta actividad antimicrobiana.
Las medidas de conservacin para productos no estriles tienen por
objeto una actividad microbiosttica, la inhibicin del crecimiento. Para
preparados estriles en recipientes multidosis, como gotas para los ojos
o inyectables en solucin, la conservacin tiene como objeto una
actividad microbicida.
V. 2. Conservadores
En todos los casos, en los cuales las medidas fsicas de conservacin
(eliminacin de agua, concentraciones altas de azcar, etc.) no son
posibles, se exige el uso de agentes conservadores.
En los ltimos 30-35 aos han sido pocos los conservadores
antimicrobianos que han sido introducidos en la prctica farmacutica.
Incluso, algunos conservadores que se haban usado por mucho tiempo
han restringido su uso, al menos para algn tipo de preparados, debido
228
a problemas de toxicidad. Por ejemplo, los compuestos

organomercuriales que se han restringido en productos parenterales y
oftlmicos. sta situacin ha llevado al uso de mas de un conservador,
esto es, al uso de una combinacin de conservadores, para la proteccin
de las diferentes formas farmacuticas del ataque microbiano. Las
combinaciones se han preferido para lograr un mayor espectro de
actividad antimicrobiana. El uso de combinaciones tambin permite
capitalizar las interacciones de potenciacin sinergista entre
conservadores ya que, de cualquier manera, existe la necesidad de
lograr niveles aceptables de proteccin, aun con un nmero limitado de
conservadores. Al mismo tiempo, minimizando el riesgo de reacciones
adversas, al evitar el uso de concentraciones excesiva e
innecesariamente elevadas.
La utilizacin de conservadores en preparados farmacuticos est
condicionada a que estos cumplan con ciertos requisitos.
Requisitos que deben cumplir los conservadores
Probada actividad microbiosttica o microbicida.

Un amplio espectro de su actividad antimicrobiana.
Compatibilidad fisiolgica.
Inocuidad farmacodinmica.
No provocar sensibilidad o alergias.
Compatibilidad fsica y qumica con la frmula.
Estable fsica y qumicamente
Debido a que la actividad de un conservador depende en gran parte

de las condiciones del medio en que se encuentra, no es posible hacer
recomendaciones especficas sobre las concentraciones a utilizar. Esto
explica en parte las grandes diferencias que se reportan en la literatura,
lo que hace ms laborioso el trabajo de desarrollo farmacutico (tabla V.
1).
Los agentes conservadores se ven afectados en su actividad por
muchos factores como son el pH, interacciones con los excipientes,
229
difusin hacia los recipientes, etc., por lo que para cada nueva
formulacin deber verificarse experimentalmente su efectividad. La
investigacin de los factores que influyen el desempeo de los
conservadores nos permite la utilizacin de concentraciones mnimas de
stos, sin comprometer la seguridad, la confiabilidad y la
reproducibilidad del efecto conservador.
Tabla V. 1. Ejemplos de la utilizacin de conservadores:
Sustancia Concentracin Solubilidad pH-Accin
Clorobutanol 0.3 0.6 % 0.77% a 20 C 2

5
Alcohol benclico 1.0 2.0 % 4.0% a 17 C 25
Fenol 0.25 0.5 % 6.7 a 16 C 29
Metilparabeno 0.1 0.2 % 0.22 a 20 C 26
Propilparabeno 0.02 0.05 % 0.033% a 20 C 26
cido srbico 0.05 0.2 % 0.2% a pH de 3.1 2 5
Clorhexidina 0.005 0.01 % 0.8% como base 5 8
C. Benzalconio 0.005 0.02 % Muy soluble 3-8
Otro tipo de conservadores son los aceites esenciales y los alcoholes,

los cuales han sido usados desde hace mucho tiempo en la teraputica.
Muchos de estos aceites tienen propiedades antibacterianas y
antifngicas. Por ejemplo, varios aceites esenciales se usaron,
depositados sobre slica (Aerosil 200), para conservar tabletas de
pancreatina. Las tabletas con 2% de alcohol cinmico o cido cinmico
mostraron una buena conservacin, observndose que otros derivados
de aceites esenciales no mostraron tan buena conservacin, debido a
que reaccionaron con los componentes de las tabletas. Para soluciones
orales se encontr que substancias como el citral solubilizado con
compuestos polioxietilados (Tweens), a concentraciones de
aproximadamente 0.05%, fueron suficientes para evitar el crecimiento
de microorganismos. Los alcoholes, principalmente el polietilenglicol, se
han usado satisfactoriamente para conservar emulsiones y
microemulsiones (1).
Una de las presentaciones de los aceites esenciales, las aguas
aromticas, por ejemplo la de canela, posee apreciable actividad contra
230
Ps. aeruginosa y satisface los requisitos de monografas farmacopicas.

La pronunciada accin antimicrobiana del agua de canela es debida al
cido cinmico y al cinamaldehido, componentes del aceite esencial de
la canela. Sin embargo, otras aguas aromticas han presentado efecto
antimicrobiano solo un da, despus del cual la cuenta microbiana se ha
elevado, por ejemplo la de menta, la de ans y la de clavo. ste
fenmeno se considera sea debido a la utilizacin de otros componentes
de las aguas aromticas como nutrientes. En la figura V. 1 se observa el
efecto de la presencia del aceite esencial de canela y del de ans sobre
la cuenta de Ps. aeruginosa, determinado por el mtodo de vaciado en
placa.
8
log (CUENTA VIABLE - CFU)
Agua simple
6
Agua de canela
4
Agua de ans
0
0 5 10 15 20 25 30
TIEMPO (das)
Figura V. 1. Cuenta de viables de Ps. aeruginosa en
diferentes medios, por el mtodo de placa (2).
Para ste mtodo se distribuy aspticamente 20 ml del agua

correspondiente en recipientes preesterilizados, los cuales fueron
inoculados con 0.2 ml de una suspensin de Ps. aeruginosa conteniendo
108 cfu/ml. Inmediatamente despus de la inoculacin y despus de
diferentes tiempos se tomaron muestras y se aplicaron, despus de las
diluciones necesarias, sobre placas. Las placas de agar fueron incubadas
a 37 C por 24 horas, determinado posteriormente el nmero de
colonias.
Como se puede observar, el agua de canela posee una fuerte
actividad contra Ps. aeruginosa, mientras que el efecto del agua de ans
no es muy pronunciado, similar a la del agua de clavo y a la de menta
(2).
231
Utilizando el mtodo de cilindros, se determin el efecto de diferentes

aceites esenciales sin diluir, sobre el halo o zona de inhibicin del
crecimiento de Ps. aeruginosa. Los resultados se observan en la tabla V.
2. Como se puede ver, el mayor halo de inhibicin o poder
antimicrobiano se observa con el aceite esencial de canela.
Para esta determinacin se prepararon placas de agar inoculadas con
Ps. aeruginosa, perforando orificios cilndricos de 10 mm de dimetro,
con un horadador de tapones (tamao 5), colocando en ellos los aceites
esenciales. Se permiti un tiempo de predifusin de 2 horas. Los
dimetros de las zonas de inhibicin se midieron despus de 18 horas de
incubacin a 37 C.
Tabla V. 2. Actividad antimicrobiana de diferentes aceites esenciales

sobre Ps. aeruginosa, por el mtodo de los cilindros sobre placa (2).
Aceite Dimetro medio de la

Esencial zona de inhibicin (mm)
Aceite de ans 35
Aceite de canela 49
Aceite de clavo 30
Aceite de eneldo 26
Aceite de limn 20
Aceite de menta 12
Diferentes componentes individuales de los aceites esenciales tienen

diferentes actividades antimicrobianas, adems de que esta actividad,
antes demostrada contra Ps. aeruginosa, es tambin diferente sobre
diferentes microorganismos, tal como se observa en la tabla V. 3.
Como se puede ver, Los gram positivos (St. aureus) son ms sensibles
que los gram negativos (E. coli y Ps. aeruginosa). La Ps. aeruginosa es
particularmente resistente y solo es sensible al cinamaldehido y al
ansalcohol, razn por la cual se escoge como microorganismo de
referencia en varios estudios de conservacin microbiolgica.
Los alcoholes como la glicerina y el polietilenglicol se han usado como
agentes antimicrobianos y como parte de sistemas cosolventes para la
preparacin de formas farmacuticas fluidas. La actividad
232
antimicrobiana, al igual que los conservadores ya antes mencionados, es

diferente contra diferentes microorganismos. Por ejemplo, tomando
como referencia el efecto de adicionar 10% de glicerina o de 10% de
propilenglicol, en una prueba de desafo, sobre una base de crema
hidroflica. En ste caso, se us un cultivo diluido en solucin salina para
provocar la contaminacin de las cremas, a travs de agitacin. Despus
de diferentes tiempos de incubacin se tomaron muestras de 10 g de la
crema, se diluyeron 1 a 10 con solucin salina, emulsionndose la
mezcla con agitacin y con la ayuda de perlas de vidrio dentro del
recipiente. De estas mezclas se tomaron muestras para inocular placas y
contar las colonias despus del periodo de incubacin. Los resultados
muestran que microorganismos como el St. aureus y la E. coli fueron
eliminados despus de un da de exposicin, tanto usando glicerina as
como usando propilenglicol. Otros microorganismos como Ps. aeruginosa
y Penicilum species mostraron un comportamiento irregular y una
eliminacin completa solo hasta despus de 4 semanas (1).
Tabla V. 3. Actividad antimicrobiana mostrada por diferentes

componentes individuales de aceites esenciales sobre diferentes
microorganismos, usando el mtodo de difusin en agar (1).
sustancia Concentracin E. coli Ps. aeruginosa St. aureus

(mg %) dimetro de zona de inhibicin (mm)
Citral 71.9 6.0 0.0 19.4

Geraniol 70.6 7.25 0.0 7.25
Citronelal 68.4 4.5 0.0 12.0
Citronelol 68.5 8.75 0.0 9.0
Linalool 69.0 7.0 0.0 7.0
Eugenol 85.0 4.5 2.0 7.0
Cinamaldehido 84.0 9.5 10.25 17.0
Ansalcohol 88.6 6.4 7.5 4.0
Amilactato 69.8 2.0 0.0 0.0
Acet. Benzilfenlico 88.6 6.4 7.5 4.0
Salicilato de Benzilo 94.4 0.0 0.0 0.0
Hidroxicitronelal 73.8 6.5 2.0 12.5
233
El ejemplo anterior nos muestra que los alcoholes como la glicerina y

en especial el propilenglicol son adecuados para conservar cremas
hidroflicas. Sin embargo, estos y otros alcoholes como el etanol pueden
usarse tambin en combinacin con otros conservadores para ejercer un
mayor efecto, ya sea por aumento de la solubilidad de los conservadores
pocos solubles, funcionando como cosolventes, o a travs de un efecto
conjunto, ambos como conservadores.
Los estudios acerca de los mecanismos de accin de los
conservadores sugieren que los parabenos actuan desorganizando las
membranas de los microbios. Se cree que esta actividad sea mas
efectiva en cuanto los parabenos sean ms solubles en agua, pero aun
conserven suficiente lipofilicidad para favorecer su penetracin a travs
de las membranas. En cuanto a los alcoholes, se sugiere que su
actividad antimicrobiana se encuentra asociada con el dao a las
membranas citoplsmicas (3).
Los steres de alquilo del cido p-hidroxibenzico, comnmente
conocidos como parabenos, constituyen un grupo de agentes
conservadores ampliamente usado en productos farmacuticos y
cosmticos. Aunque los estudios de las series homologas de los
parabenos nos muestran que su actividad aumenta conforme aumenta
el tamao de la cadena del ster, en la prctica esto no es muy aplicado,
ya que los compuestos ms activos, esto es, los de cadenas alqulicas
ms grandes disminuyen de tal manera su solubilidad que su
biodisponibilidad para los microbios es muy limitada.
Cuando los alcoholes como el etanol, el propilenglicol y la glicerina se
mezclan con los parabenos, el aumento en la concentracin de los
parabenos, en las soluciones cosolventes, produce un aumento de la
actividad antibacteriana contra St. aureus y Ps. aeruginosa. La extensin
de ste aumento en la actividad antibacteriana fue mayor conforme la
hidrofobicidad de los conservadores fue mayor, esto es, cuando la
solubilidad original de los conservadores en agua fue menor.
Aunque la adicin de cosolventes reduce el coeficiente de reparto de
los parabenos, provocando una menor penetracin hacia las clulas, la
adicin de los cosolventes potencia el dao causado a las membranas
celulares de los microorganismos. Estos resultados indican un aumento o
potenciacin de la actividad de los parabenos sobre las membranas de
los microbios, cuando se adicionan polialcoholes, como cosolventes, al
sistema. La efectividad de este tipo de sistemas es dependiente del
cosolvente utilizado y puede ser optimizado, a travs de la seleccin de
un sistema cosolvente apropiado, para causar el mayor deterioro en las
membranas de los microbios, buscando afectar en una mnima parte la
biodisponibilidad y consecuentemente la adsorcin de los parabenos a
las clulas bacterianas (3).
234
Un ejemplo del efecto conjunto de un conservador y un cosolvente, es

el efecto del propil p-hidroxibenzoato o propilparabeno (PHB) y del
propilenglicol (PG) sobre Ps. aeruginosa. Como se observa en la figura V.
2, la primera mezcla de PG y PHB tiene un efecto microbicida menor,
comparada contra el PHB solo, debido a la preponderancia del efecto
inhibidor de la penetracin de las membranas por el PHB, debido al
cambio en el coeficiente de reparto provocado por el PG. Sin embargo, la
presencia del PG permite aumentar la concentracin del PHB en
solucin, por su efecto cosolvente, de tal manera que las mezclas con
concentraciones de PHB de 0.06% y de 0.1% ya muestran un efecto
microbicida mas pronunciado que los componentes individuales
originales. El incremento en la concentracin de PHB solo es posible en
la presencia de un cosolvente.
LIMITE DE DETECCIN DE VIABLES
PG 3M
log (REDUCCIN EN CFU)
3
PHB 0.04%
2 PG 3M +
PHB 0.04
PG 3M +
1 PHB 0.06
PG 3M +
PHB 0.1%
0
0 50 100 150 200 250 300
TIEMPO (min)
Figura V. 2. Reduccin logartmica en la cuenta de viables

(CFU) de Ps. Aeruginosa en presencia de diferentes
concentraciones de propilenglicol (PG) y de propilparabeno
(propil p-hidroxibenzoato - PHB) (3).
Otras substancias que tambin podran afectar la solubilidad y el

efecto microbicida de los conservadores son los tensoactivos. Un
ejemplo es el caso del tween 80 en mezcla con conservadores como el
metilparabeno, el fenoxietanol y el clorocresol. Cuando se usaron
concentraciones de tween 80 por debajo de la concentracin micelar
crtica o CMC, las actividades antibacterianas de los conservadores
mencionados aumentaron conforme aument la concentracin de tween
235
80 o su equivalente, conforme disminuy la tensin superficial de las

soluciones o la tensin interfacial en una emulsin formada por las
soluciones acuosas y parafina lquida. Se considera que el aumento en la
actividad antimicrobiana de los conservadores sea debida a un aumento
en la adsorcin y en la captura de los conservadores por las celulas
bacterianas, de sta manera, matando ms rpidamente las celulas.
Cuando se usaron concentraciones de tween 80 por arriba de la CMC,
tambin se facilit la actividad antibacteriana de los conservadores
mencionados, aunque en una proporcin pequea, atribuyendose el
efecto, en este caso, a un aumento en la permeabilidad de las
membranas bacterianas, a los conservadores (4).
Utilizando la Ps. Aeruginosa como referencia, para medir el efecto del
tensoactivo, se observ que las diferentes concentraciones usadas del
Tween 80, por si solo, permitan el crecimiento bacteriano, por lo que se
consider que ste no tendra efecto inhibitorio, recayendo cualquier
actividad antimicrobiana exclusivamente en los conservadores.
Como se puede observar en la figura V. 3, la velocidad de muerte de
la Ps. aeruginosa aumenta linealmente conforme aumenta la
concentracin del conservador, en este caso del fenoxietanol,
aumentando tambin la velocidad de muerte de los microorganismos
conforme aumenta la concentracin del tensoactivo (Tween 80).
0.08
k (1/h)
Tween 80
0.06 -3
1* 10 % p/v
-4
1* 10-6 % p/v
* 10 % p/v
1
0.04
0.7 0.9 1.1 1.3 1.5
FENOXIETANOL (%-p/v)
Figura V. 3. Efecto de diferentes concentraciones de Tween

80 sobre la actividad del fenoxietanol contra la Ps.
aeruginosa (4).
236
La ecuacin que describe mejor la muerte de la Ps. aeruginosa es una

de primer orden:
K = 1/t log (B/b) (V. 1)
Donde k es la constante de velocidad de muerte del microorganismo,

B es el nmero inicial de microorganismos y b es el nmero de
microorganismos al tiempo t.
Una medida de la eficiencia de los conservadores es la determinacin
de su concentracin efectiva, Cw. Originalmente se denomina Cw, sin
embargo aqu se usa como, Cw para denotar que se refiere a una
concentracin diferente, debido al efecto del tensoactivo. , C w se define
como la concentracin del conservador con la cual se produce una
velocidad de muerte tal que reduzca la poblacin bacteriana en un
factor de 103 en 48 horas, tal como lo especifica la farmacopea britnica
(BP). Esto es, una velocidad de 0.0625 hora -1. La relacin entre Cw y la
tensin superficial (TS), para diferentes conservadores, se muestra en la
figura V. 4. Para el fenoxietanol la ecuacin es: C w = 0.0060 * TS +
0.6970.
METILPARABENO CLOROCRESOL
Cw = 0.0033 * TS +0.1258
Cw = 0.0011 * TS
0.4
+0.0700 0.16
CONC. EFECTIVA (% p/v)
0.35 0.14
0.3 0.12
0.25 0.1
40 60 80
TENSIN SUPERFICIAL (dinas/cm)
Figura V. 4. Relacin entre la concentracin efectiva de

conservadores y la tensin superficial de soluciones con
diferentes concentraciones de Tween 80 (4).
237
Como se puede observar en la figura V. 4, Cw disminuye linealmente

conforme disminuye la tensin superficial del medio. La pendiente de
estas lneas es diferente para diferentes conservadores, indicando que
las actividades antibacterianas de diferentes conservadores se afectan
en un grado diferente, cuando cambia la tensin superficial del medio.
Clorocresol, el cual fue el que requiri menores concentraciones para
lograr la reduccin microbiana de 103, fue el que menos aument su
actividad antibacteriana por la presencia del tensoactivo, mientras que
el fenoxietanol, el cual necesit las mayores concentraciones para lograr
la misma reduccin en la cuenta de viables, fue el que ms aument su
efecto bactericida por la presencia del tensoactivo.
En ste punto cabe hacer notar, que otros autores han reportado que
conservadores como el cloruro de benzalconio, el alcohol feniletlico y el
sorbato de potasio han visto reducida su capacidad antimicrobiana, en
diferentes proporciones, debido a la presencia de tensoactivos no
inicos, asignndole tambin esta accin al Tween 80. Existe la
posibilidad de que este efecto sea debido a un cambio en el coeficiente
de reparto, como el ya mencionado para los cosolventes, lo que
permitira el uso de mayores concentraciones del conservador, para
posiblemente recuperar y aumentar su efecto microbicida.
La presencia de ciclodextrinas en una formulacin conteniendo
conservadores, puede alterar la actividad de stos, al mismo tiempo que
su solubilidad. Por ejemplo, para conservadores muy solubles en agua
como el timerosal y el bronopol se encontr poco cambio en su actividad
antimicrobiana. Sin embargo, substancias ms lipoflicas como los
derivados fenlicos muestran una fuerte inactivacin cuando se usan en
combinacin con la hidroxipropil -ciclodextrina. La prdida de actividad
de estos conservadores se correlaciona con la fraccin de los mismos
que participa en la formacin de un complejo con la ciclodextrina. Estos
hallazgos nos permiten reconocer que para conservar soluciones de
ciclodextrinas solo podrn ser usados, sin interferencia, aquellos
conservadores muy solubles en agua. En su defecto, debern calcularse
nuevas y mayores concentraciones mnimas inhibitorias (MIC), para cada
formulacin (5).
La hidroxipropil -ciclodextrina por si misma no posee efectos de
inhibicin del crecimiento de microorganismos, cuando se usa a bajas
concentraciones, menores al 5%. Sin embargo, a concentraciones
mayores puede inhibir el crecimiento.
El efecto de las ciclodextrinas se ha relacionado con las constantes de
estabilidad de los complejos formados con los diferentes conservadores.
No en todos los casos, pero si en la mayora, el efecto de disminucin de
la actividad antimicrobiana de la ciclodextrina, sobre los conservadores
con constantes de estabilidad del complejo bajas, es despreciable, por
238
ejemplo Timerosal (K1:1 = 12.7 L/mol), acetato fenilmercrico (K1:1 = 53

L/mol) y Bronopol (K1:1 = 86.4 L/mol). La excepcin fue el diacetato de
clorhexidina (K1:1 = 399 L/mol), la cual si perdi un poco de su actividad.
Por otro lado, substancias que se enlazan fuertemente a la ciclodextrina,
como el propilparabeno (K1:1 =1916 L/mol), pierden de manera
importante su actividad, mostrando valores de concentracin mnima
inhibitoria (MIC) mucho mayores; de 2 a 4 veces mayores, dependiendo
del microorganismo de prueba. Otros conservadores que tambin
disminuyen su actividad antimicrobiana en presencia de las
ciclodextrinas son el fenoxietanol (K 1:1 =99.5L/mol), el alcohol benclico
(K1:1 = 215 L/mol) y el clorocresol (K1:1 = 652 L/mol).
Como en otros casos ya mencionados, el efecto de la ciclodextrina
sobre la actividad antimicrobiana de los conservadores tambin depende
del microorganismo de prueba. Por ejemplo, en el caso del fenoxietanol
y del alcohol benclico, el complejo formado es ms activo que los
conservadores sin complejar, contra St. aureus. Se cree que esta
diferencia se deba a que ste microorganismo es gram positivo, a
diferencia de los otros probados (Ps. aeruginosa, E. coli y C. albicans).
Esta suposicin se comprob con otro gram positivo, el Micrococus
luteus, contra el cual el fenoxietanol complejado fue 4 veces mas activo
que el fenoxietanol solo. Estos resultados hacen suponer una interaccin
entre la pared de los microorganismos gram positivos y la ciclodextrina.
V. 3. Otros medios para la conservacin

Otros polialcoholes usados tambin como conservadores, debido a su
actividad fsica (osmtica) mas que a una actividad qumica son el
azcar comn o sacarosa, el sorbitol y la glucosa. El azcar ejerce
inhibicin del crecimiento de microorganismos como el St. aureus, E. coli
y Ps. aeruginosa desde concentraciones que van desde el 30% al 50%,
dependiendo del microorganismo de que se trate. La glucosa y el
sorbitol inhiben el crecimiento en concentraciones desde 30% (1).
Indudablemente que una reduccin en la cuenta microbiana siempre
ser una ventaja para la conservacin o estabilizacin microbiolgica.
Conceptos importantes en la reduccin de la cuenta microbiana son el
de la esterilizacin con calor y en fro, adems del concepto del efecto
oligodinmico, como una posibilidad de conservacin de soluciones.
Cuando el uso de conservadores se considere indeseable, la
fabricacin bajo condiciones aspticas es siempre una alternativa. La
fabricacin asptica comprende regularmente una reduccin de la
cuenta microbiana con calor, ya sea durante alguna fase de fabricacin
o inmediatamente despus de envasar el producto terminado.
Tomando como referencia una emulsin formada por parafina lquida,
alcohol cetlico, cido esterico, Tween 60, Arlacel 60, propilenglicol,
239
glicerina y agua, se observ el efecto del calor sobre la cuenta de

viables de E. coli, St. aureus, Str. faecalis y B. subtilis. Los 3 primeros
microorganismos fueron seleccionados por ser comnmente
transmitidos por los humanos a los productos, cuando no se observan
las medidas de higiene necesarias. Su presencia es un indicio de
condiciones de operacin inapropiadas. El B. subtilis se encuentra
prcticamente en cualquier lugar, es un microorganismo que es capaz
de formar esporas y poco sensible a la temperatura, por esta razn se
escogi para el ensayo (6).
El solo cambio desde el medio de cultivo hacia la emulsin, provoc
que durante su almacenamiento a temperatura ambiente (23 C), la E.
coli y el St. aureus murieran, mientras que el Str. Faecalis y el B. subtilis
permanecieron prcticamente sin cambio.
Calentando la emulsin a una temperatura de pasteurizacin de 75
C, los microorganismos vegetativos murieron en un lapso menor a 10
minutos, mientras que el que es capaz de formar esporas mantuvo su
cuenta de viables constante.
En la figura V. 5 se puede observar el efecto del calentamiento con
vapor fluente a 100 C. Se puede ver que las formas vegetativas mueren
rpidamente (7 minutos). Sin embargo, el B. subtilis resisti hasta 20
minutos para disminuir su cuenta de viables hasta el mnimo detectable.
Elevando la temperatura hasta 121 C, todos los microorganismos
murieron en un lapso de 9 minutos.
240
Figura V. 5. Cintica de muerte de diferentes microorganismos
E. coli
6
Str. faecalis
St. aureus
log (CFU/m l)
4
B. subtilis
0
0 5 10 15 20
TIEMPO (m in)
suspendidos en una emulsin o/w, a 100 C, con vapor fluente (6).
Los resultados nos muestran que la crema mencionada puede ser

esterilizada en autoclave a 121 C para estabilizarla
microbiolgicamente. Sin embargo, para este caso, fue necesario
agregar a la frmula estabilizadores tixotrpicos de la estructura de la
emulsin (Avicel RC 591 y Laponite B, un silicato de sodio y magnesio),
los cuales inmovilizaron las gotas de la fase oleosa dispersa, impidiendo
su coalescencia, aun a pesar de que durante el calentamiento aumente
su fluidez la emulsin. En este caso no haba presente ningn principio
activo, por lo que cuando lo haya, ser necesario no solo verificar la
estabilidad fsica de la emulsin sino tambin la qumica, para poder
usar el calor como medio de estabilizacin microbiolgica.
Dentro de la esterilizacin con calor se incluye tambin el uso de calor
seco y no solo del calor hmedo, el cual se ha mencionado antes. El
calor seco acta mas lentamente y es menos intenso que el calor
hmedo, razn por la cual, para lograr resultados equivalentes, se deben
usar temperaturas mas elevadas y por un lapso de tiempo mayor, lo
cual no es posible en productos en su empaque de venta.
El trmino esterilizacin en fro es genrico para denominar todos
aquellos procedimientos de esterilizacin que no utilizan el calor. La
esterilizacin se entiende como la muerte de todos los microorganismos
presentes, en este caso, en un preparado farmacutico, incluyendo la
inactivacin irreversible de todos los virus. Esta definicin no incluye la
filtracin, ya que los microorganismos y los virus solo son separados del
producto, aunque la USP lo acepte como tal. La aceptacin de la
241
filtracin como mtodo de esterilizacin se fundamenta en el uso de

metodologas ms eficientes, como la filtracin con doble membrana o la
filtracin a travs de membranas con potenciales de superficie positivos
(potencial zeta), en las cuales la filtracin es una suma de efectos
elctricos de adsorcin y de tamizado.
La esterilizacin con radiacin, en la mayora de los casos con 60Co, es
funcin de la cantidad de microorganismos presentes en el producto y
de la sensibilidad de los mismos a la radiacin. Por esta razn, se debe
determinar experimentalmente la cantidad de microorganismos y su
sensibilidad, para saber si una dosis estndar de 2.5 Mrd (=25 kGy) es
suficiente o no. As, por ejemplo, contando como resultado de la
radiacin o esterilizacin con una reduccin de 8, como potencia de 10,
se puede calcular que para Str. faecalis (valor D = 0.28 Mrd) se requiere
de una dosis de 2.24 Mrd o 22.4 kGy. Este clculo resulta de considerar
la exigencia de la esterilizacin de una seguridad de 1:10 6 o posibilidad
de encontrar una unidad contaminada entre un milln de ellas,
partiendo de una contaminacin de 10 2 viables/ml, lo cual nos da un
factor de 8, el cual multiplicado por el valor de D para Str. faecalis (0.28
Mrd) nos da el resultado de 2.24 Mrd o 22.4 kGy. Este procedimiento se
recomienda solo cuando se ha demostrado su inocuidad para cada
producto en particular (7).
La esterilizacin con gases es un procedimiento que se encuentra
restringido ya que substancias como el xido de etileno y el
formaldehido se consideran cancergenos.
Para productos farmacuticos, el xido de etileno se podra usar si se
garantiza que el producto quedar libre de oxido de etileno y con
limitadas cantidades de sus productos de degradacin, adems de
exigirse procedimientos de operacin de extrema cautela, que protejan
a los operadores y al medio ambiente.
En la bsqueda de lograr una pureza microbiolgica en preparados
farmacuticos como las gotas oftlmicas, sin el riesgo de las reacciones
alrgicas o sensibilizantes de los conservadores, se ha hecho uso del
efecto oligodinmico de los metales pesados, entendindose esto como
la actividad antimicrobiana de la plata en concentraciones en la
magnitud de ppb (8).
En concentraciones en el intervalo de ppb, la plata no es txica,
sensibililizante ni irritante. El peligro de una argirosis, por deposito de
plata sobre la cornea, se considera imposible, dadas las concentraciones
de plata que se podran acumular. Por ejemplo, en el caso de una
solucin oftlmica (10 ml) se usaran cantidades de plata de tan solo 1-5
g.
La accin de inhibir el crecimiento microbiano con sales de cobre y de
plata fue demostrada experimentalmente desde hace 110 aos por
242
Miller. El trmino oligodinmico fue introducido por Ngeli para describir

la accin de pequesimas cantidades de alguna sustancia sobre materia
viviente. El efecto de la plata se vio favorecido por su inocuidad,
comparado contra el efecto oligodinmico de otros metales pesados
como el cobre, el cadmio y el mercurio. El efecto de la plata, en
concentraciones de 10-7-10-5 mol/l en solucin, se considera debido a su
afinidad por las nucleoprotenas, generando un enriquecimiento de la
plata en el interior de las clulas y bloqueando el DNA, a travs de una
intercalacin de la plata en la doblehlice, lo cual genera una dislocacin
de la estructura helicoidal. Concentraciones de plata mayores a 10 -5
actan igual que el mercurio y otros metales txicos, formando
mercaptanos y daando las enzimas. El examen de los complejos de
plata-protena muestra que incrementan su afinidad con el aumento en
el valor del pH y que la adsorcin, para la formacin del complejo, se ve
favorecida para el xido de plata, en comparacin con el nitrato de
plata, a una misma fuerza inica (8).
Para usar la plata como conservador se debe tener en cuenta:
El contenido microbiano (cantidad y tipo de microorganismos)

La inhibicin de disociacin de las sales de plata
La posibilidad de liberar iones de plata desde sales poco
solubles
La concentracin de plata en solucin
Cuando el nmero de microorganismos en la solucin es bajo, se

considera que su eliminacin se logra en 1-2 horas, mientras que
cuando la carga de microbios es alta, se requerirn algunos das. La
plata no ataca esporas y es poco fungicida, aunque destruye a la C.
albicans y a las bacterias.
La disociacin de las sales de plata es inhibida por la presencia de
hidrocoloides y agentes complejantes, paredes de envases, por aniones
como los halogenuros, los fosfatos y los sulfitos, estos ltimos hacen
desaparecer totalmente la actividad de la plata. Tambin inhiben su
actividad iones de hidrogeno, magnesio y calcio, posiblemente por
competencia con la plata, por los sitios de adsorcin en las paredes
celulares. El pH optimo para la formacin del complejo Ag-DNA es a pH
de 8, desviaciones de ste pH disminuyen la velocidad de muerte de los
microbios.
La concentracin de iones de plata libres estara por debajo del nivel
de actividad oligodinmica cuando se encuentre en soluciones de cloruro
de sodio isotnicas (entre 10-2-10-3 mol de cloruro/l). Si la plata aun
243
conservara actividad bajo tales condiciones, sta se debera a que la

unin plata-cloro se rompiera a favor de la formacin del complejo con
nucletidos y protenas.
Cuando la concentracin de plata se encuentra por debajo de la
necesaria, podra observarse una disminucin de la cuenta microbiana a
corto plazo, la cual sera falsa, pues el complejo con las protenas es
reversible, por lo cual el proceso de conservacin tambin lo sera. La
concentracin de iones de plata efectiva para eliminar ciertos microbios
es variable, dependiendo del microbio que se trate. Para lograr una
reduccin de 3-5 unidades logartmicas en la cuenta microbiana en 1-3
das, se necesita una concentracin de Ag+ de 50 g/l, estimados desde
nitrato de plata, para la E. coli. Para Ps. aeruginosa se requieren 200
g/l, para St. aureus 100 g/l, para B. subtilis 800 g/l y para C. albicans
200 g/l. En estos ensayos la presencia de NaNO3, como agente de
isotonicidad, no afect la actividad antimicrobiana de la plata.
La utilizacin del nitrato de plata o de un aro plateado entre el gotero y
el frasco de gotas oftlmicas ha permitido la conservacin de gotas
oftlmicas homeopticas. Igualmente se ha conservado un gel de
contacto, para pruebas de ultrasonido, con un preparado de plata
coloidal (Argentochemie Alemania). La conservacin y actividad
antimicrobiana de la plata, en el gel de contacto, fueron favorecidas por
un pH desde neutro hasta ligeramente alcalino de los geles de
poliacrilato utilizados en la frmula. Estos ejemplos muestran la
posibilidad del uso de la plata metlica o de sus sales, como una
alternativa para la reduccin de la cuenta microbiana que deber seguir
siendo investigada
V. 4. Conservacin microbiolgica de formas farmacuticas

En lo que respecta a la exigencia de pureza microbiolgica, los
productos farmacuticos se clasifican en aquellos productos que deben
ser estriles y los que deben poseer una cantidad limitada de
microorganismos. En la categora de estriles se encuentran los
productos parenterales, los oftlmicos y aquellos a los cuales se les exija
particularmente la esterilidad, lo cual significa, casi siempre, que deben
ser esterilizados dentro del envase final o comercial.
En el caso de los productos con un contenido limitado en
microorganismos, stos no deben sobrepasar un valor mximo de 10 2/ml
en su cuenta en bacterias aerobias, para productos tpicos o de 10 3-
104/ml en productos orales. Adems, los productos tpicos deben
demostrar ausencia de patgenos y de otros microorganismos como Ps.
aeruginosa, S. aureus y loas Enterobacteriaceae, cuya presencia sera un
indicio de falta de higiene en la preparacin de stos productos
farmacuticos.
244
La seleccin de los conservadores que podran usarse para estabilizar

una forma farmacutica sera el resultado de responder a las preguntas:
Cual es el pH del preparado?

Que microorganismo podra propagarse a ese pH?
Que conservadores son activos y estables a ese pH?
Para el caso particular de las suspensiones anticidas, se considera

que son un problema diferente para su conservacin, debido a su pH.
Este tipo de preparados presenta frecuentemente cuentas microbianas
altas en cuando menos una de cada tres unidades de empaque (9).
Las suspensiones anticidas tienen como alternativas para su
estabilizacin microbiolgica, el uso de conservadores, la pasteurizacin
y la esterilizacin en fro. La pasteurizacin y la esterilizacin en fro son
procesos que tienen su principal utilidad en productos empacados en
dosis nicas, ya que son procesos de reduccin de la cuenta microbiana
que no protegen los productos de la recontaminacin, cuando los
productos se exponen al medio ambiente, despus de abrir el empaque
original. Algunas consideraciones a tomar en cuenta para estos procesos
seran que la aplicacin de calor para la pasteurizacin podra reducir la
eficiencia del preparado para neutralizar cidos. Por otro lado, el uso de
hipoclorito o el de xido de cloro, para la esterilizacin en fro, es difcil
ya estos compuestos son muy inestables, por lo que su actividad no
perdura. Adems, su elevada reactivada podra provocar la prdida de
substancias como los aromatizantes o saborizantes.
Utilizando una formulacin de gel de hidrxido de aluminio (4 g de
Al2O3) con sorbitol al 70% (27 g), Tylose C 30 (1.7 g), Aerosil 200 (1.0 g)
y agua cbp 100 g, se examinaron las posibilidades de conservacin
microbiolgica, contra diferentes microorganismos como Ps. aeruginosa,
Ps. fluoreszens y Ps. stutzeri, la cual fue seleccionada por haberse
encontrado en otras suspensiones anticidas (9).
La utilizacin de parabenos, individualmente o en combinacin fue
insuficiente, particularmente contra la Ps. fluoreszens, cuando se usaron
concentraciones de hasta 0.150 %. El uso de cido srbico en
concentraciones mayores al 0.2% mostr una mayor eficiencia en la
conservacin de la suspensin. Sin embargo, el uso de mezclas de cido
srbico (0.1%) con metilparabeno (0.075%) fue ms eficiente, ya que
concentraciones que individualmente se mostraron como insuficientes,
en mezcla mostraron un buen efecto de conservacin. Finalmente, en
este estudio, la clorhexidina tambin funcion adecuadamente como
agente conservador de la suspensin. La manifiesta efectividad de la
clorhexidina se debe, entre otras cosas, a que su pH ptimo de actividad
245
antimicrobiana es entre 6 y 8, el cual es el pH en el que regularmente se

encuentran las suspensiones anticidas. Concentraciones de
clorhexidina de 0.0025% y mayores fueron suficientes contra Ps.
fluoreszens (figura V. 6).
8
log (CUENTA MICROBIANA)
6 CONTROL
5 '0.0025 %
4
'0.005 %
3
1 LMITE DE DETECCIN
0
0 10 20 30 40 50
TIEMPO (das)
Figura V. 6. Accin de la clorhexidina contra la Ps.

fluoreszens depositada en una suspensin anticida (9).
Las emulsiones, en particular aquellas aceite/agua (O/W), pueden

contaminarse con microorganismos con cierta facilidad. Esto es debido
al uso de excipientes que podran ser usados por los microorganismos
como sustrato o alimento, los cuales, asociados al medio acuoso de las
emulsiones, facilitan el crecimiento microbiano.
Las posibilidades de contaminacin sern variables, dependiendo de
los componentes de cada formulacin. As mismo, lo son tambin los
riesgos y las medidas para evitar la contaminacin microbiolgica.
En sistemas complejos como las emulsiones, solo la forma libre de los
conservadores, presente en la fase acuosa, esta disponible para la
accin antimicrobiana. sta, a su vez, depende de la proporcin
aceite/agua, del coeficiente de reparto del conservador y de la
interaccin del conservador con los tensoactivos, como en prrafos
anteriores se ha explicado (pginas 215-217). Tomando en consideracin
lo anterior, se ha usado, para calcular la concentracin de conservador
libre en la fase acuosa de una emulsin, la ecuacin:
246
Cw = CT ( 1+ / R+P) (V. 2)
Donde CT es la concentracin total del conservador en la emulsin,

es la proporcin aceite/agua, R es la proporcin del total del
conservador, en la fase acuosa y P es el coeficiente de reparto
aceite/agua del conservador.
Aunque esta ecuacin permite calcular la concentracin del
conservador en la fase acuosa, del total agregado a la emulsin, no
toma en consideracin el hecho que la actividad antimocrobiana del
conservador es diferente en la presencia de tensoactivos, comparada
con aquella en agua pura.
Una ecuacin general que toma en cuenta los efectos del reparto de
los conservadores en las fases de aceite y agua, la interaccin de los
conservadores con los tensoactivos as como los efectos del cambio en
la permeabilidad de las paredes celulares de las bacterias, debida a la
presencia de los tensoactivos, para calcular las cantidades necesarias de
conservador en una emulsin es:
CE = KP KS CT (1+ / R+P) (V. 3)
En donde KS es el factor de reduccin de la concentracin necesaria

de conservador, debido al incremento en la actividad antibacteriana por
el aumento en la permeabilidad de las membranas, debida a
concentraciones de tensoactivo por encima de la CMC, por ejemplo
Tween 80, en la fase acuosa. K P es una constante que representa el
efecto de la tensin interfacial sobre la actividad antibacteriana de los
conservadores, esto es, el efecto de los tensoactivos en concentraciones
por debajo de la CMC.
Los valores numricos de estas constantes varan con el tipo de
conservador y son influenciados tambin por el tensoactivo y el
microorganismo que sea tratado.
De acuerdo a la farmacopea britnica de 1988, se considera que una
preparacin tpica, como las cremas, se encuentra adecuadamente
conservada contra la degradacin microbiolgica, s el numero de
bacterias por mililitro o gramo, se reduce por un factor logartmico de 3
o lo que es lo mismo, se reduce a una proporcin mil veces menor,
despus de 48 horas del desafo y no se recupera ninguna bacteria
despus de 7 das. Para que esto se cumpla se requiere de una
velocidad de muerte de los microorganismos de 0.0625 hora -1, que
corresponde con una concentracin del conservador libre en agua de Cw.
247
Tomando como referencia una emulsin de parafina lquida con agua y

un microorganismo como la Ps. aeruginosa (4), se calcularon los valores
de Ks, a partir de curvas como las de la figura V. 4, desde la cual, para el
caso de la emulsin parafina lquida/agua, se obtienen ecuaciones que
representan la relacin entre Cw y la tensin interfacial entre las fases
aceite y agua de la emulsin. Suponiendo que la concentracin de
tensoactivos en una crema est por encima de la CMC, entonces la
tensin interfacial entre la parafina y el agua ser mnima. Para el caso
del Tween 80 sta es de 8.20 mNm-1. Para el caso de la tensin
superficial mnima del agua, esta es de 47.37 mNm -1, de donde se puede
calcular Cw. Sustituyendo estos valores en la ecuacin correspondiente
se obtendr el valor de la concentracin suficiente de tensoactivo (C s)
para cumplir con el requisito de una velocidad de muerte de 0.0625
hora-1. Para el caso del metilparabeno las ecuaciones son:
Cs = 0.0025 * TI + 0.2665 Cs = 0.00225 * 8.20 + 0.26665 = 0.287

Cw = 0.0025 * TS + 0.2665 Cw = 0.00225 * 47.37 + 0.26665 =
0.385
De donde se puede calcular Ks como:
Ks = Cs/Cw = 0.725 (V. 4)
El factor Kp se calcula de manera similar a partir de las curvas de

velocidad de muerte de los microorganismos a diferentes
concentraciones de conservador. Para el caso del metilparabeno, K p =
0.976.
Sustituyendo estos valores en la ecuacin V. 3 se obtiene una
concentracin de conservador apropiada para la emulsin C E = 0.280 %
(p/v).
La conservacin de soluciones, particularmente aquellas usadas en las
mucosas nasales, las cuales se consideran de uso tpico, requiere de
ciertos criterios en la seleccin de un sistema conservador, ya que la
membrana mucosa puede irritarse o sensibilizarse con cierta facilidad.
Por esta razn, estos productos requieren de un sistema de conservacin
que haya sido optimizado.
De acuerdo a la USP-1995, para que un producto como las gotas
nasales sea considerado conservado efectivamente, se requiere que la
concentracin de bacterias viables se reduzca mil veces, dentro de los
14 das siguientes a la inoculacin, en una prueba de desafo y que la
248
concentracin de levaduras y hongos permanezca o disminuya de su

valor inicial, dentro de los 14 das despus de la inoculacin.
Siguiendo el criterio mencionado se examin la eficiencia de la
conservacin de 3 productos del mercado ingles, en forma de gotas
nasales. Estos productos fueron el Flixonase (Allen & Hanbury), el cual
usa como conservador una mezcla de cloruro de benzalconio 0.02% y el
alcohol feniletlico 0.25%; el Rhinocort aqua (Astra), usando como
conservadores sorbato de potasio 0.12% y edetato de sodio 0.01% y el
Rynocrom (Fisons), conservado con cloruro de benzalconio 0.01%
acompaado de edetato de sodio. Los microorganismos usados para el
desafo fueron St. aureus, Ps. aeruginosa, E. coli, A. niger y C. albicans
(10).
Los resultados nos muestran que el Flixonase no permiti ningn
sobreviviente bacteriano ni de C. albicans despus de 48 horas, ni de A.
niger despus de 14 das. Los otros 2 productos presentaron los
resultados mostrados en las figuras V. 7 y V. 8, para el caso del lote
designado como B de ambos productos (10).
5
log (REDUCCIN DE VIABLES/ml)
3 Rhinocort-
S. aureus
USP Rhinocort-
2 E. coli
Rynocrom-
S. aureus
1
EP Rynocrom-
E. coli
0
0 2 4 6 8
TIEMPO (das)
Figura V. 7. Inactivacin de S. aureus y E. coli, expresada

como reduccin logartmica de viables/ml, en un lote de
Rhinocort y otro de Rynocrom (10).
Como se puede observar, los 3 productos pasan la prueba, de acuerdo

al criterio de la USP-1995. La USP exige adems que los niveles
249
microbianos permanezcan o disminuyan del nivel alcanzado a los 14

das, lo cual tambin fue satisfecho por los 3 productos.
Sin embargo, los criterios de la farmacopea europea (EP), criterio A,
establece una reduccin de la cuenta de bacterias viables de 2
decimales o unidades logartmicas de base 10, dentro de 48 horas y de
3 decimales despus de 7 das. Combinado con una reduccin de 2
decimales en la cuenta de las levaduras y de los hongos, dentro de un
lapso de 14 das. Adems de no mostrar ningn crecimiento durante el
tiempo restante de la prueba, que dura 28 das.
Rhinocort-
log (REDUCCIN EN VIABLES/ml)
4 A. niger
EP Rhinocort-
3 C. albicans
2 Rynocrom-
A. niger
1 Rynocrom-
C. albicans
0
0 10 20 30
TIEMPO (das)
Figura V. 8. Inactivacin de A. niger y C. albicans, expresada

como reduccin logartmica de la cuenta de viables/ml, en
un lote de Rhinocort y otro de Rynocrom (10).
Los criterios de la EP fueron satisfechos solo por el Flixonase, mientras

que el Rhinocort y el Rynocrom mostraron deficiencias en la velocidad
de muerte de los microorganismos dentro de 48 horas y en la reduccin
de levaduras y hongos, dentro de lapso de 14 das.
Estos resultados nos muestran como productos que pasaran los
criterios de la USP, no lo haran bajo los criterios de EP, lo cual tendra
que discutirse. Por otro lado, todos los productos contienen dos
conservadores, muy probablemente porque consideraron que cada uno
por separado tena limitaciones en su espectro antimicrobiano, lo cual
hizo necesaria la combinacin. De los conservadores utilizados, el
edetato de sodio es muy dbilmente antimicrobiano, cuando se usa solo,
sin embargo, se usa como potenciador del efecto del otro conservador,
250
el cloruro de benzalconio en este caso, aunque lo mismo hace con varios

otros. La combinacin cloruro de benzalconio con EDTA se dice que se
usa para conservar 17 de las 58 presentaciones de gotas nasales
vendidas en Inglaterra.
Los problemas de conservacin mostrados por el Rhinocort y el
Rynocrom, de acuerdo al criterio de la EP, se consideran debidos a
diferencias en el desempeo de los sistemas conservadores, aunque se
empleen en concentraciones dentro del intervalo normal de su uso,
cuando se utilizan en diferentes formulaciones.
V.5. Estabilidad de los agentes conservadores

La estabilidad de una forma farmacutica depende de varios
parmetros, entre ellos, de la estabilidad microbiolgica. La estabilidad
microbiolgica puede verse mermada o disminuida a travs de
diferentes circunstancias como:
Descomposicin qumica del conservador

Descomposicin microbiana del agente conservador
Adsorcin del conservador sobre algn slido suspendido
Sorcin (adsorcin y absorcin) del conservador sobre
materiales de empaque
La inestabilidad qumica es siempre una posibilidad de todos los

sistemas conservadores. Los steres del cido p-hidroxibenzico,
conocidos como parabenos, sufren de hidrlisis con una cintica de
primer orden. Disminuyendo la velocidad con que se degradan los
diferentes derivados con el aumento del tamao de la cadena lateral.
Esto es, entre mas larga sea la cadena lateral, tendrn una menor
velocidad de degradacin. La clorhexidina es otro conservador que
tambin sufre hidrlisis alcalina.
Los parabenos se han usado ampliamente en alimentos
medicamentos y productos cosmticos, desde su introduccin en la
dcada de 1930. La inocuidad y amplio espectro de accin de productos
como el metilparabeno son su mejor recomendacin. Sin embargo, la
unin del metilparabeno a otros materiales ha hecho necesario un mejor
trabajo de formulacin. El metilparabeno es estable al aire. Sus
soluciones acuosas reguladas a pH de 3 y 6 no muestran
descomposicin, aun despus de someterlas a calentamiento durante 2
horas, a 100 C. Aunque a valores de pH mayores se hidroliza en la
porcin ster y el cido p-hidroxibenzico, los cuales no tienen accin
antimicrobiana (11).
251
Como se observa en la figura V. 9, el logaritmo de la concentracin

contra el tiempo muestra una relacin lineal, lo cual identifica la
reaccin como de primer orden. La energa de activacin se calcul en
24 Kcal/mol.
Se ha observado que el pH es uno de los factores que ms afecta la
estabilidad qumica de conservadores como los parabenos. Por ejemplo,
el metilparabeno y el propilparabeno, en una solucin para uso oral,
mostraron una amplia degradacin a un valor de pH de 7.5 (12).
pH = 6
2
log (METILPARABENO-mg/100 ml)
pH = 7
1.9
1.8 pH = 8
1.7 pH = 9
1.6
1.5
0 25 50 75 100
TIEMPO (horas)
Figura V. 9. Hidrlisis de seudo orden uno de metilparabeno en

solucin acuosa, a 85 C (11).
La estabilidad de los parabenos, despus de almacenarse durante 3

meses a 40 C, mostr un perfil de degradacin cuadrtico contra los
valores del pH de las soluciones. Tanto el metil- como el propilparabeno
mostraron una mayor estabilidad a un valor del pH de 6.3, lo cual es
consistente con la degradacin de un ster, catalizada por bases.
La eficacia de los conservadores de la solucin oral se prob de
acuerdo a la USP, encontrndose que la accin conservadora fue
efectiva contra bacterias y levaduras. Por esta razn, la prueba se centr
posteriormente en el efecto conservador ejercido sobre el hongo
Aspergilus niger. Se observ que la efectividad del conservador aumenta
con un aumento en el pH desde 4.5 hasta 7.5. Desgraciadamente, la
inestabilidad del sistema conservador es tambin mayor a ese pH. Por
esta razn, si se desea usar este sistema conservador, se tendr que
252
hacer un ajuste del pH entre 5 y 7, como compromiso entre la eficiencia

del conservador y la disminucin, en lo posible, de su degradacin.
Adems del pH, otros factores que influyeron la actividad
antimicrobiana de los conservadores en la solucin oral fueron la
presencia de glicerina y la del EDTA, aunque su influencia fue menor a la
ejercida por el pH. La efectividad del sistema conservador mejor con el
aumento en la concentracin de EDTA de 0.1 mg/ml a 0.250 mg/ml. Este
efecto se consider debido a la potenciacin del sistema conservador,
generada a partir de una quelacin de iones de calcio y magnesio, los
cuales seran responsables de la estabilidad de la pared celular de
organismos gram-negativos.
La glicerina, originalmente adicionada como humectante, para
prevenir problemas de pegado de las tapas a los frascos, produjo una
ligera disminucin de la efectividad de los conservadores, cuando
aumento su concentracin en la solucin de 4% a 12%, lo cual podra
atribuirse a un cambio en el coeficiente de reparto de los conservadores,
al actuar la glicerina tambin como cosolvente.
El timerosal o thiomersal es un agente conservador antimicrobiano
usado en diferentes sistemas farmacuticos. Es la sal de sodio del
complejo formado por el cido tiosaliclico y el ion etilmercrico. Este
conservador es inestable a la luz, en soluciones acuosas, dando como
producto de degradacin el cido ditiosaliclico, el cido tiosaliclico y el
ion etilmercrico. Existen reportes de que el timerosal degradado posee
tanto o ms actividad antimicrobiana que el producto original, por lo que
se supone que sea el ion etilmercrico el que realmente posea la
actividad antimicrobiana. Cuando el ion etilmercrico se degrada es
cuando realmente se pierde la actividad antimicrobiana.
El efecto del pH y de la presencia de EDTA sobre la estabilidad del
timerosal en solucin acuosa, en ampolletas de vidrio, nos muestra que
cuando se esteriliz la solucin, por 15 minutos a 121 C, en ausencia de
luz, se pierden cantidades de timerosal entre el 10% y el 80%. Sin
embargo, las prdidas en etilmercurio son siempre menores al 10%. La
presencia de EDTA protegi casi totalmente la degradacin del
etilmercurio y la del timerosal la redujo a tan solo 5% (13).
Cuando las soluciones de timerosal se almacenaron en frascos de
polietileno de alta densidad (HDPE), en presencia y ausencia de cloruro
de sodio (0.9%), se observaron prdidas muy importantes de timerosal y
de etilmercurio, siendo mayores estas perdidas conforme se aumento el
pH de las soluciones (figura V. 10).
La qumica de las soluciones de timerosal es muy compleja y cualquier
cambio en la formulacin afecta de manera muy importante su
estabilidad. Por lo antes dicho se podr entender que ms importante
que la estabilidad del timerosal, es la estabilidad del etilmercurio, el cual
253
es probablemente el que acta como agente antimiccrobiano; lo cual

explicara porque las soluciones de timerosal degradadas mantienen su
actividad antimicrobiana.
El cido srbico en solucin acuosa se degrada por autooxidacin, por
radicales libres. Su degradacin es dependiente del pH y disminuye
conforme aumenta el valor del pH, siendo despreciable la degradacin
despus de un valor de pH de 5. Aunque, cabe mencionar, que existen
reportes de que los productos de degradacin del cido srbico sean
tanto o ms activos contra E. coli, que el mismo cido srbico (9).
Agua
ETILMERCURIO (%)
90
Agua+NaCl-
0.9%
NaCl-pH 7.5
NaCl-pH 6.5
75
NaCl-pH 5.5
60
0 10 20 30
TIEMPO (das)
Figura V. 10. Degradacin de etilmercurio total disponible en

soluciones acuosas de timerosal en diferentes medios y pH
(amortiguador de fosfatos), almacenadas en frascos de HDPE a 20
C (13).
La degradacin de los conservadores por los microorganismos incluye

los steres del cido p-hidroxibenzico, los cuales se degradan por la
accin de cepas muy virulentas de Pseudomonas. La Pseudomona
aeruginosa forma fenol desde el etilparabeno, la Pseudomona cepacia
toma como fuente de carbono al metil- y propilparabeno (9).
En las soluciones farmacuticas los conservadores deben mantenerse
dentro de ciertas concentraciones para ejercer efectivamente su accin.
Debido al mecanismo de accin de los conservadores, se puede dar el
caso de una disminucin de su concentracin en las soluciones, ya que
ejercen su accin adsorbindose sobre las membranas microbianas.
254
La figura V. 11 muestra el efecto de la cuenta microbiana, en una

solucin oftlmica, sobre la concentracin de ciertos conservadores,
despus de 3 horas de tiempo de contacto, tomando como referencia al
B. subtilis. Este mismo fenmeno se observa tambin cuando se usan
otros microorganismos como Ps. aeruginosa, el St. aureus y la E. coli. En
este caso la concentracin del conservador en solucin se determin con
el mtodo de difusin en agar, midiendo la zona de inhibicin. Este
mtodo se considera con un error de 10% en la determinacin de la
concentracin del conservador (14).
Mientras que las curvas para diferentes microorganismos, similares a
las de la figura V. 11, se diferencian poco unas de otras, cuando se trata
de diferentes conservadores. Como se puede ver, dichas curvas para B.
subtilis son diferentes para cada conservador.
100
Cloruro de
benzalconio
75
CONSERVADOR (%)
Acetato de
clorhexidina
50
Borato de
fenilmercurio
25
Timerosal
0
6.5 7.5 8.5 9.5
log (CUENTA MICROBIANA/ml)
Figura V. 11. Concentracin de diferentes conservadores con

relacin a la cuenta microbiana original de soluciones,
despus de 3 horas de contacto (14).
Una manera de comparar el efecto de elevadas cuentas microbianas

del B. subtilis sobre los diferentes conservadores es el comparar la
reduccin del conservador, para una cuenta del bacilo determinada, por
ejemplo 109/ml. El cloruro de benzalconio baja hasta un 30% de su
concentracin original, mientras que la clorhexidina lo hace hasta el 8%,
el borato de fenilmercurio hasta el 15% y el timerosal hasta el 51%. Otra
manera sera el determinar que cuenta microbiana se requiere para
255
disminuir la concentracin del conservador hasta un valor especfico, por

ejemplo hasta el 50% de su concentracin original (figura V.11).
Cabe aclarar que cuando se usaron concentraciones bajas de
microorganismos no se observ ninguna prdida apreciable de los
conservadores en solucin y que lo mostrado en la figura V. 11 solo
ocurre a concentraciones relativamente altas de microorganismos, las
cuales son improbables en un preparado farmacutico, fabricado bajo
condiciones de las prcticas correctas de manufactura (GMPs).
La circunstancia de que B. subtilis inactive una mayor proporcin de
los conservadores, se considera debida a que en este microorganismo
las clulas individuales son ms grandes, que las de los otros
microorganismos probados.
La disminucin de la concentracin de un conservador en solucin
puede darse tambin a travs de su adsorcin sobre algn material que
se encuentre en suspensin. Este problema se encontrara en
suspensiones de un principio activo o en las cuales algn excipiente se
encuentre en suspensin, provocando una disminucin en la
concentracin disponible del conservador, para ejercer su efecto
antimicrobiano.
Este fenmeno ser diferente para diferente combinacin de
conservador y material suspendido. Por ejemplo, el trisilicato de
magnesio adsorbe de manera importante el metilparabeno, mientras
que el caoln prcticamente no lo adsorbe. La capacidad de adsorcin de
los conservadores, sobre los materiales suspendidos, es funcin tambin
del pH de la solucin donde se encuentren. Por ejemplo, las partculas de
hidrxido de aluminio en suspensin acuosa adsorben una mayor
proporcin del conservador, cido srbico, a valores de pH cercanos al
valor del pK del cido srbico (4.8), tal como se observa en la figura V.
12 (9).
256
Figura V. 12. Adsorcin del conservador, cido srbico, sobre

100
C. SRBICO EN SOLUCIN (%) 80
60
40
20
0
3 6 9
pH
partculas de hidrxido de aluminio en suspensin, en funcin del pH

(9).
Un ejemplo de la capacidad de ciertos excipientes para adsorber y

retirar de las soluciones a los conservadores, reduciendo as su
concentracin en solucin y con esto su actividad antimicrobiana, lo es
la adsorcin sobre la celulosa microcristalina, como se observa en la
figura V. 13 (15). Se establece un equilibrio entre la cantidad disuelta y
la adsorbida sobre la celulosa, llegando a un limite de adsorcin sobre la
superficie de la celulosa. La cantidad en solucin sera la nica que
estara disponible para ejercer alguna actividad antimicrobiana.
257
mg ADSORBIDOS/g DE CELULOSA
16
Cloruro de
cetilpiridinium
12
Clorhexidina
8
Metilparabeno
4
0
0 0.05 0.1 0.15
CONCENTRACIN EN SOLUCIN (%)
Figura V. 13. Adsorcin de diferentes conservadores sobre celulosa

microcristalina en suspensin (15).
La adsorcin y absorcin de conservadores sobre los materiales de

empaque podra ser tambin una fuente de inestabilidad de un
preparado farmacutico. Mientras que en recipientes de vidrio
prcticamente no se presenta este fenmeno, la situacin con los
materiales plsticos es mas o menos compleja.
Bajo el trmino sorcin (adsorcin + absorcin) se entiende la
interaccin de una sustancia con otra, a travs de una unin mas o
menos firme. Para el caso de la interaccin de los conservadores con los
materiales de empaque, el proceso es selectivo ya que cada material
sorbente solo esta capacitado para adsorber y absorber determinadas
substancias. La sorcin ocurre en dos fases, en la primera, en este caso
el conservador, se adsorbe sobre la superficie del material de empaque,
para posteriormente disolverse en l, penetrando el conservador en las
capas interiores del material de envase. Los factores que influyen este
proceso incluyen la polaridad, la cristalinidad, el hinchamiento y
actividad superficial del material plstico as como el tamao molecular
del conservador, el tiempo, la temperatura y la concentracin y el pH de
la solucin. Los conservadores mas conocidos como los parabenos, el
cloruro de benzalconio, el clorocresol se adsorben y absorben sobre
materiales plsticos como el PVC, el polietileno, el polipropileno y la
poliamida (16).
Un ejemplo de la interaccin de los conservadores con los materiales
de empaque es el metilparabeno y el alcohol benclico en solucin,
cuando fueron almacenados en viales con tapn de hule de diferentes
258
composiciones. Cuando los viales se almacenaron invertidos, para

asegurar un ntimo contacto entre los tapones y las soluciones, se
observ que los tapones de butilo, a pesar de que liberaban parte de sus
componentes hacia las soluciones, no mostraron tendencias de
absorcin de los conservadores. Por otro lado, los viales con tapones de
hule natural mostraron disminuciones en la concentracin de los
conservadores al paso del tiempo (17).
102
Alcohol benclico-
Hule natural
98
CONSERVADOR (%)
Metilparabeno-
Hule natural
94
Alcohol benclico-
Butilo
90
Metilparabeno-
Butilo
86
0 5 10 15
TIEMPO (semanas)
Figura V. 14. Estabilidad de soluciones de metilparabeno (0.2%-pH

4.0) y alcohol benclico (1.0%-pH 4-0), almacenadas en viales
invertidos, a 60 C (17).
Una alternativa utilizada para tratar de evitar la absorcin de los

conservadores por los tapones de hule, en los viales, ha sido el
tratamiento de los tapones con un laqueado de resinas epxicas. La
eficiencia de tales recubrimientos se prob con soluciones acuosas de
alcohol feniletlico al 0.5% y de su derivado clorado, el alcohol p-cloro--
feniletlico, reguladas a pH de 4.0. Sin embargo, los resultados muestran
que el recubrimiento epxico no ofrece ninguna proteccin contra la
absorcin de los conservadores, por diferentes hules como el natural, el
de neopreno y el de butilo. Los viales con tapones de hule de neopreno,
almacenados invertidos, mostraron las mayores prdidas de
conservador (8% a 25 C, despus de 84 das), mientras que los viales
con tapones de hule de butilo mostraron la menor prdida de
conservador (18).
259
El alcohol benclico en contacto con tapones de hule de butilo, de la

figura V. 14, el cual pareciera no tener ninguna interaccin; cuando
se realiz otro estudio, aparentemente con una formulacin diferente
del hule de butilo, disminuye su concentracin en solucin, desde
una solucin acuosa al 1.2%, cuando se almacena durante tiempos
mas prolongados. Esta sorcin del conservador es relativa a la
temperatura, a mayor temperatura el conservador se absorbe ms
rpido (19). La figura V. 15 nos muestra una prdida exponencial del
alcohol benclico, cuya regresin no pasa por el cero.
Aparentemente, esto se debe a una fase de adsorcin muy rpida,
seguida de una absorcin ms lenta. Bajo stas condiciones, la
concentracin mnima del conservador, necesaria para proteger al
producto, debe calcularse experimentalmente. Cuando sea necesario
deber aumentarse la concentracin del conservador, para
compensar la prdida durante el almacenamiento.
100
80 30 C
ALCOHOL BENCLICO (%)
60
50 C
40
0 10 20 30 40
TIEMPO (meses)
Figura V. 15. Prdida de alcohol benclico desde una solucin

acuosa, por absorcin a tapones de hule de butilo, a
diferentes temperaturas (19).
260
VI
MTODOS DE ANLISIS PARA ESTABILIDAD
VI. 1. Consideraciones generales
252
VI. 2. Los mtodos analticos
256
VI. 2. 1. Espectroscopa de absorcin
256
VI. 2. 2. Cromatografa de lquidos de alta resolucin
262
VI. 2. 3. Cromatografa de fluidos supercrticos
270
VI. 2. 4. Electroforesis capilar de zona
272
VI. 2. 5. Cromatografa de gases
273
VI. 2. 6. Cromatografa de capa delgada
276
261
VI. 2. 7. Mtodos de anlisis biolgicos
281
VI. 3. Validez de los mtodos analticos
282
VI. 4. Bibliografa
286
262
VI
MTODOS DE ANLISIS PARA ESTABILIDAD
VI. 1. Consideraciones generales

Los mtodos analticos para el ensayo de medicamentos y frmacos
son aquellos de aplicacin general en la qumica orgnica e inorgnica,
con las adaptaciones convenientes para separar los frmacos de los
dems excipientes que conforman el medicamento y as poder hacer la
determinacin correspondiente.
En la prctica analtica de los medicamentos, podemos distinguir dos
tipos de caractersticas de los mtodos a utilizar y que los separan en
mtodos de rutina y mtodos para estudios de estabilidad.
Los mtodos de rutina o de control, son aquellos cuyos atributos
principales son la exactitud y la precisin con que pueden medir la
cantidad de un frmaco incorporado en una forma farmacutica. Aunque
en algunas ocasiones los mtodos de control pueden utilizarse para
estabilidad, es conveniente recordar que un mtodo para estabilidad es
un mtodo que ofrece una determinacin selectiva del frmaco en
presencia de sus productos de degradacin o de reaccin y que dada la
llamada "contaminacin" a propsito del frmaco con excipientes, un
mtodo que sirva para una formulacin determinada, no podr utilizarse
sin comprobacin, para otra frmula de componentes diferentes, a pesar
de tener el mismo principio activo.
Queda claro que ser una condicin obligada de los mtodos de
estabilidad, el que puedan detectar los cambios que ocurran en la
molcula del frmaco o principio activo.
Para el desarrollo de un mtodo especfico para determinar contenidos
en un estudio de estabilidad se pueden considerar fundamentalmente 4
posibilidades (1):
Medicin de una propiedad de la molcula total del frmaco, que

cambie cuando un grupo funcional sufra una reaccin
(infrarrojo).
Cuando el mtodo anterior no es posible o adecuado, se puede
seleccionar la determinacin de un grupo funcional en la
molcula, siendo la condicin que la prdida de este grupo
funcional indique o resulte de la degradacin de la porcin ms
lbil del frmaco.
263
Cuando no hay posibilidades tcnicas de diferenciar entre el

frmaco intacto y sus productos de degradacin, se har
necesario establecer un procedimiento de separacin.
Con pocas excepciones, los mtodos de anlisis son una
combinacin de separacin y medicin. La separacin puede ser
tan simple como la disolucin de un frmaco desde una tableta,
para separarlo de los excipientes a travs de una filtracin, o
tan compleja como un sistema cromatogrfico o electrofortico.
Con una complejidad intermedia hay varios procedimientos
entre los cuales se puede contar la extraccin con solventes en
un embudo de separacin.
Finalmente, hay ocasiones en que la determinacin de un grupo
funcional simple, se puede correlacionar con un mtodo
analtico especfico y de esta manera se pueden utilizar los
mtodos clsicos de las farmacopeas en estudios de estabilidad.
Siempre y cuando esta correlacin se haya comprobado
experimentalmente.
La degradacin de la Filipina (antimictico), cuando se analiza

espectrofotometricamente, se correlaciona de una manera adecuada
con la determinacin microbiolgica.
Como en el ltimo caso mencionado de correlacin entre un mtodo
espectrofotomtrico y el microbiolgico, Cafeto (2) menciona la
posibilidad de tomar siempre como referencia un mtodo microbiolgico
para correlacionar con uno fisicoqumico, para asegurar la actividad
biolgica caracterstica de la molcula completa. Sin embargo, en
algunos casos el resultado de una prueba biolgica no puede ser
estimado tan exactamente como para decidir si una prueba
fisicoqumica es aceptable o no. Un caso especial sera la determinacin
de antibiticos, prueba la cual es a menudo suficientemente precisa y
conveniente. En otros casos, por ejemplo en la determinacin de
tetraciclina, podra no ser tan adecuado el ensayo microbiolgico,
observndose que muestras degradadas dan resultados ms altos de lo
que debieran, a causa de que los productos de degradacin, si bien con
mucho menor efecto antibitico, tenan en cambio una capacidad de
difusin en el medio de cultivo mucho ms grande.
Otra consideracin que se debe hacer al realizar estudios de
estabilidad es, l que se va a analizar, lo que hemos mencionado se
refiere a la determinacin de los frmacos intactos, pero tambin es
posible seguir el transcurso de una reaccin midiendo los productos de
la misma.
En estudios con frmulas nuevas, es difcil diferenciar o discriminar si
hay degradacin o no, cuando la degradacin es incipiente, pudiendo
264
caer esta pequea degradacin dentro de las variaciones propias del

mtodo analtico. Una medida precisa de los productos de degradacin,
requiere de su caracterizacin. Este trabajo de caracterizacin se vera
compensado por la facilidad con que se podra determinar una
degradacin tan pequea como el 1%. En pocas ocasiones esta
caracterizacin de los productos de degradacin no slo podra ser
conveniente sino necesaria; como en el caso de la tetraciclina, la cual da
productos de degradacin nefrotxicos (4-epianhidrotetraciclina).
De cualquier manera se puede observar, cuando hablamos de
magnitudes, que el buscar una degradacin del 1% al 2%, lo cual podra
ser de inters en un frmaco, sera mucho ms fcil al buscar los
productos de reaccin, dado que significara un cambio de 0 a una
cantidad X, que correspondera a todo el producto de degradacin, o sea
a un 100% contra un 0% inicial. Si en el mismo caso analizamos la
molcula del frmaco, intentaramos discriminar entre un 100% inicial y
un 98% final, lo cual nos dara una diferencia del 2%, porcentaje que
muy fcilmente cae en el error tpico del mtodo, por lo que esta
degradacin seria identificada significativamente solo con varias
determinaciones.
Finalmente, con respecto al anlisis de los productos de la reaccin, es
necesario hacer notar que los frmacos pueden sufrir diferentes tipos de
degradacin, que nos llevan a diferentes productos de reaccin, por lo
que dependiendo del tipo de formulacin podramos encontrar diferentes
productos de degradacin.
Cuando se quiere identificar una reaccin de degradacin desde el
principio, no se requiere nicamente que el mtodo sea especfico, sino
que tambin sea suficientemente sensible para identificar cualquier
variacin con respecto a la concentracin inicial.
Cuando se desarrolla un mtodo analtico es importante saber el
intervalo de concentracin en que se trabaja y su relacin con los
resultados.
Esto significa que debemos conocer cul es el comportamiento de
nuestro mtodo cuando se desean estimar diferentes concentraciones
para saber si hay una relacin lineal entre el resultado y la
concentracin del frmaco, o si no la hay, o si la hay en un rango de
concentracin y en otro no, o si la relacin es lineal pero no pasa por el
origen. Para tener este informe se obtiene lo que llamamos una curva
tipo o sea una relacin de las respuestas de nuestro mtodo cuando se
procesan estndares de concentraciones diferentes. Esto se ve ms
claro si analizamos los diferentes tipos de curvas que podemos obtener
y que se muestran en la figura VI. 1.
En la curva 1 se observa que hay una relacin directa entre el
resultado y la concentracin. En este caso se puede utilizar el mtodo en
265
cualquier regin de la recta sin problema alguno y ser la curva tipo

racional y adecuada para el anlisis. Los ensayos se harn con una
muestra y un estndar calculando la concentracin con una regla de
tres.
En la curva 2 se obtiene tambin una recta, pero que no pasa por el
origen, por lo que no ser suficiente hacer una muestra y un estndar,
sino que habr necesidad de determinar ms de un estndar que nos
indiquen cul es la posicin de la recta y con ello obtener la
concentracin de nuestra muestra. Este podra ser el caso de una
interferencia constante por otras substancias.
RESPUESTA
Curva 1
Curva 2
Curva 3
CONCENTRACIN
Figura VI. 1. Curvas tipo de posibles respuestas de un mtodo

analtico.
En el caso de las curvas tipo que son lineales se puede observar que
la pendiente de las mismas es una media recproca de la sensibilidad del
mtodo, as veremos que entre mayor pendiente exista, nuestro mtodo
ser ms sensible, por el otro lado y en el caso extremo en que nuestra
recta sea paralela al eje de las "Xs", nos indicara una indiferencia total
del mtodo hacia nuestro frmaco.
El caso de la curva tres, nos representa la peor situacin, en este caso
es necesario determinar por lo menos 4 estndares que cubran la regin
en donde esperamos el resultado de nuestras muestras. S es que no
encontramos una ecuacin que nos d una respuesta lineal de tales
resultados.
266
Una vez que hemos seleccionado nuestro mtodo, ser necesario

conocerlo estadsticamente para saber su potencial. Para el anlisis
estadstico de los datos, se parte de la toma de 10 muestras de una
mezcla representativa de nuestro producto, se analiza y se busca
obtener un conocimiento de todo el proceso de anlisis a travs de ellas,
relacionndolos no slo con los clculos estadsticos, sino tambin
relacionando el resultado promedio, contra la concentracin terica del
estndar, para medir de esta manera tambin su precisin y
reproducibilidad.
Cuando el estudio de estabilidad se haga analizando los productos de
degradacin ser conveniente saber adems cual es la cantidad mnima
que nuestro mtodo puede reconocer significativamente. Es obvio que
entre ms pequea sea una cantidad de sustancia por determinar, ms
amplio ser el intervalo de confianza del ensayo, o sea, la posibilidad de
error ser ms grande. Sin entrar en mayor detalle diremos que para
una curva tipo como la uno, la cantidad mnima a analizar ser la que
tenga un intervalo de confianza de 10%, lo cual correspondera con un
coeficiente de variacin de 4 cuando el ensayo se hace por triplicado.
Resumiendo todos los criterios expuestos para la seleccin y
desarrollo de un mtodo analtico para estabilidad, se puede decir que
ser necesario tener de l, como mnimo, las siguientes caractersticas:
1) Condicin obligada, el que sea especfico y sensible.

2) Que muestre linealidad sealando la cantidad mnima que
confiablemente puede medir.
3) Que se conozcan sus datos estadsticos como:
a) porcentaje de recuperacin de una muestra estndar,

b) su desviacin o su coeficiente de variacin y
c) la variacin mnima significativa que se puede reconocer
con 95% de probabilidad cuando se hacen 3 ensayos
4) Que la preparacin de las muestras sea en lo posible sencilla.
VI. 2. Los mtodos analticos
VI. 2. 1. Espectroscopia de absorcin

La espectroscopia ultravioleta - visible (UV-Vis), entre otras tcnicas,
tambin se puede utilizar en las pruebas de estabilidad de los productos
267
farmacuticos. Esto ocurre en los casos en los cuales el sistema

cromforo de un frmaco toma parte en las reacciones de degradacin,
ya que esta situacin nos conducira a cambios en el patrn de absorcin
de luz del frmaco. Este cambio se observara como un cambio en la
absorcin o como un corrimiento en el mximo de absorcin.
El cromforo o sistema cromforo es la parte de la molcula donde se
encuentran los electrones o n, los cuales son capaces de absorber la
luz visible y la ultravioleta. Los cromforos ms importantes son los
formados por electrones nicamente y los formados por electrones
y electrones n (pares electrnicos libres del oxgeno, azufre y nitrgeno).
Debido a la formacin de productos de degradacin, una
determinacin espectrofotomtrica sera un anlisis de un sistema de
varios componentes. sta situacin sera un poco ms difcil de resolver
en los estudios de estabilidad, debido a la concentracin muy elevada
de un componente, el frmaco original y pequeas cantidades de los
La mayora de los compuestos orgnicos se pueden determinar por
espectroscopia, ya sea directamente, con luz ultravioleta, o despus de
desarrollar una determinada coloracin, con luz visible. Este mtodo es
fcil de llevar a cabo, sencillo y de gran sensibilidad. La identificacin se
lleva a cabo observando el espectro de absorcin, el cual es
caracterstico de cada sustancia.
La base de esta determinacin cuantitativa es la ley de Lambert y
Beer:
Log Io/I = A = a * b * c (VI. 1)
Donde Io es la intensidad de la luz de entrada, I es la intensidad de

salida, A es la absorcin, a es el coeficiente de absorcin especifico, c es
la concentracin en g/l o mol/l y b es el grosor de la capa o paso de luz.
Debido a que sta ley tiene validez solo en un determinado intervalo
de concentraciones, es necesario hacer una determinacin de se
intervalo.
Para el anlisis espectrofotomtrico de dos o ms componentes,
regularmente se tiene que los espectros de absorcin se sobreponen.
Ocasionalmente, un cambio en el disolvente o un cambio en el pH
podran hacer que los mximos de absorcin se separaran, facilitando su
determinacin.
El procedimiento a seguir sera la determinacin de la absorcin de la
mezcla a dos longitudes de onda caractersticas, 1 y 2, de cada uno de
los dos componentes por determinar, A1 y A2. Esto es, leer a las
268
longitudes de onda donde se localice un mximo de absorcin de cada

uno de los componentes de la mezcla (ver figura a1). Para el
procedimiento, deber conocerse o calcularse previamente, con
estndares, los valores del coeficiente de absorcin especfico (a =
A1cm1%) de los dos componentes, a las dos diferentes longitudes de onda
donde se vaya a leer.
Para la longitud de onda 1 y 2 el total de la absorcin, para un paso
de luz de 1 cm, estara dado por la absorcin debida al frmaco A f ms la
absorcin debida al producto de degradacin Ad:
A1 = Af + Ad = a1(1) * c1 + a2(1) * c2 (VI. 2)

A2 = Af + Ad = a1(2) * c1 + a2(2) * c2
Resolviendo el sistema de ecuaciones para c 1 y c2. Se obtienen las

concentraciones de los dos componentes. Este procedimiento se puede
extender a ms componentes (4, 5).
c1 = A1 * a2(2) - A2 * a2(1) / a1(1) * a2(2) - a1(2) * a2(1) (VI. 3)

c2 = A2 * a1(1) - A1 * a1(2) / a1(1) * a2(2) - a1(2) * a2(1)
A1
A2
ABSORCIN
MEZCLA
FRMACO
PROD. DEG.
1 2
LONGITUD DE ONDA ()
Figura VI. 1. Determinacin espectrofotomtrica de un frmaco y su
producto de degradacin.
269
Una desventaja del procedimiento sera el que una determinacin con

un poco de error puede afectar de manera importante los resultados as
como un pequeo error en el clculo tambin tendr una repercusin
importante en el resultado. Otra desventaja sera el solo medir a dos
longitudes de onda, aunque tambin se pueden hacer determinaciones
con ms puntos (4).
Cuando en un determinado preparado farmacutico existe una sola
entidad qumica que absorbe o cuando se asocia la determinacin
espectrofomtrica con un mtodo previo de separacin, es posible hacer
una determinacin directa de la concentracin del frmaco y de su
estabilidad. Un ejemplo de ello es la determinacin de la estabilidad del
cido p-aminosaliclico en soluciones acuosas cidas (6). En este estudio
las soluciones se neutralizaron previo a la lectura, para garantizar que el
frmaco se encontraba en su forma inica. La lectura de la absorbancia
se hizo a 265 nm, leyendo contra un blanco. La determinacin de la
absorbancia al tiempo infinito, cuando ya no existe el frmaco, se
obtuvo leyendo una solucin de m-aminofenol, el cual es el nico
producto de degradacin que presenta una absorcin de luz, en
condiciones de acidez (pH entre 1 y 5). La concentracin del frmaco al
tiempo t se determin restando a la absorcin de cada muestra la
absorcin al tiempo infinito. Para este caso, la relacin entre el log (a t -
a) contra el tiempo fue lineal, lo cual corresponde con una reaccin de
orden uno, para la descarboxilacin del cido p-aminosaliclico.
En un estudio similar al anterior se utiliz la absorcin a 320 nm para
medir la estabilidad de indometacina en solucin acuosa alcalina (7). La
absorbancia se ley contra un blanco y se registr como una funcin del
tiempo. La cintica de degradacin se evalu de acuerdo a la ecuacin:
log (at - a) = -kobs * t / 2.303 + log (ao - a) (VI. 4)
Donde at es la absorbancia al tiempo t y a es la absorbancia en el

equilibrio, esto es, cuando se ha degradado todo el frmaco.
La constante de reaccin de seudo primer orden kobs fue calculada por
regresin lineal, considerando que ao es la absorbancia al tiempo cero.
La figura VI. 2 muestra la estabilidad de la indometacina, a diferentes
temperaturas, en soluciones acuosas alcalinas. La estabilidad de la
indometacina aumento conforme se adicion una mayor concentracin
de Pluronics a la solucin, por la formacin de un complejo.
Aunque este procedimiento de restar la absorbancia al tiempo infinito,
de la absorbancia a un determinado tiempo, para obtener la absorbancia
del frmaco original restante se ha reportado varias veces en la
literatura, en realidad el clculo debiera hacerse considerando el
270
sistema como formado por dos componentes, tal como ya se ha

explicado. La absorbancia del producto de degradacin al principio
prcticamente no existe, por lo que no se debiera restar a estos valores
la absorbancia al tiempo infinito.
Por supuesto, los estudios de estabilidad de los colorantes en los
preparados farmacuticos tendran como primera eleccin los mtodos
analticos de espectroscopia visible. Ejemplos de ello son los estudios de
estabilidad de un preparado lquido de sulfas (8) y la estabilidad del
colorante FD & C azul No. 1 (9).
En el caso del preparado de sulfas (8), se estudio su estabilidad contra
el calor a temperaturas elevadas, con el fin de determinar su estabilidad
a temperatura ambiente. El efecto de la temperatura sobre el espectro
visible de absorcin de una mezcla de los colorantes FDC amarillo No. 6
y el DC rojo No. 33 se observa en la figura VI. 3.
log (at - a() + 3

25 C
37 C
2
45 C
0
0 30 60 90 120
TIEMPO (min)
Figura VI. 2. Influencia de la temperatura sobre la degradacin de

soluciones acuosas alcalinas de indometacina (7).
271
0.5
0 horas
0.4 120 horas
264 horas
ABSORVANCIA
0.3
432 horas
0.2
0.1
0
400 500 600
LONGITUD DE ONDA (nm)
Figura VI. 3. Efecto del tiempo de almacenamiento sobre el espectro

de absorcin visible de una preparacin lquida multisulfa (8).
Esta determinacin de la intensidad del color requiri de una

separacin previa de los agentes suspendidos, a travs de
centrifugacin de las muestras durante 20 minutos a 2 000 r.p.m., y una
posterior dilucin con etanol. Como podr observarse en la figura VI. 3,
la absorbancia de las citrasulfas (nombre comercial del producto)
disminuye conforme transcurre el tiempo. La banda de absorcin 480-
520 nm es la que da el color rosa caracterstico del preparado. Las
grficas de la absorcin a 500 nm contra el tiempo permitieron estimar
las velocidades de disminucin de la coloracin a las diferentes
temperaturas estudiadas.
En el caso del azul No. 1 (9), se estudi su estabilidad en soluciones
preparadas en mezclas de alcohol agua, bajo el efecto de la luz (65 pie
* bujas) y diferentes concentraciones de NaOH, a 24 C. La estabilidad
se estim a partir de lecturas de absorbancia a 631 nm. La figura VI. 4
muestra los cambios ocurridos en el espectro de absorcin de una
solucin acuosa del azul FDC No. 1, con 0.003 M de NaOH, expuesta a 65
pie * bujas.
272
0.9
ABSORVANCIA
0.6 0 horas
24 horas
145 horas
0.3
0
560 590 620 650
LONGITUD DE ONDA (nm)
Figura VI. 4. Efecto del tiempo de exposicin a la luz (65 pie * bujas)
del colorante azul FDC No. 1 en solucin acuosa, en presencia de
0.003 M de NaOH (9).
Los resultados obtenidos en este estudio muestran que la prdida de

la coloracin fue mayor conforme la concentracin de etanol y del NaOH
aumentaron.
Cuando las curvas de absorcin de luz muestran sobreposicin de los
mximos de absorcin de las diferentes substancias en mezcla, se
puede obtener una valoracin ms conveniente calculando la primera
derivada de la absorcin contra la longitud de onda. Bajo estas
circunstancias los mximos y mnimos de la curva de absorcin se
observarn como valores de cero, mientras que los puntos de inflexin
correspondern con los valores mnimos y mximos de la nueva curva
formada por la derivada de la absorcin contra la longitud de onda.
VI. 2. 2. Cromatografa de lquidos de alta resolucin (HPLC)

La cromatografa de lquidos de alta resolucin es una forma particular
de la cromatografa en columna, en la cual se hace uso de elevadas
presiones. Se utiliza para separar mezclas de substancias as como para
su anlisis cualitativo y cuantitativo. La capacidad de separacin de las
columnas depende en gran medida del tamao de las partculas as
como de la distribucin de ese tamao de las partculas en la columna.
Sin embargo, cuanto ms pequeas son las partculas, la densidad de
empacamiento de la columna es mayor, lo cual dificultara el flujo de la
fase mvil. Para garantizar el flujo suficiente de la fase mvil, en la
273
HPLC, se utiliza una bomba que impulsa la fase mvil a travs de la

columna. La HPLC puede presentar diferentes caractersticas o
conceptos de separacin como la adsorcin, el reparto, los pares inicos,
el intercambio de iones y la exclusin de tamaos o cromatografa en
gel. La asignacin de un tipo de mecanismo de separacin no siempre es
posible, ya que regularmente participan varios mecanismos y la
separacin en donde uno principia y otro termina no es fcil de
determinar (4).
Las aplicaciones de la HPLC son muy variadas, quiz mostrando un
nfasis en el anlisis de substancias termolbiles o difciles de volatilizar,
las cuales no se podran determinar por otros mtodos como la
cromatografa de gases.
Cuando dos substancias se pueden separar a travs de una elucin
cromatogrfica es porque se diferencian en su tiempo de retencin. Este
tiempo de retencin (tR) esta compuesto por el tiempo de retencin en la
fase estacionaria (tR) y el tiempo de retencin en la fase mvil o tiempo
muerto (to), el cual es igual para todas las substancias (ver figura VI. 5).
Otro trmino de la HPLC es el factor de capacidad (k), el cual es la
relacin del tiempo de retencin en la fase estacionaria entre l de la
fase mvil. Este valor es independiente del largo de la columna y lo es
tambin de la velocidad del eluente o fase mvil, cuando sta es menor
de 5 cm/s (5).
tR = to + tR (VI. 5)
k = tR / to = (tR - to)/ to (VI. 6)
Existe una relacin entre el factor de capacidad (k) y el coeficiente de

adsorcin o el de reparto (K), dado por los volmenes de la fase
estacionaria (Vs) y de la fase mvil (Vm):
k = K * Vs/Vm (VI. 7)
La relacin de los factores de capacidad de 2 diferentes substancias,

bajo condiciones externas constantes y para una misma fase
estacionaria se denomina tiempo de retencin relativo (). El tiempo de
retencin relativo es una medida de la selectividad del sistema de
separacin (figura VI. 5).
= (tR2 - to) / (tR1 - to) = k2 /k1 = K2 /K1 (VI. 8)
274
SEAL DE DETECCIN tR2
tR1
to
TR1
TIEMPO w
TR2
Figura VI. 5. Representacin esquemtica de diferentes trminos de
la HPLC (5).
El trmino resolucin (R) es una medida de la calidad de la separacin

que se obtiene de una mezcla de dos substancias. Este trmino se ve
influido por el tipo de transporte y los procesos termodinmicos que se
dan en la columna. El tipo de transporte se reflejar en el ancho del pico.
Como una medida de ello se usa el trmino altura del piso o altura
equivalente a un plato terico (HETP = h). Los procesos termodinmicos
se reflejan en la distancia entre los mximos de los picos, definindose
esta situacin a travs de una medida de la selectividad del sistema, .
Las ecuaciones que definen estos trminos son (5):
R = ( - 1 / ) * (k / 1 + k) * n1/2 (VI. 9)
h = (L / 16) * (w/ tR) 2 (VI. 10)
n = L/h = 16 * (tR/w) 2 (VI. 11)
Donde L es el largo de la columna, w es el ancho del pico entre las

tangentes trazadas sobre los puntos de inflexin del pico y n es el
nmero de pisos, platos tericos o pasos de separacin.
La resolucin de 2 bandas se define como la relacin entre la distancia
entre los dos picos, esto es, la diferencia de los tiempos de retencin y la
media aritmtica de los dos anchos de los picos:
275
R = 2 (tR2 - tR1) / (w1 + w2) (VI. 12)
La mayor caracterstica de la HPLC es su elevado desarrollo tcnico,

su selectividad y versatilidad, acorde al grupo de substancias que se
desee investigar. Sus carencias en el desempeo (numero de platos /
tiempo) y eficiencia (numero de platos) se ven parcialmente
compensadas por la posibilidad de usar gradientes de elucin. Su punto
dbil es la falta de un mtodo de deteccin simple sensible y universal,
equivalente al FID (detector de ionizacin de flama) en la cromatografa
de gases y en la cromatografa de fluidos supercrticos. La sensibilidad
de un mtodo de separacin depende de su capacidad de carga y de la
naturaleza de los detectores disponibles. Esta sensibilidad es superior en
HPLC, en comparacin con otros mtodos que solo trabajan en forma
miniaturizada. Cabe hacer aqu la aclaracin de que para el anlisis
farmacutico es de mayor importancia la sensibilidad a la concentracin
y no a la masa, mientras que en la deteccin por absorbancia y por
fluorescencia es tambin la sensibilidad a la concentracin y no la
cantidad mnima detectable la que es relevante (10).
Un ejemplo del uso de la HPLC es el caso del dipiridamol (11), el cual
haba mostrado un producto de degradacin en cromatografa en capa
fina, en estudios de estabilidad. El primer paso fue determinar que
sistema solvente era el ms conveniente, decidindose que una solucin
acuosa de la sal sdica del cido pentanosulfnico (PSA) y metanol
(30:70) daba resultados adecuados en el factor de capacidad (k).
Enseguida se procedi a optimizar la concentracin de los componentes
de la fase mvil. La figura VI. 6 nos muestra cual es el efecto de
modificar la concentracin del contraion, en la fase mvil, sobre el
tiempo de retencin de un producto denominado II, el cual es
considerado la impureza por separar del dipiridamol. Como se puede
observar, el tiempo de retencin para el compuesto II disminuye
conforme se incrementa la concentracin del PSA. Considerndose una
concentracin de 200 mM/L como un valor del tiempo de retencin
apropiado.
276
TIEMPO DE RETENCIN (min)

27
22
17
0 100 200
PENTANO SULFONATO (mM/L)
Figura VI. 6. Efecto de la concentracin del contraion, en la fase

mvil, sobre el tiempo de retencin de la impureza II del dipiridamol
(11).
Bajo estas condiciones cromatogrficas, se observa coleo del pico

correspondiente a la impureza, por lo que se adiciona trietilamina, a la
fase mvil, para reducir este efecto. La figura VI. 7 nos muestra el efecto
de la trietilamina sobre el factor de coleo observado en la respuesta de
la impureza del dipiridamol. Considerndose una concentracin ptima
en el eluyente la de 30 mM/L, lo cual produjo un factor de coleo de 1.8,
lo cual es consistente con la concentracin recomendada para el
modificador de amina en la fase mvil. El efecto del pH de la fase mvil
se ajust a un valor de 3.0, lo cual mantuvo la forma del pico y su
resolucin.
El factor de coleo (T) es una medida de la simetra del pico. Vale 1
cuando el pico es perfectamente simtrico. Conforme se pierde simetra
en el pico, las determinaciones son menos confiables (12). Este factor se
calcula con la ecuacin:
T = w0.05 / 2 f (VI. 13)
Donde w0.05 es el ancho del pico a una altura de 5% del total y f es la

distancia desde la lnea perpendicular que baja del mximo del pico
277
hasta el asta izquierda del mismo, medida a una altura del 5% del total
de la altura del pico, desde la lnea base (12).
4
FACTOR DE "COLEO"
1
0 10 20 30
TRIETILAMINA (mM/L)
Figura VI. 7. Efecto de la concentracin de la amina modificadora, en

la fase mvil, sobre el factor de coleo observado para la impureza
II del dipiridamol (11).
La columna utilizada para la separacin del dipiridamol de sus

productos de degradacin fue una de 250x4.6 mm d.i., 5 m, ODS I. En
trminos generales la seleccin de una columna de HPLC se hace en
funcin de 3 parmetros fundamentales, la resolucin deseada, la
velocidad de anlisis y la capacidad de carga de la columna.
La figura VI. 8 muestra un cromatograma del sistema dipiridamol -
impureza II, el cual nos muestra una buena separacin.
El siguiente paso en el desarrollo del mtodo analtico es la separacin
del dipiridamol de los productos de degradacin. Para este fin se
degrada a propsito el frmaco bajo la accin de condiciones extremas.
Para dipiridamol se almacen a 40 C, durante 1 semana:
una solucin alcalina 0.1M de hidrxido de sodio,

cido clorhdrico 0.1M,
agua y
solucin de perxido de hidrgeno al 1%.
278
Dipiridamol
4.50
1/10 * VOLTS
4.00
3.50
Impureza II
0 0.5 1 1.5 2
1/10 * TIEMPO (minutos)
Figura VI. 8. Cromatograma tpico de dipiridamol y su impureza

sinttica II, con el mtodo propuesto (11).
En otros casos, por ejemplo en el caso del cido retinico (13), las
condiciones para provocar productos de degradacin fueron:
Calentar a reflujo (75 C) durante 3.5 horas una solucin

metanlica del frmaco,
la misma solucin calentndola 24 horas cada vez, a 100 C y a
120 C,
la solucin original con una concentracin de cido clorhdrico
0.1N, a reflujo por 5 minutos,
la solucin original con KOH 0.1N, a reflujo durante 30 minutos
y
la solucin original sometida a efectos de la luz ultravioleta de
254 nm, a una distancia de 20 cm, durante dos horas.
En trminos generales lo que se busca es una degradacin importante

del frmaco. Para el caso del cido retinico las concentraciones finales
de frmaco, despus de someterse a las condiciones extremas
mencionadas, fueron entre 30 y 65% de la concentracin original.
279
Cuando los productos de degradacin o compuestos relacionados

estn disponibles, la bondad del mtodo analtico se verifica separando
estos compuestos relacionados, del frmaco en estudio. En la figura VI. 9
se observa un cromatograma de HPLC del diclofenac sdico y sus
compuestos relacionados (14). En este caso, los factores de coleo (1.0
2.3) y de resolucin (0.5 2.74) se consideran aceptables, con la
excepcin del compuesto relacionado VI, el cual present un factor de
coleo de 4.5 y un factor de resolucin de 4.13, los cuales se consideran
debidos a un tiempo de retencin demasiado elevado (aprox. 43 min).
(*)
I IV
V
III
II VI
I
0 10 20 30 40 50
TIEMPO (min)
Figura VI. 9. Cromatograma de diclofenac sdico (*) y sus

compuestos relacionados (14).
La precisin, linealidad y recuperabilidad son requisitos que tambin

deben ser satisfechos por un mtodo de HPLC.
La precisin se evala con ensayos repetidos de muestras del
producto, en periodos de tiempo separados, por ejemplo, en un da y en
una semana. La precisin durante un da podra llevarse a cabo con 5
ensayos consecutivos, dentro de un lapso de 8 horas. La reproducibilidad
del mtodo podra realizarse analizando una misma muestra, por un solo
operador, durante 7 das consecutivos. Un ejemplo es el anlisis por
HPLC de la ribarvarina (15), la cual mostr, con el procedimiento
mencionado, una respuesta lineal en un intervalo de 0-100 g/ml.
Mientras que sus impurezas tuvieron una respuesta lineal en un
intervalo de 0 - 50 g/ml. La precisin evaluada por el mtodo
mencionado o el de la USP, mostr valores de recobro de 98-101% y de
98.3-101.5% respectivamente, lo cual demuestra que el mtodo de la
280
ribarvarina es muy preciso y exacto. Esta evaluacin consiste en

agregar, a una preparacin placebo, cantidades conocidas del frmaco y
analizarlas por el procedimiento seleccionado. En este caso se
adicionaron cantidades de 2, 4, 6, 8 y 10 mg del frmaco. En otros
casos, los estudios de recobro (13) se han hecho con placebo y 3 niveles
de potencia terica del frmaco, 50%, 100%, y 150%, en 3 diferentes
das.
La linealidad se estima relacionando las reas de los picos contra las
concentraciones del frmaco que les generaron, obtenindose una
ecuacin de regresin lineal y una varianza. El valor del coeficiente de
correlacin debe ser cercano a 1, mientras que el valor del intercepto
deber ser cercano a cero. Valores tpicos de estos parmetros, por
ejemplo para el cido retinico (13) son:
y = 43.53 + 61427 x
Syx = 81.55
R = 1.0
Intercepto insignificante para una p>0.05.
Un parmetro mas por evaluar en un mtodo analtico, es la

estabilidad de las muestras en solucin, para saber que tanto tiempo
pueden permanecer sin alteracin. En el caso del dipiridamol (11), las
soluciones se guardaron en un refrigerador, de un da para otro,
observndose que los resultados fueron significativamente diferentes,
por lo que solo podr hacerse uso de soluciones recin preparadas.
Cuando para la cuantificacin se utiliza un estndar externo, la
solucin estndar se intercala entre las muestras que se analizarn. En
el caso del cido retinico (13), el contenido en una cpsula se calcul
usando la siguiente ecuacin:
AR% = (Cs / As) * Ax * S * (100/W) (VI. 14)
Donde Cs (mg/g) es la concentracin del cido retinico (AR) en la

solucin estndar, As es el rea promedio del pico del AR en la solucin
de la muestra, W es el peso exacto del contenido de una cpsula
transferida, en este caso a un matraz volumtrico de 50 ml. S es el peso
exacto del metanol agregado para llevar a la marca el contenido del
matraz volumtrico.
281
El peso de cada producto de degradacin, como porcentaje del AR (DP

%), se calcul usando la siguiente ecuacin:
DP% = Sf * ADP / AAR * 100 (VI. 15)
Donde ADP y AAR son respectivamente el rea del pico de cada

producto de degradacin y del pico de AR, medidos por integracin en el
mismo cromatograma de una solucin de una muestra. Sf es el factor de
sensibilidad de cada sustancia relacionada con el AR.
Sf = RRS / RAR (VI. 16)
Donde R es el factor de respuesta (concentracin / rea del pico) para

las soluciones estndar de las substancias o productos relacionados y
para el AR. Para productos de degradacin desconocidos se asigna un
factor de sensibilidad de 1.0. El lmite de deteccin (LOD) y el lmite de
cuantificacin (LOQ) de los productos relacionados se calculan sobre las
reas de los picos, usando las ecuaciones:
LOD = 3 * N/B (VI. 17)

LOQ = 10 * N/B (VI. 18)
Donde N es el ruido estimado, el cual equivale a la desviacin

estndar de las reas de los picos de 5 inyecciones de cada solucin de
sustancia relacionada a una concentracin de 0.1% del contenido de la
cpsula en AR. B es la pendiente de la curva de calibracin
correspondiente (13).
VI. 2. 3. Cromatografa de fluidos supercrticos

Comparado con el mtodo de HPLC, este mtodo tiene un mucho
mejor desempeo y a menudo, tiempos de desarrollo de la metodologa
ms cortos. Tiene la ventaja de poder usar gradientes de densidad o de
modificador, o de ambos. El uso de columnas empacadas para la
cromatografa de fluidos supercrticos presenta aun algunos problemas
tcnicos y su uso se encuentra limitado a tan solo algunos eluentes.
Un ejemplo del uso de la cromatografa de fluidos supercrticos (SFC),
en este caso asociada a la extraccin con fluidos supercrticos (SFE), es
el anlisis de prostaglandinas (misoprostol) en una matriz polimrica de
hidroxipropil metilcelulosa(HPMC) (16).
282
La combinacin SFE-SFC comprende las fases de extraccin, equilibrio

y cromatografa. Durante la fase de extraccin, el fluido supercrtico
fluye a travs del vaso de extraccin. Los componentes de la muestra se
extraen y subsecuentemente se precipitan en una trampa crioscpica,
durante la descompresin del fluido supercrtico. Durante la fase de
equilibrio el flujo del fluido supercrtico, a travs del vaso de extraccin,
se ha detenido; la vlvula del refrigerante se ha cerrado, llevndose la
columna a la temperatura requerida para la cromatografa (70 C).
Entonces se lleva a cabo la cromatografa en tiempos de 6 min. a 20
min. La figura VI. 10 muestra el cromatograma para el misoprostol:
HPMC.
Misoprostol:
HPMC
HPMC
5 10 15 XY
0 TIEMPO (min) (Dispersin)
3
Figura VI. 10. Cromatogramas SFE-SFC para una dispersin
misoprostol:HPMC y un blanco de HPMC (16).
El pico que aparece es el caracterstico del misoprostol, obtenido

desde una muestra con 1.2 mg de una dispersin de misoprostol:HPMC
(12 g de misoprostol). El cambio que se observa en la lnea base es
debido al repentino cambio de presin que resulta de cambiar la vlvula
del sistema, para conectar la columna, para inyectar los componentes
extrados de la muestra. La figura VI. 10 muestra tambin el
cromatograma de un placebo de HPMC. La selectividad mostrada por el
sistema se considera debida a la capacidad del dixido de carbono
asociado a 5% de metanol, para extraer la prostaglandina, no-polar,
desde las dispersiones con HPMC. Una coelucin del HPMC no se pudo
observar en los cromatogramas. Este trabajo, aunque preliminar,
283
muestra las posibilidades del sistema SFE-SFC para usarse en el anlisis

de formulaciones farmacuticas.
VI. 2. 4. Electroforesis capilar de zona

Mientras que la HPLC se utiliza mejor cuando el numero de
componentes por separar es bajo, lo cual es la situacin casi siempre en
los estudios de estabilidad, mtodos como la SFC y la electroforesis
capilar de zona seran preferidos cuando el numero de componentes por
separar sea mayor.
La electroforesis capilar de zona (CZE) es la tcnica ms apropiada
para la separacin de mezclas muy complejas. Ejemplos de este tipo de
separaciones son los productos biotecnolgicos y quiz los extractos y
preparados de plantas medicinales (figura VI. 11).
(*)
neutr
o
cationes
anione
s
0 5 10 15 20 25 30 35 40
TIEMPO DE RETENCIN (min)
Figura VI. 11. Anlisis de un alcaloide farmacutico (*) por CZE,

almacenado bajo condiciones extremas. Voltaje aplicado 25 kV,
amortiguador de agua-acetonitrilo (60:40), usando un capilar de 90
cm x 50 m de d. i. (10).
Este mtodo tiene como caracterstica una enorme eficiencia, por lo

que los mtodos de evaluacin pueden desarrollarse rpidamente. Sus
principales desventajas seran su baja sensibilidad, estimada en 10
veces menos que la de la HPLC y el hecho de que el amortiguador de
elucin debe ser similar al de extraccin. Su baja sensibilidad no puede
284
ser totalmente compensada por un aumento en la cantidad inyectada,

ya que la sensibilidad podra verse disminuida al inyectar cantidades
demasiado grandes, llevndonos a una inaceptable perdida de
sensibilidad y de resolucin. Sin embargo, la CZE se muestra muy
prometedora en el tiempo requerido para desarrollar la metodologa
analtica, debido a su elevada eficiencia y gran desempeo. El tiempo
necesario para desarrollar el mtodo no depende solo de los parmetros
que se encuentren disponibles para modificar la selectividad sino que
tambin depende del tiempo requerido para equilibrar la columna y del
desempeo (N/t) y de la eficiencia (N) de la tcnica (10).
En lo que se refiere a la factibilidad tcnica de la CZE, los detectores
actualmente en uso son muy inferiores a los de la HPLC o SFC, 10-20
veces menos sensibles, lo cual hace que la desviacin estndar relativa
de las reas de los picos muestren como normales o comunes valores de
hasta 3-4%, por lo cual el uso de estndares internos es muy
recomendable. Por otro lado, la CZE tiene ciertas limitaciones en el tipo
de substancias que puede separar. La CZE es recomendable para
substancias que pueden ser ionizadas en solucin, por que requiere de
solventes que sean de naturaleza polar, aunque se puedan agregar
modificadores orgnicos. La separacin de substancias neutras solo
podra lograrse usando soluciones micelares (10).
VI. 2. 5. Cromatografa de gases

La cromatografa de gases (GC) es un proceso de separacin en el
cual se analizan substancias que se encuentran en fase de vapor o en
forma gaseosa, a travs de principios de adsorcin y de reparto. Cuando
se habla de adsorcin, sta se lleva a cabo sobre una fase slida
estacionaria, utilizando como fase mvil un gas inerte. En la
cromatografa por reparto, la cual es la ms comn en el anlisis
farmacutico, las substancias gaseosas se reparten o distribuyen entre
una fase estacionaria lquida y la fase mvil gaseosa. Como se podr
entender, este procedimiento es solo para substancias que son gases o
que pueden ser vaporizadas, sin descomponerse.
El anlisis por cromatografa de gases requiere de optimizar ciertos
parmetros como:
La fase de separacin
El gas de separacin y su velocidad
La temperatura del proceso
285
En las columnas ya empacadas se escoge la fase lquida estacionaria

en funcin del material por separar, materiales polares se separan
adecuadamente con fases estacionarias polares y viceversa. Para
columnas capilares, stas existen con fases estacionarias polares y no
polares tambin. Es de notarse, que muchas fases estacionarias son
sensibles al oxgeno, por lo que despus de cada anlisis se debe tener
cuidado de dejar enfriar las columnas, pasando gas que sirva de
enjuague (4).
El gas que sirve a la separacin se escoge en funcin del detector.
Para el detector de ionizacin de flama (FID), se usa en las columnas ya
empacadas el nitrgeno, mientras que en las columnas capilares se usa
el hidrgeno o el helio. La velocidad de estos gases (u) influye la
separacin de las substancias de una forma descrita por la curva de van
Deemter, la cual relaciona la altura equivalente a un plato terico (HETP)
con la velocidad del gas (figura VI. 12).
Altura Equivalente de Plato terico
Velocidad
optima del gas
de transporte
Velocidad del gas de transporte (u)
Figura VI. 12. Efecto de la velocidad del gas de transporte sobre la

capacidad de separacin (Curva de van Deemter) (4).
Como se puede observar, velocidades muy bajas del gas de arrastre o

transporte deterioran drsticamente la separacin de las substancias,
mientras que velocidades demasiado altas disminuyen tambin
lentamente la capacidad de separacin.
El coeficiente de distribucin o reparto es una variable que se ve
fuertemente afectada por la temperatura. Entre menor sea la
temperatura, mas tiempo permanecen las substancias en la columna.
286
Por esta razn, los picos de cada sustancia se separan ms unos de

otros. Aunque tambin aumenta el ancho del pico, lo que hace que no
necesariamente se produzca una mejor separacin.
El anlisis de mezclas complejas regularmente requiere, adems, de
hacer un programa de temperaturas, ya que en condiciones isotrmicas
no sera posible una buena separacin. Equipos que cuentan con
sistemas de control computarizados pueden programar combinaciones
de fases isotrmicas y de calentamiento durante un anlisis (4).
Un ejemplo del uso de la cromatografa de gases en la estabilidad de
productos farmacuticos es el caso del analgsico buprenorfina (17), el
cual pudo separarse de su producto de degradacin, despus de una
hidrlisis cida. El equipo usado incluye un detector de ionizacin de
flama, una fase lquida estacionaria de 3% de OV-210, recubriendo Gas
Crom Q de un tamao de partcula de 100-120 mallas, empacada en una
columna de vidrio silanizado de 36 cm x 2 mm de d. i. Las temperaturas
fueron de 190 C en el inyector, de 275 C en el detector y un
calentamiento programado de 170 C a 260 C, a una velocidad de 10
C/min. Como gas de arrastre se utiliz nitrgeno, a una velocidad de
flujo de 20 ml/min. En la figura VI. 13 se observa un cromatograma con
los tiempos de retencin de la buprenorfina, su producto de degradacin
y un estndar interno.
Estndar
RESPUESTA DEL DETECTOR
interno
Buprenorfina
Producto de
degradacin
0 2 4 6 8
TIEMPO (min)
Figura VI. 13. Cromatograma de gases de buprenorfina

almacenada en condiciones extremas de acidez (HCl al 10%
v/v), a 37 C, durante 24 horas (17).
287
Los productos de degradacin y la buprenorfina misma fueron

cromatografiados despus de ser sililados.
En casos como el anterior, la formacin de derivados de las
substancias por analizar se hace necesaria, la razn para ello podra
situarse en alguna de las siguientes circunstancias de estas substancias:
Poca volatilidad
Destruccin durante la evaporacin
Polaridad muy elevada
Adicin de elementos (heterotomos) a los cuales los
detectores sean especialmente sensibles
Para mejorar la capacidad de evaporarse de algunas substancias se

requiere transformar grupos muy polares como grupos amino, hidroxilo y
carboxilo en otros menos polares a travs de sililacin, acilacin,
alquilacin y halogenacin.
La cuantificacin de los picos de los cromatogramas puede llevarse a
cabo por diferentes mtodos (4):
Recorte y pesada del pico que aparece en el cromatograma.

Clculo aproximado de la superficie del pico, como un producto
de la altura del pico, multiplicado por el ancho del pico a la
mitad de su altura. Solo utilizable con picos simtricos.
Determinacin de la superficie del pico con integradores
electrnicos. Este mtodo es el mejor. Sin embargo, se debe
considerar como funciona el integrador, con respecto al
reconocimiento de los picos y de las lneas base.
Regularmente el rea de los picos es proporcional a la cantidad de la

sustancia que le gener. La linealidad de esta relacin se da en
intervalos ms o menos grandes, para cada detector.
VI. 2. 6. Cromatografa de capa delgada

Este mtodo se caracteriza por una buena sensibilidad y su capacidad
para llevar a cabo varias determinaciones al mismo tiempo, adems de
su posible automatizacin parcial, lo cual le hace adecuado para su uso
en los estudios de estabilidad.
288
Las placas previamente preparadas o compradas se aplican con una

solucin de la mezcla por separar. Se colocan en una cmara y se deja
correr el solvente de separacin lentamente sobre la placa. La fase mvil
arrastra entonces a las substancias por separar, a diferentes velocidades
(figura VI. 14). Los fenmenos de adsorcin y desorcin que se dan
sobre la fase estacionaria son los responsables de las diferencias en la
velocidad de arrastre de las diferentes substancias y por lo tanto de su
posicin en el cromatograma, despus de un tiempo. La separacin se
logra por una adsorcin de las substancias a la fase mvil as como por
un reparto o distribucin entre el agua adsorbida sobre la fase
estacionaria y el solvente de separacin.
Frente del solvente
Mancha de referencia
Mancha del frmaco
Lnea de aplicacin
Lmite del solvente
Figura VI. 14. Valoracin cualitativa de un cromatograma en

capa delgada.
La valoracin cualitativa del cromatograma se lleva a cabo a travs de

la medicin del tamao y numero de las manchas que aparecen as
como de la estimacin de su coloracin. El valor del R f y el RSt o Rf
relativo son medidas que identifican a cada sustancia en el
cromatograma. El Rf es el resultado de dividir la distancia desde la lnea
de aplicacin hasta la mancha de la sustancia, entre la distancia desde
la lnea de aplicacin hasta el frente del solvente. El R St es el resultado
de dividir la distancia desde la lnea de aplicacin hasta la mancha de la
sustancia, entre la distancia desde la lnea de aplicacin hasta la
mancha de la sustancia de referencia (18).
La valoracin cuantitativa de una placa desarrollada de TLC puede
hacerse directamente midiendo las manchas sobre la placa o despus
de extraer las manchas correspondientes con un solvente apropiado.
289
Un ejemplo del uso de la cromatografa en capa delgada es el estudio

de la estabilidad del agente inmunomodulador y antiviral clorhidrato del
1,2-O-isopropylidene-3-O-3 (N, N-dimethylamino-n-propyl)-D-
glocofuranosa (I) (19). En este caso, la cromatografa en capa delgada
permiti separar el frmaco de sus precursores y productos de
degradacin. Una excesiva hidrlisis cida produjo la dimetilamino
propilglucosa (III). Las placas de slica gel permitieron separar 7
diferentes substancias cuando se us una fase mvil compuesta por n-
propanol-acetato de etilo-agua-NH4OH, en una proporcin de 6:1:4:1. Los
valores del Rf de las diferentes substancias se dieron en un intervalo de
0.20-0.83. Las manchas se visualizaron con diferentes reactivos, entre
ellos una solucin al 3% de acetato de cobre en cido fosfrico al 18%,
despus de calentar 30 min. a 110 C y cido sulfrico al 50% despus
de calentar 10-15 min. a 120 C.
El anlisis cuantitativo de la cromatografa, del frmaco (I) y su
producto de degradacin hidroltica (III) se llev a cabo rociando las
placas con ninhidrina al 1% en etanol. El frmaco se coloreo de morado,
mientras que el producto de degradacin se coloreo de amarillo. Las
manchas obtenidas se midieron en sus reas, determinado sus
dimetros ortogonales (largo y ancho, uno perpendicular al otro),
multiplicndolos entre s, y luego por , graficndolas contra la
concentracin aplicada. Las concentraciones de las muestras se
obtuvieron interpolando en curvas tipo desarrolladas de la misma
manera, para el frmaco y el producto de degradacin (figura VI. 15).
Una curva tipo ms conveniente se puede trazar si se grafica la raz
cuadrada del rea de la mancha contra el logaritmo de la cantidad de la
sustancia, obtenindose una relacin lineal. De cualquier manera, este
procedimiento es sujeto de cierto error, el cual se estima en 3.1-3.6%
(20).
La figura VI. 16 muestra la relacin antes mencionada para el caso de
la determinacin de la fenacetina, creando la mancha con un reactivo
que forma una coloracin o midiendo directamente bajo luz ultravioleta.
Otra alternativa para estimar las manchas de una placa de
cromatografa estriba en el desprendimiento de cada mancha de la
placa, extrayendo posteriormente su contenido, con los solventes
apropiados y determinado su concentracin espectrofotomtricamnete.
El uso de densitometros para medir la remisin de la luz dirigida a las
manchas de las placas exige la utilizacin de tamaos de partcula del
sorbente muy estrechos, manchas pequeas y de formas uniformes (18).
En general, se recomienda la medicin de la altura del pico ms que la
de la superficie. La valoracin cuantitativa se lleva a cabo aplicando
sobre la misma placa diferentes estndares. Las curvas tipo obtenidas
con los diferentes estndares, con este procedimiento, son curvas (4).
290
REA - ( * a * b (mm2)
Dimetros ortogonales
160 b
a
120
80
40 Producto de
Degradacin
Frmaco
0
0 100 200 300
CANTIDAD APLICADA (mcg)
Figura VI. 15. Curvas tipo para el anlisis cuantitativo, por

TLC, de un frmaco (I) y su producto de degradacin (III),
sobre placas rociadas con ninhidrina. rea = * a * b (19).
12
10
1/2
8 COLOR
LUZ UV
6
0 0.5 1 1.5 2
log (PESO DE FENACETINA)
Figura VI. 16. Relacin entre la superficie de una mancha

cromatogrfica y la concentracin del frmaco aplicado (20).
291
La presentacin de mtodos analticos realizada no es exhaustiva. Es

casi imposible hacer aqu una revisin de todos los mtodos analticos
que podran usarse en los estudios de estabilidad de los medicamentos.
Sin embargo, como conclusin de los mtodos de anlisis mostrados, se
puede decir que la cromatografa de lquidos de alta resolucin con
deteccin ultravioleta es la que mayor uso actual tiene. El uso
preponderante de la HPLC se debe tambin a la aparicin de otros
detectores ms sofisticados (21).
Los detectores de arreglo u ordenamiento de fotodiodos (PAD) tienen
la ventaja de que se puede correr el espectro de absorcin ultravioleta
de la sustancia que se ha separado en la HPLC. Esto hace posible una
identificacin activa del pico y la comparacin de ese pico contra una
biblioteca de espectros de absorcin de diferentes substancias.
Los detectores electroqumicos (ECD) tienen utilidad en la HPLC
cuando los compuestos separados son oxidados en un electrodo de
carbn vtreo, estacionario, contra un electrodo de referencia como el de
Ag/AgCl. Estos detectores tienen como ventajas una gran sensibilidad y
un lmite de deteccin bajo, adems de ser muy selectivos (21)
Si la espectroscopia visible ultravioleta se puede usar para los
estudios de estabilidad, comnmente asociada con algn mtodo de
separacin, este mtodo es ms rpido, consumiendo menos tiempo su
realizacin que otros mtodos cromatogrficos. La espectroscopia de
absorcin tiene como gran desventaja su poca especificidad, aunque
presente los coeficientes de variacin ms bajos entre todos los mtodos
sealados.
Mtodos como la cromatografa de fluidos supercrticos y la
electroforesis capilar de zona (CZE) requieren aun de cierto desarrollo
tcnico, en lo que a productos farmacuticos se refiere.
La cromatografa de capa fina o delgada (TLC) es un mtodo de uso
muy amplio en estudios de estabilidad cualitativos, registrndose sus
resultados como una huella dactilar de los productos de degradacin.
Por otro lado, el uso de la TLC asociada a instrumental computarizado
tiene la ventaja de registrar los espectros de absorcin directamente
desde las manchas separadas en las placas. Estos espectros de
absorcin son similares, aunque no iguales, a los tomados de soluciones
en solventes polares. El lmite de deteccin de la TLC no es tan bueno
como el de la HPLC, sin embargo, se podra mejorar con el uso de placas
con zonas de concentracin (Merck) y con el uso de un desarrollo
automatizado mltiple (21).
Otros mtodos, entre ellos la cromatografa de gases, la voltametra y
aun las titulaciones, tambin podran utilizarse para estudios de
estabilidad, aunque los mas usados son los ya mencionados.
292
VI. 2. 7. Mtodos de anlisis biolgicos

Los productos fitofarmacuticos son agentes teraputicos usados en
tratamientos mdicos convencionales, cuyos ingredientes se derivan de
materias primas de origen vegetal o animal (22).
Adems de las limitaciones analticas, el principal problema de la
evaluacin de la estabilidad de estos preparados estriba en el hecho de
ser sistemas con mltiples componentes, de entre los cuales se hace
una seleccin subjetiva de elementos, para los estudios de estabilidad,
ignorando la interaccin con todo el resto de componentes del producto.
Para este tipo de productos, la lgica de los estudios de estabilidad es
aun ms difcil si los componentes activos no son conocidos o son
dudosos. En estos casos la estabilidad slo puede determinarse a travs
de un ensayo biolgico y consideraciones tecnolgicas farmacuticas.
La variabilidad de los resultados obtenidos con mtodos biolgicos es
mucho ms grande que aquella obtenida con los mtodos qumicos o
instrumentales.
La determinacin biolgica de la estabilidad de una solucin
inyectable de crataegus, como un ejemplo, se determin usando la
actividad farmacolgica, con el mtodo corazn - Langendorff, con
cobayos (22). La figura VI. 17 muestra una excelente estabilidad a largo
plazo, del preparado, con respecto a su actividad farmacolgica.
80
FLUJO CORONARIO (%)
60
50
40 Inicial
30
Despus de
20 36 meses
15
1 : 10 1 : 3. 2 Sin diluir
DILUCIN DEL PREPARADO
Figura VI. 17. Relacin de la dosis contra el efecto de una solucin

inyectable de crataegus, con el mtodo de corazn Langendorff
con cobayos (22).
293
Otro preparado de origen natural es la mixtura pepsini, el mtodo de

anlisis es el registrado en la farmacopea alemana (DAB 6). Este mtodo
comprende la digestin de la clara del huevo. La figura VI. 18 muestra la
baja estabilidad del preparado almacenado a 20 C, comparada con la
almacenada a 3.5 C (22). Como se observa, a 20 C la cantidad de la
clara de huevo sin digerir es mayor, lo cual equivale a una menor
actividad enzimtica, mucho menor que a 3.5 C. La estabilidad de la
actividad de este preparado definitivamente no se puede garantizar.
12
RESIDUO SIN DIGERIR (ml)
20 C
8
3.5 C
0
0 10 20 30
TIEMPO (das)
Figura VI. 18. Estabilidad de mixtura pepsini, medida como sustrato

no convertido (22).
VI. 3. Validez de los mtodos analticos

La precisin y exactitud de los resultados de los ensayos, en los
estudios de estabilidad, determina la confianza que se puede tener en
las predicciones acerca de la estabilidad de los productos.
Para saber que tan sensible es un mtodo, hacemos uso de la
estadstica. Con la estadstica del mtodo, podemos medir su coeficiente
de variacin (CV) y con l, podemos calcular que variacin de la
concentracin inicial puede ser detectada con significacin estadstica;
cuando se realizan 1, 2, 3, o ms ensayos para esa determinacin.
En la tabla VI, 1 se establece una relacin entre el coeficiente de
variacin de un mtodo (CV) y el nmero de ensayos (n) que se realizan
para reconocer una variacin, con respecto al estndar, con una
294
significacin estadstica y con una probabilidad del 95%. Un ejemplo de

su interpretacin sera: Si un mtodo tiene un coeficiente de variacin
de 1% y si realizamos 3 ensayos para sacar como resultado el promedio,
tendremos, con una probabilidad del 95%, la posibilidad de reconocer
una variacin de concentracin 2.5% (5).
Tabla VI. 1. Relacin entre el nmero de ensayos y el

coeficiente de variacin, para reconocer una variacin de
concentracin con respecto al terico o concentracin
inicial, con un 95% de probabilidad (5).
CV 0.1 0.2 0.3 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 5.0

n
2 0.9 1.8 2.7 4.5 9.0 13.5 18.0 22.5 44.9
3 0.25 0.50 0.74 1.2 2.5 3.7 5.0 6.2 12.4
4 0.16 0.32 0.48 0.8 1.6 2.4 3.2 4.0 8.0
5 0.12 0.25 0.37 0.6 1.2 1.9 2.5 3.1 6.2
10 0.07 0.14 0.14 0.4 0.7 1.1 1.4 1.8 3.6
Las ecuaciones usadas para este clculo seran:
_
Promedio = X =Xi (VI. 19)
n
N
_
Desviacin estndar = S =2
( 1 (X1 -
(VI. 20)
X)
n-1
Desviacin estndar porcentual relativa_

o Coeficiente de variacin = CV = (S * 100) / X (VI. 21)
Variacin significativa que sera reconocible con un 95% de

probabilidad y con tres ensayos. (I. C. 95%).
_
I.C. 4.3
95% =X (VI. 22)
(S)
Donde X es los eventos
1.73 o ensayos individuales,
_ X es el promedio de los
mismos y n es el nmero de ensayos realizados.
295
El primer paso en el desarrollo de un mtodo analtico es el establecer

que es lo que se va a medir y que exactitud se desea tener en tales
mediciones. Enseguida se hace una bsqueda en la literatura, se escoge
un mtodo que ser adaptado o se decide ha desarrollar uno nuevo. Una
vez que se ha decidido un bosquejo de cual es el mtodo mas apropiado,
se hacen algunos experimentos para examinar la repetibilidad y la
robustez, describiendo, en trminos generales, el mtodo a seguir.
La informacin mnima necesaria para hablar de un mtodo analtico
incluye (23):
Establecimiento del principio del mtodo de anlisis

Lista de los materiales o reactivos necesarios
Lista detallada del equipo necesario
Lista de los parmetros instrumentales
Descripcin detallada, paso a paso, del procedimiento
Clculos a realizar
La estimacin de la validez de los mtodos analticos significa el

establecimiento de su precisin, exactitud, sensibilidad y robustez.
Usualmente en un intervalo de concentracin del frmaco de 80% a
120% del contenido terico.
Se dice que un mtodo analtico es exacto cuando nos da una
respuesta promedio igual al valor real de las muestras, esto es, que no
hay un error sistemtico o desviacin inherente al procedimiento de
anlisis. La exactitud define la concordancia entre el valor encontrado en
la muestra con el verdadero valor en la misma. La evaluacin de la
exactitud de un mtodo de anlisis tiene como propsito el averiguar la
diferencia entre el promedio de los resultados del ensayo (X prom) y el
verdadero promedio estadstico de la poblacin ().
B = Xprom - (VI. 23)
La B significa bias y es una manera de designar un sesgo o

tendencia. Por ejemplo, para un mtodo para estabilidad por HPLC,
cuando no se puede separar o discriminar un producto de
descomposicin del frmaco, se dice que a ocurrido un sesgo o
desviacin. Un mtodo analtico ser mejor conforme su sesgo sea ms
pequeo (24).
296
La precisin de un mtodo est referida a la desviacin estndar (S),

esto es, entre ms grande sea la desviacin estndar, la precisin ser
peor. La precisin de un mtodo ser mejor conforme la desviacin
estndar sea ms pequea.
La precisin es un trmino que define el patrn de variacin de un
resultado en una muestra uniforme. Es un error al azar. La desviacin
estndar y el coeficiente de variacin son una medida de la precisin.
El trmino exactitud se define tambin a travs de los trminos
selectividad y especificidad. Un mtodo es selectivo y especfico si
discrimina el frmaco de sus compuestos relacionados, de los
precursores de la sntesis y de los productos de degradacin. Esto es,
permitiendo el anlisis del frmaco en presencia de otros componentes
conocidos. Un mtodo selectivo y especfico se denominara indicativo
de la estabilidad. Frecuentemente la especificidad se verifica
comparando los resultados de un material normal contra otro que fue
sometido a condiciones extremas de luz, pH, humedad y calor.
Otros trminos que tambin podran utilizarse para medir la validez de
un mtodo de anlisis son el lmite de cuantificacin, la reproducibilidad
y la repetibilidad. La repetibilidad es la variabilidad de los resultados
dentro de un laboratorio y esta determinada o influenciada por el
analista, las condiciones ambientales y el equipo utilizado. La
reproducibilidad sera la variacin entre laboratorios. La suma de la
variabilidad producto de la reproducibilidad y la repetibilidad es
considerada una medida de la robustez del mtodo de anlisis (23). El
limite de cuantificacin es la concentracin ms baja de analito o
frmaco que puede ser cuantificada con una precisin y exactitud
adecuadas, por el procedimiento analtico.
La validez de un mtodo incluye tambin l haber demostrado que los
componentes excipientes de la formula no interfieren en el ensayo del
frmaco, ni aun siquiera despus de degradarse.
El porcentaje de recobro es un trmino que define la cantidad de
frmaco que se recupera desde una matriz de excipientes. Es una
medida de la posible interaccin del frmaco o analito con los dems
componentes de la frmula, ocurrida durante el procesamiento de la
muestra, para su anlisis.
La linealidad aplica solo a mtodos cuantitativos y es una
demostracin de una respuesta lineal en un intervalo de evaluacin, por
ejemplo de 80% a 115% del valor terico, para un mtodo de control
(25). Para uno de estabilidad el intervalo empezara quiz desde 25%.
Si la respuesta de un mtodo es lineal, sta se puede describir con la
ecuacin de una lnea recta, por ejemplo la relacin entre la densidad
ptica y la concentracin.
297
Y=b*X+a
(VI. 24)
Es deseable que la respuesta lineal pase por el origen de los ejes

cartesianos, esto es, que a = 0. En la validacin de un mtodo los
parmetros de regresin, la pendiente (b) y la constante (a) se valoran
estadsticamente, calculando sus limites de confianza al 95% (24).
Como un ejemplo de los parmetros de validacin considerados como
adecuados, se presentan los del caso de un mtodo por HPLC, para la
estabilidad fotoqumica del frmaco ditranol (26):
linealidad en un intervalo de 1-5 mg/100 ml

Selectividad () = 1.22 (ditranol/producto de degradacin -
dantron)
Factor de capacidad k' = 4.2 (ditranol)
Resolucin (R) = 1.76 (ditranol/producto de degradacin -
dantron)
Recobro = 98.1-101.7%; sobre muestras de ditranol en matrices
semislidas
Precisin (Srel) = 1.11%, con 6 repeticiones
linealidad (coeficiente de correlacin) = 0.9998
VI. 4. Bibliografa
1. Tingstad, J. E. Conferencia: The design of stability studies in product
development. En Colorado Spring, en 1965. A travs de Thoma, K.
Arznaimittelstabilitt. Frakfurt-Alemania, (1978).
2. Chafetz, L. Stability-indicating assay methods for drugs and their
dosage forms. J. Pharm. Sci. 335-345 (1971).
3. Grimm, W. Pharm. Ind. 79 (1973). A travs de Grimm, W. y Schepky,
G. Stabilittsprfung in der pharmazie. Editio Cantor, Aulendorf-
Alemania, (1980).
4. Rcker, G., Neugebauer, M. y Willems G. C. Instrumentelle
pharmazeutische Analitik. Wissenschaftliche Verlagsgesellschaft,
Stuttgart (1988).
5. Grimm, W. y Schepky, G. Stabilittsprfung in der pharmazie. Editio
Cantor, Aulendorf-Alemania, pp. 48-67 (1980).
298
6. Plamondon, J. E. y Nairn, J. G. The effect of surfactants on the rate of

decarboxylation of p-aminosalicylic acid in acidic aqueous solutions. J.
Pharm. Sci. 86 (2), 205-208 (1997).
7. Lin, S. Y. y Kawashima, Y. Kinetic studies on the stability of
indomethacin in alkaline aqueous solution containing poly
(oxyethylene) poly (oxypropilene) surface-active block copolymers.
pharm. Acta Helv. 60 (12), 345-350 (1985).
8. Garret, E. R. y Carper, R. f. Prediction of color stability in
pharmaceutical preparations I. Color stability in a liquid multisulfa
preparation. J. Am. Pharm. Assoc. 44 (8), 515-518 (1953).
9. Hajratwala, B. The stability of FDC blue No. 1. Drug & Cosmetic 136
(2), 50-53 (1985).
10. Steuer, W. A critical review of high-performance liquid
chromatography, supercritical fluid chromatography and capillary
zone electrophoresis in drug analysis. En: Grimm, W. y Krummen, K.
Stability testing in the EC, Japan and the USA. Wissenschaftliche
11. Bridle, J. H. y Brimble, M. A stability indicating method for
dipiridamole. Drug Dev. Ind. Pharm., 19 (3), 371-381 (1993).
12. USP 23 NF 18. United States Pharmacopoeial Convention, Inc.,
Rockville, MD-USA, pp. 1774-1779 (1995).
13. Caviglioli, G., Parodi, B., Cafaggi, S., Bignardi, G. y Romusi, G.
Stability indicating HPLC assay for retinoic acid in hard gelatine
capsules containing lactose and as bulk drug substance. Drug Dev.
Ind. Pharm. 20 (15), 23925-2408 (1994).
14. Kubala, T.,Gambhir, B. y Borst, I. A specific stability indicating HPLC
method to determine diclofenac sodium in raw materials and
pharmaceutical solid dosage forms. Drug Dev. Ind. Pharm. 19 (7),
749-757 (1993).
15. Shah, Y., Joshi, S., Jindal, K. C. y Khanna, S. Stability indicating
HPLC method for Ribavirin and its pharmaceutical dosage forms. Drug
Dev. Ind. Pharm. 20 (1), 85-91 (1994).
16. Roston, D. Supercritical fluid extraction - supercritical fluid
chromatography for analysis of a prostaglandine : HPMC dispersion.
18 (2), 245-255 (1992).
17. Cone, E. J., Gorodetzky, C. W., Darwin, W. D. y Buchwald, W. F.
Stability of the 6,14-endo-Ethanotetrahydrooripavine analgesics: Acid-
catalyzed rearrangement of Buprenorphine. J. Pharm. Sci. 73 (2), 243-
246 (1984).
18. Thoma, K. Arzneimittelstabilitt, Frankfurt-Alemania, pp. 329-337
(1978).
299
19. Garret, E. R., Van Peer, A., Mahrous, H. y Schuermann, W.

Properties, stability, assay and preliminary pharmacokinetics of
inmunomodulatory 1,2-O-isopropylidene-3-O-3(n,N-dimethylamino-
n-propyl)-D-glucofuranose hydrochloride. J. Pharm. Sci. 71 (4) 387-
395 (1982).
20. Purdy, S. J. y Truter, E. V. Lab. Practise 500 (1964). A travs de 18.
21. Ebel, S. Analytical methods of stability testing for chemically
defined substances. En: Grimm, W. Stability testing of drug products.
Wissenschaftliche Verlagsgesellschaft, Stuttgart Alemania, pp.170-
186 (1987).
22. Harnischfeger, G. Analytical procedures for stability testing of
phytopharmaka and pharmaceutical products derived from natural
compounds. En: Grimm, W. Stability testing of drug products.
Wissenschaftliche Verlagsgesellschaft, Stuttgart Alemania,
pp.187208 (1987).
23. Pasteelnick, L. A. Analytical methods validation. En: Berry, I. R. y
Nash R. A. Pharmaceutical process validation, 2 Edic. Marcel Dekker,
New York, pp. 411-428 (1993).
24. Carstensen, J. T. Drug stability. 2 Edic., Marcel Dekker, New York,
pp. 321-324 (1995).
25. Willig, S. H. y Stoker, J. R. Good manufacturing practices for
pharmaceuticals. Marcel Dekker, New York, pp. 141-146 (1997).
26. Thoma, K. y Holzmann. Photostability of dithranol. Eur. J. Pharm.
Biopharm. 46, 201-208 (1998).
300
VII
PROGRAMAS DE ESTABILIDAD DE
MEDICAMENTOS
VII. 1. Consideraciones generales
290
301
VII. 2. Programas de estabilidad en la preformulacin
291
VII. 3. Programas de estabilidad en la fase de formulacin
298
VII. 4. Programas de estabilidad para un producto propuesto
o terminado
304
VII. 5. 1. Pruebas de estabilidad posteriores al registro
320
VII. 6. Bibliografa
330
VII
PROGRAMAS DE ESTABILIDAD DE MEDICAMENTOS
VII. 1. Consideraciones generales

Programar significa la exposicin de las intenciones, mas o menos
detalladas, de las distintas partes de un trabajo a realizar, dando horario
y fecha a las actividades que sirven ciertos medios o instalaciones. La
programacin puede considerarse tambin como un proceso sistemtico
de establecer actos y pasos que han de darse, asignando
302
responsabilidades, por esos actos, de modo que los objetivos planteados

puedan cumplirse (1, 2).
Los objetivos generales de los estudios de estabilidad son el
establecer las especificaciones, los mtodos analticos y los criterios
para evaluar las variaciones de las caractersticas de un producto bajo
condiciones especficas y a intervalos de tiempo determinados.
La diversidad de productos y de la complejidad de los parmetros de
estabilidad hace difcil el establecimiento de programas de estabilidad
rgidos o de validez universal. Sin embargo, existen ciertos conceptos
que tienen aceptacin general. El estudio de la estabilidad de un
producto significa bsicamente la observacin de un proceso evolutivo.
El proceso inicia con el desarrollo mismo del producto y continua hasta
la verificacin o control de la estabilidad de un producto que ya se
encuentra en el mercado.
Las fases del desarrollo de un producto en las que

participan estudios de estabilidad:
Preformulacin
Desarrollo de la formulacin
Producto formulado o propuesto
Producto nuevo
Producto establecido
Revisin o ajuste de un producto
Los resultados de los estudios de estabilidad de cada fase continan y

se complementan con los de las restantes fases, de tal manera que
forman un todo en su conjunto.
Los programas que se pueden establecer, para estudiar la estabilidad
en cada una de estas fases, se disean de acuerdo a ciertos objetivos
particulares a cada una de ellas. Aunque, en trminos generales, este
diseo pueda establecerse con un esquema general para todas ellas (3).
303
Elementos generales de un programa de estabilidad:
Consideraciones generales
Pruebas a realizar
Fechas de ensayo
Definicin de las muestras, lotes y envases
Formas de evaluacin de los datos
Aunque los elementos de un programa de estabilidad sean generales,

los objetivos de cada estudio son particulares, siempre atendiendo a
principios y juicios cientficos. Las actividades por desarrollar en cada
estudio en particular tambin dependen de la informacin que se
encuentre disponible, ya sea internamente, esto es, informacin dentro
de una cierta compaa o externamente, en la literatura farmacutica.
VII. 2. Programas de estabilidad en la preformulacin

Los estudios de estabilidad en la fase de preformulacin tienen el
propsito de establecer, de una manera gruesa, las sensibilidades de un
frmaco contra condiciones o parmetros de almacenamiento, con el fin
de establecer la necesidad de ciertas condiciones de almacenamiento
especficas para un frmaco. Se determinan, de manera general, los
efectos del calor o temperatura, de la luz, de la humedad, entre otros.
Los estudios de interaccin o compatibilidad entre el frmaco y ciertos
excipientes o ciertos componentes de envases tambin podran incluirse
en los estudios de estabilidad de la preformulacin.
Los estudios de estabilidad en la preformulacin son estudios a corto
plazo y en condiciones de almacenamiento extremas, que tratan de
mostrar sus efectos de una manera burda sobre los frmacos.
Los programas de estabilidad como se ha dicho, requieren de
condiciones determinadas, las cuales pueden ser principalmente
variaciones de temperatura y de humedad, dejndose esta ltima, por lo
regular, para analizar la efectividad del empaque en proteger el
producto del medio ambiente. Otras variables como el efecto de la luz,
la fuerza inica, el pH y otros, es ms fcil y deben hacerse en la etapa
de preformulacin sobre el frmaco puro.
304
Los criterios para medir la estabilidad en esta fase seran la apariencia

el contenido de principio activo y el anlisis de los productos de
degradacin. El periodo de tiempo de las pruebas podra extenderse
hasta 3 meses. Los intervalos de anlisis se determinaran de acuerdo al
comportamiento del producto. Como resultado de estos estudios se
espera obtener un perfil de estabilidad del frmaco que, en su caso, nos
permita definir las condiciones de su manipulacin y almacenamiento
as como las precauciones a tomar para su diseo y fabricacin en
determinadas formas farmacuticas (4). Los resultados nos permitiran
tambin fijar fechas o periodos de reanlisis.
Las condiciones de almacenamiento que se podran sugerir seran: 21
C/45% HR, 25 C/60% HR, 25 C/75% HR, 30 C/70% HR, 40 C/75% HR,
cuando se usen recipientes abiertos. Con envases cerrados se podran
sugerir: 40 C, 50 C y 60 C.
Un programa en preformulacin que examine los diferentes factores
que influyen la estabilidad incluira (5):
1. Efecto de la temperatura:
Almacenaje a 40 C, 50 C y 60 C, evaluando su efecto sobre la apariencia,
el contenido de principio activo y los productos de degradacin a las 0, 4, 8 y
12 semanas. Cuando no hay un empaque definido se recomiendan frascos
de vidrio con tapa de rosca.
2. Efecto de la temperatura y humedad:
El frmaco se almacena se almacena en recipientes abiertos hasta
alcanzar el equilibrio con las condiciones de almacenamiento de 21
C/45% HR, 25 C/60% HR, 25 C/75% HR, 30 C/70% HR, 40 C/75%
HR. La muestra con mayor contenido de humedad se cierra y se
somete a estabilidad como se describe en 1.
3. Efecto de la temperatura, humedad y concentracin del frmaco:
Se preparan soluciones o suspensiones del frmaco al 1% y al 5%, se
almacenan en frascos de vidrio con tapa de rosca y se somete a
estabilidad como se describe en 1.
4. Efecto del pH:
Se preparan soluciones acuosas al 1% en soluciones amortiguadoras
McIlvaine (cido ctrico 0.1M, fosfato disdico 0.2M) con pH de 3, 4, 5, 6
y 7, se almacenan a 60 C y se analizan a las 0, 4, 8 y 12 semanas, en
su apariencia, contenido y productos de degradacin.
5. Efecto del pH y concentracin de la solucin amortiguadora:
305
Se prepara una solucin al 1%, al pH ms conveniente de los

analizados en el prrafo anterior pero en amortiguador con el doble de
concentracin (s es cido ctrico 0.2M y s es fosfato disdico 0.4M). Se
almacena en matraz volumtrico.
6. Efecto de oxidacin:
Se prepara una solucin acuosa al 1% en agua oxigenada al 0.3%, en
un matraz volumtrico. Se evala su apariencia, su contenido y sus
productos de degradacin a las 0, 4, 8 y 12 semanas, despus de
almacenarse a 40 C y 50 C.
7. Efecto de la luz:
Una solucin acuosa (u orgnica) al 1%, se almacena en vidrio incoloro
y se somete al efecto de una lmpara de xenn. Se evala a las 8, 16 y
24 horas, en su apariencia, contenido y productos de degradacin.
El resumen de los resultados debe incluir un perfil de estabilidad as

como los mtodos usados en la evaluacin. Si existiese polimorfismo del
frmaco, ste se examinara sobre todos los restos slidos de las
pruebas, por el mtodo del anlisis trmico diferencial (DTA), al final del
almacenamiento.
En ocasiones se determina el efecto de las diversas variables y sus
interacciones, en un diseo factorial. Un ejemplo de ello es la
determinacin del efecto conjunto de la temperatura (20 C y 70 C), el
pH (2, 7 y 12), la presencia de oxgeno (solucin burbujeada 5 minutos
con nitrgeno o con oxgeno) y la luz (oscuridad o luz fluorescente de
250 Wats, a 50 cm de distancia) sobre la estabilidad de soluciones de
norfloxacina (10.0 mcg/ml) en solucin de metanol al 10% (6).
Como se puede observar en la figura VII. 1, el efecto del pH no cambia
mucho con la modificacin de las otras variables, cuando se encuentra
en condiciones cidas (pH = 2) o alcalinas (pH = 12). Sin embargo,
cuando la solucin es neutra (pH = 7) los cambios provocados por la luz
y el oxgeno son muy marcados. La norfloxacina es ms o menos estable
en condiciones cidas y alcalinas. Los resultados muestran tambin que
la presencia simultanea del oxgeno y de la luz tiene un efecto cataltico
sobre la descomposicin de la norfloxacina, provocando un mximo de
su degradacin cuando las soluciones presentan un pH neutro (pH = 7).
Concentracin
La norfloxacina es ms estable a valores de pH cidos o alcalinos, en la
inicial
oscuridad, en la ausencia de oxgeno y a bajas temperaturas.
306
Figura VII. 1. Efecto conjunto del pH, luz y oxgeno sobre la

10
Nitrgeno-
Obscuridad
NORFLOXACINA (mcg/ml)
Nitrogeno-
9 Luz
Oxgeno-
Obscuridad
Oxgeno-Luz
8
Nitrgeno-
Obscuridad
(20 C)
7
0 4 8 12
pH
estabilidad de una solucin acuosa de metanol al 10% sobre la

estabilidad de norfloxacina (10 mcg/ml), despus de 48 horas a 70
C (6).
Aunque en realidad los estudios de compatibilidad pertenecen a la

fase de formulacin, muchos autores los consideran parte de la
preformulacin, por lo cual haremos mencin aqu de este tipo de
pruebas.
En los ltimos 40 aos, la prctica de la tecnologa farmacutica ha
hecho uso de las mezclas de frmacos con excipientes, con el fin de
predecir posibles inestabilidades, aunque nunca se han presentado
evidencias fehacientes de que realmente cumplan con este cometido.
Frecuentemente se han probado mezclas binarias del frmaco con cada
excipiente, lo cual se supone sea equivalente a lo que pasara en una
frmula con todos sus excipientes. Esta suposicin es solo parcialmente
valida. Es de notarse que algunas incompatibilidades pueden conocerse
sin experimentacin, consultando adecuadamente la literatura
correspondiente.
Los estudios de compatibilidad frmaco - excipiente se pueden
describir con ciertos atributos generales como (7):
Preparacin de la muestra
Diseo estadstico
307
Mtodo de anlisis
Para la preparacin de la muestra se podra suspender la mezcla, del

frmaco con el excipiente, en un solvente favorable a la disolucin del
principio activo, por ejemplo isopropanol, cloroformo, acetona, cloruro de
metileno o agua. Tambin se podra preparar la mezcla triturando el
excipiente con el frmaco, aunque si la trituracin es muy violenta, se
corre el riesgo de alterar la cristalinidad, volviendo ms reactivos los
materiales. La preparacin de tabletas de las mezclas tambin se ha
utilizado, para tener un contacto ms ntimo de los componentes. La
proporcin del excipiente en las mezclas depende de la proporcin en
que regularmente se esperara se usara ste en las formulaciones. Por
ejemplo, para lubricantes se recomienda usar entre 5 y 50 partes del
frmaco, por una parte del lubricante. Para otros excipientes se
recomiendan concentraciones de 1:1 o de 5 partes de excipiente por una
del frmaco, esto depende, entre otros, de la posible dosificacin del
frmaco; s preparsemos una tableta con 750 mg del frmaco,
prcticamente no llevara excipientes. Por el contrario, si la tableta tiene
una concentracin del frmaco de menos de 1 mg, entonces seria
prcticamente de puro excipiente.
Los diseos estadsticos podran utilizarse para reducir el nmero de
anlisis. Se podran usar diseos factoriales parciales o completos,
utilizando una regresin para identificar las proporciones convenientes
de los excipientes.
Las condiciones de almacenamiento varan ampliamente en
temperatura y humedad, pudiendo darse el almacenamiento en
muestras en envases cerrados o abiertos y en condiciones similares a
los mencionados en la primera parte de este subttulo.
Los mtodos de anlisis son muy variados y podran incluir cualquiera
de los mencionados en el captulo anterior.
Aunque en el captulo anterior no se menciona ampliamente la
calorimetra diferencial, sta se podra usar convenientemente para los
estudios de compatibilidad, aunque los estudios realizados a
temperaturas muy elevadas podran cambiar el mecanismo de las
reacciones que realmente ocurren a temperatura ambiente. Cuando esta
tcnica se correlaciona con la degradacin de un frmaco, se puede usar
para distinguir entre los excipientes que formaran formulaciones
estables o inestables, con el frmaco en cuestin.
Varios autores han usado las tcnicas de calorimetra diferencial de
barrido (DSC) y el anlisis trmico diferencial para estudiar las
interacciones entre frmacos y excipientes. Cuando se considera que los
308
estudios de interaccin de los frmacos con los eventuales excipientes

que se usen en su formulacin, son parte de los estudios de
preformulacin, el anlisis calorimtrico puede darnos informacin
acerca de posibles incompatibilidades tanto fsicas como qumicas entre
un frmaco y determinados excipientes. En trminos generales, la DSC
permite distinguir entre aquellos excipientes que es posible que puedan
causar problemas y aquellos que probablemente no los causen, durante
la formulacin. Sin embargo, para validarlos resultados de DSC, se
requiere que se utilicen otras tcnicas conjuntamente.
Un ejemplo de este tipo de estudios es el de la indometacina con
diferentes excipientes (8). En este estudio se encontr que mientras que
algunos excipientes no mostraron ninguna interaccin con la
indometacina (Avicel, Carbomer, fosfato de calcio anhidro y metocel),
otros mostraron cambios muy importantes en los termogramas, los
cuales podran atribuirse a interacciones potenciales con el frmaco
(cido esterico, estearato de magnesio, polietilenglicol 8000 y fosfato
de calcio dihidratado).
Las pruebas se llevaron a cabo en viales mbar sellados, almacenados
durante 30 das a 27 C, como referencia y a 50 C para acelerar
posibles cambios. Las mezclas con los diferentes excipientes, obtenidas
por agitacin, fueron en una proporcin de 1:1. Para el anlisis por DSC
se utilizaron muestras de las mezclas de entre 3.0 mg y 4.0 mg, en
recipientes hermticamente sellados, calentados a una velocidad de 10
C/minuto.
El caso particular de la interaccin entre la indometacina y el
polietilenglicol 8000 (PEG), despus de un mes a 50 C, se observa en
los termogramas de la figura VII. 2, donde el PEG presenta una
transicin endotrmica a 59.4 C (187.1 J/g). La mezcla fsica del PEG
con la indometacina muestra un pico endotrmico a 63.6 C, 4 C mayor
que el pico caracterstico del PEG, acompaado de un calor de fusin
similar al mencionado y una transicin poco definida a 132.1 C, entre
125 C y 135 C. Por otro lado, el pico correspondiente a la indometacina
desapareci totalmente, lo cual sera indicativo de una solubilizacin
total de la indometacina, en el PEG fundido y por ello, sera de esperarse
una fuerte interaccin de estos componentes, tambin en el estado
slido.
Estos resultados nos permiten inferir que la DSC podra quiz
identificar posibles interacciones entre frmacos y excipientes, en
estado slido, en la fase de preformulacin. La extensin de las
interacciones observadas fue desde un corrimiento en el punto de fusin
de la indometacina, hasta la desaparicin del pico de fusin del frmaco,
aunque cabra la pregunta de s estas interacciones son solo fsicas o lo
son tambin qumicas.
309
100
PEG 8000
75
FLUJO DE CALOR
Indometacina
50
PEG-Indom.
25
0
0 50 100 150 200
TEMPERATURA (C)
Figura VII. 2. Representacin esquemtica de los termogramas de

DSC para observar posibles interacciones entre polietilenglicol 800
(PEG) e indometacina, despus de almacenarse 1 mes a 50 C (8).
Las pruebas a largo plazo con el principio activo solo quiz podran
considerarse tambin en la fase de preformulacin, ya que es una
investigacin de estabilidad del principio activo solo. Sin embargo, los
objetivos seran diferentes a los ya mencionados para una fase de
preformulacin. Los objetivos de las pruebas a largo plazo seran la
confirmacin de un estudio cintico acelerado, para determinar una
fecha de reanlisis. En las pginas 25-28 se ha mencionado un programa
especfico para la zona climtica II. Para cubrir cualquier zona climtica
en el mundo, se hace el estudio para las peores condiciones, esto es,
para la zona climtica IV. La tabla VII. 1 muestra un programa para
determinar la estabilidad a largo plazo de un frmaco puro en la zona
climtica IV, lo que es equivalente a una zona climtica en cualquier
parte del mundo.
Respecto a las condiciones de almacenamiento, los equipos usados
para controlar la temperatura debern ser capaces de mantener
variaciones menores o iguales a 2 C y una humedad relativa con una
variacin menor o igual al 5%. Las suspensiones de la temperatura y
humedad por ms de 24 horas debern describirse en los reportes de
resultados, indicando la repercusin que le asigna a estas suspensiones
del funcionamiento del equipo, sobre los resultados del estudio (9).
Estas pruebas se realizan con 3 diferentes lotes del frmaco,
fabricados por lo menos a escala piloto y usando los mismos mtodos de
sntesis que sern usados en la manufactura regular del producto.
Aunque posteriormente tambin deban someterse a la misma prueba los
310
3 primeros lotes de produccin industrial regular. Se usarn como

criterios de evaluacin la apariencia, el contenido, los productos de
descomposicin y las propiedades fsicas. Las tolerancias aceptables
sern aquellas definidas en las especificaciones de las pruebas o
ensayos. Los recipientes usados sern aquellos de uso comercial para el
producto.
Tabla VII. 1. Periodos de almacenamiento y ensayos a realizar para un

frmaco puro en pruebas de estabilidad a largo plazo, para la zona
climtica IV (5).
Temp. Hum. Rel. Periodos de almacenamiento y anlisis

( C) (%) (Meses)
0 3 6 9 12 18 24 36 48 60
30 70 X X X X X X X X X
40 75 X X
La evaluacin de los resultados se har, para cada lote individual,

comparando los cambios observados contra los resultados del anlisis
inicial, para determinar que tanto han cambiado, tanto dentro de una
condicin de almacenamiento as como comparando los cambios en
funcin de las diferentes condiciones de almacenamiento. Los resultados
de los diferentes lotes se compararan uno contra los otros, para
observar diferencias de lote a lote.
Las fechas de reanlisis y las condiciones de almacenamiento
resultantes del estudio de estabilidad debern indicar las condiciones de
almacenamiento particulares del frmaco, sealando intervalos
especficos, por ejemplo de temperatura y humedad. Trminos ambiguos
o no bien definidos como temperatura o condiciones ambientales no son
aceptables.
El reporte final acerca de la estabilidad del frmaco a largo plazo
deber incluir los datos de identificacin correspondientes a cada lote,
las especificaciones de las pruebas de estabilidad, una valoracin o
juicio acerca de los mtodos analticos y los resultados obtenidos con
ellos y la determinacin de una fecha de reanlisis.
311
VII. 3. Programas de estabilidad en la fase de formulacin

La fase de formulacin o establecimiento de una frmula
(establecimiento de los excipientes y sus concentraciones) y de los
procedimientos de fabricacin incluye tambin, en lo que se refiere a
estudios de estabilidad, la obtencin y evaluacin del envejecimiento de
las muestras o productos necesarios para estudios preliminares clnicos,
para la determinacin de la seguridad y eficacia de un producto.
Los datos obtenidos acerca de la reactividad propia de un
determinado frmaco, en la fase de preformulacin, se suman aqu al
efecto de la combinacin del frmaco con varios excipientes y variables
de procesamiento. Se busca, adems, un sistema de envase y tapa que
minimicen las reactividades de los frmacos y la determinacin de los
posibles factores que limiten la estabilidad del producto formulado.
El estudio de estabilidad en esta fase es a corto plazo. Estudios
acelerados que buscan cambios gruesos de la estabilidad que permitan
comparar diferentes frmulas. Las variables a medir son la potencia del
frmaco, productos de degradacin, perfil de liberacin del frmaco,
propiedades fsicas y otras caractersticas propias de cada forma
farmacutica.
Las condiciones de almacenamiento incluyen condiciones exageradas
de temperatura, luz y humedad, entre otros. Los periodos de evaluacin
sern funcin de la velocidad de degradacin del frmaco, con muestras
representativas de un lote completo. Los resultados se valoran de una
manera flexible, haciendo una comparacin, entre las diferentes
frmulas, de las velocidades observadas en los cambios de las diferentes
variables.
La evaluacin de los resultados se hace separando la estabilidad
organolptica y fisicoqumica, donde no se aplican las leyes cinticas, de
aquellas en las cuales si se aplican, que son las de la estabilidad
qumica, principalmente del frmaco y de los conservadores.
Las pruebas de estabilidad organolpticas y fisicoqumicas, para
productos slidos, se hacen almacenando los productos en recipientes
abiertos, hasta que se alcance un equilibrio entre el medio ambiente y
las formas farmacuticas.
Un ejemplo de programacin de la estabilidad de formas
farmacuticas slidas sera la estabilidad de tabletas de CU 32-085 (10):
Almacenamiento durante 3 meses

Temperatura de 30 C/75% de H. R., y a 35 C y 50 C
Exposicin a la luz de una lmpara de xenn, en frascos mbar
Ciclamiento de temperaturas
312
Los parmetros determinados fueron la apariencia, los productos de

degradacin y el contenido de principio activo intacto. Aunque la
determinacin de los productos de degradacin podra ser ms confiable
que la determinacin del contenido de principio activo, en realidad se
complementan ya que podra darse el caso de no detectar o no poder
separa algn producto de degradacin. Cuando se comparan diferentes
frmulas no necesariamente todas presentan los mismos productos de
degradacin. El balance de las dos determinaciones nos permite una
estimacin ms certera de las degradaciones, aunado a la evaluacin
organolptica.
Un programa ms completo, para formas de dosificacin slidas sera
(5):
Almacenamiento durante 3 meses

Temperatura de 21 C/45% de H. R., 25 C/60%, 25 C/75%, 30
C/70% y 40 C/75%, para estabilidad organolptica y
fisicoqumica (apariencia, elasticidad [para cpsulas], peso
promedio, peso promedio de llenado [para cpsulas], dureza
[para tabletas], tiempo de desintegracin y tiempo de
disolucin. Adems
de temperaturas de almacenamiento de 40 C, 50 C, 60 C y
70 C, para muestras sin tratamiento previo y para las muestras
de 25 C/75% H. R., despus de equilibrarse, para estudios de
estabilidad qumica y apariencia, tiempo de desintegracin y
peso promedio.
Exposicin a la luz de una lmpara de xenn, en recipientes
abiertos, por 24 horas, examinando la apariencia, los productos
de descomposicin y el contenido en el frmaco.
Cuando se utilizan temperaturas elevadas, con el fin de acelerar la

degradacin, cabe recordar que podran ocurrir reacciones que de otra
manera no se daran a temperatura ambiente, por lo que su uso debe
hacerse con cuidado. En un estudio con tabletas de carbamacepina, se
observ crecimiento de cristales sobre la superficie de las tabletas,
cuando se almacenaron a 50 C y 80 C. Sin embargo, este efecto no se
observ a 35 C. Se cree que este efecto fue causado por la presencia
en las tabletas del cido esterico, como lubricante, el cual fundi a las
temperaturas elevadas, disolviendo la carbamacepina y permitiendo su
posterior recristalizacin. Otro caso es el de las tabletas de maleato de
enalapril, las cuales, cuando se almacenan a 40 C y 75% de H. R., en
recipientes abiertos, mostraron una degradacin del 10% en 3 meses,
313
mientras que si se protegen de temperaturas y humedades relativas

elevadas, se conservan sin ningn problema (11).
Respecto al efecto de la luz sobre los productos farmacuticos, dentro
del texto se han utilizado diferentes unidades, las cuales corresponden a
las utilizadas en las citas originales. Sin embargo, es de notarse la
tendencia hacia el uso de unidades de energa. Los cuantos o cuanta
(singular cuantum) de energa electromagntica estn determinados por
la constante de Planck que multiplica a la longitud de onda (E = h/) y se
denominan fotones. El trmino efecto de la luz sobre la estabilidad se
ha considerado que debiera cambiarse por un uso exclusivo de pruebas
de fotoestabilidad y que, en trminos generales, se utilicen los
conceptos de la terminologa fotoqumica. Entre otros, la definicin del
nmero de molculas que reaccionan por fotn absorbido, para
establecer la extensin de una fotoreaccin (12).
Para productos semislidos, las muestras se colocan en tubos
estndar, por periodos de hasta 4 semanas, a 10 C, para determinar si
se desarrollan cambios que no fuesen reversibles a temperatura
ambiente. Los parmetros a evaluar en un semislido son la apariencia,
el tamao de partcula (s es que hay partculas suspendidas), posibles
recristalizaciones y la consistencia.
Las condiciones de ciclamiento para determinar inestabilidades fsicas
y organolpticas se hara cambiando cada 24 horas entre una
temperatura alta y una baja, por ejemplo 4 y 40 C. Otra prueba se
realizara con los tubos invertidos, para examinar otras interacciones con
el empaque, almacenando a 40 C durante 12 semanas, examinando al
final las partes baja, media y alta del envase, cortndolo, para medir el
contenido en principio activo, en conservadores y en productos de
degradacin de los mismos.
La estabilidad qumica de los semislidos considerara para su
determinacin (5):
Temperaturas de 30 C, 40 C, 50 C y 60 C
Tiempo de hasta 12 semanas (4 anlisis). Para evitar tomar
muestras separadas que alteren el contenido, se pesan las
cantidades por analizar desde antes de almacenarlas,
colocndose en matraces volumtricos.
Parmetros a evaluar: apariencia, olor, pH, contenido en activos,
contenido en conservadores y productos de descomposicin de
ambos.
314
En el caso de algunos productos como los semislidos quiz se podra

considerar como ms conveniente el hacer pruebas fsicas, las cuales
son crticas en ellos, antes de hacer las pruebas qumicas. Pruebas que
han demostrado buenos resultados en la prediccin de las estabilidades
a largo plazo son la termoestabilidad a varias temperaturas como 20oC,
30 C, 40 C y 50 C, a tiempos de almacenamiento de 14 y 28 das y el
uso de la centrifugacin para acelerar la separacin de sistemas de mas
de una fase, adems de la determinacin del pH y del tamao de
partcula. Los parmetros a evaluar seran la apariencia, la prueba de
extensin o distribucin, la viscosidad y la conductividad (10).
Para soluciones, por ejemplo las inyectables, se examinaran factores
como la apariencia, la claridad y el pH, almacenando a 10 C por un
lapso de hasta 4 semanas. Esto con el fin de comprobar la estabilidad
organolptica y fisicoqumica. Para la estabilidad qumica, las
condiciones y parmetros del estudio seran:
Temperatura: 40 C, 50 C, 60 C y 70 C
Tiempo: hasta 12 semanas (4 anlisis)
Empaque: empaque original (ampolleta, vial) o frasco de tapn
esmerilado
Parmetros: Apariencia, claridad, pH, contenido de activo y de
productos de degradacin
Para la fotoestabilidad, las muestras en el empaque original se

irradiaran con una lmpara de xenn por un periodo de hasta 24 horas,
examinando su apariencia, el contenido en principio activo y en
S el inyectable se encuentra envasado en viales, los viales se
almacenan en posicin invertida, para examinar su interaccin. Las
condiciones de almacenamiento seran de 40 C durante 12 semanas,
examinando la apariencia, la claridad, los productos de descomposicin,
el contenido en activo y las substancias extradas desde el tapn, si es
que las hubiere. En el caso de emulsiones o suspensiones se aplicara lo
mismo.
La mayora de las pruebas aceleradas o en condiciones exageradas se
llevan a cabo regularmente en los empaques estndar o normales, con
el fin de conocer la proteccin que los posibles empaques de mercadeo
puedan proporcionar a los productos en estudio.
Existen varios tipos de materiales y empaques y es difcil saber desde
el principio que tipo de empaque se usarn, cual de ellos dar mayor
proteccin y tendr mayores ventajas econmicas. Cuando no se sabe
315
que empaque se utilizara se podra tomar como referencia la siguiente

lista:
Para formas farmacuticas slidos: Frasco de vidrio con tapa de

rosca
Para formas de dosificacin semislidas: tubos con laqueado
interno, matraces volumtricos pequeos
Para formas farmacuticas lquidas: matraces volumtricos de
25 ml
Particularmente para las formas de dosificacin slidas, se buscan

empaques que brinden proteccin contra la humedad. El tipo de
empaque que se selecciona depende de la sensibilidad mostrada por el
producto, contra la humedad. Regularmente no se esperan interacciones
entre el material de empaque y las formas de dosificacin slidas.
En los ltimos aos se han popularizado mucho los empaques de
burbuja o blisters, tambin conocidos como push through packaging
(PTP), principalmente con PVC tanto opaco como translucido. El PVC se
usa tambin como pelcula recubierta con cloruro de polivinilideno
(PVDC) o policlorotrifluoroetileno (PCTFE), para aumentar la proteccin
contra la humedad. Aunque su proteccin contra la humedad
ciertamente es menor que la de los envases de vidrio. La figura VII. 3
muestra el efecto de los diferentes empaque sobre la ganancia en peso,
debida a la humedad, habida en tabletas de lactosa con almidn,
cuando se almacenaron a 20 C/65% HR, en diferentes empaques.
316
Sin empaque
AUMENTO DE PESO (%) 1.5
Burbuja de
PVC
1
Burbuja de
PVC/PCTFE
0.5
Burbuja de
PVC/PCTFE -
30 C/75% HR
0
0 5 10 15
TIEMPO (semanas)
Figura VII. 3. (10). Adquisicin de humedad en tabletas de almidn

de maz y lactosa, almacenadas a 20 C y 65% H.R., en diferentes
empaques de burbuja (10).
La mejor proteccin contra la humedad, en este ejemplo, se logra con

los empaques de burbuja de PVC recubierto con PCTFE. Sin embargo,
para climas clidos o tropicales, donde la temperatura y la humedad son
mayores, por ejemplo a 30 C y 75% de humedad relativa, la proteccin
que brindan estos empaques se reduce de manera importante, ya que
la permeabilidad de la pelcula, al vapor de agua, aumenta
considerablemente cuando aumenta la temperatura.
Las pruebas de estabilidad para los productos que se usan en ensayos
clnicos, como frmula terminada, tienen como objetivo el ensayo de un
frmaco asociado a una forma farmacutica, con excipientes especficos,
bajo la influencia de factores externos, para verificar los valores de
calidad crticos, que permitan establecer la seguridad y eficacia de tales
productos, en funcin del tiempo. Con esto se asegura que el material
utilizado en las pruebas clnicas sea el satisfactorio, permitindonos
tambin l formarnos una idea de su posible fecha de caducidad.
El diseo de un estudio para productos que se usarn en pruebas
clnicas es un estudio normal, a mediano plazo, buscando posibles
cambios en el producto. Los parmetros a evaluar son los atributos
bsicos como el contenido o potencia del principio activo, productos de
degradacin, perfil de liberacin, caractersticas fsicas y otras
caractersticas que se consideren importantes para una cierta forma
farmacutica. Las condiciones de almacenamiento sern compatibles
317
con las que se establezcan en las leyendas del producto, esto es,
similares a las de conservacin durante los ensayos clnicos. Las fechas
de ensayo sern funcin de la estabilidad que se supone, de acuerdo a
la experiencia previa. Los productos ms lbiles se evaluaran ms
frecuentemente.
En trminos generales, las condiciones exageradas de
almacenamiento usadas en la etapa de formulacin no deben ser
demasiado drsticas, prefirindose el uso de mtodos analticos capaces
de detectar cambios pequeos en los productos, en vez de utilizar
condiciones drsticas que provoquen cambios muy grandes. Esta
manera de trabajar hace ms confiables los resultados, cuando se
comparan con los de temperatura ambiente. Sin embargo, las
condiciones de almacenamiento deben ser suficientemente exageradas
para provocar cambios medibles.
Al concluir esta segunda etapa de los estudios de estabilidad, se
deber conocer las sensibilidades del frmaco as como los factores que
limitan su estabilidad. Podra ser posible la estimacin de una cierta
fecha de caducidad. La informacin hasta aqu obtenida servir de
apoyo para las siguientes etapas.
VII. 4. Programas de estabilidad para un producto propuesto o

terminado
Este programa tiene el propsito de determinar la estabilidad a largo
plazo en un producto, con fines de registro.
Estas pruebas las podemos dividir en dos partes. En la primera parte
se consideran pruebas de estabilidad aceleradas, esto es, en
condiciones extremas de almacenamiento, con el fin determinar en un
lapso de tiempo corto, la estabilidad del producto, a partir de estudios
cinticos y extrapolacin a largo plazo. Esta informacin slo sirve de
apoyo para el registro y cumple la funcin de saber por anticipado el
posible resultado en las pruebas a largo plazo, determinado una fecha
de caducidad provisional. El programa de estabilidad acelerada
considerara (4):
Condiciones de almacenamiento: Temperaturas elevadas

(40-80 C), temperaturas de ciclamiento (4 C 40 C, ver
pgina 165), temperaturas extremas (-10 C), mas las
temperaturas seleccionadas para las pruebas a largo plazo.
Parmetros: Contenido en frmacos y conservadores,
productos de degradacin. Adems de las pruebas
organolpticas y de las fisicoqumicas que se consideren
relevantes para la forma farmacutica particular.
318
Tiempo de almacenamiento: hasta 3 meses, evaluando

cuando menos 4 veces en ese intervalo, aparte del anlisis
inicial.
La segunda parte de estas pruebas es a largo plazo, pruebas exigidas

por las autoridades sanitarias para el registro de los productos (ver en el
apndice la norma oficial mexicana de estabilidad de medicamentos 8
de marzo de 1996). La ms reciente informacin oficial acerca de
programas de estabilidad es el borrador o anteproyecto de una gua para
la industria, desarrollada por la FDA y otras agencias de los Estados
Unidos (USA) en junio de 1998 (9). Los datos ms generales de esta
gua, para formas farmacuticas, se describen a continuacin, como un
ejemplo de hacia donde se podra dirigir la normatividad en la
estabilidad de medicamentos. Sin olvidar que la norma oficial mexicana,
transcrita en el apndice, es la vigente y nica vlida en nuestro pas en
este momento.
Estabilidad de formas farmacuticas

Diseo general del programa
El diseo general del protocolo para una forma farmacutica deber
basarse en el conocimiento adquirido en las etapas anteriores y servir
para justificar el programa de estabilidad establecido
Seleccin de lotes
Tres lotes de la misma formulacin, en el mismo sistema de envase y
tapa, fabricados y controlados con mtodos usados para su produccin.
Fabricados, en lo posible, con diferentes lotes de materia prima. Dos de
escala piloto y un tercero, el cual podra ser ms pequeo, por ejemplo
25 000 a 50 000 tabletas o cpsulas, los cuales debern contar con
informacin de estabilidad de al menos 12 meses al momento de
solicitar el registro.
Procedimientos y criterios aplicables a las pruebas
Los parmetros de prueba deben cubrir todos los rasgos del producto
que pudieran cambiar o influir su calidad, seguridad y eficacia. Los
mtodos analticos debern estar validados y ser indicativos de la
estabilidad. Las repeticiones necesarias del ensayo estarn
determinadas por los estudios de validacin. Los parmetros a evaluar
incluyen la estabilidad qumica y la biolgica, adems de la presencia de
los conservadores, las propiedades fsicas y organolpticas; y las
microbiolgicas, cuando sean necesarias.
319
Especificaciones
Las derivadas de los estudios de estabilidad anteriores. Deben incluir
lmites superiores para la presencia de productos de degradacin. La
justificacin para lmites como el del tamao de las partculas y la
disolucin, tendr como referencia los resultados observados en los lotes
usados para las pruebas de biodisponibilidad y estudios clnicos. Las
diferencias entre las especificaciones de control y las de estabilidad,
para los conservadores, debern justificarse con estudios de eficacia de
los conservadores.
La extensin y condiciones de almacenamiento debern cubrir
suficientemente el almacenamiento, transporte y uso del producto (tabla
VII. 2). Las condiciones a largo plazo debern cubrir el trmino completo
de la fecha de caducidad.
Tabla VII. 2. Condiciones de almacenamiento para las pruebas de

estabilidad oficiales aceleradas y a largo plazo (9).
Tipo de prueba Condiciones (*) Tiempo mnimo para iniciar registro
Largo plazo 25 C 2 C / 60% H. R. 5% 12 meses

Acelerada 40 C 2 C / 60% H. R. 5% 6 meses
(*) Estas condiciones son para un clima templado (zona climtica II), lo cual en
muchas ciudades de nuestro pas no se cumple, ya que son ms clidas y
hmedas (ver zonas climticas, captulo I).
Productos muy sensibles a la temperatura, fsica o qumicamente,

podran almacenarse a temperaturas inferiores, iguales a las que se
establezcan en la etiqueta del producto. De cualquier manera, la
temperatura de aceleracin de las pruebas deber ser, al menos, 15 C
mayor, por encima de la temperatura de almacenamiento considerada
para largo plazo. Por ejemplo, si un producto se etiqueta para
conservarse en refrigeracin, las pruebas aceleradas debern hacerse a
25 C 2 C / 60% H. R. 5%. La fecha de caducidad se definir a
temperatura de refrigeracin.
Condiciones de humedad relativa alta son necesarias para los slidos.
Sin embargo, las condiciones de almacenamiento debern conservarse
aunque los productos lquidos no le requieran. Los productos lquidos
320
debern examinarse para prdida de agua a bajas humedades relativas

como 20% H. R.
Cuando ocurra un cambio significativo en el producto en la condicin
acelerada, deber examinarse muestras conservadas a 30 C 2 C /
60% H. R. 5%, las cuales podran colocarse bajo estabilidad desde el
principio del estudio. Un cambio significativo equivale, por ejemplo a:
Prdida del 5% del contenido inicial del activo

Productos de degradacin fuera del limite establecido
Producto que salga de su especificacin de pH
Producto fuera de especificacin en su disolucin (USP
cpsulas y tabletas)
Falla en la conservacin de propiedades fsicas y de apariencia
(color, separacin de fases, mala resuspendabilidad, falla de
vlvulas en aerosoles, dureza de tabletas, etc.)
S este cambio significativo ocurre tambin a 30 C 2 C / 60% H. R.

5%, no sera conveniente fijar la fecha de caducidad a las condiciones de
largo plazo inicialmente establecidas, aunque los datos de esas
condiciones as lo avalen. En su caso debern fijarse condiciones de
almacenamiento a menor temperatura, para fijar la fecha de caducidad,
o cambiar por un sistema de envase y tapa ms convenientes, otro
procedimiento de manufactura u otra frmula, que eviten los cambios
significativos observados. En el peor de los casos, si se utilizan las
condiciones originales de almacenamiento para fijar la fecha de
caducidad, ser necesario agregar una leyenda que establezca
precauciones contra el almacenamiento prolongado a 30 C.
Cuando en estos estudios de estabilidad no se usen lotes normales de
produccin, debern enviarse los estudios similares de los 3 primeros
lotes de fabricacin industrial normal, con un mnimo de 4 ensayos en la
prueba acelerada (0, 2, 4 y 6 meses). Otras condiciones de
almacenamiento deben consultarse especficamente.
Frecuencia de ensayo
La frecuencia del ensayo del producto deber ser suficiente para
definir las caractersticas de estabilidad de la forma farmacutica o
sistema de liberacin de frmacos. Normalmente se evaluarn los
productos cada tres meses, durante el primer ao, cada 6 meses dentro
del segundo ao y despus anualmente. El mnimo para los estudios
acelerados ser de 4 determinaciones (0, 2, 4 y 6 meses).
Materiales de empaque
321
Las pruebas debern llevarse a cabo en el empaque en el que se

vender el producto. Pruebas del producto sin empaque podran
utilizarse con fines comparativos de la proteccin dada por el empaque.
Evaluacin
Se debe usar un procedimiento sistemtico en la presentacin de la
evaluacin de la informacin obtenida en los estudios de estabilidad. El
grado de variabilidad de los 3 lotes individuales probados afecta la
confiabilidad que se puede tener en un lote futuro de fabricacin
industrial, el cual debe estar dentro de los lmites de las
especificaciones, hasta la fecha de caducidad. Una manera de evaluar
los cambios cuantitativos en el tiempo es la determinacin del intervalo
de confianza inferior, para la curva promedio de degradacin o curva de
regresin y su interseccin con el lmite inferior de la especificacin de
aceptacin. Si la variabilidad entre lote y lote es pequea, todos los
resultados se pueden reunir para una sola evaluacin general. Sin
embargo, para hacer esto, es necesario aplicar pruebas estadsticas
tanto a las pendientes de las lneas de regresin as como a los
interceptos, de los lotes individuales. La reunin de datos es posible, por
ejemplo, cuando los valores de p, para el nivel de significacin de
rechazo, son mayores de 0.25. Si la combinacin de los datos es no se
considera apropiada, la fecha de caducidad depender del tiempo
mnimo que cualquiera de los lotes pueda permanecer dentro de lmites
justificados y aceptables.
La naturaleza de la degradacin con relacin al tiempo determinar si
es necesario transformar los datos para hacer un anlisis de regresin
lineal. Si es necesario, los datos se transformarn con alguna relacin
matemtica (aritmtica, logartmica, etc., para poder hacer la regresin.
El grado de bondad de la aplicacin de una determinada ecuacin o
modelo matemtico, a los datos de los lotes individuales a los datos
combinados, se verificar con los mtodos estadsticos apropiados.
Cuando los resultados muestran degradaciones en una proporcin
muy pequea y una variabilidad tambin muy pequea, se podra
considerar a simple vista que la fecha de caducidad es aceptable. Los
clculos estadsticos seran innecesarios. Sin embargo, se debe hacer
una explicacin para justificar esta omisin.
La extrapolacin de los datos de estabilidad acelerada debe
justificarse en funcin del mecanismo de degradacin, de la bondad de
los modelos matemticos aplicados, del tamao del lote y de la
existencia de datos que sirvan de apoyo.
Las evaluaciones de la estabilidad debern cubrir no solo el contenido
en activo sino tambin los productos de degradacin y los atributos
apropiados, de las formas farmacuticas. Cuando se considere apropiado
322
se revisar el balance de masa, de la estabilidad diferencial y los

La estabilidad de los productos despus de su reconstitucin o
dilucin deber proveerse con informacin apropiada.
Declaraciones y rotulado
El intervalo de temperaturas de almacenamiento se fundamentar en
la evaluacin de la estabilidad. Cuando se requiera, se pueden
establecer requisitos particulares, en especial para productos que no
soportan la congelacin a 10 C. Trminos como el de almacenar a
temperatura ambiente son inaceptables. Las declaraciones y rtulos
deben ser acordes a las caractersticas de estabilidad demostradas por
el producto. Se recomiendan declaraciones y rtulos uniformes para las
diferentes solicitudes de registro que se dirijan a las autoridades
sanitarias.
Las declaraciones y rtulos para formas de dosificacin lquidas en
recipientes semipermeables seran:
Almacenar a 25 C, se permite el trnsito entre 15-30 C (USP
Temperatura ambiente controlada)
Para agua inyectable y soluciones parenterales de gran volumen
(bolsas de plstico) se podra declarar y rotular lo mismo en el empaque
secundario, usando la siguiente declaracin en los insertos del
empaque:
Se pueden tolerar exposiciones breves a temperaturas de hasta 40 C
s la temperatura cintica no excede 25 C. Sin embargo, tales
exposiciones deben ser mnimas.
Las soluciones parenterales de gran volumen (LVP) en recipientes
semipermeables (bolsas de plstico), que contengan sales inorgnicas
pueden rotularse igual si es que se han demostrado como estables
cuando menos por 3 meses a 40 C 2 C / 15% H. R. 5% o a 40 C 2
C / no ms de 20% H. R.
Todas las dems formas farmacuticas que han sido estables a 25 C
2 C / 60% H. R. 5% o a 30 C 2 C / 60% H. R. 5% o en condiciones
como 30 C, 25-30 C o 25 C, sin control de la humedad y que se
supongan para almacenarse a temperatura ambiente, se recomienda un
rtulo con las declaraciones siguientes:
323
Cuando el espacio en el envase primario sea limitado, podra ser

aceptable la siguiente declaracin, si es que la declaracin anterior se
registra en el empaque secundario o en un inserto:
Almacenar a 25 C (ver inserto)
Para productos que sean estables solo a temperaturas de 2-8 C, con
o sin control de humedad, los cuales deban almacenarse en
refrigeracin, se recomienda la rotulacin con las siguientes
declaraciones:
Almacenar en refrigerador, 2-8 C o Almacenar refrigerado, 2-8
C
Cuando se requiera de un rotulado abreviado, se podra recomendar la
siguiente declaracin, siempre y cuando la declaracin anterior se rotule
en el empaque secundario y en los insertos:
Refrigerar
Otras declaraciones precautorias deben incluirse en el empaque
primario as como en el secundario, cuando sea necesario proteger el
producto de condiciones como calor excesivo, humedad, luz y
congelamiento u otras condiciones de deterioro. Si el espacio en el
empaque primario esta limitado, se debe hacer referencia al inserto del
empaque, para mayor informacin.
El reporte de los datos de estabilidad
El reporte de los datos de estabilidad para solicitud de registro debe
incluir datos correspondientes a los lapsos de tiempo sealados en
prrafos anteriores, adems de reportes anuales de actualizacin, de
acuerdo a un protocolo de estabilidad previamente autorizado, por el
tiempo que se pretenda la fecha de caducidad.
Los reportes anuales pueden incluir datos de estabilidad acelerada y a
largo plazo, para satisfacer los estudios de estabilidad establecidos en la
solicitud de registro original o en otras solicitudes enviadas como
suplementos posteriores. Los datos debern ser presentados en un
formato organizado de manera comprensiva y acumulada.
Los diferentes reportes deben contener la siguiente informacin:
Informacin general
8. Nombre, origen, lugar de manufactura y fecha de fabricacin de las

formas farmacuticas, de los frmacos o de los productos biolgicos
9. Forma de dosificacin, potencia del frmaco y su formulacin
324
10. Composicin tipo origen, tamao y descripcin de los componentes

del empaque (envase y tapa). Deben estar bien identificados los
rellenos, sellos y desecantes utilizados
Especificaciones e informacin de la metodologa de las pruebas
11. Atributos y especificaciones reglamentarias fsicas, qumicas y

biolgicas. En su defecto se pueden referir stas a ciertas
referencias (USP y otras).
12. Metodologas de ensayo utilizadas para cada muestra analizada o
sus referencias especficas
13. Informacin de la precisin, exactitud y pertinencia de los mtodos
de anlisis, citados por referencia en cada seccin
14. Donde sea procedente, una descripcin de los mtodos para
determinar la potencia de los frmacos, a travs de una medicin de
su actividad biolgica, incluyendo las especificaciones del ensayo de
la potencia
Diseo y condiciones del estudio
1. Descripcin del plan de muestreo incluyendo:

a) Identificacin y numero de lotes utilizados
b) Numero de diferentes envases y tapas seleccionadas
c) Numero de diferentes unidades de dosificacin seleccionadas,
sealando las pruebas realizadas sobre unidades individuales o
conjuntos de unidades individuales
d) Intervalos de tiempo para el muestreo
e) Pruebas para productos farmacuticos o productos biolgicos
despus de su reconstitucin, de acuerdo a las indicaciones de
las etiquetas, as como a lo largo del periodo de tiempo
recomendado para su uso
2. Duracin esperada del estudio
325
3. Condiciones de almacenamiento de los productos en estudio

(temperatura, humedad, luz, orientacin de los envases)
Datos de estabilidad e informacin
1. Numero de lote y fecha de fabricacin, indicando si es de

produccin, escala piloto o laboratorio
2. Para formas farmacuticas con antibiticos, la edad del principio
activo (tiempo transcurrido desde su fabricacin) usado en la
fabricacin de ese lote
3. Resultados analticos, indicando el origen de cada punto, su fecha
de anlisis y otros datos como el tipo de envase, el lote y s son
datos individuales o resultados de otros orgenes (promedios, datos
calculados, etc.). Cuando se enven datos en conjunto, debern
enviarse tambin los datos originales
4. Los datos debern tabularse por condicin de almacenamiento
5. Los datos de formulaciones previas, durante el desarrollo del
producto debern anexarse en forma resumida, haciendo referencia
a otras solicitudes, si es que las hubiere, incluyendo cualquier otro
tipo de envase que se haya estudiado
Anlisis de los datos
1. Debern anexarse los siguientes anlisis de los resultados de los

parmetros cuantitativos:
2. Evaluaciones realizadas de todos los datos, con sus grficas y
figuras
3. Documentacin pertinente de los mtodos estadsticos y formulas
utilizadas
4. Resultados de los anlisis estadsticos y el periodo estimado para la
fecha de caducidad
5. Resultados de las pruebas estadsticas usadas para obtener los
estimados de la potencia microbiolgica
326
Conclusiones
1. Periodo de fecha de caducidad que se propone y su justificacin

2. Especificaciones reglamentarias tales como el establecimiento de la
potencia mnima aceptable, al tiempo de la liberacin del producto
en fabricacin, para garantizar la vigencia del producto durante el
periodo de caducidad completo
La informacin antes mencionada deber ser acumulada y en forma

de tablas, por ejemplo:
Tabla VII. 3. Datos de estabilidad originales o crudos del producto x,

numero de lote y.
Datos de la forma farmacutica: Nombre del producto y potencia,

numero de lote, fecha de fabricacin, fecha de empaque, condicin de
almacenamiento, numero del estudio, tamao del lote, lugar de
fabricacin, lugar de empaque, orientacin del almacenamiento,
propsito del estudio, fecha de inicio del estudio, tipo y tamao as
como el proveedor del envase, proveedor de las tapas y proveedor de
los sellos o empaque internos entre envase y tapa.
Datos del frmaco utilizado: fabricante del frmaco / lugar de fabricacin
/ numero de lote / fecha de aprobacin / fecha de caducidad propuesta.
Atributos Mtodo Especificacin tiempo (meses)

PEO* (#) Nivel bajo/alto 0 3 6 etc.
Apariencia x1
Contenido x2
Degradacin A x3
Degradacin B, etc. x4
327
*Procedimiento estndar de operacin (nmero)

Un ejemplo para los programas de estabilidad en la zona climtica II
(ver zonas climticas, captulo I), la cual sirve de referencia para
productos que se pueden comercializar en climas templados, para
productos farmacuticos slidos y semislidos y lquidos, se da en las
tablas VII. 4 y VII. 5 (5).
Tabla VII. 4. Programa de estabilidad para formas farmacuticas

slidas, para distribucin en la zona climtica II (clima templado).
Temp. H. R. Periodo de almacenamiento e intervalo de ensayo

( C) (%) (Meses)
0 2 3 4 6 9 12 18 24 36 48 60
25 60 x x x x x x x x x x
30 70 x x x x
40 (75) x x x
Tabla VII. 5. Programa de estabilidad para formas farmacuticas

semislidas y lquidas, para distribucin en la zona climtica II (clima
templado).
Temp. H. R. Periodo de almacenamiento e intervalo de ensayo

( C) (%) (Meses)
0 2 3 4 6 9 12 18 24 36 48 60
4* --- x x x
25 60 x x x x x x x x x x
30 70 x x x x
40 (75) x x x
* Opcin para ver estabilidad fsica.
328
Cuando las pruebas de estabilidad son para una forma farmacutica

nueva, la cual no incluye un frmaco nuevo, aunque los estudios son
iguales a los antes descritos, se podra iniciar el registro en un tiempo
menor. Esto es, cuando se cuente con 6 meses de estabilidad tanto
acelerada como en condiciones normales. Siempre y cuando exista un
registro anterior, con el mismo frmaco, que permita justificar la
aceleracin del trmite.
Las condiciones particulares para cada forma de dosificacin solo se
pueden exponer aqu como lineamientos generales, a partir de los
cuales cada formulador podr decidir si son necesarias todas las pruebas
de estabilidad que citaremos enseguida o si no lo son. Ms aun, podra
ser que fuesen necesarios ms parmetros para determinar
apropiadamente la estabilidad de un determinado producto. De
cualquier manera, tampoco es de esperarse que los parmetros que
mencionaremos para cada forma farmacutica deban determinarse en
cada ocasin que se tomen muestras para evaluacin.
Tabletas. Para las tabletas es recomendable evaluar la apariencia, el
olor, el color, el contenido en frmacos, los productos de degradacin, la
disolucin, la humedad y la friabilidad.
Cpsulas. Las cpsulas de gelatina dura deben evaluarse en su
apariencia (incluyendo el ver si son quebradizas), el color, el olor del
contenido el contenido en activos, los productos de degradacin, la
disolucin, la humedad y los lmites microbianos.
Las cpsulas de gelatina blanda se examinaran, adems de las
pruebas antes mencionadas, en su pH, en fugas de contenido, en
formacin de pelcula, adems de examinar el lquido contenido, para
observar precipitaciones u opalescencia.
Emulsiones. Se considera su apariencia (incluyendo separacin de
fases), color, olor, contenido en frmacos, productos de degradacin,
pH, viscosidad, limites microbianos, contenido en conservadores y el
tamao y distribucin de la fase suspendida o dispersa.
Soluciones y suspensiones orales. La evaluacin debe incluir la
apariencia (para soluciones incluye la observacin de precipitados y
claridad), color, olor, contenido de frmacos y de conservadores, pH y
los limites microbianos.
Para suspensiones se examina adems la redispersabilidad, las
propiedades reolgicas y el tamao y distribucin de las partculas. Se
debe tener cuidado de agitar las suspensiones, si as lo pide el marbete,
antes de tomar las muestras para el ensayo.
Polvos orales para reconstitucin. Los polvos orales se evalan en su
apariencia, color, olor, humedad y tiempo de reconstitucin. Los
productos obtenidos despus de la reconstitucin, siguiendo las
instrucciones de la etiqueta, ya sean soluciones o suspensiones, se
329
evalan como en el apartado anterior, durante todo el tiempo que se

espera estn vigentes.
Aerosoles nasales e inhalaciones dosificadas. Estos productos deben
evaluarse en su apariencia, incluyendo el recipiente, su contenido as
como la vlvula y sus componentes. Tambin se evala su color, olor,
contenido de frmacos y de productos de degradacin, conservadores,
cosolventes (cuando proceda), la uni9formidad del contenido de las
dosis, el numero de dosis declaradas por actuacin de la vlvula, por
envase, cumpliendo la uniformidad de dosis, la distribucin
aerodinmica del tamao de las partculas, evaluacin microscpica,
contenido de humedad, proporcin de fuga, limites microbianos, peso de
un disparo de la vlvula, extrables desde los componentes de plstico y
elastmeros. Las muestras debern almacenarse en ambas posiciones,
erguidas e invertidas.
Para aerosoles del tipo suspensin, la apariencia de los componentes
de la vlvula y del contenido del envase debe examinarse
microscpicamente, buscando la eventual presencia de partculas
grandes y de cambios en la morfologa de la superficie de las partculas
del frmaco, formacin de aglomerados, crecimiento de cristales as
como posible materia extraa. La presencia de estos fenmenos tiende
a ocluir las vlvulas y a una liberacin no reproducible de cada dosis. Se
debe buscar tambin una posible corrosin del envase, ya que afectara
adversamente el desempeo del producto.
Se deber hacer un estudio de ciclamiento en condiciones de
temperatura extremas, tales como se espera que se presenten durante
el transporte y manejo, para valorar los efectos de los cambios de
temperatura sobre la calidad y desempeo del producto. Por ejemplo,
tres a cuatro ciclos de seis horas durante un da, entre temperaturas por
debajo del congelamiento y 40 C, a75-85% de H. R., por un periodo de
hasta 6 das.
Debido a su uso sobre los pulmones, estos productos deben demostrar
ausencia de Staphilococus aureus, de Pseudomonas aeruginosa, de
Escherichia coli y de Salmonela species, considerando que la cuenta de
aerobios t de hongos no se exceda.
Polvos y soluciones para inhalacin. La evaluacin de las soluciones
para inhalacin incluye la apariencia, el color, el contenido en activos,
productos de degradacin, pH, esterilidad, partculas, conservadores,
contenido de antioxidantes (s los hay), contenido neto (volumen o peso
de llenado), perdida de peso y extrables desde componentes de
plstico, elastmeros y otros componentes del empaque.
La evaluacin de los polvos para inhalacin debe incluir la apariencia,
color, ensayo de activos, productos de degradacin, distribucin del
tamao aerodinmico de las partculas emitidas, en una dosis,
330
evaluacin microscpica, limite microbiano, contenido de humedad,

partculas extraas, uniformidad del contenido de las dosis emitidas y el
numero de dosis emitidas que cumple con la uniformidad del contenido
(productos con dispositivos de medicin).
Soluciones y suspensiones en forma de aerosoles nasales. La
evaluacin de la estabilidad de soluciones y suspensiones nasales
dispensadas con bombas de dosificacin, incluye la apariencia, color
claridad ensayo, productos de degradacin, contenido de conservadores
y antioxidantes, limites microbianos, pH, partculas, uniformidad del
contenido de las unidades de medicamentos con aspersin, numero de
dosis que cumplen con la uniformidad de contenido, por envase,
distribucin del tamao de las gotas o partculas, prdida de peso,
bomba de dosificacin, evaluacin microscpica para las suspensiones,
partculas extraas y extrables desde los componentes plsticos o
elastomricos del envase, tapa y bomba.
Preparaciones ticas, oftlmicas y tpicas. Esta categora incluye
ungentos, cremas, lociones, pastas, geles, soluciones y aerosoles no
dosificados para aplicacin sobre la piel.
Las preparaciones tpicas deben evaluarse en su apariencia, claridad,
color, homogeneidad, olor, pH, resuspendabilidad para lociones,
consistencia, viscosidad, distribucin del tamao de las partculas para
suspensiones, cuando esto sea posible, ensayo, productos de
degradacin, contenido de conservadores y antioxidantes (si los hay),
limites microbianos o esterilidad y prdida de peso cuando proceda.
Para los tubos metlicos cerrados por doblez se deben establecer
estudios de estabilidad que permitan predecir su vigencia durante el
tiempo de uso por el paciente, despus de haber perforado el sello
metlico original, permitiendo el contacto entre el contenido y los
empaques internos de la tapa. Los ungentos, pastas, geles y cremas en
envases muy grandes, aun los tubos, deben ensayarse por muestreo
sobre la superficie, en la parte media y en el fondo del envase. Adems,
los tubos deben muestrearse tambin cerca del engargolado o dobleces.
Los productos oftlmicos y ticos (cremas, ungentos soluciones y
suspensiones) deben incluir, adems de las pruebas anteriores, las de
esterilidad, partculas y extrables.
La evaluacin de aerosoles tpicos no dosificados debe incluir
apariencia, ensayo, productos de degradacin, prdida de peso,
cantidad mxima que puede dispensarse, velocidad de dispensado,
limites microbianos, patrn de aspersin, contenido de agua y
distribucin del tamao de las partculas en las suspensiones.
Productos transdrmicos. Los estudios de estabilidad de los
dispositivos colocados directamente sobre la piel, con fines de una
infusin continua del frmaco en la dermis, a travs de la epidermis,
331
deben ser examinados en su apariencia, ensayo, productos de

degradacin, fugas, limite microbiano o esterilidad, fuerzas de adhesin
y de despegado y la velocidad de liberacin del frmaco.
Supositorios. Los supositorios debern evaluarse en su apariencia,
color, ensayo, productos de degradacin, tamao de partcula, intervalo
de reblandecimiento, disolucin y lmites microbianos.
Parenterales de volumen pequeo (SVPs). Aqu se incluye productos
inyectables como soluciones, suspensiones y emulsiones.
La evaluacin de productos farmacuticos inyectables debe incluir su
apariencia, color, ensayo, contenido de conservadores (s los hay),
productos de degradacin, partculas, pH, esterilidad y pirogenicidad.
La estabilidad de productos de farmacuticos para inyectables debe
incluir la apariencia, claridad, color, tiempo de reconstitucin y
contenido de humedad residual. Adems, deben ser evaluados despus
de su reconstitucin, segn las indicaciones de la etiqueta. Los
parmetros especficos a examinar, a periodos apropiados de tiempo, a
travs del mximo periodo de tiempo, despus de haber reconstituido el
producto y almacenado bajo las condiciones establecidas en la etiqueta,
debe incluir la apariencia, claridad, olor, color, pH, ensayo (potencia),
conservadores, si es que los hay, productos de degradacin y formacin
de agregados, esterilidad, pirogenicidad y partculas.
Los productos farmacuticos inyectables en forma de suspensin y los
productos para suspensiones inyectables deben incluir tambin la
distribucin del tamao de las partculas, la redispersabilidad y las
propiedades reolgicas, adems de los parmetros antes citados para
productos farmacuticos inyectables y productos farmacuticos para
inyectables.
Los estudios de estabilidad para las emulsiones farmacuticas
inyectables deben incluir la separacin de fases, la viscosidad y el
tamao promedio y la distribucin del tamao de los glbulos de la fase
dispersa, adems de los parmetros antes citados para productos
farmacuticos inyectables.
La funcionalidad e integridad de los productos parenterales envasados
en sistemas de liberacin en jeringas debe asegurar factores como la
fuerza aplicada para la extrusin, la inyectabilidad, la valuacin de la
presin y las fugas, durante todo el periodo de tiempo hasta la fecha de
caducidad.
La esterilidad de todos los productos etiquetados como estriles se
puede valorar por diferentes medios, incluyendo la evaluacin de la
integridad del envase y la tapa, por medio de pruebas de desafo y/o
pruebas de esterilidad descritas en (cita 9, captulo VII. C). Los estudios
de estabilidad deben evaluar la estabilidad del producto cuando es
332
expuesto cuando menos al mximo del proceso de letalidad especfico

(por ejemplo fo, Mrads).
Podra ser apropiada la inclusin de pruebas para extrables, en el
protocolo de estabilidad, en situaciones en las cuales otras pruebas de
cualificacin no provean de suficiente informacin o seguridad,
concerniente a los niveles de extrables desde componentes plsticos o
elastomricos.
La interaccin entre los productos farmacuticos inyectables y los
medios de administracin y dispensado, donde sea sta garantizada,
debe ser considerada en los protocolos de pruebas, para asegurar que la
absorcin y adsorcin durante el tiempo de aplicacin no ocurra.
Parenterales de gran volumen (LVPs). La evaluacin de los LVPs debe
incluir la apariencia, color, ensayo, contenido en conservadores si es que
los hay, productos de degradacin, partculas, pH, esterilidad,
pirogenicidad, claridad y el volumen.
Se debe asegurar la esterilidad de los productos etiquetados como
estriles, a travs de diferentes medios, incluyendo la evaluacin de la
integridad del envase y la tapa, por medio de pruebas de desafo y/o
pruebas de esterilidad descritas en (cita 9, captulo VII. C). Los estudios
de estabilidad deben evaluar la estabilidad del producto cuando es
expuesto cuando menos al mximo del proceso de letalidad especfico
(por ejemplo fo, Mrads).
La interaccin entre estos productos farmacuticos inyectables y los
medios de administracin y dispensado, tambin debe ser considerada
en los protocolos de pruebas, para asegurar que la posible absorcin y
adsorcin, durante el tiempo de aplicacin, no ocurra.
Aditivos farmacuticos. Siempre existe la posibilidad de
incompatibilidad entre los frmacos y diluyentes considerados para ser
usados con otro producto farmacutico y el otro producto farmacutico,
por lo que cualquier producto farmacutico etiquetado para ser usado
con otro producto farmacutico (por ejemplo parenterales y productos
para inhalacin), debe ser evaluado en su estabilidad y compatibilidad
en el mezclado, con otros productos farmacuticos o con diluyentes
tanto en una orientacin normal del envase as como en forma invertida,
si es que as se garantiza o indica en la etiqueta.
Tambin debe establecerse un protocolo de estabilidad, con los
ensayos apropiados, para observar la estabilidad a la temperatura de
almacenamiento y uso del producto, al tiempo 0, a las 6-8 horas y a las
24 horas o como se considere conveniente para el periodo considerado
para su uso. Las pruebas deben incluir la apariencia, color claridad,
ensayo, productos de degradacin, pH, partculas, interaccin con el
envase/tapa u otros dispositivos usados, y la esterilidad. Se podran
333
proveer datos que apoyen su estabilidad en lugar de una evaluacin de

fotodegradacin.
La compatibilidad y estabilidad de los productos farmacuticos debe
confirmarse en todos los diluyentes, envases, tapas as como en la
presencia de otros productos farmacuticos, con los cuales se indique en
la etiqueta que pueden mezclarse. Los estudios de compatibilidad se
deben conducir al menos a las concentraciones ms bajas y ms altas
del producto farmacutico, en cada diluyente, de los que se indique en
la etiqueta. Los estudios de compatibilidad y estabilidad se deben llevar
a cabo en cuando menos 3 lotes del producto farmacutico. Los estudios
de compatibilidad se deben repetir si el producto farmacutico o
cualquiera de los diluyentes recomendados o de los otros productos
farmacuticos con los que se mezclen, sea reformulado.
Las pruebas para determinar productos extrables, en los estudios de
estabilidad, son apropiados en situaciones donde otras pruebas de
cualificacin no han provisto de suficiente informacin o seguridad
acerca de los niveles de los extrables desde componentes plsticos o
elastomricos. La interaccin de los dispositivos de administracin y
dispensado con los productos farmacuticos, tambin debe
considerarse, a travs de pruebas apropiadas en los protocolos, para
asegurar que la posible absorcin y adsorcin, durante el tiempo de
aplicacin, no ocurra, s es que as se garantiza en la etiqueta o
indicaciones de uso.
Productos implantables, vaginales y dispositivos intrauterinos. Los
dispositivos que contienen un frmaco en un depsito o una matriz,
desde la cual difundir el frmaco, deben evaluarse en su contenido de
frmaco, productos de degradacin, extrables, liberacin del frmaco in
Vitro y cuando as proceda, en su cuenta microbiana o esterilidad. El
protocolo de estabilidad debe incluir estudios a 37 C o 40 C, sobre un
periodo de tiempo suficiente, para simular el uso del dispositivo de
liberacin del frmaco in vivo.
Las pruebas de estabilidad para los dispositivos intrauterinos (IUDs)
deben incluir la posible deflexin o desvo de los brazos horizontales u
otras partes de la estructura, s es que no conserva una forma de T
(memoria de la forma o estructura), la resistencia a la ruptura del hilo o
cordn que sirve para retirar el dispositivo, y la integridad del empaque
(por ejemplo la resistencia del sellado de la bolsa) y la esterilidad del
dispositivo.
VII. 5. Pruebas de estabilidad posteriores al registro

Este tipo de pruebas comprende las investigaciones realizadas
despus de que el producto ha sido aprobado para su venta.
334
S el producto no ha sido alterado con cambios mayores en su

frmula y procedimiento de manufactura, se distinguen dos tipos
de estabilidad, una de ellas es la continuacin de los estudios de
estabilidad sealados en los protocolos anteriores, hasta la terminacin
del periodo de la fecha de caducidad (por ejemplo 5 aos) y los de
continuacin, tambin con los mismos protocolos de estabilidad antes
sealados, de la estabilidad de los 3 primeros lotes de fabricacin, en el
caso en que el registro no se haya solicitado con ellos sino con lotes de
escala piloto.
La segunda opcin de estudios de estabilidad, cuando no se han
llevado a cabo cambios mayores ni en frmula ni procedimientos,
comprende los estudios realizados con el fin de dar seguimiento a la
estabilidad de los productos que se producen regularmente as como
para la confirmacin de la informacin de estabilidad obtenida durante
la fase de desarrollo. La seleccin de las muestras, los criterios de
ensayo, las especificaciones, las condiciones de almacenamiento y las
tcnicas analticas utilizadas son las mismas que en los estudios a largo
plazo antes descritos, la nica diferencia es que estos nuevos lotes se
examinan nicamente una vez al ao, durante 5 aos. El nmero de
lotes a estudiar es uno por ao. Si existen varias diferentes
concentraciones en el mercado (con los mismos excipientes y
procedimiento de manufactura), se examina solo el producto de menor
concentracin. Si se vende en diferentes materiales de empaque, se
examinar solo l ms sensible a la degradacin.
Cuando han ocurrido cambios posteriores al registro, son
diversos los estudios de estabilidad que se deben llevar a cabo. Entre
mayor sea el cambio realizado, mayores sern los estudios de
estabilidad que le deban acompaar, para apoyar dichos cambios. Se
reconocen 5 diferentes paquetes de estudios de estabilidad que podran
aplicarse a la mayora de los cambios que se pudieran presentar
despus del registro del producto (tabla VII. 6).
Tabla VII. 6. Paquetes de estabilidad que se deben realizar para apoyar

diferentes cambios en los productos farmacuticos, posteriores a su
registro (9).
Paquete Datos al solicitar registro Compromisos de estabilidad
Tipo 0 Ninguno Ninguno ms all de los lotes regulares

anuales.
Tipo 1 Ninguno Primer lote de produccin (1) con
estudios de estabilidad a largo plazo y de
335
ah en adelante los lotes anuales.

Tipo 2 3 meses de datos de estabilidad Primer lote de produccin b (1) con
acelerada comparativa y los datos estudios de estabilidad a largo plazo c y
disponibles a largo plazo, de 1 lote a de de ah en adelante los lotes anuales.
la forma farmacutica con el cambio
propuesto.
Tipo 3 3 meses de datos de estabilidad Primeros 3 lotes de produccin b con
disponibles a largo plazo, de 1 lote a de de ah en adelante los lotes anuales.
la forma farmacutica con el cambio
propuesto.
Tipo 4 3 meses de datos de estabilidad Primeros 3 lotes de produccin b con
disponibles a largo plazo, de 3 lotes a de ah en adelante los lotes anuales.
de la forma farmacutica con el cambio
propuesto.
(a) Es aceptable un lote de escala piloto.
(b) Si es que no se ha enviado en el suplemento.
(c) Utilizando el protocolo de estabilidad aprobado y enviando los datos en reportes anuales.
Algunos de los cambios, entre varios otros, que requieren ciertos

estudios de estabilidad seran los que a continuacin se mencionarn, de
una manera no exhaustiva. Una consulta previa con las autoridades
sanitarias respectivas, acerca de los cambios que se piensa realizar y los
estudios de estabilidad que les deben acompaar, sera conveniente
siempre.
VII. 5. 1. Cambio de lugar de fabricacin de una forma farmacutica

Cuando se cambia el lugar de fabricacin dentro de las mismas
instalaciones usando equipo y procesos de manufactura similares,
generalmente no se requiere enviar datos de estabilidad antes de
implementar el cambio.
Cuando se cambia a nuevas instalaciones usando equipos y procesos
de manufactura similares, se deben enviar datos de estabilidad de la
forma farmacutica en una solicitud complementaria. Se recomienda
enviar estudios de estabilidad acelerada de 3 meses y los datos
disponibles de estabilidad a largo plazo correspondientes a 1-3 lotes del
producto fabricado en las nuevas instalaciones, aunque esto depender
de la complejidad de la forma de dosificacin y de la existencia o no de
informacin significativa al respecto (tabla VII. 7). Adems, se debe
hacer un compromiso para llevar a cabo pruebas de estabilidad a largo
plazo sobre los 3 primeros lotes de produccin en el nuevo lugar de
fabricacin, de acuerdo a un protocolo que se haya aprobado al
respecto, dependiendo de la forma de dosificacin y de la existencia de
336
informacin suficiente. S los datos de estabilidad resultantes son

satisfactorios, se puede continuar usando la misma fecha de caducidad.
Esto no aplica para productos biotecnolgicos ni biolgicos.
VII. 5. 2. Cambio en el lugar de empaque de formas slidas orales

Un cambio en el lugar de empaque de formas farmacuticas slidas
orales, usando los mismos envases y tapas aprobados, requiere de
enviar un suplemento de los cambios efectuados. No son necesarios
otros estudios extras de estabilidad. Las nuevas instalaciones de
empaque deben contar con un perfil de las buenas prcticas de
manufactura vigente y satisfactorio, para el tipo de operacin de
empaque en consideracin, antes de enviar el suplemento mencionado.
El suplemento debe contener, adems, un compromiso para colocar el
primer lote de produccin en estudios de estabilidad a largo plazo y
posteriormente los lotes anuales, usando el protocolo de estabilidad
aprobado en la solicitud de registro y el de someter a consideracin los
resultados obtenidos, anualmente.
Tabla VII. 7. Datos de estabilidad necesarios para apoyar un cambio a

en el lugar de fabricacin de un producto farmacutico, despus de su
aprobacin (9).
Nivel del cambio Ejemplos y definiciones Documen- Paquete de

tacin estabilidad
a. Cambio del sitio de manufactura dentro AR Tipo 0
de las mismas instalaciones, con el
mismo equipo, procedimientos de
manufactura, condiciones ambientales,
controles y personal (por ejemplo, el
caso de una remodelacin).
1 b. Cambio en el lugar de empaque para CBE Tipo 1
formas farmacuticas slidas orales.
c. Cambio del laboratorio de anlisis a CBE Tipo 0
nuevas instalaciones.
Cambio dentro de una instalacin contigua

o entre instalaciones en cuadras o calles
adyacentes, con el mismo equipo,
procedimientos estndar de operacin,
condiciones ambientales, controles y
2 personal:
a. Formas de dosificacin slidas orales y CBE Tipo 1
semislidas de liberacin inmediata.
b. Formas de dosificacin de liberacin CBE Tipo 2
modificada.
337
Cambio del lugar de fabricacin a diferentes No

instalaciones con el mismo equipo,
SBI b - SBI b
procedimientos estndar de operacin,
condiciones ambientales y controles: Tipo
a. Formas de dosificacin slidas orales CBE 2 - 3
de liberacin inmediata.
3
b. Formas de dosificacin semislidas. CBE 3 - 3
c. Formas de dosificacin de liberacin PA 3 - 4
modificada.
(a) No incluye productos biotecnolgicos ni biolgicos as como tampoco Inhaladores de dosis

medida, inhaladores de polvos secos, parches transdrmicos ni de soluciones acuosas estriles.
(b) SBI = Significant body information = Cantidad de informacin significativa.
AR = Reporte anual, CBE = Suplemento de cambios que se efectan y PA = Suplemento previo
a la aprobacin.
Un cambio de lugar de empaque para otras formas de dosificacin se

considera como un cambio en el lugar de manufactura y el paquete de
datos de estabilidad correspondiente deber enviarse para su
consideracin y aprobacin (ver VII. 4. 1).
VII. 5. 3. Cambio en el laboratorio de anlisis

Un cambio en el laboratorio de los ensayos analticos, bajo ciertas
circunstancias, debe someterse a consideracin como un suplemento de
cambios efectuados. No se requieren datos de estabilidad adicionales.
VII. 5. 4. Cambio en la formulacin de una forma farmacutica

Los cambios en la formulacin de un producto farmacutico requieren
de una documentacin exhaustiva, generalmente enviada para su
consideracin como un suplemento, antes de su aprobacin. Una
excepcin sera la eliminacin de un colorante, la cual se puede enviar
en los reportes anuales, sin datos de estabilidad que le apoyen. Los
excipientes son particularmente crticos para formas de dosificacin
complejas como los semislidos y los sistemas de liberacin modificada.
La tabla VII. 8 resume las recomendaciones para los estudios de
estabilidad que apoyen cambios en la formulacin posteriores a la
aprobacin.
Tabla VII. 8. Datos de estabilidad para apoyar cambios en formulacin

de un producto farmacutico, despus de su aprobacin a (9).
338
Nivel de Ejemplos y definiciones Documen- Paquete de

cambio tacin estabilidad
a. Todas las formas de dosificacin: Eliminacin o

eliminacin parcial de un componente que afecta el
color, sabor o fragancia del producto farmacutico.
b. Formas slidas orales de liberacin inmediata y
formas semislidas: Cuando el efecto de todos los
cambios en los excipientes no excede el 5%, con
cambios individuales dentro de los limites
especificados en SUPAC-IR (liberacin inmediata) y
SS (semislidos). b
1 AR Tipo 1
c. Formas de dosificacin semislidas: Cambios en
proveedor de un excipiente que forma o determina la
estructura, que en principio es una entidad qumica
nica (pureza 95%).
d. Formas de dosificacin de liberacin modificada: ver
el documento de orientacin SUPAC-MR (Scale up
and postapproval changes for modified release) para
informacin especfica sobre que cambios en las
cantidades de los excipientes constituyen un nivel de
cambio 1.
Contina en la siguiente pgina
a. Formas de dosificacin slidas orales de liberacin

inmediata y semislidas. Cuando el efecto aditivo de
PA
todos los cambios en los excipientes es >5-10%, con
cambios individuales dentro de los limites
especificados en SUPAC-IR y SS. b
b. Formas de dosificacin semislidas: Cambios en el
proveedor o en el grado de un excipiente que forma
2 o da la estructura, no cubierto bajo el nivel 1. Tipo 2
c. Formas de dosificacin semislidas: Cambios en la CBE
distribucin del tamao de partcula de la sustancia
activa, si el frmaco se encuentra en suspensin.
d. Formas de dosificacin de liberacin modificada:
Cambios en el grado tcnico y/o especificaciones de
un excipiente que no acta sobre el control de la
liberacin.
e. Formas de dosificacin de liberacin modificada: Ver
el documento de orientacin SUPAC-MR, para PA Ver.
informacin especfica sobre que cambios en las . SUPAC.
cantidades de los excipientes que controlan la . -MR
liberacin constituyen un nivel de cambio 2.
No
SBI c - SBI c
339
a. Todas las formas de dosificacin: Cualquier cambio Tipos

cualitativo o cuantitativo en excipientes, mas all de
2 - 3/4
los i8ntervalos anotados en el nivel 2.
PA
b. Formas de dosificacin semislidas: Cambios en la
3 forma cristalina de un frmaco, si es que el frmaco 3/4 - 4
se encuentra en suspensin.
(a) No incluye productos Inhaladores de dosis medida, inhaladores de polvos secos, parches
transdrmicos ni de soluciones acuosas estriles.
(b) Los cambios permitidos en la formulacin se basan en la composicin aprobada y no en los
cambios en composicin de los niveles 1 y 2. Cambios en diluyentes (excipientes c. b. p.)
debidos a cambios en componentes y composicin de excipientes se permiten y son
excluidos del limite de cambio del 10%.
(c) Significant body of information.
VII. 5. 5. Cambio en el proceso y/o equipo de manufactura

Un cambio limitado en el proceso de manufactura de un producto, tal
como podra ser un cambio en el tipo del equipo utilizado, se puede
apoyar en el envo de datos suficientes, para demostrar que tal cambio
no altera o compromete la estabilidad. Para determinar cuando es que
un equipo es del mismo diseo y principio de funcionamiento, hay que
referirse al SUPAC-IR/MR, en su adenda de abril de 1998. En trminos
generales, se debe enviar datos de estabilidad del producto que
demuestren que el producto fabricado con los cambios es comparable o
equivalente al que antes fue aprobado. Los tipos de solicitudes y los
correspondientes paquetes de estabilidad necesarios se muestran en la
tabla VII. 9, para el caso de formas farmacuticas de liberacin
inmediata, orales, y semislidas. Estos requisitos han incorporado los
criterios de los SUPACs mencionados. Para formas de dosificacin ms
complejas, para las cuales sera apropiado enviar datos adicionales, es
necesario consultar al equipo qumico que revisa, para saber que datos
adicionales son necesarios. Es necesario establecer un compromiso para
cumplir o completar los estudios de estabilidad normal o estndar, de
acuerdo al protocolo aprobado para tal fin, esto es, en los 3 primeros
lotes de produccin obtenidos con el procedimiento de manufactura
modificado. Si los resultados son aceptables, se puede mantener la
fecha de caducidad previamente establecida
Las solicitudes para aprobacin de cambios en el lugar de fabricacin
de cualquier parte del proceso deben cumplir con lo establecido en 4. 2.
1.
Tabla VII. 9. Datos de estabilidad necesarios para apoyar cambios en el

proceso de manufactura a (9).
340
Nivel del Ejemplos y definiciones Documen- Paquete de

cambio tacin estabilidad
Proceso:
Cambios en los parmetros de proceso como tiempos de AR Tipo 0
mezclado, velocidades de operacin dentro de los lmites de
la solicitud de registro y/o de la validacin.
1
Equipo:
Cambio de equipo no automtico a uno automtico o equipo
mecnico; o cambio a un equipo alterno del mismo diseo y AR Tipo 1
principios de operacin.
Proceso: No -
Cambios en los parmetros de proceso como tiempos de SBI b SBI b
mezclado, velocidades de operacin fuera de los lmites de la Tipo
solicitud de registro y/o de la validacin.
a. Formas de dosificacin slidas orales, de liberacin CBE 1 1
inmediata
b. Formas de dosificacin semislidas CBE 2 4
c. Formas de dosificacin de liberacin modificada CBE 3 2
2 Equipo:
Cambio de equipo a uno de diferente diseo y/o principios de
operacin.
a. Formas de dosificacin slidas orales, de liberacin PA 2 3/4
inmediata
2 4
b. Formas de dosificacin semislidas CBE
3 4
c. Formas de dosificacin de liberacin modificada PA
3 Proceso: No -
b
Cambio en el tipo de proceso usado en la fabricacin del SBI SBI b
producto como cambiar de granulacin hmeda a compresin Tipo
directa del polvo seco:
a. Formas de dosificacin slidas orales, de liberacin PA 2 3/4
inmediata
b. Formas de dosificacin de liberacin modificada PA 4 4
(a) No incluye productos biotecnolgicos ni biolgicos as como tampoco Inhaladores de dosis

medida, inhaladores de polvos secos, parches transdrmicos ni de soluciones acuosas estriles.
(b) SBI = Significant body information = Cantidad de informacin significativa.
AR = Reporte anual, CBE = Suplemento de cambios que se efectan y PA = Suplemento previo
a la aprobacin.
VII. 5. 6. Cambio en el tamao del lote de un producto farmacutico
341
Aqu hay que considerar que un cambio del tamao de lote, ms all
de lo establecido en la solicitud de registro, puede incluir un cambio en
el equipo o en su modo de operacin o de otros parmetros de la
manufactura descritos en la solicitud de registro. Si no se planea realizar
un cambio de equipo, entonces la circunstancia sera que con cambios
ms grandes en el tamao del lote, los riesgos de afectar la estabilidad
seran tambin mayores. La tabla VII. 10 presenta los estudios de
estabilidad recomendados, para diferentes situaciones de cambio de
tamao de lote, que no comprendan los cambios en el equipo ni en los
principios de funcionamiento.
S un equipo llegase a cambiarse, al cambiar el tamao del lote,
entonces habr que referirse a un cambio en el proceso de manufactura,
tal como se describe en VII. 4. 5.
Tabla VII. 10. Datos de estabilidad necesarios para apoyar cambios en

el tamao del lote a (9).
Nivel del Ejemplos y definiciones Docume Paquete

cambio n-tacin de
estabilida
d
1 Formas de dosificacin slidas orales
(tabletas, cpsulas, polvos para
reconstitucin), formas semislidas y
soluciones orales: Un cambio en el AR Tipo 1
tamao del lote de hasta 10 veces el
tamao del lote pivote para estudios
clnicos o biolote.
2 Formas de dosificacin slidas orales
(tabletas, cpsulas, polvos para
reconstitucin), formas semislidas y
soluciones orales: Un cambio en el CBE Tipo 2
tamao del lote ms all de 10 veces el
tamao del lote pivote para estudios
clnicos o biolote.
(a) No incluye productos Inhaladores de dosis medida, inhaladores de polvos secos, parches
transdrmicos ni de soluciones acuosas estriles.
VII. 5. 7. Reproceso de un producto farmacutico

Los datos de estabilidad que se enven para apoyar el reproceso de un
lote especfico de un producto farmacutico debe tomar en cuenta la
naturaleza del procedimiento de reproceso as como cualquier impacto
especfico que ste pudiera tener sobre el perfil de estabilidad que
342
actualmente posea el frmaco. El periodo de la fecha de expiracin o

caducidad para un producto reprocesado no deber exceder a aquel del
lote original, debiendo calcularse desde la fecha de manufactura del lote
original o ms viejo.
El que sea aceptado o no el reproceso de un lote especfico de un
producto depende de la naturaleza del procedimiento de reproceso, el
cual puede ir, por ejemplo, desde un reempacado de un lote cuando el
equipo de empaque no ha funcionado bien, hasta la pulverizacin y
recompresin de un lote de tabletas. Debe contactarse previamente a
las autoridades sanitarias revisan estas situaciones, para determinar si
el procedimiento de reproceso sera aceptable para ellos. Cualquier lote
de un producto farmacutico que sea reprocesado deber ser colocado
en estudios de estabilidad acelerada y de largo plazo, utilizando el
protocolo correspondiente a un paquete de estabilidad tipo 2 (tabla VII.
5).
VII. 5. 8. Cambio en el envase o tapa de un producto farmacutico

Podran ser necesarios diferentes paquetes de estabilidad para apoyar
un cambio en el envase y/o tapa de un producto farmacutico (tabla VII.
11). El primer factor para determinar el tipo de paquete de estabilidad
que sera necesario llevar a cabo, es el preguntarse si el cambio
planeado afectara las propiedades protectoras del empaque primario o
no. Las propiedades protectoras del sistema envase tapa incluyen,
entre otros, la permeabilidad a la humedad, al oxgeno y la transmisin
de luz. Los cambios que afecten estas propiedades deben apoyarse con
una gran cantidad de informacin al respecto. El segundo factor seran
las caractersticas de la forma de dosificacin. Una forma de dosificacin
slida generalmente sera menos afectada por el cambio en envase, que
una forma de dosificacin lquida. Debido a que la cantidad de
informacin de estabilidad exigida para justificar los cambios del sistema
envase tapa, sera conveniente consultar previamente con los qumicos
de la autoridad sanitaria, para determinar si los estudios sugeridos
satisfacen las exigencias.
Tabla VII. 11. Datos de estabilidad necesarios para apoyar los cambios
de envase tapa, posteriores al registro o aprobacin, para productos
farmacuticos slidos y lquidos (9).
Tipo de cambio Definicin Ejemplos Paquete de

estabilidad
Cambios que no 1. Cambios de tapa. Adicin o cambio de caractersticas Tipo 0
afectan las de resistencia al fro de un empaque
propiedades de o el cambio de tapa de rosca de
343
proteccin del metal a plstico, mientras que el

sistema envase/ empaque interno de la tapa
tapa. permanece igual.
2. Cambios de empaque Tipo 0
Cambio de caja de cartn.
secundario.
3. Eliminacin de
Eliminacin de:
material no
Tipo 0
farmacutico. a. Un inserto
Tipo 1
b. Un material de relleno
4. Cambio de forma del Tipo 0

Sin cambiar el tamao.
envase/tapa.
5. Cambio del tamao de Tipo 0
a. Dentro de los tamaos
envase/tapa.
aprobados.
Tipo 2
b. Fuera de los tamaos
aprobados
Cambios que 1. Adicin o cambio de a. Adicin o cambio a un sellado
pueden afectar componentes para por calor
las propiedades aumentar la
i- Para una forma farmacutica Tipo 1
de proteccin proteccin, dentro del
slida oral.
del sistema mismo sistema.
envase/tapa. ii- Para un producto lquido oral. Tipo 2
b. Adicin o cambio de desecante Tipo 2
o relleno.
c. Adicin de caja de cartn o Tipo 2
envoltura.
2. Cambio del fabricante a. Uso de un protocolo para
equivalencia de envase o tapa
o formulacin de un
aprobada.
componente del
envase/tapa, i- Para una forma farmacutica
slida oral. Tipo 1
incluyendo el frasco o
la resina de un
ii- Para un producto lquido oral.
empaque de burbuja, Tipo 1
el empaque interno de b. Sin un protocolo de equivalencia
la tapa, sellos para un envase o tapa Tipo 2
laminados, aprobada.
desecantes, rellenos,
etc., dentro del mismo
sistema.
SBI No SBI
Para un producto farmacutico
3. Cambio a un sistema Tipo
slido o lquido oral.
de envase/tapa
diferente. 3 4
(a) En ciertas circunstancias, particularmente con frmacos muy sensibles, se pueden requerir
estudios de estabilidad adicionales. No incluye productos Inhaladores de dosis medida,
inhaladores de polvos secos, parches transdrmicos ni de soluciones acuosas estriles.
SBI = Significant body information = Cantidad significativa de informacin.
344
VII. 6. Bibliografa
1. Diccionario planeta de la lengua espaola. Editorial Planeta, Mxico,

pp. 1019 (1991).
2. Hopeman, R. J. Produccin: Conceptos, anlisis y control. Editorial
CECSA, Mxico (1971).
3. PMAs joint QC-PDS stability committee. Stability concepts. Pharm.
Technol. 8 (6), 42-48 (1984).
4. Grimm, W. Stability testing in industry. En: Grimm, W. Stability testing
of drug products. Wissenschaftliche Verlagsgesellschaft, Stuttgart
Alemania, pp. 156-169 (1987).
5. Grimm, W. General concept of stability testing. En: Grimm, W. y
Krummen, K. Stability testing in the EC, Japan and the USA.
Wissenschaftliche Verlagsgesellschaft, Stuttgart Alemania, pp. 191-
223 (1993).
6. Nangia, A., Lam, F. y Hung, Ch. T. A stability Study of aqueous solution
of norfloxacin. Drug Dev. Ind. Pharm., 17 (5), 681-694 (1991).
7. Monkhouse, D. C. Excipient compatibility possibilities and limitations
in stability prediction. En: Grimm, W. y Krummen, K. Stability testing
in the EC, Japan and the USA. Wissenschaftliche Verlagsgesellschaft,
Stuttgart Alemania, pp. 67-74 (1993).
8. Venkataram, S., Khohlokwane, M. y Wallis, S. H. Differential scanning
calorimetry as a quick scanning technique for solid state stability
studies. Drug Dev. Ind. Pharm., 21 (7), 847-855 (1995).
9. Orientacin para la industria. Stability testing of drugs substances
and drug products. Draft guidance. U. S. Department of health and
human services, FDA, CDER y CBER, Rockville MD USA, (1998).
10. Krummen, K. Stability testing during development. En: Grimm, W.
Stability testing of drug products. Wissenschaftliche
Verlagsgesellschaft, Stuttgart Alemania, pp. 210-225 (1987).
11. Kumar, V., Sunder, N. y Potdar, A. Critical factors in development
pharmaceutical formulations. An overview, part I. Pharm. Technol. (3),
94-102 (1992).
12. Piechocki, J. T. y Wolters, R. J. Light stability studies: A misnomer.
Pharm. Technol. (1), 60-65 (1994).
345
346
APENDICE
NORMA MEXICANA PARA LA ESTABILIDAD DE LOS
MEDICAMENTOS.
347
SECRETARIA DE SALUD
NORMA Oficial Mexicana NOM-073-SSA1-1993. Estabilidad de
medicamentos.
Al margen un sello con el Escudo Nacional, que dice: Estados Unidos

Mexicanos - Secretara de Salud
NORMA OFICIAL MEXICANA NOM- 073-SSA1-1993, ESTABILIDAD DE
MEDICAMENTOS.
FRANCISCO J. HIGUERA RAMREZ. Director General de Control de
Insumos para la Salud, por acuerdo del Comit consultivo Nacional de
Normalizacin de Regulacin y Fomento Sanitario, con fundamento en
los artculos 39 de la Ley Orgnica de la Administracin Pblica Federal;
194 fraccin III, 194 Bis 195, 196, 197, 231,232 y 233 de la Ley General
de Salud; 38 fraccin II, 40 fracciones I y XI, y 47 de la Ley Federal sobre
Metrologa y Normalizacin; 1130, 1133 y dems aplicables del
Reglamento de la Ley General de Salud en Materia de Control Sanitario
de Actividades, Establecimientos, Productos y Servicios; 8o. Fraccin IV y
12 fraccin I del Reglamento Interior de la Secretara de Salud, y
CONSIDERANDO
Que con fecha 8 de agosto de 1994, en cumplimiento de lo previsto en el
artculo 46 fraccin I de la Ley Federal sobre Metrologa y Normalizacin, la
Direccin General de Control de Insumos para la Salud, present al Comit
Consultivo Nacional de Normalizacin de Regulacin y Fomento Sanitario, el
anteproyecto de la presente Norma Oficial Mexicana.
Que con fecha 4 de noviembre de 1994, en cumplimiento del acuerdo del
Comit y de lo previsto en el artculo 47 fraccin I de la Ley Federal sobre
Metrologa y Normalizacin, se public en el Diario Oficial de la federacin el
proyecto de la presente Norma Oficial mexicana, a efecto de que dentro de los
siguientes noventa das naturales posteriores a dicha publicacin, los interesados,
presentaran sus comentarios al Comit Consultivo Nacional de Normalizacin de
regulacin y Fomento Sanitario.
Las respuestas a los comentarios recibidos por el mencionado Comit, fueron
publicadas previamente a la expedicin de esta norma en el Diario oficial de la
Federacin en los trminos del artculo 47 fraccin III de la Ley Federal sobre
metrologa y Normalizacin.
Que en atencin a las anteriores consideraciones, contando con la aprobacin
del Comit Consultivo Nacional de Normalizacin de regulacin y fomento
Sanitario, se expide la siguiente:
NORMA OFICIAL MEXICANA NOM- 073-SSA1-1993, ESTABILIDAD DE
MEDICAMENTOS.
NDICE
PREFACIO
348
0. INTRODUCCIN
1. OBJETIVO
2. CAMPO DE APLICACIN
3. REFERENCIAS
4. DEFINICIONES, SMBOLOS Y ABREVIATURAS
5. CONDICIONES ESPECIFICAS
6. FRMACOS
7. MEDICAMENTOS
8. CONCORDANCIA CON NORMAS INTERNACIONALES
9. BIBLIOGRAFA
10. OBSERVANCIA DE LA NORMA
11. VIGENCIA
PREFACIO
Intervinieron en la elaboracin de esta norma oficial mexicana las siguientes
instituciones y entidades.
- SECRETARIA DE SALUD
Direccin General de Control de Insumos para la Salud
Cmara Nacional de la Industria Farmacutica
Secretara de Comercio y Fomento Industrial SECOFI
Colegio Nacional de Qumicos Farmacuticos Bilogos, Mxico, A.C.
Asociacin farmacutica Mexicana, A.C.
Produccin Qumica Farmacutica, A.C.
Instituto Mexicano del Seguro Social
Academia Nacional de Medicina
Academia Nacional de Ciencias Farmacuticas
Centro de Investigacin y Estudios Avanzados, IPN
Universidad autnoma Metropolitana Plantel Xochimilco
Laboratorios Richardson Vicks, S.A. de C.V.
Laboratorios Kener, S.A. de C.V.
Productos Roche, S.A. de C.V.
Laboratorios Pisa, S.A. de C.V.
0. Introduccin
Esta Norma se emite con el objeto de establecer los requisitos de los estudios
de estabilidad que deben de efectuarse a los medicamentos nacionales o
importados que se comercialicen en Mxico de tal forma que se garantice la
349
conservacin de sus propiedades fsicas, qumicas, microbiolgicas y biolgicas

por un tiempo determinado y que tenan al momento de ser fabricados.
1. Objetivo. Esta norma tiene por objeto establecer los requisitos para llevar a
cabo y reportar los estudios de estabilidad de medicamentos.
1.1 El objetivo de los estudios de estabilidad, es proveer evidencia
documentada de como las caractersticas fsicas, qumicas, fisicoqumicas,
microbiolgicas y biolgicas del medicamento, varan con el tiempo bajo la
influencia de factores ambientales tales como: temperatura, humedad y luz, y
establecer las condiciones de almacenamiento adecuadas y el periodo de
caducidad. El titular del registro es el responsable de la estabilidad del
medicamento en el mercado bajo las condiciones de almacenamiento establecidas
por l.
1.2 Todos los medicamentos que se encuentran en el mercado deben de tener
fecha de caducidad y sta no debe exceder a los 5 aos de la fecha de
fabricacin.
2. Campo de aplicacin. Esta norma es de observancia obligatoria en los
establecimientos descritos en el ttulo dcimo segundo, captulo VII, artculo 257
fraccin I de la Ley General de Salud.
3. Referencias
NOM-Z-55 Metrologa vocabulario en trminos fundamentales y
generales.
4. Definiciones, smbolos y abreviaturas
Para efectos de la presente norma se entiende por:
4.1 Condiciones de almacenamiento particulares. Las condiciones
especficas y diferentes a las condiciones normales de almacenamiento, las cuales
se indican en el marbete del medicamento.
4.2 Condiciones de almacenamiento normales. La conservacin de
medicamentos en locales secos (no ms de 65% de humedad relativa), bien
ventilados a temperatura ambiente (entre 15C y 30C), al abrigo de la luz intensa
y de olores extraos u otras formas de contaminacin.
4.3 Estabilidad. Es la propiedad de un medicamento contenido en un envase
de determinado material para mantener durante el tiempo de almacenamiento y
uso las caractersticas fsicas, qumicas, fisicoqumicas, microbiolgicas y
biolgicas entre los lmites especificados.
4.4 Estudios de Estabilidad Pruebas que se efectan a un medicamento para
determinar el periodo de caducidad y las condiciones de almacenamiento en que
sus caractersticas fsicas, qumicas, fisicoqumicas, microbiolgicas y biolgicas
permanecen dentro de lmites especificados, bajo la influencia de diversos factores
ambientales como temperatura, humedad y luz.
4.5 Estabilidad acelerada. Estudios diseados para incrementar la velocidad
de degradacin qumica y/o biolgica o el cambio fsico de un medicamento, por
medio del empleo de condiciones exageradas de almacenamiento.
350
4.6 Estudios de estabilidad a largo plazo (tiempo real). Son aquellos en los
que se evalan las caractersticas fsicas, qumicas, fisicoqumicas, biolgicas o
microbiolgicas del medicamento durante el periodo de caducidad bajo
condiciones de almacenamiento normales o particulares.
4.7 Estudios de anaquel. Estudios diseados para verificar la estabilidad del
medicamento a partir de lotes de produccin almacenados, en las condiciones
normales o particulares establecidas.
4.8 Frmaco. Toda sustancia natural o sinttica que tenga alguna actividad
farmacolgica y que se identifique por sus propiedades fsicas, qumicas o
acciones biolgicas, que no se presenta en forma farmacutica y que rena
condiciones para ser empleada como medicamento o ingrediente de un
medicamento.
4.9 Fecha de caducidad. Fecha que se indica en el material de envase
primario y/o secundario y que determina el periodo de vida til del medicamento.
Se calcula a partir de la fecha de fabricacin, y se toma en cuenta el periodo de
caducidad.
4.10 Periodo de caducidad. Es el tiempo estimado durante el cual el lote de
producto permanece dentro de las especificaciones si se conserva bajo
condiciones de almacenamiento normales o particulares. Este periodo no debe
exceder de 5 aos.
4.11 Periodo de caducidad tentativo. Es el periodo de caducidad provisional
que la Secretara de Salud autoriza en base a los resultados de los estudios de
estabilidad acelerada presentados en el paquete de registro del producto.
4.12 Forma Farmacutica. Es la mezcla de uno o ms frmacos con o sin
aditivos, que presentan caractersticas para su adecuada dosificacin,
conservacin y administracin.
4.13 Lote. Cantidad de un frmaco o medicamento que se produce en un ciclo
de fabricacin y cuya caracterstica esencial es su homogeneidad.
4.14 Lote Piloto. Fabricacin de un medicamento, por un procedimiento
representativo y que simule aquel que ser utilizado durante la produccin
rutinaria para comercializacin.
4.15 Lote de produccin. Lote destinado para los fines de comercializacin.
4.16 Medicamento. Toda sustancia o mezcla de sustancias de origen natural o
sinttico que tenga efecto teraputico, preventivo, rehabilitatorio o de diagnstico,
que se presente en forma farmacutica y se identifique como tal por su actividad
farmacolgica, caractersticas fsicas, qumicas y biolgicas. Cuando un producto
contenga nutrimentos ser considerado como medicamento, siempre que se trate
de un preparado que contenga de manera individual o asociada: vitaminas,
minerales, electrolitos, aminocidos o cidos grasos, en concentraciones
superiores a las de los alimentos naturales y adems se presenten en alguna
forma farmacutica definida y la indicacin de uso contemple efectos teraputicos,
preventivos, rehabilitatorios o de diagnstico.
351
4.17 Mtodo analtico indicativo de estabilidad. Mtodo analtico cuantitativo

basado en las caractersticas qumicas estructurales o en las propiedades
biolgicas de cada frmaco de un medicamento capaz de distinguir cada
ingrediente activo de otras sustancias y de sus productos de degradacin, de
manera que el frmaco pueda ser cuantificado con exactitud y precisin.
4.18 Protocolo de estabilidad. Conjunto de indicaciones relativas al manejo
de las muestras, a las pruebas, mtodos analticos y condiciones del estudio de
estabilidad (tiempo, temperaturas, humedad, luz, frecuencia de los anlisis).
4.19 Envase primario. Recipiente o material que esta en contacto con el
medicamento.
4.20 Envase secundario. Material de empaque dentro del cual se coloca el
envase primario.
4.21 Validacin. Accin de probar que cualquier material, proceso,
procedimiento, actividad, equipo o mecanismo empleado en la fabricacin o
control debe lograr los resultados para los cuales se destina.
4.21.1 La validacin de un mtodo analtico debe de cumplir con las
caractersticas de linealidad, exactitud, precisin, reproducibilidad y/o repetibilidad
y especificidad.
4.21.1.1 linealidad. La linealidad de un sistema o mtodo analtico es su
habilidad para asegurar que los resultados analticos, los cuales pueden ser
obtenidos directamente o por medio de una transformacin matemtica bien
definida, son proporcionales a la concentracin de la sustancia dentro de un
intervalo determinado.
4.21.1.2 Exactitud. La exactitud de un mtodo analtico es la concordancia
entre un valor obtenido experimentalmente y el valor de referencia. Se expresa
como el porcentaje de recobro obtenido del anlisis de muestras a las que se les
han adicionado cantidades conocidas de la sustancia.
4.21.1.3 Precisin. La precisin de un mtodo analtico es el grado de
concordancia entre resultados analticos individuales cuando el procedimiento se
aplica repetidamente a diferentes muestreos de una muestra homognea del
producto. Usualmente se expresa en trminos de desviacin estndar o del
Coeficiente de Variacin.
4.21.1.4 Reproducibilidad. Es la precisin de un mtodo analtico expresada
como la concordancia entre determinaciones independientes realizadas bajo
condiciones diferentes (diferentes analistas, en diferentes das, en el mismo y/o
diferentes laboratorios utilizando el mismo y/o diferentes equipos).
4.21.1.5 Repetibilidad. Es la precisin de un mtodo analtico expresada como
la concordancia obtenida entre determinaciones independientes realizadas bajo
las mismas condiciones (analista, tiempo, aparato, laboratorio).
4.21.1.6 Especificidad. Es la habilidad de un mtodo analtico para obtener
una respuesta debida nicamente a la sustancia de inters y no a otros
componentes de la muestra.
352
4.22 Smbolos y abreviaturas

ms menos
% por ciento
C grados centgrados
5. Condiciones especificas
5.1 Estudios de Estabilidad Acelerada. Para registro de un medicamento o
modificaciones a las condiciones de registro. Se deben llevar a cabo en tres lotes
piloto o de produccin con la formulacin y el material de envase sometidos a
registro, de acuerdo al siguiente cuadro:
A.- Medicamentos con frmacos nuevos:
Tiempo: 180 das
Condiciones de Anlisis:
almacenamiento:
40C 2C con 75 por 30, 60, 90 y 180 das.
ciento de humedad relativa
5 por ciento para formas
40C 2C a humedad 30, 60, 90 y 180 das.
ambiente para formas
farmacuticas lquidas y
semislidas.
30C 2C a humedad Inicial, 90 y 180 das.
ambiente para todas las
B.- Medicamentos con frmacos conocidos:

Tiempo: 90 das
Condiciones de Anlisis:
almacenamiento:
40C 2C con 75 por 30, 60 y 90 das.
ciento de humedad relativa
5 por ciento para formas
40C 2C a humedad 30, 60 y 90 das.
ambiente para formas
farmacuticas lquidas y
353
semislidas.
30C 2C a humedad Inicial y 90 das.
ambiente para todas las
El material de envase primario de un medicamento con un frmaco

fotosensible, debe proporcionar proteccin a la luz y para demostrar que el
producto es estable: Evaluar un lote conservado bajo condiciones de luz natural o
de luz artificial que semejen las condiciones naturales, durante un periodo de tres
meses con anlisis inicial y final.
5.1.1 Cuando un medicamento en particular no pueda cumplir con los requisitos
de tiempo, humedad o temperatura descritas en el punto 5.1 se deben realizar
estudios de estabilidad a largo plazo bajo las condiciones particulares y el tiempo
en que se propone conservar y/o usar el producto.
5.2 Estudios de estabilidad a largo plazo. Se deben llevar a cabo en tres lotes
piloto o de produccin a 30C 2C o a las condiciones particulares, por un
periodo mnimo igual al periodo de caducidad tentativo, para confirmarlo. Analizar
cada tres meses durante el primer ao, cada seis meses durante el segundo ao y
despus anualmente.
5.3 Estudios de anaquel. El nmero de lotes que se deben analizar anualmente
es el siguiente:
Nmero de lotes Nmero de lotes

fabricados por analizados por
ao ao
1 a 20 1
ms de 20 2
5.4 Cuando un lote de medicamento sea reprocesado, se debe tener toda la

informacin del reproceso firmada por el qumico responsable. Cuando el
reproceso implique cambios significativos respecto al proceso original, se debe
confirmar la estabilidad del lote con un anlisis adicional a un tiempo y
temperatura mximos que demuestren que el reproceso no modifica las
especificaciones del producto.
5.5 Cuando se cambie el mtodo analtico durante el estudio de estabilidad, se
debe demostrar que los dos mtodos son equivalentes mediante el proceso de
validacin.
5.6 Para justificar cualquier cambio en el tipo de material de envase primario se
debe llevar a cabo un estudio de estabilidad.
354
5.7 En cualquier modificacin significativa a la frmula o al proceso de

fabricacin originales del medicamento registrado, el fabricante debe justificar los
cambios, con un estudio de estabilidad como se indica en el inciso 5.1 de al
menos dos lotes y con el cual se demuestre que el medicamento es tan estable
como el original, asignndole la misma caducidad que el medicamento tena antes
de la modificacin.
5.8 Los resultados de los estudios de estabilidad slo sern admitidos en papel
membretado del fabricante reconocido por la autoridad sanitaria y firmados por el
qumico responsable del laboratorio.
5.8.1 Para medicamentos importados, la informacin debe ser firmada por el
profesional responsable del laboratorio fabricante y por el qumico responsable del
laboratorio titular del registro en Mxico.
5.9 Todos los anlisis que se llevan a cabo durante el estudio de estabilidad de
cualquier medicamento, deben hacerse por duplicado y reportarse con mtodos
indicativos de estabilidad.
5.10 Los reportes de los estudios de estabilidad de medicamentos deben
proporcionar la siguiente informacin:
5.10.1 Informacin general del medicamento:
5.10.1.1 Denominacin distintiva o marca comercial.
5.10.1.2 Forma farmacutica y concentracin.
5.10.1.3 Proveedor del frmaco.
5.10.1.4 Frmula cuantitativa unitaria y por tamao de lote, incluyendo la
variacin justificada del ajuste de los aditivos.
5.10.2 Informacin general, especificaciones y mtodos analticos:
5.10.2.1 Lmites de aceptacin justificados para las caractersticas fsicas,
qumicas, microbiolgicas y biolgicas, as como la presencia en su caso, de l o
los productos de degradacin en forma cualitativa y/o cuantitativa.
5.10.2.2 Metodologa utilizada para cada parmetro medido.

5.10.2.3 Informacin de la linealidad, precisin, exactitud, reproducibilidad,
repetibilidad y especificidad del mtodo analtico indicativo de estabilidad.
5.10.3 Protocolo del estudio.
5.10.3.1 Descripcin del estudio incluyendo:
5.10.3.1.1 Nmero de lotes seleccionados
5.10.3.1.2 Tiempos de muestreo
5.10.3.1.3 Para medicamentos que deben ser reconstituidos datos de
estabilidad de la formulacin tanto antes como despus de la reconstitucin.
5.10.3.2 Condiciones de almacenamiento.
5.10.4 Anlisis de los datos y conclusiones.
355
5.10.4.1 Evaluacin de los datos incluyendo clculos, si procede.

5.10.4.2 Proposicin de la fecha de caducidad y justificacin.
5.10.4.3 En el caso de determinar la potencia por mtodo qumico, en productos
biolgicos, se debe demostrar su equivalencia con el mtodo biolgico.
5.10.5 Resumen general del procedimiento de manufactura de los lotes
empleados en el estudio.
5.10.6 Bibliografa
6. Frmacos
Para fines de registro de un medicamento con frmacos nuevos en Mxico, el
fabricante del medicamento debe presentar ante la Secretara de Salud estudios
de estabilidad acelerada y/o a largo plazo de tres lotes del (los) frmaco(s)
efectuados por el fabricante de los mismos, utilizando mtodos analticos
validados (vase 4.21).
6.1 Los estudios de estabilidad deben presentarse en papel membretado y
firmados por el Qumico responsable del fabricante del frmaco as como por el
Qumico responsable del laboratorio titular del registro del medicamento en
Mxico.
7. Medicamentos
El estudio de estabilidad de un medicamento debe incluir las pruebas para las
caractersticas mencionadas a continuacin en cada una de las formas
farmacuticas. Cuando el medicamento no requiere de alguna de las pruebas
indicadas, se deber sustentar tcnicamente su eliminacin.
En el caso de sustancias relacionadas y/o productos de degradacin, se
determinarn nicamente si la monografa correspondiente as lo establece.
7.1 Tabletas y grageas. Los parmetros a evaluar son: Concentracin del
frmaco, caractersticas organolpticas, desintegracin y/o disolucin, humedad
cuando proceda.
7.2 Cpsulas y obleas. Los parmetros a evaluar son: Concentracin del
frmaco, caractersticas organolpticas del contenido y de la cpsula u oblea,
desintegracin y/o disolucin, humedad cuando proceda.
7.3 Emulsiones. Los parmetros a evaluar son: Concentracin del frmaco,
caractersticas organolpticas, viscosidad, y cuando proceda: prueba de eficacia
de conservadores y/o valoracin de los mismos, lmites microbianos, esterilidad y
prueba de irritabilidad ocular o en piel, en anlisis inicial y final. Todos los estudios
deben llevarse a cabo en muestras en contacto con el tapn para determinar si
existe alguna interaccin entre ellos, que afecte la estabilidad del producto.
7.4 Soluciones y suspensiones. Los parmetros a evaluar son la
concentracin del frmaco, caractersticas organolpticas, pH, lmites microbianos,
y cuando proceda resuspendabilidad (en suspensiones), prdida de peso (envase
de plstico), prueba de eficacia de conservadores y/o valoracin de los mismos,
esterilidad, materia particulada y pruebas de irritabilidad ocular o en piel, que se
deben llevar a cabo en anlisis inicial y final. Todos los estudios deben llevarse a
356
cabo en muestras en contacto con el tapn para determinar si existe alguna

interaccin que afecte la estabilidad del producto.
7.5 Polvos y liofilizados. Los parmetros a evaluar son: Concentracin del
frmaco, caractersticas organolpticas, humedad; y cuando proceda prueba de
eficacia y/o valoracin de los mismos, esterilidad, stas se deben llevar a cabo en
anlisis inicial y final. Si el producto es para reconstituir, se debe preparar de
acuerdo a las instrucciones indicadas en la etiqueta y los parmetros a examinar
durante el periodo de conservacin recomendado son: Concentracin del frmaco,
caractersticas organolpticas y pH.
7.6 Aerosoles y nebulizadores. Los parmetros a evaluar son: Concentracin
del frmaco, dosis entregadas (mg/accin de la vlvula), caractersticas
organolpticas, tamao de partcula (suspensiones). Se deben considerar las
especificaciones para lmites microbianos o la cuenta total de microorganismos
aerobios, cocos gram positivos y estafilococos coagulasa positiva, cuando
proceda.
7.7 Cremas, geles, pastas y ungentos (pomadas). Los parmetros a
evaluar son: Concentracin del frmaco, caractersticas organolpticas,
homogeneidad, penetrabilidad y/o viscosidad; y cuando proceda: pH, prueba de
eficacia de conservadores y/o valoracin de los mismos, tamao de partcula,
prdida de peso (envase de plstico), esterilidad y prueba de irritabilidad ocular o
en piel, lmites microbianos; estas pruebas se deben llevar a cabo en anlisis
inicial y final.
7.8 Supositorios y vulos. Los parmetros a evaluar son: Concentracin del
frmaco, temperatura de fusin, caractersticas organolpticas, disolucin y/o
tiempo de licuefaccin.
7.9 Si existen otros parmetros fsicos, qumicos o biolgicos del medicamento
no mencionados en esta norma que se vean afectados durante el estudio de
estabilidad, se deben de determinar de acuerdo a lo que establece la Farmacopea
de los estados Unidos Mexicanos y sus Suplementos, as como lo que marca la
bibliografa internacional reconocida.
7.10 Para las formas farmacuticas no incluidas en esta norma, las pruebas
fsicas, fisicoqumicas, qumicas, microbiolgicas y biolgicas que se deben
efectuar durante un estudio de estabilidad son de las que incluya la Farmacopea
de los Estados Unidos Mexicanos y sus Suplementos las que resulten indicativas
de estabilidad. En caso de no existir en sta lo que marca la bibliografa
internacional reconocida.
7.11 Para obtener un periodo de caducidad tentativo de 24 meses, se requiere
de los datos analticos de los estudios de estabilidad acelerada (vase 5.1), que
demuestren que no hay cambios en los lmites de especificaciones, definidos
como:
7.11.1 Por ciento de prdida de la potencia inicial, por abajo del lmite inferior
especificado en la monografa del producto.
357
7.11.2 Cualquier producto de degradacin que exceda su lmite de

especificacin.
7.11.3 Cuando se excedan lmites de pH.
7.11.4 Cuando se excedan los lmites de especificaciones de disolucin.
7.11.5 Cuando no cumpla con las especificaciones de apariencia y propiedades
fsicas.
7.11.6 Cuando se excedan los lmites microbiolgicos y biolgicos. Estos datos
deben ser confirmados con los estudios de estabilidad a largo plazo (vase 5.2).
7.12 Los datos de estabilidad a largo plazo para confirmar el periodo de
caducidad tentativo, deben ser enviados a ala secretara de salud por el titular del
registro en un plazo no mayor a 6 meses, despus de que los lotes utilizados para
el registro, cumplan con este trmino.
7.13 La fecha de caducidad tentativa otorgada por la Secretara de Salud
puede ser ampliada por el tiempo solicitado por el fabricante cuando se justifique
con la presentacin de los datos de estabilidad de tres lotes de produccin
estudiados a largo plazo (vase el punto 5.2).
7.14 Para aquellos medicamentos en los cuales se desee ampliar el periodo de
caducidad a 36 meses o que se encuentren en el mercado sin indicar fecha de
caducidad, sta se debe fijar con estudios de estabilidad de tres lotes bajo
cualquiera de las siguientes condiciones:
7.14.1 Un ao a temperatura de anaquel ms tres meses a 40C 2C con
75% de humedad relativa para slidos y a 40C 2C para lquidos y semislidos.
7.14.2 Dos aos a temperatura de anaquel ms un ao a 30C 2C.
7.14.3 48 meses a las condiciones de anaquel.
En cualquiera de los casos se debe confirmar el plazo de
caducidad tentativa con estudios de estabilidad a largo plazo.
7.15 En el caso en que un medicamento se indique por el fabricante para ser
utilizado adicionado de otro, como en el caso de parenterales, vitaminas, entre
otros, la mezcla debe ser estudiada de acuerdo a lo indicado en el etiquetado, en
cuanto a la estabilidad de los frmacos.
7.16 Tratndose de productos biolgicos, adems de los parmetros en la
forma farmacutica descrita, se requiere de evaluar su potencia como actividad
biolgica, de acuerdo a lo que establece la Farmacopea de los Estados Unidos
Mexicanos y sus Suplementos. En caso de no existir en sta, lo que marque la
bibliografa internacional reconocida.
7.17 Cuando un medicamento tiene la misma frmula cualitativa en el mismo
material de envase, en presentaciones con diferentes concentraciones del
frmaco, se deben presentar los resultados del estudio de estabilidad de las
presentaciones con la menor y mayor concentracin del frmaco.
7.18 Para medicamentos de importacin el periodo de caducidad tentativo debe
ser confirmado con estudios de estabilidad a largo plazo, de muestras
358
conservadas y analizadas en Mxico; las excepciones deben ser concertadas y

evaluadas con la Secretara de Salud.
7.19 Para medicamentos con frmacos nuevos, durante los estudios clnicos de
fases I, II, III, y IV se deben guardar muestras de material clnico y analizar al inicio
y cuando menos una vez al tiempo mximo de duracin del estudio.
8. Concordancia con normas internacionales
Esta norma est parcialmente homologada con lo que se estableci en la
Conferencia Internacional de Armonizacin (ICH): Harmonisation of Stability
Testing Requirements, abril 1992.
9. Bibliografa
9.1 Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos y sus Suplementos.
9.2 Ley General de Salud.
9.3 Reglamento de la Ley General de Salud en materia de Control Sanitario de
Actividades, Establecimientos, Productos y Servicios.
9.4 NOM-Z-13 Gua para la redaccin, estructuracin y presentacin de las
Normas Oficiales Mexicanas.
9.5 Guideline for Submitting documentation for the stability of human drugs and
biologicals. Center for Drugs and Biologics Food and Drug Administration
Departament of Health and Human Services. (USA). February, 1987.
9.6 The design of stability trials
The European Organization for Quality Control Section for Quality Control in
Pharmaceutical and Cosmetic Industries. Zurich, April 1986.
9.7 Harmonization of stability testing requirements
The Regulatory Affairs Journal, august 1992.
10. Observancia de la Norma
La vigilancia del cumplimiento de la presente norma corresponde a la
Secretara de Salud, cuyo personal realizar la vigilancia y verificacin de la
misma.
11. Vigencia
Esta Norma Oficial mexicana entrar en vigor con carcter de obligatoria, a
partir del da siguiente a su publicacin en el Diario Oficial de la federacin.
Sufragio Efectivo No Reeleccin.
Mxico, D.F., a 22 de noviembre de 1995. El Director General, Francisco J.
Higuera Ramrez.- Rbrica
359
APNDICE
II
ESTADSTICA
360
ESTADSTICA
A. 2. 1. Mtodos analticos
Un factor muy importante en los estudios de estabilidad lo es sin duda
la precisin y la exactitud de los resultados analticos obtenidos en la
evaluacin de los medicamentos, al paso del tiempo. Estos datos sirven
de apoyo para el reconocimiento de un determinado patrn de la
degradacin de un producto bajo estudio. Por ejemplo, el patrn de
cambio de la concentracin de un frmaco que sirve para el
establecimiento de una fecha de caducidad.
La evaluacin de la exactitud es una determinacin de la diferencia
entre el valor promedio de los valores reales obtenidos de los resultados
analticos y la verdadera media o promedio de la poblacin. Por ejemplo,
el verdadero contenido en frmaco de un medicamento.
La precisin de un ensayo esta relacionada con su desviacin
estndar. Cuando la desviacin estndar es pequea, la precisin es
buena. La exactitud de un ensayo es tanto mejor como menor sea la
diferencia entre el verdadero valor de la variable (el valor promedio de la
poblacin), por ejemplo el contenido de un frmaco, y el valor del
promedio obtenido de los anlisis (promedio de la muestra).
El valor promedio de un conjunto de resultados analticos o media
aritmtica se conoce como una medida de tendencia central y se calcula
suponiendo que todas las observaciones (n) en una clase son iguales a
su valor medio y que la contribucin de cada una de ellas (x i) es igual.
Por lo tanto, la media se calcula por la ecuacin:
n
x = i=1 (xi / n) (A. 2. 1)
Se consideran medidas de dispersin a aquellas que nos determinan

la variabilidad de las observaciones, por ejemplo la de los resultados
analticos. Entre ellas tenemos a la varianza s 2. La varianza de un
conjunto de datos se define como la suma de los cuadrados de las
desviaciones de las observaciones con respecto a su media, dividida por
el numero de observaciones menos una. Su ecuacin es:
n
s2 = 1/(n-1) * i=1 (xi - x)2 (A. 2. 2)
La varianza tiene unidades del cuadrado de las medidas originales de

medicin, por lo que se acostumbra definir tambin a la desviacin
361
estndar, que es la raz cuadrada de la varianza, para tener una medida

de dispersin en las unidades de las medidas originales:
n
s= s2 = 1/(n-1) * i=1 (xi - x)2 (A. 2. 3)
La varianza y la desviacin estndar son medidas de dispersin

absolutas. Sin embargo, existen otras medidas de dispersin como el
coeficiente de variacin que es relativa. El coeficiente de variacin (C.
V.) es una medida de la dispersin relativa de un conjunto de datos, que
se obtiene dividiendo la desviacin estndar del conjunto entre su media
aritmtica. Mas comnmente este coeficiente se expresa tambin en su
forma de porcentaje, cuando la desviacin estndar se multiplica por
100. Para la variable x sera:
C. V. (x) = sx / x (A. 2. 4)
C. V. (x) = sx * 100/ x (A. 2. 5)
Este coeficiente de variacin, como medida de dispersin, tiene entre

sus caractersticas el que es una medida independiente de las unidades
originales de medicin. Debido a esto, el coeficiente de variacin es mas
adecuado para comparar la variabilidad de dos o mas conjuntos de
datos. Por ejemplo, para comparar la variabilidad de mtodos analticos
previamente establecidos contra un mtodo de anlisis nuevo.
La bondad de un mtodo analtico estimada a travs de sus
caractersticas centrales y de dispersin, por ejemplo de los resultados
analticos, se puede estimar, en primera instancia, cuando
determinamos la cantidad mnima reconocible con ese mtodo analtico.
Por ejemplo, cuando se realiza el ensayo por triplicado, considerando
una probabilidad estadstica del 95%:
x 4.3 * s/1.73 (A. 2. 6)
n = 3; 3 = 1.73 y el valor de tablas de t 0.025 (dos colas), para una

probabilidad del 95%, para n-1 igual a 4.3.
En este caso solo se podran reconocer como significativos valores que
se encontraran fuera de los limites de variacin considerados como
normales para este mtodo y que estaran definidos por el intervalo que
enmarca la ecuacin (A. 2. 6). Cualquier resultado que se encuentre
dentro de este intervalo, aunque sea diferente del promedio, no puede
362
considerarse como una variacin significativa. Por ejemplo, en el caso de

los estudios de estabilidad, los cambios de concentracin sern
significativos solo cuando se encuentran fuera del lmite mencionado.
Cualquier variacin dentro de estos limites es casual o producto del azar,
por lo que no debe considerarse realmente como un cambio en la
concentracin.
La ecuacin (A. 2. 6) es un caso particular de la ecuacin general para
determinar un intervalo de confianza, para una medicin puntual:
X (s/ n )*t /2 (n-1) (A. 2. 7)
Los resultados que se pretende evaluar estadsticamente podran

contener valores demasiado altos o demasiado bajos con respecto a los
valores esperados, por lo cual, procediendo de manera pragmtica,
podramos eliminar de nuestros clculos los valores mas alto y ms bajo.
Sin embargo, este procedimiento podra hacer parecer a nuestro mtodo
como uno ms sensible de lo que realmente es. Por esta circunstancia se
recomienda mejor usar todos los datos tal como se obtuvieron.
A. 2. 2. Anlisis de datos e interpretacin de los estudios a largo

plazo
Un protocolo de estabilidad debe describir tanto la manera como se
disea y se lleva a cabo el estudio as como los procedimientos
seguidos para analizar los resultados. Las fechas de caducidad o las
fechas de reanlisis deben determinarse con base en el anlisis
estadstico de los datos observados a largo plazo. Cualquier
extrapolacin ms all de los datos de los tiempos reales solo puede ser
considerada cuando se encuentra apoyada por anlisis estadsticos de
los datos de tiempos reales.
El objeto del uso de la estadstica en los estudios de estabilidad es el
establecimiento de un cierto grado de confianza suficientemente
elevado en la determinacin del periodo de caducidad. Periodo dentro
del cual los atributos del producto tales como la concentracin del
principio activo y de los productos de degradacin deben permanecer
dentro de las especificaciones o lmites establecidos.
Para un lote en particular, el tiempo durante el cual puede esperarse
que se encuentre dentro de especificaciones depende no solo de la
velocidad con que cambian sus propiedades fsicas, qumicas y
microbiolgicas sino que depende tambin del valor inicial promedio de
esos atributos. De esta manera, el valor inicial de los atributos de un lote
de producto es relevante para el establecimiento de su fecha de
caducidad, por lo que tambin debe registrarse en los reportes de
363
estabilidad. Sin embargo, la fecha de caducidad debe establecerse en

funcin de la concentracin declarada en el marbete o concentracin
terica. Esto es, haciendo referencia a ese valor para determinar cuanto
tiempo debe transcurrir para llegar al lmite inferior de la especificacin.
La variabilidad de un factor descrita a travs de una lnea recta, como
la concentracin de un frmaco en un medicamento a travs del tiempo,
puede separarse en dos componentes: una variabilidad es consecuencia
del error que se comete al ajustar una recta a puntos que no estn
exactamente sobre ella. La otra fuente de variacin es el resultado de la
determinacin de la pendiente de la recta ajustada. Por esta razn, la
fecha de caducidad no solo es funcin de los cambios cuantitativos
ocurridos en los atributos del producto en estudio sino que tambin lo
es de la precisin con que esos cambios se determinen.
Un mtodo aceptable y propuesto por la FDA, para analizar un atributo
de un producto que se espera disminuya con el tiempo y que es sujeto
de cierta variabilidad, es el del limite inferior del intervalo de confianza
al 95%. Esto significa que la fecha de expiracin o caducidad de un
producto se determinara como el tiempo que transcurre hasta el punto
en que la lnea inferior del intervalo de confianza al 95% cruza el lmite
inferior de la especificacin (ver figura II. 4, pgina 41). Cuando se
analiza un atributo que se espera que aumente al paso del tiempo, la
lnea superior que describe el intervalo de confianza al 95% sera la
referencia para determinar la fecha de caducidad.
La relacin entre dos variables como el cambio de concentracin de
un principio activo (o de su logaritmo) con respecto del tiempo se puede
describir mediante el modelo de regresin lineal simple. Por ejemplo, a
partir de un estudio de estabilidad en el cual se determinan una serie de
concentraciones (Y) a tiempos especficos (X) se pude obtener una
ecuacin que represente la relacin entre tales variables, tomando como
modelo:
Yi = Y/X i + i = 0 + 1 X i + i (A. 2. 8)
i = 1, , n
El problema sera obtener estimadores para 0 y 1, para estimar

adecuadamente la recta de regresin de la concentracin (Y) con
respecto al tiempo (X):
Y = 0 + 1 X (A. 2. 9)
364
El mtodo de mnimos cuadrados consiste en encontrar los

estimadores de 0 y 1 tales que minimicen la suma de cuadrados del
error, lo cual se expresa como:
n n
S. C. Error = i=1 (Yi - Yi)2 = i=1 (Yi - 0 - 1 Xi)2 (A. 2.

10)
Los estimadores que se obtienen son:
n
1 = i=1 (Xi - X) ( Yi - Y) / (Xi - X )2 (A. 2. 11)
= SPXY / SPXX
0 = Y - 1 - X (A. 2. 12)
La recta de regresin estimada es:
Y = 0 + 1 Xi = Y + 1 (Xi - X) (A. 2. 13)
La variabilidad de la variable dependiente se puede expresar en

trminos de suma de cuadrados:
S. C. Total = S. C. Regresin + S. C. Error (A. 2.

14)
Donde:
S. C. Total = SPYY
S. C. Regresin = 1 SPXY = 12 SPXX
S. C. Error = SPYY- 1 SPXY = (Yi Yi)2
En el caso de la regresin por mnimos cuadrados la varianza de los

valores estimados de Y para un valor dado de X (Y Xo) depende del valor
de Xo y presenta una distribucin en la que:
2Y-Xo = 2 [1/n + (Xo - X )2 / SPXX] (A. 2.

15)
365
Como estimador de 2 se utiliza S2e, la cual tiene por expresin:
S2e = S. C. Error/n-2 = SPYY - 1 SPXY / n-2 (A. 2. 16)
El estimador S2e es insesgado siempre y cuando el modelo de lnea

recta adoptada sea el correcto. En esas condiciones:
E(S2e) = 2
De esta manera, un estimador de 2Y-Xo, con dos grados de libertad,

sera:
S2Y-Xo = S2e [1/n + (Xo - X )2 / SPXX] (A. 2. 17)
Para obtener las curvas del intervalo de confianza de una recta se

tiene que un intervalo de confianza 1- para Y esta dado por:
Limite inferior = L = YXo SYXo t/2 (n-2) (A. 2. 18)

Limite superior = L = YXo + SYXo t/2 (n-2) (A. 2.
19)
La amplitud de un intervalo de confianza particular es directamente

proporcional a SY-Xo o a la precisin de la estimacin. Para un conjunto de
datos cualquiera, la magnitud de S Y-Xo depende de Xo - X. Esto es, de la
distancia entre el promedio de los valores de X y un valor cualquiera de
X (Xo) para el cual se quiere predecir el valor de Y. Mientras ms
alejado este Xo de X, mayor ser SY-Xo y mayor la amplitud del intervalo
de confianza resultante.
Los intervalos de confianza forman una banda de confianza de la recta
de regresin. La amplitud de la banda es mayor conforme ms distante
se encuentre X de X, lo cual nos indica que la precisin de la prediccin
disminuye para valores de X alejados de X. Esto muestra los riesgos de
la extrapolacin a valores alejados de los puntos experimentales. Aun
suponiendo que el fenmeno mantenga la misma tendencia, nuestras
predicciones sern poco precisas.
366
Tomando como ejemplo la degradacin de vitamina A en tabletas

citado en la pgina 38, tendramos que la recta ajustada sera:
Y = -0.0062658 X + 11.155 (A. 2.

20)
Donde Y es igual al logaritmo natural de la concentracin de la

vitamina A en las tabletas y X es el tiempo transcurrido en das. Adems,
como se desprende de la tabla A. 2. 1, los valores de las sumatorias SP
los obtenemos a partir de las sumas de los valores de las columnas 4, 5
y 6:
n = 11; X = 23.09; SPXX = 1772; SPYY = 0.07124; SPXY = -11.2020;

S2e = 0.00011693
SY-Xo = 0.00011693 [1/11 + (Xo 23.09)2 /1772
Para un = 0.05, obtenemos de la tabla de t (dos colas), t 0.025

=2.2622.
Con esto podemos calcular enseguida los intervalos de confianza para
la concentracin de la vitamina A en los valores originales del tiempo.
Las bandas de confianza se pueden ver en la figura II. 5, la cual
reproducimos enseguida. Los valores numricos calculados se presentan
en la tabla A. 2. 1, en sus partes I y II.
11.2
Intervalo de confianza al 95%
11.1
C=90%
ln C
11
10.9
10.8
0 10 367
20 30 40 50
TIEMPO (das)
Figura II. 5. Degradacin de la vitamina A, a 60 C. Regresin con

intervalo de confianza al 95%.
El periodo de caducidad se puede obtener de la grfica, pero es mas

seguro obtenerlo por el clculo sucesivo de la concentracin en la curva
del intervalo de confianza al 95%. Esto a partir de las ecuaciones
utilizadas para calcular la curva inferior del intervalo de confianza
registrado en la columna 6 de la parte II de la tabla A. 2. 1. Esta
columna esta denominada como Cinf, esto es, la concentracin inferior
del intervalo de confianza. Esta concentracin se obtiene, en este caso,
sacando el antilogaritmo de los valores de la columna L. Esto es debido
a que esta reaccin de descomposicin se consider de primer orden. En
el caso de una reaccin de orden cero se usaran los valores de
concentracin directamente y noCaducidad
su logaritmo.
Tabla A. 2. 1. Limites y amplitud (A) de los intervalos de

confianza para la concentracin de vitamina A en tabletas, a
60 C, con una probabilidad del 95%. Parte I.
t(das) ln C C SPXX SPYY SPXY

SY-Xo (X) (Y) (U.I./tab) (Xi- X)2 (Yi- Y) 2
(Xi- X) (Yi- Y)
3 11.1424 69040 403.60 0.01734 -2.6461348 3.72E-05
6 11.1229 67707 292.06 0.01259 -1.9177979 2.99E-05
9 11.0949 65841 198.52 0.00710 -1.1873745 2.37E-05
15 11.0639 63831 65.44 0.00283 -0.4309296 1.49E-05
22 11.0120 60597 1.18 1.62E-06 -0.001388 1.07E-05
25 10.9949 59575 3.64 0.00024 -0.0300558 1.09E-05
28 10.9750 58396 24.10 0.00127 -0.1754079 1.22E-05
31 10.9699 58104 62.56 0.00165 -0.3222337 1.48E-05
35 10.9280 55715 141.84 0.0068 -0.9852263 2.00E-05

2.53E-05
38 10.9299 55826 222.30 0.00651 -1.2037187
368
3.42E-05
42 10.8890 53584 357.58 0.01481 -2.3017537
En el ejemplo citado, el periodo de caducidad se estim en 15.44 das,

para alcanzar el 90% de la concentracin original que fue de 69941 U. I.
Vit. A/tab. Como se recordara, la fecha de caducidad debe calcularse
tomando como referencia a la concentracin declarada en el marbete o
etiqueta del producto. Si suponemos una concentracin terica de 70
000 U. I. Vit. A/tab., la fecha de caducidad se estimar como la fecha a la
cual el producto haya alcanzado la concentracin de 63 000 U. I. Vit.
A/tab. Si partimos del hecho de que el producto ya tenia una
concentracin inferior desde el principio, 69 941 U. I. Vit. A/tab. en lugar
de las 70 000 U. I. Vit. A/tab. que debieran ser, entonces la fecha de
caducidad ocurrir en un periodo inferior al periodo de caducidad
asignado.
Tabla A. 2. 1. Limites y amplitud (A) de los intervalos de

confianza para la concentracin de vitamina A en tabletas, a
60 C, con una probabilidad del 95%. Parte II.
t(das) ln C L L A ( L-L )
Cinf Csup (X) ( Y ) (ln) (ln)
(ln)
11.1366 11.1228 11.1504 0.0276 67697 69593

3
11.1178 11.1054 11.1304 0.0247 66532 68198
6
11.0990 11.0889 11.1106 0.0220 65381 66838
9
11.0614 11.0526 11.0709 0.0174 63112 64226
15
11.0175 11.0101 11.0249 0.0148 60485 61387
22
10.9987 10.9913 11.0062 0.0149 59355 60247
25
10.9799 10.9720 10.9878 0.0158 58224 59152
28
10.9611 10.9524 10.9698 0.0173 57095 58096
31
10.9361 10.9259 10.9462 0.0202 55603 56739
35
10.9173 10.9059 10.9286 0.0227 54498 55752
38
10.8922 10.8790 140.905 0.0264 53051 54473
42
369
Las suposiciones estadsticas mencionadas parten del supuesto que la

variabilidad de las unidades individuales de dosificacin, de todo el lote,
permanece constante todo el tiempo que se toman muestras. Esto es,
que todas las muestras que se tomen de ese lote tendrn la misma
variabilidad. Los procedimientos sealados conservaran su validez aun
cuando los supuestos sealados sufrieran de cierta desviacin. Sin
embargo, Si existiese una violacin severa de los datos a estos
supuestos, tendra que utilizarse una va alterna para tener un nivel de
confianza suficientemente elevado en la determinacin de la fecha de
caducidad.
Si los datos de varios lotes se pueden combinar para calcular los
parmetros antes mencionados, sera ventajoso, ya que los lmites de
confianza de la curva de degradacin estimada seran ms cerrados.
Esto es, los lmites de confianza inferior y superior seran ms cercanos a
los valores de regresin de la curva de degradacin del producto,
permitiendo con esto un periodo de caducidad ms prolongado. Si no se
considera apropiada la combinacin de los datos de varios lotes, debido
a su falta de similitud (ver pginas 42-43), entonces el periodo de
caducidad depender del tiempo mnimo en que un lote de producto
permanezca dentro de los lmites considerados como aceptables.
La similitud de las curvas de degradacin para diferentes lotes se
estima aplicando pruebas estadsticas de igualdad de las pendientes y
de los interceptos de regresin. El nivel de significacin que se aplica es
el de 0.25. Si las pruebas para la igualdad de las pendientes y los
interceptos no se rechazan a un nivel de significacin de 0.25, entonces
los datos de varios lotes se pueden combinar. Si esto no fuera as, solo
un acuerdo con las autoridades sanitarias debiera permitir la
combinacin de los datos.
Para estimar la conveniencia de combinar o no combinar los datos de
varios lotes, es de recomendarse la estimacin de la fecha de caducidad
tanto de los lotes individuales as como de lotes combinados. La
combinacin podra ser ventajosa o quiz no lo sera. De cualquier
manera, primero se debe verificar si la combinacin de datos es
ventajosa o no. Si se observa que la combinacin de los datos de varios
lotes no representa una ventaja para la determinacin de la fecha de
caducidad, entonces no tiene ningn sentido hacerla. Cuando los lotes
que se desea combinar tienen curvas de regresin muy diferentes, en
sus interceptos o en sus pendientes, no tendra ventaja su combinacin.
El origen de la variacin o falta de similitud se sita, en primera
instancia, en circunstancias como la uniformidad de contenido de las
unidades de dosificacin, la cual es buena en las soluciones pero no lo
370
es tanto en los productos de sistemas dispersos como los slidos. Otra

fuente de variacin es generada por variaciones en temperatura en las
estufas de estabilidad y en la transmisin del calor de las formas
farmacuticas. Esta circunstancia nos lleva a que la combinacin sea
considerada casi exclusivamente para soluciones. Aunque aun en estos
casos se deber observar el criterio del valor de p de 0.25.
A. 2. 3. Bibliografa general
1. Infante Gil S., Zarate de Lara, G. P. Mtodos estadsticos, Trillas,
Mxico (1988), pginas 463-532.
2. Carstensen, J. T. Drug stability, Marcel Dekker, New York USA
(1995), pginas 304-359.
3. U. S. Department of Health and Human Services, FDA, CDER y
CBER. Guidance for Industry. Stability testing of drug substances
and drug products. Draft de junio de 1998, pginas 41-44.
371

Estabilidad de Medicamientos

Hochgeladen von

Dokumentinformationen

Copyright

Verfügbare Formate

Dieses Dokument teilen

Dokument teilen oder einbetten

Freigabeoptionen

Stufen Sie dieses Dokument als nützlich ein?

Sind diese Inhalte unangemessen?

Copyright:

Verfügbare Formate

Estabilidad de Medicamientos

Hochgeladen von

Copyright:

Verfügbare Formate

VILLAFUERTE ROBLES L.

LEOPOLDO VILLAFUERTE ROBLES

Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas

INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL

I. INTRODUCCIN A LA ESTABILIDAD DE LOS

II. CONCEPTOS CINTICOS 36

III. ESTABILIDAD QUMICA DE FRMACOS

IV. ESTABILIDAD FSICA DE FORMAS FARMACUTICAS 142

V. ESTABILIDAD MICROBIOLGICA DE MEDICAMENTOS 212

VI. MTODOS ANLITICOS PARA ESTABILIDAD

VII. PROGRAMAS DE ESTABILIDAD 289

APENDICE I: NORMA MEXICANA PARA LA ESTABILIDAD

APENDICE II. ESTADSTICA XIII

INTRODUCCIN A LA ESTABILIDAD DE LOS

1. 2. Alteracin o envejecimiento de los productos

I. 4. El material de empaque y la estabilidad 13

I. 5. Estabilidad de otros preparados farmacuticos

I I. 5. 1. Estabilidad de productos fitofarmacuticos 19

I. 5. 2. Estabilidad de productos biofarmacuticos 22

I. 6. Desarrollo internacional de las pruebas de estabilidad

INTRODUCCIN A LA ESTABILIDAD DE LOS MEDICAMENTOS

El concepto de la estabilidad de los medicamentos significa la

Generalmente se considera que un medicamento ha caducado o que

manera ms amplia, la estabilidad de un medicamento significa el

casos se permiten excepciones, cuando el periodo de estabilidad es

garantizada cuando se cumplen estas instrucciones especficas de

Que tan precisos son los mtodos de experimentacin usados?

I. 2. Alteracin o envejecimiento de los productos

temperatura, la humedad, la luz y la atmsfera (el oxigeno atmosfrico),

Figura I. 1. Factores del medio ambiente que promueven la

Adems del medio ambiente existen otros factores que podran

Figura I. 2. Representacin esquemtica de las interacciones entre

Todas las reacciones y cambios mencionados pueden, a su vez, ser

Figura I. 3. Conceptos fundamentales termodinmicos para la

esta determinada por la posibilidad de reducir la entalpa libre. La fuerza

1) Las alteraciones qumicas, ataen tanto a los frmacos como a

Figura I. 4. Algunas de las etapas en que se desarrollan pruebas de

Las pruebas de estabilidad en la preformulacin y sobre el principio

necesariamente se consideran parte del estudio de estabilidad, se

Visto de esta manera, los estudios de estabilidad de cada fase seran

I. 4. El material de empaque y la estabilidad

Tabla I. 1. Caractersticas de los materiales de empaque que

a) Baja permeacin Al vapor de agua, al oxigeno y para

En trminos generales, se considera que las mezclas de frmacos y

de absorcin de vapor de agua desde una atmsfera hmeda, o por la

Figura I. 5. Efecto del tipo de empaque sobre la oxidacin en una

su permeabilidad a la humedad (9). La proteccin contra la humedad

A diferencia de los ensayos de estabilidad qumica, la evaluacin y

Theo-Dur 100 mg Theo-Dur 300 mg

cantidad liberada de teofilina a las 8 horas disminuye apreciablemente

Los polvos empacados para uso parenteral regularmente se envasan

Tabla I. 2. Correlacin entre la superficie especfica de polvos y su

Antibitico Preparacin Superficie esp. Turbidez

Apalcilina sdica liofilizada 0.16 62

Mezlocilina sdica polvo 5.6 49 6

I. 5. Estabilidad de otros preparados farmacuticos

I. 5. 1. Estabilidad de productos fitofarmacuticos

El equivalente de un frmaco, como materia prima, en productos

como referencia para la evaluacin, la composicin global de la droga,

Como se puede observar en la figura I. 8, el contenido del conjunto de

fitofarmacuticos. Por otro lado, es de observarse la gran disparidad que

Figura I. 8. Perfil de degradacin del total de substancias activas de

En el caso de las grageas la situacin no fue diferente, los contenidos

I. 5. 2. Estabilidad de productos biofarmacuticos