PRUEBAS GENERALES PARA AMINOACIDOS Y PROTEINAS.

Nombres E-mail
Gmez Prado Alejandro Victorgomez@unicauca.edu.co
Lugo Bedoya Lizeth Vanessa lvlugo@unicauca.edu.co
Dorado Muoz Luis David lddorado@unicauca.edu.co
Laboratorio de bioqumica, Ing. Ambiental, Ing. Civil, Universidad del Cauca.
Fecha de realizacin de la prctica: 20/03/2017
Fecha de entrega de informe: 17/04/2017

1. RESUMEN:
Las protenas desempean un papel fundamental para la vida ya que son las biomolculas
ms verstiles y diversas, cumplen un papel imprescindibles para el crecimiento del
organismo ya que realizan una enorme cantidad de funciones diferentes. Las protenas estn
constituidas por carbohidratos los cuales imparten diferentes comportamientos quimicos en la
estructura de las protenas. Debido a la presencia de diferentes aminocidos en las uniones
peptdicas de las protenas cada una de estas reaccionara de manera distinta a cierta
pruebas. Existen reacciones de coloracin que son especficas para algunos aminocidos,
en la prctica, usamos las pruebas de caracterizacin: (Xantoprotica, Biuret, Nihidrina,
Hopkins-Cole, Ehrlich). Esto con el fin de ver las caractersticas y propiedades de los
aminocidos estudiados. En las prubas (Xantoprotica, Biuret y Nihidrina), realizadas por
nuestro grupo de trabajo se puede observar que se obtuvieron los resultados esperados
tericamente, lo que indica que los mtodos usados son eficientes.

2. RESULTADOS
Imgenes:
 Imagen 1. (Prueba Xantoproteica)

Imagen 2. (Prueba de Biuret)

Imagen 3. (Prueba de Ninhidrina)

Tabla. 1: Resultados de las pruebas de coloracin de Aminocidos y Protenas.

 Prueba Xantoproteica Biuret Ninhidrina
Albumina Amarillo (+) Azul oscuro (+) Violeta oscuro (+)
Gelatina Incoloro (-) Azul oscuro (+) Violeta claro ()
Urea Incoloro (-) Azul claro (-) Incoloro (-)
Fenilalanina Incoloro (-) Azul claro (-) Vino tinto (+)
Asparagina Incoloro (-) Azul oscuro (+) Vino tinto (+)
Glicina Incoloro (-) Azul claro (-) Vino tinto (+)
Histidina Incoloro (-) Azul oscuro (+) Vino tinto (+)
Triptofano Caf (+) Azul claro (-) Vino tinto (+)
Blanco Incoloro (-) Azul claro (-) Amarillo claro (-)

3. ANALISIS DE RESULTADOS
Prueba Xantoprotica
Algunos aminocidos contienen grupos aromticos que derivan del benceno. Una reaccin
caracterstica del benceno y sus derivados, es la nitracin del benceno con cido ntrico. La
reaccin de nitracin, usada para identificar la presencia de un benceno activo se llama
prueba xantoprotica. Algunos aminocidos como la tirosina y el triptfano contienen anillos
aromticos activos, lo que indica que pueden nitrarse fcilmente, Aunque tambin existen
aminocidos que poseen en su estructura un anillo aromtico pero que no est activado,
como lo es el caso de la fenilalanina (Figura 2.), por lo tanto el proceso de nitracin no se
realiza fcilmente.
Como se observa en los resultados de la tabla.1 ( Resultados de las pruebas de coloracin de
Aminocidos y Protenas.) La prueba es positiva para, el triptfano y la albmina, lo cual es lo
esperado tericamente ya que en la estructura del triptfano se encuentra un anillo
aromtico activo como se observa en la (Figura 1). En la albmina tambin es positiva debido
a que en su estructura contienen aminocidos como la leucina, isoleucina, lisina, fenilalanina,
treonina, triptfano y valina.
(Figura 1. Estructura del triptfano)

(figura 2. Estructura de la fenilalanina)

Reaccin de biuret
Es un mtodo para la determinacin de protenas o pptidos. Se basa en la reaccin del
sulfato de cobre con compuestos que tengan dos o ms enlaces peptdicos, en un medio
alcalino, el producto es un complejo color violeta cuya intensidad de color depende de la
cantidad de enlaces pepiticos. Al llevar a cabo esta prueba se noto una reaccin positiva para
la albumina, gelatina, hitidina y la asparagina que presentaron un color violeta o azul oscuro,
lo que indican que estos compuestos presentan enlaces peptdicos, esto confirma lo
establecido en la teora, que indica que la reaccin se basa en la formacin de un compuesto
de color violeta, debido a la formacin de un complejo de coordinacin entre los iones Cu 2+ y
los pares de electrones no compartidos del nitrgeno que forma parte de los enlaces
peptdicos.
 O C C O

H N N H

R C H H C R
C u2+
O C C O

H N N H

R C H H C R

Figura 1. (Formacin del complejo)

Prueba de Ninhidrina
- Es una reaccion empleada para detectar cualitativamente y cuantitativamente a los
aminocidos. La Ninhidirna es una agente oxidante por lo que el grupo alfa-amino de los
aminocidos forma complejos coloreados con esta. Una coloracin violeta determina positiva
la prueba y para este caso tambin un color Vino tinto la determinara como positiva. Para la
Albumina, la Fenilalanina , la Asparagina , la Glicina, la Histidina y el Triptofano, la prueba es
postiva, ya que estas muestras contiene a lo largo de su cadena de aminocidos grupos
amino el cual es primario. Mietras que para el agua la prueba es negativa ya que esta no es
un aminoacido o una protena, en la gelatina la prueba debe ser negativa, debido a que su
composicin es de colgeno, la cual no contiene en su estructura grupos aminos y en la
urea es negativo ya que a diferencia de las dems muestras positivas, estas no es un alfa-
aminocido.

4. PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS
4.1 Cul es la reaccin entre un alfa-aminoacido y la ninhidrina?
La reaccin de la ninhidrina es una de las reacciones ms utilizadas para la identificacin de
los aminocidos. En esta reaccin que transcurre a altas temperaturas, intervienen dos
molculas de ninhidrina por cada molcula de aminocido, se produce la liberacin de CO2
(g), NH3 y se forma un complejo de color violeta conocido como Prpura de Ruhemann.
Cuando la ninhidrina reacciona con el aminocido este se oxida a aldehdo y la ninhidrina se
reduce a hidridantina. Esta ltima reacciona con otra molcula de ninhidrina y con el
amoniaco producido en la primera reaccin, formndose un producto coloreado azul.

4.2 Cul es la reaccin con el reactivo de Biuret?

El reactivo de Biuret es aquel que detecta la presencia de protenas, pptidos cortos y otros
compuestos con dos o ms enlaces peptdicos en sustancias de composicin desconocida.

4.3 Qu protenas dan positiva la prueba de Hopkins-cole?

La reaccin de Hopkins-Cole, tambin conocida como reaccin de Adamkiewiczs, es una
prueba estndar para el triptfano y para las protenas que contienen triptfano. La solucin
que se va a examinar se mezcla con cido glioxlico y se agrega cido sulfrico concentrado.
Un anillo entre violeta y rojo en la unin de los dos lquidos indica que la reaccin es positiva.

5. CONCLUSIONES
 El conocimiento a profundidad de las protenas y sus componentes son esenciales en
nuestro camino de ingenieros ambientales, ya que forman parte importante del
ambiente y son fundamentales en el desarrollo de un organismo.
Los resultados dieron a los esperados (tericos) lo que demuestra una buena
aplicacin del mtodo de escogido para llevar a cabo la prctica.
Determinamos que todos los mtodos realizados en prctica se hicieron de manera
cualitativa
Los mtodos para los anlisis cuantitativos de esta prctica son mtodos
espectrofotomtricos.

6. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

Vejar, E. Prcticas de Bioqumica Descriptiva, Universidad de sonora, Edic UniSon,

(2005) Mxico, p 168

Tecnologa Mdica, ULat, http://bioquimicatm2.blogspot.com.co/2015/02/aminoacidos-y-

proteinas_3.html, Aminocidos y protenas. Actualizacin 03-02-2015 acceso 15-04-2017,

Disponible en: http://bioquimicatm2.blogspot.com.co/2015/02/aminoacidos-y-proteinas_3.html