UNIVERSIDAD AUTNOMA DE CHIAPAS

Facultad De Ciencias Qumicas

Campus IV
Tapachula, Chiapas.

LIC. QUIMICO FARMACOBIOLOGO

MATERIA:
Laboratorio De Inmunologa I.

PRCTICA No. 1:
Manejo e inmunizacin de animales.
 NDICE

INTRODUCION

MARCO TERICO:...................................................................................................2

OBJETIVOS:..............................................................................................................5

METODOLOGA........................................................................................................5

OBSERVACIONES:...................................................................................................8

RESULTADOS:..........................................................................................................8

DISCUSIN:..............................................................................................................9

CONCLUSIN:..........................................................................................................9

BIBLIOGRAFA:.......................................................................................................10
Introduccin
En esta presente practica se hablara del manejo y sangrado de animales del
laboratorio a si como tambin su va correcta para su previa inoculacin, utilizando
como animal de laboratorio al conejo el cual requiere de un sumo cuidado ya que
es un animal muy delicado y puede morir si no se le da el correcto manejo, para
esto el personal debe estar capacitado(el profesor) deber ensear el correcto
sujeta miento del conejo a si como la forma de sangrar al animal para evitar un
sufrimiento a este, la sangre se extrae para una variedad de propsitos con fines
experimentales, a si como tambin las diferentes formas de inoculacin, siendo la
subcutnea la mas indicada para la previa inoculacin, y se produzca mejor la
respuesta antignica de el antgeno administrado.
 MARCO TERICO:

Al igual que el ser humano, el conejo es un animal que merece respeto como ser
vivo, debemos entender que padece necesidades y sufre dolor y que es obligacin
del personal que los utiliza y de quienes cuidan y mantienen, asegurar su
bienestar y confort mientras viva.

Animal de laboratorio

Es cualquier especie animal utilizada en experimentacin con fines cientficos, es

decir, mantenido bajo determinadas condiciones y utilizado como instrumento de
medida. Este al ser sometido a una experimentacin, proporciona datos, los
cuales son utilizados como informacin para los resultados. Como ejemplo de
esos animales tenemos al ratn, la rata, el hmster, el conejo, el perro o el mono.

Taxonoma del conejo

Clase : mamfero

Orden : Lagomorpha

Gnero : Leporidae

Gnero : Oryctolagus

Especie : cuniculus

Caractersticas generales del conejo

El conejo es un mamfero roedor que en libertad se alimenta exclusivamente de

hierbas y granos, su cuerpo esta cubierto por un pelo espeso y suave, tienen un
temperamento asustadizo, propensos al pnico, por eso su trato y transporte debe
ser cuidadoso. Cuando se encuentran nerviosos pueden araar con los miembros
posteriores, excepcionalmente, llegan a morder. Cuando se aloja a varios machos
juntos en un periodo prolongado, por instinto tienden a pelearse por una jerarqua.
En general son tmidos y no copulan si se los est observando
Biologa del conejo

Pertenece al orden Lagomorfa, se diferencia de los roedores por el segundo par

de incisivos superiores. No presentan caninos y los incisivos estn separados de
los premolares por un espacio denominado diastema. Los incisivos principales
tienen un borde cortante y crecen durante toda la vida. Sus ojos son prominentes y
con campos visuales independientes y panormicos, junto con un pequeo campo
binocular, lo que le permite un amplio rango de visin. El sentido de la audicin y
el olfato tambin estn bien desarrollados. Es un animal herbvoro y su aparato
digestivo presenta ciertas caractersticas de adaptacin como por ejemplo la
naturaleza de los dientes, la gran produccin de bilis, los intestinos voluminosos y
el gran ciego terminado en un apndice vermiforme.

En cuanto al aparato genital, los machos jvenes presentan una abertura genital
protuberante, sumamente marcada , en cambio las hembras tienen una abertura
poco manifiesta. En los machos adultos el escroto es perfectamente visible, de
localizacin inguinal, carentes de pelo y anterior al pene.

Uso como animal de laboratorio

Los conejos pueden ser empleados para muchos propsitos, entre ellos:

- Para sangrado o inyecciones endovenosas se prefiere razas de orejas grandes

- En la determinacin de pirgenos de preparados farmacuticos

- En la preparacin de antisueros

- Para pruebas de toxicidad de drogas y productos biolgicos

- Pruebas rutinarias de diagnstico

- Prueba de irritantes cutneos y oculares, debido a su alta sensibilidad para
estos productos

- En la investigacin de ciruga cardiovascular y estudios de hipertensin,

enfermedades infecciosas, teratologa, arteriosclerosis y serologa;

- El conejo es apropiado para estudios sobre reproduccin, puesto que la

ovulacin no es espontnea, no hay anestro estacional, la gestacin es corta y el
semen se puede recolectar fcilmente. Se usan para el estudio de anticonceptivos
orales

- En investigacin de enfermedades infecciosas e inmunolgicas, por la alta y

calidad y cantidad de sus anticuerpos

- Tambin se usan en serologa y para screening de agentes embriotxicos y

teratognicos

- Entre otras aplicaciones tambin son usados para cra de moscas ts- ts

- Tambin se utiliza con fines pedaggicos para anatoma, fisiologa experimental,

nutricin, reproduccin, embriologa, etc.

Inmunogenicidad y antigenicidad son propiedades inmunitarias relacionadas pero

distintas que a veces se confunden. La inmunogenicidad es la capacidad de
inducir una respuesta inmunitaria humoral o mediada por clulas, o ambas

Aunque una sustancia que induce una reaccin inmunitaria especfica suele
llamarse antgeno, es ms apropiado denominarla inmungeno. La
antigenicidad es la capacidad de combinarse de manera especfica con los
productos fi nales de las respuestas anteriores (es decir, anticuerpos secretados,
receptores de superfi cie en las clulas T, o ambos).
 OBJETIVOS:

! Realizar las diferentes tcnicas de inmunizacin con un conejo.

! Determinar la va de inmunizacin idnea de acuerdo al tipo de antgeno a

administrar.

METODOLOGA

Paso 1. A partir de un cultivo en placa de Proteus spp., resembrar en caldo

nutritivo de tioglicato, incubando durante 24 horas.

Paso 2. Esterilizar a durante minutos.

Paso 3. Centrifugar a 1500 r.p.m durante 5 minutos y decantar el

sobrenadante.

Paso 4. Re-suspender el botn celular agregando 2.5 mL de solucin salina

estril formalinizada al 0,3% y agitar vigorosamente hasta obtener
una suspensin homognea.

Paso 5. Centrifugar a 1500 r.p.m durante 5 minutos y decantar el

sobrenadante.

Paso 6. Repetir tres veces ms los pasos 3 y 4, hasta igualar su turbidez con
el del tubo nmero 3 del Nefelometro de McFarland.

Paso 7. Envasar el antgeno en un frasco mpula esteril, etiquetar y guardar

a -20C hasta su posterior uso
 METODOLOGA MANEJO DEL ANIMAL Y SANGRADO

PASO 1. CONSEGUIR UN CONEJO CON EL PESO DE 1.5K EN ADELANTE

PASO 2. RESURAR AL ANIMAL DEL LOMO PARA HACER VISIBLE LA PIEL

PASO 3. TENER UNA FRANELA LO SUFICIENTEMENTE GRANDE PARA

ENVOLVER AL ANIMAL

PASO 4. MARCAR AL ANIMAL 6 CIRCULOS PREVIOS DONDE SE INOCULARA

PASO 5. SEGUIR EL CALENDARIO DE INOCULACION DEL ANTIGENO DADO

PASO 6. DESPUES DE LA INCOULACION DEL ANTIGENO DADO SANGRAR AL

CONEJO

PASO 7. SACAR LA SANGRE NECESARIA PARA PRODUCIR 10 ML DE SUERO

Y CONGELAR EL SUERO
 PROTOCOLO DE INMUNIZACIN:

Utilizar Proteus spp., ajustada a una concentracin equivalente al tubo nmero

3 del Nefelmetro de McFarland (aproximadamente 900 millones de
bacterias/mL de suspensin).

Inmunizar al conejo de acuerdo al siguiente protocolo.

PROTOCOLO DE INMUNIZACIN DE ANTIGENOS BACTERIANOS

PARTICULADOS
NMERO DE TIEMPO DOSIS VA
INYECCIN (DAS)
1 0 0.5 mL. Subcutnea.
2 4 1.0 mL. Intradrmica.
3 8 2.0 mL. Intradrmica.
4 12 3.0mL. Intradrmica.
Sangrado. 18

OBSERVACIONES- RESULTADOS:

NMERO DE SINTOMAS
INMUNIZACIN
1 El da de dicha inmunizacin, el
conejo presento diarrea y
febrcula.
2 Aqu nicamente hubo una ligera
falta de apetito durante ese y los
dos das prximos.
3 Durante ese da hubo presencia
 de fiebre.
4 Aparentemente no se present
ningn sntoma.

DISCUSIN:

Existen varios factores que determinan las concentraciones y vas de

administracin a utilizar para obtener una buena respuesta inmunolgica, estos
pueden ser la naturaleza qumica del antgeno, tipo de antgeno y dosis
administrada.

De acuerdo al tipo de antgeno a utilizar, en este caso Proteus spp., la mejor va

de administracin es la subcutnea o intradrmica, debido a que se trata de un
antgeno particulado y con esto se cubrira una mayor superficie, lo cual
aumentara la probabilidad de presentacin antignica en los ganglios linfticos.

Otro factor muy importante es la dosis administrada del antgeno, esto se debe a
que si las dosis son muy bajas podra presentarse una falta de respuesta ya que a
lo mejor no existira estimulacin de los linfocitos o bien si la dosis fuera
demasiado alta se provocara un estado activo de tolerancia inmunolgica.

Adems dado que una sola dosis del antgeno utilizado no inducira una respuesta
inmunolgica ptima, se necesit de 3 inmunizaciones ms, las cuales debern
incrementar la proliferacin clonal de clulas B o T especificas del antgeno y, de
esta manera aumentar la poblacin de linfocitos especficos para dicho
inmunogeno.

CONCLUSIN:

Se realizaron las diferentes tcnicas de inmunizacin, adems de que se logr

determinar la va de administracin idnea para el tipo de antgeno utilizado,
realizando inmunizaciones de acuerdo a un protocolo establecido para obtener
una respuesta inmunolgica idnea por parte del conejo.
BIBLIOGRAFA:

! http://www.ins.gob.pe/insvirtual/images/otrpubs/pdf/Manejo.cuidado.cone
jos.pdf

! http://www.ins.gob.pe/insvirtual/images/otrpubs/pdf/GUIA_ANIMALES_R
ATON.pdf

! Owen, Punt, Stranford. Kuby inmunologa (6 edicin). Editorial Mc Graw

Hill Education. Pag 76